histamine induces melanogenesis and morphologic changes by protein kinase a activation via h2...

9
Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H 2 Receptors in Human Normal Melanocytes Masaki Yoshida, Yoshito Takahashi, and Shintaro Inoue Basic Research Laboratory, Kanebo Ltd, Odawara-shi, Kanagawa-ken, Japan Hyperpigmentation frequently accompanies chronic or acute in¯ammation. A number of in¯ammatory mediators have been shown to stimulate melanin synthesis in human melanocytes. Although histamine is ubiquitous as an in¯ammatory factor, its involve- ment in pigmentation remains obscure. In this work, we examined the effects of histamine on cultured human melanocytes. Treatment of human melano- cytes with 0.1±10 mM histamine evoked morphologic changes and increases in tyrosinase activity. The concomitant increases in melanin content of the his- tamine-treated melanocytes indicated an elevation of melanin synthesis by tyrosinase activation. These sti- mulatory effects of histamine were completely inhib- ited by an H 2 antagonist, famotidine, whereas H 1 and H 3 antagonists had no inhibitory effect whatso- ever. In addition, an H 2 agonist, dimaprit, induced the same degree of melanogenesis as histamine at concentrations of 0.1±10 mM. We observed an increase in the intracellular cAMP contents of human melanocytes induced by histamine via the H 2 recep- tors. We know that this cAMP accumulation and subsequent protein kinase A activation plays a criti- cal role in histamine-induced melanogenesis, because a speci®c protein kinase A inhibitor, H-89, comple- tely suppressed these stimulatory effects of histamine, and because dibutylic cAMP, a speci®c protein kinase A activator, stimulated human melanocytes as potently as histamine. Taken together, we show here that histamine induces melanogenesis of human cul- tured melanocytes by protein kinase A activation via H 2 receptors. Key words: cyclic AMP/famotidine/pig- mentation/tyrosinase. J Invest Dermatol 114:334±342, 2000 U ltraviolet (UV) exposure or in¯ammation fre- quently evokes skin pigmentation (Prunieras, 1986) via activation of melanin synthesis and distribution of melanin to keratinocytes. Melanin synthesis is triggered by melanogens, a large group of melanocyte-stimulating factors, such as endothelin-1 (Imokawa et al, 1995) and a-melanocyte-stimulating hormone (a-MSH) (Hunt et al, 1994), and several in¯ammatory factors (Tomita et al, 1992; Morelli and Norris, 1993). Although histamine is ubiquitous as an in¯ammatory mediator (Leurs et al, 1995), its involvement in pigmentation remains obscure. Several researchers reported increases in the melanin synthesis of cultured melanoma cells and melanocytes on the addition of histamine (Bernd et al, 1986; Tomita et al, 1988, 1993; Whitehead et al, 1988). As histamine antagonists did not prevent the melanogenic activity of histamine in these studies, however, it appears that the histamine receptors did not mediate the action of histamine in human melanocytes. Tomita et al speculated that histamine metabolites stimulated human melanocytes, rather than histamine itself, through imidazoline/guanidinium receptor sites, a group of nonspeci®c receptor sites for imidazoles that induce intracellular cAMP accumulation (Monte®ori and Kline, 1981; Lanier et al, 1993). For these reasons, histamine has not been regarded as a melanogen. On the other hand, McEvans et al reported inhibitory effects of histamine agonists on the melanogenesis of human melanoma cells (McEwan and Parsons, 1991; Fechner et al, 1994) and an H 2 -agonist-induced reduction in the melanin synthesis of human melanocytes and melanoma cells. In a more recent study, however, they found that the inhibitory action of H 2 agonists on melanogenesis was mediated by imidazoline/ guanidinium receptor sites (Gros et al, 1994). Thus, at this juncture, there are no reports detailing the action of histamine via histamine receptors in human melanocytes. In consideration of a report by Reynolds et al that suggested the existence of H 1 and H 2 receptors on the surface of human melanoma cells and melanocytes (Reynolds et al, 1996), we decided that these previous investigations were not suf®cient to evaluate the action of histamine on human melanocytes. In this study, we attempted to evaluate the effect of histamine on the melanogenesis of human cultured melanocytes via histamine receptors. To our surprise, we found that the melanogenic activity of histamine is speci®cally mediated by histamine H 2 receptors. Moreover, our ®ndings were con®rmed by an investigation of intracellular cAMP accumulation and subsequent protein kinase A (PKA) activation in histamine-treated melanocytes. 0022-202X/00/$15.00 ´ Copyright # 2000 by The Society for Investigative Dermatology, Inc. 334 Manuscript received March 1, 1999; revised October 1, 1999; accepted for publication November 11, 1999. Reprint requests to: Dr. Masaki Yoshida, Basic Research Laboratory, Kanebo Ltd, 3±28, 5-Chome, Kotobuki-cho, Odawara-shi, Kanagawa- ken, Japan. Email: [email protected] Abbreviations: a-MSH, a-melanocyte-stimulating hormone; cPKC, conventional protein kinase C; dbcAMP, dibutylic 3¢,5¢-cyclic adenosine monophosphate; PKA, protein kinase A; RT-PCR, reverse transcription polymerase chain reaction.

Upload: shintaro

Post on 06-Jul-2016

212 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

��������� ����� ������������ �� ���������� ��������� ������� ������ � ���������� ��� �� ��������� �� ����������� ����������

������ ������ ������� ��������� � ��� ���� � �������� �������� ���������� �� ��� �� ���������� �� �������� ����

����������������� ���������� ����������� ��������� ����� �� ��������! � ������ �� �� ���������������� ���� ���� ���"� �� ��������� ���������������� �� ����� �����������! �������� ����������� ���������� �� �� �� �������� ������# ��� �������$���� �� ������������ ������� �������! � ���� "��%#"� �&����� ��� ������� �� ��������� �� ������������ �����������! '�������� �� ����� ������$����� "��� (!)*)(� ��������� ���%� ������������������ �� ��������� �� ���������� ��������! '������������� ��������� �� ������� ������� �� ��� ���$������$������ ����������� ������� �� ��������� ��������� ��������� �� ���������� ����������! '���� ���$�������� ������� �� ��������� "��� ���������� �����$��� �� �� �� ����������# ���������# "������ �)

�� �+ ����������� �� �� ���������� ������ "�����$����! � ������# �� �� �������# �������# �����

��� ���� ����� �� ������������� �� ��������� ���������������� �� (!)*)(� ! ,� ������� ���������� �� ��� ������������� �� � �������� �� ���������������� ����� �� ��������� ��� ��� �� �����$����! ,� %��" ���� ���� �� � ������������ ������������ ������� %����� � ���������� ����� � �����$��� ���� �� ���������$����� �������������# �������� �����-� ������� %����� � ���������# �$./# ������$���� ��������� ����� ����������� ������� �� ���������#�� ������� �������� �� �# � �����-� �������%����� � ���������# ��������� ����� ����������� ���������� �� ���������! '�%�� ��������# "� ���" �������� ��������� ������ ������������� �� ����� ���$���� ����������� �� ������� %����� � ���������� ����� ���������! ��� ���� � �� �������������������������������������� � ������ ������� ���� �! �"# "$$$

