SUBDIRECCIOacuteN ACADEacuteMICA

DEPARTAMENTO DE INGENIERIacuteAS

Academia de Biologiacutea

MANUAL DE BIOLOGIacuteACELULAR

Elaborado por Dr ERMILO HUMBERTO LOacutePEZCOBAacute

FECHA JUNIO DE 2017

LUGAR TIZIMIacuteN YUCATAacuteN

DIRECTORIO

LIC CARLOS DURAacuteN PEacuteREZDirector

LCC MARIANO MATUacute SANSORESSubdirector de Planeacioacuten y Vinculacioacuten

ME JORGE GABRIEL COCOM TECSubdirector Acadeacutemica

ME LIGIA CANTO TURRIZASubdirector de Servicios Administrativos

LIC AVELINO JOSEacute ALAMILLA MENAJefe de la Divisioacuten de Estudios Profesionales

LIC JAZMI TUT NAHJefa del Departamento de Desarrollo Acadeacutemico

DR JORGE RODOLFO CANUL SOLISJefe del Departamento de Ingenieriacuteas

ING MANUEL SORIA FERNAacuteNDEZJefe del Departamento Econoacutemico-Administrativas

DR MIGUEL ANGEL COUOH NOVELOJefe del Departamento de Ciencias Baacutesicas

LIC LOURDES GUADALUPE MARFIL CEBALLOSJefa del Departamento de Recursos Humanos

LIC CONSUELO GUADALUPE FERNAacuteNDEZ LORIacuteAJefe del Departamento de Recursos Financieros

LIC WILBERTH TELLO MEDINAJefe del Departamento de Recursos Materiales y Servicios

MC DAHAIVIS MENA ARCEOEncargado del Departamento de Fomento Productivo

MA BALTAZAR MARTIacuteN LORIacuteA AVILEacuteSJefe del Departamento de Planeacioacuten Programacioacuten y Presupuestario

LIC JOSEacute ALEJANDRO MEZO GASTELUMJefe del Departamento de Gestioacuten Tecnoloacutegica y Vinculacioacuten

MA ALEJANDRINA DEL SOCORRO GAMBOAJefa del Departamento de Servicios Escolares

LIC JAZMI TUT NAHJefe del Departamento de Actividades Extraescolares

LIC JOSEacute GUILLERMO MEDINAJefe del Centro de Informacioacuten

IE MIGUEL ANGEL PERERA COLLIacuteJefe del Centro de Coacutemputo

LIC FELIX RODOLFO POOT LOacutePEZJefe del Depto de Comunicacioacuten y Difusioacuten

DR JUAN JOSEacute SANDOVAL GIacuteOJefe de la Divisioacuten de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten

INDICE

Paacuteg

I Encuadre 1

a) Introduccioacuten 1

b) Cuadro de competencias 1

c) Niveles de desempentildeo 2

II Marco legal (Praacutecticas Generales de Seguridad NOM Normas

de referencia y leyes aplicables)

2

III Praacutecticas 4

SESIOacuteN 1 USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL

ESTUDIO DE MUESTRAS BIOLOacuteGICAS

4

SESIOacuteN 2 MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES 10

SESIOacuteN 3 PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA 13

SESIOacuteN 4 SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR

CROMATOGRAFIacuteA EN PAPEL

17

SESIOacuteN 5 SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN 19

SESIOacuteN 6 CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA 21

SESIOacuteN 7 CEacuteLULA VEGETAL Y ANIMAL 25

SESIOacuteN 8 ORGANISMOS PLURICELULARES CARENTES DE

TEJIDO

28

IV Bibliografiacutea 30

ANEXO 1 Formato del reporte de la praacutectica 31

1

I Encuadre

a) IntroduccioacutenEl presente manual de praacutecticas para el curso de Biologiacutea Celular que se

imparte en la Ingenieriacutea en Agronomiacutea tiene la finalidad de reforzar la parteteoacuterica del curso y de desarrollar habilidades tales como el manejo demicroscopios y meacutetodos de tinciones y cortes histoloacutegicos de diversasmuestras

La estructuracioacuten de las praacutecticas tiene un enfoque maacutes didaacutectico porlas figuras que se incluyen y por las actividades que se pide realizar a losalumnos para mejor aplicacioacuten y comprensioacuten de los conceptos vistos en elaula de clases

Este manual de praacutecticas constituye un apoyo tanto para los profesores queimparten esta materia en las diferentes carreras del Instituto como para losestudiantes cuyas carreras tengan esta materia en comuacuten

b) Cuadro de competenciasDescribir las competencias que seraacuten abordadas en la presente guiacutea

Competencias Descripcioacuten

Previas Conocer las caracteriacutesticas principales de los ciclosbioloacutegicos de los seres vivos para aplicarlos en eldesarrollo de los organismosConocimiento uso y manejo de los instrumentos ymateriales de laboratorio

Geneacuterica Capacidad de anaacutelisis y siacutentesisCapacidad de organizar y planificarConocimientos generales baacutesicosConocimientos generales baacutesicos de la carreraComunicacioacuten oral y escrita en su propia lenguaHabilidades de gestioacuten de informacioacutenTrabajo en equipoHabilidades interpersonalesCapacidad de aplicar los conocimientos en lapraacutectica

2

Capacidad de aprenderLiderazgoPreocupacioacuten por la calidad

Especiacutefica Desarrollar conocimientos generales de losprocesos celulares y relacionarlos con losorganismos vegetales y animales de intereacutes para elhombreRealizar el anaacutelisis de los procesos bioloacutegicoscelulares para entender el comportamiento de losorganismos con su medioDistinguir las diferentes estructuras de las que secomponen las ceacutelulas vegetales y animales

Profesionales Elaborar y procesar informacioacuten necesaria paradisentildear y ampliar alternativas de solucioacuten a losproblemas de su entornoGenerar y transferir tecnologiacutea para atendernecesidades prioritarias del sector agropecuarioManejar y utilizar los medios de informacioacuten paraexpresarse con propiedad en forma verbal y escritaen el idioma espantildeol

c) Niveles de desempentildeo

Nivel 2- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajovariadas y aplicadas en diversos contextos Algunas actividades son complejasy no rutinarias Presenta un bajo grado de responsabilidad y autonomiacutea en lasdecisiones A menudo requiere colaboracioacuten con otros y trabajo en equipo

II Marco legal (Praacutecticas Generales de Seguridad NOM Normas dereferencia y leyes aplicables)

Las praacutecticas se llevaraacuten a cabo en los laboratorios de docencia del ITT por loque nos apegaremos directamente a su manual de seguridad debido a que laspraacutecticas no requieren preparacioacuten previa de reactivos

