guandu fbn 2014

Pesq. agropec. bras., Braslia, v.49, n.3, p.197-206, mar. 2014DOI: 10.1590/S0100-204X2014000300006

Estirpes de Bradyrhizobium em simbiose com guanduano em casa de vegetao e no campo

Mrcia Rufini(1), Dmiany de Pdua Oliveira(2), Andr Trochmann(1), Bruno Lima Soares(2), Messias Jos Bastos de Andrade(2) e Fatima Maria de Souza Moreira(1)

(1)Universidade Federal de Lavras (Ufla), Departamento de Cincia do Solo, Caixa Postal 3.037, CEP37200000 Lavras, MG, Brasil. Email: [email protected], [email protected], [email protected] (2)Ufla, Departamento de Agricultura. Email: [email protected], [email protected], [email protected]

ResumoOobjetivodestetrabalhofoiavaliaraeficinciasimbiticadeestirpesdebactriasfixadorasdenitrognio do gneroBradyrhizobium comguanduano.Os experimentos foram conduzidos em vasos deLeonard,emvasoscomsoloeemcampo.Foramtestadas11estirpesemvasosdeLeonard,easqueapresentarammaioreficinciaempromoverocrescimentodoguanduanoforamavaliadasemvasoscomsolo(LatossoloVermelhoAmareloeCambissolo)eemcampo(LatossoloVermelhoAmarelo).Emtodososexperimentos,ostratamentosforamcomparadosadoiscontrolespositivos(estirpesaprovadascomoinoculantesparaascultivaresdeguanduanoBR2003eBR2801)eaduastestemunhasseminoculao,umacomaltaconcentraodeNmineral,eaoutra,adependerdoexperimento,semNmineral(solo)oucombaixaconcentraodeN(vasosdeLeonard).AlgumasestirpesproporcionaramcrescimentovegetalsemelhanteousuperiorsestirpesrefernciaestestemunhasemvasodeLeonard.Emvasoscomsolo,otipodesoloinfluenciouostratamentos.Nocampo,nohouvediferenaentreostratamentos,easestirpesnativaspromoverambomcrescimento.OguanduanocapazdeestabelecerassociaosimbiticacombactriasfixadorasdeN2,eaestirpeUFLA03320apresentapotencialparaserrecomendadaparaaculturajuntocomaestirpeBR2801.

Termosparaindexao:Cajanus cajan,fixaobiolgicadenitrognio,inoculante.

Bradyrhizobium strains in symbiosis with dwarf pigeon pea under greenhouse and field conditions

AbstractTheobjectiveof thisworkwas toevaluate the symbioticefficiencyofnitrogenfixingbacterialstrains,fromthegenusBradyrhizobium,withdwarfpigeonpea.TheexperimentswerecarriedoutinLeonardjars,inpotswithsoilandinthefield.InLeonardjars,11strainsweretested,andthemosteffectiveinpromotingpigeonpeagrowthwereevaluated inpotswithsoil (OxisolandCambisol)and in thefield(Oxisol). Inallexperiments,treatmentswerecomparedtotwopositivecontrols(strainsapprovedasinoculantsforpigeonpeacultivars,BR2003andBR2801)andtotwocontrolswithoutinoculation,onewithahighconcentrationofmineralN,andtheother,dependingontheexperiment,withoutmineralN(soil)orwithlowNconcentration(Leonardjars).SomestrainshaveprovidedplantgrowthsimilarorsuperiortothereferencestrainsandtothecontrolsinLeonardjars.Inthepotexperimentwithsoil,thesoiltypeinfluencedthetreatments.Inthefield,therewasnodifferenceamongtreatments,andthenativestrainspromotedagoodplantgrowth.Dwarfpigeonpeaisabletoestablishasymbioticassociationwithnitrogenfixingbacteria,andthestrainUFLA03320hasthepotentialtoberecommendedforthiscroptogetherwiththeBR2801strain.

Indexterms:Cajanus cajan,biologicalnitrogenfixation,inoculants.

Introduo

Oguandu[Cajanus cajan(L.)Millsp.],originriodafrica, pertence famliaFabaceae e cultivadoem 5,32 milhes de hectares, com produo anualde 4,33milhes de toneladas e produtividademdiade gros de 1.354,9 kg ha1 (Food and Agriculture

OrganizationoftheUnitedNations,2012).Atualmente,a ndia seu maior produtor, com 3,86 milhesde hectares e 73% da produo mundial de gros.NoBrasil, o guandu cultivado em associao comoutrasculturas,emreasno irrigadasdeagriculturadesubsistnciaderegiessemiridas,ondeutilizadonaalimentaohumanaeanimal(Souzaetal.,2007).

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umaopo para a regioNordeste doBrasil, peloseu elevado valor nutritivo, capacidade de resistir baixa precipitao pluvial e adaptao a solossalinosedebaixafertilidade(Pazetal.,2000).Almdisso, associase a bactrias fixadoras de nitrognionodulferas (BFNN)epode receberamaiorpartedoNpara seu desenvolvimento dafixao biolgica deN (FBN) (Fernandes& Fernandes, 2000; Paz et al.,2000;Fernandesetal.,2003),oquetambmindicaseupotencialcomoaduboverde.