!���"��!�� # $% �&������ �� � '�((���� )���*�� �!� �"���� ��� ���(� ����� #+�� �����,-./% ��� ����"���� �) (�!� � �� ������ � ���������� �) (�!� � �� ������ ������0 ��!� � �� ������ �� �������� �� (�!� ��� � � !���� �����

�) (�!� ���������(�!��� � )������ ���� �� � ����!� �, #�(������� �� ,--1% � ��(�!� ���������(�!��� � ���(� � #����2%#2� � �� �� ,--3% � ��"���! � '�((����� )������ #��(��� �� ��,--45 ����!!� � 6����� ,--7%0 8!������ �����(� � �� ���*�������� � � '�((����� (������ #����� �� �� ,--1% ��� � "�!"�(� � � ���(� ����� ��(�� � �������0��"���! ����������� ������� � ������� � ��� (�!� � �� ������ �)

��!���� (�!� �(� ��!!� � (�!� ������ � ��� ����� �)�����(� � #��� �� �� ,-./5 ��(��� �� �� ,-.. ,--75 9��������� �� ,-..%0 8� �����(� � � ���� ���� � �� ���"� � ���(�!� ��� �� ����"��� �) �����(� � � ����� ������ ����"�� ��������� ���� ��� �����(� � ��������� � �� (����� ��� ����� �)�����(� � � ��(� (�!� ������0 ��(��� �� �� �����!��� ���������(� � (�����!���� ���(�!��� ��(� (�!� ������ ������ ���

�����(� � ����!) ������� �(��:�!� �;��� �� ��( �������� ����� ������ �) � �����<� �������� ����� )�� �(��:�!�� ���� � ���� �����!!�!�� �8�+ ����(�!���� #�� ��<��� � �!� � ,-.,5�� ��� �� �� ,--7%0 =�� ����� ����� � �����(� � ��� �� ��� ������ �� � (�!� ��� 0� ��� ����� �� ��>"� � �� �� ������� � �������� �))����

�) �����(� � ��� ���� � ��� (�!� ��� ���� �) ��(� (�!� �(���!!� #��>�� � +���� � ,--,5 =��� �� �� �� ,--3% � � 24���� ����� ��� ������� � ��� (�!� � �� ������ �)��(� (�!� ������ � (�!� �(� ��!!�0 � � (��� ���� ����� ����"�� ���� )�� ���� ��� � �������� ����� �) 24��� ���� � (�!� ��� ���� ��� (����� �� �(��:�!� �;��� �� ��( �������� ����� #?��� �� �� ,--3%0 ���� �� ����@� ����� ����� ��� � ������� ����!� � ��� ����� �) �����(� ���� �����(� � ��������� � ��(� (�!� ������0 � �� �������� �) � ������ �� ��� �!� �� �� ���� �������� ��� �&���� �� �) 2,� 24 ��������� � ��� ���)��� �) ��(� (�!� �(� ��!!� � (�!� ������ #��� �!� �� �� ,--/% �� ���� ���� ��������"���� � "��������� � ���� �� ��)<��� � �� �"�!���� ��� ����� �) �����(� � � ��(� (�!� ������0� ���� ���� �� ����(��� �� �"�!���� ��� �))��� �) �����(� � �

��� (�!� ��� ���� �) ��(� ��!���� (�!� ������ ��� �����(� ����������0 �� ��� �������� �� )�� ���� ��� (�!� ��� �� ����"����) �����(� � �� �����<��!!� (����� �� �����(� � 24 ���������0�����"�� ��� < � �� ���� �� <�(� �� � � "��������� �)� �����!!�!�� �8�+ ����(�!���� � �����*�� � ������ �� ��� 8#+�8% ����"���� � �����(� �������� (�!� ������0

AA44�4A4B;AA;C,10AA D E�������� � 4AAA �� ��� ������� )�� � "��������"� F��(���!��� � �0

++0

�� ������� �����"� ����� , ,---5 ��"��� ������� , ,---5 �������)�� ���!������ 6�"�(��� ,, ,---0����� � ��*����� ��G F�0 ������ ������ ����� �������� ����������

�� ��� �� 7H4. 1�E��(� ������������ ���������� �� �������� ���� 0 >(��!G (���I��0���0�� ���0��0@�8����"����� �G ����2 ��(�!� ���������(�!��� � ���(� �5 �+�E

�� "� ��� �! ������ �� ��� E5 ��8�+ �����!�� 7�1�����!�� �� ��� �(� ����������5 +�8 ������ �� ��� 85 ���+E� ��"���� ��� �������� ��!�(����� ���� ������� 0

Page 2: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

�8�>��8�� 86F �>�2�F�

�������� 2�(� (�!� ������ � ��"� � ��������� �&������ #�+>% ������������ )��( ������ #����� ���� %0 �EF�,17 (���( ��"� �� ��!� � �����!��������� ��� ���� ����� � )��( 9��� +��� E��(���!� ������� #����� ���� %0 2���������� � ��� �������� )��( �����#9��������� ������ 6�%0 ����� <����!��� ������ )����� #�=?=% ����������� )��( � ����� #6�� ����%0 +�����! ,4�(�������� ,7��������#+�8% (�!� � �����(�! ������ )����� (�����(� � )�(���� ���������(�� 7��������!�,�(����!&� �� � #���B% ������( ���(��� ��������� � ���� �������� )��( ���(��8!���� #��0 ����� ��%0 ����8�+ ����� ��� � J72K������ � ���� �������� )��( 8(�����(+���(���� ������� # ����!� ���� %0 E������! ��� ����� � )��(�� �� E��(���! #����� ���� %0F�(����� �������!���� ����2 � �(���� ��������(�� ����

�������� )��( =� ������ #����� ���� %0 2�.- � ?�/-L/ ������������ )��( E�!������(�6�"�������( #E8%0 F�����!�� 7�1�����!���� ��� � (� ���������� #��8�+% � ������� ���� �������� )��(6������ ���*�� #����� ���� %0 ��� ��"���� ��� �������� ��!�(����� ���� ������� #���+E�% ��� �!�����&��7AM�����N ��� � �B,L3 2� � ������� ���� �������� )��( ������ #����� ���� % � F���&�1A ���� ����������� )��( F�� E��(���!0

�����

�������� ���� � 2�(� (�!� ������ ���� (�� ��� � � �EF� ,17����!�(� �� ���� A03O #"�!;"�!% �+> , � ����(�� � � ��(� �=?=���(! 1 �� � ��!� ���(! 1AA � ����������� � ���(! � ,A � +�8���(! #��� �� �� ,--,%0 ��� ��!!� ���� � ������ � �EF� ,17����!�(� �� ���� , � ����(�� � � ��(� �=?= ���(! 1�� ����<�(���� �����(�! ������ )����� ���(! � 1�� � ��!� ���(! #�?�% )���� !���� 7 ��)��� ��� �&����(� �0

������� ����� ����� �� ��� ����� ��!� ������ ���� ���� � ,AA((����� �� � � ���� �) ,04� ,A/ ��!!� ��� ��� � ��!����0 8)��� � ������� � �?� )�� 7 ��� ��!!� ���� ������ ���� "������ �� �� ������ � �)�����(� �0 6�&� ��� ��!!� ���� ���"���� �� ������ �:���� ����� ����������������))��� ��!� � #+��% ����� � � 1AA�! +�� � ��� ��0��� ��!!� ���� ��� ��!���!�:� �� �� � 1AA �! �) ,A6 6��2 � � ������ � )�� 7A(� �� ���( ��(��������0 8������ �� �� 3L1 ( ���(������ � ��(���� ���� � ��� �� ���"� )�� �� ������ (�!� � 0

�� ������ ����� � ��� ���� � ������� �� ��� ����� �� ����(� � ��������� ��� ����"��� �) ��� ��!!� ��� ����"��� �) ������ � ����&�!���� ���(������ ��� � ��� )�!!��� � (����0 ��!� ������ ���� ���� � ,4 ��!!��!���� ����� �� � � ���� �) ,04� ,A1 ��!!� ��� ��!! � ��!����0 8)���� ������� � �?� )�� 7 ��� ��!!� ���� ������ ���� �����(� � ��

� ����� ����� � )�� /A �0 �"�� ��� !��� 7/ � �) �����(� � ��� ��!!� ����� ������ ���� ,0A�E� J72K������ � ���(!0 6�&� LAA�! �) ,AO�����!��������� ��� �� ��� � � 4AO �������! #�������! ��!���� % ��� ���� ��� (���( #LAA�!% � ��� (�&���� ��� (�&� � � "����& )�� 7A � � ��� �� ���)��� �� ,AAAA ��( ���� � ��B�,1A �� ���)��� #��(������ ����� ���� % )�� ,A(� 0 ��"� �� �� (����!����� �) �������� ��� � ��� ��� �)���� � �� � �� ���� � ������ ����� ���� ����������! ��!���� 0 ��� ��������"��� �) ��� < �! ����� ��� � ��� ����(� �� � !�*�� ��� ��!!���� ��� ��� #��E,AAA 8!���%0

���� ��� �� �� ������ ����� F����(� ���� �) ������ ��� ����"��� �) ��� ��!!�&����� ��� ���)��(� �� ������� �� +��!�� �� �� #+��!�� ,-L.5E���������� �� �� ,--.% ���� � �!���� (��<����� 0 8)��� � ������� � �?� )�� 7 (�!� ������ ���� ������ ���� �����(� � �� � ����� ����� �)�� /A �0 E�!!� ���� ��!!���� � ����� ����� ���� +�� � ��� !�:�� A0,� ����( ��������� ��))�� #�2 /0.% �� ��� � � ,O ����� B�,AA08)��� ����(� � � ��� ������ �� �� � � ��� ��!! �&����� ,A�� �) �����&����� ��� � ������ � ,AA�! �) ,A(� ����( ��������� ��))��#�2 /0.% �� ��� � � ,0A�E� J72K������ � ���(! 1�� �������&���� ��!�!� � � � ,O ����� B�,AA )�� ,1(� �� 7L�E0 8)��� �� � -AA �! �)�������! ��!���� ��� ��(�!�� ���� )�� 4A(� �� 3�E � ��� ������ ���)��� �� ,AAAA ��( � � ��B�,1A �� ���)��� )�� ,A(� 0 �������� ��� �� ���� ���!�� �� � A04(! F���&�1A ��!�( �*��!������ � ,AO �����!��������� ��� � ����� ���� A01(! �) ,AO �����!������������ �)��� ����� ��� ��������"��� �) ��� �)'�� �� ��� ����(� � � ���!�*�� ��� ��!!���� ��� ���0

������� � ���� �! "# ��!� ������ ���� ���� � � 441 �(4 '��� �� �� ���� �) ,04� ,A/ ��!!� ��� '��� � ��!����0 8)��� � ������� � �?�)�� 3 ��� ��!!� ���� ���"���� �� ������ �:���� ����� ���� +������� � � 1AA�! �) +�� � ��� ��0 E�!!� ���� ��!!���� ���� ���)������ �� .AA ��( ���� � ��B�,1A �� ���)��� #��(� �����% )��1(� � ��� ��!���!�:� �� �� � 4(! �) ���:�! ����� �0 ��� ��!!!������ ���� ����� ������� � ������� ��"���! ��(�� � ��� � ������ �����( ��(�������� )�� 1(� 0 8)��� �� � A03(! �) ��!���)��( �����(�!�� ���� "�������!� (�&� �� � "���� � ��� �����0 ��� ��� ��(�!������ �� ���)��� �� ,4AAA� $ )�� ,A(� �� 3�E0 =�!!��� � �� ���)������� ��� �*����� ����� ��� ��� �)���� � �� �� �����0 ��� �68 �������������� )��( ��� �*����� ����� �� ��� ����� �) �������� �! � �����!!�� ��� ����!"� � �����0 +�!�#8%P �68 ��� ����<� )��( ��� ����!�68 �� �!��� #�% ��!!�!��� ����(��������� ���� � �!�����&��7AM�����N ���0 ��� �� �� ������ �) ��!�#8%P �68 ��� ����(� ��� (������ � �F4/A0

"�%&�" �� ������ �) ��� <��� ���� �F68 � �����*�� � +E�������� ��� ������ ��� ��� � ��� ���+E� ��� ����� �� � � +E� F68����(�! ���!�� #+���� �>!(�� ���� %0 � � �� �� � ����(� �) ����

1����� )! ��������� �� ����� ��������������� ����������� ������� �� ����������������0 ��!� ������ ���� ��!���� �� �������� � ���� ���� ��' ���('�0 ���� ���� ������� �� #�% �� ���! #)% ,A � � ����!� �, #%,AA � ����2 � #'% , �� �����(� � )�� 7 0*��� )� + 1A�(0

$��0 ,,3 6�0 4 =>�� 8�� 4AAA �>�86�?>6>��� $�8 2���8��6> 24 �>E>+���� ++2

Page 3: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

�68 ��(�!� ��� ��"���� ��� ������ �� �F68 � � 4A�! ������� "�!�(�� ��� ����� �� �) ,� ��"���� ��� ��������� ��))�� #1A(� �E! ,A(�����#����&�(����!%�(� �(���� ��2E! �2 .07% 1(� ��E!4 ,(���&����� ��!����� ������������ 1A �(�! �!��� #�% ���(��� � 1A

� ��� 8�$ ��"���� ��� ���������0 ��� ��(�!�� ���� � ������ �� 34�E )��1A (� )�!!��� �� LA�E )�� ,1 (� � ��� �((�����!� ���!� � ���0��� �� �� � � ���� �� ���(�� �!��� ��!������ ���� ���� � ��

������� �� �� �� ��!��� �� �� #,--L%0 ��� ��*�� �� �) ��� �!��� ��!������ ���(��� �� �(�!�)� ��� 77A �� )���(� � �������� � � �� ��� ����� �)��(� �����(� � 24 ��������� ��� �� )�!!���G �� �� ���(�� 1���E?�?�EE��??E�8�E8E�7� �������� � � �� ��!������ ,LAH,.. � � ���� �� ���(�� 1�� EE��?E�??�E�E?��EE��7� ��(��!�(� ���� �� ��!������ 3.,H3--0 +������� �� �� � � ���� �� ���(���)�� �(�!�<����� � �) ��� 31A �� )���(� � �������� � � �� ��� ?7+F2����� ���� ��� �� � �� ���!0 ��� +E� �(�!�<����� ������� �����(���� �) /�! �) <��� ���� �F68 ������� (�&���� � -3 �! �) (�����(�& �� ��� � � , � +E� ��))�� J1A(� �E! ,A(� �����2E! #�2 .07%K,(� ��E!4 � 4A �(�! �) ���� �����<� �� �� � � ���� �� �����<����(�� )�� ��(� �����(� � 24 ��������� �� ?7+F20 ��� ������� (�&���� ��� ���@���� �� 7A ���!�� �) +E� �(�!�<����� 0 8)��� � � ����!� �������� ���� �� -3�E )�� , (� ��� ���!� ���<!� � �!�� � �������� )�� ,(� �� -3�E � ��!� � )�� ,(� �� 1.�E � �&�� ��� �� L4�E )��,(� 0 8)��� ��� < �! ���!� ��� ��(�������� ��� (�� ��� � �� L4�E )��L(� �� �!!�� )�� ��(�!���� �) �� ������ �) ��� �(�!�<� �������0��� �� (����!����� )��( ���� +E� �(�!�<� ������ ��� �!������������� � ,O ������� ��!0 >��� F68 �� ��� "����!�:� �� ���� � � ����������( ���(��0

�& ����� �,�'� �� ��� ����� ��� ��!!� ���� ����� ����� ���� +��� ��� � �!�*��� #3AA �!% �) �?� �� ��� � � A0,(� ���B � "������ �� �� ������ � �) )�(���� � ��� �!��� � �� ��� ��!!�0 8)���� ������� )�� ,A(� �� 7L�E ,AA �! �) �?� �� ��� � � A0,(� ���B� "������ �� �� ������ � �) �����(� � ���� �� � ��� ��� ��!!����� � ������ )�� 7A(� �� 7L�E0 ������! ,AAO ���� �! #,(! ��� ��!!%��� �� �� ���� ��� � ������� � ��� (�&���� � �!�� � ��� ��������!!� ��� ��� �)���� �� � �� �!��� ���� �!��� � ��� )�� 7A(� � ��� �� ���)��� )�� ,A(� �� ,-AA � $0 ��� ����� ��� � ��� ��� � � ����$�� E� �� ������ #��(� �����% � ������� � � 7AA�! �) 1A(� �����2E! � 40A(� ����!� ���(� � ����������� ���0 ��� �&������ �8�+��� (������ ���� � �8�+ ����� ���0

*��������� �������� �-������ ��.�� 8 �������!��� !�"�! �) �M A0A1 ����� ����� ��� �<�� � ��� ����!�� ���� ���@���� �� F� ���Q� (�!���!���(������ ��������0

�>� ���

���������$����� ����������� ������� �� ���������������� �� ����� ����������� ��!� ��� � ���� ��� ����!� �, #,A �% � ����2 #,AA �% ��� �� ����� <������� �) ��� (�!� ������ �� � ����"��� )��( ���� � � ������ �(��� �) � ����� � � !���� ��!! ���� ��(�������� ��� �� ���! #��(���� 1�� )� ���� 1�� )% %0 �����(�����!���� ��� ��� �) ��� (�!� ������ ������ ���� ������!(�!� ��� � ���� ��(�!���!� �� ����� � ���� � ���"���� ������#2��� �� �� ,--1%0 2����(� � #,��% �!�� ��� �� ��� (�����!����) ��(� (�!� ������ � �� � ����"��� )��( �� ���� �!� �� �������� (�!� ��� � #��(���� 1�� ) ���� 1�� )% %0 �����(�����!���� ��� ��� ���� �����"� �)��� �����&�(���!� ,A � �)�����(� � ���� �����(� � #��� �� ���� %09��� ��� (�����!���� ��� ��� �) ��� �����(� ��������

(�!� ������ ��� ����"��� �) ������ ��� � �����!�(��� � � :�(� )��(�!� � �� ������ � ������ ,01H401�)�! #1�� ��%0 ����� ����!������� ��� �!�"���� �) ������ ��� ����"��� �) ���� ��!! ������� ���

�(��� �) (�!� ������ ��� �� ��� �<�� �!� �))���� �� �����(� ����������� ��� ����� #��� �� ���� %0 ��� (������(� � �)

1����� �! ��������� �������� ��� ������� ������� �� ������������������ �� ����� �����������0 #�% ��!� � �� �� � ��� ����(� � ��(������ � ��� ������� �� �� 3L1 ( �) � (�!� ����� ��!! !����� ��!���� )��3 � ��� ����� �� �� ���� �� �) 1�� �����(� � �� ������� � ���� ������' ���('�0 #)% E�!!� ���� ������ ���� "������ �� �� ������ � �) �����(� �)�� /A �0 ��� ��!!� ���� � ������ ���� ,0A�E� J72K������ � ���(! )�� ���!��� 7/ �0 ������ ��� ����"��� ��� ����(� � �� 724� ��!���� � �� ��!����(��� �� ������� � ���� ���� ��' ���('�0 #% ������ ��� ����"��� �) ������!! �&����� ��� ����(� � �� 724� ��!���� �� ������� � ���� ���� ��'���('�0 >��� "�!�� �) (�!� � �� �� � �� ��� (�� � �>� �) )�������(� ���� � � ������ ��� ����"��� �� ��� (�� � �>� �) ���������(� ���� �0 ���M A0A, ��(���� ���� ��� �� ���! �� F� ���Q� ����0

++3 ���2�F8 /� 0 �2> �� �68� �= �6$>���?8��$> F>��8����?�

Page 4: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

������ ��� ����"��� �� � ����� (���� ��� � ��� (�!� ����� �&������!�� ����� ��� ������!���� �) ������ ��� ����"��� �� �����(� �#1�� �%%0 ������� ������ ��� ����"����� �� ����� ��� (���������� ��(�!�� ����!�� � �!! �) ��� �&����(� �� �� ��� ��!��#1��� + 0%0 ����� ����!�� ���� ���� �����(� � � ��� ��� ��(������ �) ������ ��� ����"��� � ��(� (�!� ������ �� ���� �� �����(�!� ��� � ������� � ���"���� ������� #2� � �� �� ,--35�(����� �� �� ,--1%0 �����"�� ��� � ������ �) (�!� � �� �������� ������ ��� ����"���� ��� �� <�(� �� (������ � ��� �!�"���(�!� � �� �� �� �) �����(� �������� (�!� ������ #1�� � %0 �����

< � �� �(� ������ � �����(� ��� ��� ���(�!���� �) ��(� (�!� ������ � (�!� � �� ������ �� ��� ���� � ���"���� ������������ � ��� (�!� ��� ���� �) �����(� �������� (�!� ������#��(��� �� �� ,--7%0

�� �������� ����������� �����-����� ��������� �������������� ������� �� ��������� �� ���������������� ��� ����� � �) �����(� � � ��!!� ��� (������� ����� ���� �� ��������� 2, 24 � ;�� 27 #8��� � ,--3%0 ������(� � ��� � "�!"�(� � �) ���� �� � "�������� ��� �))��� �)��!����"� � ���� ���� � ��� ����� �) �����(� �0 ��� �84 "�!��� �)

