kromatografi maret 2012
DESCRIPTION
pengertian DLLTRANSCRIPT
![Page 1: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/1.jpg)
KROMATOGRAFIKROMATOGRAFI
WIWIN R KUNUSA S.Pd, M.SiWIWIN R KUNUSA S.Pd, M.Si
![Page 2: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/2.jpg)
Kromatografi…………………Kromatografi…………………
• “CHROMA” dan “GRAPHEIN”
WARNA MENULIS
MICHAELTSWE (1960) AHLI BOTANI RUSIA
![Page 3: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/3.jpg)
![Page 4: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/4.jpg)
Penetapan Kadar (Analsis Kuantitatif)
Pemurnian suatu senyawa
(Keperluan preparatif)
Keperluan Identifikasi (Analisis Kualitatif)
KEGUNAANKROMATOGRAFI
![Page 5: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/5.jpg)
A. Keperluan Identifikasi A. Keperluan Identifikasi (Analisis Kualitatif)(Analisis Kualitatif)
1.Mengungkapkan ada tidaknya senyawa tertentu dalam cuplikanContoh : pada KLT dilakukan dengan membandingkan senyawa murni dengan campuran
2. Memberi informasi mengenai kerumitan suatu campuran atau jumlah minimum komponen
3. Kemurnian suatu senyawa dapat dikaji
![Page 6: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/6.jpg)
B. Penetapan Kadar B. Penetapan Kadar (Analisis Kuantitatif)(Analisis Kuantitatif)
• Berapa banyak komponen yang ada
• Penetapan kadar cuplikan
Contoh : secara rutin, (pengendalian mutu industri dan pemantauan lingkungan) serta kimia klinik
![Page 7: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/7.jpg)
C. Pemurnian suatu senyawa C. Pemurnian suatu senyawa (Keperluan preparatif)(Keperluan preparatif)
• Untuk memperoleh komponen campuran dalam jumlah yang memadai dalam keadaan murni sehingga dapat dipakai untuk reaksi berikutnya
![Page 8: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/8.jpg)
Metode pemisahan yang didasarkan atas distribusi diferensial komponen sampel
diantara dua fasa yaitu fasa diam (stationary phase) dan fasa gerak (mobil phase)
PENGERTIAN KROMATOGRAFI
![Page 9: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/9.jpg)
• FASA DIAM….. “ Dapat berupa padatan atau cairan yang terikat
pada permukaan padatan (kertas atau suatu adsorben) yang berfungsi sebagai penyangga”
• FASA GERAK…..“ Dapat berupa cairan disebut eluen atau pelarut atau gas pembawa yang inert”
• Gerakan fasa gerak mengakibatkan terjadinya migrasi diferensial komponen-komponen dalam sampel
![Page 10: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/10.jpg)
FASA DIAM :FASA DIAM :Merupakan fasa yang tidak bergerak. Merupakan fasa yang tidak bergerak. Umumnya senyawa yang digunakan adalah Umumnya senyawa yang digunakan adalah
silica gel (SiOsilica gel (SiO22) dan alumina (Al) dan alumina (Al22OO33).).
• FASA GERAK
• Merupakan fasa yang bergerak melalui fasa diam dan membawa komponen-komponen yang akan dipisahkan.
• Fasa gerak adalah suatu pelarut organik atau campuran beberapa pelarut organik.
![Page 11: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/11.jpg)
• KROMATOGRAFI adalah :“ Suatu teknik/metode pemisahan fisik campuran komponen berdasarkan perbedaan migrasi dari masing-masing komponen pada fasa diam dibawah pengaruh fasa gerak”
![Page 12: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/12.jpg)
DASAR KROMATOGRAFIDASAR KROMATOGRAFI
“ Pemisahan berdasarkan perbedaan laju perpindahan (migrasi) zat-zat yang menyusun suatu sampel”
MEKANISME SAMPEL ???
