中国测试CHINA MEASUREMENT & TEST Vol.44 No.5May袁2018第 44 卷第 5 期2018 年 5 月

减肥保健品非法添加 3种化学药物的TLC-Micro FTIR检测

马 姣袁 胡娅琳袁 赵益侠袁 许 凤渊齐齐哈尔医学院药学院袁黑龙江 齐齐哈尔 161006冤

摘 要院利用薄层色谱渊TLC冤与显微傅里叶变换红外光谱渊Micro FTIR冤联用技术检测减肥保健品中非法添加酚酞尧西布曲明尧芬氟拉明 3 种组分遥 供试品用甲醇超声提取袁以硅胶 GF254 铝合金薄层板为固定相袁以氯仿-甲醇-氨水

渊11颐1颐0.12冤为展开剂袁在紫外灯 254 nm 下检视袁薄层色谱法渊TLC冤快速初筛袁显微傅里叶变换红外光谱渊Micro FTIR冤进行定性检测遥结果显示在随机抽取的 9 批供试品中袁5 批检测到酚酞袁7 批含有西布曲明袁2 批含有芬氟拉明遥 所建

立的方法专属性强尧灵敏度高袁可以作为该类保健品非法添加酚酞尧西布曲明尧芬氟拉明的检测方法遥关键词院薄层色谱法曰显微傅里叶变换红外光谱法曰酚酞曰西布曲明曰芬氟拉明

文献标志码院A 文章编号院1674-5124渊2018冤05-0053-05

Determination of three chemical drugs added illegally into anti-obesity andhealthcare products by TLC-Micro FTIR method

MA Jiao袁 HU Yalin袁 ZHAO Yixia袁 XU Feng渊School of Pharmacy袁Qiqihar Medical University袁Qiqihar 161006袁China冤

Abstract: The thin layer chromatography 渊TLC冤 combining with micro Fourier transform infraredspectroscopy 渊Micro FTIR冤 was used to detect the phenolphthalein袁 sibutramine and fenfluramineadded illegally into anti -obesity and healthcare products. After samples were extracted withmethanol袁 the primary screening was performed with TLC under 254 nm UV lamp using silica gelGF254 aluminum alloy plates as stationary phase and chloroform-methanol-ammonia 渊11颐1颐0.12冤 asdeveloping solvent. Then micro FTIR was used for qualitative detection.The results show 5 batchesof samples contain phenolphthalein袁 7 batches of samples contain sibutramine and 2 batches ofsamples contain fenfluramine in randomly slected 9 batches of samples. The method was strongspecificity袁 high sensitive袁 so it could be used to detect the phenolphthalein袁 sibtutramine袁fenfluramine added illegally into anti-obesity and healthcare products.Keywords: TLC曰 Micro FTIR曰 phenolphthalein曰 sibutramine曰 fenfluramine

收稿日期院2017-12-20曰收到修改稿日期院2018-01-18基金项目院2017 年黑龙江省大学生创新创业训练计划项目渊201711230058冤作者简介院马 姣渊1997-冤袁女袁黑龙江齐齐哈尔市人袁专业方向为临床药学遥通信作者院许 凤渊1980-冤袁女袁黑龙江哈尔滨市人袁副教授袁硕士袁研究方向为药品检验遥

