draft 1 makalah kelas b p2 kelompok 3-2

8/10/2019 Draft 1 Makalah Kelas b p2 Kelompok 3-2

1/12

MAKALAH ANALISIS PANGAN

Analisis Kimia B-P2

Disusun Oleh :

1. Marda Maulana

2. S. Puja Saraswati

3. Naomi e!riani

". Dias Ki#i $ulandari

%. &'itra (mart)a

PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIA

PROGRAM DIPLOMA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2014


2/12

BAB I

1.1 Pendahuluan

*itamin meru+a#an sen)awa or,ani# )an, di!utuh#an oleh tu!uh den,an

jumlah )an, u#u+ sedi#it namun /itamin memili#i +eranan +entin, dalam +roses+ertum!uhan serta untu# menja,a da)a tahan tu!uh. Selain itu /itamin ju,a !er+eran

+entin, dalam menja,a otot nadi se+anjan, la+isan saluran +enernaan dan menja,a

#esehatan s)stem sara' #ulit ram!ut mata mulut dan hati.*itamin ter!a,i menjadidua #elom+o# )aitu /itamin larut air dan /itamin tida# larut air.Ada+un maam-

maam /itamin )an, a#an diulas +ada materi ini ialah /itamin B0 'olat asam

+antotenat !iotin dan /itamin B12 sertasen)awa )an, miri+ den,an /itamin )aitu

#olin #arnitin dan +irolo#uinolina#uinon.Kadar /itamin dalam sam+el da+at ditentu#an den,an !er!a,ai metode antara

lain ialah Enzyme-Linked Immunosorbent Assay &(SA Microbiological Assay

MBA High Performance Liquid Chromatograhy 4P5 !adioimmunoassay

6(AEnzyme Protein "inding Assay &PBA dan !adiolabelled Protein "indingAssay 6PBA. Pen,,unaan !er!a,ai maam metode !ertujuan untu# men,etahui

+en,aruh dari +en,,unaan metode terse!ut serta menentu#an metode )an, +alin,!ai# untu# menentu#an #adar /itamin dalam sam+el.

1.2 Tinauan Pu!"a#a

*itamin B12 adalah se#elom+o# sen)awa )an, di#enal se!a,ai o!alamins

)aitu o!alt )an, men,andun, orrinoids. Bentu# dominan dari o!alamins dalamma#anan adalah adenos)lo!alamin #oen7im B12 danh)dro8oo!alamin.

Siano#o!alamin !entu# sinteti# /itamin B12 )an, di,una#an dalam 'orti'i#asi !ahan

+an,an dan su+lemen nutrien menunju##an sta!ilitas )an, tin,,i dan mudahdi+eroleh seara #omersial. Bentu# #oen7im dari /itamin B12 adalah metil#o!alamin

dan %-deo#si adenosil #o!alamin. Metil #o!alamin !er'un,si seara #oen7imatis

dalam +emindahan se!uah ,u,us metal dalam metionin sintetase. Siano#o!alamin

seara alami terda+at dalam !ahan +an,an terutama +rodu# )an, !erwarna rin,anse+erti roti +utih.

9am!ar 1 Stru#tur Kimia *itamin B12


3/12

Biotin adalah salah satu #elom+o# /itamin B )an, +alin, sta!il. Penentuan#on/ensional !iotin dalam ma#anan dan !iolo,is !ahan !iasan)a den,an assa)

mi#ro!iolo,i den,an L#lantarum. Biotin meru+a#an /itamin !isi#li# larut air )an,

!er'un,si seara #oen7imatis +ada rea#si #ar!o#silasi dan trans#ar!o#silasi. Dua

!entu# )an, terda+at seara alami ialah D-!iotin !e!as dan !iositin. Biositin!er'un,si se!a,ai !entu# #oen7im dan se!etuln)a terdiri atas residu lisin

ter!iotinilisasi )an, ter,a!un, seara #o/alen +ada se!uah rantai +rotein dari

!er!a,ai #al!o#silase. Biotin !e!as mau+un !iositin teri#at +rotein menunju##ana#ti/itas /itamin #eti#a di#onsumsi dalam ma#anan.

