efectos de la melatonina en la expresión génica de células de cáncer de mama eva del valle,...
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Efectos de la Melatonina en Efectos de la Melatonina en la Expresión Génica de la Expresión Génica de
Células de Cáncer de MamaCélulas de Cáncer de Mama
Eva del Valle, Pedro Zuazua-Villar, Eva del Valle, Pedro Zuazua-Villar, Pedro Casado, Sofía RamosPedro Casado, Sofía Ramos
UNIVERSIDAD DE OVIEDO
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular
MelatoninaMelatonina Hormona indólica Hormona indólica
naturalnatural Secreción circadianaSecreción circadiana Efectos fisiológicosEfectos fisiológicos
Aparato reproductorAparato reproductor Sincronización de ritmos Sincronización de ritmos
biológicosbiológicos Sistema inmuneSistema inmune Neutralización de Neutralización de
radicales libresradicales libres Efectos antitumoralesEfectos antitumorales
0
10
20
30
40
50
60
16 18 20 22 24 2 4 6 8 10
hora
pg/m
l de
mel
aton
ina
La Melatonina como Molécula La Melatonina como Molécula Antiestrogénica Antiestrogénica
Inhibe el crecimiento de células MCF-7 Inhibe el crecimiento de células MCF-7 (Cos y (Cos y Sánchez-Barceló, 1993)Sánchez-Barceló, 1993)
Bloquea el efecto mitogénico del estradiol Bloquea el efecto mitogénico del estradiol (Rato y (Rato y Cols., 1999)Cols., 1999)
Disminuye la unión del RE, estimulada por Disminuye la unión del RE, estimulada por estradiol, al ERE estradiol, al ERE (Rato y Cols., 1999)(Rato y Cols., 1999)
Inhibe específicamente al REInhibe específicamente al RE, a través de la , a través de la calmodulina calmodulina (del Río y Cols., 2004)(del Río y Cols., 2004)
Regulación por Calmodulina de los Regulación por Calmodulina de los Receptores de Estrógenos en el Receptores de Estrógenos en el Desarrollo del Cáncer de Mama Desarrollo del Cáncer de Mama
Determinar la expresión diferencial de genes Determinar la expresión diferencial de genes implicados en el desarrollo tumoral en células implicados en el desarrollo tumoral en células MCF-7MCF-7
Determinar la expresión diferencial de genes Determinar la expresión diferencial de genes implicados en el desarrollo tumoral en células implicados en el desarrollo tumoral en células con mutaciones en el sitio de unión a con mutaciones en el sitio de unión a calmodulinacalmodulina
MetodologíaMetodología
Efecto de la melatonina sobre genes de Efecto de la melatonina sobre genes de expresión temprana en células MCF-7: expresión temprana en células MCF-7: Tratamientos de 1 hora con melatonina 10Tratamientos de 1 hora con melatonina 10 -9-9M M
y vehículo hormonaly vehículo hormonal
GEArray Q Series Human Breast Cancer GEArray Q Series Human Breast Cancer and Estrogen Receptor Signalling Gene and Estrogen Receptor Signalling Gene ArrayArray
GEArray Q SeriesGEArray Q Series
Genes directamente asociados concáncer de mama
Genes asociados con la vía de señalizaciónde estrógenos
Genes asociados con el pronóstico delcáncer de mama
Genes asociados con respuestaa quimioterapia
GEArrayGEArray RNA totalRNA total
PrehibridaciónPrehibridación
Retrotranscripción, Retrotranscripción, amplificación y amplificación y marcaje conmarcaje con3232P dCTPP dCTP
Desnaturalización deDesnaturalización dela sondala sonda
HIBRIDACIÓNHIBRIDACIÓN
Análisis de los ResultadosAnálisis de los Resultados
Control Melatonina 10-9M
0
20
40
60
80
100
CM SG M
SG I SB
Scion Image
0
2
4
6
8
10
12
ERBB2 GSN HMGB1 HSP28 IL6ST KIT MKI67
Control
Melatonina
p < 0,5 p < 0,05
GENGEN NOMBRENOMBRE CARACTERÍSTICASCARACTERÍSTICAS
GSN Gelsolin (amyloidosis, Finnish Gelsolin (amyloidosis, Finnish type) type)
Regulación del crecimiento y Regulación del crecimiento y apoptosisapoptosis
Posible supresor tumoralPosible supresor tumoral
IL6ST Interleukin 6 signal transducer Interleukin 6 signal transducer (gp130,oncostatin M receptor)(gp130,oncostatin M receptor)
Funciones variadasFunciones variadas
Buen pronósticoBuen pronóstico
KIT v-kit Hardy-Zuckerman 4 v-kit Hardy-Zuckerman 4 feline sarcoma viral oncogene feline sarcoma viral oncogene homolog (C-kit)homolog (C-kit)
C-kit se expresa en C-kit se expresa en adenocarcinomas mamarios adenocarcinomas mamarios no invasivosno invasivos
SOBRE-EXPRESIÓN POR SOBRE-EXPRESIÓN POR MELATONINAMELATONINA
GENGEN NOMBRENOMBRE CARACTERÍSTICASCARACTERÍSTICAS
ERBB2ERBB2 v-erb-b2 erythroblastic leukemia v-erb-b2 erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 2, viral oncogene homolog 2, neuro/glioblastoma derived neuro/glioblastoma derived oncogene homolog (avian) oncogene homolog (avian)
Sobre-expresado en Sobre-expresado en varios tipos de varios tipos de tumores mamariostumores mamarios
Mal pronósticoMal pronóstico
HMGB1HMGB1 High-mobility group box 1High-mobility group box 1 AntiapoptóticoAntiapoptótico
HSP28 HSP28 Heat shock 27kDa protein 1Heat shock 27kDa protein 1 Inhibidor de la Inhibidor de la apoptosisapoptosis
MKI67MKI67 Antigen identified by monoclonal Antigen identified by monoclonal antibody Ki-67 antibody Ki-67
Marcador de Marcador de proliferaciónproliferación
REPRESIÓN POR MELATONINAREPRESIÓN POR MELATONINA
Estos resultados parecen indicar que el
tratamiento con melatonina en concentración
10-9M durante 1 hora
disminuye la expresión de algunos genes
relacionados con invasividad y aumenta la
expresión de otros genes asociados con
buen pronóstico en cáncer de mama
Sofía Ramos Pedro “The Nightmare Master” Casado
Pedro Zuazua-Villar Eva del Valle
Financiado por: ISCIII PI 04/2664