![Page 1: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/1.jpg)
Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv(experimenty in vivo)
![Page 2: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/2.jpg)
• Pokusy na laboratorních zvířatech jsou nedílnou a nenahraditelnou součástí biomedicínských experimentů
• Musí se zachovávat pravidla hry (zákony)
• Dodržování zásad práce s pokusnými zvířaty uvedených v rámci zákonů, je především v zájmu vědců samotných
![Page 3: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/3.jpg)
Etické zásady – koncepce tří „R“
• REPLACEMENT – náhrada laboratorních zvířat v pokusech (hlavně výuka)
• REDUCTION – redukce počtu zvířat výběrem vhodných metod, uspořádáním experimentu, atd.
• REFINEMENT – snížení až úplné vyloučení bolestivých a stresujících postupů
![Page 4: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/4.jpg)
Legislativa I.
• Projekt pokusů – cíle, očekávané přínosy• popis pokusu ve vztahu ke zvířeti• doložení nezbytnosti pokusu, zdůvodnění
volby zvířat• zdůvodnění počtu zvířat, způsob tišení
bolesti, anestézie• způsob naložení se zvířaty po ukončení
pokusu, zdůvodnění opakování zákroku, …
![Page 5: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/5.jpg)
Legislativa II.Legislativa II.
Orgány ochrany zvířat • Ministerstvo zemědělství (www.mze.cz)• Veterinární správa (KVS Olomouc)• Ústřední komise na ochranu zvířat (ÚKOZ)• Odborné komise při uživatelském zařízení• Oprávnění dle §17 zákona 246/1992 Sb.
![Page 6: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/6.jpg)
Legislativa - III. • Zákon č. 246/1992 Sb. na ochranu
zvířat proti týrání• Změna 1993 (č. 162/1993 Sb.)• Změna 1994 (č. 193/1994 Sb.) • Změna 1997 (č. 243/1997 Sb.)• Změna 1998 (č. 30/1998 Sb.)• Změna 2004 (č. 77/2004 Sb.)• Změna 2008 (č. 312/2008 Sb.)
• NYNÍ zákon č. 359/2012 Sb.
Vyhláška č. 39/2009 Sb. o ochraně, chovu a využití pokusných zvířat
![Page 7: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/7.jpg)
Aspekty genetiky labor. zvířat
• Outbrední populace = geneticky jedineční jedinci
• Inbrední kmeny = 20 a více páření bratr x sestra (výsledkem jsou homozygoti, sledování vlivu genetického
pozadí zvířete)
• Mutantní kmeny = knock-out, knock-down, knock-in (náhrada určitého genu)
• Transgenní kmeny = přenesený gen do genomu (humanizovaná myš)
![Page 8: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/8.jpg)
Podle osídlení patogeny rozdělujeme:• Konvenční zvířata• SPF – specifických patogenů prostá• Bezmikrobní (výzkumy trávení a vstřebávání,
studia o funkci antibiotik, nemoci z ozáření,…)
![Page 9: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/9.jpg)
Klasifikace Mikrobiologická
bezmikrobníA
A+B
A+B+C
bezmikrobní(axenická)
monoxenická
polyxenická
dixenická
konvenční
bez specifikovanýchpatogenů
-P1-P2-P3
DEF
INO
VA
NĚ
ASO
CIO
VA
NÁ
GN
OTO
BIO
TICK
Á
SPF
![Page 10: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/10.jpg)
Systém chovu• Otevřený – vstup i výstup zvířat, osob i
materiálu je bez bariéry
• Bariérový –zvířata jsou oddělena od vnějšího prostředí a vstup a výstup je možný pouze přes bariéru (hygienickou smyčku) k zamezení průniku nežádoucích vlivů z vnějšího prostředí
• Izolátorový – zvířata jsou trvale oddělena bariérou od vnějšího prostředí a osob
![Page 11: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/11.jpg)
11
Schéma bariérového chovu
Schéma bariérového chovu
(Cendelín a Voller 2009)
![Page 12: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/12.jpg)
Schéma izolátoru
(Cendelín a Voller 2009)
![Page 13: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/13.jpg)
• Nejčastěji používaná zvířata k vědeckým experimentům
![Page 14: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/14.jpg)
Laboratorní zvířata - příklady
• Laboratorní potkan (Rattus norvegicus) 39 %
• Laboratorní myš (Mus musculus) 54 %
• Křeček zlatý (Mesocricetus auratus) 2 %
• Morče domácí (Cavia apperea) 2 %• Králík domácí (Oryctolagus cuniculus) 2 %
• Prase domácí (Sus scrofa)• Ryby • Obojživelníci• Plazi• Primáti
• Pes domácí (Canis familiaris)