C

HNNH

S

H

(CH2)4 COOH

Biotin

O

9am!ar 2 Stru#tur Kimia Biotin

sAsam +antotenat +ada ma#anan terda+at dalam !entu# !e!as dan jumlah

)an, teri#at le!ih !esar terutama se!a,ai #oen7im A dan turunan +rotein lainn)a.

Asam +antotenat atau nama lainn)a D-N-2"-dihidro#si-33-dimetil!utiril

meru+a#an /itamin larut air )an, terdiri atas -alanin dalam tautan amida den,anasam 2"-dihidro#si-33-dimetil!utirat +antoat. Asam +antotenat !er'un,si se!a,ai

meta!oli se!a,ai suatu #om+onen dari #oen7im A dan se!a,ai suatu ,u,us +rosteti#)an, teri#at seara #o/alen dari +rotein +em!awa asli dalam sintesis asam lema#.

Asam +antotenat esensial !a,i semua mahlu# hidu+ dan terse!ar luas dalam da,in,

!e!ijian telur susu dan sa)uran.

CHC

CH3

CH3

H2C C

O

HNHO

OH

H2C

H2C COOH

Asam Pantotenat

9am!ar 3 Stru#tur Kimia Asam Pantotenat

olat meru+a#an sen)awa )an, memili#i stru#tur #imia dan a#ti/itas nutrisi

seru+a den,an asam 'olat. Asam 'olat terdiri atas asam -,lutamat )an, di,a!un,#an

melalui ,u,us ;-aminon)a +ada ,u,us #ar!o#sil dari asam


4/12

+teridina tero#sidasi seluruhn)a +teridina !erada se!a,ai sistem ter#onju,asi )an,seluruhn)a !eri#atan ran,#a+. Bentu# alami utama 'olat dalam !ahan-!ahan dari

sum!er tanaman hewan dan mi#ro! adalah s+esies +oli,lutamil dari %0>?-tetra

hidro'olat 'olat4" )an, didalamn)a dua i#atan ran,#a+ dari sistem inin +teridina

diredu#si. Seara meta!oli# 'olat4" ialah mediator +en,u!ahan 1-#ar!on )a#nitrans'er o#sidasi dan redu#si unit satu #ar!on )an, meneran,#an #e!eradaan

!er!a,ai !entu# 'olat tersu!stitusi 1-#ar!on dalam sel hidu+.

N

N N

NH2C NH C

O

HN C

COOH

H

H2C

OH

H2N

H2C COOH

Asam olat

9am!ar " Stru#tur Kimia Asam olat

&n7)me in#ed (mmunosor!ent Assa) &(SA didasar#an +ada intera#si

s+esi'i# dari anti!odi den,an anti,en. &(SA dila#u#an +ada #it dan memili#i#euntun,an rea,en sta!il dan tida# rea#ti' dan da+at disim+an dalam wa#tu )an,

lama. &(SA di,una#an untu# analisis /itamin den,an jenis tida# lan,sun, )aitu

/itamin-+rotein #onju,at )an, !er,era# #e +ermu#aan. &(SA di,una#an untu#analisis asam +antotenat telah di#em!an,#an men,,una#an anti!odi s+esi'i# a#ti'

untu# /itamin #o/alen ter#ait den,an en7im al#aline +hos+hatase Smith et al.

1@?1. &(SA umumn)a di,una#an untu# analisis ma#anan se+erti #andun,an asam

+antotenat 'olat dan !iotin. &(SA men,,una#an anti!odi )an, memili#i +otensile!ih !esar untu# mendete#si /itamin !entu# tertentu )an, da+at !er,una untu#

+en,ujian nilai ,i7i termasu# +enilaian /itamin !ioa/aila!ilitas di ma#anan dan+en,u#uran #andun,an /itamin dalam ma#anan.

6(A 6adioimmunoassa) adalah te#ni# )an, !er,una dalam analisis #linis

)an, memili#i #elemahan utama )aitu !ersi'at radioa#ti/itas )an, menim!ul#an

masalah ter#ait den,an +enan,anan dan +em!uan,an !ahan radioa#ti' selain itu hallain )an, menjadi masalah adalah !ahan #imia )an, di,una#an mahal sehin,,a tida#

oo# untu# analisis rutin. 6(A umum di,una#an dalam analisis asam +antotenat.