3

III Praacutecticas

SESIOacuteN 1

USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MUESTRASBIOLOacuteGICAS

OBJETIVOEl alumno conoceraacute las partes maacutes importantes del microscopio

compuesto oacuteptico y el microscopio estereoscoacutepico asiacute como la formaadecuada de manejo y almacenamiento

INTRODUCCIOacuteNExisten varios tipos de microscopios tales como el microscopio

estereoscoacutepico el compuesto de campo oscuro fluorescencia contraste defases de luz ultravioleta el microscopio electroacutenico de transmisioacuten y elmicroscopio electroacutenico de barrido Para saber cuaacutel elegir debemospreguntarnos iquestQueacute es lo que queremos observar los maacutes usados en loslaboratorios de nivel superior son los siguientes

Microscopio compuesto es el que se utiliza de manera maacutes comuacuten en laspraacutecticas de temas bioloacutegicos este microscopio consta de tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte carro o platina pinzas de sujecioacutenrevoacutelver tornillos micromeacutetricos y macromeacutetrico de enfoque

b) Sistema de iluminacioacuten fuentes de luz condensador y espejoc) Sistema oacuteptico estaacute constituido por oculares y objetivos los oculares

son dos y tienen generalmente un valor de 10X cada uno los objetivosson 4 de diferente aumento (4X 10X 40x y 100X)Para saber el tamantildeo de las muestras que observamos al microscopio

debemos de multiplicar el valor del ocular (10X) por el nuacutemero del objetivo(4X 10X 40X 0 100X) que se esteacute usando

El elemento oacuteptico es el maacutes importante puesto que es el que producela imagen aumentada del objeto esta imagen ademaacutes la observamosinvertida (el objetivo funciona como una lente fotograacutefica) de ahiacute que seobserve a la derecha de la preparacioacuten se encuentre realmente a la izquierda yviceversa

4

Figura 1 Microscopio compuesto

Microscopio estereoscoacutepico este microscopio nos sirve para observarmuestras de mayor tamantildeo ya sean muestras enteras o parte de ellas seencuentra compuesto por tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte tornillo macromeacutetrico de enfoqueNota En el brazo de este tipo de microscopio se encuentra una de lasfuentes de luz por lo que a la hora de transportarlo se debe tenercuidado con esta

b) Sistema de iluminacioacuten cuenta con dos fuentes de luz una situada en labase (parte inferior) del microscopio y la otra situada en el brazo delmismo el condensador y el espejo nos son visibles

c) En este microscopio uacutenicamente se puede apreciar un objetivo pero sepueden cambiar los lentes desde 08X 1X 15X 2X 25X 3X 35X y4X dependiendo la marca y el modelo del microscopioPara saber cuaacutentas veces aumentamos la muestra se hace exactamente

lo mismo que con el microscopio oacuteptico se multiplica el valor del ocular (10X)por el valor del lente que se esteacute trabajando por ejemplo se trabaja con el08X (10X por 08X igual a 8) entonces aumentamos la muestra a 8 veces sutamantildeo real

A diferencia del microscopio oacuteptico en el estereoscoacutepico observamos laspreparaciones tal cual sin invertir por la lentes es decir que si se pone unrecorte de alguna palabra se puede leer igual que si trajera unos anteojos ouna lupa

5

Figura 2 Microscopio Estereoscoacutepico

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO OacutePTICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente y de ser

necesario con el diafragma4 Colocar el objetivo de menor aumento para visualizar el campo a

observar5 Situar la preparacioacuten a observar sobre la platina sujetando con la pinza

de la platina con el objeto de poder desplazar la muestra con lostornillos para mover la pinza

6 Mirar el microscopio lateralmente (no por el ocular) usar el tornillomacromeacutetrico y acerca el objetivo hasta la preparacioacuten sin que llegue atocarse

7 Siempre con el tornillo macromeacutetrico ajustar hasta que se observe elobjeto a estudiar

8 Con el tornillo micromeacutetrico acabar de enfocar con nitidez9 Moviendo la preparacioacuten con el tornillo de la platina se localizan los

campos a observar10Si se requieren mayores aumentos bajar un poco la platina esto para

evitar que los objetivos topen con la muestra (debido a que mientrasmayor sea el aumento el objetivo aumenta de largo) y girar el revoacutelvera la derecha para colocar el objetivo que en aumentos le sigueposteriormente corregir levemente el enfoque con el tornillomicromeacutetrico

11Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

12Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

6

Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

7

PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

8

g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

9

SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

10

Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

13

SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

14

Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

18

3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

20

2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

21

SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

DIRECTORIO

LIC CARLOS DURAacuteN PEacuteREZDirector

LCC MARIANO MATUacute SANSORESSubdirector de Planeacioacuten y Vinculacioacuten

ME JORGE GABRIEL COCOM TECSubdirector Acadeacutemica

ME LIGIA CANTO TURRIZASubdirector de Servicios Administrativos

LIC AVELINO JOSEacute ALAMILLA MENAJefe de la Divisioacuten de Estudios Profesionales

LIC JAZMI TUT NAHJefa del Departamento de Desarrollo Acadeacutemico

DR JORGE RODOLFO CANUL SOLISJefe del Departamento de Ingenieriacuteas

ING MANUEL SORIA FERNAacuteNDEZJefe del Departamento Econoacutemico-Administrativas

DR MIGUEL ANGEL COUOH NOVELOJefe del Departamento de Ciencias Baacutesicas

LIC LOURDES GUADALUPE MARFIL CEBALLOSJefa del Departamento de Recursos Humanos

LIC CONSUELO GUADALUPE FERNAacuteNDEZ LORIacuteAJefe del Departamento de Recursos Financieros

LIC WILBERTH TELLO MEDINAJefe del Departamento de Recursos Materiales y Servicios

MC DAHAIVIS MENA ARCEOEncargado del Departamento de Fomento Productivo

MA BALTAZAR MARTIacuteN LORIacuteA AVILEacuteSJefe del Departamento de Planeacioacuten Programacioacuten y Presupuestario

LIC JOSEacute ALEJANDRO MEZO GASTELUMJefe del Departamento de Gestioacuten Tecnoloacutegica y Vinculacioacuten

MA ALEJANDRINA DEL SOCORRO GAMBOAJefa del Departamento de Servicios Escolares

LIC JAZMI TUT NAHJefe del Departamento de Actividades Extraescolares

LIC JOSEacute GUILLERMO MEDINAJefe del Centro de Informacioacuten

IE MIGUEL ANGEL PERERA COLLIacuteJefe del Centro de Coacutemputo

LIC FELIX RODOLFO POOT LOacutePEZJefe del Depto de Comunicacioacuten y Difusioacuten

DR JUAN JOSEacute SANDOVAL GIacuteOJefe de la Divisioacuten de Estudios de Posgrado e Investigacioacuten