No contexto atual, a FBN tem considervelimportnciaeconmicaeambiental,poisreduzoscustoscomfertilizantesnitrogenadose,consequentemente,oalto consumode combustvelutilizadona fabricaodestes,almdeminimizaroimpactoambientalcausadopelo uso intensivo e inadequado desses fertilizantes(Moreira&Siqueira,2006).Umdosgrandesdesafiospara o uso daFBN obter ummanejo adequadodasimbioseeaumentarsuaeficincia.

Oguanduumaleguminosaaltamentepromscua,capaz de nodular com BFNN de crescimento lentoe rpido. Poth et al. (1986) estimaram, pormeio dediluio isotpica de 15N, a quantidade de N fixadobiologicamentenasimbiosecomguandueefetivamenteincorporadoaosolo,eobtiveramde144a179kgha1,conformeaestirpedeBFNNutilizada.AsduasestirpesdeBFNNaprovadascomoinoculantespeloMinistrioda Agricultura, Pecuria e Abastecimento Mapa(Brasil, 2011) pertencem ao gnero de crescimentolento Bradyrhizobium: BR 2003 (SEMIA 6156) eBR2801(SEMIA6157).Emoutrotrabalhoconduzidona ndia, Anand & Dogra (1997), ao avaliar aeficincia de diferentes estirpes deRhizobium spp. eBradyrhizobium spp., de crescimento rpido e lento,respectivamente, em cultivares de guandu, em vasosde Leonardmodificados, observaram que as estirpesde Bradyrhizobium spp. foram superiores a todas asestirpesdeRhizobiumspp.

Bradyrhizobium tem a vantagem de ser maisestvel do que outros gneros de bactrias fixadorasdeN2,poisosgenesrelacionadosaoestabelecimento(genes nod) e funcionamento da simbiose (genesnif) esto localizados em cromossomo e no emplasmdeos que podem ser perdidos em condiesambientais estressantes. A maioria das estirpes deBFNN, aprovadas para espcies florestais, aduboverde,forrageiraseparagros,pertenceaessegnero,emuitasjsousadascomsucessohdcadas,sema

perdadesuaspropriedadessimbiticas,comoasdesojaedefeijocaupi.Parausocomfeijocaupi,tmsidorelatadasnovasestirpeseficientesdeBradyrhizobium (Guimaresetal.,2012;Costaetal.,2013;Jaramilloetal.,2013),oquepodeserextrapoladotambmparaguandu.

A presena de BFNN nativas, pouco efetivasna FBN e que podem competir com as estirpesinoculadaspodemlimitarosefeitosdainoculaonoguandu.Outrosfatores,comotipodesoloediferentescultivares, podem tambm influenciar o processodaFBN(Nautiyalet al.,1988;Bidlacket al.,2001).De acordo comNautiyal et al. (1988), esses fatorespodem ser os responsveis pela pobre nodulao ebaixarespostadoguanduinoculao.

Em razo da diversidade climtica e edfica dosagroecosistemas do Brasil e, ainda, da ausncia dosresultados publicados que motivaram a indicaodas estirpes de BFNN atualmente aprovadas peloMapa,tornasedefundamentalimportnciaaseleode estirpes inoculantes que permitam o sucessodo manejo da simbiose entre BFNN e guandu, emcondiesclimticaseedficasespecficas,bemcomoa constatao da eficincia das estirpes atualmenteaprovadas.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficinciasimbitica de estirpes de bactrias fixadorasde nitrognio, do gnero Bradyrhizobium, comguanduano.

Material e Mtodos

Oensaiopara a avaliaoda eficincia simbiticadas estirpes de BFNN em guandu foi realizado emcondies axnicas de vasos de Leonard (Vincent,1970),emvasoscomsoloeemcampo.Foiutilizadaa cultivar de guanduano Iapar 43 (Arat), de ciclocurtoemenoraltura,desenvolvidaparaaproduodegrosparaalimentaoanimalehumana.

OensaioemvasosdeLeonardfoirealizadonoSetorde Biologia, Microbiologia e Processos Biolgicosdo Solo, do Departamento de Cincia do Solo, daUniversidadeFederaldeLavras,de10/8a10/10/2012.ForamtestadasseteestirpesdogneroBradyrhizobium,que fazem parte da coleo do referido Setor e semostrarameficientesemfixaroN2emoutrasespciesleguminosas como siratro e feijocaupi (Tabela 1).Alm destas, tambm foram testadas estirpes de

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Bradyrhizobium j aprovadas como inoculantesparaaculturadasoja(BR29ouSEMIA5019)edofeijocaupi (UFLA 0384 ou SEMIA 6461, INPA0311bouSEMIA6462eBR3267ouSEMIA6463).InformaesrelevantessobrecadaestirpeencontramsenaTabela1.

Utilizouse o delineamento experimental inteiramente casualizado, com trs repeties e 15tratamentos. Os tratamentos constituramse de:inoculao individual das estirpes; comparao comduas testemunhas consideradas controles positivos(estirpesreferncia,aprovadascomoinoculantesparaguandu,BR2003eBR2801);almdeduastestemunhassem inoculao, uma com alta concentrao de Nmineral,eoutracombaixaconcentraodeNmineralpara, respectivamente, verificao de condiesadequadas de crescimento vegetal e controle depossvelcontaminao.

