instituto superior de ciencias médicas villa clara “dr. serafín ruiz de zárate ruiz”
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Instituto Superior de Ciencias Médicas Villa Clara “Dr. Serafín Ruiz de Zárate Ruiz”. Unidad de Investigaciones Biomédicas. Determinaciones enzimáticas que se realizan. Superóxido Dismutasa (SOD). Catalasa (CAT). Glutation Reducido (GSH). Fosfolipasa A 2 (FLA 2 ). - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
Instituto Superior de Ciencias Médicas
Villa Clara“Dr. Serafín Ruiz de
Zárate Ruiz”
Unidad de Investigaciones Biomédicas
Determinaciones enzimáticas que se realizan
Superóxido Dismutasa (SOD)
Catalasa (CAT)
Glutation Reducido (GSH)
Fosfolipasa A2 (FLA2)
Determinación de la actividad enzimática Superóxido Dismutasa
Pirogalol PurpurogalinaO2
-
Purpurogalina
420 nmSOD
Inhibe el proceso
Para evaluar la cantidad de enzima presente en la muestra se emplea el grado de inhibición
Determinación de la actividad enzimática Catalasa
H2OO2 + H2O2
CAT
c(H2O2)descompuesto~ c(CAT)
Las mediciones se realizan a 240 nm, siguiéndose la variación en
la densidad óptica que tiene lugar durante la descomposición del
sustrato por la enzima.
Determinación de la concentración de Glutation reducido
GSH + ELIMAN
Muestra desproteinizada
ácido 5-tio-2-nitrobenzoico
412 nm
La concentración de GSH se cuantifica utilizando una curva patrón de GSH.
Determinación de la actividad enzimática Fosfolipasa A2
MuestraÁcidos grasos
Lisofosfolípidos
El ensayo es realizado mediante el empleo
de una curva patrón de HCl 0,1N midiendo
los cambios producidos en la absorbancia
de la solución sustrato (578 nm)
Muestra
La muestra fue obtenida por medio de un pesquisaje a
población adulta normal de la provincia de Villa Clara
Fue empleada la técnica de punción venosa extrayendo en cada caso 10 cc de sangre, llevando a cabo las determinaciones en suero
En todos los casos fue seguida una secuencia lógica para las determinaciones, SOD, CAT, GSH, FLA2
teniendo en cuenta su estabilidad en la muestra
Resultados(U/ml) n SOD CAT
normotensos 127 2.75227± 0.83128 4.05E-2 ± 3.80E-2
hipertensos 42 3.24383 ± 0.19497 6.42E-2 ± 0.10E-2
n GSH (μM) FLA2 (U/ml)
normotensos 127 26.6667 ± 2.5482 4,4776
hipertensos 42 14.3422 ± 1.0496 6,8715
Los radicales libres circulan por el organismo humano teniendo acceso a todos los órganos y tejidos.
Las reservas antioxidantes del organismo contribuyen a mantener este equilibrio.
Los antioxidantes exógenos actúan como moléculas suicidas oxidándose al neutralizar los radicales libres.
Teniendo en cuenta que: