instrumentos de laboratorio de microbiologia de alimentos
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I. INTRODUCCION
Un laboratorio de microbiología es un lugar habilitado para manejar y estudiar
microorganismos.
El trabajo debe realizarse de acuerdo con los estándares técnicos y de
seguridad propios de un laboratorio de microbiología de alimentos.
Es importante recordar que la finalidad es determinar los microorganismos
presentes en la muestra por lo que es preciso extremar las precauciones para
evitar contaminaciones que den lugar a resultados erróneos.
Para deshacerse del material contaminado se deben utilizar recipientes
adecuados que deben ser esterilizados posteriormente.
Nunca se debe tirar nada contaminado por el fregadero o al cubo de la basura
común sin haber sido esterilizado previamente.
Debe existir un procedimiento de control de calidad en el laboratorio de
microbiología que implique la monitorización de los medios e instrumentos con
el fin de asegurar la adecuada realización de los aislamientos, identificación y
caracterización de los patógenos que puedan estar en la muestra.
Por lo tanto en este presente informe se dará a conocer sobre la utilidad de
cada equipo o material dentro del laboratorio de microbiología.
II. OBJETIVOS
Reconocimiento y utilidad de los diferentes materiales y equipos
que se utilizan en el laboratorio de microbiología.
III. MARCOTEORICO
3.1. Materiales de laboratorio de microbiología
3.1.1. Materiales de vidrio
1. Tubos de prueba: Consiste en un pequeño tubo cilíndrico de vidrio con
un extremo abierto (que se puede poseer una tapa) y el otro cerrado y
redondeado, que se utiliza en el laboratorio para contener pequeñas
muestras liquidas o sólidas, aunque pueden tener otras fases, como
realizar reacciones químicas en pequeña escala. Debe ser de vidrio de
paredes gruesas.
2. Placa de Petri: Es un recipiente redondo, de cristal o plástico, con una
cubierta de la misma forma que la placa. Tiene usos en microbiología.
Siendo las más usadas la de 15x 100mm (altura y diámetro) y se emplea
para cultivo y aislamiento de microorganismos.
3. Placa de Brewer: Es idéntica a la anterior, solo que en este caso la tapa
es más pesada, adaptada para crear anaerobiosis. Se usa para cultivo y
aislamiento de cultivo anaerobios. No entra oxígeno a esta placa.
4. Pipetas: Tubos cilíndricos delgados terminados en punta, se usan para
medir y trasladar pequeños volúmenes de líquidos. De los cuales tienen
dos tipos:
a) Pipetas serológicas: Son terminales y están graduadas hasta
la punta y calibradas para dispensar. Las graduaciones son
permanentes en color ámbar e incluyen banda de color para
fácil identificación. Con capacidad de 0,1 a 25ml, delos cuales
las de mayor uso son (10, 5, 1, 2, 0.1ml)
b) Pipetas volumétricas: Pipetas volumétricas se usan para
dosificar líquidos. La pipeta volumétrica tiene una marcación
para un volumen definido. Las pipetas volumétricas son
ajustadas “EX” (por vertido), es decir la cantidad del líquido
vertida corresponde al volumen impreso. El extremo proximal
angosto de la pipeta.
c) Pipetas Pasteur: fabricadas en vidrio, con estrangulamiento
en el tubo de aspiración, punta larga y fina, no es estériles y
no graduadas de diámetro 4x20, 30, o 40cm. Se utiliza para la
toma de pequeños inóculos de cultivo.
5. Espátulas de Drigalsky: Es una varilla de vidrio, acotada en ángulo
recto en un punto de sus extremos, en forma de L o de triángulo
equilátero. Se utiliza para inoculación masiva de placas (impregnación)
aunque su uso es muy limitado, facilita la siembra y aislamiento de
microorganismos por diseminación.
6. Matraces y Erlenmeyer: También conocido como matraz de síntesis
extrema de químicos, es uno de los frascos de vidrio más ampliamente
utilizados en el laboratorio de química y física como también en
microbiología. Se usan para preparación y aislamiento de soluciones,
colorantes, reactivos, medios de cultivo, etc.