ApartesuperiordosvasosdeLeonardcontinhaumamistura1:1deareiaevermiculita,eainferior,soluonutritiva de Hoagland & Arnon (1950) modificada.Apsopreparo,osvasosforamautoclavadosporumahora,pressode1,5kgcm2,a127C.Nostratamentosquereceberaminoculaoenatestemunhacombaixaconcentrao de Nmineral (5,25 mg L1de N), queno inibe a FBN, a soluo nutritiva apresentou a

seguinte composio por litro: 0,4 mL de 236,16 gL1 Ca(NO3)24H2O; 0,6 mL de 101,11 g L1 KNO3;0,1 mL de 115,03 g L1 NH4H2PO4; 2,0 mL de 246,9gL1MgSO4.7H2O;3,0mLde87,13gL1 K2SO4;10,0 mL de 12,6 g L1 Ca(H2PO4)2H2O; 200,0 mLde 1,72 g L1 CaSO42H2O; 1,0 mL de FeEDTA e1,0 mL de soluo suplementar (2,86 g L1 H3BO3;1,81 g L1 MnCl24H2O; 0,22 g L1 ZnSO47H2O;0,08gL1CuSO45H2O; e 0,02gL1H2MoO4H2O).No tratamento que recebeu alta concentrao deN mineral (52,5 mg L1N), foi utilizada a soluocompleta,comaseguintecomposioporlitro:4,0mLde236,16gL1Ca(NO3)24H2O;6,0mLde101,11gL1 KNO3; 1,0 mL de 115,03 g L1 NH4H2PO4; 2,0 mLde 246,9 gL1MgSO4.7H2O; 1,0mLdeFeEDTAe1,0 mL de soluo suplementar (2,86 g L1 H3BO3;1,81gL1MnCl24H2O;0,22gL1ZnSO47H2O;0,08gL1CuSO45H2O;e0,02gL1H2MoO4H2O).Ambasassoluesforamautoclavadaspor40min,a1,5kgcm2 ea127C,antesdeseremcolocadasnosvasos.

Assementesforamdesinfestadassuperficialmentecomlcooletlicoa96%v/vpor30sehipocloritodesdioa2%por2min.Emseguida,assementesforam lavadas seis vezes com gua esterilizada,pararetiradaderesduosdostratamentosanteriores.Aps esses procedimentos, as sementes foram

Tabela 1. Origemecaractersticasdas estirpesdeBradyrhizobiumtestadas.Estirpe Origem Eficinciasimbitica() Fonte/referncia(2)

Estado/regio Sistemadeusodaterra Plantahospedeira

UFLA03153 MinasGerais Mineraodebauxita Vigna unguiculata V. unguiculata(E) SBMPBSUfla/(Soaresetal.,2014)UFLA03154 MinasGerais Mineraodebauxita V. unguiculata V. unguiculata(E) SBMPBSUfla/(Soaresetal.,2014)UFLA03164 MinasGerais Mineraodebauxita V. unguiculata V. unguiculata(E) SBMPBSUfla/(Soaresetal.,2014)UFLA03320 MinasGerais Agricultura V. unguiculata V. unguiculata(E) SBMPBSUfla/(Rufinietal.,2014)UFLA03321 MinasGerais Agricultura V. unguiculata V. unguiculata(E) SBMPBSUfla/(Rufinietal.,2014)UFLA03325 MinasGerais Agricultura V. unguiculata V. unguiculata(E) SBMPBSUfla/(Rufinietal.,2014)UFLA04212 Amaznia Agricultura Macroptilium atropurpureum M. atropurpureum (E) SBMPBSUfla/(Florentinoetal.,2009)INPA0311b Amaznia Capoeira Centrosemasp. V. unguiculata (R) SBMPBSUFLA/(Soaresetal.,2006)UFLA0384 Rondnia Pastagem V. unguiculata V. unguiculata(R) SBMPBSUFLA/(Soaresetal.,2006)BR3267 Semirido V. unguiculata V. unguiculata(R) EmbrapaAgrobiologia/(Martinsetal.,2003)BR29 RiodeJaneiro Glycine max(R) CNPAB(Peres&Vidor,1980)BR2801 RiodeJaneiro Crotalariaspp. Cajanus cajan(R) EmbrapaAgrobiologia(Brasil,2011)BR2003 Braslia Stylosantesspp. C. cajan(R) EmbrapaAgrobiologia(Brasil,2011)(1)E,eficiente(massadematriasecadaparteareadotratamento,cominoculaodaestirpetestada=testemunhaseminoculao,querecebeuNmineral);R,aprovadacomoinoculanteparaVigna unguiculata(UFLA0384,INPA0311beBR3267),Glycine max(BR29)eCajanus cajan(BR2801,BR2003),peloMinistrio daAgricultura, Pecuria eAbastecimento. (2)SBMPBSUFLA,Coleo deBactrias do Setor deBiologia,Microbiologia e Processos BiolgicosdoSolo,daUniversidadeFederaldeLavras.


