Állatkísérletek elmélete és gyakorlata a és b...

54
Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzus Coremodul 4/3 A kísérleti állatok és állatházak higiénés fokozatai, a kísérleti Sebészeti Műtéttani Intézet SZTE ÁOK 2015-2016-I. szemeszter A kísérleti állatok és állatházak higiénés fokozatai, a kísérleti állatház működtetése; A környezetgazdagítás; Dr. Érces Dániel egyetemi tanársegéd

Upload: others

Post on 20-Feb-2020

3 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Állatkísérletek Elmélete és GyakorlataA és B kurzus

Core modul 4/3

A kísérleti állatok és állatházak higiénés fokozatai, a kísérleti

Sebészeti Műtéttani Intézet

SZTE ÁOK 2015-2016-I. szemeszter

A kísérleti állatok és állatházak higiénés fokozatai, a kísérleti állatház működtetése; A környezetgazdagítás;

Dr. Érces Dániel egyetemi tanársegéd

Page 2: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• 19. § (1) A létesítményekben gondoskodni kell a helyiségek

rendszeres és hatékony takarításáról, valamint a megfelelõ

higiéniai körülmények fenntartásáról. (A Kormány 40/2013. (II. 14.) Korm. Rendelete az állatkísérletekről)

Higiénia az állatházban

Higiénia: „Az egészség megőrzéséhez szükséges tisztaság.”

Page 3: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• A különböző mikroorganizmusok általi fertőzöttség befolyásolja az állatok általános állapotát, ezáltal a kísérleti eredményeket.

• Az inhomogenitás csökkentésének lehetőségei:– Egyformán fertőzött állatok gnotobiota állatok

– A mikroorganizmusok számának csökkentése

Mikrobiológiai homogenitás?

Barrieralkalmazása

Page 4: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Célja a paraziták, baktériumok, vírusok kizárása.

• Elemei:– Csíraszegény táp, alom, ivóvíz

– Sterilizált ketrecek, berendezések

– Csíramentes, szűrt levegő

Zsiliprendszer („Barrier”)

• Az ember „vektor” szerepének csökkentése:– Bejutás, mozgás korlátozása

– Fertőtlenítés

– A test beburkolása (steril váltóruházat)

Page 5: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Higiéniai fokozatok az állatházban

A. Csíramentes (GF – „germ free”): •Izolátor:•Steril belső tér•10-30 ketrec, 50-100 állat

B. Kórokozóktól mentes •Zárt építészeti rendszerű állatházban.•Zsiliprendszer, de:

Egy állatházban csak egy higiéniai fokozat van!

•Zsiliprendszer, de:•Sterilizálás helyett fertőtlenítés•Ember is beléphet a zsilip mögé

C. Konvencionális állatház •Nyílt építészeti rendszer•Nincs zsiliprendszer•Törekedhet az igényesebb higiéniára:

•Légtechnika•Átöltözés•takarmány pasztörizálás

Page 6: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Csíramentes – „A” szint: izolátor

• A higiéniai rendszer csúcsa.

• A zárt steril térbe csak steril anyag, eszköz kerülhet be.

• Személyzet a steril téren kívül.

Page 7: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Béltartalom híg, zöldes,

• megacolon,

• bélnyálkahártya megújulása lassú,

• nyirokszervek fejletlenek,

• az állat szagtalan,

Csíramentes környezetben tartott állatok jellemzői

• az állat szagtalan,

• vitaminhiány,

• rezisztencia cytostaticumokkal, rtg sugárral szemben

Page 8: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Ami NINCS,

„Specified Pathogen Free” – „B” szint

SPF: meghatározott kórokozóktól mentes állomány

Az ilyen állatok esetében megadják, hogy melyek azok a kórokozók, amelyek jelenlétét NEM tudták kimutatni

NEM pedig az ami VAN

• Tartásukhoz zárt rendszerű, higiéniai zsilipekkel lezárt állatház szükséges.

• Anyagok, eszközök sterilizálása, fertőtlenítése elengedhetetlen.

