formato de proyectos farmaceuticos dgp imayo 2014 2_proyecto_planta_hemo bms

7/24/2019 Formato de Proyectos Farmaceuticos Dgp Imayo 2014 2_proyecto_planta_hemo Bms

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ndice General

Pg.

ndice 1Introduccin

3

CAPITULO I: Marco Conceptual

1.1 Objetivo General 5

1.2 Objetivos Especficos

1.3 Filosofa de la epresa.

1.3.1 !isin

1.3.2 "isin. #

1.3.3. Estructura or$ani%ativa

CAPITULO II Estudio de la Necesidad

2.1 &n'lisis de patrones de necesidades actuales (

2.2 )eterinacin de las necesidades

2.3 Otros ofertantes *

2.+ ,recios anejados por los copetidores2.5 ,orcentaje de la deanda -ue atender' la epresa ita 1/

2.# 0adena de 0oerciali%acin )istribucin

2.#.1 )e los 0opetidores

2.#.2 )e la Epresa de ,roduccin 11

2.#.3 ,rincipales )istribuidores de la Epresa

CAPITULO III Estudio de la Cadena

3.1 )ia$raa de la 0adena 12

3.2 0adena dinai%ada para el sector en estudio

3.3 Identificacin de Insuos 13

3.3.1 Insuos acionales

3.3.2 Insuos Iportados

&nteproecto ,'$ina 1 de 12


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CAPITULO IV Definicin! Caracteri"acin de Productos #

Capacidad a Instalar

+.1 0uadro )efinicin4 0aracteri%acin de ,roductos 0apacidad a Instalar 1+

CAPITULO V In$enier%a

5.1 0rono$raa 15

CAPITULO VI U&icacin de la Planta

#.1 e-ueriientos t6cnicos para la locali%acin $eo$r'fica 1#

#.2 "ariables 7ocio8Econicas del ,roecto 19

#.3 e-uisitos :6cnicos#.+ "ariables Econicas del ,roecto 1*

#.5 oras4 perisolo$a est'ndares de calidad

'eferencias 21

INT'ODUCCI(N



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Cap%tulo I

Marco Conceptual

)I)TEMA A*O

El sistea &;O se conoci cuando uanos por sueros de otros individuos en

1*//?51@ al aAo si$uiente clasific los tipos de san$re en tres $rupos4

denoinados &4 ; O ?2/821@. :abi6n descubri -ue el suero de individuos del

$rupo & a$lutinaba los $lbulos rojos de individuos de $rupo ; a la inversa4 -ue

el suero de individuos del $rupo ; a$lutinaba los $lbulos rojos de individuos &.=os $lbulos rojos -ue no se a$lutinaban con el suero de individuos del $rupo & o

; se deterinaron coo pertenecientes a un tercer $rupo4 el $rupo O se

deterin -ue el suero de los individuos pertenecientes a este $rupo a$lutinaba

los $lbulos rojos tanto de los individuos del $rupo & coo del $rupo ;. En 1*/24

dos discpulos de =andsteiner4 von )escatello 7tBrli4 identificaron el cuarto $rupo4

el $rupo &;.?22@

El sistea de $rupo san$uneo &;O si$ue siendo el 's si$nificativo en edicinatransfusional.?23@ Es el Cnico en el cual el suero de la aora de las personas no

epuestas a eritrocitos >uanos posee anticuerpos recprocos constantes de

posible identificacin. & causa de estos anticuerpos4 la transfusin de san$re &;O

incopatible puede provocar >elisis intravascular $rave4 as coo otras

anifestaciones de las reacciones >eolticas transfusionales a$udas. ,or tanto

las pruebas de deteccin de la incopatibilidad &;O entre los receptores

donantes de san$re constituen la base de los estudios pretransfusionales.

Antgenos



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=as pruebas de a$lutinacin son usadas para detectar los ant$enos & ; en los

$lbulos rojos. 0on frecuencia los anticuerpos reaccionan enos con los

eritrocitos de los reci6n nacidos -ue con los del adulto. &un-ue pueden encontrase

en los $lbulos rojos de ebriones de 58# seanas4 en el oento del naciiento

los ant$enos & ; no est'n desarrollados por copleto4 -ui%'s por-ue las

estructuras oli$osac'ridas raificadas sur$en de anera $radual. Entre los 28+

aAos4 la epresin de los ant$enos & ; es copleta peranece 's o enos

constante durante toda la vida.

Subgrupos

=os sub$rupos de &;O son fenotipos -ue difieren en la concentracin de estos

ant$enos en los $lbulos rojos la saliva de a-uellos -ue son secretores. =ossub$rupos & son 's counes -ue los ;. =os dos principales sub$rupos & son los

&1 &2. =os $lbulos rojos de las personas de abos sub$rupos reaccionan

fuerteente con los reactivos anti8& en la prueba de a$lutinacin directa. =a

distincin serol$ica de $lbulos &1 &2 se lo$ra ediante pruebas -ue utili%an la

lectina anti &1. Eisten diferencias cualitativas cuantitativas entre &1 &2.?2+@ =a

transfersa &1 es 's eficiente en la conversin del sustancia D en ant$eno &

puede crear estructuras :ipo 3 & repetitivas. Eisten alrededor de 1/45 1/5 sitios

de ant$enos & en los $lbulos rojos de adultos &1 alrededor de 2421 1/5 sitios

de ant$enos & en los $lbulos rojos de adultos &2.?25@ El 9/ de los individuos

del $rupo & o &; posee $lbulos rojos -ue se a$lutinan en presencia de la lectina

anti8&1 por lo tanto se clasifican coo &1 o &1;. El 2/ restante cuos

eritrocitos son fuerteente a$lutinados en presencia de anticuerpos anti8&4 pero

no de la lectina anti8&1 se clasifican coo &2 o &2;. En los donantes receptores

no es necesario efectuar evaluaciones de rutina con anti8&1.

=os sub$rupos 's d6biles de &2 son infrecuentes en $eneral se caracteri%an

por el enor nCero de sitios anti$6nicos & eritrocitarios el increento

proporcional de la actividad de los ant$enos D. & enudo se reconocen los

sub$rupos cuando eiste una discrepancia entre la a$rupacin de los $lbulos

&nteproecto ,'$ina + de 12


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rojos ?directa@ el suero ?inversa@. =a clasificacin de los sub$rupos & d6biles ?&34

&4 &4 &cl@ suele basarse en

El $rado de a$lutinacin de los $lbulos rojos con anti8& anti8&1.

El $rado de a$lutinacin de los $lbulos rojos con sueros anti8&4 ;

>uanos o onoclonales.

El $rado de a$lutinacin de los $lbulos rojos con anti8D ?le europaeus@.

=a presencia o ausencia de anti8&1 en el suero.

=a presencia de sustancias & D en la saliva de los receptores.

Estudios de adsorcinelucin.

Estudio de linajes failiares.

o se efectCa la identificacin de rutina de los diferentes sub$rupos &. =a

clasificacin serol$ica de los sub$rupos & ; se desarroll con reactivos

policlonales >uanos anti8&4 anti8; anti8&;. Estos reactivos >an sido

reepla%ados por reactivos onoclonales urinos la reactividad depende del

clon o clones seleccionados por el fabricante. 7in ebar$o4 es iportante

considerar al$unas caractersticas. 0uando se anali%an los $lbulos rojos &3 con

anti8& de donantes de $rupo ; o O uestran un patrn caracterstico de capo

ito. =os $lbulos rojos & no a$lutinan en presencia de anti8& de personas del

$rupo ;4 pero s con los anti8&4; del $rupo O. =os eritrocitos & podran reaccionar

con al$unos anticuerpos anti8& onoclonales. =os $lbulos rojos &cl no a$lutinan

conn anti8a o anti8b de nin$Cn ori$en la presencia de ant$enos & slo se

deuestra ediante t6cnicas de adsorcin elusin. =os sub$rupos ; son aCnenos counes -ue los &.

7e confir por estudios oleculares -ue los sub$rupos & ; son

>etero$6neos -ue la clasificacin serol$ica no siepre correlaciona con el



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an'lisis $enicoH uc>os alelos dan el iso fenotipo debilitado a veces4 's

de un fenotipo posee el iso alelo.?2#@

Anticuerpos anti-A y anti-B

En $eneral4 las personas poseen anticuerpos diri$idos contra los ant$enos

& o ; ausentes en sus $lbulos rojos. Esta relacin copleentaria previsible

perite efectuar la tipificacin &;O en el suero o en los $lbulos rojos. na de las

>iptesis -ue eplica el desarrollo de estos anticuerpos se basa en -ue las

confi$uraciones responsables de los deterinantes anti$6nicos & ; de la

ebrana eritrocitaria tabi6n eisten en otras entidades biol$icas4 en particular

las ebranas celulares bacterianas. =a distribucin de las bacterias es u

aplia su presencia en la flora intestinal4 el polvo4 los alientos otros sustratosase$ura la eposicin constante de todas las personas a ant$enos del tipo & o ;.

=os individuos inunocopetentes reaccionan contra los ant$enos abientales

produciendo anticuerpos contra a-uellos ausentes en el or$aniso. &s4 las

personas de los $rupos O ; sinteti%an anticuerpos anti8& las de los $rupos O

&4 anti8;. =as del $rupo &; -ue e>iben abos ant$enos4 no $eneran

anticuerpos. Esta eplicacin abientalJ de la eer$encia de los anticuerpos anti8

& anti8; si$ue siendo presuntiva.

Momento de aparicin

En $eneral4 los anticuerpos anti8& anti8; se detectan en el suero despu6s

de los prieros 3 a # eses de vida. =a deteccin de anti8& anti ; en el suero de

los reci6n nacidos lactantes enores de +8# eses no es v'lida4 por-ue al$unos

o todos los anticuerpos derivan de la transferencia placentaria de I$G anti8& anti8

; aternas. En ocasiones4 al$unos lactantes producen estos anticuerpos desde el

oento del naciiento.?2(@

=a sntesis de los anticuerpos auenta pro$resivaente4 alcan%ando los

niveles del adulto entre los 581/ aAos en las etapas tarda de la vida declina. =as

&nteproecto ,'$ina # de 12


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personas de edad avan%ada poseen concentraciones de anti8& anti8; 's bajas

-ue los adultos jvenes.

Reactividad de los anticuerpos anti-A y anti-B

=as inuno$lobulinas anti8& predoinantes en los individuos del $rupo ;

anti8; en los del $rupo &4 son I$!4 aun-ue tabi6n se advierten pe-ueAas

cantidades de I$G. =as I$G son las anti8& anti ; predoinantes en el suero del

$rupo O.?29@ 0oo la I$G atraviesa la placenta con facilidad la I$! no4 en los

>ijos de $rupo & o ; de adres del $rupo O el ries$o de enferedad >eoltica

del reci6n nacido ?ED@ es aor -ue en los >ijos de adres del $rupo & o ;.

