immunph ä notypisierung h ä matologischer neoplasien: ergebnisse des ringversuchs 2002 r. schabath...
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Immunphänotypisierung hämatologischer Neoplasien:
Ergebnisse des Ringversuchs 2002
R. SchabathRobert-Rössle-Klinik
Medizinische Klinik m. S. Hämatologie, Onkologie u.Tumorimmunologie
INSTAND e.V.
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Ergebnisse des Ringversuchs Immunphänotypisierungin Zusammenarbeit mit INSTAND e.V. Düsseldorf
Zielsetzung des Ringversuchs...
...war die Evaluation von Laboren, die die immunologische Diagnostik Hämatologischer Neoplasien (Leukämien, Non-Hodgkin-Lymphome etc.) anbieten.
Viele dieser Erkrankungen sind nur immunphänotypisch eindeutig zu charakterisieren, die Diagnose ist für den Patienten mit einer dezidierten Therapie und Prognose verbunden.
Somit erlangt die Qualitätssicherung im Rahmen von Ringversuchen in diesem Bereich enorme Bedeutung und ist auch eine der Kernanliegen innerhalb des Teilprojekt IV – Immunphänotypisierung - des Kompetenznetzes „Akute und Chronische Leukämien“.
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Methodik und im Vorfeld aufgetretene Probleme:
- Es wurden zwei Ausstrichpräparate und die dazugehörigen Ergebnisse der durchflusszytometrischen Messung als sogenannte „Listmode-Daten“ auf CD-Rom and die Labore versand.
- Auf Grund der Größe der Listmodefiles war eine Aussendung über Disketten nicht mehr möglich. Die CD´s waren jedoch nicht auf Anhieb bei allen Teilnehmern lesbar
- Einige Teilnehmer erkannten nicht, dass es sich um „dreifach“-Färbungen handelt und werteten den Versuch wie eine „zweifach“-Färbung aus
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Das Gesamtergebnis
Gemeldete Teilnehmer (Anzahl der Proben-Aussendungen) = 86 (100%)Ausgefüllte rückgesandte Bearbeitungsbögen = 81 (94%) Zertifikat erhalten = 77 (95%)
Es gab 42 Punkte aus 5 Aufgaben zuzüglich 4 Extrapunkten (aus Aufgabe 5). Die Bestehensgrenze lag bei 60% entsprechend 25 Punkten.
Die Bewertung
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Bitte stellen Sie an Hand des Ausstrichpräparats eine Diagnose !
(2x5 Punkte)
Frage 1
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Morphologie Probe I
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Morphologie Probe I
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Morphologie Probe I
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Bitte stellen Sie an Hand des Ausstrichpräparats eine Diagnose !
Frage 1 / Probe 1
AML
AML M0/M1
AML M2
AML M2/M3
AML M2/M3v
AML M3
AML M3/M5
AML M3v
AML M4
AML M4/M5
Häufigkeit
403020100
3
37
20
3
11
“Musterlösung“ AML M3v
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Morphologie Probe II
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Morphologie Probe II
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Morphologie Probe II
ALLALL FAB L1, DD: PLL
ALL FAB L3ALL, Blastenschub bei CLL
B-CLL, B-PLLB-NHL
B-NHL, B-PLLB-NHL, CLL oder MZLB-NHL, DD: PLL, MZL
B-PLLB-PLL, DD: ALL
B-PLL, DD: blastäres MZLB-Zell-Leukämie
CLLCLL mit ProlymphozytenCLL, atypische DD MZL
ImmunozytomLP-IC
Mantelzell-LymphomPlasmazell-Leukämie
Plasmazell-Leukämie / M. WaldenströmSLVL (Milzlymphom)
Häufigkeit
403020100
6
33
19
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Bitte stellen Sie an Hand des Ausstrichpräparats eine Diagnose !
Frage 1 / Probe 2
“Musterlösung“ B-PLL
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Bitte stellen Sie an Hand des Immunphänotyps eine Diagnose !
