IDENTIFIKASI SPESIES RAGI MALASSEZIA YANG DIISOLASI DARI

PASIEN DENGAN PITYRIASIS VERSICOLOR

Vanessa Petry, Fernanda Tanhausen, Luciana Weiss, Thais Milan, Adelina

Mezzari, dan Magda Blessmann Weber

Abstrak : Pityriasis versicolor ( PV ) adalah penyakit yang dapat ditemukan di seluruh dunia. Ada 12 jenis spesies ragi Malassezia. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan spesies Malassezia yang sering ditemukan pada pasien dengan pityriasis versicolor. Sampel dikumpulkan dari gesekan lesi 87 pasien dengan kecurigaan klinis pityriasis versicolor . Sampel kemudian diperiksa secara mikroskopis dan kultur untuk mengidentifikasi spesies . Spesies yang ditemukan adalah : Malassezia simbolis podialis ( 30 % ), Malassezia furfur ( 25,7 % ), Malassezia globosa ( 22,7 % ), Malassezia restricta ( 12,1 % ), Malassezia obtusa ( 7,6 % ) dan Malassezia slooffiae ( 1,5 % ).

Kata kunci : Dermatologi ; Dermatomycoses ; jamur ; Mikosis.

Pityriasis versicolor (PV) adalah penyakit yang tersebar di

seluruh dunia. Diagnosis PV didasarkan pada temuan klinis dan

dikonfirmasi dengan mikroskop langsung. Kultur dan analisis

molekuler dari Malassezia mikroflora dapat digunakan untuk

mengidentifikasi perbedaan spesies Malassezia (1996, Guillot dkk.)

Metode untuk mengidentifikasi spesies Malassezia berdasarkan

kultur dan reaksi biokimia. Saat ini, telah ditemukan dua belas spesies

Malassezia. Namun, tidak semua secara klinis relevan pada manusia.

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan spesies Malassezia

yang paling lazim dalam populasi pasien dengan pityriasis versicolor

yang menerima perawatan di klinik rawat jalan dermatologi dari

Federal University of Health Sciences dari Porto Alegre (UFCSPA).

Studi cross-sectional dilakukan dimana pasien dengan PV yang

terlihat di klinik rawat dermatologi rawat jalan selama satu tahun

diundang untuk berpartisipasi. Pasien di bawah 16 tahun, mereka yang

telah menggunakan obat antijamur sistemik atau topikal pada bulan

sebelumnya dan pasien diketahui memiliki penyakit imunosupresif

yang dikeluarkan dari penelitian. Studi ini disetujui oleh Dewan Intern

Ulasan UFCSPA bawah surat persetujuan No. 383/07. Analisis data

dilakukan dengan menggunakan software SigmaStat. Uji T-test dan uji

chi-square digunakan untuk variabel kontinyu dan kategoris, masing-

masing. Mann-Whitney / Wilcoxon Dua-Sample Test (uji Kruskal-

Wallis untuk dua kelompok) digunakan untuk membandingkan variabel

kuantitatif antara dua kelompok independen.

Diagnosis pityriasis versicolor dikonfirmasikan oleh pengamatan

klinis dan mikroskop langsung. Untuk isolasi utama dari jamur dalam

bahan dikumpulkan, Agar Sabouraud dan Dixon digunakan, dengan

penambahan minyak zaitun dalam kedua kasus. Setelah penyemaian,

bahan diinkubasi pada 32-35’C selama 3-6 hari. Koloni gundul dari

warna krem-kuning dan permukaan berkerut diamati, kebalikan dari

koloni juga menjadi krem-kuning dalam warna. Setelah isolasi primer,

identifikasi akhir dari spesies dibuat menggunakan metodologi yang

digariskan oleh Guillot dkk. (1996), yang didasarkan pada karakteristik

ic phenotype spesies: kapasitas untuk tumbuh dalam ketiadaan lipid,

produksi enzim katalase, deskripsi micromorphology dan kemampuan

untuk mengasimilasi konsentrasi yang berbeda dari Tween (20, 40 , 60

dan 80) di Sabouraud agar yang mengandung 0,05% kloramfenikol dan

0,05% dari cyclohex- imide. Uji The Tween asimilasi dilakukan

menggunakan suspensi koloni diinokulasi ke dalam piring yang berisi

Agar Sabouraud dilengkapi dengan 0,05% kloramfenikol dan 0,05%

cycloheximide. Setiap polisorbat (Tween 20, 40, 60 dan 80)

ditambahkan untuk mengisi sumur berjarak sama dibuat di agar

diinokulasi. Piring kemudian diinkubasi pada 32’C selama 5-7 hari.