=a I$! las I$G anti K& anti8; a$lutinan los $lbulos rojos en fora

preferencial a teperatura abiente ?2/82+L0@ o enor activan el copleento

a 3(L0.

=a capacidad ltica ediada por copleento de estos anticuerpos se pone

de anifiesto cuando las pruebas incluen una fase de incubacin a 3(L0. =os

sueros de al$unas personas >eolisan los eritrocitos &;O incopatibles a

teperaturas inferiores a 3(L0. 0uando el sobrenadante del suero es rosado o

rojo o el botn celular es escaso o nulo4 cabe pensar en >elisis por

anticuerpos &;O. =a >elisis debe interpretarse coo ediada por

copleento cuando al suspender los $lbulos rojos en plasa o en a$entes

inactivadores coo el E):&4 esta no ocurre.

Reactividad anti-A,B (suero del grupo O)

El suero delos individuos del $rupo O contiene anticuerpos denoinados

anti8&4; por-ue reaccionan con $lbulos rojos & ; esos anti8& anti8; no

pueden separarse por adsorcin diferencial. 0uando se incuba suero del $rupo o

con c6lulas del $rupo & o ;4 los eluatos e>iben reactividad contra los eritrocitos &

;. =a saliva de los secretores de sustancia & o ; in>ibe la actividad de estos

anticuerpos contra $lbulos rojos & o ;.

Anticuerpos anti-A

&nteproecto ,'$ina ( de 12


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=os anticuerpos anti8&1 aparecen coo alo anticuerpos en el suero del 1

al 2 de los individuos &2 del 25 en los individuos &2;.?2+@ En ocasiones

:abi6n se encuentra anti8&1 en el suero de individuos con otros sub$rupos

d6biles de &. El anti8&1 puede $enerar discrepancias en la tipificacin &;O e

incopatibilidad en pruebas cru%adas con $lbulos rojos &1 o &1;. =os anti8&1

$eneralente reaccionan ejor4 o solaente4 a teperatura 's bajas -ue 3(L0

no se considera si$nificativo si no uestra reactividad a 3(L0. 0uando reacciona

a 3(L04 solaente se deben usar los eritrocitos &2 o O para la transfusin.

En los estudios de adsorcin siple4 los anticuerpos anti8& del $rupo8;

parecen contener anti8& anti8&1 separables. El suero del $rupo ; a$lutina los

$lbulos rojos &1 &24 slo reacciona con los &1. o obstante4 si se efectCan

pruebas adicionales4 las diferencias en la epresin de los ant$enos & entre las

c6lulas &1 &24 parecen ser 's cuantitativas -ue cualitativas.?25@

Eisten reactivos anti8& confiables4 derivados de la lectina de )olic>os

biflorus -ue pueden ad-uirirse en el ercado o prepararse. El etracto ve$etal

reacciona con eritrocitos &1 &2 pero el diluido en fora apropiada no a$lutina las

c6lulas &2 por lo tanto4 constiue un anti8&1. El iso objetivo pude

alcan%arse si se utili%a una dilucin apropiada de un &c!o anti sustancia D.?2*@

)I)TEMA '+

El sistea > fue descrito >ace 's de #/ aAos por =evine 7tetson en

1*3*. Estos autores reportaron coo una adre -ue terinaba de dar a lu% un

feto uerto acerado4 >aba desarrollado una reaccin >eoltica severa a

causa de una transfusin de san$re proveniente de su esposo. Ellos encontraron

-ue el suero de esta ujer a$lutinaba los eritrocitos de su esposo el 9/ de los

donantes cauc'sicos &;O copatibles. n se$undo >alla%$o4 esta ve%

eperiental4 se produce en 1*+/4 coo resultado de los eperientos reali%ados

en aniales por =andsteiner Miener ?3/831@. Ellos inuni%aron conejos



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cobaos con $lbulos rojos de onos !acacus r>esus de esa fora obtuvieron

un suero -ue a$lutinaba los $lbulos rojos de los onos r>esus el 95 de la

poblacin blanca de ueva Nor.

&l inicio se pens -ue los anticuerpos identificados en los aniales deeperientacin ?anti8>@ los encontrados en el suero de al$unas personas

sensibili%adas4 estaban diri$idos contra la isa sustancia anti$6nica. Dasta ese

oento todo su$era -ue el ant$eno presente en el $lbulo del Macacus rhesus

el >allado en el >uano era el iso ?factor >@ por consi$uiente4 los

correspondientes anticuerpos deberan poseer i$ual especificidad. !'s tarde se

pudo deostrar -ue esto no era cierto4 pero se antuvo el t6rino factor >

acuAado por =andsteiner Miener. El >eteroanticuerpo fue denoinado =M el

anticuerpo >uano se denoin anti >.

El sistea > es despu6s del &;O el 's iportante de los sisteas de

$rupos san$uneos4 por sus iplicaciones clnicas en la transfusin san$unea

en la etiopato$enia de la enferedad >eoltica del reci6n nacido ?ED@. Este

sistea es el 's polirfico coplejo de los sisteas de $rupo san$uneo. 7u

iportancia desde el punto de vista clnico radica en -ue de los +# ant$enos

relacionados con el sistea4 cinco ?)404c4E4e@ son altaente inuno$6nicos

especialente el > ?)@.?32833@

=as protenas de sistea > son codificadas por $enes denoinados D3/

D)0E D5/. :ales nCeros ?3/ 5/@ est'n relacionadas con la asa

olecular de las protenas $eneradas respectivaente al i$rar en $el de

poliacrilaida.

7e usa el t6rino $en6rico D) D0E para los $enes -ue codifican a la

protena >) a la protena D0E respectivaente el t6rino D&G para el

$en -ue codifica a la $licoproteina asociada al > >&G. =os ant$enos

counes del sistea son )4 04 c4 E e4 los cuales eran escrito ori$inalente en

orden alfab6tico ?0)E@. ,osteriorente4 cuando se descubri -ue los ant$enos 0

E se >eredaban en blo-ue4 el orden fue cabiado a )0E.?33@ &un-ue el

&nteproecto ,'$ina * de 12


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ant$eno dJ no eiste4 esta letra se usa para indicar un fenotipo ) ne$ativo. =as

foras 's frecuenteente encontradas del D0E D) son las si$uientes?3+@

)ce4 dce4 )ce4 d0e4 )cE4 dcE4 )0E d0E ?noenclatura de Fis>er ace?35@@

conocidos tabi6n respectivaente coo o4 r4 14 rP4 24 rQ4 % r

?noenclatura de Miener?3+@@. =a aCscula se usa cuando el ant$eno ) se

epresa la r inCscula cundo no eiste ?:abla I@. =os fenotipos -ue epresan

raras delecciones utili%an $uiones para indicar la carencia de un deterinado

ant$eno ?)c84 para los -ue carecen de E e4 )884 para los -ue carecen de 04 c4 E4

e@. =os eritrocitos con el llaado fenotipo > nulo4 no epresan nin$Cn ant$eno.

!uc>as noenclaturas >an sido utili%adas para describir ant$enos4 protenas

$enes del sistea >. El 0oit6 de :erinolo$a de la 7ociedad Internacional de

:ransfusin 7an$unea4 utili%a una noenclatura nu6rica basada en la descritapor osenfield4?3#@ en la cual a cada ant$eno se le asi$na un nCero se$Cn la

cronolo$a de su descubriiento.

En la ?:abla.8 II@ se representan los fenotipos 's frecuentes ?epresados

en las tres noenclaturas@ al utili%ar los cinco principales anticuerpos diri$idos

contra este sistea.

=as protenas >) >0E tienen un alto porcentaje de >oolo$a ?*2@

entre si coparten >oolo$a en un 3945 3*.2 respectivaente con la

$licoproteina >5/4 su$iriendo -ue foran parte de una isa failia proteica.

?3(839@

=a protena > transporta los ant$enos del sistea >4 pero slo se

epresa sobre la superficie del eritrocito si el >&G est' presente.

Eisten protenas accesorias -ue est'n asociadas a la failia de las

protenas >4 las cuales est'n deficientes o ausentes en el > nulo.

Este conjunto de protenas es denoinado coplejo >.J?33@ =as

protenas >) epresan el ant$eno )4 ientras -ue las >0cEe4 transportan

ant$enos 0 c junto al E e en la isa ol6cula. =os an'lisis de las

&nteproecto ,'$ina 1/ de 12


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secuencias de aino'cidos ?aa@ deuestran -ue los prieros +1 aa 8terinales

del >) del >0E son id6nticos -ue las diferencias con las foras counes

del D0E son slo 3/835 aa a lo lar$o de la protena total4 de los cuales die% de

ellos est'n ubicados en las la%adas etracelulares de la protena4 forando

eptopes inuno$6nicos. & pesar del alto $rado de >oolo$a4 las protenas

>0cEe no epresan nin$Cn eptope ) los > ) no epresan eptopes 0 E.

?3*8+/@

El >&G ?tabi6n denoinado >5/4 >5/& $licoproteina4 )5/4 protena

!;82)1/4G,5/4 G,5/&@ se caracteri%a por tener $licosilado uno de los dos sitios

accesibles ?8$licano@. ,or lo $eneral los sitios 8$licanos transportan ant$enos

&;O4 pero en este caso no se >a deostrado -ue posea tal funcin.

Sistema R! y su importancia clnica

El ant$eno ) es altaente inuno$6nico e induce una respuesta inune

en el 9/ de las personas > ne$ativo -ue se transfunden con 2// l de san$re

) positivo. ,or esta ra%n es obli$atorio tipificar rutinariaente a los donantes de

san$re a los receptores4 a fin de -ue los > ne$ativos reciban productos >

ne$ativo. )e esta anera las coplicaciones clnicas debidas a incopatibilidad

san$unea > son u raras.

Otra fora de sensibili%acin es a trav6s del ebara%o. Eiste

aproiadaente un 1# de sensibili%acin en ujeres ) ne$ativo -ue paren

>ijos &;O copatibles ) positivo cuando no reciben la inuno$lobulina anti8)

coo profilais a la sensibili%acin.?+1@ 0uando eiste incopatibilidad aterno8

fetal para el ant$eno )4 se produce la ED. & pesar del uso de la

inuno$lobulina anti ) en fora profil'ctica4 la aloinuni%acin por ebara%o

ocurre?33@.