1����� +! ���������� �� ��� ������� �� ����������� �� ��� ����������� ������� �� ���������� �������� ��������� �� ���������0 #�% 2�(� (�!� ������ ���� ���(�!��� �� ,�� �����(� � )�� L4 � � ��� ����� �� �) # % �� ���! #1% (�����(� � #2, � ���� ���% #�% )�(���� � #24 � ���� ���%� #-% ��������(�� #27 � ���� ���%0 >��� � ���� ��� ��� ��� �� ,��0 *��� )� + 1A�(0 #)% 2�(� (�!� ������ ���� ���(�!��� �� , �� �����(� � )��/A � � ��� ����� �� �) ���� � ���� ��� ������� ���"�0 ��� ��!!� ���� � ������ ���� ,0A�E� J72K������ � ���(! )�� ��� !��� 7/ �0 ������ ��� ����"��� �������(� � �� 724� ��!���� � �� ��!���� (��� �� ������� � ���� ���� ��' ���('�0 #% ������ ��� ����"��� �) ��(� (�!� ������ � ��� ���� �� #�% ������� �� #�% �) ,�� �����(� � ��� ����(� � �� ���"� ���� "������ �� �� ������ � �) )�(���� �0 #'% ������ ��� ����"��� �) ���� ��!! �&����� �������(� � �� 724� ��!���� �� ������� � ���� ���� ��' ���('�0 >��� "�!�� �) ������ ��� ����"��� �� ��� (�� � �>� �) ����� �� � � ����(� ���� �0���M A0A, �� ��(���� ���� ��� �� ���! �� F� ���Q� ����0

$��0 ,,3 6�0 4 =>�� 8�� 4AAA �>�86�?>6>��� $�8 2���8��6> 24 �>E>+���� ++4

Page 5: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

����� � ���� ���� � ����� ����� �!���� � ���!��� ���� �� �����(� �0��� ������� �84 "�!��� )�� (�����(� � )�(���� � � ��������(�� #-0A L0. � .07 ��������"�!�5 ����� �� �� ,--1%�(� ������ ���� ���� � ���� ��� �� � ,�� �� �� ������ ����)<��� � �� �!��� ��� ����� �) ,�� �����(� �0 � � (����(�!��)�(���� � � 24 � ���� ��� ��� �<�� �!� ���"� �� ���(�����!���� ��� ��� �� ,�� �����(� � ��� ��� 2, � 27� ���� ���� �(� ������ � ���"� ����"� �))���� #1�� +�%0�����"�� �����(� ��� ��� ������ ��� ����"���� ��������<��!!� ��������� �� )�(���� � ������ )�(���� � �� ��))��� � ��� ����"��� �) ��� �����(� ��� ������ (�!� ������#1�� +% %0 ����� �))���� �� ��� � ���� ���� � �����(� ��� ��������� ��� ����"���� ���� �!�� �����"� �� � ����� (���� )��(������ � ������ ��� ����"��� ���� ��!! �&������ #1�� +%0 8 �����

24 �������� � ���� ��� �� ���� � ����� �))���� ��(�!�� ��)�(���� � � ��������� � ��� �����(� � ����� � (�!� ������#��� �� ���� %0 ����� < � �� ������� ��� � "�!"�(� � �) 24��������� � �����(� � ����� � ��(� (�!� ������0

�� ������� ���������� ����������� �� ����������� ����������� �� �� <�( ��� � "�!"�(� � �) 24 ��������� ��� "�������� ��� �))���� �) �����(� � ��� ���� � ��(� (�!� ������0 8� �&����� � !� �(����� � 24 ��� ��� � ���(�����!���� ��� ��� #1�� 0�% � � ������ ��� ������ ��� ����"����) ��(� (�!� ����� ��!����� � �&������ #1�� 0%*%0 ��������(�!����� ����"����� �) �(����� ���� �����"� �� A0,H,A��0 � �� ����� � (��� ������ �� �� ������ #,AA�� �� (���% �)�(����� ����� ������ ��� ����"��� #��� �� ���� %0 9� �����!���

1����� 0! 5������ �� �������� �� ��� ���������� �� ���������� �������� �� ����� �����������0 #�% 2�(� (�!� ������ ���� ������ ���������(� � ��� ���� )�� L4 �G # % �� ���!5 #1% ��������� � #2, ��� ���%5 #�% �(����� #24 ��� ���%5 � #-% �(���� #27 ��� ���%0 >��� ��� ��� ��� ��� �� ,��0*��� )� + 1A�(0 #)% 2�(� (�!� ������ ���� ������ ���� �����(� � ��� ���� )�� /A �0 ��� ��!!� ���� � ������ ���� ,0A�E� J72K������ � ���(! )�� ��� !���7/ �0 ������ ��� ����"��� ��� ����(� � �� ������� � ���� ���� ��' ���('�0 #% 2�(� (�!� ������ ���� ������ ���� "������ �� �� ������ � #A0,H,A��%�) �(����� � ������ ��� ����"��� ��� (������0 #'% ������ ��� ����"��� �) ���� ��!! �&����� ��� ����(� � �� 724� ��!���� �� ������� � ���� ���� ��'���('�0 >��� "�!�� �) ������ ��� ����"��� �� ��� (�� � �>� �) ����� �� � � ����(� ���� �0 ���M A0A, ��M A0A1 �� ��(���� ���� ��� �� ���! ��F� ���Q� ����0

++. ���2�F8 /� 0 �2> �� �68� �= �6$>���?8��$> F>��8����?�

Page 6: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

���� ��� ������� �) ������ ��� ����"��� ��� �� �� ��� �����))��� �)�(����� "�� ��� �(��:�!� �;��� �� ��( �������� ����� ��������� �� ?��� �� �� #,--3%0

6�������� �� ���� ������� �� ��������� �� �'$��� �� ����(� � ��� �&���� �� �) 24 ��������� �����)��(� ���+E� ���� ��!�#8%P �68 )��( ��(� (�!� ������ #1�� 2%0 ��� �����<� 77A �� �� )�� 24 ������������ ������ �!������ ��� �� ��� �� ������ ������� ��"�������� ��������� �����(� � #��� �� ���� %0 ��� ��:� �) ��� �� ��(�!���!� ����� ���� � ���"���� ������ #�� �� ��!��� �� ��,--L% � ������� �� ��"���! ���������� � :�(�� �� ����� ����&����� !� ��� �) F68 )���(� �� #��� �� ���� %0 ���� ���� �!�� ���� (�68 )�� 24 ��������� ��� �&������ � ��(� (�!� ������0 ����� < � �� �������� ��� �&���� �� �) 24��������� � ��(� (�!� ������0

