les analyses de pesticides en agroalimentaire€¦ · 1/ généralités sur les pesticides ... -...
TRANSCRIPT
Les analyses de Pesticides en agroalimentaire
Le 14/11/2017 – Rungis – Éric Capodanno – Matinale Phytocontrol
PHYTOCONTROL
Programme :
1/ Généralités sur les pesticides
2/ La règlementation
3/ Normes et textes de références
4/ Les méthodes d’essai
5/ L’accréditation COFRAC
PHYTOCONTROL
1/ Présentation des pesticides
PHYTOCONTROL
Qu’est ce qu’un pesticide ?
Les pesticides sont des substances introduites dans les cultures pourlutter contre des organismes nuisibles. Ils sont composés d’unprincipe actif d’origine naturelle ou synthétique et sontgénéralement dilués dans l’eau pour être appliqués sur les zones àprotéger.
Un pesticide est composé d'un ensemble de molécules :• Une (ou plusieurs) matière active à laquelle est due l'effet toxique.• Un diluant qui est une matière solide ou un liquide (solvant)incorporé à une préparation et destiné à en abaisser la concentrationen matière active.PHYTOCONTROL
Quelques chiffres
• Il existe près de 100 familles chimiques de pesticides :organophosphorés, organochlorés, carbamates, pyréthrinoïdes,triazines…etc.
• Il existe près de 10 000 formulations commerciales composées de lamatière active et d'adjuvants et qui se présentent sous différentesformes (liquides, solides : granulés, poudres,..).
• Aujourd'hui, l'agriculture française utilise environ 500 pesticides quientrent dans la composition de près de 1800 produits commercialisés.
• Avec 66 659 tonnes de pesticides utilisées en 2014, la France est lesecond consommateur européen après l’Espagne.
PHYTOCONTROL
Les résidus dans les échantillons
Dernière étude de l’EFSA en 2015:
- 46,7% des aliments contiennent des traces de résidus au-delà des limitesde quantification.
- 97,2% des cas en dessous des LMR.
- Les aliments avec le plus fort % d’échantillons présentant plusieursresidus: banane, raisin, poivrons.
PHYTOCONTROL
Classification des pesticides selon leur mode d’action :
• Pesticides de contact
PHYTOCONTROL
Classification des pesticides selon leur mode d’action :
• Pesticides systémiques
PHYTOCONTROL
Les principales familles
Il existe plusieurs catégories de pesticides, et chacune lutte contre un type d’attaque spécifique :
• Les fongicides Un fongicide est un produit phytosanitaire conçu exclusivement pour tuer ou limiter le développement des champignons parasites des végétaux.
Il est possible de distinguer :• Les produits préventifs empêchant le développement des spores à la surface de la plante (ex : mancozeb)• Les produits curatifs stoppant le développement du champignon déjà installé dans la plante (ex : trifloxystrobine)PHYTOCONTROL
Les principales familles
• Les herbicides Un herbicide est défini comme une substance active ayant la propriété detuer les végétaux.
Nous distinguons :• Les désherbants sélectifs, les plus nombreux (ex : MCPA, fluroxypyr)• Les débroussaillants et désherbants totaux (ex : glyphosate)• Les défanants qui détruisent la partie aérienne des végétaux. Ils sont, parexemple, utilisés pour la récolte mécanique de la pomme de terre ou de labetterave (ex : diquat)• Les anti-germes qui empêchent le démarrage de la végétation (ex :chlorpropham) PHYTOCONTROL
Les principales familles
• Les insecticidesLes insecticides sont des substances actives ou des préparations ayant la propriété de tuer les insectes, leurs larves et/ou leurs œufs. Il est possible de différencier les divers produits utilisés et leurs cibles :
• Les produits actifs sur le système nerveux (ex : pyrethrinoïdes)• Les médiateurs chimiques agissant sur les molécules de communicationentre les insectes et leur environnement (ex : N-methyl carbamates)•Les stérilisants (ex : lufénuron)• Les produits synergiques, inactifs mais qui prolongent ou intensifientl’action d’autres pesticides (ex : piperonyl butoxide)
PHYTOCONTROL
PHYTOCONTROL
2/ La règlementation sur les pesticides
PHYTOCONTROL
La règlementation
LMR (Limites Maximales en Résidus):
•Règlement 396/2005 et ses modifications successives.
•Accessibles sur le site européen :http://ec.europa.eu/food/plant/pesticides/eu-pesticides-database/public/?event=pesticide.residue.selection&language=FR
PHYTOCONTROL
PHYTOCONTROL
PHYTOCONTROL
Les homologations
•Usage des produits phytopharmaceutiques par culture.
•Accessibles sur le site e-phy :
https://ephy.anses.fr/recherche_avancee/ppp
PHYTOCONTROL
PHYTOCONTROL
Le processus d’homologation
L’homologation d’un produit phytosanitaire suit un double circuit : européen et national.Les États membres évaluent les substances actives ; les instances nationales évaluentensuite les produits formulés à partir de ces substances.