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imersas em gua destilada por duas horas, paraficaremembebidasdeguaegarantiragerminao.Posteriormente,assementesforampostasagerminarem placas de Petri, que continham papel filtro ealgodo umedecido e esterilizado, e colocadas emcmaradecrescimentoa28C,por24horas.Apseste perodo, foram semeadas quatro sementesprgerminadas por vaso e, posteriormente, foirealizada a inoculao com 1,0 mL do meio decultura 79 lquido (Fred & Waksman, 1928)colocado junto a cada semente.Os isolados foramcultivados sob agitao por aproximadamente120horasecontinhamaproximadamente108clulasdeBFNNmL1.Paraevitarcontaminao,colocouse sobre a superfcie do vaso uma fina camada demisturaesterilizadadeareia,clorofrmioeparafina.

Onveldesoluonutritivanosvasosfoimantido,com reposio peridica. At aos 45 dias aps oplantio,osvasosreceberamsoluonutritivacom1/4deforainica.Apartirdesseperodo,aumentouseaforadasoluonutritivapara1/3.Apsaemergncia,realizouseodesbaste, tendosedeixadoduasplantasporvaso.Asplantasforamcolhidasaos60dias,tendoseavaliadoonmerodendulos(NN),amatriasecade ndulos (MSN), a matria seca da raiz (MSR) eda parte area (MSPA), o teor (TNPA) e o acmulo(ANPA)deNnapartearea,aeficinciarelativa(ER)eaalturadaplanta.

Asestirpesmaiseficientes(UFLA03320eUFLA03321)noexperimentocomvasosdeLeonard,almdaestirpeBR29,aprovadacomoinoculanteparasoja,foram selecionadas para testes em vasos com solo ecampo.

Oexperimentoemvasoscomsolofoirealizadoemcasadevegetao,noDepartamentodeCinciadoSolodaUfla,de23/1a17/5/2013.Foramcoletadossolosdacamadaarvel,emdoislocaisdistintosLuminriase Lavras. As amostras de solo foram destorroadas,homogeneizadasepassadasempeneirade4mm,antesdeseremusadascomosubstrato.Osvasosutilizadostinhamcapacidadede1,6dm3.

Os solos de Luminrias (2132'S e 4457'W)e Lavras (2112'S, 4458'W) foram classificadoscomo Cambissolo e Latossolo VermelhoAmarelo,respectivamente, ambos de textura argilosa. Essessolos tinhamhistrico de cultivo commilho, e nohavia registro de uso de inoculantes. A populaonativa em ambos era de aproximadamente

103 UFC g1 de solo. O Cambissolo e o LatossoloVermelhoAmarelo apresentaram os seguintesatributosqumicosefsicos,respectivamente:pHemgua,4,6e5,9;P(MehlichI),0,56e5,81mgdm3;K, 68 e 128 mg dm3; Ca, 0,4 e 3,5 cmolc dm3;Mg,0,2 e1,1 cmolc dm3;Al, 0,8 e0,1 cmolc dm3;H+Al, 5,05 e 4,04 cmolc dm3; somade bases, 0,77e4,93cmolc dm3;T,5,82e8,97cmolc dm3;t,1,57e 5,03 cmolc dm3; saturao por alumnio, 50,96 e1,99%;saturaoporbases,13,31e54,94%;matriaorgnica,3,41e2,61dagkg1;areia,400e590gkg1;silte,250e70gkg1;eargila,350e340gkg1.

Odelineamentoexperimentalemblocosaoacasofoi utilizado com quatro repeties, em arranjofatorial 7x2, com sete tratamentos e dois tipos desolo. Os sete tratamentos foram: inoculao comas estirpes UFLA 03320, UFLA 03321 e BR 29,alm das estirpes aprovadas como inoculante paraguandu(BR2003eBR2801),edastestemunhasseminoculao, com ou sem adubao comNmineral.Emtodasasparcelas,foiefetuadaumaadubaocom300,300,40,0,8, 1,5, 3,6,5,0e0,15mgdm3 de K, P, S, B, Cu, Mn, Zn e Mo, respectivamente(Malavoltaetal.,1989).AtestemunhacomNmineralrecebeu300mgdm3deN,fonteNH4NO3,parceladosemtrsaplicaes.

As sementes de guanduano 'Iapar 43' (Arat)foram desinfestadas e germinadas conforme ametodologiadescritanoensaiocomvasosdeLeonard.Foram semeadas quatro sementes prgerminadaspor vaso, e cada uma recebeu 1,0 mL do inculo(aproximadamente 108 clulas de BFNN mL1),cultivadoemmeio79lquido.Apsaemergncia,foifeitoodesbaste, tendosedeixadoduasplntulasporvaso.

As plantas foram colhidas no perodo da florao(aproximadamenteaos120diasapsemergncia),paraavaliaodasseguintesvariveis:nmerodendulos(NN),matria seca de ndulos (MSN),matria secada parte rea (MSPA), eficincia relativa (ER), teor(TNPA) e acmulo (ANPA) de N na parte area ealturadaplanta.

