サンプル前処理 - waters corporation...sep-pak用各種キット.....59 サンプル前処理...

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サンプル前処理 サンプル前処理の必要性............................................................................................8 サンプル前処理法セレクションガイド. ....................................................................9 Oasis 固相抽出製品. ................................................................................................10 Oasis.HLB. ............................................................................................................12 Oasis.PRiME.HLB................................................................................................14 Oasis.PRiME.MCX...............................................................................................18 Oasis.2x4 メソッド. ..............................................................................................21 . Oasis 製品価格表......................................................................................26 Waters.96 ウェルプレート用加圧送液プロセッサー......................................29 Ostro サンプル前処理製品. ....................................................................................31 PoraPak.Rxn カートリッジ. .................................................................................32 Sep-Pak 固相抽出製品...........................................................................................38 . Sep-Pak セレクションガイド.................................................................40 Sep-Pak.96.ウェル.固相抽出プレート..............................................................42 カートリッジ型 Sep-Pak.......................................................................................43 オリジナル型 Sep-Pak...........................................................................................43 シリンジ型 Sep-Pak...............................................................................................44 ポリマー充塡剤 Sep-Pak.PS-2. ...........................................................................46 . . 農薬測定用~ Sep-Pak.PS-2. ......................................................46 . . 変異原性試験用~ Sep-Pak.CSP-800. .....................................46 . . 爆発物測定用~ Porapak.RDX ......................................................46 . . PFAS 品質証明付き.Oasis.WAX...............................................46 特殊 Sep-Pak...........................................................................................................47 . . Sep-Pak.AC-2. ...............................................................................47 . . Sep-Pak.Dry. ..................................................................................47 大気用 Sep-Pak.......................................................................................................48 . アルデヒド類測定用~悪臭防止法・大気汚染防止法・EPA 準拠~ . . Sep-Pak.DNPH.............................................................................48 . . Sep-Pak.XPoSure アルデヒドサンプラー...............................48 . . Sep-Pak オゾンスクラバー..........................................................48 . 中揮発性物質測定用 ~農薬用~ . . Sep-Pak.PS.Air. ............................................................................49 固相抽出ビギナーズガイド.....................................................................................49 ポジティブリスト前処理ミニカラムには. 信頼と実績の Waters.Sep-Pak.&.Oasis .........................................................50 グラファイトカーボン /NH2 積層ミニカラムも. 信頼と実績の Waters.Sep-Pak...........................................................................51 Sep-Pak.PSA 固相抽出ミニカラム. ....................................................................52 DisQuE.サンプル前処理キット. ............................................................................54 減圧型多検体用マニホールド.................................................................................57 . . エキストラクションマニホールド................................................57 . . エキストラクションマニホールド用バケット. ............................58 旧バキュームマニホールド スペアパーツ・アクセサリー. ...............................58 Sep-Pak 用各種キット...........................................................................................59

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Page 1: サンプル前処理 - Waters Corporation...Sep-Pak用各種キット.....59 サンプル前処理 8 サンプル前処理 サンプル前処理の必要性 過去20年間における分析機器とラボインフォマティクスシステ

サンプル前処理

サンプル前処理の必要性.............................................................................................8サンプル前処理法セレクションガイド.....................................................................9Oasis 固相抽出製品.................................................................................................10Oasis.HLB. .............................................................................................................12Oasis.PRiME.HLB.................................................................................................14Oasis.PRiME.MCX................................................................................................18Oasis.2x4メソッド...............................................................................................21. Oasis 製品価格表.......................................................................................26Waters.96ウェルプレート用加圧送液プロセッサー.......................................29Ostro サンプル前処理製品.....................................................................................31PoraPak.Rxnカートリッジ..................................................................................32Sep-Pak 固相抽出製品............................................................................................38. Sep-Pak セレクションガイド..................................................................40Sep-Pak.96.ウェル.固相抽出プレート...............................................................42カートリッジ型Sep-Pak........................................................................................43オリジナル型Sep-Pak............................................................................................43シリンジ型Sep-Pak................................................................................................44ポリマー充塡剤Sep-Pak.PS-2............................................................................46. . 農薬測定用~Sep-Pak.PS-2.......................................................46. . 変異原性試験用~Sep-Pak.CSP-800......................................46. . 爆発物測定用~Porapak.RDX.......................................................46. . PFAS品質証明付き.Oasis.WAX................................................46特殊Sep-Pak............................................................................................................47. . Sep-Pak.AC-2................................................................................47. . Sep-Pak.Dry...................................................................................47大気用Sep-Pak........................................................................................................48. アルデヒド類測定用~悪臭防止法・大気汚染防止法・EPA準拠~. . Sep-Pak.DNPH.............................................................................48. . Sep-Pak.XPoSure アルデヒドサンプラー...............................48. . Sep-Pak オゾンスクラバー...........................................................48. 中揮発性物質測定用 ~農薬用~. . Sep-Pak.PS.Air.............................................................................49固相抽出ビギナーズガイド......................................................................................49ポジティブリスト前処理ミニカラムには.信頼と実績のWaters.Sep-Pak.&.Oasis..........................................................50グラファイトカーボン /NH2積層ミニカラムも.信頼と実績のWaters.Sep-Pak............................................................................51Sep-Pak.PSA固相抽出ミニカラム.....................................................................52DisQuE.サンプル前処理キット.............................................................................54減圧型多検体用マニホールド..................................................................................57. . エキストラクションマニホールド.................................................57. . エキストラクションマニホールド用バケット.............................58旧バキュームマニホールド スペアパーツ・アクセサリー................................58Sep-Pak 用各種キット............................................................................................59

Page 2: サンプル前処理 - Waters Corporation...Sep-Pak用各種キット.....59 サンプル前処理 8 サンプル前処理 サンプル前処理の必要性 過去20年間における分析機器とラボインフォマティクスシステ

サンプル前処理

www.waters.com8 サンプル前処理

サンプル前処理の必要性

 過去 20 年間における分析機器とラボインフォマティクスシステムの劇的な変化は分析者の主たる仕事を分析からサンプル前処理とデータ解析にシフトさせました。 高感度化、選択性、真度、精度と処理されるべきサンプル数増加への厳しい要求に対応した分析手法とデータ取り込みの高度化は従来のサンプル前処理の改善を追い越してしまいました。 ある試算によると典型的な分析ラボにおいて 75-80% の労力とコストが分析装置へ注入されるサンプルの前処理に費やされています。 これからの分析科学の進歩のためにはサンプル前処理プロトコールを簡素化するようにデザインされた製品の必要性は明白です。

サンプル前処理のゴール HPLC、GC、質量分析、RIA など多くの分析手法のための優れた サンプル前処理法は次の3つの要件を満たしています。

■ サンプル前処理溶液が分析手法に適した溶液として得られること

■ 分析を妨害するマトリックス成分の影響がないこと

■ 検出または定量に適した濃度が得られること

■ 低コスト ■ エマルジョン生成の問題無し

■ 少ない溶媒消費量 ■ サンプルハンドリングの手間を削減

■ 高回収率 ■ フィールドサンプリング可能

■ 少ない試薬消費量 ■ サンプルの分解を削減

■ サンプル分注操作の最小化 ■ エバポレーション頻度削減

■ 使用器具削減 ■ ガラス器具破損機会の危険を回避

■ 迅速操作 ■ ガラス器具洗浄の手間を省略

■ 少ない作業工程 ■ 少ないクロスコンタミネーション

■ 高い安全性

■ 毒劇物への暴露機会削減

■ 高精度

固相抽出 (SPE) 法の利点他のサンプル前処理法と比べ固相抽出法には次のような利点があります。

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サンプル前処理

www.waters.com 9サンプル前処理

サンプル前処理

サンプル溶液の種類

中極性有機溶媒 非極性有機溶媒水系

No Yes

Sirocco Oasis(p.10)Ostro(p.30)

例)水溶液、バッファー溶液、生体試料 例)メタノール、アセトニトリル溶液 例)ヘキサン、酢酸エチル溶液

タンパク質除去以外のクリーンアップが必要ですか? 水で希釈 非極性溶媒で希釈

順相系Sep-Pak(p.40)

1. サンプル溶液別セレクションガイド

2. アプリケーション別セレクションガイド

【製薬】

生体試料中医薬品 → Oasis 2 x 4 メソッド(p.21)

【環境】

水道上水、原水、環境水、飲料水中

  フェノール類 → Oasis HLB(p.12)

  非イオン界面活性剤 → Oasis HLB(p.12)

  農薬類 → Sep-Pak PS-2(p.46) Oasis HLB(p.12)

  1,4- ジオキサン → Sep-Pak AC-2(p.47)

  カビ臭物質 → Sep-Pak PS-2(p.46) Sep-Pak tC18(p.36)

PFOS/PFOA、PFCs → Oasis HLB(p.12) Oasis WAX(p.46)

気中農薬類 → Sep-Pak PS-Air(p.49)

気中アルデヒド・ケトン類 → Sep-Pak XPoSure アルデヒドサンプラー

Sep-Pak DNPH Silica(p.48)

オゾン除去 → Sep-Pak オゾンスクラバー(p.48)

【食品】

食品中ポジティブリスト農薬 → ポジティブリスト試験法前処理ミニカラム(p.50)

食品中クロラムフェニコール → Oasis HLB(p.50)

農作物中ストレプトマイシン、ジヒドロストレプトマイシン → Oasis WCX(p.21)

【バイオセパレーション】

オリゴヌクレオチド (<35mer) の脱塩 → Oasis HLB(p.12)

タンパク質・ペプチド ( 分子量 >10000) → Sep-Pak Accell(p.38)

ぺプチド ( 分子量 <10000) → Oasis HLB(p.12) → PST Therapeutic Peptide メソッド開発キット(p.250)

糖タンパク質、糖ペプチド → GlycoWorks Rapi Fluor-MS N-Glycanキット(p.286)

【その他】

水中爆発物(ニトロ化合物)測定 → Sep-Pak PoraPak RDX(p.46)

脱水 → Sep-Pak Dry(p.47)

サンプル前処理法セレクションガイド

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サンプル前処理

www.waters.com10 サンプル前処理

革新的な固相テクノロジーとハードウェアデザインを組み合わせた Oasis 製品は、

固相抽出(SPE)のファーストチョイスとして選択されています。

Oasis 製品は世界中の分析者の信頼を得ており、シンプルで迅速なサンプルクリーンアップから

最も困難で高度な選択的抽出が要求されるサンプル前処理まで、

サンプル前処理におけるさまざまなニーズを満たしています。

研究者に信頼されている Oasis 製品は、その優れた性能により他に類を見ない純度、

再現性、そしてクオリティの高いサンプル前処理メソッドを実現します。

* U.S. patents 5,882,521 (1996), 5,976,376 (1998), 6,106,721 (1999), 6,254,780 (2001), 6,322,695 (2001), 6,468,422 (2002), 6,726,842 (2004), 6,773,583 (2004), 6,723,236 (2004)

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サンプル前処理

www.waters.com 11サンプル前処理

サンプル前処理

■ 最高レベルのサンプル純度を実現する迅速でシンプルなメソッド

■ 低分子化合物やペプチド医薬品の前処理に適応する最高の感度

■ LC-MS/MS 分析のマトリックス効果を削減

■ 優れた選択性

■ 最高の回収率

■ 比類のない高品質と再現性

■ 幅広い固相ラインアップ

■ 広範なボディーフォーマット

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サンプル前処理

www.waters.com12 サンプル前処理

5 ステッププロトコールから 3 ステッププロトコールへの変更により前処理時間の短縮と溶媒の節約を実現

Oasis HLB

固相抽出をシンプルに ウォーターズは 1996 年に Oasis HLB を発表し、分析者が固相抽出(SPE)を行う際の方法、そして SPE に対する期待を一変させました。Oasis HLB は pH 0 ~ 14 で安定な水湿潤性ポリマーをベースにしており、固相抽出メソッド開発に新しい可能性を広げました。世界中の分析者の信頼を得ている、逆相 SPE のゴールドスタンダードです。

 従来の固相抽出メソッドでは、サンプルロード前の固相の準備でコンディショニングと平衡化のステップが必要でした。コンディショニングは、逆相固相充塡剤の細孔に液体を浸透させるために必要なステップで、これにより水系サンプルが浸透し、固相が保持能を発揮できるようになります。さらにコンディショニング後に、水系サンプルをロードするための準備として水系溶媒で平衡化する必要がありました。これに対し Oasis HLB は水湿潤性固相であるため、水系サンプルを固相に直接ロードした場合でも、分析種が固相と相互作用し保持されます。つまり、従来の固相抽出プロトコールで必要とされていたコンディショニングと平衡化のステップが不要となり、処理ステップ数が 5 ステップから 3 ステップに減ります。その結果、平均溶媒消費量が最大 70% 減少し、平均サンプル前処理時間が 40% 短縮されます。

親水性・親油性基を併せ持つポリマー

親水性基極性化合物へ保持能発揮

親油性基逆相保持能発揮

標準(5 ステップ)プロトコール シンプル(3 ステップ)プロトコール

メタノール 200 µL

水 200 µL

ロード

平衡化

洗 浄

溶 離

希釈した添加血漿 200 µL(血漿 100 µL + 4% 濃リン酸水溶液 100 µL)

5% メタノール水 200 µL

25 µL メタノール × 2 回25 µL メタノール × 2 回

5% メタノール水 200 µL

希釈した添加血漿 200 µL(血漿 100 µL + 4% 濃リン酸水溶液 100 µL)

コンディショニング

従来の 5 ステップ SPE プロトコールと、Oasis HLB µElution プレートを使用する新しい 3 ステップ SPE プロトコールとの比較。(一般的なロード範囲は希釈前血漿として 10 ~ 375 µL)

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サンプル前処理

www.waters.com 13サンプル前処理

サンプル前処理

回収率を維持して固相抽出をシンプルに

 SPE プロトコールのシンプル化と時間短縮は、親水性・親油性基を併せ持つユニークな水湿潤性 Oasis 固相により実現されます。シリカベースの固相や Oasis に類似した他のポリマー固相は Oasis HLB ほどの水湿潤性を有しておらず、コンディショニングと平衡化のステップを行わなければ性能が低下します。下の図は、Oasis HLB のような高い水湿潤性を有する固相により実現するシンプルな 3 ステッププロトコールの導入でもたらされる結果の違いを示しています。Oasis HLB は、コンディショニングと平衡化のステップを行わない場合も幅広い化合物に対する効果的な保持能を発揮します。他のポリマー固相やシリカベース固相の使用時はこれらのステップが必要不可欠です。

HLB μElution プレート A社ポリマーベースμプレート シリカベースtC18 μElution プレート

100908070605040302010

0

Azidoth

ymidi

ne (A

ZT)

Propran

olol

7-Hyd

roxyc

oumari

n

Phena

cetin

Protrip

tyline

Amitripty

line

Betameth

ason

e

Alpraz

olam

Naprox

en

Oasis HLB を使用する固相抽出プロトコールではコンディショニングと平衡化を行わない場合も、さまざまな化合物の回収率が維持されます。コンディショニングと平衡化のステップを行わないこのような条件下でシリカベース固相を使用した場合の回収率は、すべての分析種で 10% 未満です。A 社のポリマーベース固相を使用した場合の回収率は、7 種の化合物で 10% 未満、残り 2 種の化合物で 20% 未満および 50% 未満でした。

詳細な情報は、以下のアプリケーションノートでご覧いただけます:

アプリケーションノート 文献コード

A Simplified, Mixed-Mode Sample Preparation Strategy for Urinary Forensic Toxicology Screening by UPLC-MS/MS (UPLC-MS/MS を用いた尿中薬毒物の法医学スクリーニングのためのSimplifiedミックスモードサンプル前処理法) 720005290EN

A Simplified, Solid-Phase Extraction(SPE)Protocol for Bioanalysis Using Oasis HLB(Oasis HLB を用いたバイオアナリシスのためのSimplified固相抽出(SPE)プロトコール) 720005140EN

waters.com から文献コードで検索することができます

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サンプル前処理

www.waters.com14 サンプル前処理

Oasis PRiME HLB は、ルーチン分析に新たな性能基準を打ち立てる今までに類を見ないサンプル前処理製品です。ユニークな Oasis PRiME HLB 固相(特許出願中)では、よりクリーンなサンプルを、より短時間で、より簡単に得ることができます。特に MS 検

出を行う際、サンプル前処理として使いやすく強力なツールである Oasis PriME HLB のメリットが重要となります。

たとえば、マトリックス効果の低減、クロマトグラフィーのシンプル化、そしてサンプル濃縮効率の向上な

どのメリットです。一方、分析者は実現できる最大スピードでよりクリーンなサンプル溶離液を

得ることができ、さらにシンプルさを併せ持つサンプル前処理メソッドを求めています。

Oasis HLB テクノロジーに基づく Oasis PRiME HLB は、これらのメリットに

焦点をあて、これらのニーズを満たすために開発されました:

■ より簡単に

■ より速く

■ よりクリーンに

Oasis PRiME HLB

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サンプル前処理

www.waters.com 15サンプル前処理

サンプル前処理

より簡単に

簡単で効率的なプロトコール

 Oasis PRiME HLB の開発時には、Oasis HLB で実現した強力なメリットと同等のメリットを得ることを目指しました。Oasis PRiME HLB ポリマーは、非常に高い水湿潤性を有し、シリカベースの固相や他のポリマー固相で必要とされるコンディショニングと平衡化のステップが不要になりました。水湿潤性がそれほど高くない固相を使用する場合、この 2 つの作業を行わなければ、サンプルロードステップで目的の分析種を効果的に保持することができず回収率が低下します。この 2 つのステップが不要になったことで、貴重なサンプル処理時間と、溶媒の購入および廃棄にかかる高いコストを節約することができます。

 Oasis PRiME HLB では、お客様の分析ニーズに合わせてサンプル前処理プロトコールを選択いただけます。固相デザインとプロトコールがシンプルになったことにより、固相抽出の専門知識を必要とせず、ラボのワークフローに簡単に組み入れることができるようになりました。