PHYTOCONTROL
3/ Normes et textes de référence
PHYTOCONTROL
Les principales normes sur les méthodes multiresidus
NF EN 12393 Décembre 2013
Aliments d'origine végétale - Méthodes multirésidus de détermination de résidus de
pesticides par CPG ou CL-SM/SM (parties 1 – 2 – 3)
- Principe
- Avantages : Choix entre plusieurs protocoles d’extraction et purification, concentration des
extraits. - Inconvénients : volumes de solvant, délai et cout d’analyse
NF EN 15662 Janvier 2009
Aliments d'origine végétale - Méthode polyvalente de détermination des résidus des
pesticides par CG-SM et CL/SM/SM avec extraction/partition avec de l'acétonitrile et
nettoyage par SPE dispersés - Méthode QuEChERS
- Principe
- Avantages : rapide, simple, pas chère, robuste, efficace.
- Inconvénients : pas de facteur de concentration, récupération de l’extrait dans l’acétonitrile
PHYTOCONTROL
Les autres normes
NF EN 1528 Janvier 1997
Aliments gras - Dosage des pesticides et des polychlorobiphényles (PCB) – (parties 1
– 2 – 3 – 4)
NF EN 15637 Février 2009
Aliments d'origine végétale - Détermination des pesticides par LC-MS/MS après
extraction méthanolique et purification sur terre de diatomées
NF ISO 8260 Octobre 2008
Lait et produits laitiers – Dosage des pesticides organochlorés et des
polychlorobiphenyles – Méthode par chromatographie capillaire en phase gazeuse-
liquide avec détection à capture d’électron.
NF EN 12396 Mai 1999
Aliments non gras - Détermination des résidus de dithiocarbamates et de bisulfures
de thiurame –
Partie 1 : méthode spectrométrique.
Partie 2 : méthode par chromatographie en phase gazeuse.
Partie 3 : méthode spectrométrique UV utilisant le xanthogénatePHYTOCONTROL
Les guides techniques
Document LAB GTA 26 (rév 1 – avril 2016)
Analyses de résidus de pesticides et contaminants organiques dans les denrées
alimentaires destinées à l’homme et aux animaux, les matrices biologiques d’origine
animale.
Document SANTE 11945/2015 (1 décembre 2015 - rév 0)
Guidance document on analytical quality control and validation procedure for
pesticides residues analysis in food and feed.
PHYTOCONTROL
4/ Les méthodes d’essai
PHYTOCONTROL
Le domaine d’application
Les analytes:
- Méthode mono ou multirésidus ?
- Définition des résidus (notion de métabolite et isomères)
Les matrices:
- Méthode mono ou multimatrice ?
- Définition des catégories de matrices (voir classification des catégories:
Doc. SANCO, Liste EFSA, LAB GTA 26, 21…etc)
La plage de concentration:
- ng/kg, µg/kg, mg/kg…..quel est l’impact de l’étendue de la plage de
concentration validée sur la fiabilité d’une analyse ?
PHYTOCONTROL
Les principaux critères qui caractérisent une méthode
Les limites de détection et de quantification :
- LD: plus basse concentration pour un composé dans une matrice pouvant être
différenciée d’un blanc
- LQ: plus petite concentration de l'analyte pouvant être quantifiée avec une incertitude
connue
La LQ peut varier selon les matrices pour une même méthode
C’est en général à la LQ que l’incertitude est la plus grande
La LQ doit être inférieure ou égale au seuil règlementaire ou la LMR
Comment est déterminée une LOQ ?
PHYTOCONTROL
Les taux de récupération:Rendement: paramètre qui caractérise la capacité de la méthode à extraire l’analyte de la matrice
(généralement exprimé en %)
Les incertitudes:
Incertitude: paramètre qui caractérise la dispersion des valeurs attribuées à un mesurande.
PHYTOCONTROL
La préparation des échantillons
PHYTOCONTROL
A/ Réception / Broyage
PHYTOCONTROL
Les points clés à respecter avant l’étape d’extraction:
- Identification de la nature de l’échantillon
(interaction analyte-matrice variable).
- La quantité reçue
(représentativité d’un lot).
PHYTOCONTROL
Les points clés à respecter avant l’étape d’extraction:
- L’intégrité de l’échantillon
(dégradation, contamination croisées …etc).
- L’ homogénéité du broyat (finesse de broyage) et la quantité broyée avant l’étape
d’extraction (impact sur la fidélité et la justesse du résultat)
PHYTOCONTROL
Les principes d’extraction:
Importance du choix du solvant: il doit permettre d’extraire le maximum d’analytes
avec un minimum de matrice.
PHYTOCONTROL
- MgSO4 (4g)
- NaCl (1g)
- trisodium citrate dihydrate (1g)
- disodium hydrogencitrate sesquihydrate (0,5g)Application à la Quechers
Facteurs influençant le partage:
- salinité
- pH
- température
- présence d’autres composés
PHYTOCONTROL
Les principaux composés extraits
PHYTOCONTROL
Action sur:
- résidu d’eau
- sucres, acides gras et organiques, anthocyanes
- pigments, stérols, interférents non polaires
- lipides, interférent non polaires
- pigment chlorophylliens
- phospholipides
La purification (SPE dispersive)
Choix sur le sorbant:
- MgSO4
- PSA
- GCB
- C18
- « Chlorofiltr »
- ZrO2
PHYTOCONTROL
Les techniques d’analyses
PHYTOCONTROL
La chromatographie, technique majeure pour l’analyse des pesticides
Principe:
Types de chromatographie: gaz ou liquide ?