INDICE

Paacuteg

I Encuadre 1

a) Introduccioacuten 1

b) Cuadro de competencias 1

c) Niveles de desempentildeo 2

II Marco legal (Praacutecticas Generales de Seguridad NOM Normas

de referencia y leyes aplicables)

2

III Praacutecticas 4

SESIOacuteN 1 USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL

ESTUDIO DE MUESTRAS BIOLOacuteGICAS

4

SESIOacuteN 2 MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES 10

SESIOacuteN 3 PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA 13

SESIOacuteN 4 SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR

CROMATOGRAFIacuteA EN PAPEL

17

SESIOacuteN 5 SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN 19

SESIOacuteN 6 CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA 21

SESIOacuteN 7 CEacuteLULA VEGETAL Y ANIMAL 25

SESIOacuteN 8 ORGANISMOS PLURICELULARES CARENTES DE

TEJIDO

28

IV Bibliografiacutea 30

ANEXO 1 Formato del reporte de la praacutectica 31

1

I Encuadre

a) IntroduccioacutenEl presente manual de praacutecticas para el curso de Biologiacutea Celular que se

imparte en la Ingenieriacutea en Agronomiacutea tiene la finalidad de reforzar la parteteoacuterica del curso y de desarrollar habilidades tales como el manejo demicroscopios y meacutetodos de tinciones y cortes histoloacutegicos de diversasmuestras

La estructuracioacuten de las praacutecticas tiene un enfoque maacutes didaacutectico porlas figuras que se incluyen y por las actividades que se pide realizar a losalumnos para mejor aplicacioacuten y comprensioacuten de los conceptos vistos en elaula de clases

Este manual de praacutecticas constituye un apoyo tanto para los profesores queimparten esta materia en las diferentes carreras del Instituto como para losestudiantes cuyas carreras tengan esta materia en comuacuten

b) Cuadro de competenciasDescribir las competencias que seraacuten abordadas en la presente guiacutea

Competencias Descripcioacuten

Previas Conocer las caracteriacutesticas principales de los ciclosbioloacutegicos de los seres vivos para aplicarlos en eldesarrollo de los organismosConocimiento uso y manejo de los instrumentos ymateriales de laboratorio

Geneacuterica Capacidad de anaacutelisis y siacutentesisCapacidad de organizar y planificarConocimientos generales baacutesicosConocimientos generales baacutesicos de la carreraComunicacioacuten oral y escrita en su propia lenguaHabilidades de gestioacuten de informacioacutenTrabajo en equipoHabilidades interpersonalesCapacidad de aplicar los conocimientos en lapraacutectica

2

Capacidad de aprenderLiderazgoPreocupacioacuten por la calidad

Especiacutefica Desarrollar conocimientos generales de losprocesos celulares y relacionarlos con losorganismos vegetales y animales de intereacutes para elhombreRealizar el anaacutelisis de los procesos bioloacutegicoscelulares para entender el comportamiento de losorganismos con su medioDistinguir las diferentes estructuras de las que secomponen las ceacutelulas vegetales y animales

Profesionales Elaborar y procesar informacioacuten necesaria paradisentildear y ampliar alternativas de solucioacuten a losproblemas de su entornoGenerar y transferir tecnologiacutea para atendernecesidades prioritarias del sector agropecuarioManejar y utilizar los medios de informacioacuten paraexpresarse con propiedad en forma verbal y escritaen el idioma espantildeol

c) Niveles de desempentildeo

Nivel 2- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajovariadas y aplicadas en diversos contextos Algunas actividades son complejasy no rutinarias Presenta un bajo grado de responsabilidad y autonomiacutea en lasdecisiones A menudo requiere colaboracioacuten con otros y trabajo en equipo

II Marco legal (Praacutecticas Generales de Seguridad NOM Normas dereferencia y leyes aplicables)

Las praacutecticas se llevaraacuten a cabo en los laboratorios de docencia del ITT por loque nos apegaremos directamente a su manual de seguridad debido a que laspraacutecticas no requieren preparacioacuten previa de reactivos

3

III Praacutecticas

SESIOacuteN 1

USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MUESTRASBIOLOacuteGICAS

OBJETIVOEl alumno conoceraacute las partes maacutes importantes del microscopio

compuesto oacuteptico y el microscopio estereoscoacutepico asiacute como la formaadecuada de manejo y almacenamiento

INTRODUCCIOacuteNExisten varios tipos de microscopios tales como el microscopio

estereoscoacutepico el compuesto de campo oscuro fluorescencia contraste defases de luz ultravioleta el microscopio electroacutenico de transmisioacuten y elmicroscopio electroacutenico de barrido Para saber cuaacutel elegir debemospreguntarnos iquestQueacute es lo que queremos observar los maacutes usados en loslaboratorios de nivel superior son los siguientes

Microscopio compuesto es el que se utiliza de manera maacutes comuacuten en laspraacutecticas de temas bioloacutegicos este microscopio consta de tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte carro o platina pinzas de sujecioacutenrevoacutelver tornillos micromeacutetricos y macromeacutetrico de enfoque

b) Sistema de iluminacioacuten fuentes de luz condensador y espejoc) Sistema oacuteptico estaacute constituido por oculares y objetivos los oculares

son dos y tienen generalmente un valor de 10X cada uno los objetivosson 4 de diferente aumento (4X 10X 40x y 100X)Para saber el tamantildeo de las muestras que observamos al microscopio

debemos de multiplicar el valor del ocular (10X) por el nuacutemero del objetivo(4X 10X 40X 0 100X) que se esteacute usando

El elemento oacuteptico es el maacutes importante puesto que es el que producela imagen aumentada del objeto esta imagen ademaacutes la observamosinvertida (el objetivo funciona como una lente fotograacutefica) de ahiacute que seobserve a la derecha de la preparacioacuten se encuentre realmente a la izquierda yviceversa

4

Figura 1 Microscopio compuesto

Microscopio estereoscoacutepico este microscopio nos sirve para observarmuestras de mayor tamantildeo ya sean muestras enteras o parte de ellas seencuentra compuesto por tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte tornillo macromeacutetrico de enfoqueNota En el brazo de este tipo de microscopio se encuentra una de lasfuentes de luz por lo que a la hora de transportarlo se debe tenercuidado con esta

b) Sistema de iluminacioacuten cuenta con dos fuentes de luz una situada en labase (parte inferior) del microscopio y la otra situada en el brazo delmismo el condensador y el espejo nos son visibles

c) En este microscopio uacutenicamente se puede apreciar un objetivo pero sepueden cambiar los lentes desde 08X 1X 15X 2X 25X 3X 35X y4X dependiendo la marca y el modelo del microscopioPara saber cuaacutentas veces aumentamos la muestra se hace exactamente

lo mismo que con el microscopio oacuteptico se multiplica el valor del ocular (10X)por el valor del lente que se esteacute trabajando por ejemplo se trabaja con el08X (10X por 08X igual a 8) entonces aumentamos la muestra a 8 veces sutamantildeo real

