manual de practicas de microbiologia
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Manual de Practicas de MicrobiologiaTRANSCRIPT
UNIVERSIDAD DE SONORA
DEPARTAMENTO DE MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
MANUAL DE REPORTES DE PRACTICAS DE MICROBIOLOGIA
Profesora: Esther Margarita Gutiérrez Verduzco
Alumnos:
Jesús Tadeo Guzmán Barreras
María José Soto Osuna
28 de Agosto del 2015
Objetivo
Cubrir los diferentes aspectos básicos de la Bioseguridad desde las prácticas
estándar, técnicas de desinfección, niveles de bioseguridad, buenas prácticas de
laboratorio, manejo de desechos y el uso de equipo de protección personal.
Introducción
La bioseguridad se define, como un conjunto de medidas encaminadas a proteger
a los trabajadores y los pacientes de la exposición a riesgos biológicos en el
laboratorio, así como también la protección del ambiente. Compromete también a
todas aquellas otras personas que se encuentran en la institución. Los laboratorios
microbiológicos constituyen medio ambientes de trabajo especiales, generalmente
únicos, que pueden presentar riesgos de enfermedades infecciosas identificables
para las personas que se encuentren en o cerca de ellos. La norma que rige la
bioseguridad en los laboratorios es la NOM-087-ECOL-SSA1-2002.
Los residuos peligrosos biológicos infecciosos (RPBI), son aquellos que se generan
durante las actividades asistenciales a la salud de humanos o animales en los
centros de salud, laboratorios clínicos o de investigación, bioteros, centros de
enseñanza e investigación, principalmente; que por el contenido de sus
componentes puedan representar un riesgo para la salud y el ambiente. Esta Norma
Oficial Mexicana, establece los requisitos para la separación, envasado,
almacenamiento, recolección, transporte, tratamiento y disposición final de los
residuos peligrosos biológico-infecciosos que se generan en establecimientos que
presten servicios de atención médica.
Procedimiento
Mantener disciplina y el orden dentro del
laboratorio.
Desinfectar el área de trabajo antes y
después de la práctica.
Dejar limpio todos los equipos utilizados.
No manejar equipos que se desconozca
su operación.
No sustraer ningún material del laboratorio.
Colocar todos los materiales de
desecho en los recipientes específicos.
Cualquier material que no se utilice en
la práctica mantenerlo fuera
del área de trabajo.
La siembra y resiembra siempre
tendrán que realizarse cerca del
mechero.
Actividad
1. Realizar un resumen de la norma NOM-087-ECOL-SSA1-2002.
De acuerdo con la NOM-087-ECOL-SSA1-2002 sobre el manejo de residuos con
agentes biológico-infecciosos (RPBI).
La norma señala como agente biológico-infeccioso “cualquier organismo que sea
capaz de producir enfermedad. Para ello se requiere que el microorganismo tenga
capacidad de producir daño, esté en una concentración suficiente, en un ambiente
propicio, tenga una vía de entrada y estar en contacto con una persona susceptible”.
De acuerdo con la Norma 087 se puede representar con cuatro pasos importantes
para el manejo de RPBI, los cuales se verán explicados a continuación:
Paso 1 Identificar los residuos Paso 2 Envasar
Tipos de residuos Estado físico Envasado/Color
Punzocortantes:
Agujas de jeringas desechables,
navajas, lancetas, agujas de suturas,
bisturí y estiletes de catéter.
Solido Recipientes de
polipropileno/ROJO
No anatómicos:
Materiales de curación empapados en
sangre o líquidos corporales.
Solido Bolsa de
plástico/ROJO
Materiales desechables:
Que contengan secreciones
pulmonares de pacientes sospechosos
de tuberculosis, diagnostico de fiebres
hemorrágicas o enfermedades
emergentes; y usados para cultivo de
agentes infecciosos.
Solido Bolsa de
plástico/ROJO
Patológicos:
Placentas, pastes de tejido humano,
partes del cuerpo (que no se
encuentren el formol).
Solido Bolsa de
plástico/AMARILLA
Sangre: Líquido Recipiente
hermético/ROJO
Líquida y sus derivados excluyendo la
sangre seca.
Muestras para análisis:
Excluyendo orina y excremento. Líquido
Recipiente
hermético/AMARILLO
Fluidos corporales Líquido Recipiente
hermético/ROJO
Paso 3 Almacenamiento temporal
Se tiene que seleccionar un área especial de almacenamiento, el cual tendrá que
estar claramente señalizada, además esta área tiene que encontrarse en buenas
condiciones de limpieza; los RPBI deberán almacenarse en contenedores con tapa,
e igualmente tendrán que quedar claramente identificadas.
El tiempo máximo de almacenamiento es de 7 días. El personal encargado de esto,
tienen recibir capacitaciones y contar con el equipo necesario para protección.
Paso 4 Transporte externo
Los RPBI que no han recibido tratamiento de desinfección tienen que enviarse a
lugares especializados y autorizados a esta tarea; los que si se hayan sido
desinfectados adecuadamente pueden ser recogidos por el camión de la basura
común.