Types de détecteurs: spécifiques (UV, Fluo, ECD, FPD..etc) ou spectrométrie de masse
- Pesticides en GC: organophosphorés, organochlorés, pyréthrinoides, triazoles
- Pesticides en LC: urées, carbamates, triazines, strobilurines et la plupart des molécules polaires extraites en
méthode monorésidu spécifique (glyphosate, hydrazide maléique, ethephon, quats..etc).
Cependant la plupart des molécules des screening GC peuvent se faire en LC selon le détecteur. La réciproque
n’est pas vraie !! PHYTOCONTROL
Le couplage LC-MS et GC-MS pour l’analyse des pesticides
1/ GC-MS simple quad:
=PHYTOCONTROL
2/ GC-MS-MS (Triple quad):
PHYTOCONTROL
3/ LC-MS-MS:
HPLC
350>198
350>97
PHYTOCONTROL
Quantification
PHYTOCONTROL
Une méthode est une association de ….
PHYTOCONTROL
5/ L’accréditation COFRAC
PHYTOCONTROL
Présentation du Comité Français d’Accréditation
Le Cofrac, créé en 1994 sous le régime de la loi du 1er juillet 1901(association de droit privé à but non lucratif) a été désigné commeunique instance nationale d’accréditation par le décret du 19décembre 2008, reconnaissant ainsi l’accréditation comme uneactivité de puissance publique.
Il est composé d’environ 150 permanents qui gèrent 4 sections(laboratoire d’essai, inspection, certification, santé humaine) avec300 évaluateurs qualiticiens et environ 1300 évaluateurs techniques.
PHYTOCONTROL
Rôle du COFRAC
Attester que les organismes accrédités sont compétents etimpartiaux.
Valider la pertinence d’une organisation qualité.
Etablir pour un établissement un champ d'accréditation clairementdéfini pour une durée déterminée.
Attention : en aucun cas le Cofrac ne garantit la fiabilité d’un résultat !
PHYTOCONTROL
Les référentiels
Les évaluations des candidats à l'accréditation sont menées sur la base desnormes européennes ou internationales en vigueur, donnant une garantie solidefaisant l'objet d'un contrôle régulier par des auditeurs et experts qualifiésreconnus.
Normes et guides utilisés par les accréditeurs pour délivrer lesaccréditations aux :
Laboratoires d'essais, d'analyses ou d'étalonnage ISO/CEI 17025
Laboratoires de biologie médicale ISO 15189
Organismes d'inspection ISO/CEI 17020
Organisateur de comparaisons interlaboratoires ISO/CEI 17043
Producteurs de matériaux de référence Guide ISO 34
Organismes certificateurs ISO/CEI 17021, 24 …etcPHYTOCONTROL
Processus d’accréditationAnalyser• Formalisation de la demande
• Examen de la recevabilité du dossier
• Etablissement d'une convention entre le Cofrac et le candidat
Evaluer• Définition du programme d’évaluation
• Constitution d’une équipe d’évaluateurs adaptée (1 auditeur par programme + LAB GTA)
• Evaluation (selon 17015, LAB REF 02, GEN REF 11…etc)
Décider• Examen du rapport d'évaluation au sein d'une commission ad hoc
• Formulation d'un avis soumis à décision
Notifier• Notification de la décision par le directeur du Cofrac
• Délivrance d’une attestation précisant le champ et la durée de l’accréditationPHYTOCONTROL
Le cycle d’accréditation
PHYTOCONTROL
Les portées d’accréditation
Le principal intérêt de la portée flexible est de pouvoir développer ses
propres méthodes et de les accréditer entre deux audits !!
Il existe 2 types de portée, suivant la souplesse d’utilisation attendue par lelaboratoire et suivant ce que ce dernier est en mesure de démontrer.
La flexibilité acceptable pour une portée dépend de l’aptitude du laboratoire à :
- adopter des méthodes normalisées ou consensuellement reconnues (ex:protocoles fournisseurs) sans pouvoir pour autant les modifier: portée fixe
- adapter/mettre au point des méthodes internes ou adapter voire développerdes méthodes : portée flexible (flex 1, 2 ou 3)
PHYTOCONTROL
Exemple de portée fixe:
PHYTOCONTROL
Exemple de portée flexible (flex 3):
PHYTOCONTROL
MERCI DE VOTRE ATTENTION
Eric Capodanno
Directeur Scientifique Phytocontrol Groupe
Laboratoire Phytocontrol
Parc Scientifique Georges BESSE II
180 rue Philippe Maupas
30035 NIMES
Tél. : +33 (0)4 34 14 70 00
Fax : +33 (0)4 66 23 99 95