katab uh 0607
DESCRIPTION
KATABOLIZAM UGLJENIH HIDRATATRANSCRIPT
KATABOLIZAM
FAZE GLIKOLIZE
ADP + Pi
ADP + Pi
2 NAD+
Glukoza
Fruktoza-1,6-difosfat
DHAP
GAP
Piruvat Piruvat
ATP
ATP
GAP
2 NADH2 ADP 2 ATP
2 ADP 2 ATP
I faza:
UTROŠAK
ATP-a
II faza:
DOBIJANJE
ATP-a i NADH
Enzimi i intermedijeri glikolize
• 11 Glikolitičkih enzima (10 + LDH):
• lokalizacija u citozolu
• Intermedijeri glikolize - svi fosforilisani
– Negativno naelektrisanje povećava polarnost i onemogućuje prolaz kroz membranu
– Stvaranje kompleksa ES
• Vezivanje za enzim
• “Prepoznavanje” supstrata
– Fosforil ostaci postaju terminalne fosfatne grupe ATP
1. Fosforilacija D-glukoze: Heksokinaza
O
CH2OH
HH
OH
H
OH
OH
HOH
H
+ ATP
Heksokinaza
Mg2+
O
CH2OPO3
HH
OH
H
OH
OH
HOH
H
+ ADP H+
Glukoza
Glukoza-6-fosfat (G6P)
+
2-
Utrošak prvog mola ATP-a
Ireverzibilna reakcija
Enzimi:• Heksokinaza (većina ćelija)• Glukokinaza (jetra)
Kinetika fosforilacije D-glukoze pod dejstvom heksokinaze i glukokinaze
• Heksokinaza•Niska Km
•U većini ćelija•Negativni alosterni modulator G-6-P•Održava veliki konc.gradijent
•Glukokinaza•Visoka Km •U jetri •Aktivna samo posle obroka•Nema alosternog modulatora
2. Konverzija G-6P u F-6P
Fosfoglukoza-izomeraza (PGI)
O
CH2OPO3
HH
OH
H
OH
OH
HOH
H
Glukoza-6-fosfat (G6P)
2-
O
CH2OPO3
H
OH
H
H
OHOH
CH2OH
2-
Fruktoza-6-fosfat (F6P)
3. Fosforilacija F-6P: Fosfofruktokinaza
Fosfofruktokinaza (PFK)
O
CH2OPO3
H
OH
H
H
OHOH
CH2OH
2-
Fruktoza-6-fosfat (F6P)
Mg2+
+ ATP
O
CH2OPO3
H
OH
H
H
OHOH
CH2OPO3
2-
2-
Fruktoza-1,6-difosfat (FDP)
+ ADP H+
+
• PFK-1 glavni regulatorni enzim glikolize !!!
4. Cepanje FDP: Aldolaza
CH2OPO3
C
C
C
C
CH2OPO3
O
HOH
OH
H
H
OH
CH2OPO3
C
CH2
O
OH
C
OH
C OHH
CH2OPO3
Dihidroksiaceton-fosfat (DHAP)
Gliceraldehid-3-fosfat (GAP)
Fruktoza-1,6-difosfat (FDP)
Aldolaza
2-
2-
2-
2-
1
2
3
• Reverzibilna aldolna kondenzacija
• Intermedijer tipa Schiff-ove baze
5. Trioza-fosfat izomeraza: Interkonverzija trioza-fosfata
• U ravnoteži: 90% DHAP !