A diferencia del microscopio oacuteptico en el estereoscoacutepico observamos laspreparaciones tal cual sin invertir por la lentes es decir que si se pone unrecorte de alguna palabra se puede leer igual que si trajera unos anteojos ouna lupa

5

Figura 2 Microscopio Estereoscoacutepico

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO OacutePTICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente y de ser

necesario con el diafragma4 Colocar el objetivo de menor aumento para visualizar el campo a

observar5 Situar la preparacioacuten a observar sobre la platina sujetando con la pinza

de la platina con el objeto de poder desplazar la muestra con lostornillos para mover la pinza

6 Mirar el microscopio lateralmente (no por el ocular) usar el tornillomacromeacutetrico y acerca el objetivo hasta la preparacioacuten sin que llegue atocarse

7 Siempre con el tornillo macromeacutetrico ajustar hasta que se observe elobjeto a estudiar

8 Con el tornillo micromeacutetrico acabar de enfocar con nitidez9 Moviendo la preparacioacuten con el tornillo de la platina se localizan los

campos a observar10Si se requieren mayores aumentos bajar un poco la platina esto para

evitar que los objetivos topen con la muestra (debido a que mientrasmayor sea el aumento el objetivo aumenta de largo) y girar el revoacutelvera la derecha para colocar el objetivo que en aumentos le sigueposteriormente corregir levemente el enfoque con el tornillomicromeacutetrico

11Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

12Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

6

Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

7

PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

8

g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

9

SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

10

Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

13

SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

14

Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

15

Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

16

5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

17

SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

18

3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

19

SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

20

2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

21

SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

INDICE

Paacuteg

I Encuadre 1

a) Introduccioacuten 1

b) Cuadro de competencias 1

c) Niveles de desempentildeo 2

II Marco legal (Praacutecticas Generales de Seguridad NOM Normas

de referencia y leyes aplicables)

2

III Praacutecticas 4

SESIOacuteN 1 USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL

ESTUDIO DE MUESTRAS BIOLOacuteGICAS

4

SESIOacuteN 2 MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES 10

SESIOacuteN 3 PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA 13

SESIOacuteN 4 SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR

CROMATOGRAFIacuteA EN PAPEL

17

SESIOacuteN 5 SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN 19

SESIOacuteN 6 CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA 21

SESIOacuteN 7 CEacuteLULA VEGETAL Y ANIMAL 25

SESIOacuteN 8 ORGANISMOS PLURICELULARES CARENTES DE

TEJIDO

28

IV Bibliografiacutea 30

ANEXO 1 Formato del reporte de la praacutectica 31

1

I Encuadre

a) IntroduccioacutenEl presente manual de praacutecticas para el curso de Biologiacutea Celular que se

imparte en la Ingenieriacutea en Agronomiacutea tiene la finalidad de reforzar la parteteoacuterica del curso y de desarrollar habilidades tales como el manejo demicroscopios y meacutetodos de tinciones y cortes histoloacutegicos de diversasmuestras

La estructuracioacuten de las praacutecticas tiene un enfoque maacutes didaacutectico porlas figuras que se incluyen y por las actividades que se pide realizar a losalumnos para mejor aplicacioacuten y comprensioacuten de los conceptos vistos en elaula de clases

Este manual de praacutecticas constituye un apoyo tanto para los profesores queimparten esta materia en las diferentes carreras del Instituto como para losestudiantes cuyas carreras tengan esta materia en comuacuten

b) Cuadro de competenciasDescribir las competencias que seraacuten abordadas en la presente guiacutea

Competencias Descripcioacuten

Previas Conocer las caracteriacutesticas principales de los ciclosbioloacutegicos de los seres vivos para aplicarlos en eldesarrollo de los organismosConocimiento uso y manejo de los instrumentos ymateriales de laboratorio

Geneacuterica Capacidad de anaacutelisis y siacutentesisCapacidad de organizar y planificarConocimientos generales baacutesicosConocimientos generales baacutesicos de la carreraComunicacioacuten oral y escrita en su propia lenguaHabilidades de gestioacuten de informacioacutenTrabajo en equipoHabilidades interpersonalesCapacidad de aplicar los conocimientos en lapraacutectica

2

Capacidad de aprenderLiderazgoPreocupacioacuten por la calidad

Especiacutefica Desarrollar conocimientos generales de losprocesos celulares y relacionarlos con losorganismos vegetales y animales de intereacutes para elhombreRealizar el anaacutelisis de los procesos bioloacutegicoscelulares para entender el comportamiento de losorganismos con su medioDistinguir las diferentes estructuras de las que secomponen las ceacutelulas vegetales y animales

Profesionales Elaborar y procesar informacioacuten necesaria paradisentildear y ampliar alternativas de solucioacuten a losproblemas de su entornoGenerar y transferir tecnologiacutea para atendernecesidades prioritarias del sector agropecuarioManejar y utilizar los medios de informacioacuten paraexpresarse con propiedad en forma verbal y escritaen el idioma espantildeol

c) Niveles de desempentildeo

Nivel 2- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajovariadas y aplicadas en diversos contextos Algunas actividades son complejasy no rutinarias Presenta un bajo grado de responsabilidad y autonomiacutea en lasdecisiones A menudo requiere colaboracioacuten con otros y trabajo en equipo

II Marco legal (Praacutecticas Generales de Seguridad NOM Normas dereferencia y leyes aplicables)

Las praacutecticas se llevaraacuten a cabo en los laboratorios de docencia del ITT por loque nos apegaremos directamente a su manual de seguridad debido a que laspraacutecticas no requieren preparacioacuten previa de reactivos

3

III Praacutecticas

SESIOacuteN 1

USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MUESTRASBIOLOacuteGICAS

OBJETIVOEl alumno conoceraacute las partes maacutes importantes del microscopio

compuesto oacuteptico y el microscopio estereoscoacutepico asiacute como la formaadecuada de manejo y almacenamiento

INTRODUCCIOacuteNExisten varios tipos de microscopios tales como el microscopio

estereoscoacutepico el compuesto de campo oscuro fluorescencia contraste defases de luz ultravioleta el microscopio electroacutenico de transmisioacuten y elmicroscopio electroacutenico de barrido Para saber cuaacutel elegir debemospreguntarnos iquestQueacute es lo que queremos observar los maacutes usados en loslaboratorios de nivel superior son los siguientes

