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TRANSFUSION
Groupes sanguins érythrocytaires
(système ABO, système RH et système KELL
Les examens en immuno-hématologie
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� 1900 Landsteiner découvre le 1er système des groupes sanguins : le système ABO
� 1940 valide le système Rhésus
� 1952 Dausset met en évidence le système HLA des GB
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Les groupes sanguins érythrocytaires
� Les groupes sanguins érythrocytaires sont déterminés pas des antigènes présents (ou non) à la surface des globules rouges
� Certains antigènes sont situés dans la Mb lipidique (Rhésus), d’autres dans les glycolipides sur la face externe de la Mb du GR (ABO)
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Les groupes sanguins érythrocytaires
� Génétiquement induits et déterminés
indépendants les uns des autres
� Antigènes allotypiques cad caractères propres à un groupe d’individus dans une espèce donnée
� 29 systèmes de groupes sanguins liés au globule rouge
� Le plus connu et le plus ancien : le système ABO,
le plus important du fait de son implication en transfusion sanguine et pour la transplantation d’organe
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--RHAG030RHAG
--GIL029GIL
--P028GLOB
--I027I
--JMH026JMH
11p15.5MER2MER2025RAPH
19p13.3CD147OK024OK
11p13CD44IN023Indian
1q32CR1KN022Knops
1q32DAFCROM021Cromer
2q14-q21GYPCGE020Gerbich
Xp21.1XKXK019Kx
19q13.3FUT1H018H
6p21.3C4A, C4BCH/RG017Chido Rodger
19p13.3LWLW016Landsteiner Wiener
7p14AQP1CO015Colton
12p12.3DODO014Dombrock
1p34SCSC013Scianna
Xp22.32XGXG012Xg
7q22.1ACHEYT011Yt
17q21-q22SLC4A1DI010Diego
18q11-q12SLC14A1JK009Kidd
1q22-q23DARCFY008Duffy
19q13.3FUT3LE007Lewis
7q33KELKEL006Kell
19q13.2LULU005Lutheran
1q36.13-q34.3RHD, RHCERH004Rh
22q11.2-qterP1P003P
4q28.2-q31.1GYPA, GYPB, GYPEMNS002MNS
9q34.2ABOABO001ABO
Localisation du gèneGène(s)SymboleNuméroSystème
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Jk3JkbJkaJK09
Fy3FybFyaFY08
LebLeaLE07
KpbKpakKKEL06
LubLuaLU05
CwCeceecECDRH04
P1P103
UsSNMMNS02
A1A,BBAABO01
87654321N°
Antigènes
Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) et et
nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)
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Le système ABO
� Le système ABO présente deux caractéristiques qui sont à l’origine des méthodes de groupage et expliquent son rôle important en transfusion et lors des transplantations :
� La présence ou l’absence des antigènes A et/ou B à la surface des GR
� La présence ou l’absence des anticorps naturels anti-A et/ou anti-B dans le plasma correspondants aux antigènes absents sur les GR
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Les antigènes du système ABO
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Les antigènes du système ABO
3%aucunA et BAB
43%anti-A et anti-BHO
9%anti-ABB
45%anti-BAA
Fréquence
en France
Anticorps
sériques
Antigènes
membranaires
Groupe
sanguin
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Répartition des Ag ABH dans l’organisme
� à la surface des GR, PN, lymphocytes, monocytes et des plaquettes
� présents sur de nombreuses cellules de l’organisme (cellules épithéliales, endothélium vasculaire, secrétions salivaires, cellules rénales) à l’exception de l’os, des neurones et de la cornée
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Les anticorps naturels,réguliers
� Naturels : Présents dans le plasma d’un sujet en dehors de toute stimulation antigénique reconnue (transfusion ou grossesse)
� Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne possèdent pas sur leur GR
� Réguliers : existent constamment chez les individus ne possédant pas l’antigène correspondant
� Apparaissent chez l’enfant entre 0 et 6 mois (suite à l’hétéro immunisation par les bactéries de la flore intestinale)
� Intérêt primordial en transfusion sanguine en raison du risque d’incident dès la 1ère transfusion incompatible
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Les anticorps immuns, irréguliers
� N’existent pas à l’état naturel
� Apparaissent à la suite d’une immunisation préalable : grossesse ABO incompatible
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Détermination du groupe ABO
Le groupage ABO repose sur deux épreuves qui doivent être concordantes :
Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent
consiste à rechercher par une technique d’agglutination les antigènes présents sur les hématies
GR à tester (antigènes à déterminer) + sérums tests connus (anticorps monoclonaux anti-A et anti-B)
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Réaction d’agglutination
Formation d’un réseau
Agglutination
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Absence d’agglutination
Agglutination
