hidrolisis quimica y enzimatica de los disacaridos

5/30/2018 HIDROLISIS QUIMICA Y ENZIMATICA DE LOS DISACARIDOS

Ao de la Promocin de la Industria Responsable y del Compromiso Climtico

Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Facultad de Medicina

Escuela Acadmico Profesional de Tecnologa Mdica

Curso: Bioqumica

Informe de Laboratorio N 10

PRACTICA DE LABORATORIO N 12 - 13

HIDROLISIS QUIMICA Y ENZIMATICA DE LOS DISACARIDOS

Mesa N 04

Aguilar Ocaa, Gissel Teresa

Bonifacio Mundaca, Jenny Katherine

De la Cruz Isuiza, Luis Fernando

Mallma Ynga, Piero Luis

Pacheco Santilln, Jos Luis

Snchez Salinas, lvaro Hernando

Docente: Nuez Fonseca, Marco Antonio

5 de Mayo del 2014


INTRODUCCION

Los disacridos son un tipo de glcidos formados por la unin o condensacin de

dos azcares monosacridos iguales o distintos mediante un enlace O-glucosdico

(con prdida de una molcula de agua) pues se establece en forma de ter siendo

un tomo de oxgeno el que une cada pareja de monosacridos, mono odicarbonlico, que adems puede ser o en funcin del -OH hemiacetal o

hemicetal.

Los disacridos ms comunes son

Sacarosa (azcar comn):

- No tiene poder reductor

- Es el resultado de la unin del carbono 1 de la alfa-glucosa y el carbono

2 de la -fructosa con un enlace glucosdico alfa (1-2)

-La hidrlisis de la sacarosa por cidos o por enzimas como la invertasa o

sacarasa, rompe el enlace glucosdico y se obtiene el azcar invertido que es una

mezcla de glucosa y fructosa.

Lactosa (azcar de la leche):

-Tiene poder reductor

-Est constituda por -galactosa y alfa-glucosa, con el enlace glucosdico

(1-4) entre el carbono 1 de la -galactosa y el carbono 4 de la a-glucosa.

-Su hidrlisis se lleva a cabo por la accin de la enzima Lactasa

Maltosa, isomaltosa, trehalosa y celobiosa: Formadas todas por la unin de

dos glucosas, son diferentes dependiendo de la unin entre las glucosas. Todas

ellas tienen poder reductor, salvo la trehalosa.

Maltosa:

-Est formada por dos molculas de alfa-glucosa con el enlace glucosdico

alfa (1-4) entre el carbono 1 de la primera molcula y el carbono 4 de la segunda.

-Es un azcar reductor debido a que reduce el in cprico a in cuproso

cuando se emplea el reactivo de Felhing.

-Se obtiene durante la degradacin o sntesis del polisacrido celulosa


El carcter reductor se da en un disacrido si uno de los monosacridos que lo

forman tiene su carbono anomrico (o carbonlico) libre, es decir, si este carbono

no forma parte del enlace O-glucosdico. Dicho de otra forma, si el enlace O-

glucosdico es monocarbonlico el disacrido resultante ser reductor (maltosa,

celobiosa, etc.), mientras que si el enlace O-glicosdico es dicarbnlico el

disacrido resultante ser no reductor (sacarosa, trehalosa).

El enlace covalente entre dos monosacridos provoca la eliminacin de un tomo

de hidrgeno de uno de los monosacridos y de un grupo hidroxilo del otro

monosacrido, de forma que en conjunto podemos decir que se elimina una

molcula de agua (H2O) que se libera al medio de reaccin.

En la mucosa del tubo digestivo del ser humano existen unas enzimas llamadas

disacaridasas, que hidrolizan el enlace glucosdico que une a los dos

monosacridos, para suabsorcin intestinal.

La maltosa y lactosa son disacridos que poseen un carbonos anomricos libre

por lo que poseen poder reductor y la reaccin con el Reactivo de Benedict es

positiva, en tanto que la sacarosa es un disacrido que no posee carbonos

anomricos libres por lo que carece de poder reductor y la reaccin con el

Reactivo de Benedict es negativa.

Sin embargo, en presencia de HCl y en caliente, la maltosa, lactosa y sacarosa se

hidrolizan, es decir, incorpora una molcula de agua y se descomponen en los

monosacridos que los conforman, glucosa + glucosa, glucosa + galactosa y

glucosa + fructosa, respectivamente, que si son reductores.

OBJETIVOS

- Inducir la hidrolisis de la maltosa, lactosa y sacarosa qumicamente y

enzimticamente.

- Evaluar a los disacridos previos a la hidrlisis con reactivo Benedict y

Selliwanof.

- Evaluar a los disacridos despus de su hidrolisis con reactivo Benedict

y Selliwanof.


PROCEDIMIENTO

HIDRLISIS QUMICA

1. Colocamos agua destilada en el tubo control y en los tubos 1A, 2A, 3A

2. Luego en el tubo 1A 2ml de Maltosa, en el tubo 2A lactosa y el tubo 3A

Sacarosa.

3. Luego echamos 1 ml del reactivo de Benedict a los 3 tubos.


4. Llevamos a calentar a bao mara los tubos y observamos los cambios.

5. Luego para observar la hidrlisis procedemos a hacer de nuevo el

procedimiento 1 y 2 y echamos 1ml de HCl 4M lo llevamos a bao Mara

para hidrolizar los disacridos.