&PBA &n7)ne la!elled !indin, +rotein assa) didasar#an +ada +en,,unaanalami /itamin dalam men,i#at +rotein !ersi'at radiola!els se+erti dalam uji !erla!el

+rotein teri#at. &PBA !er,una untu# uji s+esi'i# analisis #elom+o# /itamer esensial

se+erti 'olat atau !iotin. &PBA +rotein men,i#at la!elled den,an adan)a #o+lin,

#imia se+erti en7im +ero#sidase horseradish. Protein en7im men,,anti#an anti!odidan di,una#an !ai# seara lan,sun, dalam assa) setelah +en,eneran atau setelah

+emurnian. &PBA meru+a#an metode den,an sensiti'itas tin,,i den,an !atas dete#si

1 i, +er dan telah di,una#an untu# menentu#an !iotin. &PBA telah di#em!an,#anuntu# /itamin B12 )an, untu# di,una#an dalam sediaan 'armasi dan /itamin da)a

tahan tu!uh.


5/12

MBA Miro!iolo,ial (mmunoassa) di,una#an dalam +enentuan#on/ensional !iotin dalam ma#anan dan !iolo,is !ahan !iasan)a den,an den,an .

+lantarum. MBA adalah metode )an, umum di,una#an dalam analisis !iotin. Cji

mi#ro!iolo,i +ada analisis ma#anan den,an men,,una#an !a#teri mem!utuh#an

wa#tu selama 2" jam namun memili#i !ia)a )an, relati' murah dalam +en,erjaann)adan #elemahann)a analisisn)a le!ih lama di!andin,#an metode &PBA dan &(SA.

1.$ Tuuan

Penelitian !ertujuan men,etahui metode )an, !ai# untu# identi'i#asi asam

+antotenat /itamin B12 asam 'olatdan !iotin.


6/12

BAB II

2.1 Me"%de

*itamin-/itamin ini da+at diuji den,an !er!a,ai metode. sAsam +antotenat

+ada ma#anan terda+at dalam !entu# !e!as dan jumlah )an, teri#at le!ih !esarterutama se!a,ai #oen7im A dan turunan +rotein lainn)a. &n7)me-lin#ed

immunosor!ent assa) &(SA untu# asam +antotenat ju,a telah di#em!an,#an

men,,una#an anti!odi s+esi'i# a#ti' untu# /itamin )an, telah #o/alen dihu!un,#anden,an en7im al#aline +hos+hatase. Pen,i#atan en7)me lin#ed anti!odi #e

+antothenate di +ermu#aan ta!un, ter,antun, +ada jumlah /itamin !e!as s+esi'i#

untu# asam +antotenat den,an ross reati/ities rendah untu# sen)awa )an, diuji.

Cji mi#ro!iolo,is untu# asam +antotenat da+at men,,una#an .Plantarum atauden,an +eneta+an radioimunolo,) 6adioimmunoassa) 6(A.

Penentuan #on/ensional !iotin dalam ma#anan dan !iolo,is !ahan !iasan)a

den,an assa) mi#ro!iolo,i den,anL# lantarum. Se!uah &(SA dan uji &PBA ju,a

telah di#em!an,#an untu# analisis !iotin dalam ma#anan. &PBA meman'aat#ana'initas tin,,i dari #elom+o# ureido dari mole#ul oleh a/idin. Anti!odi telah

di+rodu#si untu# !iotin men,,una#an #onju,at !iotin-BSA disintesis melalui ,u,usasam #ar!o#silat rantai sam+in,. Pada anti!odi san,at s+esi'i# untu# D-!iotin dan

menunju##an tida# ada rea#ti/itas silan, den,an dethio!iotin.

