gram-negatív fakultatív anaerob pálcáksemmelweis.hu/mikrobiologia/files/2014/10/fok_05a.pdf ·...
TRANSCRIPT
Gram-negatív fakultatív
anaerob pálcák
(Enterobacteriaceae)
Dr. Szabó Dóra
Semmelweis Egyetem
Orvosi Mikrobiológiai Intézet
Enterobacteriaceae
Morfológia és általános jellemzés
Gram-negatív, nem-spórás, pálca alakú baktériumok
Oxidáz –
Glükózt fermentálják, gáz termeléssel vagy anélkül (aerogenic -
anaerogenic)fakultatív anaerobok
Laktóz pozitív (nem pathogének) és negatív törzsek
Elkülönítésük
biokémiai reakciókkal
antigén szerkezeti különbségek alapján
O, H, K antigének
Tárgylemezagglutináció!!
Enterobacteriaceae
Normál bélflóra tagjai
ember és más állat bélrendszerének normál flórájának tagja
Pathogén törzsek
Enterális pathogén
Extraintestinális kórokozók
Osztályozás - több mint -15 különböző törzs:
Escherichia, Shigella, Edwardsiella, Salmonella, Citrobacter, Klebsiella,
Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella,
Yersinia, Erwinia, Pectinobacterium
E. coli fertőzések
Extraintestinális fertőzések
Húgyúti infekciók
Újszülöttkori meningitis
K1 tok antigén
Peritonitis, cholecystitis
Nosocomiális fertőzések
Intestinális fertőzések
gastroenteritis
E. coli intestinális fertőzések
Gastroenteritis – számos E. coli típus, okozhat
különböző gastroenteritist:
enterotoxikus E. coli (ETEC),
enteroinvazív E. coli (EIEC),
enteropathogén E. coli (EPEC) ,
enteroaggregatív E. coli (EAEC),
enterohemorrhagiás E. coli (EHEC).
E. coli törzsek okozta gastroenteritisek
E. coli gastroenteritis
enterohemorrhagiás E. coli (EHEC)
Leggyakrabban O157:H7 szerotípusa okozza.
Élelmiszer, hús, tej közvetítette ZOONÓZIS
Alacsony fertőző dózis
A tünetek vizes hasmenéssel kezdődnek, majd véres
hasmenés alakul ki
Pathogenezis: Shiga-like toxint (SLT) termelnek
Heamolytikus-urémiás szindróma
Thrombotikus thrombocytás purpura
SLT kapilláris endothel receptorhoz kötődik, elongációs
faktoron keresztül gátolja a fehérje szintézist
Shigella genus
Négy speciese van antigénjeik alapján.
S. dysenteriae (Group A)
S. flexneri (Group B)
S. boydii (Group C)
S. sonnei (Group D)
OBLIGÁT HUMÁN PATHOGÉN
Shigella species Antigén szerkezet
O antigén alapján A, B, C, és D szerotípus; O antigén
hasonlít az E. coli-éhoz, ezért fontos, előbb az
identifikálás, és csak utána a szerotípus meghatározás.
Virulencia faktorok
Shiga toxin –S. dysenteriae termeli és kisebb mennyiségben
S. flexneri és S. sonnei.
A fehérjeszintézist gátolja a 60S riboszómális
alegységen.
Az intestinális nyálkahártya kifekélyesedésében van
szerepe.
Shigella Klinikai jelentősége
Shigellosist vagy bacillaris dysentériát okoz.
Feco-oral úton terjed.
Nagyon alacsony a fertőzést kiváltó csíraszám (10-200
organizmus).
1-7 napos inkubációs idő után láz, görcsök, hasi fájdalom, és
vizes hasmenés jelentkezik (toxin hatás miatt) 1-3 napig.
Ezt követheti a gyakori, csekély mennyiségű székletürítés
vérrel, nyákkal, gennyel (intestinal mucosába történő invázió
miatt).
Nagyon ritkán disseminálódik.
S. dysenteria a leggyakoribb pathogén, melyet S. flexneri, S.
sonnei és S. boydii követ.
Shigellosis.