2. Describir 10 materiales y 5 equipos utilizados en el laboratorio de
microbiología.
Asas de siembra: Se utilizan para la siembra, pueden ser metálicas o
de plástico, y curvas o rectas.
Placas Petri: Recipiente para la preparación de medios de cultivo
sólidos.
Micropipetas: se utilizan para pipetear pequeñas cantidades de
líquidos.
Mechero de Bonsen: encendedor utilizado para calentar o esterilizar
las muestras o reactivos químicos.
Tubo de ensayo: Pequeño tubo cilíndrico de vidrio con un extremo
abierto, se utiliza para contener muestras líquidas o sólidas.
Porta objetos: Lámina que sirve de soporte para las preparaciones o
los cuerpos que se observaran en el microscopio.
Matraz Erlenmeyer: Frasco de vidrio que se utiliza principalmente para
las preparaciones de soluciones.
Gradilla: Herramienta que se utiliza para sostener y almacenar gran
cantidad de tubos de ensayo.
Cubreobjetos: Lámina delgada de cristal de forma cuadrangular con la
que se cubren las preparaciones o los cuerpos que se observan en un
microscopio.
Pizeta: Recipientes en general de plástico con tapón y un tubo fino y
doblado, que se emplea para contener agua destilada o
desionizada. Se emplea para dar el último enjuague al material de
vidrio después de lavado, y en la preparación de disoluciones.
o Estufa de incubación: Es una cámara de temperatura controlada para
el cultivo de microorganismos.
o Cámaras refrigeradas: Se utilizan para conservar tanto reactivos
como microorganismos.
o Microscopio óptico: Instrumento ópticos que sirve para ampliar la
imagen de objetos o seres microscópicos.
o Centrifuga: Aparato que aplica sobre los tubos de ensayo una fuerza
centrífuga los que permite la separación de los distintos componentes
de una muestra mediante la precipitación.
o Contador de colonias: Aparato que mediante la iluminación de la
placa y una lupa, permite observar con mayor nitidez las colonias de
microorganismos y por lo tanto facilita su recuento.
3. ¿Qué tratamiento se le da a los cultivos contenidos tanto en placas de
Petri como en los tubos de ensayo después de terminar con su estudio?
Se sugieren tres opciones: autoclave o esterilizador, contratar servicio
profesional para la eliminación de desechos, u olla a presión.
4. ¿Cuál es el tipo de contenedor en el que se desecharían las placas de
Petri que no han sido tratados por ningún método de destrucción?
En la basura municipal. En casos especiales se desecharían en bolsas de
polietileno de color rojo para RPBI.
Conclusión
El laboratorio de microbiología es donde llevaremos a practica todo lo aprendido en
teoría por eso es de suma importancia conocer los aspectos básicos de la
bioseguridad y las normas del laboratorio para poder cumplirlas y así evitar que
surjan accidentes y/o disminuir los riesgos que puedan causar al trabajar con
sustancias peligrosas o con residuos peligrosos biológicos- infecciosos. En caso de
que ocurra un incidente es muy importante que sepamos donde se encuentra el
botiquín, los lavados y salidas de emergencia, los extinguidores etc.
Es esencial el uso del equipo de protección como: bata (abrochada), guantes, cubre
bocas y lentes si así lo requiere la práctica, para evitar cualquier exposición hacia
los microorganismos o equipo peligroso que puedan comprometer nuestra salud
Conocer la norma 087 es fundamental para el manejo de los RPBI, la cual establece
como clasificar y desechar todos los residuos peligrosos biológicos- infecciones
como lo son: sangre, tejidos, cepas, objetos punzo-cortantes. Los residuos antes
descritos son desechados en recipientes especiales según las características y
clasificación de cada desecho.
El manejo inadecuado de los RPBI por parte de cualquier involucrado en este
proceso aumenta el riesgo para las personas en los pasos subsiguientes de la
cadena (recolectores de basura, personal de limpieza etc.), así como para la
población en general.
Anexo a practica 1
Mutaciones responsables de virulencia de bacteria de la peste
Imagen: Una microfotografía
electrónica de barrido (SEM)
mostrando una masa de bacterias,
Yersinia pestis, en el intestino
anterior de una pulga infectada
(Fotografía cortesía de los
Institutos Nacionales de Salud de
los EUA]).
Un equipo de microbiólogos moleculares ha encontrado que la adquisición de una sola proteína en
su existencia temprana activó a la bacteria de la peste Yersinia pestis para invadir el tejido pulmonar,
pero que se requirieron mutaciones posteriores de este gen para que ese organismo pudiera
propagarse rápidamente a los ganglios linfáticos y producir la forma bubónica de la enfermedad.
La Yersinia pestis, una bacteria Gram negativa que causa la peste bubónica y la neumónica, se
puede diseminar rápidamente a otras partes de sus hospederos mamíferos. La Y. pestis expresa en
su superficie la enzima activadora del plasminógeno (Pla), de la cual se ha sugerido que desempeña
un papel en la diseminación bacteriana.