• A levegőt szűrni kell.

• A személyzet a zárt térben dolgozik:személyi higiénia, steril öltözék

Page 9: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

További, barriert igénylő kategóriák

COBS – „ceasarean derived barrier sustained” Császármetszéssel nyert, barrier mögött tartott (Carworth Farm)A tenyészet ELSŐ nemzedékét császármetszéssel hozták világra.

Nem tartalmaznak a placentán át nem jutó mikrobát

BR – „barrier reared” ≈ SPF

VAF – „virus antibody free” vírus ellenanyagtól mentes. (Charles RiverLaboratories)Laboratories)Ellenanyag kimutatáson alapul. Ugyanakkor kórokozó jelen lehet kimutatható ellenanyag szint nélkül is. Más esetekben az antitest még azonosítható lehet annak ellenére, hogy a kórokozó már nem található meg.

SOPF – „specific opportunistic free” A konkrét vizsgálat céljára, mely mikroorganizmusoktól mentesek az állatok. (IFFA Credo)

MD – „minimal disease” Lényegében javított konvencionális. „Clean conventional”

Page 10: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Konvencionális – „C” kategória

• Nincs kifejezett zsiliprendszer

• A levegő bejuthat szűrés nélkül.

• Az almot, tápot nem szükséges kezelni.

• Átöltözés „szociális jellegű” (saját ruházat megóvása)

• Változatos higiénia megoldásokat alkalmazhatnak:Fertőtlenítő oldatos felmosás– Fertőtlenítő oldatos felmosás

– Levegő szűrése

– Köpeny, állatházi cipő alkalmazása

• MD (minimal disease) jelzés, ha hosszabb ideig sikerül megóvni a fertőző betegségektől.

Page 11: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• A különböző mikroorganizmusok általi fertőzöttség befolyásolja az állatok általános állapotát, ezáltal a kísérleti eredményeket.

• Az inhomogenitás csökkentésének lehetőségei:

– Egyformán fertőzött állatok gnotobiota állatok

– A mikroorganizmusok számának csökkentése

Ismert mikrobiológiai állapot – „axenikus” állapot

Gnotobiota állapot Gnotobiota állapot fenntartása

Izolátor

Page 12: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

GF, gnotobiota, xenobiota

Csíramentes vagy „germ free” Mikrobamentes állatok

Gnotobiota (régebben axenikus) A csíramentes és az ismert mikrobákkal együtt élő állatok

Xenobiota („holoxenikus”) Konvencionálisan tartott állatok, ismeretlen számú és fajú mikrobákkal

A gnotobiota állatokat izolátorban kell tartani, hogy megelőzzük a xenobiotává válásukat !

Page 13: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Gnotobiota állatok csoportosítása

Attól függően, hogy az állatok hányféle ismert baktérium törzzsel élnek együtt, lehetnek:

• Monoasszociált – egyféle törzzsel fertőzött

• Diasszociált – kétféle törzzsel él együtt

• Oligoasszociált – három, vagy kevés törzs esetén• Oligoasszociált – három, vagy kevés törzs esetén

• Poliasszociált – több, de ismert törzs található meg bennük

SPF Gnotobiota

Azt garantálja, hogy mely kórokozók NEMtalálhatóak meg az

állatokban.

Azt tudjuk, hogy mely mikrobák

TALÁLHATÓAKmeg bennük

Page 14: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Gnotobiota állatok előállítása

• hiszterotomia, hiszterektomia útján

• embriotranszfer: beágyazódás előtti embrió átvitele álvemhesnősténybe

• cryoprezervatió (mélyhűtve tárolható)

Page 15: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• A – szint: maga az izolátor

• B – szint: sokféle. Mikroorganizmus összetételt tekintve és technikailag is.

• C – szint: legkevesebb akadály. Változó higiéniai szint. Több-kevesebb zsilipelési lehetőség kialakítása ajánlatos.

