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日赤からの情報提供

ー個別NAT導入効果ー

平成28年度赤十字血液シンポジウム

1

2

2

Ⅰ．最近の安全対策 １．HBc抗体の基準変更 ２．個別NAT導入 ３．ALT基準値の変更

3

HBc抗体判定基準の変更

3

4

輸血HBV感染の原因血液の変遷

（1年当たりのHBV受血者感染症例数） 4年

（2004.8～2008.7） 4年

（2008.8～2012.7）

5.63.2 2.7

1.1

1.50.7

2.7

3.0 4.7

0.9

0.30.5

0

2

4

6

8

10

12

50p-NAT 旧20p-NAT 20p-NAT

ウインドウ期（個別NAT陽性） ウインドウ期（個別NAT陰性）

感染既往（個別NAT陽性） 感染既往（個別NAT陰性）

１０．３ ８．０

ウインドウ期 （個別NAT陽性）

ウインドウ期 （個別NAT陽性）

８．６

4年7ヵ月

（2000.2～2004.7） （件数）

4

5 HBc抗体検査判定基準の変更

前提条件：HBｓ抗原陰性 HBc抗体

1≦C.O.I＜12 C.O.I≧12

HBs抗体 ≧200mIU/mL 適

（20pool-NAT）

適 （20pool-NAT）

＜200mIU/mL 適 （20pool-NAT）

出庫不可

HBc抗体：CLEIA法にてC.O.Iが1未満のみ適合

HBc抗体 C.O.I＜1 C.O.I≧1

HBs抗体 ≧200mIU/mL 適

（20pool-NAT）

適 （20pool-NAT）

＜200mIU/mL 適 （20pool-NAT）

出庫不可

2012.8より

5

6

NAT時期別の1年当たりHBV受血者感染症例数

（献血者感染状況別分類）

4年 （2004.8～2008.7）

4年 （2008.8～2012.7）

5.63.2 2.7 2.6

1.1

1.50.7

0

2.7

3.0 4.7

0

0.9

0.30.5

0

0

2

4

6

8

10

12

50p-NAT 旧20p-NAT 現行20p-NAT HBｃ基準変更後

ウインドウ期（個別NAT陽性） ウインドウ期（個別NAT陰性）

感染既往（個別NAT陽性） 感染既往（個別NAT陰性）

１０．３ ８．０ ８．６

6

2年 （2012.8～2014.7）

２．６

個別NATスクリーニングによる検出が期待

される

（件数） 4年7ヵ月

（2000.2～2004.7）

7

個別NAT導入

7

8

81 122

175

PANTER system （NOVARTIS)

8

9

9

MMLV 逆転写酵素およびT7 RNA ポリメラーゼを利用した転写反応によって目的核酸を約1010倍に増幅

反応温度は一定 ➜ サーマルサイクリング不要

DNA・RNAの両方の鋳型を増幅可能

増幅産物はRNA

ワンステップ反応 ➜ 反応が始まれば試薬の追加が不要

ワンチューブ反応 ➜ 抽出・増幅・検出を1本のチュー ブ内で実施

導入した個別NAT（TMA法）の特徴

10 ウイルス核酸の抽出の原理 磁気ビーズへの

固定化

TTTTT・・・

DNA

RNA

RNA

ウイルスの分解

DNA/RNAの遊離

RNA

AAAAA・・・

特異的配列

*キャプチャープローブ

キャプチャー プローブ*への結合

HBV用プローブ

HCV用プローブ

HIV用プローブ

IC用プローブ

IC（内部標準）

HBV

HCV

HIV

10

11

DNA/RNA増幅法(TMA)