Unos investigadores de la Universidad de Northwestern (Evanston, Illinois, EUA) trabajaron con
cepas ancestrales de Y. pestis en modelos de ratón. Encontraron que la adquisición de un solo gen
que codifica la proteasa Pla fue suficiente para que las cepas más ancestrales y profundamente
arraigadas de Y. pestis pudieran producir la peste neumónica, lo cual indica que la Y. pestis se cebó
para infectar los pulmones en una fase muy temprana de su evolución. Sin embargo, en esta etapa
la bacteria no producía la forma fulminante de la peste neumónica, ni podía diseminarse a los
ganglios linfáticos para producir la forma bubónica.
Se hizo evidente que a medida que la Y. pestis evolucionó más, sus cepas modernas adquirieron
una modificación de un solo aminoácido en Pla, que optimizó la actividad de esta proteasa. Mientras
que esta modificación no era necesaria para producir la peste neumónica, esa sustitución sí se
necesita para inducir eficazmente la infección invasiva asociada con la peste bubónica.
“Nuestros hallazgos demuestran cómo la Y. pestis tenía, muy temprano en su evolución, la capacidad
para producir una enfermedad respiratoria grave”, dijo el autor principal, el Dr. Wyndham Lathem,
profesor asistente de microbiología e inmunología de la Universidad de Northwestern. “Esta
investigación nos ayuda a comprender mejor cómo las bacterias pueden adaptarse a los entornos
para producir la enfermedad mediante la adquisición de pequeños fragmentos de ADN. Nuestra
información sugiere que la inserción y luego la posterior mutación del Pla dio lugar a nuevas cepas
de la enfermedad, de rápida evolución. Esta información puede mostrar cómo los nuevos patógenos
respiratorios podrían surgir con sólo pequeños cambios genéticos”.
Bibliografía
Tortora, Gerard J; Funke, Berdell R; Case, Christine L. 2007.
Introducción a la microbiología. Editorial Médica Panamericana S.A.
ROSS, Michael H. PAWLINA, Wojciech. (2007). Histología Texto y Atlas
Color con Biología Celular y Molecular. 5ta Edición. Buenos Aires:
Editorial Médica Panamericana.
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html
http://www.labmedica.es/microbiologia/articles/294759991/mutaciones_
responsables_de_virulencia_de_bacteria_de_la_peste.html
Objetivo
El alumno aprenderá el uso y el cuidado del microscopio compuesto al observar de
manera directa entre porta y cubre heces y cultivo de Protozoarios.
Introducción
El microscopio es un instrumento diseñado para ser posible la observación y
examen de seres muy pequeños o los elementos formativo de uno de ellos y que
están fuera de la visibilidad adecuada del ojo humano. Hay varios tipos de
microscopio, los más usados y conocidos son los microscopios simples o lupa, los
microscopios compuestos y el microscopio binocular estereoscopio, luego podemos
encontrar otros tipos de uso más especializado en determinados campos de la
biología y otras ciencias. El más revolucionario en el campo biológico es el
microscopio electrónico que usa como fuente de funcionamiento un chorro de
electrones.
El microscopio es indispensable en el Laboratorio de Microbiología para el estudio
de la morfología y estructura de los microorganismos, así como su reacción a
diferentes colorantes, lo cual junto con otros criterios, permitirá su identificación, por
lo tanto, es importante conocer su adecuado manejo.
La forma más simple de examinar las bacterias y otros microorganismos vivos es
suspenderlos en agua u otro líquido, colocar una gota de esta suspensión en un
portaobjetos ordinario y encima un cubreobjetos, utilizando para su observación al
microscopio los objetivos seco débil y seco fuerte. Existen otros métodos como son
el de gota pendiente y el micro-cultivo.
Procedimiento
1. Tome tres portaobjeto limpios y secos, por separado flaméelos para eliminar
grasa, en uno con la ayuda de una pipeta Pasteur colocar una gota de cultivo
de protozoarios, en los otros portaobjetos una gota de solución salina o lugol
en la cual en uno mezclará con el aplicador pequeña cantidad de heces
fecales y en el tercero biopelícula oral tomado con un hisopo.
2. Colocar encima de cada portaobjeto un cubreobjeto cuidando que todo caiga
dentro del portaobjeto y de que no queden burbujas.
3. Observar al microscopio y anotar resultados.
Resultados y observaciones
Protozoarios Heces
40 X 40 X
En esta laminilla se pueden observar microorganismos, que en este caso son protozoarios de forma cilindrica de un color azul más claro que el fondo, tambien se pueden ver unos de forma esferica y de un tono amarillo.
Esta fotos es de una muestra de heces fecales caninas, se pueden observar puntos de color marrón oscuro los cuales vendrian siendo bácterias o parasitos.
Actividad
1. ¿Qué es poder de resolución?
Capacidad de un sistema óptico para diferenciar entre dos puntos o líneas
muy próximos.