![Page 13: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/13.jpg)
Kecenderungan molekul-molekulkomponen untuk bereaksi secara kimia
(penukar ion)
Kecenderungan molekul tereksklusi pada pori-pori fasa diam
Kecenderungan molekul komponen untuk melarut dalam cairan (fasa gerak)
Azas
partisi
Azas
partisi
Azas Pertukaran Ion
Azas Pertukaran Ion
Azas Size Exlusion
Azas Size Exlusion
SAMPEL
Azas Adsorpsi
Azas Adsorpsi
Kecenderungan molekul-molekul
Komponen untuk melekat pada
permukaan padatan halus
![Page 14: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/14.jpg)
Keuntungan Pemisahan Menggunakan Keuntungan Pemisahan Menggunakan Metode KromatografiMetode Kromatografi
Sampel
semi mikro dan makro)
Cukup selektif
waktu yang relatif singkat
Murah dan sederhana
HASILHASIL
![Page 15: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/15.jpg)
PERKEMBANGAN TEKNIK PERKEMBANGAN TEKNIK KROMATOGRAFIKROMATOGRAFI
• Tahun 1903,,Tswet,,
memisahkan pigmen dari hijau daun menggunakan CaCO3 (istilah kromatografi)
• Tahun 1967,,Huber,
memperkenalkan “Kromatografi cair Kinerja Tinggi (KCKT) “
![Page 16: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/16.jpg)
KLASIFIKASI KLASIFIKASI KROMATOGRAFIKROMATOGRAFI
KLASIFIKASI KROMATOGRAFI
![Page 17: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/17.jpg)
![Page 18: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/18.jpg)
Klasifikasi Kromatografi Berdasarkan Fasa Gerak
Klasifikasi Kromatografi Berdasarkan Fasa Gerak
1. KROMATOGRAFI CAIR (Liquid Chromatography)
2. KROMATOGRAFI GAS (Gas Chromatography)
![Page 19: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/19.jpg)
ZAT CAIR GAS
ZAT PADAT Kromatografi cair-padat (KCP)
Kromatografi Gas - Padat (KGP)
ZAT CAIR Kromatografi cair-Cair (KCC)
Kromatografi Gas – cair (KGC)
FASA GERAK
FASA
DIAM
![Page 20: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/20.jpg)
TEKNIK ANALISIS
Kromatografi Lapis Tipis
Kromatografi Lapis Tipis
Kromatografi KolomKromatografi Kolom
Kromatografi Cair ( HPLC)
Kromatografi Cair ( HPLC)
Kromatografi Gas(GC)
Kromatografi Gas(GC)
Kromatografi Superkritik (SFC)
Kromatografi Superkritik (SFC)
Kromatografi Kertas
![Page 21: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/21.jpg)
Kromatografi Berdasarkan Bentuk Kromatografi Berdasarkan Bentuk TempatTempat
1. Komatografi Kolom : Kromatografi kolom merupakan teknik pemisahan di mana tempat stasioner dalam tabung.
2. Kromatografi Planar yaitu kromatografi kertas dan kromatografi lapis tipis
![Page 22: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/22.jpg)
Gas ChromatographyDigunakan untuk menentukan komposisi kimia zat-zat yang tidak diketahui, seperti senyawa berbeda dalam bensin yang ditunjukkan oleh tiap-tiap puncak dalam grafik di bawah ini.