O ensaio de campo foi instalado no Centro deDesenvolvimento Cientfico e Tecnolgico emAgropecuria da Ufla, de 28/11/2012 a 2/4/2013.Os dados de temperatura mdia e precipitao, noperododoexperimento,foramde21,6Ce883,4mm,respectivamente. Utilizouse o delineamento experi



mentaldeblocosaoacasocomquatrorepetiesesetetratamentos.Ostratamentosforam:inoculaocomasestirpesUFLA03320,UFLA03321,BR29,maisasestirpesBR 2003 eBR 2801, alm das testemunhasseminoculao,comousemNmineral.

Oinoculantefoipreparadocomturfaesterilizada, proporo de 3:2 de turfa e culturas em meio79 lquido, que continham aproximadamente 108 clulas de BFNN mL1. Utilizaramse 250 g doinoculanteparacada10kgdesementes.Asparcelasforam constitudas por seis linhas de 5 m decomprimento,espaadasem0,50m,oquetotalizou15m2de rea total e5m2de reatil (duas linhasdestinadascolheitadosgros).

Apsademarcaodossulcos,todosostratamentosreceberam adubao fosfatada e potssica basede90kgha1deP2O5e50kgha1 de K2O, tendoseutilizadocomofontesosuperfosfatotriploeocloretodepotssio, respectivamente.Almdesta adubao,a testemunha nitrogenada recebeu 70 kg ha1 de N(fonte ureia), parcelados em duas vezes: 35 kg ha1 deN aplicados poca de semeadura, e 35 kg ha1 de N aos 35 dias aps a emergncia.A semeadurafoi realizada imediatamente aps a inoculao, densidade de 15 sementes por metro. O ensaiofoi mantido livre de plantas invasoras pormeio decapinasmanuais. No houve necessidade de outrostratamentosfitossanitrios.

Porocasiodoflorescimento,foramcoletadasoitoplantasdecadaparcela,dasegundae terceira linhas,para avaliao de: nmero e massa de matria secadendulos (NNeMSN, respectivamente);massadematriasecadapartearea(MSPA);eficinciarelativa(ER%); teor (TNPA%) e acmulo (ANPA) de N napartearea;eaquantidadedeNdisponibilizada(kgdeNha1).pocadacolheita,quefoirealizadanaquartaequintalinhasdecadaparcela,tendosedeixado1mlinear de bordadura nas cabeceiras, avaliaramse: onmerodevagensporplanta;onmerodegrosporvagem;amassade100gros;orendimentodegros;oeteor(TNG%)eoacmulo(ANG)deNnosgros.Paraaavaliaodorendimentodegros,aumidadefoicorrigidapara13%.

Emtodososensaios,aeficinciarelativa(ER)foicalculadaemrelaoproduodeMSPAdasplantasdo tratamento que recebeu N mineral, por meio daseguinte expresso: ER = (MSPA tratamento)100/(MSPAdaTCN).OteordeNtotalfoiavaliadopelo

mtodosemimicrokjedahl,deacordocomSarruge&Haag (1979), tendose determinado a percentagemdeNnamatriasecadaparteareaenosgros.ONacumuladofoicalculadopormeiodamultiplicaodamassadematriasecadaparteareaoudorendimentodegrospeloteordeN(%)edivisodoprodutopor100.

Todos os dados foram submetidos anlise devarincia, com uso do sistema de anlise estatsticaSisvar (Ferreira, 2011). As mdias dos tratamentosforam agrupadas pelo teste de ScottKnott, a 5% deprobabilidade. Os valores das variveis nmero dendulos (NN) e matria seca de ndulos (MSN)forampreviamentetransformadoscomusodafrmula(X+0,5)0,5. Realizouse a correo da produtividadeem funo do estande, pela anlise de covarinciaparaoestandemdio,comoprogramaGenes(Cruz,2013).ParaoclculodaquantidadedeN(kgha1N)disponibilizada pela biomassa, utilizouse o estandemdiodoensaio(72milplantasporhectare).

Resultados e Discusso

No ensaio em vasos de Leonard, no se verificoua presena de ndulos na testemunha com baixaconcentrao de N, o que indica que no houvecontaminaodoexperimento.

Todasasestirpestestadasforamcapazesdenodularoguanduano,dasquaisUFLA0384,UFLA0311B,UFLA 03154 e UFLA 04212 apresentaram osmaioresvaloresdenmerodendulos,superioresaosdasdemaisestirpesesestirpesrefernciaaprovadascomoinoculanteparaoguandu(BR2003eBR2801),porm, estes ndulos no forammuito eficientes empromover o crescimento da planta (MSPA e altura)(Tabela2).

Naanlisedamatria secadendulos, asestirpesBR29,UFLA0384,UFLA0311B,UFLA03153,UFLA 03320, UFLA 03325 e UFLA 04212apresentaramosmaioresvaloresenoseagruparamanenhumadasestirpesreferncia.AestirperefernciaBR2003apresentouomenorvalordeMSN.AsestirpesUFLA 0384, UFLA 0311B, UFLA 03153,UFLA 03320, UFLA 03321, UFLA 03325 eUFLA04212induziramosmaioresvaloresdematriasecaderaize foramsemelhantesestirperefernciaBR 2801 e superiores s testemunhas e estirperefernciaBR2003.



Osefeitosdostratamentosforammaispronunciadosna parte area do que nas razes.Quanto matriaseca da parte area, eficincia relativa e altura, asestirpes UFLA 03320 e UFLA 03321 foram asmaiseficientesempromoverocrescimentovegetal,tendo superado os demais tratamentos. As estirpesUFLA 0384, UFLA 0311B, UFLA 03153,UFLA 03325 e UFLA 04212, junto com aestirpereferncia BR 2801, foram superiores sdemaisestirpes,inclusiveBR2003estestemunhas.A testemunha que recebeu alta concentrao de NmineralfoisemelhanteestirperefernciaBR2003;eatestemunhacombaixaconcentraodeNmineralapresentou os menores valores nestes parmetros.Os tratamentos que receberam inoculao foramsuperiores s testemunhas quanto ao teor de N napartearea.QuantoaoacmulodeNnapartearea,asestirpesUFLA0384,UFLA03320,UFLA03321e UFLA 03325, junto com a estirperefernciaBR 2801, apresentaram os maiores valores, tendosuperado os demais tratamentos, e as testemunhasapresentaramosmenoresvalores.

As estirpes UFLA 03320 e UFLA 03321 foramas mais eficientes em promover o crescimento doguandu.Estasestirpestambmsemostrarameficientes

em promover o crescimento do feijocaupi (Vigna unguiculata),emcondiesdecasadevegetao,emvasosdeLeonard(Rufinietal.,2014).

Fernandes& Fernandes (2000) e Fernandes et al.(2003), que testaram BFNN nativas dos tabuleiroscosteirosemguandu,encontraramestirpescapazesdeestabelecersimbioseefetivacomoguanduemvasosdeLeonard, semelhantes s estirpes aprovadascomoinoculanteusadasnopresenteensaio.Carvalhoetal.(2008),aotestaraeficinciadeestirpesdesojaesuasvariantes,entreelasaBR29,emsoja,caupieguandu,observaram que todas nodularam as trs espciesde plantas, contudo, apenas para soja, a interaorizbioleguminosamostroueficinciasignificativa.

No ensaio em vasos com solo, a interao soloe tratamentos foi significativa para a maioria dosparmetros estudados, exceto paraMSPA e altura, oqueindicaqueotipodesoloinfluenciouostratamentos(Tabela 3). No Cambissolo, as estirpesreferncia(BR2003eBR2801)eaestirpeBR29apresentaramos maiores valores de NN, seguidas das estirpesUFLA 03320 e UFLA 03321. No LatossoloVermelhoAmarelo, a estirpe BR 2003 no ficouno grupo com osmaiores valores deNN.Alm dasestirpes BR 2801 e BR 29, que apresentarammaior

Tabela 2.Nmerodendulos(NN),massadematriasecadendulos(MSN),deraiz(MSR)edepartearea(MSPA),eficinciarelativa(ER),teor(TNPA)eacmulodenitrognionapartearea(ANPA),ealturadoguanduanocultivarIapar43(Arat),emvasosdeLeonard,nosdiferentestratamentosdefontesdeN(1).

FontedeN NN porvaso

MSN(mgporvaso)

MSR(gporvaso)

MSPA(gporvaso)

ER(%)

TNPA(%)

ANPA(mgporvaso)

Altura(cm)

+N(52,5mgL1) 0c 0,0c 0,857b 2,500c 100,0c 1,43b 36,006d 41,75c

N(5,25mgL1) 0c 0,0c 0,287b 0,663d 26,6d 1,82b 12,376d 23,42d

BR2003 108b 75,0c 0,570b 1,910c 78,1c 3,12a 59,618c 32,38c

BR2801 188b 156,7b 1,197a 3,747b 148,5b 3,86a 144,317a 44,75b

BR29 165b 245,0a 0,470b 2,070c 84,2c 2,99a 61,477c 33,00c

UFLA0384 328a 371,7a 1,107a 3,807b 154,7b 3,77a 142,827a 50,75b

INPA0311B 294a 435,0a 1,170a 3,783b 152,8b 3,12a 118,486b 50,67b

BR3267 121b 210,7b 0,517b 2,253c 89,6c 3,21a 72,280c 37,58c

UFLA03153 223b 374,3a 1,067a 3,430b 139,4b 3,60a 121,026b 45,83b

UFLA03154 285a 192,3b 0,770b 2,807c 116,1c 3,68a 102,353b 39,167c

UFLA03164 197b 143,7b 0,623b 2,367c 94,7c 3,51a 85,328c 38,167c

UFLA03320 146b 292,3a 1,480a 4,683a 188,0a 3,51a 164,220a 56,25a

UFLA03321 118b 196,0b 1,447a 4,756a 195,1a 3,73a 176,861a 55,83a

UFLA03325 132b 299,3a 1,287a 3,957b 162,3b 3,60a 142,398a 49,33b

UFLA04212 439a 325,0a 0,957a 3,397b 138,0b 3,25a 108,091b 46,83b

Pvalor 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000

CV(%) 30,5 4,6 28,3 17,5 19,5 14,5 20,3 10,6

(1)Mdiasseguidasdeletrasiguais,nascolunas,nodiferementresi,pelotesteScottKnott,a5%deprobabilidade.



nodulao no Cambissolo, a estirpe UFLA 03320tambm proporcionou maior nodulao em guanduno Latossolo VermelhoAmarelo. A testemunha querecebeu N mineral no nodulou no Cambissolo e,juntocomatestemunhasemNmineral,apresentouosmenoresvalores.NoLatossoloVermelhoAmarelo,atestemunhaquerecebeuNmineralapresentoundulos,pormemnmerobaixo.AtestemunhasemNmineralapresentou mais ndulos do que a testemunha querecebeuNmineral,efoisemelhanteestirperefernciaBR2003eaestirpeUFLA03320.