2. ¿Cuáles son los usos del microscopio compuesto?
Se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados
en láminas tan finas que se transparentan, aumentan las imágenes de
objetos y organismos no visibles a simple vista.
3. ¿Qué importancia tiene el estudiar y observar los microorganismos
en muestras biológicas?
El estudio de los microorganismos es realmente importante ya que éstos son
parte de nuestra naturaleza, y de este modo, siempre hemos estado
rodeados de ellos. El observar y estudiar los microorganismos ha sido de real
utilidad para el hombre, en áreas como: la medicina, en conocer que es lo
que causa las diferentes enfermedades, y de este modo saber cómo tratarlas,
como la creación de antibióticos; también es importante para aspectos como
la industria, la agricultura y la economía, ya que han servido para evitar
pérdidas económicas en cosechas de productos agrícolas, al conocer los
microorganismos patógenos que infectan y dañan los cultivos y poder saber
cómo controlar o evitar que estos microorganismos ataquen los cultivos.
4. ¿Cuáles son los principales cuidados que se deben de tener con el uso
del microscopio?
Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos
manos, sujetándolo por el brazo con una mano y por el pie con la
palma de la otra.
Una vez colocado el microscopio en su sitio, no debe moverse hasta
que finalice la práctica. Cuando se vaya a cambiar de observador se
debe mover él y no el microscopio.
Mover siempre suave y lentamente cualquier elemento del
microscopio.
Nunca poner los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo. Si se
ensucian dichas lentes se limpiarán con un paño suave de algodón,
sin utilizar ningún disolvente.
No sacar de su sitio el ocular ni los objetivos, a no ser que vayan a
ser sustituidos, en cuyo caso la operación debe realizarse lo más
rápidamente posible, para evitar la entrada de polvo.
Asegurarse de que el portaobjetos está bien seco cuando va a ser
colocado sobre la platina.
Al enfocar, sobre todo con los objetivos de mayor aumento, hay que
evitar que el extremo del objetivo choque con la preparación. Para
ello acercaremos el objetivo a la preparación mirando lateralmente y
luego, mirando ya a través del ocular, enfocamos alejando el objetivo.
5. Escriba el nombre de cada una de las partes
del microscopio compuesto.
1. Lente
2. Brazo
3. Platina
4. Tornillo macrométrico
5. Tornillo micrométrico
6. Base
7. Foco
8. Diafragma
9. Pinzas
10. Objetivos
11. Revolver
12. Ocular
Conclusión
En esta práctica aprendimos a usar el microscopio y que con el uso correcto del
microscopio nos brinda una imagen más clara de lo que estamos buscando, así
como su buen cuidado le alarga la vida y nos brinda ventajas a nosotros en este
caso los universitarios al poder tener acceso a este material, que si no se cuidará
de manera correcta no tendríamos. Por eso tenemos que seguir las normas para el
buen uso; como dejarlo como debería de ser con el objetivo de menor aumento, la
luz en baja intensidad, la platina has abajo etc.
También aprendimos que el examen directo o en fresco de microorganismo es de
gran utilidad para detectar relaciones de tamaño, forma y movilidad. Esta
observación en fresco o en directo tiene muchos beneficios porque ves a los
microorganismos al “natural” y son muy útiles para ver parasitos vivos en heces
fecales.
Anexo a practica 2:
Instalarán laboratorio de microbiología
El Congreso del Estado aportó 200 mil pesos para la operación de un laboratorio de microbiología que
permitirá analizar productos lácteos de la región y garantizar la sanidad e inocuidad de los mismos, y con ello
facilitar su comercialización.
Marco Antonio Novelo Osuna anunció lo anterior durante la realización de la LXV asamblea de la Unión
Ganadera Regional y reiteró el exhorto hecho a las secretarías de Agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural,
Pesca y Alimentación (Sagarpa) y de Fomento Agropecuario (Sefoa) de Baja California a concluir el rastro
Tipo Inspección Federal (TIF) que permanece inconcluso en Ensenada desde hace varios años.
Novelo Osuna, presidente de la Comisión de Agricultura, Ganadería, Asuntos Portuarios y Pesca del
Congreso del Estado, señaló que es urgente e indispensable iniciar la operación de dicho rastro para
garantizar la sanidad de los productos cárnicos de esta región.
Sobre todo, dijo, ante las deficiencias técnicas y sanitarias con que opera actualmente el rastro municipal.
En torno a la operación del laboratorio de microbiología, el diputado señaló que dicho fondo procede de
aportaciones hechas por tres diputados locales, ante la solicitud de productores lácteos que requerían de ese
tipo de inspecciones para mejorar sus procesos de vigilancia sanitaria y la comercialización de la leche y
derivados que se producen en el municipio ensenadense.
