UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA

LA MOLINA

DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA

INFORME N.º 3

“DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DE BIOMOLÉCULAS II”

PROFESORA:

ALUMNO: Rubén Torre Alvarez

I. INTRODUCCIÓN

Los carbohidratos o también llamados glúcidos, están constituidos principalmente por carbono, hidrógeno y oxígeno, y gran parte, pero no todos, presentan la fórmula empírica CnH2nOn.Los glúcidos son las biomoléculas más abundantes de la Tierra. Cada año, la fotosíntesis convierte más de 100.000 millones de toneladas métricas de CO2 y H2O en celulosa y otros productos vegetales. Ciertos glúcidos (como el azúcar y el almidón) son fundamentales en la dieta humana en la mayor parte del mundo y la oxidación de glúcidos es la principal ruta de obtención de energía en la mayoría de las células no fotosintéticas.En las plantas se almacenan dentro de los amiloplastos en forma de almidón, y en los animales en forma de glucógeno en el hígado y en los músculos. También se encuentran en las paredes celulares de las bacterias y plantas como peptidoglucano y celulosa respectivamente, así también como en el exoesqueleto de los insectos en forma de quitina.

Al igual que los carbohidratos, los lípidos también cumplen funciones importantes en los seres vivos.

Los lípidos biológicos constituyen un grupo químicamente diverso de compuestos cuya característica en común y definitoria es su insolubilidad en el agua. Las funciones biológicas de los lípidos son igualmente diversas. En muchos organismos, las grasas y los aceites son las formas principales de almacenamiento energético, mientras que los fosfolípidos y los esteroides constituyen los principales elementos estructurales de las membranas biológicas. Otros lípidos, aun estando presentes en cantidades relativamente pequeñas, juegan papeles cruciales como cofactores enzimáticos, transportadores electrónicos, pigmentos que absorben la luz, anclas hidrofóbicas para proteínas, agentes emulsionantes en el tracto digestivo, hormonas y mensajeros estructurales.

II. MATERIALES

Materiales por Mesa:

1 ml (40 gotas) de orina (la primera del día y en ayunas) 4 ml (100 gotas) de aceite de cocina 1 ml (40 gotas) de leche evaporada 1 ml (40 gotas) de leche descremada

1 ml (40 gotas) de jugo de mandarina Un trozo pequeño de papa, pan, cebolla, zanahoria y manzana 3 goteros

Materiales de Laboratorio

Placa Petri 4 tubos de ensayo Pipetas de 5 ml Pinzas de madera Vaso de precipitado de 500 ml para baño maría Gradillas Lugol Solución de glucosa al 1 % NaOH al 20 % Reactivo de Sudán III en reacción alcohólica Reactivo de Benedict Bencina Agua destilada Detergente Estufa Cocina

MÉTODOS

Experimento 1: Reconocimiento del Almidón

En primer lugar, se colocó en una placa petri los pequeños trozos de pan, papa, zanahoria, cebolla y manzana.

Luego se agregó dos gotas de lugol a cada muestra y se anotó lo sucedido.

Experimento 2: Reconocimiento del Azúcar Reductor

Se rotuló cada uno de los 4 tubos de ensayo. En el primer tubo se colocó 1 ml de agua destilada y se le agregó 1 ml de reactivo

de Benedict. Este tubo es la muestra control negativa, debido a que el agua destilada no muestra ningún cambio al agregarle reactivo de Benedict.

En el segundo tubo de ensayo, se colocó 1 ml de solución de glucosa y se agregó 1 ml de reactivo de Benedict. Ésta es la muestra control positiva, ya que la glucosa presenta cambios muy notables al agregarle reactivo de Benedict.

En un tercer tubo, se colocó 1 ml de jugo de mandarina y se le agregó 1 ml de reactivo de Benedict. Ésta es la muestra 1.

Luego, en el cuarto tubo de ensayo, se colocó 1 ml de orina y se agregó 1 ml de reactivo de Benedict. Ésta es la muestra 2.

Finalmente se colocó los tubos de ensayo en baño maría durante 3 minutos y se anotó lo sucedido.

Experimento 3: Propiedades de los Lípidos

En el primer tubo de ensayo, se colocó 1 ml de agua destilada y se agregó 1 ml de aceite. Se agitó para observar una emulsión transitoria y luego se dejó reposar para observar las dos fases que formaba.

En el segundo tubo de ensayo, se colocó 1 ml de agua destilada, se agregó 1 ml de aceite y se añadió una pizca de detergente. Se agitó y se observó una emulsión permanente.

En el tercer tubo de ensayo, se colocó 1 ml de bencina y se agregó 1 ml de aceite.

