laporan tetap mikrobiologi umum isolasi.docx
TRANSCRIPT
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
1/12
LAPORAN TETAP
PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI UMUM
TEKNIK ISOLASI DAN PEMURNIAN MIKROBA
Oleh :
Ernita Nurliani
05031!1"1#0#1
PROGRAM STUDI TEKNOLOGI $ASIL PERTANIAN
%URUSAN TEKNOLOGI PERTANIAN
&AKULTAS PERTANIAN
UNI'ERSITAS SRI(I%A)A
015BAB 1
PENDA$ULUAN
1*1* Latar Bela+an,
Biakan murni bakteri adalah biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri
yang ditumbuhkan dalam medium buatan. Teknik biakan murni untuk suatu
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
2/12
spesies dikenal dengan beberapa cara yaitu cara penggoresan, cara penuangan,
cara pengenceran. Cara penggoresan lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut
ekonomi dan waktu, tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan.
Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah tetapi
kelemahan dari cara ini adalah bakteri-bakteri anareob tidak dapat tumbuh. Cara
ini terbagi menjadi 4 yaitu, goresan T, goresan kuadran, goresan radian, goresan
sinambang.
Teknik biakan murni tidak hanya diperlukan untuk bagaimana
memperoleh suatu biakan yang murni, tetapi juga bagaimana memelihara serta
mencegah pencemaran dari luar. Media untuk membiakkan bakteri haruslah steril
sebelum digunakan. Pencemaran terutama berasal dari udara yang mengandung
banyak mikroorganisme. Pemindahan biakan mikroba yang dibiakkan harus
sangat hati-hati dan mematuhi prosedur laboratorium agar tidak terjadi
kontaminasi.
ntuk mengelompokan bakteri gram positi! dan gram negati! dilakukan
identi!ikasi mikrobia dengan teknik pewarnaan gram. Bakteri gram positi! akan
mempertahankan "at warna kristal #iolet dan akan tampak berwarna ungu tua di
bawah mikroskop. $dapun bakteri gram negati! akan kehilangan "at warna kristal
#iolet setelah dicuci dengan alkohol, dan sewaktu diberi "at pewarna air !ucsin
atau sa!ranin akan tampak berwarna merah
1** Tu-uan
Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mempelajari cara mengisolasi
mikroorganisme dan mempelajari teknik penggoresan untuk memperoleh biakan
murni.BAB
TI%AUN PUSTAKA
Pada dasarnya sendiri Biakan murni diperlukan dalam berbagai metode
mikrobiologis, antara lain digunakan dalam mengidenti!ikasi mikroba. ntuk
mengamati ciri-ciri kultural mor!ologi, !isiologi dan serologi dibutuhkan mikroba
yang berasal dari satu spesies , sehingga akan diperoleh kultur murni atau biakan
murni. %ultur murni sendiri merupakan kultur yang sel-sel mikrobanya berasal
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
3/12
dari pembelahan dari satu sel tunggal yang bersi!at tunggal. &ering kali juga
isolasi diartikan sebagai pemisahan suatu hal dari hal lain atau usaha untuk
memencilkan manusia dari manusia lain' pengasingan' pemencilan' pengucilan
,keadaan terpencilnya satu wilayah karena jauh dari hubungan lalu
lintas,penyekatan (pengham-batan atau penahanan) arus listrik oleh suatu bahan
sehingga arus itu tidak dapat mengalir, pemisahan satu kelom-pok ikan dari
kelompok ikan lain sehingga perkawinan antarkelompok dapat
dihindari.Pemisahan dan pemurnian merupakan suatu cara yang dilakukan untuk
memisahkan atau memurnikan suatu ssenyawa atau sekelompok senyawa yang
mempunyai susunan kimia yang berkaitan dari suatu bahan, baik dalam skala
laboratorium maupun skala industri. Pada prinsipnya, pemisahan dilakukan untuk
memisahkan dua "at atau lebih yang saling bercampur, sedangkan pemurnian
dilakukan untuk mendapatkan "at murni dari suatu "at yang telah tercemar oleh
"at lain. Pemisahan dan pemurnian campuran memiliki man!aat yang sangat
penting dalam ilmu kimia, industri maupun dalam kehidupan sehari-hari, dalam
banyak kasus kita dapat menggunakan material tanpa pemurnian, baik material itu
dari alam (misalnya minyak tanah) atau yang disintesis di laboratorium,
Pemisahan atau pemurnian dengan metode tertentu perlu dilakukan. *emikian
pula dalam pekerjaan di laboratorim maupun dalam proes industi banyak yang
melibatkan pemisahan dan pemurnian. Misalnya pengolahan bijih dari
pertambangan, pemisahan logam dari mineralnya, pengolahan minyak bumi,
pengolahan air minum dan lain-lain. &edangkan contoh sederhana pemisahan dan
pemurnian yang sering dilakukan dalam kehidupan sehari-hari misalnya
pemisahan ampas kelapa dengan santannya yang dilakukan dengan metode
penyaringan .*alam melakukan pemisahan dan pemurnian diperlukanpengetahuan dan keterampilan, terutama jika harus memisahkan komponen
dengan kadar yang sangat kecil. ntuk tujuan itu, dalam ilmu kimia telah
dikembangkan berbagai cara pemisahan dari pemisahan sederhana yang serig
dilakukan sehari-hari sampai metode pemisahan dan pemurnian yang kompleks
atau tidak sederhana. Maka dari itu, berdasarkan kebutuhan terhadap oksigen,
bakteri dibedakan atas bakteri aerob dan bakteri anaerob. Bakteri aerob adalah
bakteri yang membutuhkan oksigen untuk melakukan proses kehidupan.