Bibliografía
http://www.moodle19.manuelgvs.com/cuidado.htm
Tortora, Gerard J; Funke, Berdell R; Case, Christine L. 2007. Introducción a
la microbiología. Editorial Médica Panamericana S.A.
http://www.elvigia.net/general/2015/4/12/instalaran-laboratorio-microbiologia-
193739.html
Objetivo
El alumno realiza la preparación de frotis para colorear microorganismos por medio
de tinción simple con azul de metileno para observar hongos levaduriformes.
Introducción
Entre las principales características de las bacterias se encuentran su tamaño,
forma, estructura y tipo de agrupación. Todas estas características van a constituir
la morfología propia de las células bacterianas.
Existen también algunas especies de bacterias que presentan otras características
además de las ya mencionadas y que pueden ser detectadas a través de técnicas
específicas de tinción, como es la presencia de diferentes elementos facultativos:
flagelos, cápsulas, esporas, corpúsculos metacromáticos, etc.; y que igualmente
forman parte de la morfología de las bacterias.
La morfología nos da una información primaria sobre el tipo de bacteria, no de forma
concluyente pero sí como paso previo a cualquier proceso de identificación y
clasificación taxonómica.
Tipos de Tinción
Tinción simple. Solo nos sirve para hacer más fácilmente visibles a las
bacterias sin resaltar ninguna característica en especial.
Tinción negativa. Este método de tinción utiliza colorantes neutros o ácidos
ya que tienen poca afinidad por la célula bacteriana por lo tanto como no se
absorben se colorea el fondo en el que están las bacterias pero la célula
queda incolora y transparente, así pues las bacterias aparecen como
pequeñas áreas iluminadas en un fondo oscuro.
Tinción diferencial. Las bacterias se diferencian unas de otras tanto física
como químicamente, por lo cual su reacción ante algunos colorantes también
será diferente dando lugar así a grupos tintoreales característicos.
Tinción estructural. Existen diferentes tipos de colorantes que de acuerdo a
su afinidad se utilizan para teñir y detectar ciertas estructuras de la célula
bacteriana como son las esporas, los flagelos y las cápsulas.
Material
Mechero
Portaobjetos
Asas bacteriológicas
Puente de tinción
Piseta
Caja Petri
Microscopio
Colorante: azul de metileno
Cepas microbianas
Procedimiento
1. Flamear los portaobjetos lavados y secos para desengrasarlo.
2. Colocar una pequeña gota de solución salina al 0.85% en el centro del
portaobjeto, y con el asa bacteriológica, tomar una pequeña cantidad del
centro de la superficie de la colonia o material, emulsionar el material en la
gota de solución salina y extenderla uniformemente en una superficie
aproximada de 1 cm2.
3. Dejar secar la extensión al aire, para evitar la formación de aerosoles y
provocar una contaminación ambiental.
4. Una vez seca la extensión, fijarla al calor suave, pasando rápidamente el
portaobjetos sobre la flama del mechero, sin que se caliente demasiado,
unas 5 veces.
5. Cubrir el frotis con una solución de azul de metileno y dejar actuar el
colorante durante 1 minuto y lavar el frotis
6. Lavar el frotis usando una piseta para tal actividad o bajo el chorro de agua
con poca presión, pero es mejor usar la piseta, observar al microscopio.
Resultados
40 X
Ambas fotos son de la misma laminilla de una muestra de hongos
levaduriformes, en ellas se pueden observar microorganismos de forma
esférica de un color azul rey, con los bordes más oscuros, se encuentran desde
individuales, en parejas y hasta en racimos pequeños y grandes. En base a los
colores, podemos ver que en este tipo de tinción, los microrganismos son los
que se tiñen.
Actividad
1. ¿Por qué es conveniente realizar una capa fina al momento de hacer el
frotis del microorganismo a estudio?
Porque si se coloca demasiada muestra de cultivo bacteriano, el extendido
quedara muy grueso y una vez teñido, al observarlo en el microscopio, se
observara una masa oscura de estructuras que no pueden ser distinguidas en
forma individual y el proceso de identificación de la morfología, arreglos y
estructuras se dificulta.
Conclusión
En esta práctica aprendimos a preparar un frotis para darle color y contraste a los
microorganismos por medio de tinción o colorantes simples como fue el caso el azul
de metileno para observar hongos levaduriformes. También conocimos la
importancia de los colorantes, la principal dificultad es la falta de contraste entre la
célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste es
la utilización de colorantes. Estos pueden emplearse para distinguir entre tipos
diferentes de células o para revelar la presencia de determinados constituyentes
celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares, centros de
actividad respiratoria, etc. Además de lo útil que es la fijación para bacterias, la
fijación por el calor es lo más común, aunque también puede fijarse con sustancias
químicas como formaldehido, ácidos y alcoholes. Después de la fijación, si se añade
el colorante, no se producen cambios estructurales en el protoplasma.
Al finalizar los procedimientos logramos ver por medio del microscopio la morfología
y tamaño de los hongos levaduriformes, cumpliendo con el objetivo de la práctica.
