hba1c capillary electrophoresis

*Presentan : Novida Dwi Astuti Pembimbing : Dian Ariningrum, dr. Mkes, SpPK Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi KlinikFakultas Kedokteran Universitas Sebelas MaretSurakarta2015

*

NoStaseJudul MetodaTanggalPengampu1HematologiPenghitungan Eritrosit, Leukosit dan Trombosit dengan Bilik Hitung12-09-2014dr. Tahono, SpPK-K2SamplingKesehatan dan Keselamatan Kerja pada Laboratorium Patologi Klinik11-10-2014dr. Tahono, SpPK-K

3SerologiPemeriksaan CYFRA 21-1 dengan Metode Enzym Linked Immunosorbent Assay (ELISA)13-12-2014dr . Tonang Dwi A, Sp.PK, PhD.4MikrobiologiPemeriksaan Bacterial Vaginosis14-01-2015dr. B. Rina A. Sidharta, SpPK- K5Sekresi EkskresiTes Darah Samar Feses dengan Prinsip Immunokimia12-02-2015dr. Yuwono Hadisuparto, SpPK 6Kimia KlinikPemeriksaan HbA1c dengan Metode Capillary Electrophoresis27-03-2015Dr. Dian Ariningrum, Mkes, SpPK

Mengetahui fraksi Hemoglobin dan varian Hemoglobin.Mengetahui dan memahami proses pembentukan HbA1c.Mengetahui dan memahami pemeriksaan HbA1c dengan metode Capillary Electrophoresis.

*

Hemoglobin (Hb) : Unsur utama dalam sel darah merah berperan dalam pengangkutan oksigen dari paru-paru ke seluruh jaringan, dan mengangkut karbon dioksida dari jaringan ke paru-paru untuk dibuang, serta berfungsi sebagai buffer (mereduksi perubahan pH)

Molekul hemoglobin terdiri dari dua pasang rantai polipeptida yang mengandung tetramer globin dan empat gugus heme.*

Anoni m, 2010

*

Hemoglobin S,Hemoglobin C,Hemoglobin E,Hemoglobin Constant Spring,Hemoglobin H,Hemoglobin Barts,dll

*

*

HbA1a HbA1cMerupakan fraksi terpenting sekitar 4-5% dari total hemoglobin (Nitin, 2010).

HbA1b

*

Anonim, 2010

N-(1-doxy)-fructosyl-hemoglobin atau N-(1-deoxyfructose-1-yl) hemoglobin beta chain (Aldasouqi, 2008). Glukosa stabil yang terikat pada gugus N-terminal pada rantai HbHbA yang mengalami glikosilasi pada gugus valin rantai -globinReaksi glikasi secara nonenzimatikIrreversibel

Metoda pengukuran kadar HbA1c:Berdasarkan perbedaan muatan (ion exchange column chromatography, high performance liquid chromatography), elektroforesis, isoelectric focusing),Berdasarkan perbedaan struktur (affinity chromatography, immunoassay), Berdasarkan analisis kimia (fotometris dengan enzimatik direk).

TujuanMengukur kadar HbA1cMenegakkan diagnosis DMMenentukan panduan terapi DMMonitoring terapi DMMengetahui faktor risiko komplikasi DM

Sampel:Darah EDTASebia The Minicap Flex PiercingPenyimpanan:15-30C 18 jam2-8C 7 hari-70 / -80 0C dapat disimpan selama 3 bulan. Pra Analitik

Persiapan pasienTidak ada persiapan khusus

PERKENI (Perkumpulan Endokrinologi Indonesia)

Setiap 3 bulan

Minimal 2x setahun

ADA (American Diabetes Association)

2x setahunTujuan terapi tercapaiKadar gula terkontrol

4x setahunTujuan terapi tidak tercapaiPerubahan terapiPra Analitik...Pra Analitik

Quality control

Dilakukan setelah pergantian nomor lot analisis buffer atau setelah urutan pembersihan kapiler,Atau sebelum memulai analisis.

Pra Analitik...Pra Analitik

Prinsip pemeriksaanCapillary Electrophoresis

(Li. 1996)

Jinseokseo, 2011Analitik

*Capillary Electrophoresis (CE) merupakan teknik analisis pemisahan molekul berdasarkan mobilitas elektroforesis dengan menggunakan tegangan listrik.Mobilitas elektroforesis tergantung pada muatan molekul, viskositas, dan ukuran molekul. Capillary Electrophoresis umumnya terdiri dari power supply, tabung kapiler, detektor dan perangkat output.