• Stalna potrošnja GAP u procesu glikolize favorizuje konverziju DHAP u GAP
C
C
CH2OPO3
O
OH
H
HC
OH
C OHH
CH2OPO3
Dihidroksiaceton- fosfat (ketoza)
Gliceraldehid- 3-fosfat (aldoza)
2-2-
C
OHH
C OHH
CH2OPO32-
Intermedijer (endiol)
6. Oksidacija gliceraldehid-3-fosfata:Stvaranje prvog visokoenergetskog intermedijera
Za odvijanjeglikolize neophodan NAD+
NADH pod aerobnimuslovima u mitohondrije(resporatorni lanac)
7. Fosfoglicerat-kinaza: Stvaranje prvog mola ATP-a fosforilacija na nivou supstrata
8. Fosfogliceromutaza: Konverzija 3-fosfoglicerata u 2-fosfoglicerat
• Reverzibilna reakcija
• Mehanizam reakcije:
enzim (donor fosforil gr.) + 3-fosfoglicerat 2,3-Difosfoglicerat
2-Fosfoglicerat + enzim
Sinteza i degradacija 2,3-DPG u eritrocitima: odvojak glikolitičkog puta
9. Enolaza: Stvaranje drugog visokoenergetskog intermedijera
Za delovanje enolaze neophodni K+ i Mg2+
Inhibitor: F- u prisustvu neorganskog fosfata vezuju se u stabilan kompleks sa Mg2+ u aktivnom centru enzima
10. Piruvat-kinaza: Stvaranje drugog mola ATP-a, fosforilacija na nivou supstrata
• PK - regulatorni enzim ! U prisustvu K+ i Mg2+
Sudbina piruvata pod anaerobnim uslovima: Laktat dehidrogenazamlečno-kiselinsko vrenje
Uloge:
1.ReoksidacijaNADH do NAD+
za inteziviranje glikolize (brzo dobijanje ATP-a)aerobni put glikolize daje više ATP-aanaerobni put brže
2. Laktat u jetri –za resintezu glukoze
Izoenzimi LDH kod sisara
M4
M3H
M2H2
MH3
H4
U skeletnim mišićima i jetriNiska KM za piruvatNema inhibicije piruvatom
U srčanom mišićuViša KM za piruvatAlosterna inhibicija piruvatom
• Tetramerni enzim
• Dva tipa subjedinica:
– M (mišićni tip) u tkivima – povremeno pod anaerobnim uslovima
– H (srčani tip) – u izrazito aerobnim tkivima
ALKOHOLNO VRENJE – ĆELIJE KVASCA
(koenzim TPP)
ENERGETIKA GLIKOLIZE
Glukoza 2 laktat + 2H+
Go’ = +61 kJ/mol glukoze2 ADP + 2Pi 2 ATP
Go’ = -196 kJ/mol glukoze
Efikasnost glikolize = 61/196 = 0,31
• (31% oslobođene energije iskorišćeno je za sintezu ATP-a)
• Pod realnim uslovima u ćeliji (uz realne koncentracije intermedijera), efikasnost glikolize je veća nego pod standardnim uslovima, i iznosi oko 59%
Regulacija glikolize: Promene slobodne energije u glikolitičkim reakcijama
(eritrociti)
Glu
koz
a G6
P
F6
P
FD
P
DH
AP
GA
P
3P
G
2P
G
PE
P
Piruvat
Heksokinaza
PFK
PK
G
GLAVNI MODULATORI ALOSTERNIH GLIKOLITIČKIH ENZIMA
Uticaj alosternih modulatora na aktivnost PFK-1
ATP – alosterni inhibitor PFKAMP - alosterni aktivator PFKUdruženi efekti ATP-a i AMP-avažni za mišićne ćelije:
Brza nadoknada ATP-a u mišićima: CK
kreatin+ATP↔fosfokreatin+ADP AK
2ADP↔ATP+AMP
Pad ATP-a za 10%
Porast AMP-a 4x
↑ PFK-1
↑ glikolize
Stvaranje F2,6Pnajmoćniji alosterni aktivator PFK-1
Bifunkcionalni enzim:Jedan aktivni centar – fosfofruktokinaza -2 ( PFK-2)Drugi aktivni centar – fruktoza-difosfataza ( FDP-aza)
Glukoza ↑
Glukagon ↓
cAMP ↓
Defosforilacija enzima(aktivacija PFK-2)
