kp nyimas i.adlini
TRANSCRIPT
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 1/23
Oleh
Nyimas I. Adlini
0903135513
Pembimbing Jurusan
Bernadeta Leni Fibriarti M.Si
NIP. 197202172000032001
Koordinator Kerja Praktek
Dr. Mayta Novaliza Isda.M.Si
NIP. 197005231997032001
Koordinator Kerja Praktek
Dr. Herman. Sp. M.Sc
NIP. 197206292008121001
Pembimbing Lapangan
Martarina S.Si
NIP. 197103261996032001
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 2/23
Pangan jajanan anak sekolah (PJAS) memegangperanan penting karena menjadi salah satu penyumbangsumber asupan gizi bagi anak-anak saat disekolah
Namun PJAS juga memiliki
potensi masalah
Salah satunya bahaya mikrobiologi yangdisebabkan oleh mikroba yang seringmenyebabkan keracunan pangan
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 3/23
TUJUAN
Mempelajari dan memahami praktek pengujian secara
mikrobiologi Angka Lempeng Total (ALT), MPN Coliform, MPN
Escherichia coli , Angka Staphylococcus aureus , Salmonella, dan
Angka Kapang/Khamir pada pangan jajanan anak sekolah (PJAS)
di Balai Besar Pengawas Obat dan Makanan (BBPOM).
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 4/23
Kerja praktek (KP) inidilaksanakan terhitung mulaitanggal 26 Maret s/d 30 Maret2012
Waktu Tempat Kegiatan
Bertempat di LaboratoriumMikrobiologi Balai BesarPengawas Obat dan Makanan(BBPOM) Wilayah Pekanbaru
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 5/23
Tahu IsiSiomay Lontong Lontong Sate
Minumanberwarna dan
sirup
Minumanberwarnaorange
Es
Kudapan
Es manisorange
Siomay A Siomay B
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 6/23
Parameter
Uji
Mikrobiologi
PJAS
UjiAngka
LempengTotal
Uji
Angka Kapang/ Khamir
UjiSalmonella
Uji AngkaStaphylococc
us aureus
Uji MPN Escherichia
coli
Uji
MPN Coliform
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 7/23
Pereaksi Khusus
Media padat
Plate Count Agar (PCA-1%)Pengencer
Pepton Dilution Fluid (PDF)
Pereaksi
Triphenyl Tetrazolium Chloride (TTC suhu 45° C)
Peralatan Khusus
Stomacher
Pipet Volume
Alat hitung koloni
Incubator 35-37°C
Prosedur
1. Homogenisasi sampel
Ditimbang 25 gr
sampel
225 ml PDF
Kocok hingga homogen
sehingga diperoleh suspensi
pengenceran 10ˉ¹
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 8/23
2. Pengenceran
10ˉ¹
1 ml
9 ml PDF
10ˉ²
1 ml
10ˉ³
9 ml PDF
3. Inokulasi danInkubasi
1 ml 1 ml 1 ml
15-20 ml media PCA-1% & TTC suhu 45° C
Inkubasi pada suhu 35-37 ° C selama 24-
48 jam dengan posisi cawan dibalik
Jumlah koloni yang tumbuhdiamati dan dihitung
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 9/23
Pereaksi Khusus
Media
Baird Parker Agar + Egg Yolk Tellurite
(BPA-EY), Peptone Dilution Fluid (PDF)Pereaksi
Egg Yolk Tellurite
Peralatan Khusus
Stomacher
Pipet Volume
Alat hitung koloniBatang gelas bengkok
Prosedur Homogenisasi Sampel
Media BPA-EY
10ˉ¹ 10ˉ² 10ˉ³
0.3ml 0.3ml 0.4ml0.3ml 0.3ml 0.4ml
Media BPA-EY Media BPA-EY
0.3ml 0.3ml 0.4ml
Inkubasi pada suhu 35-37° C
selama 48 jam
Jumlah koloni yang
tumbuh dihitung
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 10/23
Pereaksi Khusus
Media Pengencer
Pepton Dilution Fluid (PDF), Mac Concey Broth (MCB), Ecsherichia coli Broth (ECB), Eosine Methilene Blue Agar
(EMBA), Nutrient Agar (NA), Tryptone Broth (TB), MR-
VP Medium, Simmon’s Citrate Medium (SCA).
Pereaksi
Larutan indol (Kovac’s), Larutan metal merah, larutan a-
naftol, Larutan KOH 40%
Peralatan Khusus
Stomacher
Pipet VolumeAlat hitung koloni
Incubator 37°C & 44.5° C
Tabung reaksi berisi
tabung durham
Prosedur
Homogenisasi Sampel
Pengenceran Uji Praduga
(presumptive
test) Meliputi 10 ml MCB 10 ml MCB 10ml MCB
1 ml 1 ml 1 ml10ˉ¹ 10ˉ² 10ˉ³
Inkubasi pada suhu 37° C
selama 24-48 jam
Catat adanya gas yang
terbentuk dalam tiap
tabung, menunjukkan hasil
uji positif
Lanjut ke uji
penegasan
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 11/23
Uji Penegasan (Confirmed test) Satu ose Satu oseSatu ose
10 mlECB
10 ml
ECB 10 mlECB
Inkubasi pada suhu 44.5° C selama 24-48 jam.