Az állatház helyiségei

• Állattartó helyiségek:– Tenyésztésre

– Kísérleti állatok elhelyezésére

• Kiszolgáló helyiségek:– Higiénia: mosó-fertőtlenítő helyiség, zsilipterek

– Műszaki: hőközpont, klímagépház

– Szociális: pihenő-étkező, öltöző, WC

– Raktár

Page 16: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• B – szint esetében funkcionális kapcsolat alapján kétféle megoldás:

– Körforgalmú, kétfolyosós

– Belső forgalmú, nagytermes

Az állatház helyiségei II.

– Belső forgalmú, nagytermes

• Munkaszervezés: „tiszta” „piszkos”

Page 17: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Szigorúan egyirányú folyamat

tenyésztőhely felhasználói intézmény

• Háromféle modell:

Tenyésztő- és felhasználói létesítmény viszonya

Háromféle modell:– Felhasználói intézmény a tenyésztő állatházhoz kötve (pl. tenyésztéssel

is foglalkozó intézeti állatházak)

– Egymástól távol elhelyezett intézmények

– A kísérleti állatok a laborban kerülnek elhelyezésre (izolátor, légtechnikai polc, -ketrec)

Page 18: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Fal-, padló és mennyezetkiképzés:– Moshatóság, fertőtleníthetőség.

– Ablak nem szükséges

– Ajtók tokja ideálisan fémből készül

– A konvex sarkok fém burkolattal védendők

– A konkáv sarkokat íveltre kell kiképezni a könnyű tisztíthatóság

Az állatházak építészeti megoldásai

– A konkáv sarkokat íveltre kell kiképezni a könnyű tisztíthatóság érdekében

– A padló sima, ellenálló burkolattal legyen ellátva (öntött műgyanta)

– A rágcsálók szobáiban a padló sík, rajta lefolyó nincs kialakítva

– Küszöb csak a zsilipsávban, az öltözőnél

– Falat legalább állványmagasságig csempézni kell

– B – szintű állatházakban állmennyezet kialakítása tilos!

Page 19: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Az ablak nélküli helyiségekben a világításnak az állatok igényeinek is meg kell felelnie és lehetővé kell tennie a munkavégzést.– Fény-sötétség ciklus

– Fény erőssége

– Hullámtartomány

Világítás és zaj az állatházban

• Zajszint max. 55 dB lehet.– Hirtelen, erős zajok (ultrahang) szervműködés megváltozása

Kerülendők, amennyire csak lehetséges

– Hangszórók alkalmazása zajelfedésre

Page 20: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Megfelelő hőmérséklet

• Megfelelő páratartalom

• Hatásos higiéniai eszköz: túlnyomás alkalmazása:

Szellőztetés az állatházban

ketrec állatszoba folyosóKülső

környezet

15 Hgmm

• Az állatház levegőjét szűrni kell.– Több lépcsőben, csökkenő pórusméretű szűrőn át

• Visszakeringtetés csak akkor, ha a káros gázokat (CO2, NH3) és a port eltávolítják

5 Hgmm 5 Hgmm5 Hgmm 15 Hgmm

Page 21: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Fekete-fehér öltöző

• Légzuhany

• Átadó autokláv: külső („fekete”) ajtó a konvencionális térben. Beépítik a falba.

• Átadó kamra: formaldehid gázt használ

• Buktató medence: fertőtlenítő folyadékkal töltött beton kád. A fertőtlenítő mosogatás egyik fázisa.

Csíraszám csökkentést szolgáló egyéb berendezések

fertőtlenítő mosogatás egyik fázisa.

• UV-zsilipek: baktériumok számát csak csökkenti. Germicid lámpa.

• Fertőtlenítőszer porlasztó: falak, nagyobb berendezési tárgyak

• Alomelszívó gép

• Mosogató medencék: 2-3-4 részes, alkalmazott technológiától függően

• Állatházi ruházat

Page 22: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Az állatházban tartott állatok egészségének védelme – A fertőtlenítés

Dekontamináció:A. szennyező anyagok, toxinok, radioaktív anyagok eltávolítása

a felületről.