3 ステッププロトコールでは、塩、リン脂質、およびタンパク質などのマトリックスによる妨害の大部分を排除できます。この方法でサンプル濃縮も可能です。ルーチンのバイオアナリシス用サンプルクリーンアップやその他のあらゆる逆相固相抽出アプリケーションに理想的なソリューションです。

サンプル溶液に有機溶媒が高濃度に含まれている場合や脱塩が不要な場合には、2 ステッププロトコールを用いてマトリックスによる妨害を迅速に排除できます。このプロトコールは、食肉や魚に残留する複数の動物用医薬品のスクリーニングに最適です。

3 ステッププロトコール(キャッチ & リリース SPE)

2 ステッププロトコール(パススルー SPE)

サンプルロード

洗浄 : 5% メタノール

溶離 : アセトニトリル/メタノール (90/10)

サンプルロード分析種は保持されずに素通り

素通り+洗い込み画分を回収

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サンプル前処理

www.waters.com16 サンプル前処理

より速く

目詰まりが少なく、より高流速に対応

 Oasis PRiME HLB は、SPE 処理のスピードとラボのサンプル処理ワークフローのスピードの両方を高めることを目的としてデザインされました。コンディショニングと平衡化のステップが不要になるだけでなく、フリットの最適化と固相の新しいデザインにより、粘度の高いサンプルでもカートリッジや 96 ウェルプレート内をスムーズに流れます。血漿、尿、乳などの一般的なマトリックスにおいて Oasis PRiME HLB は他の SPE 製品と比べより速い送液を可能にします。同時に他の SPE 製品よりも低い吸引圧や加圧でロード、洗浄、および溶離ステップに最適な流速を実現します。

他のサンプル前処理法よりも速い処理スピード

 コンディショニングと平衡化のステップが不要になった Oasis PRiME HLB では、固液抽出(SSLE)などの他のサンプル前処理法と比べてより迅速な処理が可能です。シンプルになったステップの少ないプロセスで、再現性の高いサンプルクリーンアップが実現します。

サンプルマトリックス ボディーフォーマット Oasis PRiME HLB による高速化

1:1 希釈血漿 µElution プレート 2~3倍高速

1:1 希釈血漿 1 cc/30 mg カートリッジ 4倍高速

1:1 希釈尿 30 mg プレート 6倍高速

1:1 希釈尿 10 mg プレート 2倍高速

1:1 希釈乳 3 cc/60 mg カートリッジ 1~2倍高速

1:1 希釈乳 6 cc/200 mgカートリッジ 2~3倍高速

Oasis PRiME HLB におけるサンプル処理スピードの高速化

他の逆相 SPE 固相との流速比較。4 inch Hg でロード(n=4)。

 Oasis PRiME HLB は効率的なサンプル前処理により、前処理時間と煩雑さを削減し、SSLE と比べて少ないステップで短時間にサンプルを処理することができます。

SSLE1.サンプルロード(3 分)2.静置(5 ~ 10 分)3.抽出溶媒の添加(2 分)4.静置(5 ~ 10 分)5.抽出(1 分)6.エバポレート(5 分)7.再溶解(2 分)

Oasis PRiME HLB1.サンプルロード(4 分)2.洗浄:5% メタノール(3.5 分)3.溶離:アセトニトリル / メタノール(90/10)(2 分)

Oasis PRiME HLB では SSLE と比べてサンプル前処理時間の短縮とステップの削減を実現

分28–33

9.5分

トータル処理時間 :

トータル処理時間 :

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サンプル前処理

www.waters.com 17サンプル前処理

サンプル前処理

Oasis PRiME HLB 他社 SX 他社 SO タンパク沈殿法 1: 3血漿: アセトニトリル

0

7000000

6000000

5000000

4000000

3000000

2000000

1000000

%

0

1: MRM of 12 Channels ES+TIC (Phospholipid)

1.87e8

4.58

4.33Silica C18

100

1 2 3 4 5 6 min 1 2 3 4 5 6 min

%

0

1: MRM of 12 Channels ES+TIC (Phospholipid)

1.87e8

4.33

Oasis PRiME HLB100

よりクリーンに Oasis PRiME HLB では、一般的なプロトコールを最適化することなく、タンパク質、塩、およびリン脂質などの一般的なマトリックスによる妨害の 95% 以上を排除できます。サンプルがより高純度であるためサンプル間の分析結果のばらつきが低減し、分析の頑健性が向上します。

 食品分析では、サンプル前処理が非常に困難な場合もあります。食肉や牛乳サンプル中の残留動物用医薬品を LC-MS で測定する場合は、一般的にアセトニトリルベースの溶媒で抽出します。この際、脂肪と極性脂質(特にリン脂質)が多量に共抽出されます。たとえば、1 mL の全乳には約 35 mg の脂肪と約 0.3 mg のリン脂質が含まれています。また、1 g の豚の筋肉には約 100 mg の脂肪と約 5 mg のリン脂質が一般的に含まれています。C18 などの逆相固相を用いることでアセトニトリルベースの抽出溶媒から脂肪を効果的に排除することができますが、リン脂質を排除することはできません。リン脂質が過剰に含まれていると、LC カラムの寿命が短縮するうえ、質量分析計におけるイオン化抑制と汚染の原因となることがあります。Oasis PRiME HLB は、食肉や牛乳の抽出物からリン脂質と脂肪の両方を非常に効果的に排除することができます。

最終サンプル前処理溶液に残存するリン脂質

パススルーサンプルクリーンアップ後の残存リン脂質

Oasis PRiME HLB 固相を 3 ステッププロトコールで使用した場合の最終サンプル前処理溶液に残存するリン脂質は、他社の固相で従来の 5 ステッププロトコールを用いた場合と比較して少なくなっています。また、エラーバー(n=5)で示されているようにOasis PRiME HLB ではリン脂質除去の再現性も高くなっています。

アセトニトリルベースの食肉抽出物からの脂質除去結果:Oasis PRiME HLB ではヘキサンで抽出できる総脂質の 90% 以上を除去することができます(重量測定法により定量)。Oasis PRiME HLB パススループロトコールを用いることによりリン脂質と脂肪の両方を除去することができます。シリカベース C18 固相を用いた場合、脂肪は除去されますが、リン脂質は除去されません。脂肪とリン脂質の両方が除去されることで、マトリックス効果が低減し、カラムや装置の汚染も減少します。

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サンプル前処理

www.waters.com18 サンプル前処理

Oasis PRiME MCX

よりシンプルに Oasis ファミリー共通の高い水湿潤性を持つ Oasis PRiME MCX には、逆相固相抽出で必須とされるコンディショニングと平衡化が必要

ありません。分析ニーズに合わせて次の 2 つのサンプル前処理プロトコールをお選びいただけます。

* 必要に応じてその他のマトリックスを除去するために追加洗浄ステップが含まれます。

• 100% メタノール

• 濃アンモニア水 : メタノール 5:95

• 2% ギ酸含有 100 mM ギ酸アンモニウム水溶液

溶離

洗浄 2

洗浄 1

ロード• 調製済みサンプル  通常、4% H3PO4 水溶液で 1:1 (v/v)希釈

Oasis PRiME MCX 4ステッププロトコール*

**サンプルは 4% H3PO4 含有 200 mM ギ酸アンモニウム溶液で 1:1 に希釈するため、最終濃度は2% H3PO4 含有100 mM ギ酸アンモニウム溶液になります。

Oasis PRiME MCX 3ステッププロトコール**

• 濃アンモニア水 : メタノール 5:95

• 100% メタノール

溶離

洗浄 1

ロード• 調製済みサンプル  4% H3PO4 含有 200 mM ギ酸アンモニウム水溶液で 1:1(v/v)希釈

Oasis PRiMEファミリーに、新しく強陽イオン交換/逆相ミックスモード固相のOasis PRiME MCXが加わりました。

よりシンプルに:■ 塩基性化合物に対して高く再現性の良い回収率を与えるシンプルで一般的なメソッド

よりクリーンに:■ 99%のリン脂質を除去し、よりクリーンな抽出物■ リン脂質をタンパク質沈殿を用いた場合と比べて99%除去し、このプロトコールを用いて品質管理されており、性能保証付き

より速く:■ コンディショニング・平衡化不要■ 製造の最適化により、カートリッジおよびプレートで再現性の良い流速を実現、全品検査を実施

専門知識を必要としないシンプルな前処理

Oasis PRiMEファミリーは、以下のメリットに焦点をあて、開発されました:

■ SIMPLER よりシンプルに

■ FASTER より速く

■ CLEANER よりクリーンに

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サンプル前処理

www.waters.com 19サンプル前処理

サンプル前処理

より速くよりクリーンに 専門知識を必要としないシンプルな 4 ステップ、3 ステッププロトコールで効果的なリン脂質除去

Oasis ファミリーの選択ガイド

残存リン脂質

Oasis PRiME MCX 4 ステッププロトコール

Oasis PRiME MCX 3 ステッププロトコール

Oasis MCX 汎用プロトコール

0

7000000

8000000

9000000

10000000

600000050000004000000300000020000001000000

面積値

3 ステップ

プロトコールでは、リン脂質の

95%が除去されます

4 ステッププロトコールでは、 Oasis MCX を汎用プロトコールで用いた場合と

比べてリン脂質が

98%除去されます

OASIS PRiMEシンプル、速い、クリーン

Oasis HLB

高極性化合物に対して高い

キャパシティ

酸性、塩基性、中性化合物用

Oasis MAX

逆相-強陰イオン交換ミックスモード

酸性化合物 pKa 2 - 8

Oasis WAX

逆相-弱陰イオン交換ミックスモード

強酸性化合物pKa <1

Oasis MCX

逆相-強陽イオン交換ミックスモード

塩基性化合物 pKa 2 - 10

Oasis WCX

逆相-弱陽イオン交換ミックスモード

強塩基性化合物pKa >10

Oasis PRiME HLB

ルーチン分析用の逆相SPE

シンプルなプロトコール

酸性、塩基性、中性化合物用

Oasis PRiME MCX

塩基性化合物クリーンアップ用ミックスモードSPE

シンプルなプロトコール

塩基性化合物 pKa ≥4.5

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サンプル前処理

www.waters.com20 サンプル前処理

固相ケミストリー イオン交換 / 逆相ミックスモード固相はすべて Oasis HLB ポリマーをベースにしており、広範なメソッド開発の選択肢を提供します。

マトリックス効果の低減 サンプル中のマトリックスによる妨害により、得られる最高感度が制限されることがあります。また、マトリックス排除により分析結果の頑健性と再現性が向上します。

複数の尿ロットで 5 種類の抗鬱剤について Oasis ミックスモード固相で抽出を行い、マトリックス効果を評価しました。マトリックスファクターの相対標準偏差(RSD)は5.5% ~ 8.4% となり、規制当局のガイドライン 15% に適応しています。

Oasis MCX塩基性化合物に適した

逆相 ─ 陽イオン交換ミックスモード固相

Oasis WCX 四級アミンなどの強塩基性化合物に適した

逆相 ─ 弱陽イオン交換ミックスモード固相

Oasis MAX酸性化合物に適した

逆相 ─ 陰イオン交換ミックスモード固相

Oasis WAX強酸性化合物に適した

逆相 ─ 弱陰イオン交換ミックスモード固相

Oasis HLB親水性・親油性基を併せ持つ逆相固相で、酸性、塩基性、中性全ての化合物に対応

pKa <1

pKa ~ 5

pKa >18

pKa ~ 6

pH 0 ~ 14 で安定水湿潤性

残存シラノール基無し

親水性基極性化合物へ保持能発揮

親油性基逆相保持能発揮

分析種 マトリックスファクターの相対標準偏差(RSD /%)

アミトリプチリン 6.03

ノルトリプチリン 5.53

イミプラミン 8.36

デシプラミン 7.15

ドキセピン 5.96

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サンプル前処理

www.waters.com 21サンプル前処理

サンプル前処理

A. ブランク血漿

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 分

B. 1 pg/mL 添加血漿

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 分

1.61

1.521.55

1.661.73

0

A. ブランク血漿

%

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

0

1.04138

Baselinex5

B. 1 pg/mL 添加血漿

%

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

%

0

1.04765

Baselinex25

B. 5 pg/mL 添加血漿

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分Oasis ミックスモード充塡剤 Oasis ミックスモード製品は、最高レベルの精製能と分析種への特異性のために開発されました。逆相とイオン交換の保持メカニズムを組み合わせることにより、酸、塩基、中性化合物、両性化合物に対して適切な Oasis 充塡剤を選択すれば、用意されている SPE のジェネリックメソッドを用いることができます。

 Oasis ミックスモード製品は、未知分析種の混合物のメソッド開発においても、目的の分析種に対して最適な充塡剤とプロトコールをすばやく決定できます。

ラット血漿中の 1 pg/mL アルプラゾラムの LC-MS/MS クロマトグラム

感度 Oasis ミックスモード固相はすべてユニークな水湿潤性のOasis HLB ポリマーをベースにしているため、逆相とイオン交換の保持特性を併せ持ち、酸性、中性および塩基性化合物に対して、固相が乾燥した場合でも、優れた選択性と感度を発揮します。Oasis µElution プレートは特許取得済のデザインを採用し、エバポレーションや再溶解をすることなく、サンプルを最大 15 倍まで濃縮できる利点があります。

 ロード、洗浄、溶離に用いる溶液は、目的の分析種の特徴や分析のニーズに合わせて、最適化することが可能です。例えば、弱塩基性化合物を Oasis MCX充塡剤にロードする際、酸性の水溶液に溶解してあらかじめ解離型にしておき、イオン交換と逆相との両方の保持を確実にします。さらに、各ステップにおける有機溶媒混合比を調整することにより、メソッドを最適化します。

 詳細については、ウェブページを ご覧ください。

www.waters.com/oasis

血漿中アルプラゾラムの高感度分析例

Oasis 2 × 4 メソッド

ロード 調製済みのサンプル

洗浄1 2% ギ酸水溶液

洗浄2 or 溶離1 100% メタノール

溶離2 濃アンモニア水/メタノール 5:95

ロード 調製済みのサンプル

洗浄 濃アンモニア水/精製水 5:95

溶離2 ギ酸/メタノール 2:98

溶離1 100% メタノール

中性化合物中性化合物

4 ステッププロトコール 4 ステッププロトコール

pKa < 1.0

OASIS WAX

強酸性化合物

pKa 2–10

OASIS MCX

塩基性化合物

pKa 2-8

OASIS MAX

酸性化合物

pKa > 10

OASIS WCX

強塩基性化合物

塩基性化合物 強酸性化合物 強塩基性化合物 酸性化合物

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サンプル前処理

www.waters.com22 サンプル前処理

ペプチド ペプチドをベースにした医薬品の開発が進むことにより、一般的なバイオアナリシスラボには新たな課題がもたらされます。このような高分子医薬品のバイオアナリシスメソッドで求められる感度、選択性、および頑健性は低分子医薬品と大きく異なるため、それぞれを理想的に現行の法規制に適合させるためには、ペプチド医薬品に対応するバイオアナリシスメソッドを開発しなければなりません。生体高分子はそのサイズと荷電状態分布のため、質量分析における感度が一般的な低分子化合物と比べて低くなる可能性があるため、サンプル濃縮やその他の手法によってメソッド全体の感度を向上させる必要があります。ウォーターズではサンプル前処理の基本となるプロトコールを用意しており、µElution フォーマットによる逆相 - イオン交換ミックスモード固相抽出でペプチド医薬品およびバイオマーカー用メソッド開発のプロセスをシンプル化する手法を提示します。

ペプチド医薬品用 Oasis µElution プレートテクノロジーで実現できること:

  エバポレーションなしで最高 15倍濃縮    ペプチドでは多くの場合、検出限界(LOD)に到達させるために濃縮が必要です  分析種の損失を最低限に抑制    エバポレーションステップ後のペプチド再溶解における問題がありません    熱に不安定なペプチドに最適です

A. ブランク血漿

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 分

B. 1 pg/mL 添加血漿

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 分

1.61

1.521.55

1.661.73

0

A. ブランク血漿

%

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

0

1.04138

Baselinex5

B. 1 pg/mL 添加血漿

%

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

%

0

1.04765

Baselinex25

B. 5 pg/mL 添加血漿

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

A. ブランク血漿

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 分

B. 1 pg/mL 添加血漿

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 分

1.61

1.521.55

1.661.73

0

A. ブランク血漿

%

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

0

1.04138

Baselinex5

B. 1 pg/mL 添加血漿

%

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

%

0

1.04765

Baselinex25

B. 5 pg/mL 添加血漿

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

A. ブランク血漿

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 分

B. 1 pg/mL 添加血漿

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 分

1.61

1.521.55

1.661.73

0

A. ブランク血漿

%

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

0

1.04138

Baselinex5

B. 1 pg/mL 添加血漿

%

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

%

0

1.04765

Baselinex25

B. 5 pg/mL 添加血漿

100

0.50 1.00 1.50 2.00 分

ヒト血漿中の 1 pg/mL および 5 pg/mL デスモプレシンの LC-MS/MS クロマトグラム

血漿中デスモプレシンの LOD および LOQ

メタノールコンディショニング/水平衡化

Oasisペプチド用プロトコール

Oasis WCXµElution

Oasis MAXµElution

4%濃リン酸水溶液希釈血漿

洗浄 1:5%濃アンモニア水

洗浄 2:20%アセトニトリル

溶離:1% TFA アセトニトリル/水(75/25)溶液

希釈:水

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サンプル前処理

www.waters.com 23サンプル前処理

サンプル前処理

105

95

850 5 10 15 年

Reco

very

%

バッチ限定の必要なし:15 年以上にわたる製造で、常に一定の高い回収率

回収率の変動係数(%RSD): プロカインアミド:1.90% ラニチジン:1.68% アセトアミノフェン:1.65%

品質 細かなところまで配慮したプロセスデザインと厳しい品質管理により、ウォーターズは、固相のゲルバッチ間やパッキングロット間の再現性に新しい標準を築き上げました。これにより分析科学者は、頑健かつ正確で高精度な分析メソッドを開発できるようになり、開発したメソッドを自信を持って世界中に広めることができるようになったのです。

