組換えマウスを用いたヒト HSP90 遺伝子の機能解析

2012 5 2015 3

◉

✔

◉

配置ボタンで

確定してください

※部分一致で検索可能です

✔ ✔

加齢医学研究所

○○分野

東北 太郎

教授

記記載載例例：：ウウイイルルスス・・ママウウスス（（感感染染実実験験）） （注）Ｗｅｂシステム上で承認された実験計画の変更申請については、

様式 A 中央の“これまでの変更”申請を選択し、承認番号を入力すると

過去の申請内容が反映されます。さきに内容を呼び出してから入力を

始めてください。

○○○分野

1）実験実施期間の延長：研究進展のため

2）実験実施場所の変更：22○組換実-010は研究室の移転により廃止となるため削除し、

新たな実験場所として 22〇組換実-001を追加鵜する。

3）ノックアウトマウスの追加：X遺伝子の発現調節因子として HSP90遺伝子の関与を

明らかにするためノックアウトマウスの使用を追加する。

加齢医学研究所

東北 太郎

022-717-xxxx

大腸菌 20 Adenovirus 3

20

教授

gene@xxx.tohoku.ac.jp

宮城 太郎 加齢医学研究所 ○○○分野 准教授 10 大腸菌 10

東北 太郎 加齢医学研究所 ○○○分野 教授 20 大腸菌 10

紙媒体で承認された申請については、

検索ウィンドウの右上の“フリー入力”

を選択し、承認番号を入力ください。

※変更箇所への印（赤下線等）

は不要となりましたので

具体的内容の記載をお願い

します

加齢医学研究所 ○○○分野

教授 東北 太郎

組換えマウスを用いたヒト HSP90 遺伝子の機能解析

✔

ヒト熱ショックタンパク質、HSP90の機能を明らかにする。

HSP90は哺乳動物のストレス応答機構の解明は様々な原因を起因とする病態を理解する為に必須である。

ストレスや細胞外シグナルに応答し、伝達経路や転写因子の活性制御等に重要な役割を果たす蛋白質で、

この機能を明らかにすることはストレス応答の理解に与えるインパクトは大きい。また、マウスに効率

よく導入するためにアデノウイルスベクターを利用することは科学的知見に照らして合理的である。

実験１ 承認済み実験計画、2011○組換-001で作成済みの

ヒトHSP90 発現アデノウイルスベクタープラスミドを P2

HEK293細胞にトランスフェクションし、組換アデノ

ウイルス（増殖能欠損型）を産生する。

実験２－１ HSP90ノックアウトマウス及びHSC70-GFP発現マウス P1A

を△△研究所から譲り受け、飼育する。

実験２－２ 上記マウスに、実験1で得たアデノウイルスベクターの感染 P2・P2A

によりHSP90を発現させ、表現型の解析を行う。

21加組換実-002 動物感染実験室202 P2・P2A マウス

21加組換実-005 ○○分野P2実験室 P2

21加組換実-007 動物飼育施設P1A室 P1A マウス・ラット

実験３ HSC70-GFP発現マウスから摘出した組織を野生型マウス

に移植し、飼育する。 P1A

✔

✔

✔

注）組換え培養細胞や組換え動物から摘出した組織を

移植するような実験は「動物作成実験」に該当します。

なお、動物接種実験は主に微生物の感染実験です。

2012 5 2015 3

科学的知見に照らして、培養細胞やマウス個体に当該実験に供する目的で遺伝子を導入するためには

遺伝子導入組換えウイルスを作製して用いることが必須である。ストレス応答機構の解明は、様々な

ストレスに起因する病態を理解しそれを解決する方法を見出すことにつながり、その研究成果が人類

の健康の維持の方法論の開発に与えるインパクトははかり知れない。

✔

✔

✔

◉

アデノウイルス、及び培地・器具類・糞尿等

✔

✔

実験で使用したガラス器具類

✔

✔

HSP90 KOマウス、及びHSC70-GFP発現マウス

✔

アデノウイルス

様式が改定されま

したのでご注意願

います。

マウス、ラット等の

哺乳動物の処置に

ついては、すべて

上段へ記載してく

ださい。

微生物、植物、魚類、

昆虫等、哺乳動物以

外の組換え生物の

不活化の処置方法

は下段に記載して

ください。

※２番を選択した場合は、実験効果と危険度の点等で比較し、代替可能な実験方法より

今回申請された実験方法のほうが優れていると判断される理由を簡潔に記載してください。

（入力画面）

別紙 1＜遺伝子組換え生物等の特性及び拡散防止措置一覧表＞

※マスタデータから検索できない生物、及びベクターについては、直接空欄をクリックし、名称を手入力してください。なお、生物名はすべて学名で登録されております。

□

別紙 2

のみ 実験番号

遺伝子組換え

生物等の名称 宿主等の特性

(名称/実験分類/特性等)