Microscopio compuesto es el que se utiliza de manera maacutes comuacuten en laspraacutecticas de temas bioloacutegicos este microscopio consta de tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte carro o platina pinzas de sujecioacutenrevoacutelver tornillos micromeacutetricos y macromeacutetrico de enfoque

b) Sistema de iluminacioacuten fuentes de luz condensador y espejoc) Sistema oacuteptico estaacute constituido por oculares y objetivos los oculares

son dos y tienen generalmente un valor de 10X cada uno los objetivosson 4 de diferente aumento (4X 10X 40x y 100X)Para saber el tamantildeo de las muestras que observamos al microscopio

debemos de multiplicar el valor del ocular (10X) por el nuacutemero del objetivo(4X 10X 40X 0 100X) que se esteacute usando

El elemento oacuteptico es el maacutes importante puesto que es el que producela imagen aumentada del objeto esta imagen ademaacutes la observamosinvertida (el objetivo funciona como una lente fotograacutefica) de ahiacute que seobserve a la derecha de la preparacioacuten se encuentre realmente a la izquierda yviceversa

4

Figura 1 Microscopio compuesto

Microscopio estereoscoacutepico este microscopio nos sirve para observarmuestras de mayor tamantildeo ya sean muestras enteras o parte de ellas seencuentra compuesto por tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte tornillo macromeacutetrico de enfoqueNota En el brazo de este tipo de microscopio se encuentra una de lasfuentes de luz por lo que a la hora de transportarlo se debe tenercuidado con esta

b) Sistema de iluminacioacuten cuenta con dos fuentes de luz una situada en labase (parte inferior) del microscopio y la otra situada en el brazo delmismo el condensador y el espejo nos son visibles

c) En este microscopio uacutenicamente se puede apreciar un objetivo pero sepueden cambiar los lentes desde 08X 1X 15X 2X 25X 3X 35X y4X dependiendo la marca y el modelo del microscopioPara saber cuaacutentas veces aumentamos la muestra se hace exactamente

lo mismo que con el microscopio oacuteptico se multiplica el valor del ocular (10X)por el valor del lente que se esteacute trabajando por ejemplo se trabaja con el08X (10X por 08X igual a 8) entonces aumentamos la muestra a 8 veces sutamantildeo real

A diferencia del microscopio oacuteptico en el estereoscoacutepico observamos laspreparaciones tal cual sin invertir por la lentes es decir que si se pone unrecorte de alguna palabra se puede leer igual que si trajera unos anteojos ouna lupa

5

Figura 2 Microscopio Estereoscoacutepico

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO OacutePTICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente y de ser

necesario con el diafragma4 Colocar el objetivo de menor aumento para visualizar el campo a

observar5 Situar la preparacioacuten a observar sobre la platina sujetando con la pinza

de la platina con el objeto de poder desplazar la muestra con lostornillos para mover la pinza

6 Mirar el microscopio lateralmente (no por el ocular) usar el tornillomacromeacutetrico y acerca el objetivo hasta la preparacioacuten sin que llegue atocarse

7 Siempre con el tornillo macromeacutetrico ajustar hasta que se observe elobjeto a estudiar

8 Con el tornillo micromeacutetrico acabar de enfocar con nitidez9 Moviendo la preparacioacuten con el tornillo de la platina se localizan los

campos a observar10Si se requieren mayores aumentos bajar un poco la platina esto para

evitar que los objetivos topen con la muestra (debido a que mientrasmayor sea el aumento el objetivo aumenta de largo) y girar el revoacutelvera la derecha para colocar el objetivo que en aumentos le sigueposteriormente corregir levemente el enfoque con el tornillomicromeacutetrico

11Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

12Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

6

Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

7

PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

8

g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

9

SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

10

Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

13

SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

14

Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

15

Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

17

SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

1

I Encuadre

a) IntroduccioacutenEl presente manual de praacutecticas para el curso de Biologiacutea Celular que se

imparte en la Ingenieriacutea en Agronomiacutea tiene la finalidad de reforzar la parteteoacuterica del curso y de desarrollar habilidades tales como el manejo demicroscopios y meacutetodos de tinciones y cortes histoloacutegicos de diversasmuestras

La estructuracioacuten de las praacutecticas tiene un enfoque maacutes didaacutectico porlas figuras que se incluyen y por las actividades que se pide realizar a losalumnos para mejor aplicacioacuten y comprensioacuten de los conceptos vistos en elaula de clases

Este manual de praacutecticas constituye un apoyo tanto para los profesores queimparten esta materia en las diferentes carreras del Instituto como para losestudiantes cuyas carreras tengan esta materia en comuacuten

b) Cuadro de competenciasDescribir las competencias que seraacuten abordadas en la presente guiacutea

Competencias Descripcioacuten

Previas Conocer las caracteriacutesticas principales de los ciclosbioloacutegicos de los seres vivos para aplicarlos en eldesarrollo de los organismosConocimiento uso y manejo de los instrumentos ymateriales de laboratorio

Geneacuterica Capacidad de anaacutelisis y siacutentesisCapacidad de organizar y planificarConocimientos generales baacutesicosConocimientos generales baacutesicos de la carreraComunicacioacuten oral y escrita en su propia lenguaHabilidades de gestioacuten de informacioacutenTrabajo en equipoHabilidades interpersonalesCapacidad de aplicar los conocimientos en lapraacutectica

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Capacidad de aprenderLiderazgoPreocupacioacuten por la calidad

Especiacutefica Desarrollar conocimientos generales de losprocesos celulares y relacionarlos con losorganismos vegetales y animales de intereacutes para elhombreRealizar el anaacutelisis de los procesos bioloacutegicoscelulares para entender el comportamiento de losorganismos con su medioDistinguir las diferentes estructuras de las que secomponen las ceacutelulas vegetales y animales

Profesionales Elaborar y procesar informacioacuten necesaria paradisentildear y ampliar alternativas de solucioacuten a losproblemas de su entornoGenerar y transferir tecnologiacutea para atendernecesidades prioritarias del sector agropecuarioManejar y utilizar los medios de informacioacuten paraexpresarse con propiedad en forma verbal y escritaen el idioma espantildeol

c) Niveles de desempentildeo

Nivel 2- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajovariadas y aplicadas en diversos contextos Algunas actividades son complejasy no rutinarias Presenta un bajo grado de responsabilidad y autonomiacutea en lasdecisiones A menudo requiere colaboracioacuten con otros y trabajo en equipo

II Marco legal (Praacutecticas Generales de Seguridad NOM Normas dereferencia y leyes aplicables)

Las praacutecticas se llevaraacuten a cabo en los laboratorios de docencia del ITT por loque nos apegaremos directamente a su manual de seguridad debido a que laspraacutecticas no requieren preparacioacuten previa de reactivos