doi院10.11857/j.issn.1674-5124.2018.05.010

中国测试 2018 年 5 月

0 引 言减肥保健品是随着审美观念的变化衍生出来的

一种瘦身产品袁因其快速的减肥效果受到很多人尤

其是女性的喜爱遥 但是有很多对人体有害的减肥产

品充斥着市场袁让减肥保健品市场鱼龙混杂遥 减肥

产品非法添加物中酚酞尧西布曲明尧芬氟拉明渊结构

如图 1 所示冤 因其减肥效果好袁 是一些常见的添加

物遥 酚酞属刺激剂袁用于慢性便秘袁长期使用可损害

肠神经系统袁且很可能是不可逆的曰西布曲明为非苯

丙胺类食欲抑制剂袁通过抑制人的食欲袁达到减肥的

效果袁但会增加严重的心脑血管不良事件曰芬氟拉明

为苯丙胺类食欲抑制药袁会导致心脏瓣膜病变等不良

反应遥 故减肥保健品非法添加化学药物的行为不仅

违反了食品卫生法规袁而且严重危害人体健康遥

目前袁减肥保健品中非法添加西药的常用检测

方法有薄层色谱法渊TLC冤[1-5]尧液相色谱法渊HPLC冤[6-7]尧液相色谱-质谱法渊HPLC-MS冤 [8-9]袁表面增强拉曼光谱

法渊SERS冤[10]等遥 本实验中袁薄层色谱方法作为初筛手

段袁简单快速袁再联用显微傅里叶变换红外光谱的

高灵敏度尧高专一性[11-13]对非法添加药物快速检测遥1 实验部分1.1 仪器与试剂

显微傅里叶变换红外光谱仪 NICOLET iN10渊Thermo SCIENTIFIC冤曰硅胶 GF254 铝合金薄层板渊德国默克公司冤曰超声波清洗仪 UIP50渊南京垒君达超

声电子设备有限公司冤曰高速台式离心机 TGL-16渊上海医用分析仪器厂冤遥

酚酞对照品渊A袁批号院100102冤尧西布曲明对照

品渊B袁批号院100624冤尧盐酸芬氟拉明对照品渊C袁批号院0073-9501冤院 均购自中国药品生物制品检定所遥实验中所用的 9 批减肥保健品均购于市场曰 其他试

剂均为分析纯遥对照品溶液和混合对照品溶液的制备院 分别精

密称定 A尧B尧C 3 种对照品适量袁加入甲醇溶解尧超声

5 min袁制成浓度为 1 mg/mL 的 A 溶液尧2 mg/mL 的 B溶液和 5mg/mL 的 C 溶液作为对照品溶液和同等浓

度的混合对照品溶液遥供试品溶液的制备院取胶囊剂 10 粒或袋泡茶

4 包袁称取内容物约 1/10 置于 10mL 容量瓶中袁加入

5mL甲醇振摇尧超声 10min后袁离心 5min渊4000r/min冤袁取上清液作为供试品溶液遥1.2 实验条件

以硅胶 GF254 铝合金薄层板为固定相袁以氯仿-甲醇-氨水渊11颐1颐0.12冤为展开剂袁点样量为 4 滋L袁饱和 5 min 后袁展开尧取出晾干袁在紫外灯 254 nm 下检

视定位遥 再将 TLC 板上对照品斑点刮下袁放在 2 mL的离心管中用 0.5 mL 的甲醇溶解袁超声 5 min尧高速

离心 3~5 min袁取上清溶液放在离心管中室温挥干袁然后放在金板上进行显微红外光谱检测遥采集模式院反射袁检测条件院液氮冷却后检测袁采集时间院12 s袁扫描院64 次袁光谱分辨率院8 cm-1遥 数据处理软件为

OMNIC 工作站和 origin6.1遥2 结果与分析2.1 对照品 TLC及Micro FTIR测定

用微量进样器在硅胶 GF254 铝合金薄层板上点

对照品溶液及对照品混合溶液各 4 滋L袁按 1.2 节下

实验条件进行测定遥 再取极少量的酚酞尧西布曲明尧芬氟拉明对照品粉末放在金板上袁 进行显微红外光

谱检测遥 结果如图 2渊a冤耀图 2渊d冤所示遥由图 2渊a冤可知袁酚酞尧西布曲明和芬氟拉明

3 种成分在本实验色谱条件下分离较好遥分析图 2渊b冤耀图 2渊d冤可知袁对照品粉末与刮板甲醇提取后的

对照品红外谱图峰形尧峰位基本一致遥 图 2渊b冤中3 289.50 cm-1 处的吸收峰袁说明分子中-OH 的存在曰1 718.24袁1 216.52袁1 123.64 cm-1 的吸收峰袁 说明分