Metode )an, di,una#an dalam +enentuan /itamin B0 men,,una#an metode

mi#ro!iolo,i. Ba#teri )an, di,una#an adalah $accharomyces u%arum. Metode inimem!eri#an nilai total /itamin B0 di dalam ma#anan. Be!era+a or,anisme strain

ditam!ah#an untu# men,uran,i res+on terhada+ PM. Metode Bios+ei'i /itamin B0

telah se+enuhn)a meman'aat#an 'ormat &(SA. Se!uah #onju,at +irido#sal-BSAdisintesis melalui ,u,us 'un,sional aldehida men,,una#an metode sodium

+en,uran,an !orohidrida. Pende#atan ini di,una#an dalam u+a)a untu#

men,hasil#an s+esi'isitas antiserum luas )an, a#an men,enali semua !entu#B0.Metode 4P5 didasari terutama +ada +emisahan 'ase ter!ali# atau +ertu#aran ion

den,an dete#si 'luorometri.

*itamin B12 adalah se#elom+o# sen)awa )an, di#enal se!a,ai o!alamins

)aitu o!alt )an, men,andun, orrinoids. Bentu# dominan dari o!alamins dalamma#anan adalah adenos)lo!alamin #oen7im B12 dan h)dro8oo!alamin. Metode

tradisional analisis /itamin B12 seara mi#ro!iolo,i men,,una#an L# leichmannii

atau &chromonas malhamensis se!a,ai or,anisme. Or,anisme &chromonasmalhamensismemili#i s+esi'isitas )an, le!ih !esar untu# o!alamins di!andin,#an

den,anL# leichmanniimem!eri#an hasil )an, le!ih a#urat terhada+ a#ti/itas !iolo,is

/itamin. Kelemahan malhamensisadalah memerlu#an wa#tu in#u!asi le!ih lama3" hari di!andin,#an den,an L# Leichmannii. 4asil )an, le!ih tin,,i di+eroleh

den,an 6(A #arena +ada te#ni# ini di,una#an +rosedur e#stra#si )an, le!ih #uat

di!andin,#an den,an uji mi#ro!iolo,i. Metode &PBA telah di#em!an,#an untu#/itamin B12 )an, di,una#an den,an sediaan 'armasi dan da)a tahan /itamin. Metode

ini diada+tasi dari +en,em!an,an 'ormat PBA +irin, mi#rotitrasi untu# analisis

/itamin B12 di dalam ma#anan. PBA di,una#an untu# menentu#an jumlah tam!ahan

siano#o!alamin dalam sereal. Penelitian ini menunju##an !ahwa wa#tu in#u!asi


7/12

)an, le!ih +ende# se#itar 1 jam +ada suhu 3>5 mem!eri#an hasil )an, sama den,an)an, di+eroleh +ada suhu "5 den,an in#u!asi semalam. Disim+ul#an !ahwa &PA

untu# analisis siano#o!alamin dalam ma#anan memili#i sejumlah #eun,,ulan

di!andin,#an uji mi#ro!iolo,i dan 6(A. Kele!ihan &PBA adalah le!ih m udah untu#

dila#u#an dan !er+otensi menin,#at#an re+rodu#ti'itas di!andin,#an den,an+rosedur mi#ro!iolo,i.

olat !iasa di uji men,,una#an metode uji mi#ro!iolo,i men,,una#an .

rhamnosus dan Enterococcus hirae dimana +en,u#uran am+uran 'olat dila#u#an!erdasar#an res+on or,anisme terse!ut. Metode mi#ro!iolo,i !ai# mes#i mema#an

wa#tu selama +ero!aan dan res+on dari or,anisme untu# 'olat )an, !er!eda tida#

selalu identi#. Prosedur 4P5 !erdasar#an +enelitian !e!era+a tahun tera#hirmemili#i resolusi )an, !ai# untu# am+uran standar 'olat namun !ila tin,#at 'olat

rendah )an, serin, ditemu#an dalam se!a,ian !esar ma#anan da+at men)e!a!#an

#esalahan dalam dete#si dan +enentuan #adar 'olat men,,una#an metode ini. Metode&PBA untu# 'olat den,an ara meman'aat#an en7im !erla!el 'olat men,i#at +rotein

dari susu sa+i. Berdasar#an !e!era+a metode)an, da+at di,una#an unu# men,u#ur /itamin-/itamin terse!ut dida+at#an se!uah

metode s+esi'i# untu# masin,-masin, /itamin. Cji s+esi'i# asam +antotenat ialahmetode &(SA !iotin men,,una#an metode &PBA *itamin B0 men,,una#an

metode 4P5/itamin B12 men,,una#an metode &PBA dan 'olat men,,una#an

metode mi#ro!iolo,i.