"riterios para la seleccin de un reactivo anti # (AcMo) para ser utili$ado en

donantes y pacientes



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En vista de la iportancia clnica transfusional del ant$eno )4 su

deterinacin debe ser >ec>a rutinariaente a cada donante receptor de san$re

a las ujeres ebara%adas. En estas Cltias sera de utilidad conocer el

$enotipo del feto para su apropiado anejo.?+2@

,or lo tanto es necesario -ue el fenotipaje del ant$eno ) se realice e

interprete correctaente. :abi6n es iportante conocer la capacidad de los

diferentes reactivos en detectar las variaciones fenotpicas considerar su

relevancia clnica.

%ipi&icacin del R! #' Reactivos y tcnicas

=os prieros reactivos utili%ados4 provenan de donantes sensibili%ados

eran de tipo I$! ?reaccin en salina@. Eran buenos pero poco pr'cticos4 por-ue

re-ueran lar$o tiepo de incubacin.

,osteriorente en 1*+5 )iaon )enton ?+3@ desarrollaron antisueros de

tipo I$G potenciados con protenas otras sustancias4 de anera -ue se acortara

el tiepo de incubacin se $eneraban reacciones fuertes. &de's podan

detectar los ) d6biles a -ue por ser I$G4 la prueba se llevaba >asta la fase de

anti$loulina >uana ?&GD@.

El problea -ue presentaron estos reactivos fueron las falsas reacciones

positivas en pacientes con disproteineias o con la prueba de 0oobs positiva.

,or ello se tuvo -ue adicionar un control paralelo a la prueba del >.

En 1*((4 oans?++@ describi un proceso -uico ediante el cual se

ropan los puentes disulfuros -ue antenan r$ida la ol6cula de I$G4

counic'ndole propiedades -ue la aseejan a la I$!4 increent'ndose la

posibilidad de reaccionar en salina reduci6ndose la potenciacin con protenas.

En los Cltios aAos4 los reactivos policlonales >an sido sustituidos por los

onoclonales >uanos4 debido a las ventajas -ue ellos presentan. 7on potentes4

'vidos especficosH de f'cil uso en el laboratorio4 no tienen containantes4

pueden ser cuantificables en fora precisa4 pueden ser obtenidos en $randes



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volCenes4 sin variaciones en sus propiedades no son dependientes de

donantes. Estos anticuerpos tabi6n representan un valioso instruento para la

sustitucin de los reactivos policlonales en la profilais de la ED.?21@

7in ebar$o4 los &c!os est'n diri$idos a eptopes especficos del ant$eno)4 los cuales pueden estar epresados noralente4 en fora reducida o estar

ausente se$Cn el fenotipo. in$Cn &c!o detecta todas las variantes de ). ,ara

solventar esta situacin4 al$unos investi$adores recurrieron a la e%cla de los

&c!os I$! en alto ttulo4 con anti ) policlonal ?I$G@4 de anera de poder utili%ar la

prueba de la anti8$lobulina >uana &GD para la fase )u. Este tipo de

cobinacin >a sido utili%ada apliaente por los laboratorios coerciales. En

"ene%uela es obli$atorio llevar >asta la fase de &GD todo tipiaje ) ne$ativo4 por lo

tanto este tipo de reactivo es conveniente para nosotros. ,ero es u iportante

reali%ar las cobinaciones en las proporciones adecuadas4 a -ue la I$G puede

causar blo-ueo de la I$! reduci6ndose la capacidad de reaccin sobretodo en

fenotipos 1r. Esto retarda la tipificacin en estos casos4 por re-uerirse

prolon$acin en la ejecucin de la prueba4 al tenerse -ue increentar el tiepo de

incubacin e incluso tener -ue llevarse a la fase de &GD ?eperiencia personal

)ra. G. =en@.

Otra alternativa -ue eiste es >acer una e%cla de &c!os I$! e I$G. Esto

tiene la ventaja de -ue se eliina el lavado de las c6lulas previa a la adicin de la

&GD ?paso re-uerido con los policlonales@.

I$ual -ue en el caso anterior4 la e%cla debe >acerse con uc>o cuidado para

evitar blo-ueos.

0on los reactivos e%clados ?e%clas oli$oclonales@ se reduce la

posibilidad de deteccin directa de los ) d6bil o variantes d6biles de ). &l$unos

anti ) I$! pueden ser potenciados para detectar ) u d6biles en salina. ,ero su

patrn de reactividad con diferentes c6lulas es >etero$6neo.



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7cott ! = et al4?+58+#@ reportaron un &c!o anti8) ?I$!@ -ue detecta )

d6biles en salina4 en la isa fora coo lo >ace un anticuerpo anti8) ?I$G@ por

&GD. 0on 6ste tipo de reactivo slo u pocos ) ?u d6biles@ pueden ser

tipificados coo ne$ativos recibir erradaente transfusiones ne$ativas.

ANTICUE'PO) MONOCLONALE)

=a posibilidad de obtener preparaciones especficas4 repetibles e

ina$otables de anticuerpos con funciones predeterinadas4 se >i%o realidad entre

1*(+ 1*(54 coo resultado de los eperientos reali%ados en 0abrid$e4 eino

nido4 por Geor$e ler 06sar !ilstein.?+(@ =a tecnolo$a de $eneracin de

c6lulas secretoras de anticuerpos onoclonales ?&c!o@ desarrollada a partir del

descubriiento reali%ado por los citados autores el posterior perfeccionaiento

del 6todo por otros investi$adores4 sobre todo en lo referente a la obtencin de

lneas de ieloas con caractersticas ptias?+94+*@ revolucion las

posibilidades del uso de las inuno$lobulinas en la investi$acin b'sica4 en

t6cnicas dia$nsticas4 seroterapia procesos industriales.

En la actualidad los &c!os4 producidos por >ibridoas ?>bridos obtenidos

por fusin celular entre linfocitos ; c6lulas de ieloa@4 se eplean en la

purificacin caracteri%acin de ol6culas diversas4 la anipulacin de la

fisiolo$a la bio-uica celular4 la definicin de fenotipos subpoblaciones

celulares4 el tipiaje de ant$enos de tejido de $rupos san$uneos4 la deteccin de

los niveles circulantes de >oronas otros factores s6ricos4 la deostracin de

daAo tisular4 la de ticos4 ut'$enos dro$as4 en el estudio de las

enferedades infecciosas4 parasitarias de tuores ali$nos4 en el dia$nstico

a$rcola veterinario en la purificacin de f'racos vacunas. =os &c!os

tabi6n se aplican en la terapia antituoral en procesos s6pticos e inflaatorios

se evalCan coo catali%adores de reacciones -uicas bio-uicas. ,or todo

lo antes epuesto se infiere -ue los &c!os se >an convertido en uno de los

&nteproecto ,'$ina 1+ de 12


15/54

eleentos b'sicos de la bioedicina oderna4 as coo de otras raas de la

ciencia la tecnolo$a ?5/@.

=a $eneracin de >ibridoas de ratn rata ?ori$en Crido@ productores de

&c!os es una tecnolo$a nobleJ -ue funciona en laboratorios con u diversoe-uipaiento4 condiciones eperiencia4 siepre -ue los operadores se ajusten a

un ri$or eperiental eleental. ?51852@

,oco tiepo despu6s del reporte de ler !ilstein se coen% la

adaptacin de la t6cnica a c6lulas >uanas.?53@ =a cual es uc>o as copleja

en relacin a lo -ue sucede en ratn rata. Ello >ace -ue eistan u pocas

aplicaciones coerciales de &c!os >uanos.

=a produccin de &c!os contra los ant$enos del sistea &;O otros

ant$enos eritrocitarios4 es posible obtenerla a trav6s de la foracin de >bridos

Cridos ?5145245+455@ la produccin de &c!os contra los ant$enos del sistea

> es posible a trav6s de la foracin del >etero>ibridoas ?,roduccin de

>etero>ibridoas utili%ando coo c6lulas productoras de anticuerpos linfocitos ;

transforados por el "E; coo pareja de fusin c6lulas de ieloa de ratn

deficientes de la en%ia >ipoantina8$uanina8fosforibosil8transferasa ?DG:,:@@4

debido a -ue el ratn tiende a responder contra el coplejo > en su totalidad no contra los ant$enos especficos del sistea.?5#85(@

P'ODUCCI(N A G'AN E)CALA

M#*OS # "+%*O

:radicionalente se >a utili%ado suero de ori$en anial ?suero fetal bovino4

suero bovino adulto4 suero e-uino@ coo supleento del edio de cultivo

epleado para el creciiento de las c6lulas de aferos cultivadas in vitro. Entre

las dificultades asociadas al uso de suero anial en los cultivos de c6lulas



16/54

utili%adas en la produccin de anticuerpos de uso terap6utico o coo reactivos se

encuentran

S 7u alto costo

S 7u coposicin indefinida.

S =a variabilidad lote a lote.

S El potencial ries$o de la presencia de icoplasas4 virus otros a$ente

adversos.

El desarrollo de edios de cultivo de coposicin definida4 es decir libres

de suero4 >idroli%ados proteicos u otras e%clas de ori$en anial o ve$etal cua

coposicin eacta no pueda ser deterinada ni reproducida4 de edios libres

de cual-uier protena4 >a sido objeto de nuerosos estudios ?5*8#2@. Entre las

ventajas -ue ofrecen estos edios de cultivo se encuentran las si$uientesS eproducibilidad de los cultivos.

S !enor ries$o de aparicin de pat$enos oportunistas ?virus4 icoplasas4

priones@.

S 7iplificacin reduccin de costos del proceso.

o obstante4 debe tenerse en cuenta -ue la forulacin ptia de un

edio de cultivo libre de suero o de un edio de cultivo libre de protenas

depende fuerteente de la lnea celular epleada4 del clon particular4 de las

condiciones de cultivo de las variables del proceso4 por lo -ue debe ser objeto de

un estudio cuidadoso especfico para cada caso ?#38#5@.

S*S%MAS # "+%*O "+AR

En el cultivo de c6lulas aniales se eplean diferentes sisteas para el

creciiento celular4 en funcin de la capacidad de las c6lulas de crecer en fora

dependiente o independiente de una superficie ?denoinada sustrato@4 es decir4

ad>eridas o en suspensin.

&nteproecto ,'$ina 1# de 12


17/54

Sistemas ad!erentes

,ara el creciiento de las c6lulas ad>erentes se eplean nuerosos soportes4

entre los -ue se encuentran

S Placas de culti,o: placas de poliestireno con un nCero variable de po%os4 de

diferente superficie4 para el cultivo celular en icroescala ?voluen 'io de

cultivo T 5 l@.

S -rascos T: frascos de poliestireno -ue proveen una u alta relacin

superficievoluen. =os 's utili%ados poseen una superficie Ctil de creciiento

de 25 c24 (5 c2 15/ c2 ?voluen 'io de cultivo T #/ l@.