子中苯甲酸酯的存在曰1 595.68袁1 509.50袁1 460.46袁1 170.73袁1 106.82 cm-1 的吸收袁 说明分子中有与取

代基共轭的苯环存在曰图 2渊c冤中 3 333.0 cm-1 吸收

峰袁说明分子中含有结晶水曰2 921.5 cm-1 吸收峰袁说明环丁基的存在曰1 566.0袁1 414.5袁1 078.9袁1 017.6袁793.3.0 cm-1 吸收峰袁说明氯苯基的存在曰2 361.3袁1 649.5袁1 335.0 cm-1 吸收峰袁说明是叔胺盐遥 图 2渊d冤中 2951.5袁2721.6袁2479.4袁2389.3袁1452.8袁1334.5 cm-1

吸收峰袁说明分子为仲胺盐曰1587.9袁尧894.9袁795.5cm-1

吸收峰袁说明间位取代苯的存在曰1203.0袁1118.4袁1073.5cm-1吸收峰袁说明三氟代物的存在遥

图 1 3 种成分结构式

渊c冤盐酸芬氟拉明

HNHClC

FFF

渊b冤西布曲明

Cl N

渊a冤酚酞

HO OO

HO

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第 44 卷第 5 期

2.2 TLC及Micro FTIR最低检测限考察

用微量进样器在硅胶 GF254 铝合金薄层板上点

1.1 节下的对照品溶液袁酚酞和西布曲明的点样量分

别为 1袁2袁3袁4滋L袁芬氟拉明的点样量分别为0.5袁1.0袁1.5袁2 滋L袁按 1.2 节下的 TLC 条件检测袁结果酚酞在

1 滋g 时可以检出袁西布曲明在 2 滋g 时可以检出袁芬氟拉明在 2.5滋g 时可以检出遥 将 TLC 板上对照品斑

点刮下袁取甲醇提取挥干后的粉末放在金板上进行

显微红外光谱检测遥 结果酚酞和西布曲明在 2滋g 时

可以检出袁芬氟拉明在 2.5滋g 时可以检出遥由此说明

本实验条件下袁TLC 法及 Micro FTIR 方法灵敏度均

较高遥2.3 真实样品检测

2.3.1 TLC 检测

用微量进样器取 1.1 节下的对照品混合溶液

及1~9 号供试品溶液各 4 滋L 点于硅胶 GF254 铝合金

薄层板上袁按 1.2 节下的检测条件检测袁结果如图 3所示遥

由图可知袁由比移值和斑点颜色初步判定供

试品 1袁2袁3袁6袁7袁8 批次含有酚酞尧供试品 1~9 批

次含有西布曲明尧供试品 2袁3袁5袁8袁9 批次含有芬氟

拉明遥2.3.2 Micro FTIR 检测

薄层色谱方法虽然简单快速袁但定性能力有限袁易出现假阳性结果袁因此只能作为初筛手段遥与常规

红外光谱相比袁显微傅里叶变换红外光谱灵敏度高袁可以实现痕量样品的分析曰采用溴化钾压片法会出

淤 1 2 3 4 5 6 7 8 9淤3 种成分对照品曰1~9.供试品遥

图 3 供试品 TLC 图

图 2 对照品 TLC 图及 Micro FTIR 图

渊a冤对照品 TLC 图

1 2 3 41.酚酞曰2.西布曲明曰3.盐酸芬氟拉明曰4.混合对照品遥

渊b冤酚酞 Micro FTIR 图

1.酚酞对照品粉末曰2.刮板酚酞对照品遥

4000波数/cm-1

3000 2 000 10005256606468727680

12

渊c冤西布曲明 Micro FTIR 图

1.西布曲明对照品粉末曰2.刮板西布曲明对照品遥

4 000波数/cm-1

3 000 2 000 1 0000102030405060708090100

1

2

渊d冤芬氟拉明 Micro FTIR 图

1.盐酸芬氟拉明对照品粉末曰2.刮板芬氟拉明对照品遥4 000

波数/cm-13 000 2 000 1 000

1

2