B. jelentősége kiemelendő sterilizálás előtt: a szennyező anyagok csökkenthetik a mikrobás és a fertőtlenítőszer közötti érintkezés mértékétközötti érintkezés mértékét

Sterilizálás („csíramentesítés”):A. nincs kimutatható mikroorganizmus (beleértve mikoplazmát,

vírusokat, prionokat).

B. minden életképes alakot elpusztít, függetlenül attól, hogy kórokozó-e vagy sem.

Page 23: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

A fertőtlenítés

Dezinfekció („fertőtlenítés”):A. a környezetbe került kórokozók elpusztítása,

fertőzőképességgük megszüntetése.

B. nem minden mikroba elpusztítása a célja, csak a betegségeket kiváltóké és csak külső eljárás. A szervezeten belüli kórokozók elpusztítása szintén nem célja.belüli kórokozók elpusztítása szintén nem célja.

C. a csíramentesítéstől csak mértékében különbözik!

Page 24: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

A fertőtlenítő eljárások jellemzői

• Bakteriosztatikus hatás: a baktérium nem pusztul el, deszaporodása, fejlődése gátolt (pl. fagyasztás

• Szanációs effektus: a csíraszám olyan mértékű felületicsökkentése, amely már nem okoz fertőzést (kézmosás,felmosás, szellőztetés)

• Baktericid hatás: a baktériumok vegetatív alakjai elpusztulnak.(A spórák azonban NEM!)(A spórák azonban NEM!)

• Sporocid hatás: az ellenálló spórák is elpusztulnak(Clostridiumok, Bacillaceae). Csak néhány fertőtlenítőszerjellemzője!

• Virucid hatás: a vírusok elvesztik fertőzőképességüket,inaktiválódnak

• Fungicid hatás: gombák elpusztítása

• Paraziticid hatás: paraziták és azok szaporító alakjai (lárva, pete)elpusztulnak

Page 25: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Fertőtlenítő eljárások

• 3 fő csoport:

– Fizikai: hő, UV-, radioaktív sugárzás

– Kémiai: vegyületek, oldat vagy gáz formában– Kémiai: vegyületek, oldat vagy gáz formában

– Kombinált eljárások: kémiai és fizikai módszerek együttes alkalmazása

Page 26: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Fertőtlenítőszer csoportok

• Oxidálószerek:

– Perecetsav: szúrós szagú színtelen folyadék, legtöbb anyagra, fémre erősen korrozív hatású

– Hidrogénperoxid: ritkán használt, csak rozsdamentes acél műszerek fertőtlenítésére. Nehézfémek esetén robbanásszerűen bomlik!robbanásszerűen bomlik!

• Jód és vegyületei

– Jodofórok: az elemi jódnak felületaktív anyagokkal alkotott komplexei. Nem keverhetők szappannal, lúggal. 35 C° felett elbomlanak. Betadin, Braunol, Josan.

Page 27: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Klór és vegyületei: a hatásért a hipoklórossav a felelős. Baktericid, virucid, akár sporocid hatás, de gombaölő hatásuk nincs.

– Nátrium –hipoklorit: „Hipo”

– Klórmész: Ca-hipoklorit, CaCl2, Ca(OH)2 keveréke.

– Kloramin-B: Flóraszept. A hipónál stabilabb, csekélyebb a bőrizgató hatása.

Fertőtlenítőszer csoportok II.

bőrizgató hatása.

• Glikolok: kétértékű alkoholok, nedvszívó hatással.

– Trietilénglikol: levegő fertőtlenítés porlasztóból alkalmazva.

• Fenolok:

– Karbolsav: 10% víz felvételével fenol keletkezik. Ma már nem használják, csak származékait (Dodesept tinktúra)

– Krezol: krezol és káliszappan keveréke a krezolszappan(Lysol). Erőteljes antibakteriális hatás.

Page 28: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Tenzidek: Felületaktív vegyületek. Segítik a hidrofób szennyeződések eltávolítását. Szappanok, tisztítószerek.