2.2 Pe&'aha!an

A!a& Pen"a"%na"

Penentuan asam +antotenat men,,una#an metode &(SA. Metode &(SA

di!a,i menjadi dua )aitu &(SA lan,sun, dan tida# lan,sun,. &(SA lan,sun,

men,una#an anti!odi s+esi'i# untu# /itamin )an, telah !er#o/alen den,an en7im

'os'at. Sam+el )an, di,una#an ialah serum manusia )an, meru+a#an #onju,at

+antotenat +asi' teradsor+si #e +ermu#aan ta!un, uji )an, ter!uat dari +olistirena.

Pen,i#atan en7im !er,antun, +ada jumlah /itamin !e!as awal.

Saat ini &(SA telah di#em!an,#an menjadi metode tida# lan,sun, )an, diutama#an

untu# analisa ma#anan. Pantotenat men,,una#an Bo/ine Serum Al!umin BSA

)an, disintesis melalui dua metode #onju,asi. Pada !a,ian +ertama al#ohol +rimer

dideri/asi menjadi !romoasetil !romide a,ar mem!entu# deri/ate /itamin

!romoasetil )an, #emudian a#an !er#uran, a#i!at adan)a +roses denaturasi +rotein

)an, a#an men,hu!un,#an asam +antotenat den,an BSA. 6ea#si )an, terjadi ialah

se!a,ai !eri#ut :


8/12

9am!ar % 6ea#si Denaturasi Protein

Berdasar#an 9am!ar.. dihasil#an antisera )an, #ualitasn)a !er!eda namun san,at

s+esi'i# !a,i asam +antotenat )an, rea#ti/itasn)a rendah. Kedua metode &(SA

di,una#an #arena memili#i s+esi'itas )an, tin,,i untu# /itamin !e!as dan sensiti/e.

Bi%"inMetode s+esi'i# untu# analisis !iotin ialah &n7)me Protein Bindin, Assa)

&PBA dimana +rotein di+asan,#an lan,sun, den,an en7im se+erti +ero#sidase.

Anti!odi da+at di,una#an !ai# seara lan,sun, mau+un anti!odi )an, telah

men,alami +emurnian. Metode &PBA #emun,#inan a#an mem!eri#an nilai !iotin

dalam sam+el ma#anan )an, se!andin, den,an uji mi#ro!iolo,i namun memili#i

#e#hususan )an, luas !a,i analo, !iotin lainn)a. Sam+el )an, di,una#an +ada uji

&PBA ialah hati dom!a.

(%la"

Sen)awaan 'olat meru+a#an salah satu #elom+o# ter+entin, dalam ,ru+/itamin B. Se!a,ian !esar /itamers 'olat telah di#etahui +rosedur )an, +alin,!an)a# di,una#an dan diterima untu# 'olat adalah uji mi#ro!iolo,i men,,una#an .

rhamnosus dan &nteroous hirae dimana res+on dari or,anisme untu# #e!eradaan

am+uran 'olat dalam sam+el diu#ur. Prosedur mi#ro!iolo,i termasu# metode )an,

u#u+ !ai#. Namun selama analisis mema#an wa#tu dan menuntut dalam+ela#sanaan. Selain itu res+on dari or,anisme den,an !entu# 'olat )an, !er!eda

tida# selalu identi#. Sejumlah 'a#tor )an, di#etahui mem+en,aruhi a'initas +rotein

)an, di,una#an untu# men,i#at 'olat misaln)a suhu wa#tu in#u!asi dan #hususn)a+4. Se!a,ai alternati' uji &PBA di#em!an,#an untu# 'olat den,an meman'aat#an

en7im !erla!el 'olat men,i#at +rotein dari susu sa+i. &PA di,una#an untu# +enentuan

'olat dalam !er!a,ai sa)uran mentah dan dimasa#. Sam+el ju,a dianalisis den,an ujimi#ro!iolo,i dan hasil dari dua tes di!andin,#an.