Paper ChromatographyDapat digunakan untuk memisahkan komponen-komponen tinta, pewarna, senyawa tumbuhan (klorofil), make-up, dan banyak zat lain
Liquid Chromatographydigunakan untuk identifikasi pigmen tumbuhan atau komponen lain
Thin-Layer ChromatographyMenggunakan lapisan tipis atau gelas kaca untuk memisahkan komponen kimia dan bahan lainnya
Contoh Chromatography
![Page 23: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/23.jpg)
KROMATOGRAFI PENUKAR ION(Kromatografi Cairan-Padatan)
KROMATOGRAFI EKSKLUSI(Kromatografi Cairan Padatan)
KROMATOGRAFI PARTISI(Kromatografi Cair-cair)
KROMATOGRAFI ADSORPSI(Kromatografi Cair - padat)
BERDASARKANBERDASARKAN MEKANISME PEMISAHANMEKANISME PEMISAHAN
BERDASARKANBERDASARKAN MEKANISME PEMISAHANMEKANISME PEMISAHAN
![Page 24: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/24.jpg)
![Page 25: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/25.jpg)
A.A. KROMATOGRAFI ADSORPSIKROMATOGRAFI ADSORPSI(Kromatografi Cair – Padat)(Kromatografi Cair – Padat)
Fasa diam berupa Fasa diam berupa padatan dan fasa padatan dan fasa gerak berupa cairan gerak berupa cairan atau gasatau gas
Zat terlarut Zat terlarut diadsorpsi oleh diadsorpsi oleh permukaan permukaan partikel padatanpartikel padatan
Contoh :Contoh : KLT)KLT)
![Page 26: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/26.jpg)
Proses AdsorpsiProses Adsorpsi• Adsorpsi adalah penyerapan pada
permukaan dan bukan penyerapan secara keseluruhan
• Adsorpsi pada permukaan melibatkan interaksi elektrostatik seperti ikatan hidrogen, penarikan dipol-dipol dan penarikan yang diinduksi oleh dipol-dipol
• Contoh : silika gel adanya gugus Si-O-Si dan Si-OH
![Page 27: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/27.jpg)
Mekanisme….Mekanisme….• Kepolaran zat/analit yang dipisahkan terhadap
fasa diam mempengaruhi kecepatan laju analit melalui permukaan fasa diam dalam kolom
• Solut akan bersaing dengan fasa gerak untuk berikatan dengan sisi-sisi polar pada permukaan adsorben
• Solut-solut polar, akan terikat kuat pada adsorben karenanya butuh fasa gerak yang cukup polar untuk mengelusinya
• Urutan polaritas solut-solut organik : alkana<alkena<alkena<aromatis<eter<ester<keton dan aldehid<tiol<amin dan amida<alkohol<fenol<asam-asam organik
![Page 28: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/28.jpg)
Adsorpsi solut oleh fasa diam atw Adsorpsi solut oleh fasa diam atw adsorben sangat tergantung pada :adsorben sangat tergantung pada :
1. Struktur kimia solut atau gugus kimia aktif yg dapat berinteraksi dengan solut
2. Ukuran partikel adsorben3. Kelarutan solut pada fasa gerak. Solut
yang semakin mudah larut dalam fasa gerak akan semakin mudah lepas dari fasa diam
![Page 29: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/29.jpg)
Kekurangan Metode KCPKekurangan Metode KCP
• Pilihan fasa diam terbatas
(Alumina, Selulosa, Silika gel, Karbon aktif, Magnesium silikat, resin2 polimerik)
• Koefisien distribusi untuk serapan seringkali tergantung pada kadar total, sehingga pemisahannya kurang sempurna
![Page 30: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/30.jpg)
KROMATOGRAFI PARTISIKROMATOGRAFI PARTISI(Kromatografi Cair-Cair)(Kromatografi Cair-Cair)
Zat terlarut akan akan terdistribusi ke dalam dua pelarut yang tidak Saling bercampur
Fasa diam berupa cairanFasa gerak berupa zat cair atau gas
Contoh :
Kromatografi Kertas
![Page 31: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/31.jpg)
Proses PartisiProses Partisi
• Partisi merupakan proses yang analog dengan ekstraksi pelarut
• Fasa diam cair diikatkan pada padatan lapis tipis yang lemban (inert)
• Fase diam berada dalam kolom disebut kromatografi kolom
![Page 32: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/32.jpg)
Keuntungan Metode PartisiKeuntungan Metode Partisi(Kromatografi cair-cair)(Kromatografi cair-cair)
• Pilihan kombinasi cairan cukup banyak
• Koefisien distribusinya tidak tergantung pada konsentrasi, sehingga hasil-hasil pemisahannya lebih tajam.