Setelah periode ini, pertumbuhan sekitar setiap cating asimilasi

dengan baik, dari individu substrat dan hasil positif, diamati. Hasil

positif menunjukan adanya perbedaan antar spesies. Sampel diambil

dari 87 pasien, 51 (58,6%) perempuan dan 36 (41,4%) laki-laki. Usia

rata-rata pasien adalah 31 ± 15 tahun. Sehubungan dengan situs dari

lesi, 90% dari pasien memiliki lesi pada lebih dari satu bagian tubuh,

yang paling umum adalah punggung bawah (53 pasien) dan punggung

atas (36 pasien). Enam puluh tujuh pasien (77%) di antaranya kondisi

secara klinis diduga positif pada pemeriksaan mikologi langsung,

sedangkan 66 (75%) hasil kultur mikologi positif. Dari hasil kultur

menunjukan, 30% terdiri dari Malassezia sympodialis, 25,7%

Malassezia furfur, 22,7% Malassezia globosa, 12,1% Malassezia

restricta, 7,6% Malassezia obtusa dan 1,5% Malassezia slooffiae.

Gambar 1 menunjukkan lokasi lesi pada pasien dalam kaitannya

dengan spesies Malassezia terisolasi yang dikultur. Perbedaan antara

durasi lesi dan kekambuhan penyakit, menurut spesies Malassezia,

dapat dilihat pada Tabel 1. Prevalensi pityriasis versicolor lebih besar

pada pasien wanita dan pada pasien muda (usia rata-rata 31 tahun).

Data ini sesuai dengan laporan dalam literatur yang menekankan

frekuensi tertinggi dari infeksi ini pada orang muda karena karakteristik

lipofilik dari jenis jamur. 2 Spesies yang paling umum dari Malassezia

pada populasi sample ini adalah M. sympodialis diikuti oleh M. furfur

dan M. globosa. Temuan ini berbeda dari yang dilaporkan dalam studi

yang dilakukan di negara bagian Goiás di Brasil pada tahun 2006 di

mana prevalensi M. furfur dari 77,8% ditemukan. Namun, mereka

berada dalam perjanjian dengan temuan Framil et al., Yang juga

melaporkan M. sympodialis sebagai spesies yang paling lazim.

Relaps sering dilaporkan oleh pasien dan kasus kekambuhan

ditemukan untuk hampir semua spesies terisolasi; Namun, jumlah

kambuh tidak berbeda secara signifikan antara spesies cendawan.

Framil dkk. melaporkan dominasi podialis M. Lokasi yang paling

umum dari infeksi adalah punggung, dada dan perut dalam kasus

sebagian besar spesies dan temuan ini sesuai dengan hasil penelitian

yang dipublikasikan oleh Miranda et al. (2006), yang juga melaporkan

kembali bahwa dada sebagai lokasi yang paling umum dari lesi.

Tidak ada perbedaan signifikan yang ditemukan antara spesies

sebagai fungsi dari jenis kelamin, usia atau durasi lesi. Untuk yang

terbaik dari pengetahuan kita, tidak ada laporan dalam literatur di mana

perbedaan statistik signifikan ditemukan antara data klinis dan

demografi dan spesies Malassezia. Penelitian lebih lanjut dengan

sampel yang lebih besar ukuran mungkin diperlukan untuk memperjelas

masalah ini.

REFERENCES

1. Esteves JA, Cabrita JD, Nobre AS, Rabello FE. Pitiríase versicolor. In: Esteves JA, Cabrita JD, Nobre AS, Rabello FE. Micologia médica. Lisboa: Fundação Calouste- Gulbenkian; 1974. p.215-21.

2. Borelli D, Jacobs PH, Nall L. Tinea versicolor: epidemiologic, clinical and therapeutics aspects. J Am Acad Dermatol. 1991;25:300-5.

3. Gupta AK, Kohli Y, Faergemann J, Summerbell RC. Epidemiology of Malassezia yeasts associated with pitiryasis versicolor in Ontario, Canada. Med Mycol. 2001;39:199-206.

4. Gupta AK, Boekhout T, Theelen B, Summerbell R, Batra R. Identification and Typing of Malassezia Species by Amplified Fragment Length Polymorphism and Sequence Analyses of the Internal Transcribed Spacer and Large-Subunit Regions of Ribosomal DNA. J Clin Microbiol. 2004;42:4253-60.

5. Guillot J, Guého E, Lesourd M, Midgley G, Chévrier G, Dupont B . Identification of Malassezia species. A practical approach. J Mycol Med. 1996;6:103-10.

6. Kaneko T, Makimura K, Abe M, Shiota R, Nakamura Y, Kano R, et al. Revised Culture-based system for identification of Malassezia species. J Clin Microbiol. 2007;45:3737-42.

7. Framil VMS, Melhem MSC, Szeszs MW, Corneta EC, Zaitz C. Pitiríase versicolor: isolamento e identificação das principais espécies de Malassezia. An Bras Dermatol. 2010;85:111-4.

8. Framil VMS, Melhem M, Zaitz C. Pitiríase versicolor: estudo conceitual, etiológico, imunológico e perfil de sensibilidade in vitro a derivados azólicos [Tese]. São Paulo (SP): Faculdade de Ciências Medicas da Santa Casa de São Paulo; 2006.

9. Miranda KC, Araújo CR, Soares AJ, Lemos JA, Souza LKH, Silva MRR. Identificação de espécies de Malassezia em pacientes com pitiríase versicolor em Goiânia-GO. Rev da Soc Bras de Med Tropical. 2006;39:582-3.