目的遺伝子に係る

核酸供与体の特性 (実験分類・特性)

目的遺伝子に係る

供与核酸の特性 (種類・機能・大きさ

及び構成・Ac. No.)

ベクター等の特性 (構成・名称・伝達性・

宿主特異性)

遺伝子組換え

生物等の特性 (宿主との相違)

保有動植物等の特性 (移入方法・存在状態

・形質・増殖等)

拡散防止措置の区分 (区分・選択理由・

第二種使用等の根拠)

目的と実験室名 (拡散防止措置のレベル)

※右欄の組換

え生物を使用

する全ての

実験番号を

記載してくだ

さい。

※実験で使用する

組換え生物ごとに

記載してください。

(1)名称および実験分類

実験分類

(2)自然環境における分布

状況及び生息又は生育

が可能な環境

(3)繁殖又は増殖の様式

(4)病原性、有害物質の

生産性その他の特性

(1)核酸供与体の名称・

実験分類

(2)病原性、有害物質の

生産性その他の特性

(1)種類及び一般名称

(2)大きさ、構成及び

塩基配列情報又は

アクセッションナンバー

(3)機能及び毒性・

病原性等の有無

(1)名称

(2)構成

(3)伝達性及び宿主

特異性

(1)特性

（2）入手先の実験

計画書承認番号

(1)区分

(2)大臣確認申請に該当

しない旨の根拠

（区分選択理由）

(3)クロスコンタミネー

ションを防止する方法

(1)目的

(2)実験室承認番号・名

称・拡散防止措置レベル

実験の概要に対応する

番号を記入してください。

同じ組換え生物を使用する

場合は、該当するすべての

番号を入力ください。

組換え生物の特徴を示す名称

（容器やラベルに記載してい

る名称等）を入力ください。

識別可能な名称であれば審査

の可否には影響しません

宿主は 1 種に限ります。

※名称検索のマスタは

学名登録されています

のでご留意願います。

目的遺伝子の由来する生物

名を選択してください。

目的遺伝子が複数ある場

合、核酸供与体と供与核酸

が対応する表を別途添付く

ださい。

スクリーニング等により

網羅的に複数種を使用す

る場合は、別途一覧を作

成し添付する等でご対応

願います。

入力欄が不足する場合は、

別途一覧を添付ください。

ベクターの構成が明瞭な

図であれば、ベクターマッ

プの添付のみで詳細情報

の入力は省略可能です。

組換えウイルスの場

合は、自己増殖力、

及び感染力の有無を

必ず記載してくださ

い。

組換えウイルス・細菌等の微生

物を感染させた動植物（培養細

胞を含む）の特性を記載してく

ださい。

ウイルスでは、消失にかかる期

間等についても記載願います。

実験室の承認番号は末尾

が 3 ケタで登録されてお

ります。入力ボタンから

検索し、入力ください。

※マスタ登録されたベクター

を入力すると参照データが

自動表示され、情報を確認

できます。

その他、資料等の添付は、

画面左下の添付ボタンから

操作願います。

実験 1

実験 2-2

HSP90発現Adenovirus

Adenovirus

Homo sapiens クラス 1

哺乳動物に対する

病原性なし

HSP90（cDNA）

分子シャペロン

哺乳動物に対する

病原性なし

添付資料のベクター

マップ参照

異宿主への

伝達性なし

E1 領域を完全に欠損し

ているため、自己増殖

能はない。

感 染 細 胞 に お い て

HSP90 を一過的に発現

する。HSP90 の発現に

より病原性を付与する

ことはない。

HEK293 細胞で組換え

アデノウイルスを産生

する。組換えウイルス

は、複製して培養液上清

中に産生される。HSP90 ノックアウトマ

ウス及び HSC70-GFP Tg マウスに感染させた

場合は、感染細胞内で一過的に HSP90 を発現す

ると予想される。

核酸供与体はクラス 1で、

供与核酸は同定済みかつ

病原性がない。宿主がク

ラス 2であるため P2レベ

ルを選択する。なお、

組換えウイルスの自己増

殖能は欠損しているため

大臣確認実験には該当し