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
4/12
&edangkan bakteri anaerob adalah bakteri yang tidak membutuhkan oksigen
bebeas untuk melaksanakan proses kehidupannya (*widjoseputro, +).
*alam teknik pemeliharaan bakteri, sangat perlu diperhatikan dalam
masalah pemenuhan nutrisi bagi bakteri dan mikroba lainnya agar dapat terus
sur#i#e dan tumbuh optimal pada suatu lingkungan, sehingga perlu ditemukannya
media yang cocok dan bagus untuk pertumbuhan bakteri. Media tersebut dikenal
sebagai media agar. Media agar memungkinkan suatu bakteri tetap tumbuh
dengan baik di koloni yang telah ada dan sejenis dengan diriya. &ehingga dalam
kultur bekteri, satu koloni dianggap sebagai satu organisme yang sejenis. amun
dalam isolasi dan pemurnian bekteri, perlu adanya teknik teknik yang dipelajari
dan dikuasai. /akni teknik dilusi, teknik pour plate, serta teknik streak plate.
*alam isolasi kultur murni bakteri, perlu diperhatikan komponen komponen yang
dibutuhkan untuuk menunjang kehidupan bakteri itu sendiri. Biakan murni bakteri
adalah biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri yang ditumbuhkan dalam
medium buatan. Teknik biakan murni untuk suatu spesies dikenal dengan
beberapa cara yaitu cara penggoresan, cara penuangan, cara pengenceran. Cara
penggoresan lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu,
tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan. Penggoresan yang
sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah tetapi kelemahan dari cara ini
adalah bakteri-bakteri anareob tidak dapat tumbuh. Cara ini terbagi menjadi 4
yaitu, goresan T, goresan kuadran, goresan radian, goresan sinambang (0aluyo,
+1).
BAB 3
PELAKSANAAN PRAKTIKUM
3*1* (a+tu .an Te/at
Praktikum ini dilaksanakan pada hari &elasa tanggal 4 o#ember +2
pukul 3. 0B sampai dengan pukul 3. 0B di 5aboraturium %imia 6asil
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
5/12
Pertanian (%6P), 7urusan Teknologi Pertanian 8akultas Pertanian ni#ersitas
&riwijaya.
3** Alat Dan Bahan
$lat yang digunakan dalam praktikum ini yaitu9 ) Bunsen +) Cawan petri, 3)
7arum ose, 4) Tabung reaksi.
Bahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu9 ) $lkohol, +)
$:uadest, 3) Biakan hasil isolasi, 4) 5arutan kristal #iolet.
3*3* ara Ker-a
Cara kerja dalam praktikum teknik isolasi dan pemurnian mikrobia adalah9
. *isiapkan cawan petri yang berisi media padat (jenis media tertentu)
+. &atu koloni mikroorganisme dari biakan yang dipilih diambil dengan jarum
ose steril berukuran + mm.
3. 7arum ose digoreskan pada media padat secara hati-hati.
4. &etiap berpindah dari ke-+, ke-3 dan seterusnya jarus ose harus dibakar di
atas Bunsen.
2. Cawan petri di inkubasi kemudian dilakukan pemurnian dengan cara diambil
koloni dari cawan petri dengan menggunakan jarum ose steril berukuran +
mm.;. *isiapkan tabung reaksi berisi agar miring lalu jarum ose tadi digoreskan di
permukaan agar miring dengan hati-hati dan diletakkan dalam incubator.