S -rascos roller: 7on frascos cilndricos sobre cua superficie interna crecen las

c6lulas. e-uieren de una c'ara de cultivo especial en la cual son posicionados

>ori%ontalente4 sobre una base rotatoria4 -ue perite -ue $iren a velocidades

variables con el fin de baAar copletaente las c6lulas con edio de cultivo

?voluen 'io de cultivo T 25/ l@.

S Microcarriers: son soportes poli6ricos relativaente cilndricos4 lisos o

porosos4 -ue periten el desarrollo de c6lulas ad>eridas a su superficie. 7e

utili%an principalente en biorreactores a$itados4 -ue los antienen en

suspensin ?voluen 'io de cultivo T 1/./// l@.

Sistemas en suspensin

=os sisteas de cultivo en suspensin re-uieren -ue las c6lulas sean

previaente adaptadas al creciiento en estas condicionesH es decir4 6stas deben

perder su ad>esin al sustrato replicarse en un cultivo en a$itacin continua.

&nteproecto ,'$ina 1( de 12


18/54

S -rascos a$itados tipo spinner: Estos frascos de vidrio borosilicato son a$itados

a$n6ticaente4 a sea ediante un p6ndulo o una pe-ueAa >6lice con una

pe-ueAa pie%a et'lica en su interior4 sujetos a la tapa. Estos frascos se

posicionan en una placa a$itadora -ue posee un i'n -ue $ira a una velocidad

definida4 variable4 -ue perite as una a$itacin suave >oo$6nea del cultivo4

tanto vertical coo >ori%ontalente4 inii%ando las fuer%as de corte.

S *iorreactores: En $eneral4 los biorreactores se clasifican en dos $randes

cate$oras ?#3@ los biorreactores para c6lulas en suspensin ?tipo tan-ue a$itado

tipo airlift@ los biorreactores para c6lulas inovili%adas ?microcarriers4 de fibra

>ueca4 de ebrana4 de entrapaiento en perlas de a$arosa o al$inato4 deespua de poliuretano4 de atri% cer'ica4 etc.@.

Modos de cultivo

=a viabilidad de un proceso de produccin a escala industrial ediante el

cultivo de c6lulas aniales en biorreactores ei$e -ue se cuplan una serie de

re-uisitos operacionales. Estos procesos deben4 idealente

S 7er altaente eficientes desde el punto de vista econico.

S ,resentar operabilidad4 siplicidad confiabilidad ptias.

S ,eritir f'cilente un auento de escala de produccin.

S )eandar un nCero reducido de unidades operacionales.

S Garanti%ar la obtencin de un producto de alta calidad.

na variable u iportante -ue debe ser considerada en el oento de

definir un proceso productivo es el odo de operacin del biorreactorH es decir4 la

produccin en cultivos por lote ?cultivos batch@4 por lote alientado ?fed-batch@4

cultivos continuos tradicionales ?tipo -uiiostato@4 o cultivos continuos con

retencin de c6lulas ?con perfusin de edio de cultivo fresco@. =a eleccin

depende de distintas variables4 especialente econicas ?##@. =as principales

caractersticas de cada sistea se describen a continuacin ?#3@.



19/54

Modo de cultivo por lote .&atc/0

En estos sisteas se a$re$a todo el edio de cultivo en el biorreactor al

coien%o

del proceso4 para lue$o inocular las c6lulas dejar transcurrir el creciiento sin

-ue se adicionen edio fresco o supleentos al cultivo4 sin -ue se retire

suspensin celular en oento al$uno. Unicaente se perite el intercabio

$aseoso con el eterior. El voluen del cultivo se antiene constante a lo lar$o de

todo el proceso.

Modo de cultivo por lote alimentado .fed1&atc/0

Este sistea es siilar al anterior4 a -ue se coloca el edio de cultivo

en el biorreactor se inoculan las c6lulas4 sin -ue se retire suspensin celular

durante el proceso. =a diferencia consiste en -ue durante el cultivo se va

a$re$ando edio de cultivo fresco o nutrientes especficos4 en fora continua o

interitente a lo lar$o del proceso. =os nutrientes el densidad de o$eno ?)O@

pueden ser ajustados de anera de optii%ar el creciiento. 0oparado con el

sistea por lote4 el odo por lote alientado perite etender la vida del cultivo

obtener concentraciones celulares 's altas al ipedir la deplecin de nutrientes.7in ebar$o4 la concentracin la calidad del producto resultan variables4 a -ue

el increento de su acuulacin debido a la aor densidad celular resulta

contrarrestado por el efecto de la dilucin reali%ada al a$re$ar edio de cultivo

fresco. ?#(@

Modo de cultivo continuo en .uimiostato

En un sistea de cultivo continuo en -uiiostato se a$re$a edio de

cultivo fresco en fora continua al biorreactor4 a la ve% -ue se retira el iso

voluen4 con el iso flujo4 de suspensin celular4 peritiendo antener as el

voluen del cultivo constante. =a velocidad de alientacin del edio fresco est'

deterinada por la velocidad de creciiento de las c6lulas4 por lo -ue la cantidad

&nteproecto ,'$ina 1* de 12


20/54

de c6lulas producidasJ por unidad de tiepo es i$ual a la cantidad de c6lulas -ue

sale del reactor4 por unidad de tiepo4 lo -ue >ace -ue el sistea se anten$a en

un estado estacionario. ?#(@

Modo de cultivo continuo con per&usin

En estos procesos se a$re$a edio de cultivo fresco en fora continua4 en

tanto se retira la isa cantidad de sobrenadante de cultivo libre de c6lulas del

interior del reactor. )e esta anera todas las c6lulas peranecen en el interior del

biorreactor4 siendo alientadas con nutrientes reovi6ndose los productos del

cataboliso en fora continua. Estos sisteas periten obtener densidades

celulares u altas ?/4181 1/9 c6l81l81@ as coo una productividad

increentada del producto de inter6s4 durante un perodo de tiepo prolon$ado

?de varios eses4 inclusive@4 si pueden antenerse condiciones abientales

apropiadas4 a -ue las c6lulas continCan creciendo ientras se encuentren en el

reactor. =os puntos crticos de este sistea radican en la necesidad de antener

un control ptio de las condiciones de cultivo de disponer de un sistea

adecuado de retencin de c6lulas ?$eneralente de alto costo@4 lo -ue los

convierte en sisteas 's coplejos -ue los anteriores. ?#(@

232 O&4eti,o General

0ontar con una ,lanta acional para la ,roduccin de eactivos

Deoclasificadores.

235 O&4eti,os Espec%ficos

8 )escon$elar4 cultivar epandir en 7isteas oller4 las diferentes clonas

productoras de anticuerpos onoclonales diri$idas contra los ant$enos



21/54

eritrocitarios4 indispensables para una clasificacin san$unea -ue perita una

transfusin se$ura desde el punto de vista de su copatibilidad.

8 ,roducir envasar los reactivos >eoclasificadores si$uientes

1. &nti8&

2. &nti8;

3. &nti8)

+. &nti803b

5. &nti803d

#. &nti8I$G ?policlonal@(. eactivo de 0oobs

236 -ilosof%a de la e7presa

1.3.1 Misin

=a ,lanta de ,roduccin de eactivos Deoclasificadores tiene coo

finalidad el desarrollo de reactivos >eoclasificadores de alta calidad4 -ueperitan una correcta tipificacin san$unea4 ediante la aplicacin de la

tecnolo$a de produccin de anticuerpos onoclonales ?&c!o@4 lo -ue

conllevara a reducir los costos asociados a este rubro en "ene%uela4 cuo

consuo actual depende de la iportacin.1.3.2 Visin

0onstituirnos en una ,lata ,roductora de eactivos Deoclasificadores

de ecelencia dentro del pas4 capaces de copetir con los producidos por las

epresas transnacionales. )istribuir a nivel nacional estos reactivos para su

uso en los bancos de san$res adscritos al !inisterio del ,oder ,opular para la

7alud a futuro para su coerciali%acin dentro la red de ;ancos acionales

privados.



22/54

1.3.3 Estructura or$ani"ati,a

)esde el punto de vista or$ani%ativo la ,lanta ,roductora seestructurar' de la si$uiente anera n )irector o Vefe de )epartaento

cinco 'reas subordinadas directaente a 6l.


LICENCIADO(A) EN

BIOANALISIS

Produccin,congelacin,descongelacin yexpansin de clonesproductores deanticuerposmonoclonales.

LICENCIADO(A) EN

BIOANALISISProduccin,

congelacin,descongelacin yexpansin de clonesproductores deanticuerposmonoclonales.

LICENCIADO(A) ENENFERMERA

ESP. ENHEMOTERAPIA

Pruebas de campo y

control de calidad

LICENCIADO(A) ENENFERMERA

ESP. ENHEMOTERAPIA

Pruebas de campo y

control de calidad

SECRETARIA

Asuntos Generales

SECRETARIA

Asuntos Generales

CRISTALERA

Entrenada en

materiales

especiales

CRISTALERA

Entrenada en

materiales

especiales

AUXILIAR DELABORATORIO

Soporte tcnico en

los laboratorios

AUXILIAR DELABORATORIO

Soporte tcnico en

los laboratorios

LICENCIADO(A) ENFARMACIA

Encargado de la

produccin

LICENCIADO(A) ENFARMACIA

Encargado de la

produccin

JEFEDEPARTAMENTO

Bilogo Jefe

Supervisin,coordinacin y toma

de decisiones.

JEFEDEPARTAMENTO

Bilogo Jefe

Supervisin,

coordinacin y toma

de decisiones.


23/54

Cap%tulo II

Estudio de la Necesidad

532An8lisis de patrones de necesidad actuales

535 Deter7inacin de las necesidades en reacti,os! 7ateriales #

e9uipos para la Produccin de reacti,os +e7oclasificadores3



24/54



25/54

CUAD'O 'E)UMEN DEL CON)UMO ANUAL



26/54

Nro3 DE)C'IPCION Presentacin Concentracin

Total -cosal Ao

; a Produciren la Planta

.Apro


27/54

53> Porcenta4e de la de7anda 9ue atender8 la e7presa

)entro de los principales consuidores de estas producciones4 teneos

53? Cadena de co7erciali"acin # distri&ucin

53?32 De los co7petidores

53?35 De la e7presa productora de -luidoter8picos

53?36 Principales distri&uidores de la e7presa

Cap%tulo III

Estudio de la Cadena

632 Dia$ra7a de la cadena

635 Cadena dina7i"ada para el sector en estudio

636 Identificacin de insu7os

63632 Insu7os nacionales

63635 Insu7os i7portados



28/54

Cap%tulo IV

Definicin! Caracteri"acin de Productos # Capacidad a Instalar

A9u% se de&e colocar un cuadro: definiendo las l%neas de7anufactura! con los productos 9ue all% se reali"ar%an! principios

acti,os! presentaciones! cantidades! deri,ado del cuadro denecesidades presentado en el punto 535

& continuacin4 se describen los procediientos a se$uir en los diferentes

laboratorios de la ,lanta ,roductora de reactivos >eoclasificadores4 para lo$rar

la produccin a $ran escala de los isos.

