introdução à cultura de tecidos
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CULTURA DE TECIDOS
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O que é cultura de tecidos?
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CULTURA DE TECIDOS
Histórico
• Século XVII (DUHAMEL) � calos de espécies arbóreas.
• 1675 (MALPIGHI) � anatomia microscópica.
• 1838 (SCHLEIDEN) e 1839 (SCHWANN) �
formularam a “teoria celular”.
• 1853 (TRÈCUL) � formação de calos (arbóreas) e publicação de figuras de seções.
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• 1878 (VÖCHTING) � calos de Brassica rapa. Atenção voltada para a polaridade.
• 1893 (RECHINGER) � tamanho mínimo dos explantespara permitir a divisão celular (20 mm). Espessura < 1,5mm � incapazes.
• 1902 (HABERLANDT) � teoria de totipotência:
“Seres vivos têm a capacidade de
regenerar organismos inteiros, idênticos
à matriz doadora, a partir de células
únicas.”
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CULTURA DE TECIDOS VEGETAIS
Célula madura e especializada (diferenciada )
Volta ao estágio embrionário (desdiferenciada)
Volta a ser especializada (determinação/rediferenciação)
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• 1920 � germinação e crescimento de orquídeas.
• 1926 (WENT) � descoberta das auxinas.
• 1939 (WHITE, NOBERCOURT, GAUTHERET) � calos de fumo e cenoura.
• Década de 40 � água de coco – zeatina.
• 1954 (TORREY) � suspensões celulares.
• 1955 (MILLER et al.) � descoberta das citocininas.
• 1957 (SKOOG & MILLER) � Auxina/citocinina na morfogênese.
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• 1958 (STEWARD & REINERT) � embriões somáticos em cenoura.
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• 1960 (MOREL) � eliminação de vírus.
• 1960 (COCKING) � cultura de protoplastos.
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• 1962 (MURASHIGE & SKOOG) � desenvolvimento de meio artificial.
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• 1965 (AGHION-PRAT) � indução de florescimento in vitro de tabaco.
• 1985 (HORSCH et al.) � transformação genética de discos foliares por Agrobacterium, com regeneração das plantas transformadas.
Crop genetic engineering includes:
1) DNA isolation;
2) gene cloning;
3) gene design;
4) Transformation;
5) plant breeding.
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Cultura de tecidos
Explantes = fragmentos de tecidos vegetais
Totipotência
Teoria � todas as células
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Cultura de tecidos
1. Cultura de tecidos desorganizados
Calos – cultura e manutenção de massas celulares �proliferação desordenada, a partir de tecidos ou órgãos.
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Suspensões – proliferação de células isoladas ou em pequenos aglomerados, dispersos.
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2. Cultura de tecidos organizados
Cultura de órgãos – inclui o isolamento de primórdios e segmentos foliares. Para a micropropagação, os tipos mais importantes são:
a) Cultura de meristemas – ápices meristemáticos, consistindo de domo apical, isentos ou contendo um ou dois primórdio foliares.
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b) Cultura de ápices caulinares – iniciada a partir de ápices caulinares ou gemas laterais.
c) Cultura de segmentos nodais – contêm segmentos caulinares que carregam gemas simples ou múltiplas.
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d) Cultura de embriões – embriões zigóticos são excisados e cultivados para originar plântulas.
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e) Cultura outros tecidos vegetais
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Cultura de raízes – raízes isoladas.