– Anionaktív: általános tisztítószerek. A kationaktívdezificiens hatását közömbösítik!

– Kationaktív: bakterio- és fungisztatikus filmet képeznek. Kiemelendőek a kvaterner ammónium vegyületek. (Bradophen, Apesin, Metasept)

Fertőtlenítőszer csoportok III.

(Bradophen, Apesin, Metasept)

– Nem ionos tenzidek: antimikrobás hatásuk gyenge, de jó zsíroldók.

– Amfoter tenzidek: jelentős maradványhatás.

Page 29: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Alkoholok: Az etil- és a propilalkohol használatos.

– Etil-alkohol: leghatékonyabb fertőtlenítő hatása 70 V/V %-os koncentrációban van. Bakteriosztatikus hatású, hosszabb idő alatt baktericid. Influenza vírusra is hatékony. Spórákat tartalmazhat, ezért kézfertőtlenítésre, műtéti terület lemosására csak sterilre szűrve használható!

• Aldehidek: formaldehid, glutáraldehid. A leghatásosabb

Fertőtlenítőszer csoportok IV.

• Aldehidek: formaldehid, glutáraldehid. A leghatásosabb fertőtlenítőszerek.

– Formaldehid: vizes oldata a formalin. Gázosításra használt koncentráció: 0,1 V/V %. Az ammónia közömbösíti.

– Lysoform: formaldehidet, etilalkoholt és káliszappant tartalmaz.

– Glutáraldehid: enyhén savas kémhatású. Lúg hatására aktiválódik. Aktiválás után két hétig használható fel. Fémeket nem károsítja, a szappanok nem csökkentik hatását.

Page 30: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Koncentráció: fontos a megfelelő töménység használata! (70%-os alkohol!)

• Szelektivitás: – szelektívek azok a szerek, amelyek csak néhány mikroba fajra

hatásosak (pl. kvaterner ammóniumok: néhány Gram-pozitívbaktérium)

– Csoportszelektívek: baktericid, de nem virucid

Fertőtlenítőszerek hatásosságának feltételei

– Csoportszelektívek: baktericid, de nem virucid

– Széles spektrumú

• Kapilláraktív hatás: a szennyező anyagok feloldása, fellazítása. A hatás fokozható mechanikus módszerekkel.

• Hőmérséklet: a hőmérséklet növelése általában csökkenti a szükséges behatási időt. De: jodofórok (35 C°)

• A fertőtlenítés időtartama: Fertőtlenítő oldat rászárítása. Öblíteni lehet, de letörölni nem szabad.

Page 31: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Ketrecek fertőtlenítése:

• Kétfázisú fertőtlenítés:– Kialmozás

– Előmosás: vízsugár

– Mosás: meleg víz, detergens, szivacs, kefe

– Öblítés: külön kádban, meleg víz.

– FERTŐTLENÍTÉS

Állatházi tárgyak, eszközök fertőtlenítése

– FERTŐTLENÍTÉS

– Öblítés

– Szárítás

• Egyfázisú fertőtlenítés: korszerű mosószerek tartalmazzák a detergenst és a fertőtlenítőszert is.– Kialmozás

– Előmosás

– FERTŐTLENÍTÉS

– Szárítás

Page 32: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Kíméletes kezelés– Aminosavak (pl. lizin)

– Vitaminok (A, E, K, B6)

• Autoklávozás: túltelített gőzzel történő hőkezelés– 121 C°-on 15 percig

– Pellet mérettől függ, általában inkább 20-30 perc

A takarmány csíraszámának csökkentése

• Ionizáló sugárzás– Csomagolt takarmány sterilizálására is alkalmas

– SPF: 25 kGy, GF állatok: 40 kGy (Bacillus fajok miatt)

• Szerves savas kezelés

• Az ivóvíz kezelése:– Klórozás

– Sósavval pH 3-ra savanyított ivóvíz

Page 33: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Gázok: formalin-, perecetsav aeroszol, formaldehid. Gázmester végezheti!