CLONACI(N

Objetivo 0lonacin de Dibridoas con el fin de ase$urar la onoclonalidad del

clon productor de anticuerpo.

Responsables:0oordinador ?;ilo$o Vefe@ =icenciado en ;ioan'lisis.

Definiciones, Abreviaciones y/o Traducciones !edio de cultivo ?!0@

Materiales ,lacas de *# po%os fondo plano ?GEIE@

Reactivos:sobrenadante de cultivo de la lnea celular V(++.2 al 1/4

!uipo:0apana de flujo lainar vertical. =ainaire

"rocedimiento:



29/54

18 =as c6lulas contenidas en los po%os con seAal positiva4 se epanden se

clonan en cuatro ocasiones con el fin de ase$urar la onoclonalidad del

clon -ue se seleccione.

28 El procediiento -ue se eplea es el de dilucin lite.

38 El !0 -ue se utili%a en este procediiento ade's de contener los

coponentes presentes en el edio de epansin4 se enri-uece con el

sobrenadante de cultivo de la lnea celular V(++.2 al 1/ ?lnea tuoral

acrof'$ica de ratn4 productora de -uiiosinas -ue favorecen el

creciiento celular@.

+8 =as c6lulas contenidas en el edio de clonacin se cuentan lue$o se

reali%an diluciones en tubos de 15 l con tapa ?0E==7:&@ >asta

alcan%ar concentraciones de 1/4 5 2.5 c6lulasl de fora tal -ue alsebrar 1// ul de estas suspensiones en los po%os de una placa de *#

po%os ?GEIE@ la aor probabilidad sea la de estar depositando en

cada po%o 14 /45 /425 c6lulas respectivaente.

58 En cada clonacin el clon esco$ido debe pertenecer a la dilucin 's baja

sebrada ?/425 c6lulas po%o@. ?#98#*@

CONGELACI(N CELULA'

Objetivo 0on$elar 06lulas en itr$eno =-uido ?81#3L0@ con el fin de alacenar

las clonas por tiepo indefinido.

Responsables 0oordinador ?;ilo$o Vefe@4 =icenciado en ;ioan'lisis

=icenciado en Faracia


Materiales 0entrfu$a refri$erada ?;ecan 7GN;*5#/5@


Reactivos !0 ,!I 1#+/ 1W4 edio de con$elacin ?3/ de ,!I 1#+/4 5/

de 7F; 2/ )!7O ?7i$a )82#5/@.



30/54

"rocedimiento:

18 =as c6lulas a con$elar se ajustan a una concentracin de entre /.581 1/(

c6lulasl en !0 ,!I 1#+/ 1W.

28 7e centrifu$an a 2//$ por 1/ in4 se decanta el sobrenadante se aAade

$ota a $ota i$ual voluen de edio de con$elacin ?3/ de ,!I 1#+/4

5/ de 7F; 2/ )!7O ?7i$a )82#5/@.

38 En cada vial de con$elacin ?7i$a "82991@ se dispensan bajo estrictas

condiciones de esterilidad entre /43 /45 l de la suspensin.

+8 =ue$o se colocan los viales en un el con$elador de entre K(5 a 89/ o 0 pou

19 a +9 >oras pasado este tiepo se llevan al tan-ue de itr$enol-uido a K1#3L 0. ?(/@

DE)CONGELACI(N CELULA'

Objetivo )escon$elar clonas4 productoras de anticuerpos onoclonales4 con el

fin de epandir para sebrar en frascos oller.

Responsables: 0oordinador ?;ilo$o Vefe@4 =icenciado en ;ioan'lisis4 =icenciado en Faracia.


Materiales baAo de !ara ?a 3(X0@4 0entrfu$a refri$erada ?;ecan

7GN;*5#/5@


Reactivos: !0 ,!I 1#+/ 1 W o !0 libre de suero se$Cn el caso o

procediiento.

"rocedimiento:



31/54

18 =a descon$elacin se reali%a de fora r'pida4 los viales se trasladan del

l-uido a un baAo de !ara ?a 3(X0@.

28 En un periodo de tiepo no aor de 2/ se$undos4 donde se a$itan

suaveente para favorecer la descon$elacin.

38 na ve% alcan%ada la descon$elacin total las c6lulas se diluen en !0

,!I 1#+/ 1 W o !0 libre de suero4 a ra%n de 1/ l de !0 por cada vial

descon$elado. ?(1@

P'ODUCCI(N DE LO) 'EACTIVO) +EMOCLA)I-ICADO'E) A G'AN

E)CALA! A PA'TI' DE CLONA) DE ANTICUE'PO) MONOCLONALE)3

Objetivo ,roducir reactivos >eoclasificadores a $ran escala4 a partir de clonas

de anticuerpos onoclonales.

Responsables: 0oordinador ?;ilo$o Vefe@4 =icenciado en ;ioan'lisis4

=icenciado en Faracia.

Materiales Frascos oller de ,oliestireno ?Eas Grip "ent4 0ornin$ 0ell;I)

7urface@

!uipo:nidad de rodillos ?:>e 7tovall =oY ,rofile ollerZ4 Incubadora de 3(L0

5 de 0O2?&,0O@

Reactivos:!edio de cultivo libre de suero ?EW80E==Z #1/8D7F !edio =ibre de

7uero

"rocedimiento:

El sistea de cultivo a utili%ar4 ser' el de ote Alimentado con reposicin

celular. =as c6lulas se sebrar'n en Frascos oller de ,oliestireno ?Eas Grip

"ent4 0ornin$ 0ell;I) 7urface@ con tapas con ebrana de intercabio

$aseoso4 a una concentracin de 3 1/5celulasl en 25/ l de edio de cultivo



32/54

libre de suero ?EW80E==Z #1/8D7F !edio =ibre de 7uero para 06lulas de

Dibridoa con =8 Glutaina4 con ;icarbonato de sodio@ acostubradas a vivir en

este edio. El cultivo se reali%ar' a 3(L0 a + r.p.. en una unidad de rodillos ?:>e

7tovall =oY ,rofile ollerZ@4 a *5 de O2 5 de 0O2 se reali%ar'n

sustituciones diarias o interitentes4 del +/ del edio etaboli%ado por edio

fresco con reposicin celular. Deos ele$ido este sistea debido a -ue es el -ue

ejores ventajas econicas nos brinda el >ec>o de poder etender el cultivo en

el tiepo4 nos a>orrara insuos dado -ue los ttulos en la produccin de

anticuerpos a partir de las clonas -ue poseeos son altos4 la sustitucin de edio

de cultivo la consecuente dilucin del producto final no sera un inconveniente.

o obstante ser' necesario reali%ar un estudio previo del coportaiento de cada

una de las clonas de anticuerpos onoclonales especficos contra los diferentes$rupos san$uneos en Frascos oller a $ran escala utili%ando el 6todo de lote

alientado a -ue no teneos estudios previos de este procediiento en nuestro

laboratorio. ?#(4 (28(3@

.

#OTA: :odos los procediientos descritos4 ser'n reali%ados bajo condiciones

estrictas de esterilidad en 0apana de flujo =ainar "ertical4 $uantes tapaboca.

CONT'OL DE CALIDAD

,ara cada lote producido de cada anticuerpo onoclonal se reali%ar'4 con todo el

ri$or re-uerido4 el correspondiente 0ontrol de 0alidad.

E,aluacin in7uno/e7atol$ica ?(+@

Objetivo:Evaluar cada lote producido en la ,lanta.

Responsables 0oordinador ?;ilo$o Vefe@4 Especialista en Deoterapia

=icenciado en bioan'lisis.

Definiciones, Abreviaciones y/o Traducciones 7obrenadante de cultivo ?70@



33/54

Materiales:0entrfu$a de 12 posiciones para tubo de (525

Desarrollo del "rocedimiento:

7e reali%ara la evaluacin tanto en el 70 coo en el producto de las cosec>as

obtenidas en los Frascos oller.

$- Especificidad 0on relacin a los &c!o anti8; se coprobar' la

especificidad >aciendo reaccionar el sobrenadante de cultivo una

suspensin de $lbulos ; al enos tres de &1;4 as coo con $lbulos &

O.

1.1 )e fora siilar se proceder' con los &c!o anti8& en este caso seutili%aran $lbulos &1 &2; coo control ne$ativo se usar'n $lbulos ; O.

1.2 En el caso de los &c!o anti8)4 para su evaluacin se utili%ar' un panel de

c6lulas coerciales ?esolve & ++5 Ort>o@ -ue inclue $lbulos or4 114

224 rPr4 rQr4 rr4 as coo con $lbulos &1 ;4 )8ne$ativos con el fin de evaluar

la presencia de anticuerpos containantes.

1.3 En todas las deterinaciones se utili%an eritrocitos de enos de ( das de

>aber sido etrados se lavar'n al enos 2 veces con 77F al /.* seajustar'n a una concentracin del 5. :odas las c6lulas -ue se utilicen deben

presentar la prueba de anti$lobulina >uana ne$ativa. 7e deben incluir c6lulas

de fenotipos raros "ariantes )8d6biles )8parciales.

%- "otencia: 7e reali%an diluciones dobles del producto de las cosec>as

obtenidas en los frascos oller.

2.1 7e utili%a coo diluente solucin salina isotnica con 182 de albCina

bovina.2.2 7e reali%a en tubos de vidrio de 12 (5 . El voluen dispensado en

cada tubo es de 1// ul.



34/54

2.3 7e inclue un tubo -ue slo contiene 1// ul de la solucin diluente coo

control ne$ativo. =a lectura se reali%a >asta lle$ar al tubo -ue resulte

ne$ativo.

2.+ )ic>o procediiento se reali%ar' de la isa anera con los reactivos

coerciales -ue se encuentre en uso en ese oento en el servicio de

Inuno>eatolo$a del ;anco !etropolitano de 7an$re ?;.!.7.@ del ).0.

2.5 7e utili%an eritrocitos frescos previaente evaluados con anti$lobulina

>uana4 para ase$urarse no eisten fracciones de copleento o

Inuno$lobulinas fijadas a sus ebranas se lavan previaente con

77F al /4*

2.# & continuacin se prepara una suspensin entre el 385 en la isa

solucin con albCina bovina al 2.2.( =os $lbulos a utili%ar en el caso de los anticuerpos anti8& deben cuplir

con el re-uisito de tener un fenotipo4 &14 &2 &2;.