Anexo a practica 3:
El académico del Marx Planck Intitute for Infection Biology Arturo
Zychlinsky será el encargado de dictar la conferencia magistral de
clausura del Congreso Nacional de Microbiología
La Universidad Autónoma de Querétaro (UAQ) es la sede este día del XXXIX Congreso
Nacional de Microbiología, el cual es organizado por la Asociación Mexicana de Microbiología,
A. C. El acto inaugural se llevó a cabo en el Teatro de la República justo en el Centro Histórico
de ciudad de Querétaro.
Irineo Torres Pacheco, secretario académico de la Máxima Casa de Estudios del estado, en
representación del rector de la UAQ, Gilberto Herrera Ruiz, inauguró el Congreso Nacional de
Microbiología en el que resaltó la importancia de esta rama de la ciencia en el mundo.
“La Microbiología es un área del conocimiento muy relevante en nuestro tiempo, se hizo distintiva a
partir de la segunda mitad del siglo XX, con el descubrimiento del ADN; junto con la informática,
dieron pauta al desarrollo científico del siglo XX y lo sigue siendo en la actualidad”.
Por su parte, Teresa de Jesús García Gasca, directora de la Facultad de Ciencias Naturales,
dio la bienvenida a los asistentes y agradeció a la AMM por escoger a esta Casa de Estudios
como sede.
Resaltó la relevancia de la investigación de la Microbiología en el país y en el mundo, pues “la
generación del conocimiento habla de los diferentes ámbitos a nivel tecnológico, ecológico,
biotecnológico, de salud y de alimentos”, refirió García Gasca.
La conferencia magistral de clausura será impartida por el académico del Max Planck Institute
for Infection Biology, Arturo Zychlinsky, que pronunciará la ponencia titulada “Neutrófilos
Trampas Extracelulares: Una nueva función de la cromatina”
Bibliografía
http://bibliotecadigital.ilce.edu.mx/sites/ciencia/volumen1/ciencia2/13/htm/se
c_4.html
Giovannielo, Octavio; D. Klanj; A. M. Pertierra; M. V. Preciado y S.
Rondinone. Koneman: Diagnóstico Microbiológico Texto y Atlas en color.
Medica Panamericana S. A. 6° edición.1380 págs. 2006. Madrid, España.
Tortora, Gerard J; Funke, Berdell R; Case, Christine L. 2007. Introducción a
la microbiología. Editorial Médica Panamericana S.A.
http://amqueretaro.com/queretaro/2015/03/24/la-uaq-alberga-el-congreso-
nacional-de-microbiologia
Objetivo
El alumno observa estructuras bacterianas especiales, como las cápsulas a través
de la tinción negativa.
Introducción
La cápsula es una red de polímeros que cubre la superficie de una bacteria. La
mayoría de las cápsulas están compuestas de polisacáridos. Si el polisacárido
forma una capa homogénea y uniforme alrededor del cuerpo bacteriano se le llama
cápsula y si solo forma una red de trabéculas o una malla alrededor de la bacteria
se le llama glucocalix. El papel de la cápsula bacteriana es proteger a la bacteria de
la respuesta inflamatoria del hospedero, esto es, activación del complemento y
muerte mediada por fagocitosis.
La célula bacteriana intacta se tiñe fácilmente con colorantes básicos como el cristal,
azul de metileno y fucsina básica, pero relativamente mal con colorantes ácidos
como la eosina.
Un colorante básico es aquel constituido por un agrupamiento de átomos orgánicos
con carga positiva que será la parte activa del colorante ya que tendrá afinidad por
los ácidos nucleicos. Un colorante ácido es aquel que se encuentra constituido por
átomos orgánicos con carga neta negativa por lo cual tiene afinidad por el
citoplasma.
Material
Mechero
Portaobjetos
Asas bacteriológicas
Piseta
Caja Petri
Microscopio
Colorante: tinta china
Cepas microbianas
Procedimiento
1. Colocar una gota de tinta china en uno de los extremos de un portaobjetos
limpio, colocar encima una gota del cultivo de la cepa microbiana. Esto si el
cultivo es líquido. En cambio si está sobre agar, tocar suavemente con un asa
una colonia en estudio y mezclar cuidadosamente con la tinta china (en ambas
bacterias).
2. Colocar el portaobjetos sobre la mesa para afianzar el portaobjetos. Usar un
segundo portaobjetos para deslizar y distribuir la tinta china y el cultivo
3. Dejar secar al aire y observar en el microscopio.
Resultados
40 X
En esta laminilla se pueden observar microorganismos de forma circular de un color blanco o gris muy claro, en un fondo gris oscuro o hasta negro, los hongos se encuentran en racimos grandes y pequeños. En comparación con la práctica anterior, en este caso de tinción negativa, lo que se tiñe es el fondo para resaltar la cápsula de los microorganismos.
Actividad
1. ¿Explique el fundamento de la tinción negativa y qué tipo de
información se obtiene?
Aplicada para poner en evidencia la cápsula como entes refringentes sobre
un campo de fondo oscuro de las bacterias utilizando nigrosina o tinta china.