• Fertőtlenítő takarítás: száraz tisztítás (pl. seprés) nem ajánlott.– Padlóburkolat: kőagyaglap, kerámia, műgyanta. Felmosáshoz két

edény használandó. A felmosáshoz használt eszközöket ki kell mosni,

Helyiségfertőtlenítés

edény használandó. A felmosáshoz használt eszközöket ki kell mosni, szárítani és fertőtlenítőszerben tárolhatók.

– Falak: legalább állványmagasságig keményburkolat. Meszelt fal mésztejjel átfesthető.

– Nyílászárók, átadó eszközök: lemosásos, leáztatásos módszer

• Hatékonyság ellenőrzése: a kritikus helyek környékéről mikrobiológiai mintavétel.

Page 34: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• A kritikus helyek környékéről mikrobiológiai mintavétellel ellenőrizzük a fertőtlenítő takarítás hatékonyságát.

Helyiségfertőtlenítés hatékonyságának ellenőrzése

Page 35: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• SPF állatházak gyakorlata (konvencionális állatházakban lehet enyhébb szabályozás)

• „Fekete – fehér” öltöző

• Zuhanyozás, hajmosás. Az alkar, kéz fertőtlenítése kombinált fertőtlenítőszerrel. Törölközés steril törölközővel.

• Steril ruházat felvétele.

Személyi higiénia

• Steril ruházat felvétele.

• Ha van légzuhany: nem kötelező az alsóruházat váltása, de speciális védőoverall használata igen (az állatot védi az ember testén lévő mikroorganizmusoktól)!

Page 36: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Kéz- és az alkar fertőtlenítése:

– Rezidens- és tranziens flóra

– Több szakaszos kézfertőtlenítés.

– Mint a sebészi bemosakodás.

– Mechanikai tisztítás

Személyi higiénia II.

– Mechanikai tisztítás

– Ismételt dezinficiálás.

• A rezisztencia kialakulásának megelőzésére érdemes rendszeres időközönként más-más hatóanyagú kézfertőtlenítő-szert használni az állatházban.

Page 37: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• A személyi higiénia oktatása: az SPF térben való viselkedés szabályait tanulni kell.– Minden változtatást tanfolyammal kell megismertetni a személyzettel.

– Az eljárást a Szabvány Műveleti Előírásban rögzíteni kell.

– Személyi napló (influenza, nátha, köhögés, hőemelkedés, hasmenés rögzítése)

• Látogatók: belépésük csak nagyon indokolt esetben!

Személyi higiénia III.

• Látogatók: belépésük csak nagyon indokolt esetben!– A személyi higiéniai előírások rájuk nézve is kötelezőek.

– adatrögzítés

• Vendégdolgozó: nem minősül látogatónak.– A személyi higiéniai előírások rájuk nézve is kötelezőek.

– Saját állatházban legalább a megelőző 2 hétben nem járt.

– Állatokkal foglalkozhat amennyiben rendelkezik megfelelő tanúsítvánnyal

Page 38: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Szállítás egyszer használatos dobozban

• SPF esetén légszűrő.

• Rövid szállítás (<2-3h):

– Elegendő faforgács alommal ellátni.

• Hosszú szállítás (4-6h):

– Víz és táplálék ellátás.

– SPF: folyadékot 2%-os steril agar-agar oldattal lehet biztosítani.

– Konvencionális: alma, sárgarépa

Az állatok bezsilipelése

– Konvencionális: alma, sárgarépa

• Bezsilipelés (SPF):

– A gépkocsiból a dobozokat az állatház előterébe (járda, útpadka NEM!).

– Külső felszín fertőtlenítése. Rögzítőkapcsok kiszedése, de a fedél zárva marad.

– Átadó ablak

– Az állatok áthelyezése

– A doboz eltávolítása a konvencionális tér felé.

• Egyszerűsíteni csak akkor lehet, ha az állatok magasabb higiéniai szintű helyről érkeznek.