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Interprétation difficile :
Double population avec le sérum test anti-A
- Patient A transfusé en O
- Patient ayant subi une allogreffe de moelle (A/O ou O/A)
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Détermination du groupe ABO
Epreuve sérique dite de Simonin
Consiste à identifier les anticorps naturels réguliers dirigés contre les antigènes absents
Plasma à tester (anticorps naturels) + GR tests connus
Le groupe ne sera définitif qu’à la suite de 2 déterminations réalisées à partir de 2 prélèvements sanguins différents
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Groupage ABO
__++++++AB
_++++++_B
+++__+++A
++++++__O
BETH VINCENT
anti-A anti-B
SIMONIN
GR A GR B
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Règles de compatibilité ABO
POUR LES GLOBULES ROUGES
� SYSTEME ABO
Ac anti-AAc anti-B
Ac anti-B
Ac anti-A pas d'Ac
A
A
B
B
OO AB AB
donneuruniversel
receveuruniversel
compatibilité
compatibilité
identité
identité
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Règles de compatibilité ABO
POUR LE PLASMA
A
B
OAB
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Le système RH (Rhésus)
� Système complexe de groupe sanguin
� On compte 52 antigènes appartenant à ce système
� En pratique courante seuls 5 sont à connaître :
D, C, c, E, e
� La présence de l’antigène D défini le groupe Rhésus positif (85%)
� son absence le groupe Rhésus négatif
� Le phénotype Rhésus est déterminé par la présence ou l’absence des 5 antigènes : D, C/c, E/e
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Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés sur la membrane du GR
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Les antigènes
98%e (RH5)
80%c (RH4)
30%E (RH3)
70%C (RH2)
85%D (RH1)
Fréquence en FranceANTIGENES
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D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
(0,15)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
(0,01)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
(0,02)
D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)
(0,04)
D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)
(0,12)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
(0,12)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
(0,20)
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
(0,34)
Phénotype Rhésus (RH) du CGR à transfuser par ordre
prioritaire
Phénotype Rhésus (RH) du receveur
(fréquence en France)
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Les Anticorps du système Rhésus
� Toujours acquis, secondaires à une allo-immunisation, lors d’une transfusion ou d’une grossesse
� Probabilité d’apparition fonction de l’immunogénicité
� L’antigène Rh standard (D) est le plus immunogène puis dans l’ordre E, c et e
� de classe IgG, hémolysants, capables de traverser le placenta, responsables de la symptomatologie présentée par un nouveau-né Rhésus + né de mère Rhésus - : maladie hémolytique du nouveau-né
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Règles de compatibilité Rhésus
POUR LES GLOBULES ROUGES
Rh + = Ag D+Rh -
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Les autres systèmes érythrocytaires
� Importance transfusionnelle car certains de leurs antigènes sont fortement immunisants
� Système KELL: l’Antigène K est un puissant immunogène pour les sujets K- (91% de la population K-)
� Système Duffy : antigène Fya et Fyb
� Système MNS : antigène S et s
� Système Kidd : antigène Jka et JKb
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Les autres systèmes érythrocytaires
L’absence d’un Antigène dans l ’un de ces systèmes ne s’accompagne pas d’anticorps naturels, comme dans le système ABO, mais une transfusion ou une grossesse peuvent provoquer la formation d’anticorps immuns (allo-immunisation) responsables ultérieurement d’accidents transfusionnels ou de MHNN
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Les examens immunohématologiques
� Groupage ABO RH1 (RhD)
� Phénotypage RH et Kell
� Phénotypage étendu
� Recherche d’anticorps irréguliers (RAI)
� Epreuve de compatibilité au laboratoire
� Tests de Coombs
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� Exigences relatives aux échantillons : Qualité et quantité :
5Test de Coombs Direct (TCD)
1010AHAI : TCD–Elution–Hémolysine–AF-RAI
5Bilan de maladie hémolytique du nouveau-né
55Bilan de réaction transfusionnelle
5Test de Kleihauer
15Titrage et dosage pondéral anti-RH1
5ABO.RH1 et RH.K et RAI chez le nouveau-né
5RAI chez le nouveau-né
5ABO.RH1 et RH.K et RAI chez l’adulte
5RAI chez l’adulte
5Groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1
Nombre de ml sur tube sec ou
anticoagulant
Nombre de ml sur anticoagulantType d’analyse
-Identification du patient : Nom patronymique / Nom marital / Prénom(s) / Date de naissance / Sexe.