100959085807570656055

马 姣袁等院减肥保健品非法添加 3 种化学药物的 TLC-Micro FTIR 检测 55

中国测试 2018 年 5 月

现水的吸收峰袁还会使谱图变形袁而 Micro FTIR 技

术分析时不需要添加任何稀释剂袁能反映样品的本

质光谱遥 将图 3 中对照品的斑点及相同比移值处供

试品中疑似含有非法添加组分的斑点刮下袁提取处

理后取其少量粉末进行显微红外测定遥 结果如图 4~图 6 所示遥

由图 4 分析 6 个批次供试品的显微红外谱

图袁在供试品 1袁2袁3袁7袁8 的谱图中袁几个特征峰包

括渊VOH尧VC=O尧VC-O-C尧VC=C冤的峰位尧峰形基本上与酚酞

刮板对照品的显微红外谱图一致袁而供试品 6 无酚

酞特征峰袁说明其不含酚酞组分遥由图 5 分析 9 批供试品的显微红外谱图袁在供试

品 1袁2袁3袁4袁7袁8袁9 显微红外谱图中袁特征峰及相关峰

渊VCH3尧VC-N尧VC=C尧茁=C-H尧酌=C-H冤的峰位峰形基本上与西

布曲明刮对照品的显微红外谱图一致袁而供试品 5尧6 无西布曲明特征峰袁说明其不含西布曲明组分遥

由图 6 分析 2袁3袁5袁8袁9 等 5 个批次供试品的显

微红外谱图袁供试品 5袁9 几个特征峰渊仲 NH2+伸缩尧VCH3尧VC=C尧VC-N冤的峰位尧峰形与芬氟拉明刮板对照品

的显微红外图谱基本一致袁认为在供试品 5袁9 中非法

添加芬氟拉明袁2袁3袁8 号供试品均无相关特征峰袁说明不含盐酸芬氟拉明遥3 结束语

在进行显微傅里叶变换红外光谱检测时袁要保

证前处理方法的一致性袁即需要在相同的条件下将

TLC 薄层板上的对照品和样品斑点刮下尧提取和测

定袁否则无可比性遥 另外袁扫描不同样品区域时出现

的吸收峰个别部位略有差别袁需要多次测定取平

均值遥本实验采用薄层色谱-显微傅里叶变换红外光

谱联用技术对减肥保健品中非法添加的酚酞尧 西布

曲明尧芬氟拉明进行快速检测袁在被检测的 9 批供试

品中袁5 批供试品检测出非法添加酚酞袁7 批供试品

非法添加西布曲明袁2 批供试品非法添加芬氟拉明遥此方法专属性强尧灵敏度高尧准确性好袁适用于对该

类化合物的快速检测遥

图 6 供试品盐酸芬氟拉明比移植处的 Micro FTIR 图

扣板对照品

2号样

3号样

5号样8号样

9号样

4 000 3 500 3000 2 500 2 000 1 500 1 000 500波数/cm-1

图 4 供试品酚酞比移植处的 Micro FTIR 图

4 000 3 500 3000 2 500 2 000 1 500 1 000 500波数/cm-1

刮板对照品

1号样

2号样

3号样

6号样

7号样

8号样

图 5 供试品西布曲明比移植处的 Micro FTIR 图

4 000 3 500 3000 2 500 2 000 1 500 1 000 500波数/cm-1

刮板对照品

1号样

2号样

3号样

6号样

7号样

8号样

9号样

5号样

4号样

56

第 44 卷第 5 期

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试系统满足设计要求袁测试数据准确可靠袁已成功投

入到企业生产中遥 弥补了 JZ-7 型中继阀技术条件中

一些检测项模糊的检测标准袁 对后续新标准的制定

具有借鉴意义遥参考文献

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渊上接第 42 页冤

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