ない

HSP90 発現アデノ

ウイルスベクターの

産生と利用

21加組換実-005

○○共同実験室（P2） P2

哺乳動物細胞に感染

哺乳動物細胞内で増殖

咽頭炎・胃腸炎等を

引き起こす

2.7 kbp,

Ac. No. xxxxx

Adeno-X Viral DNA

2011○組換-001

クラス 2

21加組換実-005

動物感染実験室 202 P2・P2A

P2・P2A

異宿主への伝達性は

なし

学内の他研究分野から

譲り受ける組換え体は、

その作製・使用に係る

実験計画の承認番号を

入力してください。

※右欄の組換

え生物を使用

する全ての

実験番号を

記載してくだ

さい。

※実験で使用する

組換え生物ごとに

記載してください。

(1)名称および実験分類

実験分類

(2)自然環境における分布

状況及び生息又は生育が

可能な環境

(3)繁殖又は増殖の様式

(4)病原性、有害物質の生

産性その他の特性

(1)核酸供与体の名称・

実験分類

(2)病原性、有害物質の

生産性その他の特性

(1)種類及び一般名称

(2)大きさ、構成及び

塩基配列情報又は

アクセッションナンバー

(3)機能及び毒性・

病原性等の有無

(1)名称

(2)構成

(3)伝達性及び宿主

特異性

(1)特性

（2）入手先の実験

計画書承認番号

(1)区分

(2)大臣確認申請に該当

しない旨の根拠

（区分選択理由）

(3)クロスコンタミネー

ションを防止する方法

(1)目的

(2)実験室承認番号・名

称・拡散防止措置レベル

※右欄の組換

え生物を使用

する全ての

実験番号を

記載してくだ

さい。

※実験で使用する

組換え生物ごとに

記載してください。

(1)名称および実験分類

実験分類

(2)自然環境における分布

状況及び生息又は生育が

可能な環境

(3)繁殖又は増殖の様式

(4)病原性、有害物質の生

産性その他の特性

(1)核酸供与体の名称・

実験分類

(2)病原性、有害物質の

生産性その他の特性

(1)種類及び一般名称

(2)大きさ、構成及び

塩基配列情報又は

アクセッションナンバー

(3)機能及び毒性・

病原性等の有無

(1)名称

(2)構成

(3)伝達性及び宿主

特異性

(1)特性

（2）入手先の実験

計画書承認番号

(1)区分

(2)大臣確認申請に該当

しない旨の根拠

（区分選択理由）

(3)クロスコンタミネー

ションを防止する方法

(1)目的

(2)実験室承認番号・名

称・拡散防止措置レベル

添付ファイル

添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除

情報提供書 1.pdf □

手順）

① 資料を添付する項目をプルダウンから選択

② 参照ボタンから添付資料を検索

③ 添付ボタンで該当項目の下に添付完了

①

② ③

実験 2-1 HSC70-GFP 発現

マウス

クラス 1

Mus musculus

哺乳動物に対する

病原性なし

分子シャペロン、及び

緑色蛍光タンパク質

哺乳動物に対する

病原性なし

△△研究所より入手予定。

CAG プロモーターの制御

により HSC70-GFP 融合

タンパク質をほぼ全身の

臓器で発現する。宿主に

病原性を付与することは

ない。

（※情報提供書添付）

該当なし

宿主及び核酸供与体の

実験分類はクラス 1 で、

かつ、供与核酸は同定済

みで病原性に関与しな

いため。

HSC70-GFP 発現

Tg マウスの飼育

21 加組換実-007

動物飼育施設 P1A 室 P1A

クラス 1

認定宿主ベクター系の

宿主・マウス・ラット・

ウサギ・ニワトリ・ゼブラ

フィッシュ・線虫・ショウ

ジョウバエ・イネ・アラビ

ドプシス」は特性の記載を

省略できます（？参照）

※作成済みの組換え動物で

供与核酸がゲノムに組込み

済みの場合、ベクターの

特性は記載不要です。

Homo sapiens クラス 1

Aequorea