Page 39: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• „ 18. § (3) A létesítményekben biztosítani kell az újonnan

érkező állatok elkülönítését egészségi állapotuk felméréséig és

a már beszoktatott állatokra jelentett lehetséges egészségügyi

kockázatok értékeléséig, és minimalizálásáig.” (A Kormány 40/2013.

(II. 14.) Korm. Rendelete az állatkísérletekről)

• Az állatházba bekerült állatokat karanténezni kell.

Karantén

• Az állatházba bekerült állatokat karanténezni kell.

• Kivéve: csíramentes állatok akklimatizációs idő

• Ha magasabb szintről érkeznek az állatok (SPF MD) a karantén lényegében megegyezik a megszokási idővel.

• Nem SPF állatok esetén a karantén ideje függ:– Az állat fajától

– A távol tartani kívánt betegségtől

• A karantén nem lehet az SPF állatház területén.

Page 40: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

„ 19. § (5) A létesítményekben gondoskodni kell az állati

tetemek és hulladékok higiénikus tárolásáról és biztonságos

ártalmatlanításáról.” (A Kormány 40/2013. (II. 14.) Korm. Rendelete az állatkísérletekről)

• Alom: faforgács vizelettel, ürülékkel, táp maradékkal szennyezve.

Hulladékok kezelése

szennyezve.

• „Minden anyag fertőzött ami az állatházból kikerül.” SPF

• Kis állatház: kis mennyiségű hulladék, fóliazsákba kell gyűjteni

• Nagyobb mennyiség: komposztálás (kertészeti hulladékkal keverve

• Fertőzött, veszélyes hulladék: speciálisan kezelendő. Égetés.

Page 41: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Az ember mint környezeti tényező:

– Szabályozza az állatház hőmérsékletét

– világítását,

– a ketrecek méretét (az állatok mozgásterét),

Az állatházban tartott állatok egészségének védelme – A szociális környezet

– a ketrecek méretét (az állatok mozgásterét),

– takarmányozást,

– párválasztást.

• „Handling”

Page 42: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Akklimatizáció: az állat szervezetének alkalmazkodása a megváltozott környezethez.

• Adaptálás: a kísérleti körülményekhez való alkalmazkodás kényszere.

• Kísérlet megtervezésekor figyelembe kell venni a lehetséges stresszorokat:

Szállítás,

Akklimatizáció, adaptálás

– Szállítás,

– ketrec-, alom-, táp váltás,

– gondozó szerepe,

– mikrobiológiai állapot

• Szállítás: félelem, zaj, hőmérséklet változás, táplálék- és folyadék megszorítás Kortikoszteroid hormonok plazma szintjének emelkedése.

Page 43: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Laborizálás: nemzedékeken keresztül való alkalmazkodás a laborkörnyezethez.

– Ketreckörülmények

– Alomanyagon való tartózkodás

– Takarmány és ivóvíz ellátottság,

Laborizálás

– Takarmány és ivóvíz ellátottság,

– Sajátos zajok, állatcsoportok (pl. „háremek”)

Page 44: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Kísérleti állatok elhelyezése

Az állatok megfelelő elhelyezése és környezetük megfelelő alakítása nélkülözhetetlen a megfelelő minőségű, megbízható kísérleti eredményekhez, az állatok jóléte érdekében, valamint a személyzet egészsége és biztonsága tekintetében. ____________________________________________________________

Az állatok részére elegendő hely kell ahhoz, hogy megforduljanak és a helyzetváltoztatást megtehessék; hozzá kell jutniuk az élelemhez és a vízhez, elegendő tiszta alommal ellátott terület kell a pihenéshez, és terület kell vízhez, elegendő tiszta alommal ellátott terület kell a pihenéshez, és terület kell a mozgáshoz is.

Alkalmat kell adni az állatoknak, hogy a fajra jellemző viselkedésmintákat gyakorolhassák.