ボディフォーマット

µElution プレート■■ 特許取得済の µElutionプレートデザイン■■ 10 µLから 375 µLのサンプルのクリーンアップや濃縮に最適■■ わずか 25 µLの溶媒で脱離を可能にし、エバポレートや再溶解不要■■ 最大 15倍まで濃縮可能■■ ハイスループット SPE(HT-SPE)用リキッドハンドリングロボットシステム適合

96- ウェルプレート■■ 受賞歴のある革新的な 2ステージウェルデザイン■■ ハイスループット、高回収率■■ 1ウェルあたり 5 mg、10 mg、30 mg、60 mg充塡タイプをラインアップ■■ ハイスループット SPE(HT-SPE)用リキッドハンドリングロボットシステム適合

シリンジバレルカートリッジ■■ ウルトラクリーンなシリンジバレルとフリッツ■■ 1 cc~ 60 ccのカートリッジをラインアップ■■ フランジレスシリンジバレルカートリッジは 1 cc、3 cc、6 ccで利用可能■■ 他に、ルアー型の Plusカートリッジ(225 mg充塡)もラインアップ

ガラスカートリッジ■■ ウルトラクリーンなガラスシリンジと TeflonⓇフリッツ■■ ppt(1兆分の 1)レベルでのトレースレベル検出および分析用■■ 5 cc(200 mg)シリンジをラインアップ

オンラインカラムおよびカートリッジ■■ 頑健で再現性が高い超高速オンライン分析用■■ 様々なカラムサイズ、粒子径、固相を選択可能■■ 特許取得済の 5種類の固相ケミストリー(HLB、MCX、MAX、WCX、WAX)がすべて利用可能■■ 広範囲の化合物について、高い回収率と再現性■■ Spark Holland Prospekt-2 ™ /Symbiosis ™ システム用のカートリッジフォーマットもラインアップ

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サンプル前処理

www.waters.com24 サンプル前処理

5 mg/96 ウェル 10 mg/96 ウェル 30 mg/96 ウェル 60 mg/96 ウェル

固相 1/pk 1/pk 1/pk 1/pk

Oasis HLB 30 µm 186000309 186000128 WAT058951 —

Oasis PRiME HLB — 186008053 186008054 —

Oasis HLB 60 µm — — — 186000679

Oasis PRiME MCX 30 µm — 186008915 186008916 —

Oasis MCX 30 µm — 186000259 186000248 —

Oasis MCX 60 µm — — 186000250 186000678

Oasis MAX 30 µm — 186000375 186000373 186001256

Oasis MAX 60 µm — — — 186001205

Oasis WCX 30 µm — 186002501 186002503 —

Oasis WAX 30 µm — 186002502 186002504 186003915

µElution 96 ウェル

固相 1/pk

Oasis HLB 30 µm 186001828BA

Oasis PRiME HLB 186008052

Oasis MCX 30 µm 186001830BA

Oasis PRiME MCX 30 µm 186008914

Oasis MAX 30 µm 186001829

Oasis WCX 30 µm 186002499

Oasis WAX 30 µm 186002500

1 cc/10 mg 1 cc/30 mg 1 cc/30 mg フランジレス

1 cc/30 mg ギルソン

アダプター付3 cc/60 mg 3 cc/60 mg

フランジレス

3 cc/60 mg ギルソン

アダプター付3 cc/540 mg 3 cc/540 mg

フランジレス 3 cc/150 mg

固相 100/box 100/box 100/box 500/box 100/box 100/box 500/box 100/box 100/box —

Oasis HLB 30 µm 186000383 WAT094225 186001879 WAT058882 WAT094226 186001880 WAT058883 — — —

Oasis PRiME HLB — 186008055 — — 186008056 — — — — 186008717

Oasis HLB 60 µm — — — — — — — 186004134 186003852 —

Oasis PRiME MCX 30 µm — 186008917 — — 186008918 — — — — —

Oasis MCX 30 µm 186004648 186000252 186001881 186001888 186000254 186001882 — — — —

Oasis MCX 60 µm — 186000782 — — 186000253 — — — — —

Oasis MAX 30 µm 186004649 186000366 186001883 — 186000367 186001884 — — — —

Oasis MAX 60 µm — — — — 186000368 — — — — —

Oasis WCX 30 µm 186004650 186002494 — — 186002495 — — — — —

Oasis WCX 60 µm — 186002496 — — 186002497 — — — — —

Oasis WAX 30 µm 186004651 186002489 — — 186002490 — — — — —

Oasis WAX 60 µm — 186002491 — — 186002492 — — — — —

Oasis 96 ウェルプレートOasis µElution プレート

Oasis 製品セレクションガイド

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サンプル前処理

www.waters.com 25サンプル前処理

サンプル前処理

6 cc/150 mg 6 cc/200 mg 6 cc/400 mg フランジレス 6 cc/500 mg 12 cc/500 mg 20 cc/1 g 35 cc/6 g Plus 225 mg Vac RC

30 mgVac RC60 mg

ガラスカートリッジ5 cc/200 mg

30/box 30/box 30/box 20/box 20/box 10/box 50/box 50/box 50/box 30/box

186003365 WAT106202 — — — — — — 186000382 186000381 —

186008057 — 186008718 — — — — — — —

186003379 — — 186000115 186000116 186000117 186000118 186000132 — — 186000683

186008919

186000256 — 186001216 (500/box)

— — — — — — 186000261 —

186000255 — — 186000776 — 186000777 186000778 186003516 — 186000380 —

186000369 — 186001855 (100/box)

— — — — — 186000372 186000371 —

186000370 — — 186000865 — — — 186003517 — 186000378 —

186002498 — — — — — — — — — —

— — — 186004646 — — — 186003518 — — —

186002493 — — — — — — — — — —

— — — 186004647 — — — 186003519 — —

商品名 粒子径 商品番号

Oasis µElution メソッド開発キット、96ウェル 30 µm 186004475

Oasis メソッド開発プレート、10mg/96ウェル 30 µm 186003249

Oasis メソッド開発キット、30mg/1cc 30 µm 186003463

Oasis メソッド開発ツールは LC/MS/MS のためのサンプル前処理メソッド開発をスピードアップします。キットには目的成分の選択抽出を可能にするミックスモード Oasis 固相 4 種全てが含まれています。

Oasis メソッド開発ツールOasis µElution プレート

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サンプル前処理

www.waters.com26 サンプル前処理

Oasis PRiME HLB

商品名 個数 商品番号

Oasis PRiME HLB µElution プレート 1 186008052Oasis PRiME HLB 96 ウェルプレート 10mg 1 186008053Oasis PRiME HLB 96 ウェルプレート 30mg 1 186008054Oasis PRiME HLB 30mg/1cc 100 186008055Oasis PRiME HLB 60mg/3cc 100 186008056Oasis PRiME HLB 150mg/3cc 100 186008717 Oasis PRiME HLB 200mg/6cc 30 186008057Oasis PRiME HLB 500mg/6cc 30 186008718 Oasis PRiME HLB Plus Light, 100 mg 50 186008886Oasis PRiME HLB Plus Short, 335 mg 50 186008887

Oasis HLB

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis HLB 10mg/1cc 30 µm 100 186000383Oasis HLB 30mg/1cc 30 µm 1000 186003908Oasis HLB 30mg/1cc 30 µm 100 WAT094225Oasis HLB Vac RC 30mg 30 µm 50 186000382Oasis HLB 60mg/3cc 30 µm 100 WAT094226Oasis HLB Vac RC 60mg 30 µm 50 186000381Oasis HLB 150mg/6cc 30 µm 30 186003365Oasis HLB 150mg/6cc 60 µm 30 186003379Oasis HLB 200mg/6cc 30 µm 30 WAT106202Oasis HLB 400mg/3cc 60 µm 100 186003849Oasis HLB 500mg/6cc 60 µm 30 186000115Oasis HLB 500mg/12cc 60 µm 20 186000116Oasis HLB 540mg/3cc 60 µm 100 186004134Oasis HLB 540mg/3cc フランジレスタイプ 60 µm 100 186003852Oasis HLB 1g/20cc 60 µm 20 186000117Oasis HLB 6g/35cc 60 µm 10 186000118Oasis HLB Plus type 225mg 60 µm 50 186000132Oasis HLB 30mg/1cc フランジレスタイプ 30 µm 100 186001879Oasis HLB 60mg/3cc フランジレスタイプ 30 µm 100 186001880Oasis HLB Glass 200mg/5cc 60 µm 30 186000683Oasis ガラス用テフロンジョイントアダプター 10 405000934Oasis HLB 10mg/1cc ギルソン 30 µm 500 186000988 ASPEC アダプター付きOasis HLB 30mg/1cc ギルソン 30 µm 500 WAT058882 ASPEC アダプター付きOasis HLB 60mg/3cc ギルソン 30 µm 500 WAT058883 ASPEC アダプター付き

Oasis HLB 96 ウェルプレート  30mg 30 µm 1 WAT058951Oasis HLB 96 ウェルプレート  30mg 30 µm 3 JKTN20275Oasis HLB 96 ウェルプレート  30mg 30 µm 10 JJAN20253Oasis HLB 96 ウェルプレート  30mg 30 µm 30 JJAN20254Oasis HLB 96 ウェルプレート  10mg 30 µm 1 186000128Oasis HLB 96 ウェルプレート  10mg 30 µm 3 JKTN20276Oasis HLB 96 ウェルプレート  5mg 30 µm 1 186000309Oasis HLB 96 ウェルプレート  5mg 30 µm 3 JKTN20277Oasis HLB 96 ウェルプレート  60mg 60 µm 1 186000679Oasis HLB µElution プレート 30 µm 1 186001828BA Oasis HLB ステンレスカラム  2.1×20mm 5 µm 1 186002034Oasis HLB ステンレスカラム  2.1×20mm 15 µm 1 186002035Oasis HLB ステンレスカラム  2.1×20mm 25 µm 1 186002036Oasis HLB ステンレスカラム  3.0×20mm 5 µm 1 186002037Oasis HLB ステンレスカラム  3.0×20mm 15 µm 1 186002038Oasis HLB ステンレスカラム  3.0×20mm 25 µm 1 186002039Oasis HLB ステンレスカラム  3.9×20mm 5 µm 1 186002040Oasis HLB ステンレスカラム  3.9×20mm 15 µm 1 186002041Oasis HLB ステンレスカラム  4.6×20mm 5 µm 1 186002043

Oasis HLB ステンレスカラム  4.6×20mm 15 µm 1 186002044Oasis HLB ステンレスカラム  4.6×20mm 25 µm 1 186002045

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis HLB 直結タイプステンレスカラム 25 µm 1 186001792 2.0×15mm

Oasis HLB カートリッジカラム  2.1×20mm* 25 µm 1 186000706Oasis HLB カートリッジカラム  3.9×20mm** 5 µm 1 186001413Oasis HLB カートリッジカラム  3.9×20mm** 15 µm 1 186001414

*186000262 が別途必要です。** WAT046910 が別途必要です。

Oasis MCX

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis MCX 10mg/1cc 30 µm 100 186004648Oasis MCX 30mg/1cc 30 µm 100 186000252Oasis MCX 30mg/1cc 60 µm 100 186000782Oasis MCX 60mg/3cc 30 µm 100 186000254Oasis MCX 60mg/VacRC 30 µm 50 186000261Oasis MCX 60mg/VacRC 60 µm 50 186000380Oasis MCX 60mg/3cc 60 µm 100 186000253Oasis MCX 150mg/6cc 30 µm 30 186000256Oasis MCX 150mg/6cc 60 µm 30 186000255Oasis MCX 500mg/6cc 60 µm 30 186000776Oasis MCX 1g/20cc 60 µm 20 186000777Oasis MCX 6g/35cc 60 µm 10 186000778Oasis MCX 30mg/1cc フランジレスタイプ 30 µm 100 186001881Oasis MCX 60mg/3cc フランジレスタイプ 30 µm 100 186001882Oasis MCX Plus type 225mg 60 µm 50 186003516Oasis MCX 96 ウェルプレート  30mg 30 µm 1 186000248Oasis MCX 96 ウェルプレート  30mg 30 µm 3 JLCN20278Oasis MCX 96 ウェルプレート  30mg 60 µm 1 186000250Oasis MCX 96 ウェルプレート  30mg 60 µm 3 JLCN20279Oasis MCX 96 ウェルプレート  10mg 30 µm 1 186000259Oasis MCX 96 ウェルプレート  10mg 30 µm 3 JLCN20280Oasis MCX 96 ウェルプレート  60mg 60 µm 1 186000678Oasis MCX µElution プレート 30 µm 1 186001830BA

Oasis MCX ステンレスカラム  2.1×20mm 30 µm 1 186002046Oasis MCX ステンレスカラム  3.0×20mm 30 µm 1 186002047Oasis MCX ステンレスカラム  3.9×20mm 30 µm 1 186002048Oasis MCX ステンレスカラム  4.6×20mm 30 µm 1 186002049Oasis MCX カートリッジカラム   2.1×20mm* 30 µm 1 186002051

Oasis WCX

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis WCX 10mg/1cc 30 µm 100 186004650Oasis WCX 30mg/1cc 30 µm 100 186002494Oasis WCX 30mg/1cc 60 µm 100 186002496Oasis WCX 60mg/3cc 30 µm 100 186002495Oasis WCX 60mg/3cc 60 µm 100 186002497Oasis WCX 150mg/6cc 30 µm 30 186002498Oasis WCX 500mg/6cc 60 µm 30 186004646Oasis WCX Plus type 225mg 60 µm 50 186003518Oasis WCX µElution プレート 30 µm 1 186002499Oasis WCX 96 ウェルプレート  10mg 30 µm 1 186002501Oasis WCX 96 ウェルプレート  30mg 30 µm 1 186002503

Oasis WCX ステンレスカラム  2.1×20mm 30 µm 1 186002505Oasis WCX ステンレスカラム  3.9×20mm 30 µm 1 186002507

Oasis 製品リスト

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サンプル前処理

www.waters.com 27サンプル前処理

サンプル前処理

Oasis MAX

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis MAX 10mg/1cc 30 µm 100 186004649Oasis MAX 30mg/1cc 30 µm 100 186000366Oasis MAX 60mg/3cc 30 µm 100 186000367Oasis MAX 30mg VacRC 30 µm 50 186000372Oasis MAX 60mg VacRC 30 µm 50 186000371Oasis MAX 60mg VacRC 60 µm 50 186000378Oasis MAX 60mg/3cc 60 µm 100 186000368Oasis MAX 150mg/6cc 30 µm 30 186000369Oasis MAX 150mg/6cc 60 µm 30 186000370Oasis MAX 500mg/6cc 60 µm 30 186000865Oasis MAX 30mg/1cc フランジレスタイプ 30 µm 100 186001883Oasis MAX 60mg/3cc フランジレスタイプ 30 µm 100 186001884Oasis MAX Plus type 225mg 60 µm 50 186003517Oasis MAX 96 ウェルプレート 30mg 30 µm 1 186000373Oasis MAX 96 ウェルプレート 30mg 30 µm 3 JLCN20281Oasis MAX 96 ウェルプレート 10mg 30 µm 1 186000375Oasis MAX 96 ウェルプレート 10mg 30 µm 3 JLCN20282Oasis MAX 96 ウェルプレート 60mg 30 µm 1 186001256Oasis MAX 96 ウェルプレート 60mg 60 µm 1 186001205Oasis MAX µElution プレート 30 µm 1 186001829

Oasis MAX ステンレスカラム 2.1×20mm 30 µm 1 186002052Oasis MAX ステンレスカラム 3.0×20mm 30 µm 1 186002053Oasis MAX ステンレスカラム 3.9×20mm 30 µm 1 186002054Oasis MAX ステンレスカラム 4.6×20mm 30 µm 1 186002055Oasis MAX カートリッジカラム 2.1×20mm* 30 µm 1 186002057

*186000262 が別途必要です。

Oasis WAX

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis WAX 10mg/1cc 30 µm 100 186004651Oasis WAX 30mg/1cc 30 µm 100 186002489Oasis WAX 30mg/1cc 60 µm 100 186002491Oasis WAX 60mg/3cc 30 µm 100 186002490Oasis WAX 60mg/3cc 60 µm 100 186002492Oasis WAX 150mg/6cc 30 µm 30 186002493Oasis WAX 500mg/6cc 60 µm 30 186004647Oasis WAX Plus type 225mg 60 µm 50 186003519Oasis WAX µElution プレート 30 µm 1 186002500Oasis WAX 96 ウェルプレート 10mg 30 µm 1 186002502Oasis WAX 96 ウェルプレート 30mg 30 µm 1 186002504Oasis WAX 96 ウェルプレート 60mg 30 µm 1 186003915 Oasis WAX ステンレスカラム  2.1×20mm 30 µm 1 186002508Oasis WAX ステンレスカラム  3.9×20mm 30 µm 1 186002509

Oasis PRiME MCX

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis PRiME MCX µElution プレート 30 µm 1 186008914Oasis PRiME MCX 96 ウェルプレート 10mg 30 µm 1 186008915Oasis PRiME MCX 96 ウェルプレート 30mg 30 µm 1 186008916Oasis PRiME MCX 30mg/1cc 30 µm 100 186008917Oasis PRiME MCX 60mg/3cc 30 µm 100 186008918Oasis PRiME MCX 150mg/6cc 30 µm 30 186008919

メソッド開発キット

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis メソッド開発キット 30 µm 10×4 186003463 (MCX, MAX, WCX, WAX 30µm 30mg/1cc)

Oasis メソッド開発プレート 30 µm 1 186003249 (MCX, MAX, WCX, WAX 各 8×3 列充塡)

Ossis µElution メソッド開発プレート 30 µm 1 186004475 (MCX, MAX, WCX, WAX 各 8×3 列充塡)