3

III Praacutecticas

SESIOacuteN 1

USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MUESTRASBIOLOacuteGICAS

OBJETIVOEl alumno conoceraacute las partes maacutes importantes del microscopio

compuesto oacuteptico y el microscopio estereoscoacutepico asiacute como la formaadecuada de manejo y almacenamiento

INTRODUCCIOacuteNExisten varios tipos de microscopios tales como el microscopio

estereoscoacutepico el compuesto de campo oscuro fluorescencia contraste defases de luz ultravioleta el microscopio electroacutenico de transmisioacuten y elmicroscopio electroacutenico de barrido Para saber cuaacutel elegir debemospreguntarnos iquestQueacute es lo que queremos observar los maacutes usados en loslaboratorios de nivel superior son los siguientes

Microscopio compuesto es el que se utiliza de manera maacutes comuacuten en laspraacutecticas de temas bioloacutegicos este microscopio consta de tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte carro o platina pinzas de sujecioacutenrevoacutelver tornillos micromeacutetricos y macromeacutetrico de enfoque

b) Sistema de iluminacioacuten fuentes de luz condensador y espejoc) Sistema oacuteptico estaacute constituido por oculares y objetivos los oculares

son dos y tienen generalmente un valor de 10X cada uno los objetivosson 4 de diferente aumento (4X 10X 40x y 100X)Para saber el tamantildeo de las muestras que observamos al microscopio

debemos de multiplicar el valor del ocular (10X) por el nuacutemero del objetivo(4X 10X 40X 0 100X) que se esteacute usando

El elemento oacuteptico es el maacutes importante puesto que es el que producela imagen aumentada del objeto esta imagen ademaacutes la observamosinvertida (el objetivo funciona como una lente fotograacutefica) de ahiacute que seobserve a la derecha de la preparacioacuten se encuentre realmente a la izquierda yviceversa

4

Figura 1 Microscopio compuesto

Microscopio estereoscoacutepico este microscopio nos sirve para observarmuestras de mayor tamantildeo ya sean muestras enteras o parte de ellas seencuentra compuesto por tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte tornillo macromeacutetrico de enfoqueNota En el brazo de este tipo de microscopio se encuentra una de lasfuentes de luz por lo que a la hora de transportarlo se debe tenercuidado con esta

b) Sistema de iluminacioacuten cuenta con dos fuentes de luz una situada en labase (parte inferior) del microscopio y la otra situada en el brazo delmismo el condensador y el espejo nos son visibles

c) En este microscopio uacutenicamente se puede apreciar un objetivo pero sepueden cambiar los lentes desde 08X 1X 15X 2X 25X 3X 35X y4X dependiendo la marca y el modelo del microscopioPara saber cuaacutentas veces aumentamos la muestra se hace exactamente

lo mismo que con el microscopio oacuteptico se multiplica el valor del ocular (10X)por el valor del lente que se esteacute trabajando por ejemplo se trabaja con el08X (10X por 08X igual a 8) entonces aumentamos la muestra a 8 veces sutamantildeo real

A diferencia del microscopio oacuteptico en el estereoscoacutepico observamos laspreparaciones tal cual sin invertir por la lentes es decir que si se pone unrecorte de alguna palabra se puede leer igual que si trajera unos anteojos ouna lupa

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Figura 2 Microscopio Estereoscoacutepico

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO OacutePTICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente y de ser

necesario con el diafragma4 Colocar el objetivo de menor aumento para visualizar el campo a

observar5 Situar la preparacioacuten a observar sobre la platina sujetando con la pinza

de la platina con el objeto de poder desplazar la muestra con lostornillos para mover la pinza

6 Mirar el microscopio lateralmente (no por el ocular) usar el tornillomacromeacutetrico y acerca el objetivo hasta la preparacioacuten sin que llegue atocarse

7 Siempre con el tornillo macromeacutetrico ajustar hasta que se observe elobjeto a estudiar

8 Con el tornillo micromeacutetrico acabar de enfocar con nitidez9 Moviendo la preparacioacuten con el tornillo de la platina se localizan los

campos a observar10Si se requieren mayores aumentos bajar un poco la platina esto para

evitar que los objetivos topen con la muestra (debido a que mientrasmayor sea el aumento el objetivo aumenta de largo) y girar el revoacutelvera la derecha para colocar el objetivo que en aumentos le sigueposteriormente corregir levemente el enfoque con el tornillomicromeacutetrico

11Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

12Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

6

Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

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PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

8

g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

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SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

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Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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Capacidad de aprenderLiderazgoPreocupacioacuten por la calidad

Especiacutefica Desarrollar conocimientos generales de losprocesos celulares y relacionarlos con losorganismos vegetales y animales de intereacutes para elhombreRealizar el anaacutelisis de los procesos bioloacutegicoscelulares para entender el comportamiento de losorganismos con su medioDistinguir las diferentes estructuras de las que secomponen las ceacutelulas vegetales y animales

Profesionales Elaborar y procesar informacioacuten necesaria paradisentildear y ampliar alternativas de solucioacuten a losproblemas de su entornoGenerar y transferir tecnologiacutea para atendernecesidades prioritarias del sector agropecuarioManejar y utilizar los medios de informacioacuten paraexpresarse con propiedad en forma verbal y escritaen el idioma espantildeol

c) Niveles de desempentildeo

Nivel 2- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajovariadas y aplicadas en diversos contextos Algunas actividades son complejasy no rutinarias Presenta un bajo grado de responsabilidad y autonomiacutea en lasdecisiones A menudo requiere colaboracioacuten con otros y trabajo en equipo

II Marco legal (Praacutecticas Generales de Seguridad NOM Normas dereferencia y leyes aplicables)

Las praacutecticas se llevaraacuten a cabo en los laboratorios de docencia del ITT por loque nos apegaremos directamente a su manual de seguridad debido a que laspraacutecticas no requieren preparacioacuten previa de reactivos

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III Praacutecticas

SESIOacuteN 1

USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MUESTRASBIOLOacuteGICAS

OBJETIVOEl alumno conoceraacute las partes maacutes importantes del microscopio

compuesto oacuteptico y el microscopio estereoscoacutepico asiacute como la formaadecuada de manejo y almacenamiento

INTRODUCCIOacuteNExisten varios tipos de microscopios tales como el microscopio

estereoscoacutepico el compuesto de campo oscuro fluorescencia contraste defases de luz ultravioleta el microscopio electroacutenico de transmisioacuten y elmicroscopio electroacutenico de barrido Para saber cuaacutel elegir debemospreguntarnos iquestQueacute es lo que queremos observar los maacutes usados en loslaboratorios de nivel superior son los siguientes