AsestirpesrefernciaBR2003eBR2801eaestripeUFLA03320apresentaramosmaioresvaloresdeMSNnoCambissolo,seguidaspelasestirpesBR29eUFLA03321,enquantoastestemunhasapresentaramosmenoresvalores.NoLatossoloVermelhoAmarelo,atestemunha+Nfoiinferioraosdemaistratamentos.NoCambissolo,astestemunhasapresentarammaioresvaloresdeERdoqueostratamentoscominoculao.Quanto ao teor e acmulo de N na parte area, atestemunha que recebeu N mineral foi superior aosdemaistratamentos.NoLatossoloVermelhoAmarelo,nohouvediferenasignificativaentreostratamentosquantoaosparmetrosER,TNPAeANPA.

Quantoaosparmetrosrelativosaodesenvolvimentodaplanta(EReANPA),ostratamentoscominoculaoforaminferiorestestemunha+NnoCambissolo.Istopodeestarrelacionadoacidezefertilidadedosolo,pois,noLatossoloVermelhoAmarelo,quepossuipHmaiselevadoemais frtil,estes tratamentosforamsemelhantes.Umfatorestressanteparaabactriaeaplanta,comoasensibilidadeacidez,podeterafetadoasimbiose.DeacordocomMoreira&Siqueira(2006),ohospedeiropodesermaisafetadopelaacidezdoqueabactria.PlantassemadubaodeNsomaissensveisaosestressesambientaisdoqueplantasque recebemapenas N mineral. Rufini et al. (2011) observaramque a simbiose e o desenvolvimento das plantas defeijoeirocomum,emsolocomesemcalagem,foramfavorecidos com a calagem. Portanto, em outrostiposde solo, comcaractersticasmais favorveis aoestabelecimentodasimbiosecomestasestirpes,podehaverrespostaspositivasinoculao.

Emrelaoaosefeitosprincipaisdostratamentospara MSPA, a testemunha que recebeu N mineralfoi superior aos demais tratamentos, porm quanto altura, no houve diferena significativa entre ostratamentos (Tabela 4). Entre os dois tipos de solo,

Tabela3.Nmerodendulos(NN),massadematriasecadendulos(MSN)edepartearea(MSPA),eficinciarelativa(ER),teor(TNPA)eacmulodenitrognionapartearea(ANPA),ealturaemguanduanocultivarIapar43(Arat),paraainteraoentresoloetratamentos,emcasadevegetao(1).

Tratamento NN porvaso

MSN(mgporvaso)

MSPA(gporvaso)

ER(%)

TNPA(%)

ANPA(mgporvaso)

Altura(cm)

Cambissolo

+N(300mgdm3) 0c 0,0c 6,378a 100,0a 4,16a 259,55a 58,33a

N 2c 35,3c 5,568a 89,4a 2,08b 115,87b 66,75a

BR2003 19a 265,5a 4,893a 77,3b 2,60b 125,38b 57,06a

BR2801 22a 180,5a 5,198a 82,0b 2,24b 117,15b 56,60a

BR29 14a 111,3b 4,923a 78,7b 1,98b 97,89b 66,80a

UFLA03320 6b 158,0a 4,410a 68,1b 2,24b 99,29b 51,38a

UFLA03321 8b 104,3b 4,935a 77,6b 2,18b 109,70b 62,53a

LatossoloVermelhoAmarelo

+N(300mgdm3) 7c 49,3b 7,013a 100,0a 2,80a 196,54a 71,94a

N 22b 308,5a 5,295a 76,6a 3,15a 166,36a 66,06a

BR2003 19b 225,3a 5,558a 77,6a 2,76a 149,79a 68,31a

BR2801 41a 338,3a 6,035a 86,1a 2,76a 167,05a 76,81a

BR29 36a 376,0a 5,733a 82,5a 2,73a 156,17a 69,69a

UFLA03320 24b 293,3a 5,330a 74,3a 2,96a 159,74a 60,06a

UFLA03321 29a 286,3a 5,713a 80,4a 3,06a 175,10a 66,50a

Pvalor 0,0281 0,0008 0,8895 0,8173 0,0000 0,0027 0,5385

CV(%) 22,4 5,1 17,0 15,7 11,8 21,0 17,0




houvediferenasignificativaparaMSPAealtura,emqueostratamentosemLatossoloVermelhoAmareloapresentaram os maiores valores (Tabela 4), fatoque tambm pode estar relacionado acidez e menor fertilidade do Cambissolo, o que afetou odesenvolvimentodaplanta.