2. Mencione 3 ejemplos de bacterias encapsuladas y si causan alguna
enfermedad.
Streptococcus pneumoniae: microorganismo patógeno capaz de causar
diversas infecciones, como neumonía, endocarditis y de procesos
invasivos severos como meningitis, septicemia, etc. particularmente en
ancianos, niños y personas inmunodeprimidas. El hábitat natural de
neumococo es la faringe.
Salmonella Typhi: se transmite por medio de alimentos o agua
contaminados con materia fecal y orina de personas portadoras. La
fiebre tifoidea o fiebre entérica es causada por Salmonella Typhi de la
que el ser humano es el único portador. Es una enfermedad infecciosa
intestinal, grave y aguda.
Neisseria meningitidis: Las enfermedades producidas por esta bacteria
se pueden presentar como meningitis y/o como meningococcemia y
además como meningoencefalitis. Cuando esta bacteria ataca a las
meninges, se denomina Meningitis meningocócica del tipo bacteriana;
si la infección se disemina por vía sanguínea, produce un cuadro
llamado Meningococcemia, la cual consiste en una septicemia que
puede presentarse con o sin meningitis; y la Meningoencefalitis es una
enfermedad infecciosa grave del espacio subaracnoideo con reacción
inflamatoria del parénquima del sistema nervioso central que se
caracteriza por la inflamación de las meninges y el encéfalo, causada
por esta bacteria.
Conclusión
En esta práctica aprendimos a usar la tinción negativa con tinta china o negrosina
la cual no tiñe al hongo o bacteria, en su lugar el colorante da contraste coloreando
el fondo. En la cual al observar por el microscopio pudimos ver la estructura del
hongo y también pudimos a observar las capsulas las cuales están formadas de
polisacáridos, lípidos y proteínas. Depende del grosor, composición y solubilidad se
puede llamar microcapsula o material limoso y todas estas varían en las diferentes
bacterias y hongos. La función de la capsula es la protección y almacén de
alimentos.
Anexo a practica 4
Centro nacional de Microbiología: máxima seguridad
frente a patógenos peligrosos
Cualquier bacteria, virus, hongo altamente infectivo que se sospeche ha entrado en
España tiene un sitio: el Centro Nacional de Microbiología, en Majadahonda, Madrid.
Organismo dependiente del Instituto de salud Carlos III, es el único laboratorio de alta
seguridad, nivel, P3 que hay en España. En sus laboratorios fueron analizados,
descartados y confirmados los 60 casos sospechosos de Ébola que se han alertado
desde 2014. Incluido los de los misioneros Miguel Pajares y Manuel García Viejo, y el
de la auxiliar de clínica Teresa Romero. La calificación de alta seguridad biológica le
acredita para poder inactivar los patógenos y, carentes de poder infectivo, ser
manipulados para hacer además cultivos para tratamiento e investigación.
Bibliografía
http://www.biblioweb.tic.unam.mx/libros/microbios/Cap4/
Rodríguez, E; Gamboa, M; Hernández, F; García, J. 2005. Bacteriología
general: Principios y Prácticas de Laboratorio. Editorial Universidad de
Costa Rica.
Tortora, Gerard J; Funke, Berdell R; Case, Christine L. 2007.
Introducción a la microbiología. Editorial Médica Panamericana S.A.
http://www.abc.es/videos-espana/20150804/centro-nacional-
microbiologia-maxima-4398106602001.html
INTRODUCCION
La tinción propuesta por el médico danés Christian Gram en 1884, es una de las
tinciones diferenciales más utilizadas en bacteriología, que clasifica los cultivos
bacterianos de menos de 24 horas en Gram positivas y Gram negativas. La reacción
de la tinción de Gram se basa en la cantidad de peptidoglucano que se encuentra
en las paredes celulares de estas bacterias. Las bacterias Gram positivas tienen
muchas capas de peptidoglucano, las cuales a su vez, sostienen moléculas de ácido
teicoico. El ácido teicoico reacciona con el cristal violeta y el yodo utilizado en este
proceso de tinción. Un complejo de las moléculas cristal violeta-yodo-ácido teicoico
es muy difícil de remover. Como la pared celular de las células Gram positivas
retiene estos compuestos, es más difícil decolorar una célula Gram positiva que una
Gram negativa. Una mezcla de alcohol remueve el cristal violeta de la célula Gram
negativa, pero no de la Gram positiva. Esta mezcla de alcohol también disuelve
mucho de la capa exterior de lipopolosacárido de la pared celular de la pared Gram
negativa, lo cual acelera la remoción del colorante primario cristal violeta de estas
células.
Cuando otro colorante, usualmente safranina, se añade, las células Gram positivas
siguen de color azul-violeta mientras que las Gram negativas absorben el color
rojizo de la safranina. Al final del procedimiento de tinción, las células Gram positivas
serán del color del cristal violeta, o colorante primario, y las células Gram negativas
serán del color de la safranina que es el colorante de contraste.