![Page 33: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/33.jpg)
KROMATOGRAFI PENUKAR IONKROMATOGRAFI PENUKAR ION(Kromatografi Cair-Padat)(Kromatografi Cair-Padat)
Fasa Diam berupa padatan polimer (resin organik) dg gugus2 tetapFasa gerak berupa cairan
Mekanisme pemisahan berdasarkan Kesetimbangan pertukaran ion
Contoh : proses pembuatanAir minum
![Page 34: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/34.jpg)
Mekanisme PemisahanMekanisme Pemisahan
• Metode ini kebanyakan digunakan pada pemisahan bahan-bahan anorganik,baik anion2 atau kation2, dan pemisahan asam-asam amino
• Pemisahan terjadi karena pertukaran ion-ion dalam fasa diam
• Solut-solut ion dalam fasa gerak dapat bertukar dengan ion-ion yang bermuatan sama pada fasa diam
• Mekanisme pemisahan didasarkan pada perbedaan kekuatan interaksi ion terlarut dengan resin
![Page 35: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/35.jpg)
1.Resin penukar kation1.Resin penukar kationasam kuat mengandung gugus fungsi asam asam kuat mengandung gugus fungsi asam teradisi pada cincin aromatik dr resin. Penukar teradisi pada cincin aromatik dr resin. Penukar kation mengandung gugus asam sulfonat kation mengandung gugus asam sulfonat (-SO(-SO33H)H)
2.Resin penukar Anion :
Prinsipnya anion hidroksil ditukarkan dgn anion lain.
Jenis resin memiliki gugus basa kuat dan basa lemah
![Page 36: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/36.jpg)
PERTUKARAN ION
![Page 37: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/37.jpg)
KROMATOGRAFi EKSKLUSIKROMATOGRAFi EKSKLUSI1. Teknik pemisahan
didasarkan atas ukuran molekul zat
terlarut
2. Molekul-molekul zat terlarut
dengan ukuran lebih besar dari pori-pori fasa diam akan
tertahan
Contoh : Kromatografi filtrasi gel
![Page 38: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/38.jpg)
Mekanisme PemisahanMekanisme Pemisahan
• Pemisahan didasarkan atas ukuran molekul dari fasa diam, berupa (penyaring molekul) suatu gel dengan permukaan berpori kecil yang inert.
• Fasa gerak : cairan
• Kromatografi ini dipengaruhi oleh perbedaan bentuk struktur dan ukuran molekul.
![Page 39: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/39.jpg)
BENTUK MOLEKUL FASA DIAM GEL
![Page 40: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/40.jpg)
KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
![Page 41: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/41.jpg)
TEORI DASAR KROMATOGRAFI
![Page 42: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/42.jpg)
Beberapa Pengertian UmumBeberapa Pengertian Umum Pada Kromatografi Pada Kromatografi
• Koefisien Distribusi• Migrasi dan Retensi Solut• Waktu Retensi (tg)• Volume Retensi (VR)• Faktor kapasitas (k’)• Faktor selektifitas• Bentuk pita dan pelebaran pita• Teori Plat• Difusi Eddy
![Page 43: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/43.jpg)
KOEFISIEN DISTRIBUSIKOEFISIEN DISTRIBUSI
• Distribusi dari molekul-molekul sampel diantara dua fase ditentukan oleh tetapan kesetimbangan yang dikenal “Koefisien Distribusi”
K = koefisien partisiCs =konsentrasi sampel dalam fase diamCm = konsentrasi sampel dalam fase gerak
m
s
C
CK
![Page 44: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/44.jpg)
LAJU MIGRASI KOMPONENLAJU MIGRASI KOMPONEN
• Keefektifan proses kromatografi dlm memisahkan campuran tergantung pada laju migrasi komponen dalam koefisien distribusi dua fasa
m
s
V
VK
uk
uikomponenlajuMigras
1
1
1
11
![Page 45: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/45.jpg)
Laju Migrasi ditentukan oleh : Laju Migrasi ditentukan oleh :
1.Kecepatan fasa gerak
2.Perbandingan volum fasa diam dan fasa gerak
3.Koefisien distribusi