2.9 :abi6n deben utili%arse $lbulos & provenientes de reci6n nacidos. 0on

relacin a los anticuerpos anti8;4 se utili%ar'n $lbulos ; & 1;. En el caso

de los anticuerpos anti8) se re-uieren $lbulos cuo fenotipo sea )ce

?or@.

=as lecturas de titulacin se reali%ar'n a centrifu$acin inediata ?3+// rp W

15 se$undos4 en centrfu$a de 12 posiciones para tubo de (525@ lue$o

de incubarse por 15 inutos a :& a 3(X0.

=a potencia ser' el recproco de la aor dilucin del anticuerpo -ue se

evalCa4 en la -ue la reaccin resulte con positividad de 1[. El resultado debe

ostrar -ue el si$uiente tubo al de lectura final resulte ne$ativo al i$ual -ue eltubo -ue slo contena diluente.

2.*=a lectura de la a$lutinacin producida se reali%a de la si$uiente anera

2.*.1 +[ ;otn Cnico en fondo claro

2.*.2 3[ ;otones $randes en fondo claro



35/54

2.*.3 2[ ;otones pe-ueAos en fondo turbio

2.*.+ 1[ ;otones u pe-ueAos en fondo turbio

2.1/ & estas reacciones se les da un valor score: =@T124 6@T1/4 5@T94

2@T5

3 Avide&:7e evalCa en l'inas portaobjetos utili%ando el 7obrenadante de

cultivo ?70@ no diluido de los anticuerpos4 anti8& anti8;4 con $lbulos & 1

&2; anti8; $lbulos ;1 &1;4 respectivaente.

3.1 0on relacin al anti8) se reali%ar' en el 70 se eplear'n $lbulos 1r.

3.2 =as suspensiones celulares se utili%an al 5/ se e%clan 5/ ul de esta

con 5/ ul del 704 la lectura se reali%a en un visor de a$lutinacin4

anteniendo la preparacin en oviiento constante.

3.3 =a avide% ser' cronoetrada coo enores aores a 1 desde el

oento en -ue coien%a la a$lutinacin >asta la estabili%acin de los

a$lutinados.

+8 A'lutinaci(n espont)nea 0on relacin al anti8)4 se utili%an eritrocitos O rr4

fuerteente sensibili%ados con reactivo anti8c4 los cuales a$lutinan en

edio con alta concentracin de protena.

58 Evaluacin del efecto pro%ona En el caso de los anticuerpos anti8)4 se

eplean eritrocitos de tres individuos diferentes con fenotipo 1r4 cada uno

se incuba a :& por 154 3/4 #/ inutos respectivaente.

5.1 En cada tubo se aAade una $ota del 70 una $ota de la suspensin de

los eritrocitos entre el 385 en solucin salina4 se centrifu$a a 35// rp

durante 15 se$undos se lee por a$lutinacin.



36/54

5.2 0uando el $rado de a$lutinacin peranece i$ual o se increenta en los

diferentes tiepos de incubacin4 no eiste feneno de pro%ona. 7i decrece

con la incubacin si >a pro%ona. )ebe obtenerse al enos 2[ de a$lutinacin

en todos los tiepos

#eterminacin #el %tulo #e Anti-*g0 1umana n +n Antisuero 2oliclonal #e

"one3o ?(+@

Objetivo )eterinacin del titulo de &nti8I$G >uana en un antisuero policlonal

de conejo4 con el fin de posteriorente preparar un reactivo de 0oobs

Alcance Obtencin de c6lulas sensibili%adas con I$G4 :itulacin del antisuero

Responsables: 0oordinador del laboratorio4 =icenciado en ;ioan'lisis

Especialista en >eoterapia.

Desarrollo del "rocedimiento

Reactivos:77F al /495 4 pipeta ,asteur

&ctividades

18 7ensibili%acin de $lbulos rojos >uanos O positivo con I$G >uana anti8

).

1.1 previaente reali%ar el titulo de anti8) des suero -ue se va a utili%ar.

1.2 tili%ar el suero en la dilucin en la -ue se obtuvo una cru% al reali%ar el

titulo del iso. ? esta dilucin no deber ser eno a 11# ni aor a 1#+@

1.3 eali%ar una suspensin al 5 de $lbulos rojos O positivo ? 1 r @.

1.+ 0olocar a partes i$uales el suero diluido la suspensin al 5 de Glbulos

rojos.

1.5 Incubar a 3(X0 durante 3/ in.

1.# =avar los $lbulos rojos + veces con 77F al /495 4 centrifu$ar a 3+//

,! durante 3 in.

1.( ,reparar una suspensin de $lbulos rojos al 5 .

&nteproecto ,'$ina 3# de 12


37/54

28 :itilacin de antisuero de conejo anti8I$G.

2.1 !arcar una serie de tubos coo si$ue 12H 1+H 19H 11#H 132...... 11/2+.

2.2 &Aadir + $otas de solucin salina a cada tubo.

2.3 0olocar + $otas del suero a titular al prier tubo solaente.

2.+ !e%clar bien lo reali%ado en el punto 2.3 trase$ar con pipeta ,asteur +

$otas del prier tubo al se$undo. !e%clar bien continuar trase$ando del

se$undo al tercero. )el tercero al cuarto as sucesivaente.

2.5 colocar una $ota de suspensin de G al 5 previaente sensibili%ados a

cada tubo.

2.# 0entrifu$ar a 3+// ,! durante 15 se$undos. 7e establecer' coo titulo

la dilucin anterior a a-uella donde no se observe a$lutinacin a siple vista.

#eterminacin del ttulo de anti-c4d !umana ?(+@

"rop(sito: )eterinacin del titulo de &nti803d4 con el fin de posteriorente

preparar un reactivo de 0oobs.

Alcance Obtencin de c6lulas sensibili%adas con I$G4 :itulacin del antisuero



)esarrollo del ,rocediiento

!ateriales 77F al /495

Reactivos:77F al /495 4 pipeta ,asteur

&ctividades



38/54

18 7ensibili%acin de $lbulos rojos >uanos O positivo ? 1 r @4 para ello es

necesario reali%ar una activacin in vivo del copleento a traves de la via

alterna llevarlo >asta 03d.

1.1 ,rocediiento para la obtencin de $lbulos rojos sensibili%ados con 03b.

1.1.1 ,ara este procediiento es necesario la solucin V la solucin D.

1.1.2 0olocar 1*.9 l de solucin V a /X0 en baAo de >ielo e%clar

suaveente con una a$itador a$n6tico.

1.1.3 &$re$ar /.5 l de $lbulos rojos lavados epa-uetados.

1.1.+ &$re$ar /.5 l de plasa fresco del iso donante diluido 15/ con

solucin salina /.95 .

1.1.5 &$re$ar 1 l de solucin D.

1.1.# Incubar a una teperatura constante de /X0 a$itando suaveente

durante 3/ in.

1.1.( =avar los $lbulos rojos + veces con 77F al /495 4 centrifu$ar a 3+//

,! durante 5 in.

1.1.9 ,reparar una suspensin de $lbulos rojos al 5 .

1.2 ,rocediiento para la obtencin de $lbulos rojos sensibili%ados con 03d.

1.2.1 ,ara este procediiento es necesario la solucin 7.

1.2.2 0olocar /.5 l de $lbulos rojos sensibili%ados con 03b en un tubo.

1.2.3 0olocar 1 l de la solucin 7.

1.2.+ !e%clar e incubar a 3(X0 durante 3/ in. !e%cl'ndolo ocasionalente

con un a$itador a$n6tico.

1.2.5 =avar los $lbulos rojos # veces con 77F al /495 4 centrifu$ar a 3+//

,! durante 5 in.

1.2.# ,reparar una suspensin de $lbulos rojos al 5 .

1.2.( Guardar los $lbulos rojos a +X0.

28 :itulacin del antisuero &nti8 03d



39/54

2.1 !arcar una serie de tubos coo si$ue 12H 1+H 19H 11#H 132...... 11/2+.

2.2 &Aadir + $otas de solucin salina a cada tubo.

2.3 0olocar + $otas del suero a titular al prier tubo solaente.

2.+ !e%clar bien lo reali%ado en el punto 2.3 trase$ar con pipeta ,asteur +

$otas del prier tubo al se$undo. !e%clar bien continuar trase$ando del

se$undo al tercero. )el tercero al cuarto as sucesivaente.

2.5 colocar una $ota de suspensin de G al 5 previaente sensibili%ados a

cada tubo.

2.# 0entrifu$ar a 3+// ,! durante 15 se$undos. 7e establecer' coo titulo

la dilucin anterior a a-uella donde no se observe a$lutinacin a siple vista.

Metodologa para determinar la dilucin ptima a la cual se deben preparar

los reactivos monoclonales anti-A, anti-B y reactivo de "oombs (anti-"d4 y

anti-*g0 !umana) as como el tipo de colorante y cantidad .ue se debe

utili$ar en cada uno de ellos' ?(+@

Objetivo:)eterinacin de la dilucin ptia a la cual se deben preparar losreactivos onoclonales anti8&4 anti8; reactivo de 0oobs4 as coo colorante

para cada uno de ellos

Alcance: ,reparacin de reactivos onoclonales necesarios para la

>eoclasificacin.



Definiciones, Abreviaciones y/o Traducciones:


Materiales:77F al /495



40/54

Actividades:

18 na ve% obtenidas las ascitis producidas en ratones balbc4 coo se

epuso anteriorente4 correspondientes a los clonos productores de anti8

&4 anti8; anti803d. 7e procede con cada una de ellas de i$ual fora.

28 7e reali%an diluciones dobles de las isas en la solucin diluente para

reactivos onoclonales se >acen reaccionar vv con los $lbulos lavados

correspondientes en una dilucin del 5 en 77F.

38 0oo dilucin ptia se toa a-uella dilucin por encia de la cual se

obtienen cuatro diluciones con resultados T +[

+8 0olorantes a utili%ar

+.1eactivo

+.2&nti8& &%ul brillante cresil /4/1 $ 0. 7. ,. 1/// l

+.3 &nti8; &criflvina /./15 0. 7. ,. 1/// l

+.+ eactivo de 0oobs ap>tol $reen ; /415 $ 0. 7. ,. 1///l

Mtodo para estimar el tiempo de e/piracin o tiempo 5til de los reactivos

monoclonales ?(+@

Objetivo:Estiacin del tiepo de epiracin de los reactivos onoclonales.

Alcance:,reparacin de reactivos onoclonales..

