GENOMA

E X T R A Ç Ã O DE D

N A

INTRODUÇÃO:Todos os organismos vivos armazenam todas as suas

informações genéticas codificadas e contidas nos ácidos nucléicos ( DNA).

A molécula de DNA é conhecida como a molécula da hereditariedade, pois dentro dela estão contidas todas as informações genéticas das quais o novo indivíduo necessita para ser formado.O DNA é uma molécula por duas cadeias na forma de uma dupla hélice. 

EXTRAÇÃO DO DNAMuito utilizada nos setores alimentício e farmacêutico, uma vez que

estes se utilizam frequentemente da manipulação do DNA de organismos para a criação de transgênicos e para o estudo de características genéticas com fins medicinais.

O objetivo é sempre o de adquirir um organismo de melhor qualidade ou que apresente uma característica antes ausente. Isso é possível, pois é o material genético que codifica as proteínas que determinam as características de todo ser vivo. Assim, manipulando-se o material genético pode-se alterar as características de um organismo, potencializando as desejáveis e evitando as indesejáveis.

Para chegar nesse nível de desenvolvimento biotecnológico, foi preciso estudar a estrutura da molécula de DNA para assim possibilitar a escolha e isolamento do gene de interesse, o que torna a extração de DNA fundamental para seu próprio estudo.

DNAEssas cadeias são constituídas por um açucar ( desoxirribose),

um grupo fosfato e uma base nitrogenada (T timina, A adenina, C citosina ou G guanina).

MATERIAL SUFICIENTE PARA 3 GRUPOS DE ATÉ 10 ESTUDANTES:• Morangos maduros• 3 sacos plásticos para maceração dos morangos• 3 colheres de sopa• 3 colheres de chá• 9 copos de vidro transparente• 3 recipientes contendo sal de cozinha• 3 frasco com detergente (sem cor) de lavar louça.• 3 frasco com álcool comercial 98%• 3 provetas ou 3 frasco contendo 150 mL de água• 3 peneiras ou coadores de chá• 6 tubos de ensaio grandes• 3 bastões de vidro, plástico ou madeira• 3 protocolos com os procedimentos

SELECIONAR 3 MORANGOS E TIRAR OSSEUS CABINHOS VERDES.

COLOCAR OS MORANGOS DENTRO DE UM SACO PLÁSTICO E MACERÁ-LOS PRESSIONANDO OS MORANGOS COM OS DEDOS ATÉ OBTER UMA PASTA QUASE HOMOGÊNEA. TRANSFERIR A PASTA DE MORANGO PARA UM BECKER

Em outro becker misturar 150 ml de água, uma colher (sopa) de detergentee uma colher (chá) de sal de cozinha. Mexer bem com o bastão de vidro, porém devagar para não fazer espuma

Colocar cerca de 1/3 da mistura de água, sal e detergente sobre o macerado de morango. Misturar levemente com o bastão de vidro.Incubar em temperatura ambiente por 30 minutos. Mexer de vez em quando com o mesmo bastão.

Colocar uma peneira sobre um becker limpo e passar a misturapela peneira para retirar os pedaços de morango que restaram.

Colocar metade do líquido peneirado em um tubo de ensaio. Colocar apenas cerca de 3 dedos no fundo do tubo.

Despejar delicadamente no tubo (pela parede do mesmo), sobre a solução, dois volumes de álcool comum. Não misturar o álcool com a solução.Aguardar cerca de 3 minutos para o DNA começar a precipitar na interface.

Passo opcional. Usar um bastão de vidro, plástico ou madeirapara enrolar as moléculas de DNA. Gire o palito na interfaceentre a solução e o álcool.

MACERAÇÃO: O morango precisa ser macerado para que os produtos químicos utilizados para a extração cheguem mais facilmente em todas as suas células

SAL: A adição do sal proporciona ao DNA um ambiente adequado. O sal contribui com íons positivos que neutralizam a carga negativa do DNA.

JUSTIFICATIVA DAS ETAPAS:

DETERGENTE: O detergente afeta as membranas porque elas são formadas por lipídeos. Com a ruptura das membranas o conteúdo celular, incluindo as proteínas e o DNA, soltam -se e dispersam-se na solução. A função de algumas dessas proteínas é manter o DNA enrolado numa espiral muito apertada

ÁLCOOL: Ao colocar o álcool na solução de extração misturada com o morango, foi possível observar a precipitação da fita de DNA, isso ocorreu devido ao fato de a proteína DNA ser insolúvel em álcool, ou seja, ela não se dissolve no álcool, tornando possível a visualização. O DNA é menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares.

CULMINÂNCIA:

* A molécula de DNA pode ser extremamente longa, mas seu diâmetro é de apenas 2 nanômetros, visível apenas em microscopia eletrônica. Assim sendo, o que se vê após a precipitação é um  emaranhado formado por milhares de moléculas de DNA.