A colon mucosa sigmoidoscopos
képe S. flexneri által okozott enyhe
esetben. Exsudate, fibrinből és
polymorphonuclear leucocytákból
áll.
Shigellosis.
Colon mucosa sigmoidiscopos
képe egy fatális kimenetelű S.
dysenteriae 1 típusa okozta
shigellosis, mely kiterjedt
pseudomembranous colitis képét
mutatja.
SHIGELLOSIS
Mikrobiológiai diagnózis Klinikai minta: széklet, ételmaradék
Tenyésztés: Szelektív differenciáló táptalajokon:
-dezoxycholate citrát agar
- eozin metilénkék agar
Biokémiai identifikálás, tárgylemezagglutináció az O antigén meghatározása
Pozitív Serény teszt. Keratoconjunctivitis
Nyúlban inokulációt követően
SHIGELLOSIS-Kezelés és prevenció
Kezelés
Folyadék és elektrolitpótlás
Antimikrobás kezelés
Szulfonamidok, streptomycin, tetracyclin, ampicillin és klóramfenikol
Rezisztens törzsek gyakoribbá válása miatt érzékenység vizsgálatot kell
végezni
Prevenció
Vakcina
Élő atteunált vakcina
Alegység vakcina
Salmonellae
SALMONELLA SPP.
Gram-negatíve
Motil pálca rods, peritrich flagella
Facultatív anaerob
O antigen
H (flagella) antigéé
Salmonella typhi Vi antigénnel is rendelkezik.
Biokémiai tulajdonágok:
H2S termelés
Laktóz negatív
Salmonella spp. által okozott
megbetegedések
I. Gastroenteritis Salmonella enterica
állatról emberre terjed - ZOONÓZIS
II. Enterális láz (typhus és paratyphus) Salmonella typhi
Salmonella paratyphi A, B és C
emberről emberre terjed
ENTERÁLIS LÁZ
ENTERÁLIS LÁZ
THYPHOID FEVER
kórkozó S. typhi
PARATHYPHOID FEVER
kórokozó S. paratyphi A, B és C; enyhébb
megbetegedés
Mindig humán eredetű!
ENTERÁLIS LÁZ - Patogenezis
Tünetek fejfájás
lépcsőzetesen emelkedő lázmenet
néhány nap alatt igen magasra emelkedik
a beteg tudata ködös, typhosus
relatív bradycardia
hepatosplenomegalia
nem jellemző tünet a hasmenés
lehetnek a has és a mellkas bőrén roseolák
a vérkép jellegzetes lehet
leukopenia
aneosinophilia
lymphocytosis
Enterális lázr a: petechia, b: Peyer plaque és necrosis az ileumban c, d: Peyer-plaque perforációja
Fig. 4.37 Enterális láz. Fekélyek a vékonybélben a Peyer plakkok felett
(Peyer’s patches). By courtesy of Dr. J. Newman.
Roseolák hastyphusos beteg mellkasán és hasfalán.
Mikrobiológiai diagnosztika
Klinikai minta:
széklet: második vagy harmadik héttől pozitív
vizelet: második héttől pozitív
epe, csontvelő aspirátum
vér, hemokultúra: gyakran az első héten pozitív
Direkt kenet nincs diagnosztikus értéke.
Tenyésztés:
Mintákat kioltják brilliant zöld és/vagy bizmut szulfit
szelektív táptalajra.
Biokémiai azonosítás: Laktóz (-), dextróz fermentáció
gáz termeléssel vagy anélkül, H2S (+)
Szerológiai azonosítás:
Tárgylemez agglutináció specifikus antitestekkel S.
typhi jelenlétének kimutatása a sejtekben.
Vér szerológia:
=> Gruber-Widal reakció : (Ag = 'H' és 'O' antigének a
S. typhi törzsek) specifikus antitestek jelenlétét vagy
emelkedését mutatjuk ki a beteg szérumából.
Salmonella typhibismutsulfit táptalajon
Gruber-Widal reaction
+ -Salmonella typhi O antigén
meghatározása tárgylemez
agglutinációval
•Kezelés
Antibiotikum érzékenységi vizsgálatot követően: S. typhi törzsek
rendszerint érzékenyek ampicillinre, sulfomethoxazole +
trimethoprimre, vagy 3.dik generációs cephalosporinokra.