• jako laboratorní zvíře užívána od počátku. 20 st.• vyšlechtěno 200 inbredních kmenů, běžně používáno 25• průměrná váha 20 - 40 g• průměrná délka života 1.5 - 3 roky
Laboratorní myšLaboratorní potkan
• jako laboratorní zvíře užíván od poloviny 19 st.• roku 1906 standardizován první kmen bílé barvy - Wistar• nejpoužívanější outbrední kmeny - Sprague Dawley (SD), Wistar (WI), Long
Evans (LE)• nejpoužívanější inbrední kmeny - Fisher 344 (F 344), Brown Norway (BN),
Lewis (LW) a Wistar Furth (WF)• průměrná hmotnost 200 - 250 g• průměrná délka života 2.5 - 3.5 roku
• jako laboratorní zvíře užíván od roku 1930• používán zejména při testech karcinogenity• průměrná hmotnost 85 - 100 g • průměrná délka života 1.5 - 3 roky
Zlatý křečekMorče
• jako laboratorní zvíře užíván od roku 1780 - Lavoisier
• používán zejména při testech senzibilace a při výzkumu patogenníchmikroorganismů
• průměrná hmotnost 700 - 1200 g
• průměrná délka života 4 - 5 let
Bílý králík
• nejčastěji používán Novozélandský bílý
• používán zejména při testech akutní dráždivosti na kůži,oči a sliznice
• z hlediska experimentální toxikologie považován za nehlodavce
• průměrná hmotnost 3,5 - 5 kg
pes Beagle
• nejčastěji používáno plemeno Beagle
• používán zejména při testech subchronické a chronické toxicity a přitoxikokinetických studiích
• průměrná hmotnost 10 - 15 kg
(www.mpouzar.net/prednasky/tdata.ppt)
![Page 15: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/15.jpg)
Léky stažené z trhu pro nežádoucí účinky
• Mibefradil (Posicor) – 1998 (inhibice CYP3A4)
• Troglitazon (Rezulin) – 2000 (hepatotoxicita)• Cerivastatin (Cholstat) – 2001 (rhabdomyolýza)• Rofecoxib (Vioxx) – 2004 (↑ I.M.)
![Page 16: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/16.jpg)
Léčiva užívaná ke tlumení bolestivých podnětů
• analgetika• lokální anestetika• celková anestetika
![Page 17: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/17.jpg)
AnalgetikaOpioidní analgetika:• morfin • fentanyl
Nesteroidní protizánětlivé látky:• Ketoprofen• Meloxikam
![Page 18: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/18.jpg)
Sedace
• Ke zklidnění zvířete před neinvazivními příp. málo bolestivými výkony
• Součást premedikace před celkovou anestezií
Diazepam, midazolam, medetomidin
![Page 19: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/19.jpg)
Lokální anestezie
• Znecitlivění v určité oblasti (oko, močová trubice – při katetrizace,…)
• Trimecain (Mesocain)• Procain• Lidocain• Bupivacain
![Page 20: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/20.jpg)
Celková anestezie
• Premedikace – Atropin• Injekční celková anestetika• Časté kombinace léčiv:• Fentanyl + medetomidin (i.p.)• Ketamin + diazepam (i.p., i.m., i.v.)• Ketamin + xylazin (i.p., i.v., i.m.)• Medetomidin + propofol (i.m., i.v.)• Fentanyl + dexmedetomodin + diazepam
(i.m.)
![Page 21: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/21.jpg)
Celková anestezie
• Inhalační celková anestetika• Éther• Halotan• Isofluran, sevofluran
![Page 22: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/22.jpg)
Eutanázie - usmrcení zvířete s minimem jeho fyzického
a duševního utrpení.
Fyzikální metody • dislokace krční páteře• dekapitace (gilotina)
Chemické metody • oxidu uhličitý• barbituráty nebo éter (předávkování) • Embutramid + mebezoniumjodid +
tetrakain (T61) i.v. aplikace
![Page 23: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/23.jpg)
GMO GMO
organizmy, jejichž genetický základ byl úmyslně pozměněn vnesením či vyjmutím
nějakého genu (genů).
.
![Page 24: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/24.jpg)
Význam GMOVýznam GMO
- výroba léčiv (inzulín, lidský růstový hormon,...)
- studium chorob, vývoj léků
-Zlepšení vlastností rostlin (odolnost proti houbovým a virový chorobám, škůdcům, zvýšení nutriční hodnoty …)
Zemědělství
Farmacie a medicína
![Page 25: Využití laboratorních zvířat ve vývoji nových léčiv ( experimenty in vivo)](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/56815656550346895dc3fb81/html5/thumbnails/25.jpg)
K zamyšlení:K zamyšlení:
geneticky modifikované organizmy GM plodiny, GM živočichovéklonování, genová terapie …
ANO?ANO? NE?NE?