7. Matraces o balones: Es un frasco de cuello largo y cuerpo esférico.
Está diseñado para calentamiento uniforme de distintas sustancias, se
produce con distintos grosores de vidrio para diferentes usos. Está
hecho generalmente de vidrio o plástico especial. Las más comunes son
los de 100, 300, 500, 1000, 2000ml.
8. Matraces aforados o fiolas: Se emplea para medir un volumen exacto
de líquido en base a la capacidad del propio matraz, que aparece
indicada. Tiene un cuello alto y estrecho para aumentar la exactitud,
pues un cambio pequeño en el volumen se traduce en otro considerable
en la altura del líquido en el cuello del matraz. Se denomina aforado por
disponer de una marca de graduación o aforo en torno al cuello para
facilitar determinar con precisión cuándo el líquido alcanza el volumen
indicado.
9. Kitazato: Instrumento graduado, está hecho de vidrio, es de base ancha
y cuello estrecho, Su función principal es evitar la pérdida de líquido por
agitación o por evaporación y suele
utilizarse para calentar sustancias a
temperaturas altas, además es utiliza como complemento del equipo de
filtración.
10.Vasos de precipitación o Beaker: Se utiliza para contener líquidos o
sustancias, para así poder disolverlas, calentarlas, enfriarlas, etc...Se
pueden encontrar vasos precipitados de diferentes volúmenes (desde
1ml hasta varios litros).
11.Probetas: Son cilindros de vidrio graduados con una base que le
proporciona estabilidad sobre sí mismo. Su utilidad es medir volúmenes
que no requieran mucha precisión. Los más utilizados son los que en la
parte superior llevan incorporada una boca que facilita el vertido de
líquidos y los que tienen tapón para almacenarlos.
12.Jeringas y agujas hipodérmicas: Las jeringas están comprendidas de
tener el pívot de vidrio o de metal en posición central, las más conocidas
son de 2, 5, 10,20 y 50ml, las de mayor capacidad se utilizan para
sangría.
13.Frasco para hemocultivos, vacunas, cultivos de tejido: Son de vidrio
neutro, resistente al calor trasparentes y con tapa de rosca, con
capacidad de 10, 100, 150 ml, pueden ser color blanco o ámbar.
14.Varillas de vidrio macizo: Son materiales que sirven para la confección
de agitadores o baquetas, Una Varilla de vidrio es un fino cilindro macizo
de vidrio que sirve para revolver disoluciones. En uno de sus extremos
tiene plástico alrededor que sirve para arrastrar algo de soluto que se
haya quedado en las paredes, pero no debe ser confundido con el
agitador de vidrio, ya que son diferentes y no sirven para lo mismo
aunque se parezcan.
15.Varillas de vidrio hueco: Son unas varillas de unos 20 cm de longitud
que se utilizan para agitar las disoluciones ayudando a que los sólidos
se disuelvan en los disolventes más rápidamente además se utilizan
para confeccionar pipetas Pasteur.
16.Perlas de vidrio: Las
perlas de vidrio son un producto que se elabora con vidrio óptico de alto
grado, están diseñadas para ser utilizadas bajo presión de aire. Su
composición está creada para resistir temperaturas y fracturas de
impacto.
3.1.2. Materiales de otra naturaleza
1. Mango de Kolle: Consiste de dos piezas: el mango de Kolle y el asa de
siembra, de bronce cromado y mango con bakelita. Son de un material
inoxidable. Sirve para tomar muestras y poder realizar el cultivo en las
placas Petri.
2. Espátula de metal con mangos de madera: Es de metal, construido de
un anillo circular apoyado en tres patas equidistantes, que son varilla
delgada. Se utilizan para colocar sobre el la malla de asbesto en una
operación de calentamiento de cualquier matraces con medios de
cultivo.
3. Trípodes: Es utilizado principalmente como una herramienta de sostén
para la rejilla de asbesto, o lo que se sitúa sobre este.
4. Estuches cilíndricos o
cubiculares para pipetas y
placas Petri: La Caja Petri sin
división 100x15 mm de plástico estéril
desechable sirve en la bioquímica para llevar a cabo cultivos de
bacterias y microorganismos, diseñada en forma circular con una base,
una tapa y costillas de ventilación en la parte de abajo para prevenir
condensación al llenado.