Prospekt(Spark Holland 社製)用カートリッジ

商品名 粒子径 個数  

Oasis HLB Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186005781 1.0 × 10 mm,, 96/pkgOasis MCX Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186005782 1.0 × 10 mm,, 96/pkgOasis MAX Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186005783 1.0 × 10 mm,, 96/pkgOasis WCX Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186005784 1.0 × 10 mm,, 96/pkgOasis WAX Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186005785 1.0 × 10 mm, 96/pkgOasis HLB Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186005786 2.0 × 10 mm, 96/pkgOasis MCX Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186004653 2.0 × 10 mm, 96/pkgOasis MAX Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186004654 2.0 × 10 mm, 96/pkgOasis WCX Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186004655 2.0 × 10 mm, 96/pkgOasis WAX Prospekt-2/Symbiosis Cartridges, 30 µm 96 186004656 2.0 × 10 mm, 96/pkg

* 新番号の商品は 700 シリーズ、800 シリーズ両方に対応します。 使用されている充塡剤と充塡量は全く同様です。

オンラインカートリッジカラム用ホルダー

商品名 個数 商品番号

カートリッジホルダー 2.1×20mm 用 1 186000262カートリッジホルダー 3.9×20mm、4.6×20mm 用 1 WAT046910

(186001196)

(186002099)

(186002893)

(186002098)

(186002892)

(186003925)

商品番号 (旧製品)

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サンプル前処理

www.waters.com28 サンプル前処理

エキストラクションマニホールド&スペアパーツ

商品名 個数 商品番号

エキストラクションマニホールド 1 186008998 20 検体用、ラック無し

(ニードルチップ 20 本、プラグ 20 個付)エキストラクションマニホールド 20 検体用、 1 WAT200606J 13mm × 75mm 試験管ラック付

(ニードルチップ 20 本、プラグ 20 個付)エキストラクションマニホールド 20 検体用、 1 WAT200607J 13mm × 100mm 試験管ラック付

(ニードルチップ 20 本、プラグ 20 個付)エキストラクションマニホールド 20 検体用、 1 WAT200608J 16mm × 75mm 試験管ラック付

(ニードルチップ 20 本、プラグ 20 個付)エキストラクションマニホールド 20 検体用、 1 WAT200609J 16mm × 100mm 試験管ラック付

(ニードルチップ 20 本、プラグ 20 個付)13mm × 75mm 試験管ラック 1 18600899413mm × 100mm 試験管ラック 1 18600899516mm × 75mm 試験管ラック 1 18600899616mm × 100mm 試験管ラック 1 186008997廃液バケット 1 お問合せ下さいニードルチップ 20 WAT200691

(Oasis 用・ストップコックバルブ無し)ニードルチップ(ストップコックバルブ付) 20 WAT200685ルアープラグ(密栓用) 20 WAT058851デルリン製カバー 1 186008990

(ゲージアッセンブリー、ガスケット無し)減圧ゲージアッセンブリー 1 WAT200687ガラスチャンバー(排出バルブ付き) 1 186008991排出バルブ 1 WAT200689ニードルチップ取り外し用ツール 1 WAT058839ラバーボール(減圧ゲージ用) 1 WAT058840バキュームポンプ(115V 60Hz) 1 725000417

アクセサリー

商品名 個数 商品番号

リザーバー 30cc 48 WAT011390リザーバー 60cc 12 186005587ジョイントアダプター(1、3、6cc 用) 12 WAT054260ジョイントアダプター(12、20、35cc 用) 10 JJAN20173

96 ウェルプレートマニホールド & スペアパーツ

商品名 個数 商品番号

96 ウェルプレート / 1 186001831 µElution プレート用マニホールド96 ウェル プレート / – WAT097944 µElution プレート用マニホールド Kit A

(マニホールド、廃液受け、 350 µL コレクションプレート、シーリングキャップ付)96 ウェル プレート / – WAT097945 µElution プレート用マニホールド Kit B

(マニホールド、廃液受け、 1mL コレクションプレート、シーリングキャップ付)96 ウェル プレート / – WAT097946 µElution プレートマニホールド Kit C

(マニホールド、廃液受け、 2mL コレクションプレート、シーリングキャップ付)96 ウェルコレクションプレート 350µL 50 WAT05894396 ウェルコレクションプレート 1mL 50 WAT05895796 ウェルコレクションプレート 2mL 50 WAT058958廃液受け 25 WAT05894296 ウェルシーリングキャップ(ポリプロピレン製) 50 WAT05895996 ウェルコレクションプレート / ガラスバイアル入り 1 186000349

(各ウェルに 700µL ガラスバイアル入り)96 ウェルプレート用 700µL ガラスバイアル 96 本セット 1 18600143796 ウェルコレクションプレート / ガラスバイアル入り 18 186000855

(各ウェルに 1mL ガラスバイアル入り)96 ウェルプレート用 1mL ガラスバイアル 96 本セット 1 186001436ガラスバイアルセット用 96 ウェルプレート 20 18600143896 ウェルシーリングキャップ角形 5 186000857 PTFE/ シリコンプレスリット

(186000349 700µL ガラスバイアル入りプレート用)96 ウェルシーリングキャップ丸形 5 186006332 PTFE/ シリコンプレスリット

(186000855 1 mL ガラスバイアル入りプレート用) 96 ウェルフィルタープレート 54 186002799ガスケットキット トップガスケット:2 個、 186003522 Oリング:2 個バキュームポンプ(115V 60Hz) 1 725000417

Oasis 96- ウェル µElution プレート(スペーサー必要)

µElution プレート用スペーサー(キットに付属)

コレクションプレート

Oasis 96- ウェルプレート(スペーサー不要)

96 ウェルプレートマニホールド186001831

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サンプル前処理

www.waters.com 29サンプル前処理

サンプル前処理

商品名 個数 商品番号

Waters 96 ウェルプレート用加圧送液プロセッサー 1 18600696196 ウェルシーリングガスケット 1 18600552296 1cc フランジレスカートリッジホルダー 1 186005523ガス源接続部品 , NPT フィッティング 1 186005524 ( インレット:1/8 インチ , アウトレット:1/4 インチ)、 1/4 インチチューブ (6 フィート)廃液バケット , 10mL×24 ウェル 1 186005586µElution プレート用スペーサー 1 405006528丸形 1 mL 96 ウェルコレクションプレート 50 186002481

Waters 96 ウェルプレート用加圧送液プロセッサー

 Waters 96 ウェルプレート用加圧送液プロセッサーは最新技術により 96 ウェルサンプル前処理製品への高精度な送液を実現します。すべての 96 ウェルにはリストリクターにより均一な圧力が配分され、加圧によるウェル間で均一な送液は粘性の高いサンプル溶液のロード効率を顕著に改善。固相抽出などのサンプル前処理回収率の再現性を劇的に向上します。

 ■ 96ウェル 全てに均一な流速

 ■ 粘性の高いサンプル溶液も処理可能

 ■ より高精度なサンプル前処理を実現

 ■ 使いやすさを考慮したデザイン

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THE FASTER WAY TO CLEANER

SENSITIVITY IN ITS PUREST FORMSIMPLY CLEAR

創薬から医薬開発後期まで、ウォーターズはバイオアナリシスのためにリン脂質を除去

する新製品 Ostro プレートを含む広範なレンジのサンプル前処理製品群を提供します。

©2013 Waters Corporation. Waters, The Science of What’s Possible, Ostro, Oasis, and Sirocco are trademarks of Waters Corporation.

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サンプル前処理

www.waters.com 31サンプル前処理

サンプル前処理

Ostro サンプル前処理製品

 Ostro 96 ウェルプレートは血漿、血清中リン脂質を除去する ための新ソリューションです。最小限あるいはまったくメソッド開発を必要としないシンプルプロトコールにより分析ラボの ワークフロー最適化を今すぐにでも実行可能です。既存のリン脂質除去製品や技術と比べよりきれいで再現性の高い精製を実現することにより Ostro 96 ウェルプレートはより高感度でハイスループットな分析を可能にし、また分析装置のダウンタイムを削減します。

 ■ よりきれいなサンプルを得るためにより多くのリン脂質を除去

 ■ より一貫した頑健な分析方法のための改善された再現性

 ■ 簡単な使用方法によるスループット増加

再現性 6 ロットの異なる血漿中のリン脂質除去試験において Ostro(相対標準偏差 0.19%)はブランド A(相対標準偏差 24.5%)、ブランド B(相対標準偏差 40.9%)と比較し、ほぼ完全なリン脂質除去を高い再現性で実現。

Ostro Competitor A Competitor B

1 2 3 4 5 60

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

% P

hosp

holip

id R

emov

al

Ostroをコレクションプレートに重ねる

50-200 µL の血漿サンプルを各ウェルにロード*

ギ酸を1%含むアセトニトリルをいきおいよくかつ迅速にロード混合比率は溶媒:サンプル溶液≧3:1(メタノールは非推奨)

15インチ Hg で5-10分吸引または60psi で5分加圧により濾過

直接注入により分析または希釈や乾固再溶解後に分析

3回ピペッティングにより完全に混合

*サンプル容量が 50 µL 以下の場合は必要に応じて沈澱用溶媒の混合比を増加させる。

リン脂質除去 Ostro により処理されたサンプル中の5種のリン脂質残存量は 分析種によって最適化を必要とする液液抽出(LLE)や珪藻土 カラム抽出(SSLE)と比べより少なくなってます。

Sum

of A

rea

Coun

ts o

f 5 P

hosp

holip

ids

350000

300000

250000

200000

150000

100000

50000

0Ostro LLE SSLE

ホスファチジルコリン骨格を有する5種のリン脂質(分子量 496, 524, 704, 758, 806)面積値の合計

使用方法

メソッド開発時間を最小化。Ostro 標準プロトコールは酸性、塩基性および中性と幅広い成分に優れた結果を与えます。

Ostro オーダーインフォメーション

商品名. . 個数. 商品番号

Ostro 96 ウェルプレート 1 186005518

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サンプル前処理

www.waters.com32 サンプル前処理

 このたび、ウォーターズ製品に PoraPak Rxn が加わりました。PoraPak Rxn はポリマーベースのクロマトグラフィー製品で、合成反応後のクリーンアップ効率を飛躍的に高めます。PoraPak Rxn 製品には次の 2 種類がラインアップされています:

• PoraPak Rxn CX、強陽イオン交換充塡剤

• PoraPak Rxn RP、逆相充塡剤

 PoraPak Rxn 充 塡 剤 は、 容 量 6、20、60 cc の シ リ ン ジ に 充 塡され提供されます。充塡剤のみのバルクも販売しており、また カスタム製造のご要望にもお応えできます。

いち早く結果を得るための新ソリューション

 PoraPak Rxn 充塡剤は、以下の特性を持つポリマーをベースにしています:

• 高流速でも背圧上昇が少ない硬質ポリマー

• 幅広い溶媒条件や極端な pH 条件でも、膨張や収縮がほぼ発生しない

• 自然落下による送液を可能にする低い送液抵抗

• 極端な pH への耐性が高く、シリカベース充塡剤で問題となる 溶解や加水分解を起こさない

 これらの物理特性および化学特性を有するPoraPak Rxn カートリッジは、合成後クリーンアップに最適なカートリッジです。 そのポリマー特性と粒子径は、送液抵抗を高める可能性のある沈殿物が反応混合物に含まれている場合でも、自然落下や加圧または吸引による送液を維持し、サンプルは問題なくカートリッジを通過します。

   PoraPak Rxn 製品で使用されているポリマーは、合成反応で一般的に用いられる有機溶媒中でも膨張や収縮を起こしにくい特性を有しています。以下の溶媒を用いたテストでは、充塡ベッドで良好な送液特性が維持されることが示されています:

• DCE • DMF• DCM • THF• DMSO • アセトン

 医薬品合成の分野では、反応後クリーンアップにおいてシリカベース製品がたびたび使用されます。シリカをベースとするイオン交換充塡剤の欠点のひとつが、pH 安定性の低さです。シリカは高 pH で溶解しますが、その一方で結合相は低 pH で加水分解されます。どちら の条件でも、回収率低下や、不純物(シリカおよび結合相)が生成物フラクションに混入します。ポリマーベースの PoraPak Rxn は、 極端な pH でも安定しています。この特性により pH を利用して、特にイオン交換で効果的な分離や精製を行なうことが可能になっています。

ウォーターズ:分離科学の世界的なリーダー

分離ソリューションを提供

ウォーターズはクロマトグラフィーの専門企業として、世界中で 高い評価をいただいています。優れた専門知識と、重要な機器や ケミストリ、分離技術、ソフトウェアをシームレスに結び付ける 能力を備えたウォーターズは、他の追随を許さない付加価値のある ソリューションをお客様に提供しています。

製造

ウォーターズのワールドクラスの製造施設は、新製品や既存製品への市場のニーズに対応するために、継続的に拡張および改良されています。ウォーターズの製品は、ISO-9001:2000、ISO-13485:2003、医薬品適正製造基準(cGMP)などの業界最高の品質基準に準拠して製造されています。

PoraPak Rxn カートリッジ

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サンプル前処理

www.waters.com 33サンプル前処理

サンプル前処理

Catch and Elute

Pass Through

Adsorption

PoraPak Rxn CX

PoraPak Rxn CX

PoraPak Rxn RP

Catch and Elute

Catch and Elute

PoraPak Rxn CX

PoraPak Rxn CX

Catch and Elute

Catch and Elute

PoraPak Rxn CX

PoraPak Rxn CX

Catch and Elute Catch and Elute 手法では、反応混合物をカートリッジにロードし、目的成分(合成産物)を充塡剤に保持させます。その後、洗浄手順によりカートリッジから他の反応物を除去したのち、強溶媒を用いてカートリッジから目的成分を溶出させます。最終的な溶出液容量がロード 容量よりも少ない場合は、クリーンアップだけではなく濃縮も行われます。

Pass Through Pass Through 手法では、目的成分を保持させずに素通りさせ、不純物を保持させて除去します。保持された成分はカラムとともに廃棄できます。成分の分画は、反応混合物中の不純物と充塡剤との相互作用により行なわれます。本手法では濃縮は行われません。

Adsorption  逆相充塡剤を使用する Adsorption 手法は、中性化合物を水混合比が高い状態(例:水混合比 75% 以上)でロードし保持させ、低混合比の有機溶媒を含む洗浄液でクリーンアップ後、有機溶媒の混合比を上げて脱離します。脱離に必要な有機溶媒混合比は目的成分の疎水性や 分子量により決定します。

クリーンアップに最適な製品と手法を選択する PoraPak Rxn 製品では、強陽イオン交換充塡剤 CX と逆相充塡剤 RP という 2 種類の充塡剤を利用できます。 下の図では、クリーンアップで使用する充塡剤と分離手法を推奨しています。適切な充塡剤と手法は、反応生成物、反応物、溶媒、分取カラムなどの特性によって異なります。

手法: 推奨製品:

反応生成物の分画精製

TFA 除去 溶媒置換

分取クロマト前後の処理

塩基性化合物

酸性化合物

中性化合物

TFA 除去~塩基性化合物

高沸点溶媒の交換~塩基性化合物

分取前にサンプルを分画 ~塩基性化合物

分取フラクションから水を除去~塩基性化合物

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クリーンアップ手順 PoraPak Rxn CX:強陽イオン交換による Catch and Elute および Pass Through 手法

PoraPak Rxn RP:逆相による Adsorption 手法

Catch and Elute Pass Through

Adsorption 本手法は目的成分が中性化合物の場合に使用します。 目的成分を逆相で保持する ために、反応液の極性有機溶媒をエ バ ポ レ ー ト ま た は 水 に より希釈(3:1 以上)します。 この希釈により、有機含有量が25%以下に下がり、逆相による保持が可能になります。 右で示している一般的なプロトコルは、反応混合物クリーンアップの開始点として利用できます。

コンディショニング100%メタノール

コンディショニング100%メタノール

ロードここで得たフラクション

には、酸性物質、 中性物質、反応溶媒が

含まれています

ロードここで得たフラクション

には、酸性物質、 中性物質、反応溶媒が

含まれています

コンディショニング

ロード

洗浄

脱離

洗浄100%メタノール フラクションには、

多くの不純物、酸性物質、 中性物質が

含まれています

洗浄100%メタノール フラクションには、

酸性物質、中性物質が 含まれています

脱離濃アンモニア水を 5% 添加したメタノール 本フラクションには

塩基性化合物が 含まれています

ロードと 洗浄フラクション

を再混合

メタノールなどの有機溶媒でコンディショニング このステップは、充塡剤に溶媒を浸透させる重要なステップです

Pass Through 手法―保持された化合物は不要な 反応成分です。脱離は必要ありません

Catch and Elute 手法―濃アンモニア水を 5% 添加した メタノールにより塩基性化合物を脱離します

Catch and Elute 手法―洗浄液には、 不要な反応成分が含まれています

Pass Through 手法―分析対象物が保持されず、 洗浄液に溶出します ロードステップで集めた フラクションと洗浄フラクションを混合します

100%メタノールで洗浄します

Catch and Elute 手法―分析対象物が イオン交換により保持されます

Pass Through 手法―分析対象物は保持されません

反応混合物をカートリッジにロード 反応混合物は自然落下でロードされます

充塡剤を極性有機溶媒でコンディショニング(反応で用いた極性有機溶媒が望ましい)

その後、水 75%以上を含む有機/水溶媒を用いて平衡化

一般的なプロトコル―メタノールでコンディショニング後、水で平衡化

反応混合物をカートリッジにロード 反応混合物は自然落下によりロードされる

一般的なプロトコル―水:有機溶媒(3:1 以上)をロードここで得たフラクションには高極性化合物が含まれる

目的成分ではなく、不要な反応成分を 除去するためのステップ

一般的なプロトコル:洗浄 1―水 本フラクションには高極性化合物が含まれる洗浄 2―水:メタノール(1:1) 本フラクションには

高~中極性化合物が含まれる

強溶媒で目的成分を溶出させます

一般的なプロトコル―メタノール 本フラクションには 目的成分を含む疎水性化合物が含まれる

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オーダーインフォメーション

商品名 商品番号

6 cc フランジカートリッジ、 PoraPak Rxn CX 186004541400 mg、30 個パック PoraPak Rxn RP 1860045456 cc フランジレスカートリッジ、 PoraPak Rxn CX 186004542400 mg、30 個パック PoraPak Rxn RP 186004546

20 cc カートリッジ、2 g、20 個パック PoraPak Rxn CX 186004543

PoraPak Rxn RP 186004547

60 cc カートリッジ、5 g、10 個パック PoraPak Rxn CX 186004544 PoraPak Rxn RP 186004548

バルク、コンテナあたり 200 mL PoraPak Rxn CX 186004569

PoraPak Rxn RP 186004570

還元的アミノ化混合物のクリーンアップ 還元的アミノ化は、医薬品合成ラボで一般的に用いられている反応です。この例では、PoraPak Rxn CX カートリッジを用いて反応混合物を分画しています。

RH –H2O +H2

HR

NR'

O+C

R

R NC R'R

R'HN

CR

H

UPLC 条件

装置 : ACQUITY UPLC System

カラム : ACQUITY UPLC BEH Shield RP18、

2.1 X 100 mm、1.7 µm

カラム商品番号 : 186004049

移動相 A : 0.01%ギ酸

移動相 B : 100%アセトニトリル

グラジエントおよび流速 : Time Flow Rate A(%) B(%) Curve

(min) (mL/min)

Initial 0.42 95 5 Initial

7 0.42 1 99 6

注入量 : 2 µL

カラム温度 : 30 ºC

検出器 : ACQUITY UPLC PDA

UV 波長 : 250-340 nm (total absorbance mode)

0.0

2.0e-1

4.0e-1

6.0e-1

8.0e-1

1.0

1.2

1.4

1.6

1.8

2.0

2.2

2.4

2.6

2.8

3.0

0.0

5.0e-1

1.0

1.5

0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 Min

0.0

5.0e-1

1.0

1.5

2.0

2.5

0.0

5.0e-1

1.0

1.5

2.0

2.5

Catch and Elute 手法で反応混合物をクリーンアップすることにより、少数の画分を迅速に採取し、目的成分検出の確実性を手軽に高めることが可能です。目的成分画分を分析して確認したのち、揮発性溶出溶媒のエバポレートを実施してください。

1- ナフトアルデヒド(NA) DCE 中のナトリウムトリアセトキシボロヒドリド

4- メチルベンジルアミン(MBA) N-( ナフチルメチル ) メトキシベンジルアミン(生成物)

クリーンアップ前の反応混合物

未精製の反応混合物 目的化合物~合成産物、高濃度のアルデヒドとともに、低濃度の MBA(開始アミン)が存在しています

1- ナフトアルデヒド

ロード画分中の NA 収率 :71%

洗浄画分中の NA 収率:11%

洗浄画分中の 目的成物収率:10%

脱離画分中の 目的成分収率:78%

ロード画分中の 目的成分収率:3%

目的成分 (収率 80%以上)

MBA

カートリッジをメタノールで洗浄したこのフラクションにも、続けてアルデヒドが溶出しています

カートリッジを濃アンモニア水を 5% 加えたメタノールで脱離操作すると、すべての塩基性化合物が溶出しますこのフラクションに目的成分が含まれています

ロード時にカートリッジを通過した画分には、陽イオン交換で保持されないアルデヒドが含まれています

ロード時の素通り画分

洗浄

脱離

コンディショニング100%メタノール

ロード

洗浄100%メタノール

脱離濃アンモニア水を

5% 加えたメタノール

Catch and Elute 手法手順:

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製品仕様 以下の表は、ロード量、流速、洗浄および脱離溶媒量のガイドラインとなるものです。 これらの表は、カートリッジの寸法やベッドボリュームを考慮したもので、適切な流速およびコンディショニング・洗浄・溶出ステップの容量を示しています。

最大容量ガイドライン PoraPak Rxn RP PoraPak Rxn CX カートリッジ 中性化合物キャパシティー 塩基性化合物キャパシティー

6 cc - 150 mg 15 mg/50 µmole 15 mg/50 µmole6 cc - 400 mg 40 mg/150 µmole 40 mg/150 µmole20 cc - 2 g 200 mg/350 µmole 200 mg/350 µmole60 cc - 5 g 500 mg/2000 µmole 500 mg/2000 µmole

 ここに記載している容量は、反応に関わる化合物のうち、保持される全化合物の合計を 示しています。陽イオン交換の場合は、生成物と反応物を含む反応混合物中の全塩基性化合物の合計を示しています。

 化合物の漏出を防ぐためには、ロード量を最大容量ガイドラインよりも少なくするか、 充塡量の多いカートリッジを使用してください。

流速ガイドライン (mL/min)

6 cc カートリッジ 2 mL/min20 cc カートリッジ 5 mL/min60 cc カートリッジ 9 mL/min

この流速ガイドラインは、ロード流速を示すものです。

 反応混合物は、自然落下によりカートリッジにロードされます。流速が遅い場合には、若干の圧力を加えるか吸引することにより、スピードが上がります。反応容器に沈殿物がある場合は、 ロード溶媒で容器を洗浄し、カートリッジ上部に追加してください。 洗浄ステップの際に、沈殿物に捕捉された生成物が溶解する可能性がありますが、これは 充塡ベッドに保持され、のちに適切な溶媒条件で溶出できます。

洗浄および溶出量 (mL) カートリッジ コンディショニング 洗浄 溶出

6 cc - 150 mg 3 mL 4 mL 4 mL6 cc - 400 mg 5 mL 10 mL 10 mL20 cc - 2 g 20 mL 20 mL 20 mL60 cc - 5 g 45 mL 45 mL 45 mL

 この表は、各サイズの PoraPak Rxn について、コンディショニング・洗浄・脱離ステップで使用する液量のガイドラインを示しています。

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クリーンアップの課題

課題 解決策

次の反応ステップへ進む前の高沸点溶媒の 変換または除去――生成物が塩基性の場合

PoraPak Rxn CX カートリッジに反応混合物をロードし、DMSO などの沸点の高い溶媒を素通りさせるメタノールで洗浄後、濃アンモニア水を 5% 加えたメタノールを用いて脱離次のステップへ進む前に沸点の低いメタノールに置換し蒸発除去することにより、サンプルを濃縮し、時間を節約

反応物および反応溶媒からの 塩基性生成物の分離

PoraPak Rxn CX カートリッジにロードメタノールで洗浄後、濃アンモニア水を 5% 加えたメタノールで脱離

反応に使用した TFA を 塩基性生成物から除去

反応混合物を PoraPak Rxn CX カートリッジにロードTFA は保持されずに通過メタノールで洗浄後、濃アンモニア水を 5% 加えたメタノールで脱離

分取 LC の前に合成で用いた溶媒を 移動相へ置換―生成物が塩基性の場合

PoraPak Rxn CX カートリッジにロードメタノールで洗浄後、濃アンモニア水を 5% 加えたメタノールで脱離フラクションを蒸発させ、生成物を分取 LC 開始移動相に再溶解

分取 LC で集めたフラクションから水分を 除去し、迅速に乾固―生成物が塩基性の場合

PoraPak Rxn CX カートリッジにロードメタノールで洗浄後、濃アンモニア水を 5% 加えたメタノールで脱離

脱離洗浄ロードコンディショニング

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Sep-Pak 固相選択チャート逆相

特性 アプリケーション 仕様

C18 Si(CH3)2C18H37

シリカベースの充塡剤で強い疎水性を持ち、水溶液中の弱疎水性化合物も抽出可能です。

以下のアプリケーション他に使用されます。• 血清、血漿、尿中の医薬品及びその代謝物• ペプチドの脱塩• 水環境中の微量有機化合物抽出• 飲料中の有機酸• 逆相 HPLC カラムと同様の挙動

1. 粒径 – 55-105 µm2. 細孔径 – 125Å3. 比表面積 – 325 m2/g4. カーボンロード – 12%

tC18 SiC18H37

シリカベースの充塡剤で強い疎水性を持ちます。 ト リ フ ァ ン ク シ ョ ナ ル 結 合 の 充 塡 剤 で す。 加水分解に安定です。

C18 と同様 1. 粒径 – 37-55 µm 3. 比表面積 – 325 m2/g2. 細孔径 – 125Å  4. カーボンロード – 17%

C8 Si(CH3)2C8H17

シ リ カ ベ ー ス の 充 塡 剤 で 穏 や か な 疎 水 性 を 持ち C18 よ り も 弱 い 保 持 を 必 要 と す る 場 合 に 使用します。

以下のアプリケーション他に使用されます。• 血清、血漿、尿中の医薬品及びその代謝物• 血清中ペプチド

1. 粒径 – 37-55 µm 3. 比表面積 – 325 m2/g2. 細孔径 – 125Å  4. カーボンロード – 9%

tC2 SiC2H5

シ リ カ ベ ー ス の 充 塡 剤 で 弱 い 疎 水 性 を 持 ち C8 よりも弱い保持を必要とする場合に使用します。

C18, C8 と同様 1. 粒径 – 37-55 µm 3. 比表面積 – 325 m2/g2. 細孔径 – 125Å  4. カーボンロード – 2.7%

逆相 / 順相

Amino Propyl

Si(CH2)3NH2

シリカベースの極性担体に塩基性の官能基が 結合しています。Silica のように極性担体として用いますが、酸性・塩基性化合物に対して異なる選択性を示し、水系アプリケーションでは弱アニオン交換の働きをします。

以下のアプリケーション他に使用されます。• フェノール類、フェノール系色素• 石油分留物• 糖類• 医薬品とその代謝物

1. 粒径 – 55-105 µm2. 細孔径 – 125Å3. 比表面積 – 325 m2/g4. カーボンロード – 3.5%

Cyano Propyl

Si(CH3)(CH2)3(CN)

シリカベースの極性担体です。順相で用いるとSilica よりも極性が弱く、逆相で用いると C18, C8

よりも疎水性が弱い充塡剤です。

以下のアプリケーション他に使用されます。• 医薬品• 医薬品代謝物• 農薬類

1. 粒径 – 55-105 µm2. 細孔径 – 125Å3. 比表面積 – 325 m2/g4. カーボンロード – 6.5%

Diol

Si(CH2)3OCH2CH(OH)CH2OH

シ リ カ ベ ー ス の 極 性 担 体 に 中 性 の 官 能 基 が 結合しています。Silica の酸性基が望ましくない場合に Silica の代わりに用いる事ができます。 水系アプリケーションでは非常に弱い相互作用を示します。

以下のアプリケーション他に使用されます。• 化粧品中抗生物質• タンパク質及びぺプチドの疎水クロマトグ

ラフィー分離

1. 粒径 – 37-55 µm2. 細孔径 – 125Å3. 比表面積 – 325 m2/g4. カーボンロード – 9%

Sep-Pak 固相抽出製品

順相

Silica

SiO2

極性充塡剤で非極性溶媒(炭化水素や塩素系有機 溶 媒、 フ ッ 素 系 有 機 溶 媒、 極 性 の 低 い エ ステル類及びエーテル類など)から化合物を抽出する場合のファーストチョイスとなります。 脱離は極性の高い溶媒(極性エーテル及びエステル、アルコール類、アセトニトリル、水など)で行います。結合のメカニズムは水素結合または双極子間相互作用に基づきます。また Silica は水系アプリケーションではカチオン交換の働きもします。カチオン交換の強さは中程度です。

以下のアプリケーション他に使用されます。• 順相全般

1. 粒径 – 55-105 µm2. 細孔径 – 125Å3. 比表面積 – 325 m2/g4. 活性度 – high

Alumina (A, B & N)

Al2O3

Silica と似た目的で使用します。高活性のアルミナ充塡剤で、酸性・中性・塩基性があります。芳香族炭化水素のπ電子とも特異的相互作用があります。高 pH 条件で Silica よりも安定です。

以下のアプリケーション他に使用されます。• 原油分留物• 酸性及び塩基性アルミナは低キャパシティー

のイオン交換体としても使用可能

1. 粒径 – 50-300 µm2. 細孔径 – 120Å3. 活性度 – high• Al N pH – 7.5• Al A pH – 4.5• Al B pH – 10.0

Florisil

MgO3Si

極性があり高活性で弱塩基性の充塡剤です。非水系溶媒中の低・中極性化合物を吸着します。

以下のアプリケーション他に使用されます。• AOAC 及 び 米 国 環 境 保 護 局 (US.EPA) の

農薬分析公定法• トランスオイル中の PCB 類

1. 粒径 – 50-200 µm2. 細孔径 – 60Å3. 活性度 – high

イオン交換

Accell Plus QMA

強陰イオン交換体

C(O)NH(CH2)3N(CH3)3+ Cl-

シリカベースの親水性・強陰イオン交換充塡剤でポアサイズが大きいことが特徴です。水系及び非水系溶液中の陰イオン性化合物の抽出に使用します。

以下のアプリケーション他に使用されます。• イムノグロブリン、酵素等の酸性タンパク

質の単離• ワイン、果汁、食品からの酸性色素の除去、

フェノール類の単離• ペプチド分画

1. 粒径 – 37-55 µm2. 細孔径 – 300Å3. カーボンロード – 6%4. 対イオン – Cl5. 使用 pH 範囲 2-9

6. キャパシティー – 200 mg BSA / gram sorbent

7. イオン交換容量 – 1.8-2.8 µeq/m2

8. イオン交換基結合 密度 – 220 µmoles/g

Accell Plus CM

弱陽イオン交換体

CO2-Na+

シリカベースの親水性・弱陽イオン交換充塡剤でポアサイズが大きいことが特徴です。水系及び非水系溶液中の陽イオン性化合物の抽出に使用します。

以下のアプリケーション他に使用されます。• 塩基性タンパク質の単離• 農薬類• 除草剤類• ステロイド類

1. 粒径 – 37-55 µm2. 細孔径 – 300Å3. カーボンロード – 5.5%4. 対イオン – Na5. 使用 pH 範囲 2-9

6. キャパシティー –175mg Cytochrome C / gram sorbent

7. イオン交換容量 – 3.1-4.2 µeq/m2

8. イオン交換基結合 密度 – 350 µmoles/g

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サンプル前処理

専用 Sep-Pak

商品名 商品詳細 商品番号 充塡量 / 容量 / ボディタイプ 充塡剤

Sep-Pak Dry 硫酸ナトリウム

固相抽出液中の脱水に使用 WAT054265 50 個入り

2.85 g / 1.6 mL / Plus ロングボディー

1. 2.85 g 無水硫酸ナトリウム

オゾンスクラバー沃化カリウム

カルボニル化合物分析におけるオゾンの妨害を除去するために使用。Sep-Pak DNPH または XPoSure カートリッジの 手前に接続して使用。

WAT054420 20 個入り

1.4 g / 1.6 mL / Plus ショートボディー

1. 1.4 g 沃化カリウム2. 4.2 mmole のオゾンを除去

Porapak RDXジビニルベンゼン -ビニルピロリドン

地表水及び地下水中の爆発物測定用。米国環境保護局 (US.EPA) メソッド 8330 と同等以上の性能。使用有機溶媒量を1/10 に削減。ジビニルベンゼン / ビニルピロリドン共重合体

WAT047220 30 個入り

500 mg / 1 mL / 6cc Vac ボディー 1. 粒径 125-150 µm2. ポアサイズ 200Å

Sep-Pak DNPH Silicaショートボディ

酸処理ジニトロフェニルヒドラジン含浸シリカゲル使用。 気中アルデヒド及びケトン類の測定に使用。アルデヒド類、ケトン類はヒドラゾン誘導体として得られ、HPLC で分析される。厚生労働省、環境省及び米国環境保護局公定法準拠。

WAT037500 20 個入り

350 mg / 0.7 mL / Plus ショートボディー

1. 粒径 - 55-105 µm2. ポアサイズ 125Å3. DNPH 含有量:14 µmol/g, 5 µmol/

カートリッジ

Sep-Pak DNPH Silica ロングボディ

酸処理ジニトロフェニルヒドラジン含浸シリカゲル使用。 気中アルデヒド及びケトン類の測定に使用。アルデヒド類、ケトン類はヒドラゾン誘導体として得られ、HPLC で分析される。汚染源調査に適する。厚生労働省、環境省及び米国環境保護局公定法準拠。

WAT039550 20 個入り

800 mg / 1.6 mL/ Plus ロングボディー

1. 粒径 - 55-105 µm2. ポアサイズ 125Å3. DNPH 含有量:14 µmol/g, 10 µmol/

カートリッジ

XPoSureアルデヒドサンプラー

大粒径 DNPH 含浸シリカゲル使用。小型ポンプまたはパッシブサンプリングによる室内空気中アルデヒド類モニタリング、個人暴露量調査等に使用。厚生労働省、環境省及び米国環境保護局公定法準拠。

WAT047205 20 個入り

350 mg / 0.7 mL / Plus ショートボディー

1. 粒径 500-1000 µm2. ポアサイズ 125Å3. DNPH 含有量:14 µmol/g, 5/

カートリッジ

Sep-Pak AC2高純度活性炭

低灰分活性炭を Sep-Pak Plus ボディーに充塡。水中および食品中の高極性農薬等の抽出に使用。PS2 との直列使用による水道水中 1,4- ジオキサン抽出法(厚生労働省告示法)準拠。

