gk 14 12-15
TRANSCRIPT
![Page 1: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/1.jpg)
![Page 2: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/2.jpg)
ü GenelBilgiler
ü ÇalışmaKapsamında
Yapılacaklar
ü İleriHedefler
![Page 3: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/3.jpg)
ÇalışmanınTemelHedefi
• Oositmaturasyonarres@görülenIVFolgularında;
ü Kisspep@nü Kisspep@nReseptörü(GPR54)ü Siklooksijenaz2ekspressyonseviyelerinintespi@veetkinliğiningösterilmesi
![Page 4: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/4.jpg)
OositMaturastonArre@
![Page 5: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/5.jpg)
• Fetalhayat
6.-7.haZa10.000
8.haZa600.000
16.–20.haZa6milyon
28.HaZamitozdurur
HızlıMitoz
PartumÖncesi2–3Milyon
Puberte300.000
² Primordialgermhücreleri5-6haZagenitalkabarbyagöçeder.
“Oogonia“
GENELBİLGİLER
![Page 6: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/6.jpg)
OositMaturasyonu(Puberteyekadar)
ü MayozIarrest–Germinalvezikül-primeroosit
ü MuralGranülozahücrelerinde
sentezlenen,Natriure;cpep;tprecursor;pC(NPPC)ilecGMPüre;mi
ü Gapjunc@onaracılıoositegeçiş
ü cGMP–fosfodiesteraz3AenziminincAMPhidroliziinhibisyonu
ü Mayo;karres;nkorunması
![Page 7: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/7.jpg)
OositMaturasyonu(Puberte)
v OvulasyonöncesindekiLHarbşıyadahCGuygulanması
ü FolikülercGMPseviyelerindedüşme
ü Oosit–kumulusgapjun@onkapanması
ü OositcAMPhidroliziü “GVBD“ü Mayozdevamıü OvulasyonileMayozIIarrest–
sekonderoositablımı
![Page 8: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/8.jpg)
OositMaturasyonuSinyalYolakları
cGMPPDE3cAMPPKACDC25B+WEE1BCDK1+SiklinB1(MPF)MATURASYONARREST
![Page 9: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/9.jpg)
IVFolgularında%8.6-%15.2enazbirmayo@kmaturasyonuyetersizoositeldesi
![Page 10: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/10.jpg)
GVarrest
MIarrest
MIIarrest
![Page 11: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/11.jpg)
ü Oositmaturasyonyetmezliği@pI:GVarrestMPFak@vasyonundansorumluuyarıkaskadındadefektler
ü Oositmaturasyonyetmezliği@p2:MIarrestKromozomlardakondensasyon,metafaziğciklerioluşumu,kromozomlarıngruplaşmasıvesonrasındahomologkromozomlarınseperasyonvesegregasyondefektleri
ü Oositmaturasyonyetmezliği@p3:MIIarrestMorfolojikmaturitevekapasitearasındakibuuyuşmazlık
ü Oositmaturasyonyetmezliği@p4:Mixarrest
OositDonasyonu&İnVitroMaturasyon
![Page 12: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/12.jpg)
ü Kisspep@n,malingmelanomahücrelerindemetastaz-baskılayıcıgenolarakkeşfedilenKISS1genininürünüolanpep@t
ü KISSPEPTIN(KISS-1)
![Page 13: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/13.jpg)
Kisspep@nmul@-fonksiyonelbirpep@t
![Page 14: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/14.jpg)
KISS1R(GPR54)reseptörününfonksiyonkaybınayolaçanmutasyonların:
ü Pubertalgelişmeeksikliğiü Üremeak@vitelerindekayıpü Hipogonadotropikhipogonadizm
![Page 15: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/15.jpg)
ü Kpsistemikşekildeüreme
aksisininanadüzenleyicisi
![Page 16: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/16.jpg)
ü Kp,GnRH-gonadotrophinsalgılayıcıenpotansiyelaraç
![Page 17: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/17.jpg)
ü Gonadalgelişim,ü Pubertebaşlangıçıü Fer@liteninkorunmasıiçin
KP–GPR54sinyalsistemişart!
![Page 18: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/18.jpg)
proestrus(P)estrus(E)metestrus(M)diestrus(D)
![Page 19: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/19.jpg)
![Page 20: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/20.jpg)
![Page 21: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/21.jpg)
ELISAKpseviyesiFolikülersıvıda.335±22.5pgmL-1Serum25±,.2pgmL-1,P<0.05).
![Page 22: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/22.jpg)
![Page 23: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/23.jpg)
![Page 24: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/24.jpg)
![Page 25: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/25.jpg)
![Page 26: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/26.jpg)
ü SİKLOOKSİJENAZ(COX-2)ü Prostaglandinendoperoksitsentaz–2(PTGS2)
![Page 27: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/27.jpg)
![Page 28: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/28.jpg)
PTGS2;ü Preovulatuarprostaglandinsenteziü Kumulusekspansiyonuü FolikülerRüptür
LH–bağımlıPTGS-2
OVULASYON
![Page 29: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/29.jpg)
![Page 30: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/30.jpg)
![Page 31: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/31.jpg)
ÇalışmaHipotezi
ü FolikülermikroçevredeekspressyonusaptananKisspep@nsinyalsisteminin,oositmasturasyonbasamaklarınabağımlısiklooksijenaz-2enzimiilenega@fkorelasyongöstermektedir.
