Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetéseaz Európai Unió új társadalmi kihívásainaka Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni EgyetemenAzonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

KLINIKAI KIPRÓBÁLÁS (3)

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetéseaz Európai Unió új társadalmi kihívásainaka Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni EgyetemenAzonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Dr. Pongrácz JuditHáromdimenziós szövettenyésztés és „tissue engineering”- 25. Előadás

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Tissue engineering útján készült vérerek (TEBV)• TE útján előállított vérerek az alacsony nyomású tüdő keringésben

használatosak• Az ilyen vénák nem elég ellenállóak ahhoz, hogy az arteriális

nyomásnak ellenálljanak

Kisvénákkivétele

Sejtek polimerrenövesztése

Sejtek izolálása

Sejtek felszaporítása

Tissue-engineering útján készült graft

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

TEBV előállítása

• Teljesen biológiai módon, tissue-engineered humán véredények (Nicolas L'heureux, Stéphanie Pâquet, Raymond Labbé, Lucie Germain, and François A. Auger) FASEB Journal 1998

• HUVEC-t és SMC-t használtak

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Miokardiális infarktus

• Őssejteket használnak olyan esetben, amikor nagy területet érint a károsodás

• A legtöbb esetben javulás mutatkozik, de további vizsgálatokra van szükség

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Húgyvezeték és húgyhólyag

• Sejtmentes, kollagén-alapú mátrixok• Bélből vagy húgyhólyagból származó

epitéliális sejtek• 4-7 évvel később 40 betegből 34 betegnél

javulás volt észlelhető

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Porc

• Eddig két, többközpontú klinikai kipróbálás történt

• A legtöbb esetben javulást tapasztaltak• Hosszú távú hatások még feldolgozás alatt

állnak

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Tüdő

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Trachea - bronchusok - tüdő

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Tüdőbetegségek, amelyekre a sejtes terápiák jótékony hatással lehetnek

• COPD (chronic obstuctive pulmonary disease)• ARDS (acute respiratory distress syndrome)• Asztma• Mechanikai szöveti károsodás

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Stratégiák sejtalapú tüdő terápiákhoz

Tüdő epithéliumszerű sejtek

Embrionális őssejtek

Sejtkultúra

Szelekció(genetikai, levegő-folyadék határ, medium ko-kultúra)

Epithélium Ér

Stroma (fibroblaszt)

ESC-k, MSC-k, Fibrociták

Akut sejtvédelem/javítás(túlélési, növekedési faktorok)

Porc

Tracheán belüli/Vaszkuláris infúzióSzerkezeti graft

Engraftment GéntranszferTerápiás molekulák bevitele

Engraftment

Organoid

Funkcióképes egység

Endotélium

Tüdő epitélium

Mezenchima

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

A tüdő komplex struktúráinak kifejlődése egérben

Hengeres sejt

Fibroblasztok

Goblet sejt

Bazális sejt

Csillós sejt Clara sejtI –es

típusúsejt

II-estípusú

sejt

I.Embrionális

E 9-12

II.Pszeudoglanduláris

E 12-15

III.Canaliculáris

E 15-E17

IV.Sacculáris

E 17-Születésig (Sz)

V.Alveoláris

Sz-Sz. után 20 nap

Tüdő rügy

Es EsT T

KUTATÁSBAN VALÓ FELHASZNÁLÁS, DROG TESZTELÉS

Az orvosi biotechnológiai mesterképzés megfeleltetéseaz Európai Unió új társadalmi kihívásainaka Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni EgyetemenAzonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Dr. Pongrácz JuditHáromdimenziós szövettenyésztés és „tissue engineering” – 26. Előadás

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Kutatási felhasználás

• Sejtek közötti interakció• Jelátvitel útvonalak vizsgálata (inter- és intra-

celluláris)• Regenerációs folyamatok vizsgálata• Betegségek modellezése

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Tímusz reaggregáció

E15 egér embrió

T-limfociták vagylimfoid progenitorok

Deoxiguanozinnalkezelt kultúrák

Tímusz epitéliális sejtek

E15 tímusz lebenyek

Reaggregátum

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Notch jelátvitel vizsgálata tímusz kultúrákban

Intracelluláris Notch(ICN)

• Nincs T-sejt irányú elköteleződés• B-sejt irányú elköteleződés

• T-sejt irányú elköteleződés• B-sejt irányú elköteleződés gátolt

Sejtmag

Stroma sejt

Limfocita progenitor

Jagged/Delta-like

CSLCSL

KoR KoA

Preseniling-Szekretáz

KoR

(ICN)

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Nyálmirigy aggregátum

GFP-Ad FoxN1-Ad

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Szövetspecifikus változások

• Transzkripciós faktorok és más gének expressziója könnyen módosítható

• A génexpresszió módosulások szövettípushoz kötöttek

• A teljes szövetre kifejtett hatásokat morfológiai, sejt interakció és jelátvitel szintjén lehet vizsgálni

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Drog tesztelés

• Toxicitás tesztek• Hatékonyság tesztek

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Máj toxicitási tesztek

• Tisztított primer humán májsejtek 2D kultúrában

• Komplex, 3D máj mikroszövetkék• Toxicitási vizsgálatok (akut és krónikus)• Viabilitási vizsgálatok• Epe termelés• Molekuláris markerek tesztelése (albumin

stb.)

TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011

Drog tesztelés tüdőmodellen

• Komplex sejt összetétel• Fiziológiáshoz közeli drog transzporter

expresszió• Reprodukálhatóság• Akalmas HTS-re