Experimento 4: Reconocimiento de Lípidos

En el primer tubo de ensayo, se colocó 1 ml de agua destilada y se agregó 2 gotas del reactivo de Sudán III en solución alcohólica. Se dejó reposar y se anotó lo observado. Ésta es la muestra control negativa, debido a que no presenta cambios al agregarle el reactivo de Sudán.

En el segundo tubo de ensayo se colocó 1 ml de aceite y 2 gotas de reactivo de Sudán, se dejó reposar y se anotó lo observado. Ésta es la muestra control positiva, debido a que el reactivo de Sudán reconoce lípidos se da un cambio notable en el aceite, después de agregarle el reactivo.

En el tercer tubo de ensayo, se colocó 1 ml de leche evaporada y se agregó 2 gotas del reactivo de Sudán, se dejó reposar y se anotó lo observado.

Finalmente en el cuarto tubo de ensayo, se colocó 1 ml de leche descremada, se agregó 2 gotas de reactivo de Sudán, se dejó reposar y se anotó lo observado.

III. RESULTADOS Y DISCUSIONES

Experimento 1: Reconocimiento de Almidón

Muestra Observaciones Presencia de Almidón

Papa Se pone de tiñe de color azul SI

Cebolla No reacciona NO

Zanahoria Se torna de un color azul , menos intenso

SI

Pan Reacciona muy rápido y se torna de un negro azul

SI

Manzana Cambio un poco su color , se oscureció

SI

Para el reconocer la presencia del almidón haremos uso de un compuesto denominado lugol.

1. Reconocimiento del almidón en la papa.

Cuando se adiciona lugol a la muestra de papa esta cambia de un color ya que la papa es una raíz y en esta hay abundante presencia de leucoplastos, organelos que almacenan almidón.

2. Reconocimiento del almidón en la cebolla.

Cuando se adiciona lugol a la nuestra de cebolla esta no sufre ningún cambio ya que la cebolla no contiene almidón.

3. Reconocimiento del almidón en la zanahoria

La zanahoria es una raíz vegetal que posee un sistema radicular que es la que contiene la función almacenadora, al colocarle el lugol notamos que cambio de color pero de una manera muy ligera por lo tanto esto corresponde porque en ese el sistema radicular existe presencia de almidón pero en menos cantidad a diferencia de las demás muestras.

4. Reconocimiento de almidón en el pan

El pan es un alimento que contiene alta cantidad de almidón ya que está formado por 55.45% de este compuesto, por eso al echarle lugol al pan, este cambio de color de una manera notoria corroborando la existencia de el almidón. Por lo tanto el pan se considera un alimento con alto nivel energético.

5. Reconocimiento del almidón en la manzana

Cuando se adiciona lugol a la muestra de manzana esta se oscurece ligeramente ya que la manzana contiene bajas cantidades de almidón.

El almidón es el principal carbohidrato presente en manzanas inmaduras. Las enzimas lo hidrolizan a sus unidades elementales (glucosa y otros derivados), lo que provee de energía para procesos celulares y le otorga a la fruta el dulzor característico. El almidón está compuesto químicamente de amilosa (25% del total del almidón de manzanas) y amilopeptina (la mayor parte del almidón, variando su contenido entre 60 y 95%).

Experimento 2: Reconocimiento de Azúcar Reductor

Muestra

Observaciones

Contenido de azúcar reductor

Color de la sustancia

Sustanciaoriginal

Agregar el reactivo de Benedict

Después de Calentar en baño maría

Tubo 1: Agua destilada

Transparente Celeste turquesa Celeste turquesaMuestra control

negativo no presenta azúcar reductor

Tuvo 2: Glucosa Transparente

Celeste turquesa(menos

intenso que el agua Rojo intenso

Muestra control positivo si presenta

azúcar reductor

destilada)

Tuvo 3: Jugo de Fruta

Anaranjado intenso

Verde claro Anaranjado Si presente azúcar reductor

Tuvo 4: Orina Amarillo Verde oscuro

Verde claro(mientras se

calentaba despedía un olor

a mariscos, debido a amoniaco presente)

No presenta azúcar reductor

+ REACTIVO DE BENEDICT

Muestras en el baño maría

Tubo 1

El control negativo (agua destilada) no se tiñe de ningún color. Porque el agua no presenta grupos OH libres.

Tubo 2

El control positivo (solución de glucosa) se tiñe de naranja con un precipitado rojo. Porque un grupo OH de la glucosa está libre y reacciona con el reactivo de Benedict.