Catat adanya gas yang terbentuk dalam tiap tabung
yang menunjukkan hasil uji positif
Media
EMBA
Media
EMBA
Media
EMBA
Inkubasi pada suhu 35-37° C selama
24-48 jam
Diamati adanyakoloni yang
berbentuk bulat
berwarna hijau
dengan kilap logam
dan bintik hijau
ditengahnya
Inkubasi pada suhu
35-37° C selama
24 jam
Dilanjutan ke
tahap konfirmasi
melalui uji
biokimia (IMVIC) NA miring
Tahap Isolasi
Satu ose
Satu ose Satu ose Satu ose
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 12/23
Tahap Konfirmasi a. Uji Indol
NA miringInokulasikan
ke dalam
media TB
Teteskan
beberapa tetes
larutan indol,
dikocok
hingga
homogen
Reaksi positif
jika biakan
berwarna merah
dan terbentuk
cincin di atas
b. Uji Merah Metil
NA miringInokulasikan
ke dalammedia MR-
VP
Inkubasi pada
suhu 35-37° C
selama 24 jam
Diteteskan 5
tetes metil
merah, dikocok
hingga
homogen
Reaksi positif
jika biakan
berwarna merah
Inkubasi pada
suhu 35-37° C
selama 24 jam
Satu ose
Satu ose
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 13/23
c. Uji Voges Proskaeur
Inokulasikan
ke dalammedia MR-
VP
Inkubasi pada
suhu 35-37° C
selama 24 jam
Ditambahkan
0.2 ml KOHdan 0.6 ml a-
naftol, dikocok
hingga
homogen
Reaksi positif
jika biakanberwarna merah
muda hingga
berwarna merah
menyala
d. Uji Sitrat
Inokulasikan
ke dalammedia SCA
Inkubasi pada
suhu 35-37° C
selama 24 jam
Reaksi positif
jika biakan tetap
berwarna hijau
Satu ose
Satu ose
NA miring
NA miring
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 14/23
Pereaksi Khusus
Media pengencer
Pepton Dilution Fluid (PDF), Mac Concey Broth
(MCB), Brilliant Green Lactose Bile Broth (BGLB)
Peralatan Khusus
Stomacher
Pipet Volume
Alat hitung koloni
Incubator 37°CTabung reaksi berisi tabung
durham
Prosedur
Homogenisasi Sampel
Pengenceran
Uji Praduga
(presumptive
test)
Meliputi 10 ml BGLB 10 ml BGLB 10 ml BGLB
Satu ose Satu ose Satu ose
Inkubasi pada suhu 37° C
selama 24-48 jam
Catat adanya gas yang terbentuk
dalam tiap tabung, menunjukkanhasil uji positif
Uji Penegasan(Confirmed test) dirujuk ke
tabel MPN
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 15/23
Pereaksi Khusus
Media dan Pengencer
Buffered Peptone Water (BPW), Muller
Kaufmann Tetrathionate Novobiocin Broth
(MKTTn), Rappaport Vassiliadis Medium +
Soya (RVS), Bismuth Green Agar (BGA),
Xylose Lysine Desoxycholate (XLD)
Peralatan Khusus
Stomacher
Pipet volume
Inkubator 37 ° C ± 1° C
dan inkubator 41.5 ° C ± 1° C
225 ml BPW
Ditimbang 25 ml
sampel
Prosedur
1. Homogenisasi sampel & Pra pengkayaan non selektif
Dikocok hingga homogen dan
diinkubasi pada suhu 35-37° C
selama 24 jam.