���������$����� ������������� ��� ��� ���$�����������"�� �8�+ ����(�!���� )�!!��� �� +�8 ����"���� �� ���(�@�� ��� �!� � ������� (����� �� 24 ���������0 �� �!���)� ����&���� �� �) )� ���� �! 24 ��������� �� �&�(� � �����(� ��� ��� �8�+ ����(�!���� 0 9�� ��(� (�!� ������ ���������� ���� A0,H,A�� �����(� � � ��� ����� �� �) A0,(����B )�� 7A (� ��� � �����!!�!�� �8�+ �� �� �� ���� � ������������� � �!� �� �� -�)�! ���� ,A�� ��(���� ���� ����� ���!�0 9������ )�(���� � ��(�!���!� ���"� �� ���� �����(� ��� ��� �8�+ ����(�!���� #1�� 3�% �� �� � �))��� � ����8�+ �� �� �� �) � ������ (�!� ������ #1�� 3%%0 ����� ����!������ ���� )� ���� �! 24 ��������� �&��� � ��� ��!! ���)���� �)��(� (�!� ������ � ���� �����(� � � ���� �8�+

����(�!���� � !� ��� 24 ���������0 E� ����� � ��� ���"�����!�� �� ����(� � ���� �����(� � � ���� (�����!������� ��� � (�!� � �� ������ �) ��(� (�!� ������ ��� � 24����������(����� ������� � �� �!�� ���� �����(� � �� �(�!� ��� 0

1����� 2! 6�������� �� ���� ������� �� ��������� �� �'$���!?�! �!������������� �) ��� ���+E� ������� ������� �) (�!� ������0���+E� ��� ���)��(� ��� � ��� ���(��� � ���!� � �� ���� � ���!� �� ���� ���� ��' ���('�0 +E� ������� �������� � � �� ��(� 24�������� #77A ��% � ?7+F2 #31A ��% ��� ������ ���� ������ � ���� 24� ���� ? ��������"�!�0 ������Q� �B,L3 2� � �� ����� ��� �� � ���� ��� �� <�( ��� (�!���!�� ��:� �) ��� �(�!�<����� ������0

1����� 3! �� � ������������ �� ����� ����������� ��� ��

���������! #�% 2�(� (�!� ������ � ,4 ��!! �!���� ���� ���(�!��� ��"������ �� �� ������ � �) �����(� � )�� 7A(� � 1AA�! �?� (���(�� ��� � � A0,(� ���B0 ������! ,AAO ���� �! #,(! ��� ��!!% ����� �� ���� ��� ������� � ��� ��!����� ���� ���"����0 �8�+ �� �� ������ ����(� � �� ������� � ���� ���� ��' ���('�! #)% 2�(� (�!� ������ ���� � ������ ���� "������ �� �� ������ � �) )�(���� � )��,A(� ��)��� ���(�!���� �� , �� �����(� �0 8)��� ���(�!���� )�� 7A (� ������! ,AAO ���� �! #,(! ��� ��!!% ��� ��0 �8�+ �� �� �� � ������� �� #�% �� ����� �� #�% �) ,�� �����(� � ���� ����(� � �� ���"�0>��� "�!�� �) �8�+ �� ��� (�� � �>� �) ����� ����(� ���� �0���M A0A, ��M A0A1 �� ��(���� ���� ��� �� ���! �� F� ���Q� ����0

$��0 ,,3 6�0 4 =>�� 8�� 4AAA �>�86�?>6>��� $�8 2���8��6> 24 �>E>+���� ++/

Page 7: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

9� �!�� �&�(� � ��� � "�!"�(� � �) ��� �8�+�+�8 ������� �����(� ��� ��� (�!� ��� ����0 8 +�8 � ������� 2�.-��(�!���!� ��������� ��� ���(�!����� �))���� �) �����(� � � ���(�����!��� � ������ ��� ����"��� �) ��(� (�!� ������ ���� �� ������ � ������� ��&����� ������� � �����<� �� "� ��� �!������ �� ��� E #�+�E% � ������� ?�/-L/ �� � �))���� � �����(� ��� ��� ������ ��� ����"���� #1�� 4�! %0 8� �� �����"�8+�, ����"���� �� +�8 � �����<� � ������� �) ���� �� ?�/-L/#��� �� ���� % �� �� �!�� ���� +�8������ ��"� �+�E ���������� � ��� (�!� ������ � �� ����� �� ���� � � ���� �+�E� ������� �� ?�/-L/ � �� �))��� ��� ���(�!���� �� �����(� �0���� �� �� �!�� ���� 2�.- ��������� (�!� ��� ���� ��� ������� �) +�8 ��� �� �+�E ������� ��� ����� � ��� � !���������"��� � +�E ����"��� �� ����� �� �� ������ � #��� �� ���� %0� �� ����� �� ��� ���"� ��8�+ � �����<� +�8 ����"����

� ��� (�����!���� ��� ��� � ������ ��� ����"���� �� ��� ��(��&�� � �� �����(� � #1�� .� %%0 ����� < � �� ���� ���� ����"���� �) ��� �8�+�+�8 ������ �� �������� � ��)<��� � �� �"���(�!� ��� ���� �� �����(� �0 ���� �������� ����� < � ��� ����� ���� �����(� � � ���� (�����!���� ��� ��� � (�!� � �� ������ �) ��(� (�!� ������ �� +�8 ����"���� ��� 24����������(����� �8�+ ����(�!���� 0

F��E ����6

���� � �����"���� � ���� ��� ��� � ��� ��!������ ��� )��*�� �!�����(�� �� �� � '�((����� ������� � � �(��� �) � '�((�����)������ ��"� ��� ������� �� (�!� ��� �0 ��� (���� ��( �)��������(� ����� ����(�� �� �� � '�((���� ����"�� �����(�� � �������0 9� �(� ������ ���� ���� �����(� � ����*������ � '�((����� )����� ��� � (�!� ��� �� �))��� � ��(� ��!���� (�!� ������ ��� 24 ���������0 � ��(� ��� �����(� � �� (���!� ������ � ��!���� �� ��(�! (��� ��!!� � ���� �����(� � ��!���� )��( (��� ��!!� !��� �� ��� �"�!��(� � �)� '�((����� ������� �0 ���� �� �����!��� ���� �����(� � (���)�� ����������� � ��� ��������(� ����� �) ��(� ��� 0 =���&�(�!� ��������(� ����� �)��� $ ��������� �� � ������!����������� ��(�� � � ����� � '�((���� � ���(� ����� 0 8 �!�"���� �) �����(� � � $��������� ��� ��� ������� ��?�!������ �� �� #,-.,%0 � ����� ��������(� ����� �� � )��*�� ������(� �) ��"���! ������� ���� ���!�)������ � � <!������ �)��� (��� ��!!� � ��� ��� �0�0 � ��� �� ��$������ � ��������(������0 ���� �� �� ���� �� � )�� ���� �����(� � !�"�!� ��� ���� ����� � <!����� � ���� �) (��� ��!!�0 ��� < � �� (�� ��� � �� !���� � �� ����(���!���� �������� �) 24 � ���� ���� ���� (���� �� ���(�� )�� ����� ��������(� ����� �0