(2x10 Punkte)
Frage 2
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Immunphänotyp Probe I
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Immunphänotyp Probe I – das verwendete Panel(entspricht dem „core Panel“ des Kompetenznetzes „Akute und Chronische Leukämie“, Teilprojekts IV, Immunphänotypisierung)
cy cy-NC cy-NC cy-NCcy TdT cyCD79 cyCD3cy MPO CD34 CD45cy MPO LF 15s NC NC NCs CD10 CD19 CD13s CD7 HLA-DR CD33s kappa lambda CD19s CD2 CD1 CD3s CD34 "7.1" CD117s CD65 CD56 CD45s CD61 CD14 CD45s 36 GlyA 13s 64 AC133 13
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Immunphänotyp Probe I
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Frage 1 / Probe 1
AML
AML M0
AML M0, DD: M1
AML M1
AML M1/M3
AML M2
AML M2 mit t(8;21)
AML M2/M3
AML M3
AML M3, DD: CMML
AML M3/M3v
AML M3v
AML M3v, DD: AML M0
AML M4
Hybridleukämie AML M
MDS
Häufigkeit
403020100
11
37
15
“Musterlösung“ AML M3
Bitte stellen Sie an Hand des Immunphänotyps eine Diagnose !
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Immunphänotyp Probe II – das verwendete PanelDieses Panel nur für diesen Ringversuch entworfen und soll durchgängiges CD19-Gating ermöglichen
cy NC NC NCcy HLA-DR CD45 CD19cy CD20 CD56 CD19cy CD22 CD10 CD19s CD23 CD38 CD19s FMC7 CD11c CD19s CD25 CD3 CD19s CD103 CD19 CD19s CD43 CD20 CD19s CD79b CD138 CD19s kappa lambda CD19s CD2 CD1a CD3s CD4 CD8 CD3s TZR g/d TZR a/b CD3
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Immunphänotyp Probe II
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Immunphänotyp Probe II
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Immunphänotyp Probe II
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Bitte stellen Sie an Hand des Immunphänotyps eine Diagnose !
Frage 1 / Probe 2
Mantelzell-Lymphom
B-NHL
Häufigkeit
403020100
3
8
8
18
9
31
“Musterlösung“ Reifzelliges B-NHL
B-PLL
B-CLL
LP-IC
SLVL
B-ALL
Diffus großzelliges B-NHL
Follikläres NHL
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
80 13 96 84.75 11.150
N Minimum Maximum MittelwertStandard-abweichung
% maligner Zellen
Probe 1
Frage 3
Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Blastenanteil in % an !(2x2 Punkte)
80 57 98 82.65 7.027
N Minimum Maximum Mittelwert
% maligner Zellen
Probe 2 Standard-abweichung
I_BLAST
II_BLAST
100806040200
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Frage 3
Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Blastenanteil in % an !
Probe I
Probe II
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Frage 4
Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Anteil in % der Granulozyten, Monozyten, Lymphozyten und malignen Zellen an!
(2x4 Punkte)
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Frage 4
Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Anteil in % der Granulozyten, Monozyten, Lymphozyten und malignen Zellen an!
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Frage 4
Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Anteil in % der Granulozyten, Monozyten, Lymphozyten und malignen Zellen an!
Zellen n Minimum Maximum Mittelwert Standardabweichung
Granulozyten 57 0 90 6,5 16,47
Monozyten 49 0 5 1,0 1,31
Lymphozyten 73 1 15 5,1 1,87
Path. Population
77 13 99 86,2 11,04
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Frage 4
Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Anteil in % der Granulozyten, Monozyten, Lymphozyten und malignen Zellen an!
Zellen n Minimum Maximum Mittelwert Standardabweichung
Granulozyten 65 0 15 2,9 3,92
Monozyten 50 0 10 1,9 2,05
Lymphozyten 52 0 99 24,4 34,21
Path. Population 78 57 99 84,7 6,79
INSTAND Ringversuch Gruppe 214
Aussendung vom 26. Juni 2002
Frage 5
Welche zusätzlichen Untersuchungen hätten Sie durchgeführt ?(2x2 Punkte zusätzlich)
Beispiele
Probe I Probe II
• Wiederholung MPO2 • CD34, TdT• CD15 • zytoplasmatisches Cyclin D1• PML/RAR alpha • IgM
2 Wurde von vielen Teilnehmern angemahnt – tatsächlich wurde die Messung auch wiederholt