![Page 32: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/32.jpg)
ÇALIŞMANINAMACI
Matürasyonunutamamlayamamışoositlerde;ü Buoositlerinmetabolikvehücreseletkileşimiçerisindebulunduğukumulus
hücrelerinde,folikülersıvılarındaveserumdüzeyindeKpvereseptörüileCox-2(PTGS2)ekspresyondüzeylerinintespiL
ü KpileCox-2ekspresyonlarıarasındakikorelasyonunundeğerlendirilmesi
![Page 33: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/33.jpg)
ÇALIŞMANINAMACI
FolikülerMikroçevreü KumulusHücreleriü FolikülerSıvı
OositMaturasyonuü GVü MIü MII
Serum
Kisspep@nCOX-2
![Page 34: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/34.jpg)
ÇALIŞMAGRUPLARI
ÖRNEK(n=25folikül)OositMaturasyonArrestOlguları
KONTROL(n=25folikül)MaturOositOlguları
KISITLAMALARİnfer@liteetyolojisidüşükoverrezervi,ağırendometriyozis,ağıroligoastenoteratozoospermiyadaazospermive39yaşveüzerindekadınhastalar
![Page 35: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/35.jpg)
ü U.Ü.T.F.KadınHastalıklarıveDoğumAnabilimDalıÜremeSağlığıveİnfer@liteMerkeziPolikliniğiveAmeliyathanesinde
ü U.Ü.T.F.KadınHastalıklarıveDoğumAnabilimDalıÜremeSağlığıveİnfer@liteMerkeziEmbriyolojiLaboratuvarında
ü U.Ü.T.F.HistolojiveEmbriyolojiAnabilimDalıLaboratuvarlarında
ü U.Ü.T.F.MikrobiyolojiAnabilimDalıLaboratuvarlarında
ÇalışmaKapsamındaYapılacaklar
![Page 36: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/36.jpg)
U.Ü.T.F.KadınHastalıklarıveDoğumAnabilimDalıÜremeSağlığıveİnfer@liteMerkeziPolikliniğiveAmeliyathanesindeü Ovaryans@mülasyonprotokolüü Follikülergelişimsürecinintakibiü Follikülaspirasyonu
![Page 37: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/37.jpg)
U.Ü.T.F.KadınHastalıklarıveDoğumAnabilimDalıÜremeSağlığıveİnfer@liteMerkeziEmbriyolojiLaboratuvarındaü FollikülaspirasyonusonrasıfollikülsıvısıiçindenOCC’nin
toplanmasıü OCCinvitrokültürüveoositmatürasyonunun
değerlendirilmesiü Fer@lizasyonöncesioosi@nhazırlığı,fer@lizasyonyöntemi
tayiniveuygulamasıü İnvitroembriyokültürü,değerlendirmesiveembriyotransferiü Follikülsıvılarınınvekumulushücrelerinintoplanması
![Page 38: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/38.jpg)
U.Ü.T.F.HistolojiveEmbriyolojiAnabilimDalıLaboratuvarlarındaü Follikülsıvılarınınvekumulushücrelerinindondurulmasıve
saklanmasıü Çözülmüşoositlerinışıkmikroskobikveelektronmikroskobik
olarakmorfolojisinideğerlendirmekamacıylauygunsolüsyonlardafiksasyonuvedokutakibi
ü Oositlerinultrastriktürelmorfolojisinindeğerlendirmesiü Oositlerinimmünohistokimyasalanalizi
![Page 39: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/39.jpg)
U.Ü.T.F.MikrobiyolojiAnabilimDalıLaboratuvarlarında;ü ELISAyöntemiilefollikülsıvısı,serumKıss1veCox-2miktar
tayiniü Kumulushücreleriveoositlerinreal@me-PCRyöntemleriyleKıss-1vereseptörü,Cox-2ekspresyonanalizi
![Page 40: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/40.jpg)
ü Işıkmikroskobikveelektronmikroskobikolarakoositmorfolojisini
değerlendirilmesi
ü OositvekumulushücreleriKISS1/KISS1R/COX-2immünohistokimyasal
tayini(?)
ü TotalRNAeldesi,semiquanLtaLf(qPCR)vereal-LmePCR
ü Eliza–FolikülerSıvıveSerumKISS1veGPCR54seviyetayini
GereçveYöntemler
![Page 41: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/41.jpg)
Işıkmikroskobikveelektronmikroskobikolarakoositmorfolojisinideğerlendirmesi
![Page 42: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/42.jpg)
ü TotalRNAeldesi,semiquanLtaLf(qPCR)vereal-LmeqPCR
50adetOosit–KumulusHücreGrubu
(DNA-free)TotalRNAExtrac@onKitRNA
25adetkontrol 25adethasta
![Page 43: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/43.jpg)
cDNA
SuperscriptIIIreversetranscriptase
Real;meqPCR• KISS1/KISS1R/COX-2
genlerininGAPDHekspresyonuilegöreceligenanlabmpazernlerikıyaslanması
![Page 44: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/44.jpg)
ü Eliza
Kisspep;nELİSAkit
Serum FolikülerSıvı(PFF)
![Page 45: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/45.jpg)
![Page 46: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/46.jpg)
Oositmaturasyonundaetkinhücreiçisinyalyolaklarının
Ak;vasyonu/İnhibisyonu(?)
Oositinvitromaturasyonkültürlerine
KPeklen;si/KPinhibitöreklenmesi(?)
Kisspep@nALTERNATİFMİ?/GEREKLİMİ?
![Page 47: Gk 14 12-15](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022022412/58f01aa31a28ab5c618b4617/html5/thumbnails/47.jpg)
TEŞEKKÜREDERİM…