Megelőzés
- Aspecific kezelés a krónikus hordozást kontrollálja.
- Aktív immunizálás acetonnal elölt baktérium szuszpenzióval
parenteralisan adagolva nagy rizikójú egyének esetén
alkalmazható.
- Oralisan adagolt védőoltás élő avirulens S. typhi mutánssal
szintén jelentős védelmet jelent.
“Hordozás”
A hastyphust túlélők 3 %-a hordozókká válnak, az epehólyagban,
epeutakban vagy húgyutakban élhet túl a kórokozó.
SALMONELLOSIS
Salmonellosis (gastroenteritis) egyébként egészséges
egyénekben.
Invazív fertőzések (sepsis, meningitis) nagyon
fiatalokban vagy nagyon öregekben, és
inmmunkompromittált betegekben.
Pathogenesis:
-A humán fertőzések rezervoárja: szárnyas, sertés,
rovarok, szarvasmarha, háziállat.
- Orálisan kerül be a kórokozó az emberbe,
kontaminált élelmiszer vagy innivaló útján.
-Gyulladásos léziókat hoz létre a vékony és a
vastagbélben.
Mikrobiológiai diagnózis
Klinikai minta:
széklet: pozitív első héttől, és több hétig pozitív marad
vér hemokultúrához: csak 2-4 %-ban pozitív
liquor és élelmiszer maradék
Direkt kenet nincs diagnosztikus értéke.
Tenyészet: S. typhi tenyészetre jellemző.
Szerológiai azonosítás: tárgylemez agglutináció
specifikus antitestekkel azonosítjuk a kórokozót
Fág tipizálás: közegészségügyi céllal végzik.
Salmonella
Antimikróbás terápia
Enterális láz – leggyakrabban chloramphenicolt
használnak. Rezisztens törzsek tűntek fel, ezért az
antibiotikum érzékenységi vizsgálat nélkülözhetetlen.
Gastroenteritis – általában nem igényel antimikróbás
kezelést. Folyadék és elektrolit pótlásra van szükség.
Klebsiella Virulencia faktorok
Tok
Adhezinek
Vas kötő kapacitás
Klinikai jelentősége
Pneumoniát okoz, többnyire immunokomprimált egyénekben.
Permanens tüdősérülés talaján jelentkezik (ritka más
baktériális pneumoniák esetén)
Nozokomiális fertőzések fő okozója septicemia és meningitis
Klebsiella pneumoniaeNormál bélflóra tagja
Patogenitás:
Extraintestinális fertőzések:
- lobáris pneumoniae (Friedländer-pneumonia)
- húgyúti,- epeúti- fertőzések, sinusitis, otititis media
Klebsiella oxytoca:iatrogén fertőzések
Klebsiella ozaenaeozaenae
tokos Klebsiella india ink festéssel
(negatív festés)
www.icbm.de
Klebsiella pneumoniae
Mucoid telepek– tok képzés
Biokémiai azonosítás: Laktóz (+), ureáz (+), indol (-),
H2S (-), citrát (+)
Szerológiai azonosítása a baktériumnak :
- Neufeld-féle tok duzzadás (Quellung) reakció
- tokantigén ellenes specifikus antitestekkel
Kezelés és megelőzés
Antibiotikumok: érzékenységi vizsgálattól függ.
Elsősorban b-laktám antibiotikumok
Yersinia
Három fontos humán pathogén
Yersinia pestis –pestis kórokozója
Yersinia enterocolitica – enteropathogén
Yersinia pseudotuberculosis – enteropathogén
Yersinia enterocoliticaY. pseudotuberculosis
Fertőzés kontaminált élelmiszerrel vagy vizzel
Láz, hasi fájdalom
Y. enterocolitica vizes hasmenést Bejut a bélrendszer epithelium sejtjeibe az M sejteken keresztül.
M sejteken átjutva bazális felszínre jut
Penetrálnak a lymphoid szövetbe, ahol gyulladást hoz létre
extrém fájdalomért felelős (akut appendicitishez hasonlít)
mesenterialis nyirokcsomókba jutnak, mesenterialislymphadenitist okozva
Reaktiv arthritis léphet fel Y. enterocolitica fertőzést követően.
keresztreagáló T sejtek vagy antitestek
V. cholerae osztályozása
Én vagyok a vibrio!
