erna hayati, dr., mm., m.si. · 2016. 10. 28. · •aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi...
TRANSCRIPT
![Page 1: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/1.jpg)
![Page 2: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/2.jpg)
Erna Hayati, dr., MM., M.Si. Fira Amaris, dr., M.Si.
Hertina Silaban, dr., M.Si. Marrisa, dr., M.Si.
Nizmawardini Yaman, dr., M.Kes., M.Si Ratna Asih S.R., dr., M.Si.
Zizi Tamara, dr., M.Si. Budi Utami, S.Si., M.Si.
Isabella, dr., M.Si.
![Page 3: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/3.jpg)
PENDAHULUAN
![Page 4: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/4.jpg)
• Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi
• Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)
![Page 5: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/5.jpg)
REKAYASA GENETIKA
• Adalah proses pembentukan rekombinan baru dari material genetik dengan cara penyisipan suatu molekul asam nukleat asing (yang dihasilkan di luar sel) ke dalam suatu vektor, sehingga, memungkinkan penggabungan dan kelanjutan berkembang/ diperbanyak di dalam sel inang yang baru.
![Page 6: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/6.jpg)
KLON
adalah organisme identik yang terbentuk secara genetik dan membawa seluruh potongan DNA yang telah disisipkan, dan memperbanyak molekul yang baru.
![Page 7: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/7.jpg)
TAHAPAN
Isolasi DNA
Pemotongan DNA
Penyambungan DNA
Transformasi
Introduksi ke sel inang
![Page 8: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/8.jpg)
![Page 9: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/9.jpg)
Isolasi DNA
Lisozim/EDTA/triton-x sentrifugasi
Purifikasi DNA
Fenol-kloroform/ Sentrigugasi gradien Etidium
bromida sedot
![Page 10: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/10.jpg)
• Sebagai mekanisme pertahanan terhadap infeksi virus DNA
• Memotong didalam utasan DNA (endonuklease)
• Setiap enzim mendigesti pada sekuens spesifik (restriksi)
• Mengenali 4-6 pasang basa palindromik
![Page 11: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/11.jpg)
EcoRI
![Page 12: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/12.jpg)
Sisi pemotongan
PstI
Providancia stuartii
Sisi 3’
EcoRI
Escherichia coli
Sisi 5’
5’-GAATTC-3’
3’-CTTAAG-5’
5’-CTGCAG-3’
3’-GACGTC-5’
![Page 13: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/13.jpg)
![Page 14: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/14.jpg)
Transformasi Transfeksi
Mikroinjeksi Mikroproyektil
![Page 15: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/15.jpg)
Electroporation
Electrical shock yang menyebabkan membran menjadi permeabel terhadap DNA
Calcium Chloride/Heat Shock
Peningkatan suhu dan CaCl2 heat shock pada 37oC – 42oC, dalam larutan CaCl2
E.coli kompeten
![Page 16: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/16.jpg)
Elektroforasi
![Page 17: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/17.jpg)
VEKTOR KLONING
1. Dapat bereplikasi sendiri (punya ori) 2. Untai ganda 3. Memiliki minimal 2 marker
![Page 18: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/18.jpg)
Macam-macam vektor
• Plasmid
• Bakteriofag
• Kosmid
• Fasmid
• YACs
• Yaps
• Ti Agrobacterium tumafacien
• Baculovirus
![Page 19: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/19.jpg)
• Komposisi medium
• Kadar CO2
• Keasaman medium
• Suhu inkubasi
![Page 20: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/20.jpg)
![Page 21: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/21.jpg)
SINTESIS VITAMIN C
![Page 22: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/22.jpg)
D-glukosa 2,5-DKG Acetobacter
Gluconobacter
Erwinia
Corynebacterium Brevibacterium
Arthrobacter 2,5-DKG
Gen penyandi enzim 2,5-DKG reduktase dari Corynebacterium diklon kedalam Erwinia
2,5-DKG reduktase
Beberapa lintasan metabolisme
1 lintasan metabolisme
2-KLG
![Page 23: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/23.jpg)
![Page 24: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/24.jpg)
MENINGKATKAN PRODUKSI ANTIBIOTIK
• Fermentasi oleh Streptomyces spp AB • Lama kelamaan O2 << produksi AB <<
• Vitreoscilla spp (bakteri anaerob yang dapat tumbuh
pada keadaan miskin O2)
• Bakteri ini dapat memproduksi suatu protein hem homodimerik yang berfungsi mirip dengan hemoglobin eukariot, yaitu dapat mengikat O2 dari medium kemudian menyalurkannya ke dalam sel.
• Gen yang menyandikan protein heme tersebut di klon di Streptomyces
![Page 25: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/25.jpg)
![Page 26: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/26.jpg)
Isolasi cDNA
Rekayasa
Optimalisasi
Strategi untuk mendisain protein
dengan cara mengatur kombinasi, mutagenesis terarah
Sistem ekspresi berbeda-beda
![Page 27: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/27.jpg)
Optimalisasi
Kriteria:
• Memproduksi protein heterolog yang mirip dengan protein yang diinginkan
• Mamppu tumbuh dengan densitas sel yang tinggi
• Mudah dipurifikasi
• Produksi paling baik (human-interleukin-3 baik pada Bacillus licheniformis), jika di E. coli banyak kesalahan
![Page 28: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/28.jpg)
INSULIN REKOMBINAN Rantai A
Rantai B
Ikatan disulfida
![Page 29: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/29.jpg)
• Memasukkan gen penyandi insulin manusia kedalam bakteri E. coli
• Kultivasi protein insulin
• Isolasi dan purifikasi protein rekombinan tsb
![Page 30: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/30.jpg)
PROTEIN REKOMBIN
• Hormon pemacu folikel rekombinan (CHO)
• Aktivator plasminogen tipt jaringan (CHO)
• Faktor VIII rekombinan (CHO)
• Interleukin rekombinan (E. coli)
• Interferon rekombinan (E. coli)
• Faktor pertumbuhan hematopoietik rekombinan (E. coli, Saccharomyces cerevisiae, CHO, BHK)
![Page 31: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/31.jpg)
VAKSIN
GENERASI I
Mgd organisme hidup yang dilemahkan bahaya
GENERASI II
Mgd mikroorganisme yang telah dimatikan dgn formalin/fenol
GENERASI III
Vaksin rekombinan relatif lebih aman
![Page 32: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/32.jpg)
VAKSIN REKOMBINAN
![Page 33: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/33.jpg)
SISTEM PENGHANTARAN
![Page 34: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/34.jpg)
LIPOSOM LIPOPROTEIN
![Page 35: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/35.jpg)
![Page 36: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/36.jpg)
Prinsip kerja liposom
![Page 37: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/37.jpg)
![Page 38: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/38.jpg)
ANTIBODI MONOKLONAL
![Page 39: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/39.jpg)
Tipe-tipe antibodi monoklonal
![Page 40: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/40.jpg)
Complement dependent cytotoxicity (CDC)
Antibody dependent cellular cytotoxicity (ADCC)
![Page 41: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/41.jpg)
Inhibitor GFR
Antibodi directed enzyme prodrug therapy (ADEPT)
![Page 42: Erna Hayati, dr., MM., M.Si. · 2016. 10. 28. · •Aplikasi bioteknologi dalam dunia farmasi •Untuk memproduksi produk-produk yang penting dan bermanfaat (obat, enzim, protein)](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022060817/60969f37eb278c546229a42e/html5/thumbnails/42.jpg)
Transtuzumab®
Mengikat HER2-RTK
Cetuximab®
Mengikat EGFR
Bevacizumab®
Mengikat VEGF