Kese+a#atan )an, !ai# di+eroleh antara metode den,an hu!un,an linier

selama rentan, ." , +er 1 , ditemu#an. &PBA !isa dila#u#an dalam satu hari

#erja di!andin,#an den,an 2-3 hari untu# uji mi#ro!iolo,i. Prosedur 4P5menunju##an !entu# utama 'olat hadir dalam s+outs Brussels adalah %- metil-E4

%F E4 3F dan %-'ormil E4 2F. Dua dari la!oratorium )an, di,una#an


9/12

%-metil-E4 se!a,ai ali!rant sedan,#an P9A di,una#an #eti,a. Studimen)im+ul#an !ahwa +em!atasan utama dari #edua &PBA dan 6(A adalah res+on

dari !entu# 'olat indi/idu untu# +en,,unaan BP. Kontrol )an, ermat dari +4 !u''er

uji )an, di,una#an dan +ilihan #ali!rasi uji di+erlu#an ji#a tes ini harus ditera+#an

+ada +en,u#uran 'olat ma#anan.Cji &PBA untu# 'olat menawar#an +otensi s+esi'isitas )an, luas dan

#e+e#aan )an, u#u+ untu# +en,u#uran 'olat dalam ma#anan. Be#erja le!ih lanjut

!a,aimana+un di+erlu#an untu# +em!a#uan metodolo,i terutama dalam +emilihan#ondisi #ali!ran dan uji se!elum hasiln)a da+at di+era)a di!andin,#an den,an

+rosedur lain se+erti uji mi#ro!iolo,i. Ketersediaan ha)ati 'olat dalam !ahan +an,an

seara alami tida# da+at di+asti#an #arena se!a,ian !esar !ahan +an,an !elumseluruhn)a ditentu#an +ada #ondisi a#tual termasu# adan)a intera#si den,an !ahan

+an,an. Pen)era+an 'olat !erlan,sun, di dalam usus dua !elas jari den,an !antuan

+teroil+oli,lutamat hidrolase se!a,ai +e+tidasse )an, men,hidrolisis rantai+oli,lutamil menjadi mono,lutamil )an, da+at disera+ melalui suatu +roses trans'or

termediasi +em!awa. 6erata #etersediaan ha)ati 'olat )an, ter#andun, dalam !ahan+an,an han)a %F !ah#an #uran,.

a#tor-'a#tor )an, da+at men)e!a!#an #etersediaan ha)ati tida# sem+urnadise!a#an oleh +en,aruh matri#s !ahan +an,an melalui +en,i#atan non#o/alen dari

'olat +en,uraian 'olat 4" )an, la!il dalam lin,#un,an asam dalam lam!un, dan

+en,u!ahan en7imati# )an, tida# sem+urna dalam usus terhada+ +oli,lutamilmenjadi mono,lutamil )an, da+at disera+. Penentuan #etersedian ha)ati 'olat dari

ma#anan manusia memerlu#an +en,u#uran lan,sun, +ada manusia teta+i

+en,u#uran ini memerlu#an !ia)a )an, mahal dan ju,a #e!utuhan 'olat tia+ etnissan,at !era,am sehin,,a tida# oo# untu# +en,u#uran rutin. De'isiensi 'olat +ada

hewan uji sulit tera+ai #arena terjadi ofcorohagy ta+i +ema#aian #andan, #awat

tun,,al mam+u menurun#an 'olat )an, tersim+an dalam jarin,an seara si,ni'i#an.

6es+ons adan,an 'olat +ada +em!erian +a#an #em!ali den,an jumlah 'olattertentu di,una#an untu# men,u#ur +en,am!ilan dan +eman'aatan /itamin terse!ut

oleh hewan uji. Kisaran res+on terle!ar di+eroleh dari serum 'olat )an, ju,a le!ih

mudah diu#ur seara radioimunolo,i. Garin,an +adat le!ih rumit di uji #arena le!ih#om+le#s dan rentan terhada+ #etida#+astian dan mem!utuh#an wa#tu lama. Salah

satu #esulitan dalam uji#etersediaan ha)ati /itamin ialah +en,,a!un,an ma#anan

manusia #e dalam +a#an hewan +ada jumlah )an, te+at dan u#u+ tin,,i untu#memiu teru#urn)a res+on 'isiolo,is. Kadar olat serum menin,#at seara si,ni'i#an

!ah#an +ada +enam!ahan )an, relati/e sedi#it den,an ara +em!erian +a#an

semisinteti#.