Conclusión:
Con esta práctica aprendimos la importancia de la tinción Gram para la
microbiología ya que proporciona la diferencia entre el tipo de bacterias Gram(+) y
Gram(-) esto es importante ya que al momento de recetar algún antibiótico sepamos
con que bacteria vaya a actuar y no se vuelva resistente. El motivo por el cual se
identifican es por los diferentes colorantes y tinciones que se le hacen a la muestra
es porque en las pared de las bacterias Gram positivas tienen peptidoglicanos.
Al final de la práctica cumplimos con el objetivo de identificar las bacterias, los
bacilos dieron Gram (+) y Escherichia coli Gram(-)
Anexo a practica 5
La E.coli, la causa más frecuente de infección urinaria
La Escherichiacoli (E. coli) es una bacteria que está presente dentro del intestino y favorece la
absorción de algunas vitaminas, especialmente la vitamina K.
La mayoría de estas bacterias son inofensivas.
No obstante, algunos tipos de esta bacteria generan complicaciones vinculadas con el tracto
gastrointestinal.
De acuerdo con Efe, por este motivo, la E.coli es el origen más frecuente de infección urinaria y
otras afecciones tales como los problemas respiratorios.
INFECCIONES
Según José María Marimón, experto de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y
Microbiología Clínica (SEIMC), dentro de las clases de E. coli que generan gastroenteritis, “el más
destacado por su patogenicidad es el denominado E. colienterohemorrágico, que produce un
cuadro que va, desde dolores estomacales, hasta vómitos y diarrea, en muchas ocasiones
sanguinolenta".
En estos casos, no suele haber fiebre y la recuperación es en apenas unos días.
Sin embargo, otras infecciones pueden ser muy graves y generar una enfermedad gastrointestinal,
como el E. colienteroinvasivo, el E. colienterotoxigénico y el E. colienteropatógeno.
En los casos más graves, la E.coli puede dar pie al síndrome hemolítico urémico, que se
caracteriza por anemia hemolítica (disminución de los glóbulos rojos), trombopenia (disminución
del número de plaquetas) e insuficiencia renal aguda.
Por este motivo, se recomienda cocinar bien los alimentos de origen animal y evitar tomar leche o
derivados que no hayan sido pasteurizados.
Bibliografía:
http://www.lt10digital.com.ar/noticia/idnot/240197/laecolilacausamasfrecuent
edeinfeccionurinaria.html
INTRODUCCION
La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y
económica, usada para la identificación de microorganismos patógenos, como M.
tuberculosis o el género Apicomplexa (coccidios intestinales) entre otros.
Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes: Franz Ziehl, un
bacteriólogo, y Friedrich Neelsen, un patólogo.
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos
micólicos) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la
propiedad de resistir la decoloracíón con alcohol-ácido, después de la tinción con
colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistentes. Las
micobacterias como Mycobacterium tuberculosis y M. marinum se caracterizan por
sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl-
Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana
que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una
nueva solidificación de lo ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir
de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las
moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las
bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y las que no, se ven de color
azul ya que se utiliza azul de metileno como tinción de contraste.
CONCLUSION:
En esta práctica aprendimos a utilizar la tinción de Ziehl Neelsen, con la cual teñimos
una muestra de esputo y en esta en nuestro caso no se pudo observar nada lo que
quiere decir que la muestra no tenía bacilos ácido alcohol resistentes por lo que
podemos inferir que nuestro compañero no tiene tuberculosis.
Esta tinción actúa sobre la capa de peptidoglicano de la Mycobacterium tuberculosis
tiñéndolas de rojo fucsia, esto gracias a las reacciones físico- químico que produce
en dicha bacteria, para su diferenciación se utiliza el azul de metileno como
contraste.
Anexo a practica 6
Casos de tuberculosis en la mira por riesgo de sida
Instituto Nacional de Salud alertó por tuberculosis en el país, durante 2015 han
muerto 491 personas por la infección.
En promedio cada semana se reportan 238 casos de tuberculosis al Instituto
Nacional de Salud, entidad que recomendó al sistema que todos los pacientes que
tengan el diagnóstico se practiquen una prueba de VIH sida, pues podrían padecer
las dos infecciones al tiempo.
Este año se han registrado 7617 personas contagiadas, pero en los últimos cuatro
años hay un acumulado de 59.499 casos de tuberculosis en el país, el 12 por ciento
de los pacientes además tenían VIH, sin embargo la cifra puede ser más alta pues
según el Instituto Nacional de Salud, una buena proporción de los pacientes no
aceptaron que se les realizara la prueba de VIH.
La entidad recomendó a las autoridades de salud frenar la cadena de transmisión
de la enfermedad pues además de aumentar la mortalidad en pacientes con VIH,
están en riesgo las personas cercanas, por tratarse se trata de una infección muy
contagiosa.
BIBLIOGRAFIA
http://www.caracol.com.co/noticias/actualidad/casos-de-tuberculosis-en-la-mira-
por-riesgo-de-sida/20150818/nota/2897526.aspx.