� Exigences relatives aux documents accompagnateurs :-Etablissement de soins : service demandeur / ligne téléphonique directe
-Prescripteur : nom, signature du médecin prescripteur, date de prescription
-Préleveur : nom et qualité du préleveur, signature, date et heure du prélèvement
-Identification du patient : nom patronymique, nom marital, sexe et date de naissance
-Nature des analyses demandées-Renseignements cliniques éventuels
-Si une transfusion est envisagée, date et heure prévues, niveau d’urgence.
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Les examens immunohématologiques
Groupage ABO RH1
� correspond à la détermination du groupe ABO indissociable de la recherche du Rhésus standard D
� le groupage est considéré comme définitif si les résultats sont concordants sur deux déterminations sur 2 prélèvements différents
� Contexte pré-transfusionnel avéré ou potentiel et contexte périnatal
� La transmission électronique des résultats est la règle pour la délivrance des PSL
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Phénotype Rhésus Kell
� Recherche grâce à l’utilisation de sérums tests anti-C, anti-E, anti-c, anti-e et anti-K la présence ou l’absence à la surface des hématies des 5 antigènes suivants : C (RH2), E (RH3), c (RH4), e (RH5) et K (KEL1)
� Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel
� Contexte pré et périnatal
� Validation de l’identification d’anticorps anti-érythrocytaires
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Phénotype étendu
� Recherche de la présence ou l’absence des antigènes : Jka, Jkb (système Kidd), Fya, Fyb(système Duffy), S, s (système MNS)
� Champ d’application :
- patient présentant un anticorps irrégulier dans l’un des systèmes concernés
- à titre préventif chez patients devant recevoir des transfusions itératives
- patients en instance de greffe
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Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)
NB : Les anticorps immuns sont décelables avec un maximum de probabilité du 7ème au 15ème jour après la transfusion
� Examen consistant à dépister et identifier les anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à étudier grâce à une gamme d’hématies tests
� Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures
� Validité 72H
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Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)
Champ d’application :
� Obligatoire chez tout patient susceptible d’être transfusé
� Contexte de greffe ou de transplantation
� Contexte pré ou périnatal
� Chez le patient transfusé itératif en bonne place au cours des séries de transfusion
� Chez le patient transfusé dans le cadre du suivi post-transfusionnel (dans un délai de 1 mois après le dernier épisode transfusionnel)
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CAT en cas d’urgence hémorragique
Urgence vitale immédiate : distribution sans délai
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
pas de groupe ni de RAI si non disponibles
CGR O sans hémolysines
Urgence vitale : délai de distribution inférieur à 30 minutes
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
pas de RAI si non disponible
nécessité de groupe ABO conforme
Urgence « relative » : délai de distribution de 2 - 3 heures
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
nécessité de groupe et RAI conformes
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CHOIX DES CGR EN URGENCE VITALE
Dans le cadre d’un dépôt d’urgence ayant en stock des CGR :
O- (D-C-E-c+e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe
O+ (D+C+E-c-e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe
En fonction de D et Rhésus-Kell
O-D-C-E-c+e+K-connu : C-D positif
O+D+C+E-c-e+K-connu : C+D positif
O+D+C+E-c-e+K-non connuD positif
O-D-C-E-c+e+K-connu ou nonD négatif
O-D-C-E-c+e+K-non connuD non connu
Rhésus KellD
CGR à transfuserPatient
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Epreuve directe de compatibilité au laboratoire EDCL
� Qualification biologique du don� Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-vis du CGR à transfuser (l’objectif étant de détecter certains Ac masqués par la présence d’autres Ac, ou des Ac rares)
� Validité 72H� Champ d’application :Receveur présentant ou ayant présenté un ou plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytairesNouveau-né présentant un test de Coombs positif ou né de mère allo-immunisée
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Test de Coombs
� Permet la mise en évidence de la sensibilisation in vivo des hématies humaines par des anticorps grâce à l’utilisation d’un réactif appelé antiglobuline humaine
� Champ d’application :
Maladie hémolytique du nouveau-né
Incident transfusionnel
Anémie hémolytique autoimmune
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Recherche d'anticorps fixés sur les hématiesRecherche d'anticorps fixés sur les hématies
Ac non spontanémentagglutinables
Hématies fœtalesayant fixé l'Ac
complexe agglutinant
+ anti-gammaglobulines humaines