Microscopio compuesto es el que se utiliza de manera maacutes comuacuten en laspraacutecticas de temas bioloacutegicos este microscopio consta de tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte carro o platina pinzas de sujecioacutenrevoacutelver tornillos micromeacutetricos y macromeacutetrico de enfoque

b) Sistema de iluminacioacuten fuentes de luz condensador y espejoc) Sistema oacuteptico estaacute constituido por oculares y objetivos los oculares

son dos y tienen generalmente un valor de 10X cada uno los objetivosson 4 de diferente aumento (4X 10X 40x y 100X)Para saber el tamantildeo de las muestras que observamos al microscopio

debemos de multiplicar el valor del ocular (10X) por el nuacutemero del objetivo(4X 10X 40X 0 100X) que se esteacute usando

El elemento oacuteptico es el maacutes importante puesto que es el que producela imagen aumentada del objeto esta imagen ademaacutes la observamosinvertida (el objetivo funciona como una lente fotograacutefica) de ahiacute que seobserve a la derecha de la preparacioacuten se encuentre realmente a la izquierda yviceversa

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Figura 1 Microscopio compuesto

Microscopio estereoscoacutepico este microscopio nos sirve para observarmuestras de mayor tamantildeo ya sean muestras enteras o parte de ellas seencuentra compuesto por tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte tornillo macromeacutetrico de enfoqueNota En el brazo de este tipo de microscopio se encuentra una de lasfuentes de luz por lo que a la hora de transportarlo se debe tenercuidado con esta

b) Sistema de iluminacioacuten cuenta con dos fuentes de luz una situada en labase (parte inferior) del microscopio y la otra situada en el brazo delmismo el condensador y el espejo nos son visibles

c) En este microscopio uacutenicamente se puede apreciar un objetivo pero sepueden cambiar los lentes desde 08X 1X 15X 2X 25X 3X 35X y4X dependiendo la marca y el modelo del microscopioPara saber cuaacutentas veces aumentamos la muestra se hace exactamente

lo mismo que con el microscopio oacuteptico se multiplica el valor del ocular (10X)por el valor del lente que se esteacute trabajando por ejemplo se trabaja con el08X (10X por 08X igual a 8) entonces aumentamos la muestra a 8 veces sutamantildeo real

A diferencia del microscopio oacuteptico en el estereoscoacutepico observamos laspreparaciones tal cual sin invertir por la lentes es decir que si se pone unrecorte de alguna palabra se puede leer igual que si trajera unos anteojos ouna lupa

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Figura 2 Microscopio Estereoscoacutepico

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO OacutePTICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente y de ser

necesario con el diafragma4 Colocar el objetivo de menor aumento para visualizar el campo a

observar5 Situar la preparacioacuten a observar sobre la platina sujetando con la pinza

de la platina con el objeto de poder desplazar la muestra con lostornillos para mover la pinza

6 Mirar el microscopio lateralmente (no por el ocular) usar el tornillomacromeacutetrico y acerca el objetivo hasta la preparacioacuten sin que llegue atocarse

7 Siempre con el tornillo macromeacutetrico ajustar hasta que se observe elobjeto a estudiar

8 Con el tornillo micromeacutetrico acabar de enfocar con nitidez9 Moviendo la preparacioacuten con el tornillo de la platina se localizan los

campos a observar10Si se requieren mayores aumentos bajar un poco la platina esto para

evitar que los objetivos topen con la muestra (debido a que mientrasmayor sea el aumento el objetivo aumenta de largo) y girar el revoacutelvera la derecha para colocar el objetivo que en aumentos le sigueposteriormente corregir levemente el enfoque con el tornillomicromeacutetrico

11Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

12Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

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Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

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PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

8

g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

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SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

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Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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III Praacutecticas

SESIOacuteN 1

USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MUESTRASBIOLOacuteGICAS

OBJETIVOEl alumno conoceraacute las partes maacutes importantes del microscopio

compuesto oacuteptico y el microscopio estereoscoacutepico asiacute como la formaadecuada de manejo y almacenamiento

INTRODUCCIOacuteNExisten varios tipos de microscopios tales como el microscopio

estereoscoacutepico el compuesto de campo oscuro fluorescencia contraste defases de luz ultravioleta el microscopio electroacutenico de transmisioacuten y elmicroscopio electroacutenico de barrido Para saber cuaacutel elegir debemospreguntarnos iquestQueacute es lo que queremos observar los maacutes usados en loslaboratorios de nivel superior son los siguientes

Microscopio compuesto es el que se utiliza de manera maacutes comuacuten en laspraacutecticas de temas bioloacutegicos este microscopio consta de tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte carro o platina pinzas de sujecioacutenrevoacutelver tornillos micromeacutetricos y macromeacutetrico de enfoque

b) Sistema de iluminacioacuten fuentes de luz condensador y espejoc) Sistema oacuteptico estaacute constituido por oculares y objetivos los oculares

son dos y tienen generalmente un valor de 10X cada uno los objetivosson 4 de diferente aumento (4X 10X 40x y 100X)Para saber el tamantildeo de las muestras que observamos al microscopio

debemos de multiplicar el valor del ocular (10X) por el nuacutemero del objetivo(4X 10X 40X 0 100X) que se esteacute usando

El elemento oacuteptico es el maacutes importante puesto que es el que producela imagen aumentada del objeto esta imagen ademaacutes la observamosinvertida (el objetivo funciona como una lente fotograacutefica) de ahiacute que seobserve a la derecha de la preparacioacuten se encuentre realmente a la izquierda yviceversa

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Figura 1 Microscopio compuesto

Microscopio estereoscoacutepico este microscopio nos sirve para observarmuestras de mayor tamantildeo ya sean muestras enteras o parte de ellas seencuentra compuesto por tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte tornillo macromeacutetrico de enfoqueNota En el brazo de este tipo de microscopio se encuentra una de lasfuentes de luz por lo que a la hora de transportarlo se debe tenercuidado con esta

b) Sistema de iluminacioacuten cuenta con dos fuentes de luz una situada en labase (parte inferior) del microscopio y la otra situada en el brazo delmismo el condensador y el espejo nos son visibles

c) En este microscopio uacutenicamente se puede apreciar un objetivo pero sepueden cambiar los lentes desde 08X 1X 15X 2X 25X 3X 35X y4X dependiendo la marca y el modelo del microscopioPara saber cuaacutentas veces aumentamos la muestra se hace exactamente

lo mismo que con el microscopio oacuteptico se multiplica el valor del ocular (10X)por el valor del lente que se esteacute trabajando por ejemplo se trabaja con el08X (10X por 08X igual a 8) entonces aumentamos la muestra a 8 veces sutamantildeo real

A diferencia del microscopio oacuteptico en el estereoscoacutepico observamos laspreparaciones tal cual sin invertir por la lentes es decir que si se pone unrecorte de alguna palabra se puede leer igual que si trajera unos anteojos ouna lupa

