Legionella pneumophilaCenni storici

Agosto 1976Philadelphia: Epidemia di polmonite nei partecipanti al Congresso della American Legion.Letalit: 15.4%.Campioni di tessuto polmonare: microrganismi Gram-negativi di piccole dimensioni.

Novembre 1978Atlanta: Simposio Internazionale sulla Malattia dei Legionari Legionella pneumophila.Il ceppo isolato dai casi di Philadelphia ceppo di riferimento Philadelphia 1.

Legionella pneumophilaMorfologiaBacillo aerobio gram-negativo.0.3 0.9 m in larghezza e 2 3 m in lunghezza.Mobile per la presenza di un flagello.

Legionella pneumophilaManifestazioni clinicheMalattia dei Legionari o Legionellosi E caratterizzata da febbre, brividi, tosse secca non produttiva, cefalea, polmonite e coinvolgimento del tratto gastrointestinale, del SNC, del fegato e dei reni. Periodo di incubazione: 2-10 giorni. Mortalit: 15-20%.

Febbre di Pontiac Malattia simil influenzale caratterizzata da febbre, brividi, mialgia, malessere e mal di testa senza alcuna evidenza clinica di polmonite. Periodo di incubazione: 12 ore. Mortalit:

Legionella pneumophilaTrasmissioneSorgente di infezione: ambiente

Vie di trasmissione - Via respiratoria - Instillazione diretta nelle vie respiratorie. Modalit di trasmissione - Docce, rubinetti, idromassaggio, sistemi di condizionamento dellaria e torri di raffreddamento. Apparecchiature per la respirazione assistita.

Fattori di amplificazione - Flora batterica ed organismi unicellulari, quali amebe, ed alghe permettono la sopravvivenza, la moltiplicazione e la diffusione di L. pneumophila. - Biofilm presente nelle tubature degli impianti idraulici dellacqua moltiplicazione della L. pneumophila.

Ricircolo dellacqua e nebulizzazione dei getti dacqua;

Sistemi di produzione diretta di aerosol (docce e rubinetti) o indiretta (umidificatori a bolle di ossigeno connessi agli impianti per la respirazione assistita negli ospedali.

Legionella pneumophila e ambiente

Torri di raffreddamento, sistemi di condizionamento dellaria e umidificatori dellaria nei sistemi diventilazione.

Legionella pneumophila e ambiente

Legionella pneumophilaMeccanismo di patogenicitLa caratteristica principale di patogenicit la capacit di sopravvivere allinterno dei leucociti polimorfonucleati, dei monociti e dei macrofagi alveolari.

Pili: Permettono ladesione del batterio alla cellula ospite.

MOMP (Proteina maggiore della membrana esterna) Si lega ai recettori presenti sui monociti e macrofagi.Legionella pneumophilaFattori di virulenza: Adesivit

Legionella pneumophilaDiagnosi

Esame microscopico

Esame colturale

Ricerca dellantigene nelle urine

Ibridizzazione degli acidi nucleici

Ricerca degli anticorpi anti-L. pneumophila

Legionella pneumophilaEsame microscopico Colorazione di Gram: le legionelle non si colorano bene con il Gram

Metodo di Gimenez: i microrganismi appaiono colorati in rosso su fondo blu-verde.

Metodo di Dieterle (impregnazione argentica): per preparati istologici

Immunofluorescenza diretta

Legionella pneumophila Esame colturale Campione biologico - Aspirato tracheale; - Espettorato; - Essudato pleurico; - Lavaggio bronchiale (3000 rpm x 30); - Biopsia di parenchima polmonare; - Sangue.Terreni di crescita - Agar estratto di lievito-carbone tamponato (CYE Agar) + -chetoglutarato + pirofosfato ferrico (BCYE Agar). Supplementi selettivi: - Cefamandolo, polimixina B e anisomicina (BMPA) - Glicina, polimixina B, anisomicina, vancomicina, blu di bromotimolo e porpora di bromocresolo (MWY). - Glicina, polimixina B, vancomicina e cicloeximide (GVCP)

Legionella pneumophilaEsame colturale

Incubazione: 35C, 3-5% CO2 per 3-5 giorni.

Osservazione microscopica: nella colorazione del Gram si usa fucsina basica 0.1% invece di safranina.

Identificazione - Le colonie sospette vengono controllate per la dipendenza dalla L-cisteina (non crescono in assenza di L-cisteina) - Tipizzazione mediante antisieri specifici.

Legionella pneumophila su BCYE agar