6. Luego que hidrolizamos echamos 1ml de NaOH 4M y 1ml del reactivo de

Benedict y lo llevamos a bao Mara, observamos los resultados.

7. Los mismos procedimientos se hacen pero para observar si hay fructuosa

pero usamos el reactivo de Seliwanoff.


HIDRLISIS ENZIMTICA

1. En un beacker de 50 ml diluir y homogenizar 2.5g de levadura en 20ml de

agua destilada.

2. Dejar reposar durante 15 min y filtrar.

3. Posteriormente colocar el extracto de levadura segn el cuadro de

temperatura mostrado anteriormente. Y lo separamos en levadura crudo a

37C y hervido a 100C


4. Hacemos los mismos procedimientos que en la hidrlisis qumica pero solo

con la sacarosa vertiendo levadura crudo en el tubo control y tubo 1B y

levadura hervido en el tubo 2B.

5. Dejamos que pase 10 min a 37C en bao mara.


6. Luego echamos 1ml de reactivo de Benedict.

7. Llevamos a bao Mara y observamos los resultados.

8. Hacemos el mismo procedimiento con el reactivo de Seliwanoff para

observar fructuosa.


RESULTADOS

HIDROLISIS QUMICA

-Antes de la hidrolisis:

Tubo control Tubo 1A Tubo 2A Tubo3ABenedict

Seliwanoff

Despus de la hidrolisis

Tubo control Tubo 1B Tubo 2B Tubo3BBenedict

Seliwanoff


HIDROLISIS ENZIMTICA

Tubo control Crudo Hervido

Benedict

Seliwanoff


INTERPRETACION DE RESULTADOS

-En la hidrolisis qumica s necesitan altas temperaturas y cidos concentrados

para romper los enlaces glucosidicos.

-El que diera positivo la prueba de seliwanoff en el tubo de sacarosa antes de la

hidrolisis debe ser que la botella con agua destilada estaba contaminada con

monosacridos.

-Con la prueba de Benedict se comprueba que la hidrolisis se produjo y formo

monosacridos reductores y con la prueba de seliwanoff se comprueba que en la

hidrolisis de la sacarosa existe cetosas, en este caso la fructuosa.

-En la hidrolisis enzimtica de la sacarosa se produjo sin necesidad de altas

temperaturas como en el caso de el extracto de levadura crudo y sin utilizarcidos, esto se debe a que las enzimas necesitan menor energa de activacin y

necesita menos tiempo que en la hidrolisis qumica.

DISCUSION

En la presente prctica se realizaron dos hidrolisis una qumica y la otra

enzimtica, en el caso de la hidrolisis qumica existi un problema al momento de

realizar la hidrolisis a la sacarosa debido a que esta fue un poco contaminada y

por tanto luego de llevar haber agregado el HCl y puesto a T 100C, se tio de uncolor medio amarillo, lo cual indico el error al momento de pipetear la sacarosa con

una pipeta usada para otro disacrido.

En lo que respecta a la hidrolisis enzimtica los resultados para la prueba de

Selivanof debieron de ser negativo en el tubo donde se mezcl la sacarosa con el

extracto de levadura hervido, pero este tubo no estuvo el suficiente tiempo a T

de 100C por tanto no se desnaturalizo la enzima completamente y esta sigui

realizando su accin catalizadora lo que indica que el resultado con Selivanof es

positivo ya que se hidrolizo la sacarosa en fructuosa y glucosa, y este reactivo

reconoce a la fructuosa.

Por tanto para poder realizar esta prctica experimental se requiere un aislamiento

de contaminacin, ya sea del medio as como de los instrumentos a utilizar como

es en este caso las pipetas, los tubos de ensayo, los frascos contenidos con

disacridos y reactivos. Adems de mantener la T necesaria para cada

experimento practico.


CONCLUSIONES

Por medio de esta prctica se lograron reconocer algunas de las propiedades de

los carbohidratos, como lo es su propiedad reductora.

Se realiz la hidrlisis 3 disacrido, de los cules se comprob esta reaccin por

medio de pruebas qumicas con reactivos que ayudan a la identificacin de los

compuestos que se forman despus de estas reacciones para determinar y

comprobar que se realiz bien el procedimiento.

La hidrlisis de los disacaridos se puedo evidenciar con dos pruebas:

Prueba de Benedict, evidencio la aparicin de azucares reductores.

Prueba de selliwanof, sirve para distinguir entre la aldosa y la cetosa, Las cetosas

generalmente producen un color rojo.

En cambio despus de la hidrlisis de la sacarosa con la prueba de benedict

observamos que su color era diferente por la presencia de fructosa y glucosa, su

color era ms oscuro y un poco verdoso.

En la prueba de selliwanof antes y despus de la hidrlisis dio positivo slo en la

sacarosa.

BIBLIOGRAFIA

https://docs.google.com/document/d/1nJKakJFJdmKwfHoteIeU-

kXNs7JQcaTeDXQmRSU6lS0/edit

http://quimica-csfisicas.blogspot.com/2012/05/hidrolisis-de-disacaridos-o.html
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