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Isolamento e identificação dos Estafilococos
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Importância Clínica dos EstafilococosStaphylococcus aureus
Intoxicação alimentar (produção de enterotoxinas)Síndrome do choque tóxicoInfecções hospitalaresOsteomieliteEndocarditeBacteremia
MRSA (Staphylococcus aureus resistente à meticilina)VRSA (Staphylococcus aureus resistente à vancomicina)VISA (Staphylococcus aureus com resistencia intermediária à vancomicina)
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus
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Abcessos
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Síndrome da pele escaldada
Toxina: Esfoliatina
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Intoxicação alimentar
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Síndrome do choque tóxico
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Isolamento dos Estafilococos
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus
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Identificação de Estafilococos
1) Prova da Catalase
2) Prova da Coagulase
3) Resistência à Novobiocina
4) Crescimento em ágar Manitol
5) Prova da DNAse
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Prova da Catalase
Conversão de peróxido de hidrogênio a 3% em água e oxigênio pela ação da catalase.
2H2O2 H2O + O2
+Estafilococos
-
Estreptococos
OBS: Cuidado para não coletar ágar sangue junto com a colônia usada no teste falso positivo porque o sangue do agar contém catalase.
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Prova da Catalase
Staphylococcus spp Streptococcus spp
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S. epidermidisS. saprophyticus
Fibrinogênio Fibrina
+ -
S. aureus
Prova da Coagulase
Inocular colônia de bactéria em plasma de coelho incubar 37 ºC por 1-4 horas e observar formação de fibrina
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Prova da coagulase em tubo
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Staphy test
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Ágar Manitol (7,5% NaCl)
Manitol salgado
Crescimentoe fermentação
(amarelo)
Sem Crescimentoou sem fermentação (rosa ou vermelho)
S. aureus S. epidermidisS. saprophyticus
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Ágar Manitol (7,5% NaCl)
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Prova da DNAse
Ágar DNAse
S. aureus
+ -
S. epidermidisS. saprophyticus
Semear uma colônia em ágar DNAse e incubar a 35 graus por 24 horas. No momento da leitura adicionar HCl 1N sobre a placa, aguardar 30 segundos e observar a formação de um halo claro ao redor da colônia.
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PROVA DA DNAse
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Prova de sensibilidade à Novobiocina
Ágar Mueller-Hinton com disco de Novobiocina (5 microgramas)
Sensível( - ) Resistente
(+)
S. aureus
S. epidermidisS. saprophyticus
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Tabela para identificação de cocosGram + Catalase +
(Staphylococcus spp.)
Coagulase Manitol DNAse Novobiocina
S. aureus + + + Sensível
S. epidermidis - - - Sensível
S. saprophyticus - - - Resistente
Todos são Catalase +
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Identificação de MRSA
• Teste de sensibilidade à oxacilina• Teste de sensibilidade à cefoxitina• PCR para o gene mecA• Detecção de PBP2a por aglutinação
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Teste de sensibilidade à oxacilina e cefoxitina
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PCR para mecA
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Aglutinação – Slidex (Biomerieux)
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