O1 vagy O139 törzs
www.forth.go.jp/tourist/ panf/cholerae.html
NEM-TOXIKUS TOXIKUS
Lehet, hogy nem O1,
vagy O139 vagyok!(de én is tudok
problémát okozni)
Osztályozás
Toxigenic V. cholerae
O1Felosztás 2 biotípusba
inaba ogawa hikojima
A & B(A kicsi C) Antigének
A & C
O139
A, B, C
Mindegyik O1 biotípusnak
lehet 3 szerotípusa
Klasszikus El Tor
Designed using information presented in review by NS Crowcroft. 1994. Cholera: Current Epidemiology. The
Communicable Disease Report. 4(13): R158-R163.
Ribotípusokba osztás
Felosztás 2 epidemiológiai szerotípusba
Biokémiai tulajdonságok
Gram-negatív
Egyenes vagy csavart
alakú pálcák
Oxidáz pozitív
Fermentáló és oxidatív
metabolizmus
Pathogenesis
Fecális-orális úton terjed
Vékonybélben tapad, és kolonizál
Toxin regulált pilusok (TCP)
Kolera enterotoxint (CT)
cAMP szint emelkedést okoz
Terjedés lehetőségei
Víz (fertőző dózis = 109)
Élelem (fertőző dózis = 103)
Emberről emberre
The 19th-century illustration depicting the spirit of death at a pump was taken from
http://news.nationalgeographic.com/news/2004/06/0614_040614_tvcholera.html
Klinikai manifesztáció
www.who.int/entity/water_sanitation_health/dwq/en/admicrob6.pdf
CT TOXIN
CT egy A-B típusú toxin
V. cholerae toxicitása
1. CT felelős a hatásért. A kórokozó soha sem jut be a sejtbe, csak TOXINHATÁS
2. Az A alegység cAMP szint emelkedést okoz.
3. A magas ic cAMP eredményezi a klorid ion, bikarbonát és víz szekréciót.
Lencer, Wayne. 2001. Microbes and Microbial Toxins: Paradigms for Microbial-Mucosal Interactions. V. cholerae: invasion of the
intestinal epithelial barrier by a stably folded protein toxin. Am J Physiol. Gastrointest Liver Physiol. 280: G781-G786.
Pathogenézis
Az emelkedett cAMP okoz:
Mucosalis sejtek pumpálnak nagy mennyiségű Cl-
bélrendszerbe
Víz, Na+, és más elektrolitok is vándorolnak az
ozmotikus és az ion gradiensnek megfelelően
Hasmenést eredményez, amely a kolera klasszikus
tünetegyütteséhez vezet.
Diagnózis
Súlyos vizes hasmenés
“rizslé –szerű széklet ürítés”
Dehidráció
Csökkent vizeletürítés
Sokk
Folyékony székletet natív kenetben lehet
mikroszkóposan vizsgálni.
Kolera ágy
Kolera kezelése
REHIDRÁCIÓ
Intravénás vagy
Orális
Antibiotikumos kezelés másodlagos
Kezelés: Oral Rehidrációs Só (ORS)
• Oral Rehidrációs Só
csomagok
• WHO, UNICEF osztja
• 1 L vízben lehet feloldani
• NaCl, KCl, NaHCO3, glükoz
Kezelés: Hogy működik az ORS?
• A Na+ transzport a
glükoz transzporthoz
kapcsolt a vékonybélben
• A glükóz elősegíti a
hatékonyabb folyadék és
só felszívódást
• A kálium passzívan
szívódik fel
Dehidrált beteg kezelés előtt
Rehidráció– dehidrált beteg kezelés után
Védőoltások
• Lokális mucosalis immunválasz szükséges
• Orális vakcina
• Két típusa elfogadott:
• Elölt egész sejtes
• Élő attenuált
Köszönöm szépen a figyelmet!