5. Mechero de bunsen: Es un instrumento utilizado en los laboratorios
científicos para calentar o esterilizar muestras o reactivos químicos.
6. Canastillas o cestos de metal: Cesta pequeña de metal u otro material
flexible que contiene objetos menudos o delicados.
7. Asa de siembra: Se utilizan para sembrar. Pueden ser metálicas o de
plástico, curvas o rectas (para la siembra por picadura).
3.1.2. Otros
1. Gradillas de metal o plástico resistente a la esterilización para
tubos de ensayo: Es utilizada para sostener y almacenar gran cantidad
de tubos de ensayo o tubos eppendorf, de todos los diámetros y formas.
2. Rejillas de asbesto: Consiste de dos piezas: el mango de Kolle y el asa
de siembra, de bronce cromado y mango con bakelita. Son de un
material inoxidable. Sirve para tomar muestras y poder realizar el cultivo
en las placas Petri.
3. Hilos de platino: Es utilizado para la siembra de hongos y bacterias.
4. Papel de filtro: Se introduce en un embudo de filtración, con el fin de
ser filtro para las impurezas insolubles y permitir el paso a la solución a
través de sus poros.
5. Frascos goteros: Su función principal es traspasar pequeñas
cantidades de líquidos (gota a gota) de un recipiente a otro.
6. Papel Kraft: Es un tipo de papel basto y grueso de color marrón. Se
suele usar como envoltura.
3.1.3. Equipos básicos de laboratorio de microbiología
1. Microscopio óptico: Un microscopio es un instrumento que nos permite
observar entes demasiado pequeños para ser vistos a simple vista, los
microrganismos, entre otros.
2. Esterescopio: Los estereoscopios permiten hacer estudios de objetos y
especímenes demasiado pequeños para ser estudiados a simple vista,
pero demasiado grandes para ser estudiados bajo el microscopio
compuesto. Su magnificación va desde cerca de 5x hasta más de 60x.
Los estereoscopios también son conocidos como microscopios de
disección, pues en muchas ocasiones son usados para disecar los
especímenes o muestras, separando de ellos aquellas partes que serán
examinadas mediante otros
tipos de microscopía.
3. Autoclave: Es el equipo más utilizado para la esterilización mediante
calor húmedo. Es un sistema cerrado donde se forma vapor de agua que
se somete a una presión elevada, una atmósfera, lo que hace que el
agua alcance una temperatura de 121ºC causando la desnaturalización
de enzimas lo que conlleva a la muerte de los microorganismos y la
destrucción de las esporas. Habitualmente, se esteriliza a 121ºC durante
20 minutos.
En el laboratorio de Microbiología es imprescindible trabajar con material
y soluciones estériles con objeto de que los resultados que se obtengan
correspondan al microorganismo o microorganismos que están
presentes en la muestra en estudio y no a contaminantes que
procedentes del medio o los materiales, puedan desarrollarse y falsear
las pruebas. Para ello antes de comenzar el trabajo práctico se
esterilizará, junto con los medios de cultivo, el material que
posteriormente va a ser utilizado. Se entiende por esterilización los
procedimientos por los cuales se eliminan todas las formas vivas de
microorganismos, sean patógenos o no, que se hallen en un material.
4. Horno Pasteur: Emplea altas temperaturas (160-180ªC) durante un
tiempo prolongado (1.5-3 horas). Debido a su poca capacidad de
penetraciones usa para esterilizar vidrio y metales. Actúa principalmente
desnaturalizando las proteínas y secundariamente oxidando los
compuestos celulares.
5. Estufa o incubadora: Es una cámara de temperatura controlada para
cultivos de microorganismos. Se utiliza para facilitar el desarrollo de los
microorganismos a su temperatura óptima de crecimiento (generalmente
35-37º).
6. Refrigeradora: En microbiología, los científicos utilizan refrigeradores
para crear un entorno para replicar células y para llevar a cabo
experimentos en algunas de éstas para determinar cómo es que las
afectan las bacterias u otros microorganismos. Los tipos de células
generalmente dirigidas para refrigeración son microorganismos llamados
"mesófilos" y "psicotrópicos". Los científicos normalmente tienen tres
usos para las células de refrigeración los cuales son, el almacenamiento
para su uso posterior, evitar el crecimiento excesivo de éstas y reducir la
tasa de actividad celular para evitar que aparezcan mutaciones y
microorganismos bacteriales adicionales.