JJAN20229 50 個入り

400 mg / 0.7 mL / Plus ショートボディー

1. 粒径 85 µm

Sep-Pak PS2スチレンジビニルベンゼン

スチレンジビニルベンゼン共重合体を Sep-Pak Plus ショートボディーに充塡。水中農薬の抽出に使用。厚生労働省公定法準拠。

JJAN20131 50 個入り

265 mg / 0.8 mL / Plus ショートボディー

1. 粒径 50 µm

Sep-Pak Carbon/NH2

グラファイトカーボン 500mg とアミノプロピル (NH2) シリカ500mg を積層充塡。食品中残留農薬精製に使用。厚生労働省公定法準拠。

186003369 30 個入り

500mg carbon black, 500mg NH2 / 1.4mL / 6cc Vac ボディー

1. carbon black 粒径: 37-105 µm2. NH2 粒径: 55-105 µm

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サンプル前処理

www.waters.com40 サンプル前処理

PlusShort

PlusLong

PlusLight

ClassicShort/Long

Vac 1 cc/50 mg

Vac 1 cc/100 mg

Vac RC/100 mg

固相50/box

Part No./ Mass/Volume*

50/box

Part No./ Mass/Volume*

50/box

Part No./ Mass/Volume*

50/box

Part No./ Mass/Volume*

100/box

Part No./ Volume*

100/box

Part No./ Volume*

50/box

Part No./ Volume*

C18WAT020515

360 mg/0.7 mLWAT023635

820 mg/1.6 mLWAT023501

130 mg/0.3 mLWAT051910

360 mg/0.85 mLWAT054955

0.13 mLWAT023590

0.2 mLWAT036935

0.2 mL

tC18WAT036810

400 mg/0.8 mLWAT036800

900 mg/1.4 mLWAT036805

145 mg/0.4 mL— WAT054960

0.11 mLWAT036820

0.25 mLWAT043410

0.25 mL

C8WAT036775

400 mg/0.8 mL— WAT036770

145 mg/0.4 mL— WAT054965

0.11 mLWAT036785

0.25 mLWAT043415

0.25 mL

tC2WAT052720

400 mg/0.8 mL— WAT052725

145 mg/0.4 mL— — WAT052710

0.25 mL—

Silica — WAT020520 690 mg/1.6 mL

WAT023537 120 mg/0.4 mL

WAT051900 690 mg/2.0 mL

WAT054980 0.15 mL

WAT023595 0.25 mL

WAT0369400.25 mL

Florisil — WAT020525 910 mg/1.4 mL

WAT023543 145 mg/0.3 mL

WAT051960 900 mg/1.7 mL

WAT054985 0.12 mL

WAT023600 0.2 mL

Accell Plus CM WAT020550360 mg/0.8 mL

— WAT023531 130 mg/0.4 mL

WAT010910 360 mg/1.1 mL

— WAT023625 0.25 mL

Accell Plus QMA WAT020545 360 mg/0.8 mL

— WAT023525130 mg/0.4 mL

WAT010835360 mg/1.1 mL

— WAT023620 0.25 mL

WAT0434600.25 mL

Alumina A — WAT020500 1710 mg/1.2 mL

WAT023549 280 mg/0.35 mL

WAT051800 1850 mg/1.8 mL

— WAT023575 0.1 mL

Alumina B — WAT020505 1710 mg/1.2 mL

WAT023555 280 mg/0.35 mL

WAT051820 1850 mg/1.8 mL

— WAT023580 0.1 mL

Alumina N — WAT020510 1710 mg/1.2 mL

WAT023561 280 mg/0.35 mL

WAT051810 1850 mg/1.8 mL

— WAT023585 0.1 mL

Amino Propyl (NH2) WAT020535 360 mg/0.7 mL

— WAT023513 130 mg/0.3 mL

WAT010830 360 mg/0.85 mL

— WAT023610 0.2 mL

WAT0434750.2 mL

PSA 186004538360 mg/0.7 mL

— 186004578130 mg/0.3 mL

186004560360 mg/0.85 mL

1860045620.1 mL

1860045610.2 mL

1860045670.2 mL

Cyano Propyl (CN) WAT020540 360 mg/0.7 mL

— WAT023507 130 mg/0.3 mL

WAT010823 360 mg/0.85 mL

WAT054975 0.13 mL

WAT0236150.2 mL

Diol WAT020530360 mg/0.8 mL

WAT023519 130 mg/0.4 mL

— — WAT023605 0.25 mL

WAT0434800.25 mL

Sep-Pak セレクションガイド

Sep-Pak 96 ウェル プレート

商品名 商品番号

Sep-Pak tC18 25 mg プレート 186002319

Sep-Pak tC18 40 mg プレート 186002320

Sep-Pak tC18 100 mg プレート 186002321

Sep-Pak Accell™ Plus QMA 100 mg プレート 186001917

Sep-Pak C18 40 mg プレート 186003966

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サンプル前処理

www.waters.com 41サンプル前処理

サンプル前処理

Vac 3 cc/200 mg

Vac 3 cc/500 mg

Vac RC/500 mg

Vac 6 cc/500 mg

Vac 6 cc/1 g

Vac 12 cc/ 2 g

Vac 20 cc/5 g

Vac 35 cc/10 g

50/box

Part No./ Volume*

50/box

Part No./ Volume*

50/box

Part No./ Volume*

30/box

Part No./ Volume*

30/box

Part No./ Volume*

20/box

Part No./ Volume*

20/box

Part No./ Volume*

10/box

Part No./ Volume*

WAT054945 0.42 mL

WAT020805 0.8 mL

WAT036945 0.8 mL

WAT043395 1.2 mL

WAT036905 2.0 mL

WAT036915 3.6 mL

WAT036925 8.0 mL

WAT04334516.8 mL

WAT054925 0.34 mL

WAT036815 1.0 mL

WAT043425 1.0 mL

WAT036790 1.1 mL

WAT036795 1.9 mL

WAT043380 3.5 mL

WAT043365 7.8 mL

WAT04335016.3 mL

WAT054940 0.34 mL

WAT036780 1.0 mL

WAT043430 1.0 mL

WAT054525 1.1 mL

WAT054570 1.9 mL

WAT054615 3.5 mL

WAT054660 7.8 mL

WAT05470016.3 mL

— WAT052715 1.0 mL

— — WAT052705 1.9 mL

— — —

WAT054930 0.53 mL

WAT020810 1.2 mL

WAT036950 1.2 mL

WAT043400 1.2 mL

WAT036910 1.9 mL

WAT0369203.9 mL

WAT036930 11.0 mL

WAT04335523.4 mL

— WAT0208150.8 mL

WAT043435 0.8 mL

WAT043405 1.2 mL

WAT043390 2.0 mL

WAT043385 3.6 mL

WAT043370 8.0 mL

WAT04336016.8 mL

— WAT020855 1.1 mL

WAT054505 1.1 mL

WAT0545451.2 mL

WAT054590 1.9 mL

WAT054635 3.5 mL

WAT054675 7.8 mL

WAT05472016.3 mL

— WAT020850 1.1 mL

WAT054500 1.1 mL

WAT054550 1.2 mL

WAT054595 1.9 mL

WAT054640 3.5 mL

WAT054680 7.8 mL

WAT05472516.3 mL

— WAT020820 0.4 mL

— WAT054535 0.5 mL

WAT054580 0.8 mL

WAT054620 1.8 mL

WAT054670 3.9 mL

WAT0547108.2 mL

— WAT020825 0.4 mL

— WAT054540 0.5 mL

WAT054585 0.8 mL

WAT054625 1.8 mL

WAT054665 3.9 mL

— WAT020830 0.4 mL

WAT0434850.4 mL

WAT054530 0.5 mL

WAT054575 0.8 mL

WAT054630 1.8 mL

WAT043375 3.9 mL

WAT0547058.2 mL

— WAT020840 0.8 mL

WAT054515 0.8 mL

WAT054560 1.2 mL

WAT054605 2.0 mL

WAT054650 3.6 mL

WAT054695 8.0 mL

WAT05474016.8 mL

— 1860045360.8 mL

1860045680.8 mL

1860045631.2 mL

186004537 2.0 mL

1860045643.6 mL

1860045658.0 mL

18600456616.8 mL

WAT054935 0.42 mL

WAT020835 0.8 mL

— WAT054555 1.2 mL

WAT054600 2.0 mL

WAT054645 3.6 mL

WAT054685 8.0 mL

WAT05473016.8 mL

— WAT020845 1.0 mL

WAT054520 1.0 mL

WAT054565 1.1 mL

WAT054610 1.9 mL

WAT054655 3.5 mL

— —

Sep-Pak µElution プレート

商品名 商品番号

Sep-Pak tC18 µElution プレート 186002318

*Hold up volume

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サンプル前処理

www.waters.com42 サンプル前処理

 Sep-Pak カートリッジとして長年信頼を得てきた充塡剤が、Sep-Pak 96 ウェルプレートとしてご利用いただけるようになりました。何百ものサンプルを処理したいというニーズにお応えします。このプレートはほとんどのバキュームマニホールド、ロボットシステム、自動サンプル処理システムでご使用いただけます。また充塡量も複数ラインアップされていますので、サンプル量にあわせてお選びください。

 Sep-Pak 96 ウェルプレートには厳しい品質管理を実施しています。 いずれのプレートにも、シリカ原料および結合相の試験結果を記載した品質証明書が添付されています。ロットごとに結合状態、清浄性、 クロマトグラフィー選択性について試験を実施しています。また 96 ウェル全体にムラなく安定したフロー、充塡量となるようプレートの製造、試験を実施しています。

 Sep-Pak tC18 も µElution プレート(特許申請中)でご利用いただけるようになりました。このプレートは微量サンプル用の設計となっています。本プレートからの溶出量は、推奨プロトコールで 25 µL の溶媒量で目的成分が抽出され、エバポレートすることなく直接分析が可能になります。

 96 ウェルプレートの各ウェルは 2 段構造(2- ステージウェル)にデザインされています。これは各種充塡量に適するよう考案されたものです。下段は径が小さく、充塡量の少ない場合に適しています。 固相充塡部の直径と高さの比が適切であるため、サンプルの分布状態、 及び分画性能が最適化されます。また、ウェル上段は径が大きくなっており、充塡量が多い場合は下段および上段を使用し、サンプルの 分布状態、分画性能が大量サンプル注入に最適なものとなっています。

Sep-Pak 96 ウェルプレート

商品名 商品番号

Sep-Pak tC18 µElution プレート 186002318Sep-Pak tC18 25 mg プレート 186002319Sep-Pak tC18 40 mg プレート 186002320Sep-Pak tC18 100 mg プレート 186002321Sep-Pak Accell Plus QMA 100 mg プレート 186001917

Waters 96 ウェルプレートのデザイン

5 mg 10 mg 60 mg

フリッツサイズとその位置を変えることでどの充塡 量にも適応できるため、 同一の形状のプレートを 利用することができます。このウェル形状により、 充塡量が少なくても、良好 な回収率が得られます。

Sep-Pak 96 ウェル 固相抽出プレート

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サンプル前処理

www.waters.com 43サンプル前処理

サンプル前処理

Sep-Pak プラス ●セップパックの標準品

商品名 充塡量(mg) カートリッジ数 商品番号

C18 360 50 WAT020515tC18 400 50 WAT036810C8 400 50 WAT036775tC2 400 50 WAT052720CN 360 50 WAT020540Diol 360 50 WAT020530NH2 360 50 WAT020535Accell CM 360 50 WAT020550Accell QMA 360 50 WAT020545Alumina A 1710 50 WAT020500Alumina N 1710 50 WAT020510Alumina B 1710 50 WAT020505Florisil 910 50 WAT020525Silica 690 50 WAT020520

Sep-Pak ライト ●微量サンプル用 ●ベット容量 300 µL

商品名 充塡量(mg) カートリッジ数 商品番号

C18 130 50 WAT023501tC18 145 50 WAT036805C8 145 50 WAT036770tC2 145 50 WAT052725CN 130 50 WAT023507Diol 130 50 WAT023519NH2 130 50 WAT023513Accell CM 130 50 WAT023531Accell QMA 130 50 WAT023525Alumina A 280 50 WAT023549Alumina N 280 50 WAT023561Alumina B 280 50 WAT023555Florisil 145 50 WAT023543Silica 120 50 WAT023537

Sep-Pak プラス ENV シリーズ

● ENV は Environment の略です。Sep-Pak プラスの約 2 倍の充塡量で、特に 大容量のサンプルを処理したい場合やサンプル量が多い場合に適しています。

商品名 充塡量(mg) カートリッジ数 商品番号

tC18 900 50 WAT036800C18 820 50 WAT023635

Sep-Pak(オリジナルまたはクラシック)

商品名 充塡量(mg) カートリッジ数 商品番号

C18 360 50 WAT051910CN 360 50 WAT010823Diol 360 50 WAT010818NH2 360 50 WAT010830Accell CM 360 50 WAT010910Accell QMA 360 50 WAT010835Alumina A 1850 50 WAT051800Alumina N 1850 50 WAT051810Alumina B 1850 50 WAT051820Florisil 900 50 WAT051960Silica 690 50 WAT051900

バックフラッシュ溶出法

 カートリッジ型 Sep-Pak は、デッドボリュームが少ない構造のため上下どちらからでも通液できます。この特性を利用してサンプル注入後、逆の方向から溶離液を流す手法がバックフラッシュ溶出法です。 サンプルが溶出するまでの移動距離が短く、少ない溶離液で効率的に目的物を回収できるという利点があります。

サンプル

アダプター

目的物

溶離液

バックフラッシュにはアダプター(フィーメール / フィーメールカップラー)が必要です。(P/N WAT011422:100 コ入り)

 前処理の目的、マトリックスによりますが、保持力の高いサンプルには効果的です。ご使用目的にあわせてお試しください。

カートリッジ型 Sep-Pak

オリジナル型 Sep-Pak

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サンプル前処理

www.waters.com44 サンプル前処理

Sep-Pak Vac  100mg/1cc、200mg/3cc、 500mg/3cc

1Box 500 個入り /Box商品名 充塡量(mg) 個数

商品番号 商品番号

C18 100 100 WAT023590 200 50 WAT054945 500 50 WAT020805tC18 100 100 WAT036820 200 50 WAT054925 WAT094289 500 50 WAT036815 WAT094290C8 100 100 WAT036785 200 50 WAT054940 500 50 WAT036780tC2 100 100 WAT052710 500 50 WAT052715CN 100 100 WAT023615 200 50 WAT054935 500 50 WAT020835Diol 100 100 WAT023605 500 50 WAT020845NH2 100 100 WAT023610 500 50 WAT020840Accell CM 100 100 WAT023625 500 50 WAT020855Accell QMA 100 100 WAT023620 500 50 WAT020850Alumina A 100 100 WAT023575 500 50 WAT020820Alumina N 100 100 WAT023585 500 50 WAT020830Alumina B 100 100 WAT023580 500 50 WAT020825Florisil 100 100 WAT023600 500 50 WAT020815Silica 100 100 WAT023595 200 50 WAT054930 500 50 WAT020810

大量処理用 Sep-Pak Vac 特に大量のサンプルを処理したい場合、充 塡 量 が 0.5g、1g、2g、5g、10g の ものがあります。また、サンプルの容量に 合わせてシリンジ容量もお選び下さい。

Sep-Pak Vac 500mg/6cc、1g/6cc

商品名 個数 商品番号

500mg/6ccC18 30 WAT043395tC18 30 WAT036790C8 30 WAT054525CN 30 WAT054555Diol 30 WAT054565NH2 30 WAT054560Accell CM 30 WAT054545Accell QMA 30 WAT054550Alumina A 30 WAT054535Alumina N 30 WAT054530Alumina B 30 WAT054540Florisil 30 WAT043405Silica 30 WAT0434001g/6cc C18 30 WAT036905tC18 30 WAT036795C8 30 WAT054570tC2 30 WAT052705CN 30 WAT054600Diol 30 WAT054610NH2 30 WAT054605Accell CM 30 WAT054590Accell QMA 30 WAT054595Alumina A 30 WAT054580Alumina N 30 WAT054575Alumina B 30 WAT054585Florisil 30 WAT043390Silica 30 WAT036910

*サイズの表示方法:充塡量(mg または g)/シリンジの容量(cc)

Sep-Pak Vac 50mg/1cc 〜微量サンプル用〜

商品名 個数 商品番号

C18 100 WAT054955tC18 100 WAT054960C8 100 WAT054965Silica 100 WAT054980Florisil 100 WAT054985CN 100 WAT054975

 より微量のサンプル処理に、小さいシリンジタイプをご用意しました。エキストラクションマニホールドを用いた減圧方式で、多検体処理が効率良く簡単にできます。

• 溶媒使用量の削減

• 廃液処理コストの削減

• 前処理時間の短縮

シリンジ型 Sep-Pak 

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サンプル前処理

www.waters.com 45サンプル前処理

サンプル前処理

Sep-Pak Vac 2g/12cc

商品名 個数 商品番号

C18 20 WAT036915tC18 20 WAT043380C8 20 WAT054615CN 20 WAT054645Diol 20 WAT054655NH2 20 WAT054650Accell CM 20 WAT054635Accell QMA 20 WAT054640Alumina A 20 WAT054620Alumina N 20 WAT054630Alumina B 20 WAT054625Florisil 20 WAT043385Silica 20 WAT036920

Sep-Pak Vac 5g/20cc

商品名 個数 商品番号

C18 20 WAT036925tC18 20 WAT043365C8 20 WAT054660CN 20 WAT054685NH2 20 WAT054695Accell CM 20 WAT054675Accell QMA 20 WAT054680Alumina A 20 WAT054670Alumina N 20 WAT043375Alumina B 20 WAT054665Florisil 20 WAT043370Silica 20 WAT036930

Sep-Pak Vac 10g/35cc

商品名 個数 商品番号

C18 10 WAT043345tC18 10 WAT043350C8 10 WAT054700CN 10 WAT054730NH2 10 WAT054740Accell CM 10 WAT054720Accell QMA 10 WAT054725Alumina A 10 WAT054710Alumina N 10 WAT054705Florisil 10 WAT043360Silica 10 WAT043355

Sep-Pak RC

  充 塡 量 は 100mg、500mg の2 種類です。ファネルの容量は約18mL でサンプル容量が多い場合に便利です。

商品名 個数 商品番号

100mgC18 50 WAT036935tC18 50 WAT043410C8 50 WAT043415NH2 50 WAT043475Accell QMA 50 WAT043460Silica 50 WAT036940

商品名 個数 商品番号

500mgC18 50 WAT036945tC18 50 WAT043425C8 50 WAT043430tC2 50 WAT054995CN 50 WAT054510Diol 50 WAT054520NH2 50 WAT054515Accell CM 50 WAT054505Accell QMA 50 WAT054500Alumina N 50 WAT043485Florisil 50 WAT043435Silica 50 WAT036950

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サンプル前処理

www.waters.com46 サンプル前処理

農薬分析に実績ある Sep-Pak PS-22 次的インターラクションがない逆相タイプの Sep-Pak です。

特長

• 塩基性物質に最適です。 シラノール基への吸着がなく、少ない液量で高い回収率が得られます。

• キレート性物質に最適です。 微量金属イオンとの影響がなく、高い回収率が得られます。

• 幅広い使用 pH 範囲 pH1-13 耐アルカリ性、耐酸性にすぐれ、幅広い pH 範囲でご使用いただけます。

PS-1 & PS-2

 スチレンジビニルベンゼン共重合体を使用したキャパシティーの大きなタイプです。

商品名 充塡量(mg) 個数 商品番号

PS-1 Plus 265 50 JJAN20123PS-1 Vac 100/3cc 50 JJAN20143PS-1 Vac 200/3cc 50 JJAN20144PS-2 Vac 100/1cc 100 JJAN20147PS-2 Vac 200/3cc 50 JJAN20151PS-2 Vac 500/3cc 30 JJAN20148PS-2 Vac 500/6cc 30 WAT200610

PS-2 Plus 農薬分析用(水道法準拠)

 PS-2 は、厚生労働省の水道水質試験法で採用されたスチレンジビニルベンゼン共重合体を充塡した固相抽出カートリッジです。全国的な使用実績を持ち、水道水をはじめ環境水、排水、下水、廃棄物などの各方面で農薬分析用として採用されております。農薬であるチウラムにて添加回収試験を実施。各箱にインスペクションレポートが添付 されています。

充塡量

50 個入り /Box 500 個入り /Box商品名

(mg) 商品番号 商品番号

PS-2 Plus 265 JJAN20131 JJAN20226

* ウォーターズでは水質分析マニュアルを用意しております。ご希望の方は最寄りの 営業所へご連絡ください。* 500 個入り /Box は 10 個入り ×50 袋となっています。

ポリマー充塡剤 Sep-Pak PS-2

PoraPak RDX 水中爆発物測定用(EPA Method8330 適応)

 PoraPak RDX は EPA Method8330 に適応した水中の爆発物測定用に開発された新しい充塡剤です。特殊な洗浄工程により、充塡剤のバックグラウンドを低く抑え、ppb レベルの高感度分析を可能に しました。ニトロ化合物に抜群の回収率を示します。

PFAS 分析用品質証明付き Oasis WAX

PFAS 分析用品質証明付き Oasis WAX

• PFAS 分析のために 32 種の PFAS による品質検査を行っ た製品です。

• ISO、EPA、ASTM に対応。

商品名 充塡量 個数 商品番号

Porapak RDX 500mg/6cc 30 WAT047220

平成11年度

日本水環境学会技術賞受賞

商品名 粒子径 個数 商品番号

Oasis WAX for PFAS Analysis 6 cc Vac Cartridge, 150mg Sorbent per Cartridge 30µm 30 186009345Oasis WAX for PFAS Analysis 6 cc Vac Cartridge, 150mg Sorbent per Cartridge 30µm 300 186009344Oasis WAX for PFAS Analysis 6 cc Vac Cartridge, 500mg Sorbent per Cartridge 60µm 30 186009347Oasis WAX for PFAS Analysis 6 cc Vac Cartridge, 500mg Sorbent per Cartridge 60µm 300 186009346

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サンプル前処理

www.waters.com 47サンプル前処理

サンプル前処理

Sep-Pak AC-2 活性炭カートリッジ

 高極性物質の濃縮用に吸着/脱離効率の高い厳選された活性炭をパッキングした Sep-Pak です。極性が高く通常の固相には保持しにくい物質の濃縮、種々のクリーンアップ等にぜひお試しください。

特長

• 極性物質の濃縮が簡単・迅速に可能

• すぐれた脱離特性で高い回収率

• PS-2 とシリーズで使用することで他の農薬(疎水性物質)と同時濃縮でき、時間短縮、省力化が可能。

アセフェート前処理における従来法との比較

従来法

エバポレーターで濃縮乾固。所要時間(500mL):2 時間以上

他の農薬とは別処理が必要。2 倍の手間がかかります。

Sep-Pak AC-2

検水をカートリッジに通水。所要時間(500mL):25 分!!

PS-2 と直列に連結!!他の農薬と同時に濃縮可能!!

商品名 個数 商品番号

Sep-Pak AC-2 50 JJAN20229* 充塡量 400 ± 20mg

Sep-Pak Dry 脱水用ぼう硝カートリッジ

 サンプルの脱水をより簡単に…という要望から生まれたぼう哨(Na2SO4)入り Sep-Pak です。

特長

• 簡単に脱水

• 低いバックグラウンド

• 他のカートリッジと直列に接続可能(ルアーロック規格)

• 防湿用キャップ付き

仕様

• Sep-Pak プラスロングタイプ

• 充塡剤量:3g /カートリッジ

こんなケースにお試しください!!

• 固相抽出後の脱水 水道法規制農薬:シマジン、チオベンカルブ等 GC/MS 対象農薬

• メチル化 GC 分析の前に メコプロップなど

• 液液抽出後の脱水 水道法規制物質:トリクロロ酢酸、PCB など

• その他 GC、GC/MS 用サンプル

水中農薬を Sep-Pak PS-2 で濃縮する場合の使用例

PS-2

Dry

Sep-Pak Dry Sep-Pak PS-2

ジクロロメタン5 mLでコンディショニング

ジクロロメタン5mLメタノール5mL精製水5mL

検水通液 

ジクロロメタン6-7mLで溶出(流速は 1mL/min.程度)

2mLに濃縮

GC/MS分析

Sep-Pak Dryと連結

商品名 個数 商品番号

Sep-Pak Dry 50 WAT054265* 本品はサンプルに混入する微量の水分を除くために開発された製品です。

特殊 Sep-Pak

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サンプル前処理

www.waters.com48 サンプル前処理

アルデヒド類測定用 〜悪臭防止法・大気汚染防止法・EPA 準拠〜

〜 DNPH シリーズ〜

DNPH-silica

 Sep-Pak DNPH は、2,4-Dinitrophenylhydrazine(DNPH)をシリカ ゲルにコーティングしたカートリッジです。このカートリッジに大気や 排ガスを通すだけで簡単にホルマリン、アセトン等のカルボニル 化合物をヒドラゾン誘導体として捕集することができます。

長年の経験と実績を元に、DNPH 試薬由来のバックグラウンドを極限まで抑制。

独自の製造工程・品質管理により低いバックグラウンドの製品を提供しています。

全てのカートリッジは上下にキャップがつき、厳重に個装されています。

Sep-Pak DNPH - Silica(short body) 汎用型、一般大気用。DNPH コーティング量は 1.0mg です。低濃度のサンプルの場合にご利用ください。

Sep-Pak DNPH - Silica(long body) 発生源等、高濃度サンプルの場合にご利用ください。充塡量がshort body タイプの 2 倍で、DNPH コーティング量は 2.0mg です。

Sep-Pak XPoSure Aldehyde Sampler 室内環境測定用。充塡剤の粒子径が大きく、通気時の背圧が低いため、ポータブルポンプでも充分に通気することが可能です。

Ozone Scrubber(オゾンスクラバー) ヨウ化カリウム 1400mg を充塡。大気中アルデヒド測定の際、ラベル化を妨害するオゾンを除去します。Sep-Pak DNPH に接続して使用可能です。

オーダーインフォメーション

商品名 充塡量 個数 商品番号

Sep-Pak DNPH-silica (short body) 350 20 WAT037500Sep-Pak DNPH-silica (long body) 700 20 WAT039550XPoSure Aldehyde Sampler 350 20 WAT047205Ozone Scrubber — 20 WAT054420Sep-Pak ホルダー(ピン型) 10 JJAN20245

(パッシブサンプリング用スチロール製)Sep-Pak ホルダー(差し込み型) 10 JJAN20246

(パッシブサンプリング用スチロール製)

0 2 4 6 8 10 12 14Time (minutes)

1

2

3

4

5 6Lab Air Sample

Cartridge Blank

1. DNPH2. Formaldehyde-DNPH3. Acetalhyde-DNPH4. Acetone-DNPH5. Butanone-DNPH6. Isovaleraldehyde-DNPH

ポータブルポンプを使用して、0.65L/min で 100L の空気サンプルを採取しました。ホルムアルデヒド(4.8ppbv)、アセトアルデヒド(1.2ppbv)、アセトン

(118ppbv)、ブタノン(0.8ppbv)、及びイソバレルアルデヒド(0.7ppbv)が検出されています。

化学実験室内の環境

大気用 Sep-Pak 〜 DNPH/ オゾンスクラバー〜

P/N JJAN20246

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サンプル前処理

www.waters.com 49サンプル前処理

サンプル前処理

中揮発性物質測定用 〜農薬用〜

Sep-Pak PS Air 空気中に存在する種々の有害汚染物質のモニタリングが不可欠になってきた現在、いかに多くの対象化合物を一斉に捕集するかは重要な 課題です。環境中の中揮発性物質の捕集剤として多くの皆様にご愛用いただいてきました Sep-Pak PS シリーズの大気用です。

−低背圧でサンプリングがより簡便・迅速に−

オーダーインフォメーション

商品名 個数 商品番号

Sep-Pak PS Air 50 JJAN20234

大気用 Sep-Pak 〜 PS Air 〜

固相抽出の基礎理論と実践の集大成 固相抽出(SPE)の基本の全てと、過去 30 年間このテクノロジーに携わった世界中の科学者から得られた成功のテクニックを紹介するガイドブックの日本語版が完成いたしました。世界最初の固相抽出製品 Sep-Pak カートリッジが 1978 年に発売されてから現在までウォーターズが蓄積した SPE 技術の集大成をお届けいたします。本書を通して SPE が持つ能力をマスターし、ラボで自由自在にご活用ください。

オーダーインフォメーション

商品名 商品番号

固相抽出ビギナーズガイド[Beginner's Guide to SPE] JLC715003405

固相抽出ビギナーズガイド

全 208 ページ、図表満載! 固相抽出の基礎と実践をわかりやすく解説

内容の一例

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サンプル前処理

www.waters.com50 サンプル前処理

クロラムフェニコール試験法について クロラムフェニコールは全ての食品において不検出とされ、その試験は厚生労働省が告示した試験法の使用が必須となります。クロラムフェニコール告示試験法の精製にはジビニルベンゼン -N- ビニルピロリドン共重合体ミニカラム(Waters Oasis HLB)が使用されています。

ポジティブリスト制度スタート すべての農薬等について残留基準(一律基準含む)を超えて残留する食品の販売を禁止するポジティブリスト制度には、800 を超える農薬等がリストアップされ、その前処理法は固相抽出ミニカラムにより大幅な簡便・迅速化が行われています。

 世界中で最も多く使用されている信頼と実績の固相抽出ミニカラムSep-Pak および Oasis 製品はポジティブリスト試験方法をサポートいたします。

クロラムフェニコール告示試験法

クロラムフェニコール試験法に使用する固相ミニカラム

Oasis HLB 200mg/6cc商品番号/価格 (円) WAT106202:30本入り

■はちみつ及びその他の食品

Oasis HLB 60mg/3cc商品番号/価格 (円)WAT094226:100本入

■ローヤルゼリー

減圧濃縮後アセトニトリル/水(3:7)混液に溶解し測定

減圧濃縮

はちみつの精製法

ローヤルゼリーの精製法

それ以外の食品の精製法

*はちみつの場合は水に溶解しそのまま Oasis HLB による精製を実施

試料

*メタノール/1%メタリン酸溶液(3:2)混液中でホモジナイズ

*メタノール/1%メタリン酸溶液(3:2)混液で残渣を洗いろ過

ろ過

Oasis HLB(ジビニルベンゼン-N-ビニルピロリドン共重合体ミニカラム)で精製

コンディショニング:メタノール 5mL平衡化      :精製水   5mLサンプルロード洗浄:20%メタノール水 5mL脱離:60%メタノール水 6mL

コンディショニング:メタノール 10mL平衡化      :精製水   10mLサンプルロード洗浄:精製水 4mL、5%メタノール水 4mL脱離:60%メタノール水 10mL

コンディショニング:メタノール 5mL平衡化      :精製水   5mLサンプルロード洗浄:精製水 10mL脱離:メタノール 10mL

ポジティブリスト前処理ミニカラムには信頼と実績の Waters Sep-Pak & Oasis

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サンプル前処理

www.waters.com 51サンプル前処理

サンプル前処理

農作物中残留農薬一斉分析

野菜および果実GC/MS, LC/MS(/MS)Ⅰ一斉分析

穀物、豆類および種実 GC/MS, LC/MS(/MS)Ⅰ一斉分析

試料

ホモジナイズ

ろ過 or 遠心 ろ過 or 遠心

塩析・アセトニトリル抽出 塩析・アセトニトリル抽出

脱水・ろ過・濃縮 脱水・ろ過・濃縮

脱水・ろ過・濃縮

濃縮後下記溶媒に溶解し測定GC/MS:アセトン - ヘキサン(1:1)

LC/MS:メタノール

濃縮後下記溶媒に溶解し測定GC/MS:アセトン - ヘキサン(1:1)

LC/MS:メタノール

試料

ホモジナイズ

LC/MS(/MS)Ⅱ一斉分析ではグラファイトカーボン/NH2カラムの代わりにシリカゲルカラムで精製ウォーターズ対応固相Sep-Pak Silica 500mg/6cc

グラファイトカーボン/NH2積層カラムで精製ウォーターズ対応固相Sep-Pak Carbon/NH2 

C18カラムで精製ウォーターズ対応固相Sep-Pak Vac C18 1g/6cc

Sep-Pak Carbon/NH2をはじめとするウォーターズ前処理ミニカラムには、厳しい品質検査試験の合格証明書を添付し、品質再現性向上に努めています。

グラファイトカーボン/NH2積層カラムで精製ウォーターズ対応固相Sep-Pak Carbon/NH2

Sep-Pak Carbon/NH2 カラム使用例〜ほうれん草抽出液の精製

ほうれん草抽出液(写真左)の色素(クロロフィル)が Sep-Pak Carbon/NH2 カラムで完全除去されています。

グラファイトカーボン /NH2 積層ミニカラムも信頼と実績の Waters Sep-Pak

ポジティブリスト前処理ミニカラム オーダーインフォメーション

商品名 個数 / 箱 商品番号

Oasis HLB 60mg/3cc 100 WAT094226Oasis HLB 60mg/3cc 500 186002002Oasis HLB 200mg/6cc 30 WAT106202 Sep-Pak Vac C18 500mg/6cc 30 WAT043395Sep-Pak PLUS Alumina B(1710mg 充塡) 50 WAT020505Sep-Pak PLUS C18(360mg 充塡) 50 WAT020515Sep-Pak PLUS C18(360mg 充塡) 500 WAT094291Sep-Pak Vac 6cc Carbon/NH2 500mg/500mg/6cc 30 186003369Sep-Pak Vac 6cc Carbon/NH2 500mg/500mg/6cc 300 186003877Sep-Pak Vac C18 1g/6cc 30 WAT036905Sep-Pak Vac Silica 500mg/6cc 30 WAT043400Sep-Pak PLUS Silica(690mg 充塡) 50 WAT020520Sep-Pak PLUS Silica(690mg 充塡) 500 WAT094293

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サンプル前処理

www.waters.com52 サンプル前処理

グラファイトカーボン /PSA 二層固相ミニカラムを含む 全ての Sep-Pak タイプがラインアップされています

 Sep-Pak PSA(primary-secondary amine, 1 級 -2 級アミン)は弱陰イオン交換、順相および親水性相互作用クロマトグラフィー

(HILIC)として使用できるユニークで汎用性の高い固相充塡剤です。アミノプロピル(NH2)固相充塡剤と比較し、選択性は類似していますが、1 級アミン -2 級アミンと 2 つのアミノ基を有する事により、より高いイオン交換容量と保持能を発揮します。また順相として使用する場合は、Sep-Pak PSA がアミノプロピル充塡剤と比べて炭素含有量が高いことから疎水性インタラクションが増加します。

* 参考文献:Lehotay,J.AOAC Int. 90(2)2007,485-520.