No ensaio de campo, realizado em Lavras,houve diferena significativa apenas para NN e

MSN quanto aos parmetros avaliados na florao(Tabela5).AsestirpesUFLA03320eUFLA03321apresentaram maior nodulao e MSN do que osdemaistratamentos.AestirpeUFLA03321tambmapresentou alta nodulao no experimento em vasocomLatossoloVermelhoAmarelo.Comrelaoaosparmetros avaliados por ocasio da colheita, nohouve diferena nos tratamentos com inoculao.Aprodutividadefoisuperiora1.100kgha1paratodosostratamentos.Nopresentetrabalhoaprodutividademdiadegrosfoide1.287kgha1,superiorobtidaporCesaretal.(2011),de600kgha1,noCerradodoMatoGrossodoSul,eprximamdiamundialde1.354,9kgha1(FoodandAgricultureOrganizationoftheUnitedNations,2012).

No presente trabalho, mostrouse a presena deBFNN nativas, nos solos onde foram instaladosos experimentos, capazes de nodular e promovero crescimento do guanduano. Mostrousetambma eficinciadaspopulaesnativas, o queprovavelmente est associado s boas condiesde fertilidade e matria orgnica do solo, quepermitiram s estirpes nativas seu estabelecimentoe sobrevivncia. Populaes nativas de BFNNsuperiores a 50 clulas por grama de solo podemafetararespostainoculao(Moreira&Siqueira,2006). Nos solos usados no presente estudo, aspopulaeseramsuperioresaessevalor.

Tabela 4.Massadematriasecadapartearea(MSPA)ealtura em guanduano cultivar Iapar 43 (Arat), para osdiferentessolosetratamentos,emcasadevegetao(1).

Tratamento MSPA(gporvaso) Altura(cm)

+N(300mgdm3) 6,695a 65,14a

N 5,431b 66,41a

BR2003 5,225b 62,69a

BR2801 5,616b 66,71a

BR29 5,328b 68,24a

UFLA03320 4,870b 55,72a

UFLA03321 5,324b 64,51a

Pvalor 0,0168 0,3585

Solo

Cambissolo 5,186b 59,92b

LatossoloVermelhoAmarelo 5,811a 68,48a

Pvalor 0,0172 0,0058

CV(%) 17,0 17,0


Tabela 5.Nmerodendulos(NN),massadematriasecadendulos(MSN)edepartearea(MSPA),eficinciarelativa(ER),teor(TNPA)eacmulodeNnapartearea(ANPA),massadeNdisponibilizado(kgha1),nmerodevagens/planta,nmerodegros/vagem,massade100gros,rendimento,teor(TNG)eacmulodeNnosgros(ANG),emguanduanocultivarIapar43(Arat),nostratamentosemcondiesdecampo(1).

Tratamento NNporplanta

MSN(mgporplanta)

MSPA(gporplanta)

ER(%)

TNPA(%)

ANPA(mgporplanta)

N(kgha1)

Nvagensporplanta

Ngrospor

vagem

Massa100gros

(g)

Rendimento(kgha1)

TNG(%)

ANG (kgha1)

+N(70kgha1) 7b 108,4b 33,33a 100,0a 4,03a 1346,55a 96,95a 151a 2,2a 7,54a 1568,0a 4,13a 64,83a

N 6b 67,2b 19,40a 62,2a 3,81a 745,09a 53,65a 117a 2,7a 6,85a 1152,0a 4,20a 48,21a

BR2003 8b 90,6b 23,24a 76,5a 4,13a 966,47a 69,59a 100a 3,4a 7,52a 1190,2a 4,13a 48,93a



UFLA03320 12a 185,0a 31,12a 100,6a 3,54a 1101,05a 79,28a 132a 2,2a 7,12a 1408,0a 4,19a 58,91a

UFLA03321 13a 232,8a 20,51a 68,6a 3,45a 706,43a 50,86a 126a 3,2a 7,38a 1149,7a 4,19a 48,37a

Pvalor 0,0268 0,0046 0,0941 0,1302 0,2481 0,1128 0,1128 0,4942 0,1179 0,0564 0,5337 0,5054 0,4157

CV(%) 16,7 4,5 28,2 26,6 11,0 32,3 32,3 34,2 25,6 4,8 25,7 5,9 24,2




Concluses

1.AestirpeUFLA03320eficienteempromovero crescimento do guanduano 'Iapar 43' (Arat)e, portanto, tem potencial para ser utilizada comoinoculanteparaaculturajuntocomaestirpeBR2801.

2.Osdois solosutilizados tmpopulaesnativasde BFNN eficientes, com destaque para o LatossoloVermelhoAmarelo.

Agradecimentos

Ao Ministrio de Agricultura Pecuria eAbastecimento (Mapa), ao Conselho Nacional deDesenvolvimentoCientficoeTecnolgico(CNPq)eCoordenaodeAperfeioamentodePessoaldeNvelSuperior(Capes),pelofinanciamentodoprojetoepelaconcessodebolsasdeestudos.

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Recebidoem15dejaneirode2014eaprovadoem13demarode2014

guandu fbn 2014

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