F2,6DP ↑
Aktivnost PFK-1 ↑
Stimulacija glikolize
Glukoza ↑
Glukagon ↓
cAMP ↓
Defosforilacija enzima(aktivacija PFK-2)
F2,6DP ↑
Aktivnost PFK-1 ↑
Stimulacija glikolize
Alosternaregulacija
PFK-2:hormonska
GLUKAGON
PFK-2 aktivnadefosforilisana
FDP aktivnafosforilisana
Glukoza ↓
Glukagon ↑
cAMP ↑
Fosforilacija enzima(aktivacija FDP-aze)
F2,6DP ↓
Aktivnost PFK-1 ↓
Inhibicija glikolize
Glukoza ↓
Glukagon ↑
cAMP ↑
Fosforilacija enzima(aktivacija FDP-aze)
F2,6DP ↓
Aktivnost PFK-1 ↓
Inhibicija glikolize
KATABOLIZAM GLIKOGENA (GLIKOGENOLIZA)
1. Glikogen-fosforilaza (fosforilaza) -piridoksal fosfat-
Glikogen(n ostataka) + G1P+ Pi
Glikogen(n-1 ostataka)
Odvajanje ostataka glukoze:
2. Fosfoglukomutaza (PGM)
Glukoza-1-fosfat(G1P)
Glukoza-6-fosfat(G6P)
PGM
3. Enzim razgranjavanja glikogena (14)transglikozilaza
SUDBINA GLUKOZA-6-FOSFATA (G-6P)
Mišići: nastavak razlaganja G-6P glikolizom
Jetra: direktno dobijanje glukoze (Glukoza-6-fosfataza)
G-6Pazaglukoza-6-fosfat + H2O glukoza + H3PO4
Regulacija aktivnosti glikogen fosforilaze Fosforilacija/defosforilacija enzima, alosterna regulacija
NEAKTIVNA AKTIVNA
HORMONSKA KONTROLA GLIKOGEN FOSFORILAZE
Glukoza u krvi ↓
Glukagon (jetra) ↑Adrenalin, noradrenalin (nadbubreg) ↑
AC
cAMP ↑ (ATP cAMP + PPi)
cAMP
PKA ↑ (PKA cAMP-reg.j + aktivana PKA)
Fosforilaza kinaza – P aktivna
Glikogen fosforilaza - P aktivna
GLIKOGENOLIZA ↑
Kaskadnisistem fosforilacije/defosforilacijeenzima i proteina koji učestvuju uregulacijikatabolizma glikogena
NEAKTIVNA AKTIVNA
KALMODULIN(mišići)
AKTVACIJA
INHIBICIJA
cAMP-zavisna fosforilacija inhibitora (ADRENALIN i GLUKAGON)
ADRENALIN i GLUKAGON
INSULIN aktivira
KATABOLIZAM FRUKTOZE
KATABOLIZAM GALAKTOZE
KATABOLIZAM MANOZE
FOSFOGLUKONATNI PUT
• Fiziološke funkcije
– Stvaranje NADPH
– Stvaranje riboze
– Stvaranje i degradacija šećera sa različitim brojem C-atoma (od 3 do 7)
3G6P + 6NADP+ + 3H2O 6NADPH + 6H+ + 3CO2 + 2F6P + GAP
FAZE FOSFOGLUKONATNOG PUTA
1. Oksidativna faza
3G6P + 6NADP+ + 3H2O 6NADPH + 6H+ + 3CO2 + 3Ru5P
2. Faza izomerizacije/epimerizacije pentoza
3Ru5P R5P + 2Xu5P
3. Reakcije transaldolaze i transketolaze
R5P + 2Xu5P 2F6P + GAP
3 Glucose-6-Phosphate + 6 NADP+
+ 3 H2O
--->
2 Fructose-6-Phosphate + Glyceraldehyde-3-Phosphate + 6 NADPH + 6 H+ + 3 CO2
Glucose-6-phosphate
6-Phosphogluconolactone
6-Phosphogluconate
Ribulose-5-phosphate
Xylulose-5-phosphate + Ribose-5-phosphate
Glyceraldehyde-3-P + Sedoheptulose-7- P
Erythrose-4-P + Fructose-6-P
+
3
3
Fructose-6-phosphate
Glyceraldehyde-3-P
Regulacija fosfoglukonatnog puta
• Glavno mesto regulacije je reakcija G6PDH
– aktivator: NADP+
• Tok fosfoglukonatnog puta se prilagođava potrebama ćelije za NADPH, odnosno za ribozom
– samo NADPH:
višak riboze se reciklira do G6P
– samo riboza:
zaobilazi se oksidativna faza, riboza se stvara od glikolitičkih intermedijera F6P i GAP reakcijama treće faze u obrnutom smeru