Tubo 3: Jugo de mandarina

En el jugo de mandarina se encuentra la fructuosa y la glucosa, que forma la sacarosa la cual no es un disacárido reductor pero al someterlo a temperaturas más altas de la normal como lo hicimos en baño María, el enlace glucosídico que hay entre la glucosa y la fructosa se rompe de esa manera se hidrolizan y pasa a formar monosacáridos y así se obtiene el poder reductor.

Tubo 4: Orina

En la orina observamos el color verde que es más o menos la mezcla del color azul con el amarillo naranja. Esto nos indica que en la orina hay una mínima cantidad de monosacáridos, ya que esta orina fue obtenida de un compañero que estuvo en ayunas.

El reactivo de Benedict

Consta de: Sulfato cúprico; Citrato de sodio; Carbonato Anhidro de Sodio. El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+2. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).

Azúcares Reductores Jugo de Fruta>Azúcares Reductores Orina 

Experimento 3: Propiedades de Lípidos

Muestra Observación ReacciónTuvo 1: Aceite + Agua No se mezclaron. Ninguna. Son inmiscibles

Tuvo 2: Aceite + Agua + Detergente

Se dejó de formar dos fases bien marcadas.

El detergente disolvió algunas moléculas del

aceite (grasas) en el aguaTubo 3: Aceite + Bencina Se mezclaron ambas

sustancias.Se perdió un poco el

volumen.

Ninguna, solo se mezclaron

Tuvo 1: Aceite + agua

El aceite al tener presente en su estructura ácidos grasos insaturados, posee regiones hidrofobias con enlaces apolares, es decir, que no se pueden mezclar con el agua. Debido a esta propiedad, el experimento tuvo dos fases, y el aceite estuvo en la parte de arriba por las diferentes densidades entre éste y el agua.

Tubo 2: Aceite + agua + detergente

Ya una vez presente las dos fases en el tubo de ensayo más el detergente, en toda la mezcla se empieza a disolver el aceite debido a la incorporación de éste último compuesto. Y es que el detergente posee distintos componentes que cumplen roles muy variados, entre los cuales el más importante es el de disolver la suciedad (gotas de grasa, aceites) y las impurezas de un material sin desgastarlo.

Tubo 3: Aceite + bencina

Ambas sustancias se mezclan en el tubo de ensayo ya que el benceno es un solvente orgánico proveniente del petróleo y además presenta tanto como el aceite enlaces no polares. Además de la mezcla entre ellas, también se pudo observar una reducción en el volumen de la mezcla, y es que la bencina es muy volátil.

EXPERIMENTO 4: RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

Muestra Observaciones Contenido de lípidos

Tubo 1: Agua destilada Sustancia rosada(muestra control negativo)

NO

Tubo 2: Aceite Sustancia rojo intenso en la superficie (muestra control +)

SI

Tubo 3: Leche evaporadaSe forma un anillo rojo después de agregar el reactivo de Sudan

IIISI

Tubo 4: Leche descremadaSe torna una sustancia rosada

después de agregar el reactivo de Sudan III

NO

Después de agregar el reactivo de Sudan

Tubo1: Agua destilada

Es nuestra muestra control negativa ya que sabemos que el agua destilada no contiene lípidos en su composición.

Tubo 2: Aceite

Es nuestra muestra control positiva ya que sabemos que el aceite está conformado por ácidos grasos los cuales son lípidos. El reactivo Sudan III es insoluble en agua y tiñen aquellas sustancias que tienen un poder de disolución superior al del líquido empleado para preparar la solución colorante.

Tubo 3: Leche evaporada

Los colorantes para grasas son más solubles en las propias grasas que en el medio en el que van disueltos. Este reactivo tiene una alta afinidad por lípidos, cuando me refiero a alta afinidad, es que se une a éste tipo de sustancias químicas de forma no covalente. No hay un enlace químico como tal entre los lípidos. Sino una serie de interacciones de tipo lipofílico (ya que tanto el colorante como la sustancia a la que se une son de baja

polaridad). En este caso la muestra de leche evaporada se tiño rápidamente de un color rojo en la superficie formando un anillo, ya que presenta ácidos grasos en su composición.

Tubo 4: Leche descremada

En esta muestra se tiño ligeramente de rojo parecía más un rosado sin intensidad, ya que la leche descremada no contiene una gran cantidad de ácidos grasos porque ha pasado por un procedimiento de eliminación o separación de grasas a diferencia de la leche evaporada que no ha pasado por ningún proceso. El reactivo de Sudan III, que permite diferenciar las grasas neutras que se tiñen de color amarillo, las grasas minerales son incoloras y las ácidas adquieren una coloración roja.