1����� 4! 7���������� �� ��������� ������ �� �$./! #�% ������!���� ��� ��� �) ��(� (�!� ������ ���� �����"� �)��� �����(� � ���� ,�������(� � )�� 43 � �������� ���� # % �� ���! #1% ,�� 2�.-0 *��� )� G 1A �(0 #)% � #% 2�(� (�!� ������ ���� ��!���� � ��� ���� �� #�% �� ����� ��#�% �) ,�� �����(� � )�� /A � ���� "������ �� �� ������ � �) 2�.- �� ?�/-L/0 ��� ��!!� ���� � ������ ���� ,0A�E� J72K������ � ���(! )�� ��� !��� 7/ �0������ ��� ����"��� ��� ����(� � �� ������� � �������!� � ������0 >��� "�!�� �) ������ ��� ����"��� �� ��� (�� � �>� �) ����� ����(� ���� �0���M A0A, ��M A0A1 �� ��(���� ���� ��� �� ���! �� F� ���Q� ����0

+0( ���2�F8 /� 0 �2> �� �68� �= �6$>���?8��$> F>��8����?�

Page 8: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

��� ����!�� ������ � ��� � "�!"�(� � �) 24 ��������� � ������� ���� � ���"���� ������ �� ��(��� �� �� #,--7%0 ���� ����������� ��(���� � � 24 � ���� ��� ���! �� ���"� � ��� � ����� �) ������ ��� ����"���� �� �����(� �0 9� �����!��� ���� ���������� �� �� �� �� ��� (�!� ��� �� ����"��� �) ��(���� �������� �� ?��� �� �� #,--3%0 8����� � �� ����� ������ ��(� 24� ���� ���� ��"� � (�!� ��� �� ����� � ��(� (�!� �(� ��!!�� (�!� ������ �� (� �� �� ������ �0 � )��� �� �!�� �����"� �!�(��� �!�"���� �) ������ ��� ����"��� �� ��(���� � �� ��� �� ������ (��� ������ ��� 7AA�� #��� �� ���� %0 ?����� �� ����"�� �!�� ���(��� ���� ����� 24 � ���� ��� �))���� ���� � �����<� �))���� (����� �� �� 24 ��������� ��� �� �(��:��!� �;��� �� ��( �������� �����0 ���� �� �� ����� ���� ��� �����))���� �) ����� 24 � ���� ���� (���� ���"� � ���( )��( < � � ���������� ��� �!� � ������� �) �����(� ��� ��� (�!� ��� ����0 ������������ �� �����!��� ���� ��(���� � � ��� ���"���� �������(���� ��"� � ��� (�!� ��� ���� ��� ��� �(��:�!� �;��� ��� ��( �������� ����� ������ �� �!���� ��� ���(�!���� �) �����(� ���� 24 ���������0 ���� ����� ����!�� ������� ��� �� )�� (����������� �&�(� ���� � �) ��� ������ � ������ �) 24 � ���� ������� �� ��(�� �����(� ����!��� ���(� ����� �"� �) ������(�!���� �) �����(� � �� (����� � !� �� 24 ���������09� ��"� �(� ������ ���� ���� �����(� � ��� � (�!� ��� ��

�))��� � ��!���� ��(� (�!� ������0 8� ��� ��� � � ��!���� �)�����(� � �� ��� ��� �� �!���� !�� �� ���(� ����� � ��� ��� ����"�� ����� (��� �� � ����� (���� ��( �� ������� ��� (�!� � �� ������ �� ���0 9� !���� � �� �� ������ � ������!� (���� ��( ������!��� ��� � ������� �) ���(� ����� 0 � ���� ���� �� ������ ����!! �) ��� �&����(� �� � ��� ����� �� �) �=?= � (����� �� ��� �� (�!� ��� �� ������ � )�� (�!� ������ ������� �� �� �� ���!!�� ������ ���� �=?= �� � � �) ��� ���� ���! )������ ���� (�� ��� ���!���� (�!� ������0 8� ������� ���� ����� �8�+�����(�!��� ���� �� �� ���! �� �����"� �����(� ��� ��� (�!� ��� ���� � ��� ���� �� �) �=?= #����� �� �� ,--1% #��� �� ���� %09� �����!��� ���� ��� ����!� � �) +�8 ����"���� ���� �=?=

����� �� �������� )�� (�!� ����� ���(�!���� � ���� �����(��!����� !��� �=?= (���� ����!��� ��� � ����� �) �� �����������(� ����� �� �8�+��!�"��� � ������ ��� ���� �� ������(� � � ����20 ���� ���������� ������ � ��� ����!�����(���� ��( �� � �����(�!���� �� ����!� ��!"� ��� �� '��� ������ ��� )��*�� �� �) ���(� ����� � �����(� � ��!���� � ��� ��� 0����� �� �� ������� ���� �����(� � �� ����2 �� � (�!� ��� ���))��� � � ��(� )������ ��!���� #����� �� �� ,--A%0 9� ����������� ����� ����!�� ���� �� �� ��� ���� �� �) �=?= � ��� ��!����(��� � ��!���� ��� ����"��0�� ��(�� � � �!��� ������� �=?= ����� ��� � ��� �! ������

)�� �������� �� ���!� ��!���� � ��� ��� � �� ������!������ ���� �5 �����)��� ��� �&���� �� �) �=?= � ���(� �� ��� ��!!��"� �� �� �!���<� �� ������ ���� ����������0 �����"�� ����� ��"���� ��(� ������� ��� � ���� !����! �(��� �� ��!!� ��� ��*���� ���"��� �=?= �������� #FQ8(��� ,--A5 �� � FQ8(��� ,--1%08� � ����!� (��� � "��������� � ��!! �� ��� �� ����(� � �)�=?= �� � ���� �����(�!���� �� ���0 9� �� �� � � ��� ����� �� �)� ����� �����(�!���� �� ���� ��(�0 �� �����!��� ��� (�!� ��� �� ��!��) �����(� � �� ����2 �� ��� �� ��!! <��� �� �������� �� �"�!������� ����� �� �) �����(�!����� ���� �� �=?= � ���(� �� ��� 0������ ��� �� � �������� �� ����(� � ��� � "�!"�(� � �)�����(�!����� � ���(� ����� 0

1����� .! ������� �� ������������� �� ��� �! #�% ������!������� ��� �) ��(� (�!� ������ ���� �����"� �)��� �����(� � ���� # %�� ���! � #1% A0,(� ��8�+0 *��� )� + 1A�(0 #)% 2�(� (�!� ���������� ���(�!��� �� "������ �� �� ������ � �) ��8�+ )�� /A �0 ��� ��!!����� � ������ ���� ,0A�E� J72K������ � ���(! )�� ��� !��� 7/ �0������ ��� ����"��� ��� ����(� � �� ������� � ���� ���� ��' ���('�0>��� "�!�� �) ������ ��� ����"��� �� ��� (�� � �>� �) ���������(� ���� 0 ���M A0A, ��M A0A1 �� ��(���� ���� ��� �� ���! ��F� ���Q� ����0

$��0 ,,3 6�0 4 =>�� 8�� 4AAA �>�86�?>6>��� $�8 2���8��6> 24 �>E>+���� +0)

Page 9: Histamine Induces Melanogenesis and Morphologic Changes by Protein Kinase A Activation via H2 Receptors in Human Normal Melanocytes

�(� ���( � ���' ���� � �(��� ��2 *��� � 3���$�(� � (� ��(���� ���������2

4� ��� ��� � $ �����'� � � 2 *(��$ *���� ��' � 2 ��� � *����� � �(��

���' ��' (������ �'���2

�>=>�>6E>�

8��� � ���G +���(���!�����! ���������� �) �����(� � �������� ��������0 ���� �� 1��3AG4L7H4L- ,--3

��� 8 8!�(���� + ����)�� ? ������ 9E 2�!:(� 2G �!��(��� � �� ������ ������ ��� ����"��� �) ��(� (�!�� � � (�!� �(� ��!!� � ��!����0 &(� ���"�� ����������� ,.G,AL1H,A-, ,-./

E���������� 8� =� ����� � ��(��� � ��������� �G >))��� �) ������ � (�!� ��� �� ������ � � ��(� (�!� ������0 &�$���� ���� "���� ( ,,G4A/H4,4,--.

