iPS cellsinduced Pluripotent Stem cells

ES細胞において特異的に発現する24の多能性誘導因子候補遺伝子

induced Pluripotent Stem cells

Oct3/4 Sox2

候補因子からの選出 Yamanaka S et al, Cell, 2006マウス線維芽細胞

Klf4 (c-Myc)再プログラミング

iPS細胞

BIO realtime PCRRT-PCR

0 2 5 6 12 14 15(day)iPS cells

EB formationAdhesion culture

immunostain

Suspension culture(500cells/well)

Culture medium：BIO (GSK-3 Inhibitor IX)

1

重症心不全

体細胞採取

１.iPS細胞樹立

iPS細胞体細胞採取

２．心筋分化誘導

iPS由来心筋細胞

iPS由来心筋細胞シート ３．iPS細胞シート化

2

温度応答性培養皿による細胞回収法は蛋白発現や基底膜を温存する蛋白発現や基底膜を温存する

基底膜インテグリン

インテグリン 基底膜基底膜

37°C32°C 基底膜

Expression of Fibronectin3

急性期梗塞マウスへのiPS細胞シート移植

FS LVDd

40

50

6

8

20

304

6

0

10

2 4 6 2 4 6 2 4 6

0

2

2w 4w 6w 2w 4w 6w 2w 4w 6w 2w 4w 6w 2w 4w 6w 2w 4w 6w

control MI Sheet Tx control MI Sheet Tx

シート移植により心筋梗塞による心収縮力低下の抑制、左室拡大の抑制が期待できる可能性がある制、左室拡大の抑制が期待できる可能性がある

4

来 筋細胞 筋芽細胞

梗塞モデルマウスへのiPS細胞シート移植心筋梗塞 (Control) iPS由来心筋細胞シート 筋芽細胞シート

5

梗塞モデルマウスへのiPS細胞シート移植

iPSiPS細胞シート細胞シート

梗塞部位梗塞部位

6

ヒトiPS細胞の心筋への分化誘導

(day)

BIO

hiPS細胞0 1 2 3 4 5 6 30

細胞

(浮遊培養)EB形成 (接着培養 or 浮遊培養) mRNA回収

100 m 100 m

hiPS-DF4-1hiPS-DF4-1

diff (KSR)

diff (FBS)

再現性が高く、安定に大量培養可能な分化誘導法の確立を目指して検討中7

iPS細胞の臨床利用する際の問題点とその解決策

養中・培養中のcontamination・培養サンプルの取り違え

・造腫瘍性（悪性腫瘍、奇形腫）・外部遺伝子の導入→未分化なiPS細胞そのものではなく、ある程度分化させた中間段階の

細胞株、もしくは最終製品で造腫瘍性や遺伝的特徴を十分検討するのが現実的ではないか。現実的ではないか。

・臨床研究の対象疾患未知 クが存在する とを勘案 重篤 致 性 高 疾患→未知のリスクが存在することを勘案し、重篤で致死性の高い疾患、

QOLを著しく損なう疾患など対象を限定し、かつ、あらゆるリスク・ベネ

フィットに関する情報を開示した上で、被験者となるべき者の自己決定権に委ねる視点も必要ではないか。

8