![Page 46: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/46.jpg)
Waktu Retensi (tWaktu Retensi (tRR))
Merupakan waktu yang diperlukan solut Merupakan waktu yang diperlukan solut untuk keluar dari kolom dan mencapai untuk keluar dari kolom dan mencapai detektordetektor
Volum Retensi (VR)Merupakan volum fasa gerak yang diperlukan untuk mengelusi komponen sampel keluar kolom
Volum = Waktu x Laju AlirV = tg x F
t = L/laju migrasi = L/u( 1 + K’) = tM(1 + K’)
![Page 47: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/47.jpg)
Faktor Kapasitas(kFaktor Kapasitas(k’’))
• Menggambarkan laju migrasi komponen didalam kolom
• Kapasitas(k’) perbandingan mol solut didalam fasa diam terhadap mol solut didalam fasa gerak
m
s
mm
ss
V
VK
CC
VCk '
![Page 48: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/48.jpg)
Faktor Selektivitas (Faktor Selektivitas (αα))
• Faktor yang merupakan ukuran bagi distribusi relatif komponen diantara fasa diam dan fasa gerak
A
B
K
K
![Page 49: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/49.jpg)
Bentuk Pita dan Pelebaran PitaBentuk Pita dan Pelebaran Pita
• Pada kromatografi ideal, bentuk pita (puncak) kromatogram yang diperoleh berupa puncak-puncak yang sangat sempit, terpisah satu sama lain
• Pelebaran pita diperoleh sebagai hasil penjumlahan gerakan acak sejumlah besar partikel2 solut pada saat bergerak sepanjang kolom
![Page 50: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/50.jpg)
Resolusi (R)
• Merupakan ukuran apakah seuatu senyawa terpisah secara baik atau tidak dengan senyawa lain
![Page 51: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/51.jpg)
KROMATOGRAFI KROMATOGRAFI KOLOMKOLOM
![Page 52: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/52.jpg)
Kromatografi KolomKromatografi Kolom
Kromatografi kolom adalah kromatografi yang menggunakan kolom sebagai alat untuk memisahkan komponen-komponen dalam campuran.
![Page 53: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/53.jpg)
Prinsip Kerja Prinsip Kerja • Didasarkan pada absorbsi komponen2
campuran dengan afinitas berbeda terhadap permukaan fase diam.
• Absorben bertindak sebagai fase diam dan fase geraknya adalah cairan yang mengalir membawa komponen campuran sepanjang kolom.
• Sampel yang mempunyai afinitas besar terhadap absorben akan secara selektif tertahan dan afinitasnya paling kecil akan mengikuti aliran pelarut.
![Page 54: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/54.jpg)
Tujuan …Tujuan …
• Kromatografi kolom bertujuan untuk mengisolasi komponen sampel dari campurannya.
![Page 55: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/55.jpg)
Cara Penggunaan Cara Penggunaan Kromatografi KolomKromatografi Kolom
1. Sampel yang dilarutkan dalam sedikit pelarut, dituangkan melalui atas kolom dan dibiarkan mengalir ke dalam adsorben (bahan penyerap).
2. Komponen dalam sampel diadsorbsi dari larutan secara kuantitatif oleh bahan penyerap berupa pita sempit pada permukaan atas kolom.
3. Dengan penambahan pelarut secara terus menerus, masing-masing komponen akan bergerak turun melalui kolom dan akan terbentuk pita yang setiap zona berisi satu macam komponen.
4. Setiap zona yang keluar kolom dapat ditampung dengan sempurna sebelum zona yang lain keluar kolom.
![Page 56: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/56.jpg)
• Dalam proses pemisahan dengan kromatografi kolom, adsorben silika gel harus senantiasa basah karena, jika dibiarkan kering, kolom yang terbentuk dari silika gel bisa retak, sehingga proses pemisahan zat tidak berjalan optimal.
• Selain itu, kondisi yang senantiasa basah berperan untuk memudahkan proses elusi (larutan melewati kolom) dalam kolom.