coerulescens クラス 1

P1A

実験 3 マウス

（HSC70-GFP移植）

クラス 1

Mus musculus

哺乳動物に対する

病原性なし

a) HSC70（cDNA）

b) GFP（cDNA）

△△研究所より入手した

HSC70-GFP Tg マウスの

肝組織の一部を移植する。

CAG プロモーターの制御

により HSC70-GFP 融合

タンパク質が肝臓で発現

すると考えられる。

宿主に病原性を付与する

ことはない。

（実験 2-1 参照）

該当なし

宿主及び核酸供与体の

実験分類はクラス 1 で、

かつ、供与核酸は同定済

みで病原性に関与しな

いため。

HSC-GFP 発現

Tg マウスの飼育

21 加組換実-007

動物飼育施設 P1A 室 P1A

クラス 1

Homo sapiens クラス 1

Aequorea coerulescens クラス 1

P1A

分子シャペロン、及び

緑色蛍光タンパク質

哺乳動物に対する

病原性なし

（重要）

入力が完了したら、必ず「配置ボタン」で内容を確定させてください。

一時保存ボタンは仮登録のため、申請時に入力エラーとして表示されます。

a) 1.9 kbp,

Ac. No. yyyyy

b) 0.8 kbp,

Ac. No. yyyyy

a) HSC70（cDNA）

b) GFP（cDNA）

a) 1.9 kbp,

Ac. No. yyyyy

b) 0.8 kbp,

Ac. No. yyyyy

（入力画面）

別紙 2＜作成あるいは譲受する遺伝子破壊動物（マウスおよびラット）の特性及び拡散防止措置一覧＞

ノックインマウス・ラットについては、遺伝子破壊と同時に発現を目的とする遺伝子を導入することになりますので、トランスジェニック動物と同様に別紙 1へ入力してください。

実験番号

遺伝子破壊動物

の名称

作成方法・入手先

宿主動物

ターゲット遺伝子

[名称・機能]

改変後の遺伝子座に

関する情報

[組込まれる供与核酸について]

遺伝子破壊動物の

特性

拡散防止措置の区分

[区分・選択理由・第二種

使用等の根拠]

目的と実験室名

（拡散防止措置のレベル）

別紙 1

のみ

□

作成方法

入手先

作成方法 入手先入手先の実

験計画書承認番号

特記事項

(1)使用する薬剤耐性遺伝子、

その他宿主染色体に組込まれる供与核

酸の名称、実験分類および特性

(2)改変後の遺伝子座の構造

(必要があれば図を添付する)

(1)区分

(2)大臣確認申請に該当

しない旨の根拠

（区分選択理由）

(3)クロスコンタミネーション

を防止する方法

(1)目的

(2)実験室承認番号・名称・

拡散防止措置レベル

添付ファイル

添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除 添付ファイル 削除

情報提供書 2.pdf □

HSP90 KOマウス

実験 2-1

マウス

※宿主動物のバック

グラウンド系統等、

特筆すべきことが

ありましたら記載

してください。

例）NOG マウス

ヌードマウス etc.

HSP90

分子シャペロンと

して機能する

△△研究所○○研究分野

から譲り受ける予定

（情報提供書添付）

Neo遺伝子（クラス 1）※

CMVプロモーター（クラス 2）※

※（）内は、核酸供与体の実験分類です

HSP90 の第１－3 エクソン部分

がCMV－Neoに置換されている

ストレス感受性の

形質をもつ

病原因子に対する

感受性が新たに付与

されることはない。

P1A

供与核酸は同定済みで、

病原性に関与しないため

HSC-GFP 発現細胞

移植マウスの飼育

21 加組換実-007

動物飼育施設 P1A 室 P1A

学内の他研究分野から

譲りうける組換え体は、

その作製・使用に係る

実験計画の承認番号を

入力してください。

（重要）

入力が完了したら、必ず「配置ボタン」で内容を確定させてください。

一時保存ボタンは仮登録のため、申請時に入力エラーとして表示されます。