Amikor lehetséges, a társas állatokat csoportokban kell elhelyezni és nem egyedileg, feltéve, hogy az elhelyezés nem ellen javallt a kérdéses protokoll szempontjából és nem teszi ki az állatokat szükségtelen veszélynek.

Erősen szociális és domesztikált állatoknak előnyös a pozitív emberi kapcsolat.

Page 45: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Térigény

• Törvényben előírt nagyságú területet kell biztosítani a kísérleti állatoknak.

• Figyelembe kell venni az állatok várható fejlődését, hogy mindvégig elegendő terület álljon rendelkezésükre.

Page 46: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Patkány térigénye

Page 47: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Az állatok környezetének jellemzői

mikrokörnyezet - elsődleges tartási tér (ketrec, kennel, ól)

makrokörnyezet -másodlagos tartási tér (állattartó terem,istálló)

Page 48: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Ketrec

Rögzített vagy mozgatható konténer, melyet tömör falak vesznek körül és legalább az egyikoldalán rácsos vagy dróthálóval fedett, melyben egy vagy több állatot tartanak, vagyszállítanak. A tenyészet sűrűségének és a konténer méreteinek függvényében az állatokmozgása viszonylag korlátozott.

Ól / kennel

Tartási terek

Falakkal, ráccsal vagy dróthálóval körülzárt terület, ahol egy, vagy több állatot tartanak. A terület mérete és az állomány sűrűség függvényében az állatnak általában több mozgástere van, mint a ketrecben.

Kifutó

Fallal, ráccsal, kerítéssel vagy dróthálóval körülzárt terület, általában kőépületen kívül helyezkedik el, melyben a ketrecben vagy ólban tartott állat időnként, etológiai vagy élettani szükségleteinek megfelelően, szabadon mozoghat.

Page 49: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Macskák: több szinttel rendelkező berendezés –szeretnek magasabb helyeken pihenni

Speciális elhelyezési igények

Tengerimalacok számára fontos a megfelelő búvóhely kialakítása

Nyulak számára is fontos aberendezés többszintű kialakítása.Érdemes a kifutót a tartási hellyelegybenyithatóra kialakítani.

Page 50: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Környezetgazdagítás

Kisállatok (patkány, egér stb) :papírhengerfatiplizene, bekapcsolt rádió stb

Nagyállatok (kutya, sertés, macska):Labdák,Játékok,Kikötött labdák, játékok

Page 51: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• 18. § (2) „Egymással nem összeférő fajok nem tarthatók közös

helyiségben, ragadozó és zsákmányállat esetében látó-, szagló

vagy hallótávolságon belül.” (A Kormány 40/2013. (II. 14.) Korm. Rendelete az állatkísérletekről)

Fajok közötti és fajon belüli hatások

• A szagtér, hangtér és mikrobatér nem állatszobát, hanem egymásba vagy közös folyosóra nyíló helyiséget.

Minden fajt külön helyiségben kell elhelyezni!

Page 52: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Ultradiális: 1-20 órás periódus

• Cirkadiális: kb. 24 órás, napi ritmus

• Cirkannuális: éves ciklus

Napi ritmus

• Altatószer-, sugárérzékenység változik.

• Befolyásolja a hormon szinteket.

• A naponta vizsgált paramétereket mindig ugyanabban az órában kell vizsgálni.

Page 53: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

• Kondícionálás: az állatok kiválasztása, kísérletre történő előkészítése.

– Kísérleti körülményekhez szokatás,

– kiválogatás: méret, kor, ivar,

– reakció szerinti válogatás,

Kondícionálás

– reakció szerinti válogatás,

– műtéti beavatkozások (elektróda, kanül beültetés),

– edzés, gyakorlás (úszás, labirintus),

– Adaptálás a kísérleti technikához.

Page 54: Állatkísérletek Elmélete és Gyakorlata A és B kurzusweb.med.u-szeged.hu/expsur/allatkiserletek/akkreditacio/B/C/11 Kiserleti allatok... · Gnotobiota állatok csoportosítása

Köszönöm a figyelmet!