一本鎖DNA

逆転写酵素 RNAポリメラーゼ

・ ・ ・

RNA分解

DNA合成

転写 （RNA合成）

100-1000コピー

鎖置換

逆転写

DNA合成

Pro-P1

P2 RNA分解

逆転写

Pro-P1

P2

Pro-primer primer

DNA合成

一本鎖RNA

HCV, HIV HBV

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12 個別NAT導入による感度向上

項目 検出感度（IU/ｍL）

感度比 20P-NAT （2014.7.31以前）

ID-NAT （2014.8.1以降）

HBV ６４ ４．３ １５

HCV ２４８ ３．０ ８３

HIV-１ ８３６ １８．０ ４６

12

20P-NAT ID-NAT＊

検査時間 240検体/８時間 275検体/８時間

検査実施体制 ４施設 全国８施設

＊①感染症検査と同時

進行可能

②検体送付なし

↓

終日検査可能

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北海道BBC

（札幌市）

関東甲信越BBC

埼玉製造所（東松山市）

全国の検査施設（個別NAT導入後）

血清学的検査、NAT ：8施設

東北BBC

（仙台市）

関東甲信越BBC

（江東区） 東海北陸BBC

（瀬戸市） 近畿BBC

（茨木市）

中四国BBC

（広島市）

九州BBC

（久留米市）

13

14 個別NATと20プールNATの検査の流れ

全検体 血清学（－）、ALT 61 未満の検体

スクリーニングNAT スクリーニングNAT

プーリング

陰性 （＋）

（－）

特定検査（※）

同定HBV

個別NAT 20プールNAT

※ プール検体から陽性検体を特定

同定HCV 同定HIV

（－）

同定HBV 同定HCV 同定HIV

陰性

（－）

（＋）

（＋）

14

15

HCV HCV Ab（＋） HCV Ab（－）

60 60 0

HIV HIV Ab（＋） HIV Ab（－）

10 10 0

◆ HCV, HIVについては、全例で抗体が検出された。

個別NATで同定された各Ｖｉｒｕｓの血清学的検査結果(中四国ブロック） 検査期間：2014.08～2016.03（20ケ月）, 全検体数：512,074

HBV 血清学的検査※1

（＋） 血清学的検査※2

（－）

157 153 4

※1：ＨＢｓ抗原、ＨＢｃ抗体及びＨＢｓ抗体のいずれかが陽性

※2：ＨＢｓ抗原、ＨＢｃ抗体及びＨＢｓ抗体が全て陰性

15

16

HCV HCV Ab（＋） HCV Ab（－）

518 517 1

HIV HIV Ab（＋） HIV Ab（－）

57 57 0

◆ HIVについては、全例で抗体が検出された。

個別NATで同定された各Ｖｉｒｕｓの血清学的検査結果(全国） 検査期間：2014.08～2015.10（15ケ月）、 全検体数：6,178,217

HBV 血清学的検査※1

（＋） 血清学的検査※2

（－）

1,293 1,256 37

※1：ＨＢｓ抗原、ＨＢｃ抗体及びＨＢｓ抗体のいずれかが陽性

※2：ＨＢｓ抗原、ＨＢｃ抗体及びＨＢｓ抗体が全て陰性

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NAT時期別の1年当たりHBV受血者感染症例数

（献血者感染状況別分類）

4年 （2004.8～ 2008.7）

4年 （2008.8～ 2012.7）

3.23.2 2.7 2.6

0

1.1

1.5

0.52.7

3.0 4.7

0.9

0.3

0.7

0

2

4

6

8

10

12

50p-NAT 旧20p-NAT 20p-NAT HBｃ変更後 個別NAT後

ウインドウ期（個別NAT陽性） ウインドウ期（個別NAT陰性）

感染既往（個別NAT陽性） 感染既往（個別NAT陰性）

８．０ ８．６

17

2年 （2012.8～ 2014.7）

２．６ ０ １０．３

5.63.2 2.7 2.6 (1例）

1.1

1.5

0.52.7

3.0 4.7

0.9

0.3

0.7

0

2

4

6

8

10

12

50p-NAT 旧20p-NAT 20p-NAT HBｃ変更後 個別NAT後

ウインドウ期（個別NAT陽性） ウインドウ期（個別NAT陰性）

感染既往（個別NAT陽性） 感染既往（個別NAT陰性）

1年5ヵ月 （2014.8～ 2015.12）

８．６ １０．３ ８．０ ２．６ ０．６

4年7ヵ月

（2000.2～ 2004.7）

18

18

14

12

7 8

11 11

9 8

4 1

1 1 1 2

1

0

5

10

15

20

25