Responsables: 0oordinador ?;ilo$o Vefe@4 =icenciado en ;ioan'lisis4

Especialista en >eoterapia =icenciado en Faracia


&ctividades

&nteproecto ,'$ina +/ de 12


41/54

18 El tiepo de epiracin de los reactivos onoclonales preparados en

nuestro laboratorio ?&nti8&4 anti ;4 anti 03d reactivo de 0oobs@ se >a

estiado de la si$uiente anera

1.1na ve% preparado un lote de cual-uiera de los reactivos onoclonales

antes encionado se separan cuatro ?+@ frascos del iso.

1.2:res de esos frascos se alacenan a :ep. de entre 289L04 para reali%ar

los correspondientes estudios de control de calidad a lo lar$o del tiepo Ctil

del reactivo.

1.3El cuarto frasco se incuba a 3(L0 se reali%an deterinaciones diarias

ediante la prueba de a$lutinacin en tubos con $lbulos portadores del

ant$eno especfico >acia el cual esta diri$ido el &c!o contenido en el

reactivo.

1.+0ada resultado i$ual a +[ se corresponder' con un es de vida Ctil del

reactivo en prueba.

1.5na ve% -ue el resultado es inferior se toa coo resultado final el anterior

al Cltio de +[.

*n&ormacin contenida en la eti.ueta

=as eti-uetas en cada envase deben contener la si$uiente inforacin

obre del producto

obre doicilio del fabricante distribuidor.

Cero de lote

Cero de re$istro

Fec>a de epiracin

:eperatura de alacenaje

"oluen

=o$o

&nteproecto ,'$ina +1 de 12


42/54

!edidas +c #.5c

Capitulo V

In$enier%a

7e prev6 la ejecucin de las actividades de 0onstruccin !ontaje en un perodo

de ?@ eses eiste la intencin poltica de -ue 6stas concluan en

el triestre del aAo 2/1n a partir del cual se iniciara la puesta en arc>a

tecnol$ica de in$eniera de las instalaciones de acuerdo al crono$raa aneo

Ane


43/54

a@ )isponibilidad de potencia el6ctrica de varios tipos de cobustibles.

b@ 0osto del corte de ener$a.

c@ eserva para futuras epansiones.

+. &$uaa@ 0ualitativa ?caracterstica fsico8-uica icrobiol$ica@

b@ 0uantitativo ?inerales entre otros@

c@ 0osto de la ausencia de a$ua por corte

Factores Especficos

1.8 :ransporte

a@ )isponibilidad de varios servicios ?terrestre4 a6reo4 artio@

2.8 Geo$r'ficos

a@ 0osto de la inversin re-uerida para la construccin del 'rea.

b@ 0osto de los terrenos

c@ Espacio para futura epansin

3.8 =aborales

a@ )isponibilidad de ano de obra calificada no calificada

+.8 0ounitarios

a@ ,roiidad de >ospitales %onas edicas

5.8 Inundacin 0ontrol de Incendios

a@ ,eli$ro de incendio en 'rea circunvecinas

b@ "erificar los controles >istricos de inundaciones

#.8 &biente

a@ :rataiento de residuo o facilidades de ebaularlo

(.8 En copleento de las definiciones de variables socio8econicas de los

re-uisitos t6cnicos al tener en consideracin en el oento de la locali%acin de

la f'brica se propone -ue las claves de las decisiones deben ser racional

ponderadas en cada una de las variables.



44/54

Varia&les )ocio1econ7icas:

Varia&le 'acional Ponderados

&ccesibilidad )istancia a la

puertas de entrada al ,as

=as lar$as distancias las dificultades de

transporte pudiesen iplicar aor costo deproduccin necesidades de stoc

?eistencia@. ,la%os de entre$a 's lar$os.

&ccesibilidad )istancia a los

principales centros de

consuo

=as distancias lar$as conjuntaente con la

dificultad de transporte pueden iplicar

aor costo de distribucin

)isponibilidad de ano de

obra no calificada

)eber' eistir disponibilidad de ano de

obra con las caractersticas definidas la

distancia accesibilidad al transporte

deberan ase$urar un tiepo no superior a

3/ in de la localidad

)isponibilidad de ano de

obra 0alificada

)eber' eistir disponibilidad de ano de

obra con las caractersticas definidas la

accesibilidad al transporte deberan

ase$urar un tiepo no superior a 3/ in de

la localidad

'e9uisitos Tcnicos

'EBUI)ITO 'ACIONAL PONDE'ADO

&$ua WEner$a W W

&$ua

\.

&nteproecto ,'$ina ++ de 12


45/54

VALO'ACI(N ECON(MICA DEL P'OECTO

Cuadro con el Plan de in,ersin! en fases! totali"ado # separado

por: terrenos! estructura! e9uipos para proceso! e9uipo desoporte! e9uipo de produccin de ener$%a! pro#ecto deconstruccin! diseo conceptual! in$enier%a &8sica! in$enier%a dedetalle! procura! siste7as de infor7acin # softare!recluta7iento capacitacin # entrena7iento! super,isinrecepcin # puesta en 7arc/a de los e9uipos! aco7paa7ientoen el arran9ue! # otros 9ue ten$an a &ien sealar

Propuesta de transferencia tecnol$ica3

?3> Nor7as! per7isolo$%a # est8ndares de calidad:

,ara llevar a cabo cada uno de los procesos en las diferentes plantas o 'reas sedeben re$ir por las si$uientes norativas

;uenas ,r'cticas de !anufactura4 Gaceta Oficial ro 39.//*

=aborator ,ractice K G)= ? )irective 2.//+*E0 and )irective 2.//+ 1/E0 @

)ecreto8 =e ] 1(#2//# del 3/ de &$osto K Estatuto do !edicaento

I7O *//1 K 7istea Gesti^n de la 0alidad

I7O 1+//1 K 7istea de Gesti^n &biental

OD7&7 19//1 K 7istea de Gesti^n de 7e$uridad 7e$uridad en eltrabajo.

Infore 32 ?"alidacin de ,rocesos en General@

Infore 3( ?&se$uraiento de la 0alidad 0alificacin de ,ersonal

,roveedores@

Infore 3* ?7isteas de &$ua@

Infore +/ ?0alificacin de E-uipos@



46/54

Infore +3 ?Estabilidad del ,roducto@

Infore ++ ?;,=@ con &neo de Est6rilesJ

oras 0O"EI

oras I7O *//14 1(///4 1(/25.

Guas de "erificacin de ;,! de la O!7.

Foratos de e-uisitos para e$istro 7anitario de =aboratorios Fabricantesdel !,,7.

'eferencias

1. Constitucin Nacional de la 'ep&lica *oli,ariana deVene"uela. Gaceta Oficial L. 32.9#/ de fec>a 3/ 12 **.

2. 0oit6 de Epertos de la O!7 FEspecificaciones para lasPreparaciones -ar7acuticas4 Ginebra4 &Ao 1***H Infore L 35.

3. 0oit6 de Epertos de la O!7 para el FAse$ura7iento de lacalidad # calificacin del personal # pro,eedores!Infore L 3(.

+. Decreto so&re Nor7as para el 'e$istro! Ela&oracin!I7portacin! E


47/54

3 Gu%a de Verificacin de *uenas Pr8cticas de Manufactura dela OM)3

9. Gaceta Oficial de la epCblica ;olivariana de "ene%uela L333.(25 de fec>a 23 de junio del 2//+ Nor7as de *uenas Pr8cticasde Distri&ucin para la Industria -ar7acutica3

*. Gaceta Oficial de la epCblica ;olivariana de "ene%uela L39.//* de fec>a 2# de a$osto del 2//+ Nor7as de *uenasPr8cticas de -a&ricacin para la Industria -ar7acutica3

1/. Gaceta Oficial de la epCblica ;olivariana de "ene%uela L3+.212 de fec>a /# de octubre del 2//5 F'e$ulacin deMedica7entos3

11. Infor7e 65 Or$ani"acin Mundial de la )alud4 Ginebra4 &Ao1**2. K0oit6 de Epertos de la O!7 en especificaciones para laspreparaciones farac6uticas.

12. Le# Or$8nica de )alud3Gaceta Oficial L. 5.2#3 etr. de fec>a1( /* *9H :itulo III. de los servicios para la salud. 0aptulo I" de la0ontralora 7anitaria. art. 32 33H :itulo "III. del 6$ien 0autelar de7alud. art. #54 ## #(.

13. Le# de Medica7entos3 Gaceta Oficial L. 3(.//# del /3 /9 //H :itulo I". Estableciientos Farac6uticos. 0aptulos I4 II4 III. art.desde el +( al #5H :tulo "III. del 6$ien 7ancionador. 0aptulo I. art.(+4 (5 (#.

1+. Le# de E4ercicio de -ar7acia3Gaceta Oficial L. 1#.551 del /(/( 29.

&nteproecto ,'$ina +( de 12


48/54

15. =icitacin de ao del 2/1/ sobre FMedica7entos contenidosen el -or7ulario Teraputico Nacional! !inisterio del ,oder,opular para la 7alud. &Ao 2/1/.

1#. Lista *8sica de Medica7entos Esenciales3 !inisterio del,oder ,opular para la 7alud. &Ao 2//(.

1(. Manual de *uenas Pr8cticas de -a&ricacin para la Industria-ar7acutica3 epCblica de "ene%uela4 !inisterio de 7anidad

&sistencia 7ocial4 )ivisin de )ro$as 0os6ticos.

19. Plan Estrat$ico de la Nacin 5JJ15J264 ,rier ,lan7ocialista 7in ;olvarJ.

1*. 'e$la7ento Vi$ente de la Le# de E4ercicio de la -ar7acia H)ecreto L. 2.*32 del 2/ /5 *3. Gaceta Oficial L. +.592 etr. del 21/5 *3 al /1/#/5.

2/.=andsteiner er8sc>einun$en noralen

ensc>lic>en ;lutes. Mien ensc>r 1*/1H1+11328113+

21.Garrat G4 )%i M4 Issitt ,)4 et al. :erinolo$ for blood $roup anti$ens and

$enes >istorical ori$ins and $uidelines in t>e neY illenniu. :ransfusion

2//H+/+((8+9*

22."on )ecastelo &4 7turli &. Nber due usia$lutine i 7eru$esunder und

Ironer !ensc>en. !unc>ensc>r 1*/2H2#1/*/81/*5

23.Matins M !. :>e &;O blood $roup sste Distorical ;ac$round.