*Molekul bermuatan dipisahkan berdasarkan mobilitas elektroforesis dalam larutan bufer alkali, Dipengaruhi oleh pH elektrolit dan aliran elektroosmotik (EOF).Mobilitas elektroforesis tergantung pada muatan, kekuatan medan listrik, koefisien gesek dan viskositas larutan.

Hasil kuantitatif dari fraksi HbA1c ditampilkan secara otomatisDalam % (1 angka desimal) National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP)Dalam mmol/ mol (tanpa angka desimal) International Federation for Clinical Chemistry (IFCC)Kadar normal konsentrasi HbA1c < 42 mmol/mol (6,0 %) ditampilkan dengan warna biru.

Pra Analitik...Paska Analitik

Kadar HbA1c > 42 mmol/mol (6,0 %) ditampilkan dengan warna orange.Kurva elektroforesis abnormal (adanya tambahan fraksi atau hilangnya fraksi normal HbA1c, fraksi HbA, Hb A0 dan Hb A2 lainnya) ditampilkan dalam warna ungu dengan Atypical profilExpected value range dari HbA1c menurut The American Diabetes Association adalah < 6,5 7,0 % (48 53 mmol/mol)


Interferens


HbA1c dipengaruhi oleh berbagai faktor seperti genetik, hematologi dan faktor lain yang berkaitan dengan penyakit


International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) Standardization of HbA1c, 2001.Lee KF, Szeto YT, Benzie IF. Glycohaemoglobin measurement: methodological differences in relation to interference by urea.Acta Diabetol 2002; 39(1):35-9.Bain.J.B, 2006. Chapter I. Haemoglobin and The Genetics of Haemoglobin Synthesis. Haemoglobinopathy Diagnosis. Second edition. Blackwell Publishing Ltd, USA. Pp : 1-11.Saudek CD, Derr RL, Kalyani RR. Assessing glycemia in diabetes using self-monitoring blood glucose and hemoglobin A1c. JAMA 2006;295:1688-97. Saudek CD, Herman WH, Sacks DB, Bergenstal RM, Edelman D, Davidson MB. A new look at screening and diagnosing diabetes mellitus. J Clin Endocrinol Metab. 2008. Pp: 93:2447-53. Cohen RM, Franco RS, Khera PK, et al. Red cell life span heterogeneity in hematologically normal people is sufficient to alter HbA1c. Blood.2008;112:4284 91.*

Moscha.A., Paleari.R., Leone.D., Ivaldi. G. 2009., The Relevance of Haemoglobin F Measurement in The Diagnosis of Thalassemias and Related Haemoglobinopathies. In Science Direct, Clinical Biochemistry vol 42. Pp: 1797-1801.Izumi M, Oi K, Kuroda M. and Miyazawa Y. Evaluation of the Glycohemoglobin Enzyme Assay Reagent Norudia HbA1C for Automatic Analyzer. JJCLA 2009; 34(5): 1-14.Bain.J.B, Wild.B.J., Stephen.D.A. phelan.A.L., 2010. Globin Genes and Haemoglobin. Variant Haemoglobins: A Guide to Identification. Pp: 153-160.Nitin S. HbA1c and factors other than diabetes melitus affecting it. Singapore Med J. 2010. Pp: 51:616-22. Gough S, Manley S, Stratton I. HbA1c in diabetes case studies using IFCC units. Wiley Blackwell; 2010:2-61.American Diabetes Association. Standards of Medical Care in Diabetes 2010. Diabetes Care 2010;33:S11-S61.Mahajan, R.D. & Mishra, B. Using Glycated Hemoglobin HbA1c for diagnosis of Diabetesmelitus: An Indian perspective. Int J Biol Med Res 2011. Pp: 2(2): 508-12.Sebia The Minicap Flex Piercing HbA1c insert kit, 2014.

*

Interpretasi hasilProvan, 2010Paska Analitik...

Kadar HbA1cNon Diabetik4-6%DiabetikKontrol baik< 7%Kontrol sedang7-10%Kontrol buruk> 10%

*

**************

hba1c capillary electrophoresis

Documents