)i"a&in B12

*itamin B 12 ialah istilah )an, di,una#an untu# men,,am!ar#an se#elom+o#

sen)awa )an, di#enal se!a,ai #o!alamin dimana corrinoids men,andun, #o!al.

Siano#o!alamin se!enarn)a arte'a# dari +rosedur e#stra#si )an, di,una#an di mana

sianida ditam!ah#an untu# mensta!il#an #o!alamin. Bentu# dominan dari #o!alamindalam ma#anan )an, adenosil#o!alamin #oen7im B12 dan hiro#so#o!alamin.

Ma#anan )an, di+er#a)a se+erti sereal sara+an saat ini di+er#a)a den,an


10/12

siano#o!alamin. Metode tradisional /itamin B 12 )aitu metode analisis mi#ro!iolo,i!iasan)a den,an L# leichmannii atau &chromonas malhamensis se!a,ai or,anisme.

Namun malhamensis memerlu#an wa#tu in#u!asi le!ih lama 3" hari

di!andin,#an den,anL#leichmanniidan #elemahan.

Dalam tes #linis /itamin B 12 metode 6(A umumn)a di,una#an !erdasar#an+ersain,an tam!ah %> 5o-!erla!el siano#o!alamin dan !e!as /itamin !erla!el untu#

sejumlah situs )an, men,i#at )an, di!eri#an oleh B 12 +rotein )an, men,i#at.

a#tor intrinsi# dan 6-+rotein #eduan)a telah di,una#an se!a,ai !ahan +en,i#at.Mes#i+un 6(A telah men,,anti#an +rosedur mi#ro!iolo,i untu# +enentuan /itamin

B12 dalam darah se!uah la+oran !aru-!aru ini telah men)aran#an !ahwa

+en,,unaan #it 6(A tersedia seara #omersial untu# analisis serum #o!alamin da+atmem!eri#an hasil )an, #eliru tin,,i. (ni telah di#ait#an den,an non-s+esi'i#

men,i#at !entu# tida# a#ti'.

Penera+an #it 6(A !er!asis untu# +enentuan /itamin B12 dalam ma#anantelah di+eri#sa oleh !e!era+a +e#erja dan telah ditemu#an untu# menjadi e#stra#si

ter,antun,. 4asil )an, le!ih tin,,i di+eroleh den,an 6(A )an, tam+a#n)adise!a!#an oleh +rosedur e#stra#si )an, le!ih #uat di,una#an untu# te#ni# ini

di!andin,#an den,an uji mi#ro!iolo,i. Pe#erja lain menunju##an !ahwa #ehadiransianida dalam +rosedur e#stra#si mem!eri#an hasil )an, sama den,an uji

mi#ro!iolo,i.

Baru-!aru ini se!uah &PBA telah di#em!an,#an untu# /itamin B12 untu#di,una#an den,an sediaan 'armasi dan da)a tahan tu!uh /itamin. Pende#atan ini

telah diada+tasi oleh +e#erja lain dalam +en,em!an,an 'ormat PBA +irin,

mi#rotitrasi untu# analisis /itamin B 12 di ma#anan )an, di+er#a)a. 6-+rotein di!erila!el den,an en7im horseradish +ero8idase 46P dan #onju,at en7im-+rotein

selanjutn)a dimurni#an den,an P5. Dalam ma#anan )an, di+er#a)a di mana

!entu# BE2 /itamin tun,,al dominan misaln)a siano#o!alamin 6-+rotein da+at

di,una#an #arena memili#i #euntun,an dari !ia)a )an, le!ih rendah.ase amo!il uji disia+#an den,an +asan,an siano#o!alamin #e K4

men,,una#an +rosedur !romoaet)l !romida )aitu melalui #elom+o# al#ohol

+rimer. 4al ini !er!eda den,an la+oran se!elumn)a di mana #onju,at disintesismen,,una#an #elom+o# #ar!o#sil amida +ada inin corrin. Penin,#atan sensiti/itas

uji ditemu#an den,an men,,una#an onju,ate !romoasetil di!andin,#an den,an

#ar)a se!elumn)a )an, memun,#in#an +en,,unaan en7im !erla!el 6-+rotein )an,jauh le!ih tin,,i +en,eneran. Pelat mi#rotitrasi dila+isi dan en7im !erla!el solusi 6-