サンプル調製

サンプルロード0.5mL DisQuE 抽出液

エバポレート / 再溶解エバポレート後 1mL の移動相で再溶解

コンディショニング / 平衡化1mL 1% 酢酸アセトニトリル溶液

洗浄0.25mL アセトニトリル

脱離0.5mL 濃アンモニア水 / メタノール 2:98

PSA を解離させ酸性化合物の保持を最大化

中性化合物、 塩基性化合物を除去

アルカリ条件で PSA を中性化し 酸性化合物を脱離

精製法:Sep-Pak PSA 50mg/1cc

固相ミニカラムを乾燥させないこと。自然落下にて送液

QuEChERS 法との組み合わせに理想的な固相ミニカラム Sep-Pak PSA は、効率的な食品残留農薬多成分一斉分析のためのサンプル前処理法として使用されている DisQuEなどの QuEChERS 法と組み合わせ、酸性農薬を選択的に抽出精製できることが報告されています *。

サンプル調製15g ホモジナイズサンプルを 1.5g の酢酸ナトリウムと

6g の硫酸マグネシウムが入った 50mL DisQuE 抽出 Tube1 に 入れる 15mL の 1% 酢酸アセトニトリル溶液を加える

ホモジナイズ内標準添加

抽出・遠心1 分間強く振とう後 1500 回転以上で 1 分間遠心

コレクトアセトニトリル層 5mL を採取し、0.5g の硫酸マグネシウムで脱水

• 弱陰イオン交換体、pKa 10.1、10.9

• アミノプロピル固相充塡剤よりは強イオン性

• 脂肪酸、有機酸および糖に高い選択性と保持キャパシティー

• 二座配位子構造によりキレート化合物を強く保持

• 平均イオン交換容量:1.75meq/g

O Si

N H

NH 2

O

O

Primary-Secondary Amine (PSA)

抽出法:DisQuE 抽出 Tube 1

Sep-Pak PSA 固相抽出ミニカラム

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サンプル前処理

www.waters.com 53サンプル前処理

サンプル前処理

UPLC 分離条件カラム: ACQUITY UPLC BEH C18, 2.1x50mmグラジエント: A:0.1% ギ酸水溶液 B:0.1% ギ酸アセトニトリル溶液 15% B → 95% B, 3min, 95% B で 1.5min ホールド流速: 0.5mL/min注入量: 10 µLカラム温度: 40℃

農薬添加アボカド(500ng/g)での回収率とクロマトグラム

MS 条件装置: Waters Quattro PremierTM

ソフトウェア: MassLynxTM 4.0イオン化: ESI-

酸性農薬(MRM トランジッション)

農薬 トランジッション コーン電圧(V) コリジョン電圧(V)

Dicamba 219 → 175 15 12

2,4-D 219 → 161 19 19

Acifluorfen 360 → 316 15 24

オーダーインフォメーション

商品名 本数 / 箱 商品番号

Sep-Pak Vac PSA 1 cc, 50 mg 100 186004562Sep-Pak PSA Cartridge 1 cc, 100 mg 100 186004561Sep-Pak PSA Cartridge 3 cc, 500 mg 50 186004536Sep-Pak Vac PSA 6 cc, 500 mg 30 186004563Sep-Pak Vac PSA/Carbon 6 cc, 500 mg 30 186004590Sep-Pak Vac PSA 6 cc, 1 g 30 186004537Sep-Pak Vac PSA 12 cc, 2 g 20 186004564Sep-Pak Vac PSA 20 cc, 5 g 20 186004565Sep-Pak Vac PSA 35 cc, 10 g 10 186004566Sep-Pak Vac RC PSA 100 mg 50 186004567Sep-Pak Plus Light PSA 130 mg 50 186004578Sep-Pak Plus PSA 360 mg 50 186004538Sep-Pak Vac RC PSA 500 mg 50 186004568Sep-Pak Classic PSA 50 186004560Sep-Pak Plus Long PSA 50 186004577DisQuE Dispersive Sample Preparation Kit 100 176001676

Dicamba

Cl

OCH3

COOHCl

2,4-D

Cl

O

Cl

COOH

Recovery: 95.8%RSD: 1.9%

Recove 3%RSD: 3.2%

Acifluorfen

O

Cl

F3C NO2

COOH

Recovery: 99.8%RSD: 8.2%

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サンプル前処理

www.waters.com54 サンプル前処理

 “QuEChERS” 法として知られている分散型固相抽出法はシンプルで迅速なサンプル前処理法として幅広い食品における残留農薬の多成分一斉分析に適しています。 Waters DisQuE サンプル前処理キットには QuEChERS 法を誰にでも簡単かつ正確に行えるように AOAC オフィシャルメソッドに準拠した試薬と充塡剤を秤量したチューブが 100 検体分セットされています。

DisQuE サンプル前処理キットは食品サンプル中の幅広い農薬類の 迅速サンプル前処理法であることが実証されています。

• 特別なトレーニングを必要としない簡単で迅速な前処理

• 果物や野菜中の農薬スクリーニングのための AOAC オフィシャルメソッドに準拠

• 低コスト

• 信頼性が高く、高品質な試薬類をキット化

DisQuE サンプル前処理キット 〜残留農薬多成分一斉分析用〜

DisQuE使用の利点

1.チューブに固相とバッファーが封入済みなので前準備が不要

2.精製された固相とバッファーおよびDisQuEチューブを使用す

ることで抽出液への不純物の混入を防止

3. 高品質なチューブとキャップの採用で液 漏れを防止でき、 あらゆる抽出条件に対応

4. 高温処理により、有機物の混入と水分の残留を防止

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サンプル前処理

www.waters.com 55サンプル前処理

サンプル前処理

ミキサー、ホモジナイザーなどで試料の均質化する

1~8mLをチューブに移し、150 mgの硫酸マグネシウムと抽出液1mLあたり

50mgのPSAを加え、30秒間撹拌

GC/MS 分析大容量注入(LVI)を用いれば

直接分析可能LVIを使用しない場合は溶媒を

トルエンに交換

LC/MS/MS 分析抽出液を移動相で希釈して注入

1500rcfで1分間遠心分離

粉砕

抽出

d-SPE によるクリーンアップ

チューブ1

チューブ2

1分間強く撹拌した後、1500rcfで1分間遠心分離

内部標準を加える

15 mLの1%酢酸アセトニトリル溶液をバッファーと塩混合物が入ったチューブへ加える

50 mLのチューブに15gの試料を移す

DisQuE を用いたワークフロー

AOAC 法に基づいた QuEChERS 法による試料前処理手順

402 残留農薬迅速分析例 10ppb(ng/g)添加サンプル

0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7 7.5 8 Min.

UPLC測定条件LCシステム: Waters ACQUITY UPLC Systemカラム: ACQUITY UPLC BEH C18

2.1 x 100 mm, 1.7 µm商品番号: 186002352カラム温度: 40 ˚C試料温度: 4 ˚C流速: 0.450 mL/min移動相A: 98:2 水:メタノール +0.1%ギ酸移動相B: メタノール +0.1%ギ酸グラジエント: Time A% B% 0.00 90 10 0.25 90 10 7.75 0 100 8.50 0 100 8.51 90 10ランタイム: 10 分注入量: 20 µL, フルループ注入

3 種類の試料マトリックスにおける添加 (10ng/g) 回収率データ

回収率 %

ベビーフード マンゴー アボカド

0 20 40 60 80 100 125

アトラジン

カルベンダジム

シプロジニル

フルフェナセット

イマザリル

テブコナゾール

チアベンダゾール

農薬

MS測定条件MSシステム: Waters ACQUITY TQ Detectorイオン化モード: 正イオンエレクトロスプレーイオン化(ESI)法キャピラリー電圧: 1 kV脱溶媒ガス: 窒素、800 L/Hr、400 ˚Cコーンガス: 窒素、5 L/Hrイオンソース温度: 120 ˚Cモニター方法: MRMコリジョンガス: アルゴン 3.5 mBar

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サンプル前処理

www.waters.com56 サンプル前処理

製品一覧

キット

商品名 内容物 本数 商品番号

AOAC メソッド 2007.01 用DisQuE サンプル前処理キット —パウチタイプ

パウチ:1.5 g 酢酸ナトリウム、6 g 硫酸マグネシウム50 mL 抽出用エンプティチューブ

2 mL クリーンアップチューブ:150 mg 硫酸マグネシウム、50 mg PSA100 176002922

CEN メソッド 15662 用DisQuE サンプル前処理キット —パウチタイプ

パウチ:1 g クエン酸三ナトリウム二水和物、0.5 g クエン酸水素二ナトリウムセスキ水和物、1 g 塩化ナトリウム、4 g 硫酸マグネシウム

50 mL 抽出用エンプティチューブ2 mL クリーンアップチューブ:150 mg 硫酸マグネシウム、

25 mg PSA、25 mg C18

100 176002923

AOAC メソッド 2007.01 用DisQuE サンプル前処理キット

50 mL 抽出用チューブ:1.5 g 酢酸ナトリウム、6 g 硫酸マグネシウム2 mL クリーンアップチューブ:150 mg 硫酸マグネシウム、50 mg PSA

100 176001676

CEN メソッド 15662 用DisQuE サンプル前処理キット

50 mL 抽出用チューブ:4 g 硫酸マグネシウム、1 g 塩化ナトリウム、1 g クエン酸三ナトリウム二水和物、

0.5 g クエン酸水素二ナトリウムセスキ水和物2 mL クリーンアップチューブ:150 mg 硫酸マグネシウム、

25 mg PSA、25 mg C18

100 176001903

抽出用チューブ

商品名 内容物 本数 商品番号

50 mL QuEChERS 抽出用エンプティチューブ

- 50 186006814

50 mL AOAC メソッド用チューブ —青キャップ

1.5 g 酢酸ナトリウム、6 g 硫酸マグネシウム 100 186004571

50 mL CEN メソッド用チューブ —白キャップ

4 g 硫酸マグネシウム、1 g 塩化ナトリウム、1 g クエン酸三ナトリウムニ水和物、0.5 g クエン酸水素二ナトリウムセスキ水和物

100 186004837

クリーンアップチューブ

商品名 内容物 本数 商品番号

2 mL チューブ — 白キャップ 150 mg 硫酸マグネシウム、50 mg PSA 100 186004572

2 mL チューブ — 青キャップ 150 mg 硫酸マグネシウム、50 mg PSA, 50 mg C18 100 186004830

2 mL チューブ — 黄色キャップ 150 mg 硫酸マグネシウム、25 mg PSA 100 186004831

2 mL チューブ — 緑キャップ 150 mg 硫酸マグネシウム、25 mg PSA, 25 mg C18 100 186004832

15 mL チューブ — 白キャップ 900 mg 硫酸マグネシウム、150 mg PSA 50 186004833

15 mL チューブ — 青キャップ 900 mg 硫酸マグネシウム、150 mg PSA, 150 mg C18 50 186004834

試薬入りパウチ

商品名 内容物 本数 商品番号

AOAC メソッド用 DisQuE パウチ 1.5 g 酢酸ナトリウム、6 g 硫酸マグネシウム 50 186006812

CEN メソッド用 DisQuE パウチ4 g 硫酸マグネシウム、1 g 塩化ナトリウム、

1 g クエン酸三ナトリウム二水和物、0.5 g クエン酸水素二ナトリウムセスキ水和物

50 186006813

固相バルク

商品名 本数 商品番号

グラファイトカーボンブラック 25 g 186004835

トリファンクショナル結合 C18 シリカ 100 g WAT035672

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サンプル前処理

www.waters.com 57サンプル前処理

サンプル前処理

エキストラクションマニホールド

固相抽出を今まで以上に簡単・迅速・正確に!

 本エキストラクションマニホールドでは最大 20 サンプルを同時に処理することができます。従来のシリカベースの固相抽出カートリッジ用によりいっそうのパフォーマンスを追求すると同時に、ユニークな性質をもつ新製品オアシス HLB 固相抽出カートリッジの性能をフルにご使用いただけるように設計されています。

特長A Waters 独自のバキュームコントロールバルブを設計。ブリードポートを

指で操作するだけで簡単に圧力調整ができます。

B 高純度ポリプロピレンのニードルバルブとニードルチップを使用。カバーを貫通する形状となっているため、カバーからの汚染の心配がありません。

C 精密なデルリン製カバーに 3 ポイントインターロックシステムを採用。迅速、正確に試験管ラックの位置に合わせたサンプルセットが可能です。

D バキュームゲージの位置を流路部分からカバー上部に変更。マニホールド底部からの廃液除去が簡単になりました。

※排出バルブとポンプの接続には内径 5/16" 又は 3/8" のチューブをご使用下さい。

減圧型多検体用マニホールド

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サンプル前処理

www.waters.com58 サンプル前処理

エキストラクションマニホールド用バケット マニホールド内部の汚染を少なくするためのステンレス製廃液受けです。

スペアパーツ

商品名 数量 商品番号

13mm×75mm 試験管用ラック 1 18600899413mm×100mm 試験管用ラック 1 18600899516mm×75mm 試験管用ラック 1 18600899616mm×100mm 試験管用ラック 1 186008997マニホールド用廃液バケット 1 JJAN20238 1 mL, 4 mL バイアル用リバーシブルラック 1 お問合せ下さい 2 mL バイアル用ラック 1 お問合せ下さい ニードルチップ(Oasisi 用・バルブ無し) 20 WAT200691ニードルチップ(ストップコックバルブ付き) 20 WAT200685ルアープラグ(密栓用) 25 WAT058851デルリン製カバー 20 position 1 186008990

(ゲージアッセンブリ、ガスケット付き)減圧ゲージアッセンブリ 1 WAT200687ガラスチャンバー(排出バルブ付き) 1 186008991排出バルブ 1 WAT200689エジェクター(ニードルチップの取り外し用) 1 WAT058839ラバーボール(減圧ゲージ用) 1 WAT058840ガスケット 1 WAT200690バキュームポンプ(115 V/60 Hz) 1 725000417

エキストラクションマニホールド用バケット

Waters エキストラクションマニホールド(20 検体用)

商品名 商品番号

エキストラクションマニホールド本体(ラック無し) 186008998エキストラクションマニホールド本体(13mm×75mm 用ラック付き) WAT200606Jエキストラクションマニホールド本体(13mm×100mm 用ラック付き) WAT200607Jエキストラクションマニホールド本体(16mm×75mm 用ラック付き) WAT200608Jエキストラクションマニホールド本体(16mm×100mm 用ラック付き) WAT200609J

*上記製品には、Oasis 用ニードルチップ、密栓用ルアープラグ、エジェクターが 付属品として含まれます。*従来の固相抽出製品をご使用の方は、ストップコックバルブ付きニードルチップ(別売) が必要です。

アクセサリー

商品名 数量 商品番号

Sep-Pak リザーバー 30cc 48 WAT011390Sep-Pak リザーバー 60cc 12 186005587Sep-Pak アダプター(1、3、6cc 用) 12 WAT054260Sep-Pak アダプター(12、20、35cc 用) 10 JJAN20173メール・メールルアーフィッティング 100 WAT024310

長年ご愛用いただいておりましたバキュームマニホールドは、スペアパーツを現在でも販売しております。どうぞご利用下さい。

旧バキュームマニホールド スペアパーツ・アクセサリー

商品名 種類 数量 商品番号

ガラスバキュームチャンバー 12 1 WAT054797圧力ゲージ、調整バルブアセンブリー 12、16、24 1 WAT054799青色カバー(ガスケット、 12 1 WAT054800 ストップコックバルブ、ルアーメール/ フィーメールフィッティング、足付き)青色カバー(同上) 16 1 WAT054801青色カバー(同上) 24 1 WAT054802ガスケット 16 または 24 2 WAT054804ストップコックバルブ 12、16、24 12 WAT054806ステンレス製ニードル 12、16、24 12 WAT054807ポリプロピレン製ニードル 12、16、24 12 WAT054808ルアーフィーメールフィッティング 12、16、24 2 WAT054809ルアーメールフィッティング 12、16、24 2 WAT054810

商品名 種類 数量 商品番号

ホルダープレート 16mm 試験管用 12 1 WAT054814リザーバー 12、16、24 48 WAT011390バケット 12 検体用 12 1 JJAN20205バケット 16/24 検体用 16、24 1 JJAN20201廃液バケット 20 検体用 1 JJAN20238

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サンプル前処理

www.waters.com 59サンプル前処理

サンプル前処理

Sep-Pak コネクションキット

• Sep-Pak とチューブの接続

• Sep-Pak の栓

• 異なるチューブ径の接続(1/16" -1/8" -5/32")

• ラインの分岐

商品名 商品番号

セップパックカートリッジコネクションキット WAT011400

フィーメール ルアーロックアダプター1/16" 内部チューブ用

(10個入り)商品番号 N10107

ルアーロックアダプター1/16" 内部チューブ用 (10個入り)商品番号 N10113

ストップコック バルブ(5個入り)商品番号 054806

フィーメール ルアーロックアダプター1/8" 内部チューブ用

(10個入り)商品番号 011410

ルアーロックアダプター1/8" 内部チューブ用

(10個入り)

フィーメール ルアーロックアダプター5/32" 内部チューブ用

(10個入り)商品番号 011426

ルアーロックアダプター5/32" 内部チューブ用

(10個入り)

ポリエチレン チューブ1/16" ×10フィート

1/16"

ポリエチレン チューブ1/8" ×10フィート

1/8" I.D.

/フィーメール/フィ メーー ルルアー ティー アダプター

(5個入り)商品番号 011412 ルアープラグ

(10個入り)商品番号 044395

カップラー

(10個入り)商品番号 024310

フィーメール ルアープラグ(10個入り)商品番号 044385

ルアーロック リング(10個入り)

フィーメールフィーメール

/

/

カップラー(10個入り)商品番号 011422

メール

メール

メール

メール メールメール

メール

商品名 数量 商品番号

フィーメール ルアーロック  100 WAT011410 アダプター(1/8" 用)フィーメール ルアーロック  100 WAT011426 アダプター(5/32" 用)ストップコックバルブ 12 WAT054806メール/フィーメール ルアー ティーアダプター 50 WAT011412フィーメール/フィーメール カップラー 100 WAT011422メール/メール カップラー 100 WAT024310フィーメール ルアープラグ 100 WAT044385メール ルアープラグ 100 WAT044395フィーメール ルアーロック アダプター 20 JLCN10107D

(1/16" 用)(=チューブコネクター FTL210-6)メール ルアーロック アダプター(1/16" 用) 20 JLCN10113D

(=チューブコネクター MLT210-6)

Sep-Pak 用各種キット

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サンプル前処理

www.waters.com60 サンプル前処理

Sep-Pak リザーバー セップパックを大量の溶媒で洗浄する場合やたくさんのサンプルをロードする時に便利です。

商品名 商品番号

セップパックリーザーバー 30cc(48 ヶ入り) WAT011390セップパックリーザーバー 60cc(12 ヶ入り) 186005587

Sep-Pak と HPLC の接続 本アダプターを使用するとSep-PakプラスをHPLCに接続できます。目的物質・妨害物質の保持をモニターすると、迅速に前処理条件を 確立できます。

商品名 商品番号

Sep-Pak/HPLC アダプター(PEEK)2 パーツ/ 1 組 JJAN60071

Sep-Pak Vac Adaptor

1cc用

3cc用

6cc用

12cc用

35cc用

20cc用

HPLCポンプインジェクター

セップパック アダプター 

検出器

1/16inch Tube

Sep-Pak ジョイントアダプター

• シリンジ型の Sep-Pak Vac にさらにシリンジを付けて、加圧送液ができます。

• リザーバーやシリンジを接続し、大量のサンプルを処理することができます。

• Sep-Pak Vac をコンセントレーターで使うことができます。

商品名 商品番号

Sep-Pak ジョイントアダプター WAT054260 (1、3、6cc 用 12 ヶ入り)

Sep-Pak ジョイントアダプター JJAN20173 (12、20、35cc 用 10 ヶ入り)