BAB "
$ASIL DAN PEMBA$ASAN
"*1* $a2il
Tabel . solasi dan Pemurnian Bakteri
%elompok Bakteri Bentuk Margin (Tepi)
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
6/12
thypsti
Tabel +. >ambar
o %eterangan >ambar
. Biakan awal dalam tabung reaksi
Staphylococcus aureus
Salmonella thypsti
+. Biakan gores cawan petri
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
7/12
3. Biakan lurus tabung reaksi
Staphylococcus aureus
Salmonella thypsti
"** Pe/aha2an
Praktikum isolasi dan pemurnian mikrobia ini menggunakan bakteri
Lactobacillus plantarium. Bakteri ini merupakan bakteri gram positi!. Pemisahan
dan pemurnian merupakan suatu cara yang dilakukan untuk memisahkan atau
memurnikan biakan murni dari sampel yang digunakan. Biakan murni bakteriadalah biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri yang ditumbuhkan dalam
medium buatan.
Pemurnian biakan murni dapat dilakukan dengan metode gores. Cara
penggoresan lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu,
tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan. Penggoresan yang
sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah, tetapi kelemahan dari cara ini
adalah bakteri-bakteri anareob tidak dapat tumbuh.
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
8/12
Pada praktikum kali ini penggoresan dilakukan dengan metode penggoresan
berbentuk ?. Penggoresan ini ber!ungsi untuk memperluas permukaan dari
medium agar. &ehingga, mikroba memiliki tempat tumbuh yang lebih besar.
Media agar memungkinkan suatu bakteri tetap tumbuh dengan baik di koloni yang
telah ada dan sejenis dengan diriya. &ehingga dalam kultur bekteri, satu koloni
dianggap sebagai satu organisme yang sejenis. amun dalam isolasi dan
pemurnian bekteri, perlu adanya teknik teknik yang dipelajari dan dikuasai.
Pada praktikum kali, untuk menggores agar sebagai medium mikroba,
digunakan sebuah alat yang bernama jarum ose. 7arum ose sebelum digunakan
dibakar terlebih dahulu pada Bunsen sehingga tercipta kondisi aseptis, dimana
menghindari adanya bakteri kontaminan. Praktikum kali ini menggunakan dua
teknik penggoresan, yaitu teknik gores pada media padat dan teknik gores pada
media miring. Teknik gores pada media padat dilakukan penggoresan dengan
menyerupai huru! ? sebanyak empat kali, sedangkan pada teknik gores pada
media miring jarum ose hanya dimasukkan sekali saja ke dalam tabung reaksi.
Penggunaan teknik ini akan menghasilkan koloni mikroba yang terpisah.
$kan tetapi dari hasil yang didapatkan, tidak semua koloni terpisah sempurna. 6al
ini bisa disebabkan karena penggoresan yang kurang sempurna, sehingga
menyebabkan tidak terpisahnya koloni. $danya kontaminan lain juga bisa
menyebabkan tidak sempurnanya pemisahan koloni pada mikroba.
BAB "KESIMPULAN
%esimpulan dari praktikum ini adalah 9
. BakteriLactobacillus planetarium merupakan bakteri gram positi!.
+. Biakan murni bakteri adalah biakan yang terdiri atas satu spesies bakteri
yang ditumbuhkan dalam medium buatan.
3. Praktikum kali ini menggunakan dua teknik penggoresan, yaitu teknik
gores pada media padat dan teknik gores pada media miring.Pemurnian
biakan murni dapat dilakukan dengan metode gores.
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
9/12
4. Cara penggoresan lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut ekonomi
dan waktu, tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan.
2. Penggunaan teknik gores akan menghasilkan koloni mikroba yang
terpisah. $kan tetapi dari hasil yang didapatkan, tidak semua koloni
terpisah sempurna.
DA&TAR PUSTAKA
*wiesaputro, M.7. +.Dasar-dasar Mikrobiologi. ni#ersitas ndonesia. Press9
7akarta.
@usdimin.+2.Praktek Mikrobiologi Dasar.7akarta9 >ramedia.
&utardja, anang. +A. Penuntun Pratikum Mikrobiologi Umum. Bandung9
P$*.
0ahab, 5. +2.Mikrobiologi Umum. MM Press9 Malang.
0ahyuningsih. +=. Pengecetan Gram. ni#ersitas 7enderal &oedirman.
8akultas Pertanian9 Purwokerto.
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
10/12
0aluyo. ud. +=. Tehnik Metode Dasar Mikrobiologi. ni#ersitas
Muhamadiyah Malang, Malang.
LAMPIRAN
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
11/12
-
7/24/2019 laporan tetap mikrobiologi umum ISOLASI.docx
12/12