:ransfus !ed 2//1H112+382#5



49/54

2+.eid ! E4 =oas8Francis 0. :>e blood $roup anti$en factsboo. 2nded. 7an

)ie$o4 0 &&cadeic ,ress4 2//+

25.)aniels G. Duan blood $roups. 2nd ed. Oford ;lcYell 7cience4 2//2

2#.Olsson ! =4 Irs>aid !4 Dosseini8!aaf ;4 et al. Genoic analsis of

clinical saples Yit> serolo$ic &;O blood $roupin$ discrepancies

Identification of 15 novel & and ; sub$roup alleles. ;lood 2//1H*915958

15*3

2(.!ollison , =4 En$elfriet 0 ,4 0ontreras !. ;lood transfusion in clinical

edicine. 1/t>ed. Oford ;lacell 7cientific ,ublcation 1*((

29.!elaed !4 :>opson es Vones 4 e-uireents for t>eestablis>ent of >etero>bridoas secretin$ onoclonal >uan antibod to

r>esus ?)@ blood $roup anti$en. V Iunol !et>ods. 1*9(H1/+2+58251

2*.,il$ri G4 and etero$eneit Yit>in blood

$roup ;. Epl 0lin Iuno$enet 1*9(H+9*

3/.=inares V . Inuno>eatolo$a :ransfusin. ,rincipios ,rocediientos.

1ra Ed. 0aracas 1*9#

31.=andsteiner 4 Meiner &7 .&n a$lutinable factor in >uan blood reco$ni%ed

b iune sera for r>esus blood. ,roc 7oc Ep ;iol .1*+/H +3 223

32.)aniels G4 =oas8Francis 04 Mallance !4 :ippett , . Epitopes of > ) .

7erolo$ and !olecular Genetics. In 7ilbestrein =E4 Ed . !olecular and

Funcional &spects of ;lood Group &nti$ens4 ;et>esda4 !) H &erican

&ssociation of ;lood ;ans4 1**5

33.&vent 4 eid !. :>e > blood $roup sste. & revieY ;lood 2//1H*53(58

39(

&nteproecto ,'$ina +* de 12


50/54

3+."en$len8:ler "ir$inia4 0>air and Editor.:>ec>nical !anual 13t> Ed

;et>esda4 !) &erican &sociacion of ;lood ;ans4 1***

35.ace 4 7an$er . ;lood $roup in an. 7it> ed. ;lacYell 7cientific

,ublication4 Oford 1*(54 cap 5

3#.osenfield 4 &llen F4 7Yis>er 7 et al . & revieY of > serolo$ and neY

terinolo$. :ransfusion 1*#2H229(8312

3(.0arton V4 ;all ,4 =e "an ts into t>e stuctures and

function of ebrane polipeptides carrin$ blood $roup anti$ens. "o 7an$

1**9H(+?suppl 2@2*8#+

39.0>6rif8_a>ar ;4 ;lo 04 =e "an uan blood $roup > polpecttide. ,roc atl &cad 7ci 7&

1**/H9(#.2+382+(

3*.&vent 4 id$Yeell > ?>esus@8blood8$roups anti$ens

epression. ;ioc> V 1**/H2(19218925

+/.=e "an 6rif8_a>ar ;4 et al . !olecular clonin$ and priar

structure of t>e >uan blood $roup >) polpeptide. ,roc atl &cad 7ci

7&. 1**2H9*1/.*2581/.*2*

+1.!ollison ,4 En$elfriet 04 0ontreras !. ;lood :ransfusion in clinical edicine.

Oford4 En$land ;lacYell 7cienceH 1**(

+2.Vones V4 7cott !4 "oa ). !onoclonal anti ) specificit and > ) structure

criteria for selection of onoclonal anti ) rea$ents for routine tpin$ of

patients and donors. :ransf !ed 1**5H51(1819+.

+3.)iaon =4 )enton . > a$$lutination in various edia Yit> particular

reference to t>e value of albuin. V =ab 0lin !ed 1*+5H31921893/



51/54

++.oans )4 :ille 04 0rooston !4 et al. 0onversion of incopatible

antibodies to direct a$$lutinins b ild reduction4 evidence for se$ental

fleibilit Yit>in t>e Fc fra$ent of iono$lobulin G. ,roc atl &ca 7ci

7& 1*((H(+2.53182535

+5.7cott ! =4 "oa )4 Vones V4 et al. & neY I$! onoclonal anti8) t>at detects

loY $rade8)?u@ and all cate$ories variants ecept )"IK a supirior tpin$

rea$ent. :transfusion 1**3H33?suppl 1(7@*7

+#.=lod8Evans ,4 Guest & 4 "oa ) and )cott! =. )etection of Yea ) and

)"Ired cells in ) ne$ative iture b floY ctoetr iplications for feto8

aternal >aeorarr>a$e -uantification and ) tpin$ polices for neYborns.

;r V >eatol 1***H1/+#218#25

+(.ulan !4 Milde 0 ) and bridoas secretin$ specific antibodies. ature 1*(9H2(#2#*82(/

+*. &4 =iese$an$ ; and ajeYs at >as lost iuno$lobulin epression but perit t>econstruction of antibod8secretin$ >brid cell line. V Iunol

1*(*H12315+98155/

5/.Gavilondo V. &spectos b'sicos avances recientes en la tecnolo$a de

produccin de anticuerpos onoclonales. Interfern ;iotecnolo$a

1*9(H+181#

51.ivero &4 7u're% = E4 ;encoo &4 et al. Generacin de un >ibridoa de

ratn secretor de anticuerpos onoclonales contra el ant$eno del $rupo

san$uneo & del sistea &;O >uano. ;iotecnolo$a &plicada 1**5H12238

2*



52/54

52.=en G4 0ru% 04 ojas =. ,roduccin de un anticuerpo onoclonal ?&c!o@

con especificidad anti ;4 para ser utili%ado coo reactivo >eoclasificador.

Invest 0lin 2//+H+51+5815(

53.7inovis V.G3 Earl >istor of specific antibod producin$ lp>octe>bridoas. V 0ancer esearc> 1*91H+112+#812+(

5+.Gavilondo V. &nticuerpos !onoclonales. Elfos 7cientae4 =a Dabana 1**5

55.!esseter =4 ;rodin : et al. !ouse onoclonal antibodies Yit> anti8&4 anti8;

and anti8&4; specificitiesH soe superior to >uan polclonal &;O

rea$ents."o 7an$ 1*9+H+#19581*+

5#.:>opson < !4 ;arden $4 7ut>erland V et al. Duan onoclonal antibodiesto 04c4 E4e and G anti$ens of t>e > sste. Iunolo$ 1**/H(13238 32(

5(.!c 0ann !4 Vaes ods 1*99H1153815

59.e lar$e scale production of recobinant protein fro 0>inese >aster

ovar cell line. 0totec>nolo$ 1(15381#3.

5*.inese >aster ovar cells ?)G++@ usin$

a statistical desi$n beneficial effect of Yeanin$ of cells. In "itro 0ell. )ev.

;iol. 8 &nial 351(98192.

#/.bridoa and

parental eloa cell cultivation. !et>od. En%ol. 1212((82*2.

#1._an$4 !.H :rautann4 D.H Gandor4 0.H !essi4 F.H &sselber$s4 F.H =eist4 0.H

Fiec>ter4 &. eiser4 V. ?1**5@ ,roduction of recobinant proteins in

0>inese >aster ovar cells usin$ a protein8free cell culture ediu.

;io:ec>nolo$ 1339*83*2.



53/54

#2.Noon4 7.oi4 7.=.H 7on$4 V.=. =ee4 G.!. ?2//5@ Effect of culture pD on

ert>opoietin production b 0>inese Daster Ovar cells $roYn in

suspension at 32.5 and 3(./X0. ;iotec>nol. ;ioen$. 9*?3@3+5835#.

#3.:oas>ii4 !. Nooaa4 7. ?1**(@ ;iorreactors desi$n for anial cells.En !aalian cell biotec>nolo$ in protein production. D. Dauser .

Ma$ner ?eds.@4 Malter de Gruter4 ;erln4 &leania.

#+.u4 V.7. =ee4 G.!. ?1**(@ Influence of >perosolar basal edia on

>bridoa cell $roYt> and antibod production. ;ioprocess ;iosst. En$.

1#?#@3/5831/.

#5.&ltairano4 0.H Illanes4 &.H 0anessa4 . ;ecerra4 7. ?2//#b@ 7pecific

nutrient supleentation of defined seru8free ediu for t>e iproveent

of 0DO cells $roYt> and t8,& production `on line. Electronic Vournal of

;iotec>nolo$ "ol. *4 Issue 1 ?I77/(1(83+59@

>ttpYYY.ejbiotec>nolo$.infocontentvol*issue1full9

##.!ar-uis4 0.,.H Darbour4 0.H ;arford4 V.,. =oY4 ods for >bridoa propa$ation and onoclonal

antibod production. 0totec>nolo$ +?1@#*8(#.

#(.)idier4 0aroline ?2//9@ Optii%acin de la ,roduccin de Eritropoetina

Duana ecobinante ?r>E,O@ !ediante el 0ultivo de 06lulas &niales.

:esis. ,a$. 3283+. >ttpbibliotecavirtual.unl.edu.ar919/tesis>andle11(3

#9.ivero &4 7u're% = E4 ;encoo &4 et al. Generacin de un >ibridoa de

ratn secretor de anticuerpos onoclonales contra el ant$eno del $rupo

san$uneo & del sistea &;O >uano. ;iotecnolo$a &plicada 1**5H12238

2*

#*.=en G4 0ru% 04 ojas =. ,roduccin de un anticuerpo onoclonal ?&c!o@

con especificidad anti ;4 para ser utili%ado coo reactivo >eoclasificador.

Invest 0lin 2//+H+51+5815(

http://www.ejbiotechnology.info/content/vol9/issue1/full/8/http://bibliotecavirtual.unl.edu.ar:8180/tesis/handle/1/173http://www.ejbiotechnology.info/content/vol9/issue1/full/8/http://bibliotecavirtual.unl.edu.ar:8180/tesis/handle/1/173


54/54

(/.Dudson =4 Da F 0. ,ractical Iunolo$. 7econd edition. ;lac Yell

7cientific ,ublications47&4 1*9/

(1.Godin$ V M. !onoclonal &ntibodies ,rinciples and ,ractice. :>rid Edition.

&cadeic ,ress =iited4 ibridoa IFI;#05 para su propa$acin la produccin de

anticuerpos onoclonales. Interferon ;iotecnolo$a4 1*994 "ol 54 3 2#28

2#*

(3.;erson Friederic>s G. & self8feedin$ olleer ;ottle for continuous cell

culture. ;iotec>nol. ,ro$. 2//94 2+ 15+815(

(+.ecoendaciones de la &$encia de &dinistracin de )ro$as &lientos

?F)&@ de los EE para la evaluacin de reactivos >eoclasificadores4

)O0

formato de proyectos farmaceuticos dgp imayo 2014 2_proyecto_planta_hemo bms

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