kelompok 6_coombs’ test
DESCRIPTION
Tranfusi DarahTRANSCRIPT
![Page 1: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/1.jpg)
COOMBS’ TESTTes untuk mendeteksi adanya antibodi tidak sempurna (incomplete antibody ) yang diabsorpsi oleh eritrosit dengan jalan mereaksikan anti IgG dan anti komplemen dengan eritrosit yang sudah tersensitisasi terjadi hemaglutinasi.
Coombs Test ini terbagi menjadi :1. Direct Coombs test (direct antiglobulin tes (DAT))2. Indirect Coombs test (indirect antiglobulin tes (IAT))
![Page 2: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/2.jpg)
Direct Coombs TestPemeriksaan ini untuk mendeteksi antibodi inkomplit yang menyelimuti sel darah merah pasien secara invivo.
DCT dilakukan misalnya pada indikasi kasus : HDN ( Hemolytic Disease of the Newborn )AIHA ( Autoimmune Hemolytic Anemia )Reaksi transfusi hemolytikDrug Induced Hemolytic Anemia
![Page 3: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/3.jpg)
Indirect Coombs TestPemeriksaan ini digunakan untuk mendeteksi anti antibodi eritrosit atau incomplete antibody IgG dalam serum pasien secara in vitro.
ICT dilakukan pada indikasi :Skrining AntibodiDeteksi Ab IgGPada cross match (reaksi silang)
![Page 4: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/4.jpg)
Alat dan BahanPeralatan :
Inkubator (waterbath) 37° C SentrifugeMikroskopRak tabungTabung reaksiPipet pasteurBotol semprotObject glassDeck glassWadah limbah
![Page 5: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/5.jpg)
Reagensia : Sel golongan darah O atau yang segolongan
5% Coomb’s Control Cell Positive (CCCP) Bovine albumin 22 % Coomb’s serum ( AHG) Saline
Persiapan reagensia : Reagen dibiarkan pada suhu kamar Dicatat Batch No. Dan tanggal kedaluarsa
![Page 6: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/6.jpg)
Prosedur1. Direct Coomb’s Test
Disiapkan 2 buah tabung, masing-masing ditambah 1 tetes suspensi eritrosit 5%
Suspensi eritrosit 5% dicuci 3-4 kali dengan saline
Setelah dicuci, tabung 1 ditambah dengan 2 tetes AHG sedangkan tabung 2 ditambah dengan 2 tetes saline sebagai kontrol negatif
Diputar 1000 rpm selama 1 menit Dibaca hasilnya secara makroskopis dan
mikroskopis Kepada hasil yang negatif, ditambah 1 tetes CCC
dan diputar kembali 1000 rpm selama 1 menit
![Page 9: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/9.jpg)
2. Indirect Coomb’s Test
Disiapkan satu buah tabung, dimasukkan 2 tetes serum/plasma
Ditambah 1 tetes suspensi eritrosit 5% segolongan atau golongan O, dihomogenkan
Diinkubasi pada suhu 37° C selama 15 – 60 menit atau (dapat ditambah 2 tetes BA 22% dan diputar 1000 rpm selama 1 menit, lalu dibaca hasil reaksinya kemudian diinkubasi pada suhu 37° C selama 15 menit dan diputar lagi 1000 rpm selama 1 menit).
![Page 10: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/10.jpg)
Suspensi eritrosit dicuci dengan saline 3-4 kali, pada pencucian terakhir saline dibuang senyak-banyaknya untuk mencegah terjadinya pengenceran Coomb’s serum
Setelah dicuci, ditambah 2 tetes Coomb’s serum/ AHG lalu diputar 1000 rpm selama 1 menit
Dibaca hasilnya secara makroskopis dan mikroskopis
Kepada hasil yang negatif, ditambah 1 tetes CCC dan diputar kembali 1000 rpm selama 1 menit.
![Page 13: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/13.jpg)
Pembacaan Hasil1. Anaglutinasi : Tidak ada incomplete
antibody
2. Aglutinasi : Ada kemungkinan Incomplete antibody dalam serum pasien atau plasma donor
![Page 14: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/14.jpg)
Pelaporan Hasil
1. DCT : negatif / positif
2. ICT : negatif / positif
![Page 15: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/15.jpg)
PembahasanTujuan pencucian eritrosit dengan salin adalah menghilangkan globulin plasma yang tidak bersifat antibodi spesifik
Beberapa penyebab Coomb’s Test diperoleh hasil negatif palsu, yaitu : - pencucian eritrosit sebelum penambahan Coomb’s serum
kurang sempurna sehingga masih terdapat sisa globulin yang akan menetralkan Coomb’s serum- Saline terkontaminasi oleh protein / globulin- Lupa menambahkan Coomb’s serum
Diperlukan Coombs Control Cells (CCC)
![Page 16: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/16.jpg)
Incomplete antibody disebut juga antibodi tak lengkap, biasanya merupakan IgG. Yang termasuk kedalam antibodi tak lengkap antara lain anti-Rh, anti Kid, anti Daffy, anti Kell. Antibodi ini tidak mempunyai kemampuan untuk menyebabkan aglutinasi secara langsung dari eritrosit-eritrosit tsb tanpa penambahan fase antiglobulin
Complete antibody disebut juga antibodi lengkap, biasanya merupakan IgM. Yang termasuk kedalam antibodi lengkap antara lain anti-A, anti-B, anti Lewis.Antibodi ini mampu menyebabkan aglutinasi langsung ( direk ) terhadap eritrosit-eritrosit yang tersuspensi di dalam medium saline.
![Page 17: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/17.jpg)
CCCP digunakan sebagai kontrol positif pada pemeriksaan Coomb’s test, untuk mengetahui validasi reagen dan kebenaran proses dalam pemeriksaan.
Coomb’s serum (AHG / anti IgG C3d) digunakan untuk membantu terjadi aglutinasi.
![Page 18: Kelompok 6_coombs’ Test](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022082403/5695d4441a28ab9b02a0da8b/html5/thumbnails/18.jpg)
TERIMA KASIH