FQ8(��� +8G ���� �) =?= ��!���� �� ��� � �� ��� 0 ���� ���������� "������-G44LH47. ,--A

F� �� E9G 6�� ���!�� )�� (�!���!� ��(������ � ���� � �� ���!0 1���� �� 4AG3.4H3-, ,-/3

=��� �� ?8 ������ �� +���� � +?G F�(����� � �!����� � ����� ������ ��� "�� ����!���� ������� ������ � ��� � �!� �) ��� �����(� � 24 ��������01�(�� 1��(�� "�� ���� 4A,G/.LH/-7 ,--3

?�!������ �8 ����� 68 ���)) �� ���( �EG ��� ��(� �� ��� ������� G�����!���� � ������(���! ������0 5 � �' -� ���� 1G3,,H344 ,-.,

?��� ?� R�� � B�� +���� � +?G 8!��� ���� �) ������ ��� ����"��� � ��(� (�!� ������ � (�!� �(� ��!!� �� �����(� � 24 � 27 !��� �0 �������"��� ( 3G71-H7/3 ,--3

2��� � ���� � ?�!������ 8G > ����!� �, �) ������ ����� ����� �� � (������ �)(�!� ����� � ������0 5 ������ -� ����$� ,A1GL33HL3. ,--1

2� � ? �� E �� � � ���� 8�G 8E�2 ���(�!���� (�!� ��� ���� � ��!������(� (�!� ������0 5 /�' ��� ,3AG�,H�7 ,--3

�(����� ? ��������� � ��� �G > ����!� �, �� � �� (�!� ��� G ����� ����&������� �) ��� �� � � ��� ������ ��� �� � � $���&���� ��(� �����(��0 5 ������ -� ����$� ,A1G74H7L ,--1

����� � ����� � >"����� �8 =�!!�� ��G 2��(� �! ���(�!���� �) ������ �������"��� � ��(� )������ ���� ��!�����0 �� 6�� ������� -�� 1��$� 4/G113H1/A ,--A

�� �� ��!��� � ������� 8 E� ���� � �� ��G ��!�� �) � ����!��( � ������&�� � �����(� ��� ��� �������� � ��(� ��� ��! �������� � ������� �) (�68 � ��� � 2,� � 24���������� �� ���+E�0 1 5 &(� ���$�,4,G3,H3. ,--L

�� � � ?�� �: � F�!$�!!� � ���(��� � ���� 2 ��(�� �G � �������� �) ��!� �����!!�!�� ��� �!� � �������� ����"��� �� ��� (�!� ������ �7 ��������0 5 1���(����� � 4/-G,7,/4H,7,/. ,--3

�� +�� FQ8(��� +8G ����!���� �) ����� <����!��� ������ )����� #�=?=% �� � � ������ �&������� )�!!��� � ��� ��!���� )��( ���!����!!� � @��� � ����!��!��!!�0 5 ������� 1�(����� � 1.G74.H737 ,--1

�� ��� �� �"��"�� � �� �� � 6��(���� �� ������"����!�( $G $����!�:���� �)(�!���!� �(��:�!��;��� ���(��������"� �����0 5 1�� �(����� � 4/.G,/A3LH,/A1, ,--7

����� � �(�� � ��((��(� 2G ��!���!�� ����(���!�����! ������� �) �����(� ����������0 &(� ��� �(� //G3,7H3/7 ,--1

��>�� �� +���� � +?G ����!���� �) ������ ��� �&������� � ����"��� � ��(� (�!� �(� ��!!� "�� �����(� � ���������0 5 ������ -� ����$� -LG./.H.L7 ,--,

�� ��<��� FE �!� � >�G ����!���� �) ��!! �"���� � �) ������ ��� � �,/(�!� �(� ��!!� �� �(��:�!�G ������!� ��!� )�� ��� �� ���� �) (�����!��� �� �����!���� � (�((�!�� ��!!�0 5 ������� &(����$� ,A/G4.7H4-, ,-.,

����!!� �? 6����� F8G � '�� �� �) � '�((����� (������� � ������ �� � ��(� (�!� ����� )� ���� 0 5 ������ -� ����$� ,AAG,-,�H,-1� ,--7

+��!�� �G ��!� �(� � ��!����0 ���( /�7��� 1.G1/3H1LA ,-L.+�� ����� �G ��!� ������ (�!� ��� ���� � � '�((���� 0 ��� 5 -� ����$�

41G/43H/4. ,-./��� �!� �� 8����� � ������ F�G �� ��� �))��� �) �����(� � � �����(� � 2, �

24 �������� � ���� ���� � ��!!�!�� ���!�)������ �) ��(� (�!�� � � (�!� �(���!! !� ��0 ������� "�� /G-1H-- ,--/

����� $� ���� � >> �(�!��� F 8��!���!�� R8G �� �����( ���!�)������ �)��(� (�!� ������ �� �������� �� ��� ������!���� (����� � ��(�!� ������ � ����!� �, � ����� <����!��� ������ )�����0 /�� ���� "���� ( 4,LG317H31- ,--1

��(��� � ���� � ����(� 2G ���(�!����� �))��� �) �����(� � � ��(�! ��(� (�!� ������ �� ��� 0 �(�� 5 /��� ������ ��' ,11G4A-H4,A ,-..

��(��� � ���� � ����(� 2G ��!� ���������(�!��� � ���������� �) ������� ����� (�����!����G ������!� ��!� � ����� '�((����� ���(� ����� 0 &�$���� ����"���� ( 1G71LH7/, ,--4

��(��� � ���� � ����(� 2G 2����(� � ���(�!���� ��(�! ��(� (�!� ������ ����� G � � �) ��� ������!� � ����� �) ��������(� ����� � ��������� ���(� ����05 -� ���� *���� /G,3/H,13 ,--7

9������� �� ���!�� F� >"� �� �� 2��� �� 9��!!�� F>G F�(� ������� �)�����(� � 24 ��������� � ��(� (�!� �(� ��!!�0 1�(�� 1��(�� "�� ����,1,G1,.H147 ,-..

��� � 2������ � �(����� ?G >))���� �) � ����!� � � ��� �! ��� ������ � ���!�)������ � ��(� (�!� ������0 5 1�� �(����� � 4//G,.714H,.71L ,--,

+0� ���2�F8 /� 0 �2> �� �68� �= �6$>���?8��$> F>��8����?