![Page 57: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/57.jpg)
![Page 58: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/58.jpg)
![Page 59: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/59.jpg)
Rangkaian Alat KolomRangkaian Alat Kolom
![Page 60: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/60.jpg)
Pembentukan pita Pembentukan pita
![Page 61: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/61.jpg)
KROMATOGRAFI GASKROMATOGRAFI GAS
![Page 62: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/62.jpg)
Dasar Pemisahan (GC)Dasar Pemisahan (GC)
“ Penyebaran cuplikan diantara dua fasa”
![Page 63: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/63.jpg)
Kromatografi GasKromatografi GasKromatografi gas adalah proses pemisahan campuran menjadi komponen- komponennya dengan menggunakan gas sebagai fase bergerak yang melewati suatu lapisan serapan (sorben) yang diam.
![Page 64: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/64.jpg)
Kromatografi Gas adalah teknik untuk memisahkan senyawa atsiri dalam fase gas melalui fase diam.
• Bila fase diam berupa zat padat, kita sebut cara itu sebagai kromatografi gas-padat.
• Bila fase diam berupa zat cair, kita sebut cara itu sebagai kromatografi gas-cair.
![Page 65: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/65.jpg)
Syarat cuplikan:> harus memiliki keatsirian yang cukup (Volatil)> stabil terhadap panas.
![Page 66: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/66.jpg)
Bagian dasar kromatografi gas :1. Sistem gas pembawa2. Sistem pemasukan cuplikan3. Sistem pemanasan kolom4. Kolom5. Sistem deteksi6. Sistem pengolah data
![Page 67: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/67.jpg)
Prinsip Kerja Prinsip Kerja Kromatografi GasKromatografi Gas
• Gas pembawa (biasanya menggunakan helium, argon / nitrogen) dengan tekanan tertentun dialirkan secara konstan melalui kolom yang berisi fase diam.
• Komponen sampel akan terabsorbsi oleh fase dim dengan kecepatan berbeda.
![Page 68: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/68.jpg)
Gambar Kromatografi Gambar Kromatografi gasgas
![Page 69: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/69.jpg)
![Page 70: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/70.jpg)
Colom GCColom GC
![Page 71: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/71.jpg)
![Page 72: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/72.jpg)
![Page 73: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/73.jpg)
![Page 74: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/74.jpg)
![Page 75: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/75.jpg)
![Page 76: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/76.jpg)
Prinsip Kromatografi GasPrinsip Kromatografi Gas
![Page 77: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/77.jpg)
![Page 78: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/78.jpg)
![Page 79: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/79.jpg)
![Page 80: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/80.jpg)
![Page 81: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/81.jpg)
Cara Penggunaan Cara Penggunaan Krromatografi GasKrromatografi Gas
1. Sampel diinjeksikan ke injektor yang suhunya telah diatur.
2. Setelah sampel menjadi uap, akan dibawa oleh aliran gas pembawa menuju kolom.
3. Sehingga komponen akan terabsorbsi oleh fase diam sampai terjadi pemisahan.
4. Komponen yang terpisah menuju detektor akan menghasilkan sinyal listrik yang besarnya proporsional.
5. Sinyal listrik tersebut akan diperkuat oleh amplifier.6. Kromatogram akan dicatat oleh rekorder berupa
puncak.
![Page 82: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/82.jpg)
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI = HPLCTINGGI = HPLC
(High Performance Liquid (High Performance Liquid ChromatogrphyChromatogrphy
![Page 83: Kromatografi Maret 2012](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061500/5695d0f91a28ab9b0294a4bc/html5/thumbnails/83.jpg)
Fasa Terbalik/SungsangFasa Terbalik/Sungsang(Reversed Phase)(Reversed Phase)
• Fasa Diam Polar
• Fasa Diam Non-Polar
• Prinsip Dasar :
Perbedaan hidrofobisitas dari analit-analit yang dipisahkan pada sistem kesetimbangan fasa diam dan fasa gerak
Normal Phase
Reversed phase