2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015

HBV HCV HIV

7

4 1

個別NAT導入 HBc抗体判定基準変更

NAT・感染症検査システムの高感度化

2004.8 2012.8 2014.8 2008.8

0

20p NAT導入

年

件

輸血による感染が確認された症例の推移（全国集計：採血年）

19 個別NAT導入後の輸血後HBV感染症例

◆情報種別：献血後情報（遡及調査）

◆発 端 ：スクリーニングNATの陽転

献血者 （頻回献血有）

15/11/19 15/12/8 16/1/8

HBV-DNA Pos（Genotype：Ａe）

スクリーニング検査 ：適

70歳代・女性 血液腫瘍

15/11/20 15/12/11 16/2/12

HBV感染？(推定）

バラクルード投与中 ＡＬＴの上昇なし

急性肝炎発症との情報あり

HBV-DNA Pos

HLA適合 HLA適合

19

20

20

ALT基準値変更

21

21

・ALTはHCVの代替マーカーとして導入され、61 IU/L以上を

製品化から除外してきた。

・現在はHCV等については、個別NAT及びCLEIA法の高感度

検査法が導入されている。

・ALTでその他の輸血感染症を有効に予防するデータはない。

・ALT高値のほとんどは脂肪肝他に由来する。

・現在のALT基準により、年間12～15万人からの献血血液が

不適格とされている。

ALTによる製品除外基準を101 IU/Lとする

（平成28年4月1日検査分より）

ALTの製品除外基準値の変更

22

22

ALT検査基準変更による製品化可能増加数の試算

ALT値 不合格率

61～100（IU/L） 2.28％

101（IU/L）以上 0.51％

合計 2.79％

平成28年度採血計画数 445,308本

61IU/L ↑（平成27年度までの基準

による検査落ち本数） 12,427本 （2.79％で換算）

101IU/L ↑（平成28年度の基準

による検査落ち本数） 2,267本 （0.51％で換算）

製品化可能増加本数 10,127本

平成27年度 ALT検査不合格率

平成28年度 ALT検査基準値変更による製品化増加数の試算

23

23

【全国】

期間 検査数 60（IU/L）以下 61～100（IU/L） 101（IU/L）以上 製品化率

平成27年4月 396,065 388,134 6,361 1,570

98.00 % 98.00 % 1.61 % 0.40 %

平成28年4月 397,873 387,400

8,258 99,096 (1年）

2,215 99.45 %

97.37 % 2.08 % 0.55 %

【中四国】

期間 検査数 60（IU/L）以下 61～100（IU/L） 101（IU/L）以上 製品化率

平成27年 4～6月

113,339 110,568 2,253 518

97.55 % 97.55 % 1.99 % 0.46 %

平成28年 4～6月

111,792 108,510

2,595 10,380 (1年）

687 99.39 %

97.07 % 2.32 % 0.61 %

ALT製品除外基準変更後の製品化状況 (平成28年4月～）

24 まとめ １） HBc抗体検査基準の見直し

HBc抗体検査基準の見直しにより、感染晩期の血液による輸血感染はなくなった。故に、基準見直しの安全対策は効果が十分に認められた。

２） 個別NAT導入

平成26年8月より、スクリーニングNATを20プールから個 別NATへ変更した。その結果、現在まで輸血によるウイルス感染は１例のみであり、ウインドウ期の血液による感染防止も効果が認められている。

３） ALT検査の製品化基準値の変更

平成28年4月より、ALT検査の製品化基準値が61 IU/Lから101 IU/Lに変更された。この基準値変更により、平成28

年度では中四国ブロック管内で製品化される原料血液は約10,000本増加すると試算される。

24

25 結語

HBV、HCVおよびHIVの個別NAT検査の導入は、現在実施しうる最大限の安全対策と考えられる。

しかしながら、個別NATを実施しても、輸血用血液のリスクをゼロとすることはできない。

問診事項20のさらなる徹底等、「責任ある献血」の啓蒙を今後も継続していくことが望まれる。

25

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平成28年度赤十字血液シンポジウム

ＣＯＩ開示

筆頭発表者名： 大熊 重則

演題発表に関連し開示すべきＣＯＩ関係のある

企業などはありません。

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