Linfocitos TLinfocitos T

Dr. José Antonio Ortega MartellDr. José Antonio Ortega Martell

Escuela de MedicinaEscuela de Medicina

UAEHUAEH

RESPUESTA INMUNOLÓGICARESPUESTA INMUNOLÓGICA

ANTÍGENO

RESPUESTA CELULAR DEPENDIENTE DE LINFOCITOS T

LINFOCITOS T CD4+ (COOPERADORES, Th)

LINFOCITOS T CD8+ (CITOTOXICOS, Tc) T

RESPUESTA HUMORAL

DEPENDIENTE DE LINFOCITOS BANTICUERPOS: IgM

IgGIgA

IgE

B

Órganos linfoidesÓrganos linfoides

Primarios: Primarios: Timo Timo

Médula ósea Médula ósea Secundarios: Secundarios:

Bazo Bazo

Ganglios Ganglios

MALT MALT (tejido linfoide asociado a mucosas)(tejido linfoide asociado a mucosas)

B

T TT

T

T

T

TT

T

T

T

T

T

T

T

TT

T

TT

T

TTTT

TT

T

B

B

B

B

BBB B

B

B

B

N

N

N

N

N

N

NNNN

NNN

N

N

NNN

N

NN

N

TIMO

MO

PERIFERIA

N

N

SACO VITELINO

HÍGADO FETAL

LINFOCITOS: ORIGENLINFOCITOS: ORIGEN

TCR

CD4

TCR

TDN

TDP

TCD8

+

TCD4

+

TR1CD4

+ CD25+

CD8

TCR

CD4

DESARROLLO EN TIMOTIMO

H

GENERACIÓN DE LA

DIVERSIDAD

IL-7

CD3

CD3 CD4CD8

CD3

CD3

CD3

LINFOCITOS: SELECCIÓNLINFOCITOS: SELECCIÓN

GENERACIÒN DEL

REPERTORIO

T CD8+

T CD8+

SELECCIÓN

NEGATIVA SELECCIÓN

POSITIVA

SELECCIÒN

POSITIVA

DN

T CD4+

B B

B

B

B

B

BB

SELECCIÒN

NEGATIVA

ANERGIA

TIMOMÉDULA

ÓSEA

DN

DP

DP DP

DP

T CD8+

T CD4+

T CD4+

GENERACIÒN DEL

REPERTORIO

TOLERANCIA PERIFÉRICA

TRTCR

CD4CD25

NK

CD8

TCD8

TCR NKT

TCR

ANTÍGENOINACCESIBILIDAD

Th

TCR

T

CD4/CD8

CÉLULAS AUTORREACTIVAS

B

EstadísticasEstadísticas

En el adulto : En el adulto :

10 billones de células10 billones de células

2% del peso corporal total2% del peso corporal total

20% del total de leucocitos20% del total de leucocitos

CaracterísticasCaracterísticas

Tamaño = 6 – 10 micrasTamaño = 6 – 10 micras

2 Tipos de Linfocitos :2 Tipos de Linfocitos :

Linfocitos pequeños = No hay gránulos, Linfocitos pequeños = No hay gránulos,

poco citoplasma, núcleo redondopoco citoplasma, núcleo redondo

Linfocitos granulares grandes = LGL, Linfocitos granulares grandes = LGL,

gran cantidad de gránulos, mayor cantidad gran cantidad de gránulos, mayor cantidad

de citoplasma, núcleo lobuladode citoplasma, núcleo lobulado

Morfología de LinfocitosMorfología de Linfocitos

Th = 95% linfocitos pequeños, 5% LGLTh = 95% linfocitos pequeños, 5% LGL

Tc = 50% LGLTc = 50% LGL

B = no pequeños ni LGL. Citoplasma B = no pequeños ni LGL. Citoplasma

abundante con monoribosomas y retículo abundante con monoribosomas y retículo

endoplásmicoendoplásmico

NK = Morfología LGL con mayor cantidad NK = Morfología LGL con mayor cantidad

de gránulos en citoplasmade gránulos en citoplasma

CD8

TCR

RESPUESTA CELULAR RESPUESTA HUMORAL

TCR

CD4

CD3

TCD4+

CD3

TCD8+

65-75%

5-10%

66%

33%

MEDIO INTERNO

TCR

CD3

TCD8

TCR

CD3

TCD8+TEJIDOS: 25-60%

SANGRE: 1-5%

SUPERFICIES EPITELIALES

NKCD8+

KIR

NCR

BCRsIgD

CD19

sIgM

B2

3-5%

Marcadores de Linfocitos TMarcadores de Linfocitos T

CD1 = Timocitos (no T maduros), CPACD1 = Timocitos (no T maduros), CPA

CD3 = T, NKTCD3 = T, NKT

CD4 = Th, CPA, Treg, NKTCD4 = Th, CPA, Treg, NKT

CD8 = Tc y NKCD8 = Tc y NK

Marcadores de ActivaciónMarcadores de Activación

CD25 = receptor IL-2 (activación)CD25 = receptor IL-2 (activación)