+rotein )an, ditemu#an menjadi sta!il selama !e!era+a !ulan tan+a #ehilan,an )an,

u#u+ a#ti/itas.Batas dete#si +en,ujian ini adalah @ +, +er !ai# dan ada tin,#at rendah non -

latar !ela#an, tertentu men,i#at. PBA di,una#an untu# menentu#an jumlah

tam!ahan siano#o!alamin dalam sara+an sereal. Kese+a#atan )an, !ai# )an,

ditemu#an antara jumlah dianalisis ditentu#an oleh &PBA dan tin,#at teoritis.stra# non - sam+el di+er#a)a diuji untu# am+ur tan,an dalam uji dan mem!eri#an

#ur/a su+erim+osi!el di!andin,#an den,an solusi standar. Penelitian ini ju,a

menunju##an !ahwa wa#tu in#u!asi )an, le!ih +ende# dari se#itar 1 jam +ada suhu


11/12

3> 5 mem!eri#an hasil )an, sama den,an )an, di+eroleh +ada suhu " 5 den,anin#u!asi semalam.

Disim+ul#an !ahwa &PA untu# siano#o!alamin analisis dalam ma#anan )an,

di+er#a)a memili#i sejumlah #eun,,ulan di!andin,#an #edua uji mi#ro!iolo,i dan

6(A. e!ih mudah untu# mela#u#an telah +otensi menin,#at#an re+rodu#ti'itas dan!an)a# !er#uran, #ali uji di!andin,#an den,an +rosedur mi#ro!iolo,i. Mes#i+un

!atas dete#si untu# &PBA u#u+ untu# di,una#an den,an ma#anan )an, di+er#a)a

untu# men,u#ur tin,#at alami dalam ma#anan +er!ai#an le!ih lanjut dalamsensiti/itas assa) men,,una#an sistem dete#si alternati' end-+oint dan e#stra#si atau

+rosedur +em!ersihan mun,#in di+erlu#an. Ketersediaan ha)ati /itamin B12 telah

diuji terutama dalam #onte#s analisis de'isiensi /itamin B12 ter#ait den,anmala!sor+si. Belum !an)a# di#etahui men,enai +en,aruh #om+osisi !ahan +an,an

+ada #etersediaan ha)ati /itamin B12.

Pada manusia normal +en)era+an /itamin B12 dari telur #uran, dari seten,ahjumlah siano#o!alamin tan+a tam!ahan !ahan +an,an. Pe#tin dan ,om-,om )an,

seru+a da+at menurun#an #etersediaan ha)ati /itamin B12 dalam ti#us teta+i+en,aruh ini !elum di#etahui den,an jelas +ada manusia. (ndi/idu tertentu )an,

men,alami de'isiensi /itamin B12 dise!a!#an oleh +enernaan )an, !uru# dan+ele+asan #o!alamin )an, ta# sem+urna dari matri#s !ahan +an,an mes#i+un mere#a

men)era+ sen)awa murni itu seara normal. *itamin B12 han)a sedi#it )an,

ter#andun, dalam tanaman !entu# ,ann,,an, tertentu da+at men,andun, /itaminB12 )an, le!ih !an)a#. Namun ,an,,an, tida# dire#omendasi#an se!a,ai sum!er

/itamin B12 #arena #etersediaan ha)atin)a san,at rendah.

BAB III

$.1 Si&*ulan

Berdasar#an +enelitian di#etahui !awa masin,-masin, sen)awa memili#i

metode s+esi'i# )an, !er!eda )aitu asam +antotenat ialah metode &(SA !iotin

men,,una#an metode &PBA /itamin B12 men,,una#an metode &PBA dan 'olat

men,,una#an metode mi#ro!iolo,i.


12/12

DA(TAR PUSTAKA

draft 1 makalah kelas b p2 kelompok 3-2

Documents