7. Centrifuga: Aparato que aplica sobre los tubos una fuerza centrífuga lo
que permite la separación de los distintos componentes de la muestra
mediante la precipitación en el fondo del tubo de las partículas en
suspensión.
8. Baño maría: Es un método empleado en el laboratorio para conferir
temperatura uniforme a una sustancia líquida o sólida o para calentarla
lentamente, sumergiendo el recipiente que la contiene en otro mayor con
agua que se lleva o está en ebullición.
El concepto fundamental es el de baño que implica el calentamiento
indirecto, por convección térmica del medio (agua del baño) y por
conducción térmica del medio (agua del baño) y por conducción térmica
de la sustancia; ese medio (baño) puede ser de aceite mineral, de agua
pura o soluciones salinas de agua de concentraciones y solutos
diferentes, etc, según la temperatura a que se requiera llevar la
sustancia.
9. Balanza: Las Balanzas se emplean para medir el peso o la masa de una
sustancia. si se efectúa la comparación entre dos objetos, uno conocido
y otro desconocido entonces el elemento medido es la masa, si la
medición.
Sirve para realizar las pesadas delos reactivos , muestra o medios de
cultivo a usar ,hay de diferentes tipo, según su aplicación y
sensibilidad aquellas balanzas de gran sensibilidad se llaman balanzas
de precisión.
10. Potenciómetros:
Equipo de se utiliza para medir el pH de los reactivos, medio de cultivo
etc.
11.Bomba de vacío: Las aplicaciones de vacío tanto en la industria como
en los laboratorios de investigación son numerosas y variadas.
Una bomba de vacío es un dispositivo empleado para extraer los gases
y sustancias no deseados en un proceso, producto o sistema.
Las bombas de vacío trabajan solamente en un rango de presiones
limitado, por ello la evacuación de los sistemas de vacío se realiza en
varias etapas, usándose para cada una de ellas una clase de bomba
diferente.
12.Destiladores: El destilador
sirve para separar sistemas materiales que tengan sustancias cuyo
punto de ebullición sean distintos, por ejemplo, si tienes una solución de
agua y sal. destilando la mezcla, podes separar en agua pura y sal,
porque le NaCl es un compuesto iónico y tiene altos puntos de
ebullición, entonces cuando la mezcla colocada en el balón de
destilación(conectado el refrigerante) alcance los 100ºC, el agua
cambiara de estado de agregación(de líquido a vapor) y pasara por un
tubo, EL REFRIGERANTE, el cual tiene un tubo cerrado en el interior,
por que pasa el vapor de agua, y exteriormente tiene otro tubo, con dos
salidas, por una ingresa agua fría y por el otro sale, este movimiento de
agua permite la condensación dentro del refrigerante, este se coloca
inclinado, y arriba de un vaso de precipitado u otro balón, para poder
recoger el agua destilada.
13.Cámara de siembra: Equipo que se utiliza para realizar la siembra de
los microorganismos en condiciones de esterilización.
14.Licuadora y mortero: La función principal de una licuadora es
facilitarnos la elaboración (moler) de muestras y homogenizarles.
MORTERO: El molcajete es una piedra tallada en forma cóncava con
una piedra del mismo material. Mortero empleado en la elaboración de
alimentos desde la antigüedad prehispánica. Comúnmente ha sido
creado de piedra volcánica. Se muele empleando un utensilio también
de piedra llamado tejolote o te machín. El molcajete es el predecesor de
la licuadora moderna.
15.Homogeneizadoras o bortex: Sirve para homogenizar las diluciones
16.Bactocinerador o incinerador eléctrico: Sirve para esterilizar las asas
de siembra, se usa dentro de cámara o cabina de siembra.
IV. CONCLUSIONES
Gracias a la información de cada una de las utilidades de cada
instrumento y equipo se podrá hacer un debido uso de cada uno
de ellos.
V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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Limusa –Wiley, S.A., D.F. MEXICO