IV. CONCLUSIONES

En la identificación de almidón se concluyó que las muestras que tiene mayor concentración de este carbohidrato fueron el pan y la papa seguidos por la zanahoria; debido a que los primeros poseen órganos de reserva donde predomina este carbohidrato.

La reacción del lugol con la manzana salió positiva para la presencia de almidón pero no en mucha cantidad debido a la presencia mayoritaria de los elementos del almidón que son la amilosa y la amilopectina.

Los azucares reductores se encuentran en compuestos que tengan un grupo hidroxilo (OH) libre por la composición de la glucosa sabemos que tiene grupos de OH libres por lo que es un azúcar reductor. Esto se comprueba por la reacción de Benedict.

La sacarosa presente en el jugo de fruta sometida a la acción de calor (aumento de temperatura) se descompone en glucosa y fructosa por lo que presenta grupos de OH libres.

Los lípidos al tener enlaces apolares solo se va a mezclar con compuestos que tengan esos enlaces como el benceno u otros compuestos apolares.

La presencia del detergente ayudo a disolver algunas moléculas de aceite por lo que se pudo ver una fase con el agua.

El reactivo de sudan III ayudo al reconocimiento de lípidos gracias a eso se demsotro que la leche evaporada tiene lípidos y la leche descremada no debido a que paso por un proceso de separación de grasas previamente.

V. CUESTIONARIO

1. ¿Todos los lípidos son buenos para la salud? ¿Por qué?

Sí, porque cada uno de ellos como es el caso de las ceras, fosfolípidos, triglicéridos, esteroides y carotenoides; poseen funciones especiales de estructura como es pertenecer a la membrana externa de la célula la cual le confiera que sea de naturaleza lipoproteica y tenga funciones de transmisión de información o el paso de ciertas materiales orgánicos al citoplasma, son de reserva de energía ya que cuando se metabolizan liberan más del doble de energía por gramo que los carbohidratos y otra función es que sean hormonas importantes.

Pero el problema de los lípidos radica en que si uno posee gran cantidad de ellos dentro de su organismo corre riesgo de tener enfermedades como es el caso de los problemas cardiovasculares que es producido por el colesterol que es un esteroide y los triglicéridos altos para cual sea necesario tener medidas de control, estar sujetos a dietas, medicamentos, etc.

2. Menciona 5 funciones básicas de los carbohidratos y lípidos en su organismo.

CARBOHIDRATOS

1. Proporcionar energía a los seres vivos (el cerebro y el sistema nervioso solamente utilizan glucosa para obtener energía)

2. Almacén y reserva de energía: El glucógeno (en animales) 3. Forman parte de moléculas tan importantes como el DNA y el ATP, entre otra

(ribosa y otras desoxirribosa).4. Actúan como reguladores intestinales (fibra alimentaria)5. Los carbohidratos intervienen en complejos procesos de reconocimiento celular,

coagulación y reconocimiento de hormonas.6. Los carbohidratos son precursores de ciertos lípidos, proteínas y dos factores

vitamínicos, el ácido ascórbico (vitamina C) y el inositol.7. Algunos carbohidratos actúan como lubricantes de las articulaciones del esqueleto,

como adhesivos entre las células y para conferir especificidad biológica sobre la superficie de las células animales.

8. Una dieta que contenga un nivel óptimo de carbohidratos puede prevenir la acumulación de grasa en el cuerpo.

9. Los carbohidratos realzan el sabor, la textura y la apariencia de los alimentos y hacen que la dieta sea más variada y agradable.

LÍPIDOS

1. Son componentes de las membranas de las células por las propiedades antipáticas de los fosfolípidos

2. Emulsionan grasas presentes en el intestino3. Entre las hormonas sexuales se encuentran la progesterona que prepara los

órganos sexuales femeninos para la gestación y la testosterona responsable de los caracteres sexuales masculinos.

4. Entre las hormonas suprarrenales se encuentra la cortisona, que actúa en el metabolismo de los glúcidos, regulando la síntesis de glucógeno.

5. Facilitan las reacciones químicas que se producen en los seres vivos. Cumplen esta función las vitaminas lipídicas, las hormonas esteroideas y las prostaglandinas.

6. El colesterol es importante biológicamente ya que es clave para la síntesis de otros esteroides.

7. Los lípidos que poseen cadenas hidrocarbonadas sirven como depósito de energía.

BibliografíaMoggia, C., & Pereira, M. (2006). ALMIDÓN Y MADURACIÓN EN MANZANAS . (J. A. Yuri, V. Lepe, & C. Moggia, Edits.) POMÁCEAS , 6 (3), 4.