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 16/23
2. Pengkayaan selektif
Biakan pra pengkayaan
1 ml 0.1 ml
10 ml
MKKTn10 ml
RVS
Inkubasi pada suhu 41.5-
42.5° C selama 24 jamInkubasi pada suhu 35-
37° C selama 24 jam3. Inokulasi
dan
identifikasi1 ose1 ose1 ose1 ose
Media
BGA
Media
XLD
Media
BGA
Media
XLD
Inkubasi pada suhu 37° C selama 24 jam
Koloni yang tumbuh diamati
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 17/23
Pereaksi Khusus
Media dan Pengencer
Pepton Dilution Fluid (PDF), Potato Detrosa Agar (PDA) yang ditambah kloramfenikol
Pereaksi
Kloramfenikol
Peralatan Khusus
Stomacher
Pipet ukuran mulut lebarAlat hitung koloni
Incubator 20-25°C
Prosedur
Homogenisasi Sampel
Pengenceran 10ˉ¹ 10ˉ² 10ˉ³
0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
Media PDA + Kloramfenikol
Inokulasi &Inkubasi
Meliputi
Inkubasi pada suhu 20-25° C
selama 120 jam
Jumlah koloni yang
tumbuh diamati dan
dihitung
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 18/23
Uji Sampel Hasil Syarat Keterangan
1. Angka Lempeng
total
Minuman Berwarna Orange 55/PKU/SD XIII/T1/12 14 x 10³ koloni/g contoh 2 x 10² koloni/g contoh TMS
Es Manis Orange
38/PKU/SD X/T1/12
81 x 10¹ koloni/g contoh Maks 1 x 10⁴ koloni/g
contoh
MS
Cimol
56/PKU/SD XIII/T1/12
14 x 10² koloni/g contoh 1 x 10⁴ koloni/g contoh MS
Lontong Sate
44/PKU/SD XII/T1/12
43 x 10⁴ koloni/g contoh
_
HPST
Lontong
50/PKU/SD XII/T1/12
14 x 10³ koloni/g contoh
_
HPST
Siomay A
35/PKU/SD X/T1/12
11 x 10⁶ koloni/g contoh
_
HPST
Siomay B
47/PKU/SD XII/T1/12
11 x 10⁷ koloni/g contoh
_
HPST
Tahu Isi siomay 46/PKU/SD XII/ T1/12 12 x 10⁴ koloni/g contoh
_
HPST
2. Angka
Staphylococcus
aureus
Minuman Berwarna Orange 55/PKU/SD XIII/T1/12 <10 koloni / g contoh 0 koloni g/ml contoh MS
Es Manis Orange
38/PKU/SD X/T1/12
<10 koloni / g contoh _ HPST
Cimol
56/PKU/SD XIII/T1/12
<10 koloni/g contoh Maks 1 x 10² koloni/g
contoh
MS
Lontong Sate
44/PKU/SD XII/T1/12
< 10 koloni/g contoh _ HPST
Lontong
50/PKU/SD XII/T1/12
< 10 koloni/g contoh _ HPST
Siomay A
35/PKU/SD X/T1/12
< 10 koloni/g contoh _ HPST
Siomay B
47/PKU/SD XII/T1/12
< 10 koloni/g contoh _ HPST
Tahu Isi siomay
46/PKU/SD XII/ T1/12
< 10 koloni/g contoh _ HPST
3 MPN E h i hi li Mi B O 55/PKU/SD < 3/g contoh HPST
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 19/23
3. MPN Escherichia coli Minuman Berwarna Orange 55/PKU/SD
XIII/T1/12
< 3/g contoh _ HPST
Es Manis Orange
38/PKU/SD X/T1/12
< 3/g contoh _ HPST
Cimol
56/PKU/SD XIII/T1/12
< 3/g contoh _ HPST
Lontong Sate44/PKU/SD XII/T1/12
< 3/g contoh _ HPST
Lontong
50/PKU/SD XII/T1/12
< 3/g contoh _ HPST
Siomay A
35/PKU/SD X/T1/12
< 3/g contoh _ HPST
Siomay B
47/PKU/SD XII/T1/12
< 3/g contoh _ HPST
Tahu Isi siomay 46/PKU/SD XII/ T1/12 < 3/g contoh _ HPST
4. MPN Coliform Minuman Berwarna Orange 55/PKU/SD
XIII/T1/12
> 1100/g contoh < 20 / g contoh TMS
Es Manis Orange
38/PKU/SD X/T1/12
43/g contoh 20 / g contoh TMS
5. Salmonella Minuman Berwarna Orange 55/PKU/SD
XIII/T1/12Negatif/25 g contoh
Negatif/25 g contoh MS
Es Manis Orange
38/PKU/SD X/T1/12Negatif/25 g contoh
Negatif/25 g contoh MS
6. Angka Kapang / Khamir Minuman Berwarna Orange 55/PKU/SD
XIII/T1/1211 x 10³ koloni/g contoh
Maks 1 x 10² koloni/g
contoh
TMS
Es Manis Orange
38/PKU/SD X/T1/12
8.6 x 10² koloni/g contoh _ HPST
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 20/23
Uji Staphylococcus aureus
Uji MPN Escherichia coli
Uji Indol Uji MR Uji VP Uji Sitrat
Hasil
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 21/23
Uji MPN Coliform Uji Salmonella
Media BGA
Media XLD
Uji Angka Kapang/Khamir
Kapang
Khamir
5/17/2018 KP Nyimas I.adlini - slidepdf.com
http://slidepdf.com/reader/full/kp-nyimas-iadlini 22/23
1. Sampel pangan jajanan anak sekolah (PJAS) yang memenuhisyarat untuk dikonsumsi berdasarkan ujia. Angka Lempeng Total : Es Manis Orange dan Cimol b. Angka Staphylococcus aureus : Minuman Berwarna Orangedan Cimol
c.Salmonella : Minuman Berwarna Orange dan Es ManisOrange.
2. Sedangkan sampel pangan jajanan anak sekolah {PJAS} yangtidak memenuhi syarat untuk dikonsumsi berdasarkan uji
a. Angka Lempeng Total : Minuman Berwarna Orangeb.MPN Coliform : Minuman Berwarna Orange dan Es ManisOrangec. Angka Kapang/Khamir : Minuman Berwarna Orange.