HLA clase II = activaciónHLA clase II = activación

CD28 = CoactivaciónCD28 = Coactivación

CTLA-4 = InhibiciónCTLA-4 = Inhibición

CD45 RA = VirgenCD45 RA = Virgen

CD45 RO = MemoriaCD45 RO = Memoria

CL O N

A

ANTÌGENO

OTROSESTÍMULOS

RECEPTOR DE

ANTÍGENO

CÉLULA DE MEMORIADE VIDA

PROLONGADA

CÉLULAEFECTORA

DE VIDA LIMITADA

LINFOCITO T-

LINFOCITO B

Patrones de ThPatrones de Th

Th1 = IL-2, IFN-Th1 = IL-2, IFN-

Th2 = IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-13, CD30Th2 = IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-13, CD30

Th3 = TGF-Th3 = TGF-IL-10 (Treg)IL-10 (Treg)

Equilibrio TH1 / Th2Equilibrio TH1 / Th2

Célula T RegulatoriaCélula T Regulatoria

IL – 10 IL – 10

TGF – TGF –

IFN – IFN –

Fenómeno de AnergiaFenómeno de Anergia

TregTreg

Groux H. Microb Infect 2001; 3 : 883-9Groux H. Microb Infect 2001; 3 : 883-9

Célula NKTCélula NKT

IL – 4 IL – 4

IL – 5 IL – 5

IL – 13 IL – 13

Favorece AlergiaFavorece Alergia

NKTNKT

Umetsu, D. AAAAI Annual Meeting. March 2005. San AntonioUmetsu, D. AAAAI Annual Meeting. March 2005. San Antonio

Equilibrio Treg / NKTEquilibrio Treg / NKT

Receptor y Marcadores compartidosReceptor y Marcadores compartidos

TCR = marcador exclusivo de T TCR = marcador exclusivo de T

(asociado siempre a CD3)(asociado siempre a CD3)

Marcadores compartidos :Marcadores compartidos :

CD2 = T y eritrocitoCD2 = T y eritrocito

CD5 = T y BCD5 = T y B

CD7 = T y NKCD7 = T y NK

TCR alfa / betaTCR alfa / beta

alfa / beta = 95% de Linfocitos T. alfa / beta = 95% de Linfocitos T.

Cadena alfa es ligeramente más grande Cadena alfa es ligeramente más grande

por que tiene CHO. por que tiene CHO.

Cadenas unidas por puentes disulfuro. Cadenas unidas por puentes disulfuro.

Tienen dominios globulares (2 cada una) Tienen dominios globulares (2 cada una)

y regiones constantes (Cy regiones constantes (C y C y C) y ) y

variables (Vvariables (V y V y V))

TCR alfa / betaTCR alfa / beta

Reconocen al péptido antigénico en el Reconocen al péptido antigénico en el sitio de unión entre las porciones variables sitio de unión entre las porciones variables (alfa y beta). (alfa y beta).

Polimorfismo de regiones variables. Polimorfismo de regiones variables.

Capacidad de generarse 3 x 10 Capacidad de generarse 3 x 10 2020 posibilidades de TCR. posibilidades de TCR.

Linfocitos T con TCR Linfocitos T con TCR pueden ser tanto pueden ser tanto CD4 como CD8CD4 como CD8

TCR gamma / deltaTCR gamma / delta

gamma / delta = 5% Linfocitos T. gamma / delta = 5% Linfocitos T.

Son doble negativos cuando están en Son doble negativos cuando están en

circulación pero al pasar a tejidos circulación pero al pasar a tejidos

(mucosas) expresan CD8. (mucosas) expresan CD8.

Papel en el reconocimiento de Ag Papel en el reconocimiento de Ag

bacterianos y proteínas de choque térmico bacterianos y proteínas de choque térmico

(no restringidos por MHC, presentados (no restringidos por MHC, presentados

con otras moléculas como CD1) con otras moléculas como CD1)

CD8

TCR

RESPUESTA CELULAR RESPUESTA HUMORAL

TCR

CD4

CD3

TCD4+

CD3

TCD8+

65-75%

5-10%

66%

33%

MEDIO INTERNO

TCR

CD3

TCD8

TCR

CD3

TCD8+TEJIDOS: 25-60%

SANGRE: 1-5%

SUPERFICIES EPITELIALES

NKCD8+

KIR

NCR

BCRsIgD

CD19

sIgM

B2

3-5%

TCR / CD3TCR / CD3

TCR está asociado a CD3TCR está asociado a CD3

TCR está formado por 2 (TCR está formado por 2 ())

CD3 está formado por varias cadenas : CD3 está formado por varias cadenas :

Cadenas Cadenas tienen porción intracitoplasmática tienen porción intracitoplasmática

asociada a Proteína ZAP 70 asociada a Proteína ZAP 70

TCR / CD3

TCR TCR

CD3

EPÍTOPOPÉPTIDO (9)

CD4CD8

ThTc

CPA CPA

ACTIVACION DE CÉLULAS TACTIVACION DE CÉLULAS T

SEÑALES DEACTIVACIÓN

SEÑALES DEACTIVACIÓN

EPÍTOPOPÉPTIDO (15)

CD3

MHCCLASE I MHC

CLASE II

Activación de linfocitos TActivación de linfocitos T

TCR activa a CD3 TCR activa a CD3

CD3 activa a Proteína ZAP 70 CD3 activa a Proteína ZAP 70

ZAP 70 activa a Fosfolipasa C (PLC)ZAP 70 activa a Fosfolipasa C (PLC)

PLC forma 2dos. Mensajeros a partir de PLC forma 2dos. Mensajeros a partir de

la membrana celular:la membrana celular:

Inositol trifosfato (IP3) Inositol trifosfato (IP3)

Diacil glicerol (DAG). Diacil glicerol (DAG).

Activación de linfocitos TActivación de linfocitos T

IP3 estimula salida de Ca ++ intracelular IP3 estimula salida de Ca ++ intracelular

DAG activa protein cinasa C y esta a su DAG activa protein cinasa C y esta a su

vez a otras cinasas para activar Factores vez a otras cinasas para activar Factores

de Transcripción en el Núcleo (NFde Transcripción en el Núcleo (NFB)B)

Los factores nucleares desregulan genes y Los factores nucleares desregulan genes y

se producen citocinas (IL-2, etc...) y se producen citocinas (IL-2, etc...) y

moléculas de co-activacion (CD40 lig, etc...)moléculas de co-activacion (CD40 lig, etc...)

Activación de linfocitos TActivación de linfocitos T

Si solo hay TCR + Ag = AnergiaSi solo hay TCR + Ag = Anergia

Se requiere : (TCR + Ag) + (CD28 + B7) Se requiere : (TCR + Ag) + (CD28 + B7)

B7 puede ser : B7.1 (CD80) o B7.2 (CD86)B7 puede ser : B7.1 (CD80) o B7.2 (CD86)

B7.1 convence a Th0 a ser Th1B7.1 convence a Th0 a ser Th1

B7.2 convence a Th0 a ser Th2B7.2 convence a Th0 a ser Th2

Inhibición de linfocitos TInhibición de linfocitos T

Al unirse CD28 a B7 se activa linfocito T y Al unirse CD28 a B7 se activa linfocito T y

se produce al mismo tiempo molécula se produce al mismo tiempo molécula

reguladora CTLA-4reguladora CTLA-4

CTLA-4 es más afín por B7, desplaza a CTLA-4 es más afín por B7, desplaza a

CD28 y manda señal para “apagar” al CD28 y manda señal para “apagar” al

linfocito (inicia apoptosis)linfocito (inicia apoptosis)

CL O N

A

IL-4

Th2 IL-4

IL-5

IL-10

IL-13

IL-12

IL-18

ANTÍGENO

CPA

IL-2

ThCD4+

II PEPT CD4 TCR

CD45RA

TMCD45RO

Th1

IL-2

IFN-TNF-

IL-10 TGF-

CL O N

A

Foxp3

Th2 Th1

IL-6

¿?

CPA

IL-2

ThCD4+

II PEPT CD4 TCR

ANTIGENO

CD25+

TRCD4+

CÉLULAS TR “INDUCIDAS”

Células NKCélulas NK

Células NKCélulas NK

Morfología LGLMorfología LGL

Marcadores : CD16 + , CD56 +, CD3 –Marcadores : CD16 + , CD56 +, CD3 –

CD16 = FcCD16 = FcRIII (Reconoce Fc de IgG)RIII (Reconoce Fc de IgG)

Utiliza IgG para dirigir ataque (ADCC)Utiliza IgG para dirigir ataque (ADCC)

Células LAKCélulas LAK

NK + IL-2 = células LAK NK + IL-2 = células LAK

Asesinas activadas por citocinasAsesinas activadas por citocinas

Mayor cantidad de gránulos Mayor cantidad de gránulos

Útiles en respuesta hacia virus y tumoresÚtiles en respuesta hacia virus y tumores

NK y respuesta hacia tumoresNK y respuesta hacia tumores

Células CitotóxicasCélulas Citotóxicas

Células NKCélulas NK

Células LAKCélulas LAK

Linfocitos TcLinfocitos Tc

Tienen TCR / CD3Tienen TCR / CD3

Células NK, LAK y TcCélulas NK, LAK y Tc

Mecanismos de Muerte:Mecanismos de Muerte:

Liberan Perforinas Liberan Perforinas

(similar a C9 forma “poros” en las membranas)(similar a C9 forma “poros” en las membranas)

Granzimas entran por los poros Granzimas entran por los poros

(inducen apoptosis)(inducen apoptosis)

Unión Fas ligando con Fas en la membrana Unión Fas ligando con Fas en la membrana

de la célula blanco de la célula blanco (inducción de apoptosis)(inducción de apoptosis)

PERFORINAS

GRANZIMAS

CELULA BLANCO

CELULA CITOTOXICA

Fas(CD95)

FasL(CD95L)

A P O P T O S I S

GRANULO

CITOTOXICIDAD CELULARCITOTOXICIDAD CELULAR

FcRIIIB IgG Ag

KAR KIR

L (CLASE-I)

TCR EPITOPO

CLASE I

CD8

NK

NK

TCD8+ RECONOCIMIENTO