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Figura 2 Microscopio Estereoscoacutepico

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO OacutePTICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente y de ser

necesario con el diafragma4 Colocar el objetivo de menor aumento para visualizar el campo a

observar5 Situar la preparacioacuten a observar sobre la platina sujetando con la pinza

de la platina con el objeto de poder desplazar la muestra con lostornillos para mover la pinza

6 Mirar el microscopio lateralmente (no por el ocular) usar el tornillomacromeacutetrico y acerca el objetivo hasta la preparacioacuten sin que llegue atocarse

7 Siempre con el tornillo macromeacutetrico ajustar hasta que se observe elobjeto a estudiar

8 Con el tornillo micromeacutetrico acabar de enfocar con nitidez9 Moviendo la preparacioacuten con el tornillo de la platina se localizan los

campos a observar10Si se requieren mayores aumentos bajar un poco la platina esto para

evitar que los objetivos topen con la muestra (debido a que mientrasmayor sea el aumento el objetivo aumenta de largo) y girar el revoacutelvera la derecha para colocar el objetivo que en aumentos le sigueposteriormente corregir levemente el enfoque con el tornillomicromeacutetrico

11Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

12Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

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Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

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PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

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g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

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SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

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Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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Figura 1 Microscopio compuesto

Microscopio estereoscoacutepico este microscopio nos sirve para observarmuestras de mayor tamantildeo ya sean muestras enteras o parte de ellas seencuentra compuesto por tres sistemas

a) Sistema mecaacutenico son todas las partes que sirven de soporte almicroscopio brazo pie o soporte tornillo macromeacutetrico de enfoqueNota En el brazo de este tipo de microscopio se encuentra una de lasfuentes de luz por lo que a la hora de transportarlo se debe tenercuidado con esta

b) Sistema de iluminacioacuten cuenta con dos fuentes de luz una situada en labase (parte inferior) del microscopio y la otra situada en el brazo delmismo el condensador y el espejo nos son visibles

c) En este microscopio uacutenicamente se puede apreciar un objetivo pero sepueden cambiar los lentes desde 08X 1X 15X 2X 25X 3X 35X y4X dependiendo la marca y el modelo del microscopioPara saber cuaacutentas veces aumentamos la muestra se hace exactamente

lo mismo que con el microscopio oacuteptico se multiplica el valor del ocular (10X)por el valor del lente que se esteacute trabajando por ejemplo se trabaja con el08X (10X por 08X igual a 8) entonces aumentamos la muestra a 8 veces sutamantildeo real

A diferencia del microscopio oacuteptico en el estereoscoacutepico observamos laspreparaciones tal cual sin invertir por la lentes es decir que si se pone unrecorte de alguna palabra se puede leer igual que si trajera unos anteojos ouna lupa

5

Figura 2 Microscopio Estereoscoacutepico

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO OacutePTICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente y de ser

necesario con el diafragma4 Colocar el objetivo de menor aumento para visualizar el campo a

observar5 Situar la preparacioacuten a observar sobre la platina sujetando con la pinza

de la platina con el objeto de poder desplazar la muestra con lostornillos para mover la pinza

6 Mirar el microscopio lateralmente (no por el ocular) usar el tornillomacromeacutetrico y acerca el objetivo hasta la preparacioacuten sin que llegue atocarse

7 Siempre con el tornillo macromeacutetrico ajustar hasta que se observe elobjeto a estudiar

8 Con el tornillo micromeacutetrico acabar de enfocar con nitidez9 Moviendo la preparacioacuten con el tornillo de la platina se localizan los

campos a observar10Si se requieren mayores aumentos bajar un poco la platina esto para

evitar que los objetivos topen con la muestra (debido a que mientrasmayor sea el aumento el objetivo aumenta de largo) y girar el revoacutelvera la derecha para colocar el objetivo que en aumentos le sigueposteriormente corregir levemente el enfoque con el tornillomicromeacutetrico

11Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

12Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

6

Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

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PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

8

g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

9

SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

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Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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Figura 2 Microscopio Estereoscoacutepico

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO OacutePTICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente y de ser

necesario con el diafragma4 Colocar el objetivo de menor aumento para visualizar el campo a

observar5 Situar la preparacioacuten a observar sobre la platina sujetando con la pinza

de la platina con el objeto de poder desplazar la muestra con lostornillos para mover la pinza

6 Mirar el microscopio lateralmente (no por el ocular) usar el tornillomacromeacutetrico y acerca el objetivo hasta la preparacioacuten sin que llegue atocarse

7 Siempre con el tornillo macromeacutetrico ajustar hasta que se observe elobjeto a estudiar

8 Con el tornillo micromeacutetrico acabar de enfocar con nitidez9 Moviendo la preparacioacuten con el tornillo de la platina se localizan los

campos a observar10Si se requieren mayores aumentos bajar un poco la platina esto para

evitar que los objetivos topen con la muestra (debido a que mientrasmayor sea el aumento el objetivo aumenta de largo) y girar el revoacutelvera la derecha para colocar el objetivo que en aumentos le sigueposteriormente corregir levemente el enfoque con el tornillomicromeacutetrico

11Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

12Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

6

Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

7

PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

8

g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

9

SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

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Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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Cuando se use el objetivo de 100X es necesario agregar aceite deinmersioacuten una gota entre el objetivo y la preparacioacuten para lograr unaadecuada refraccioacuten de la luz y observar a este aumento

Inmediatamente despueacutes de su uso del objetivo de 100X deberaacute eliminarseel exceso de aceite con papel seda y luego impregnar otro papel seda conalcohol al 70 y limpiar nuevamente el objetivo posteriormente secar conpapel seda el mismo objetivo esto es con la finalidad de que no quede nada deaceite de inmersioacuten en el objetivo evitando el crecimiento de hongos en elmismo

INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DEL MICROSCOPIO ESTEREOSCOacutePICO1 Conectar a la toma de corriente el microscopio2 Encender el microscopio3 Regular la intensidad de luz con el botoacuten correspondiente4 Colocar el lente de menor aumento5 Situar la preparacioacuten sobre la base la muestra debe siempre estar

contenida dentro de una caja petri vidrio de reloj o portaobjetos6 Con el tornillo de cremallera (macromeacutetrico) ajustar hasta que se

observe la muestra a estudiar7 Moviendo la caja petri vidrio de reloj o portaobjetos donde se encuentre

contenida la muestra se localizan los campos a observar8 Si se quieren mayores aumentos girar el botoacuten para cambiar lentes para

colocar el aumento que le sigue corrigiendo levemente el enfoque con eltornillo macromeacutetrico

9 Observar la luminosidad para obtener el contraste deseadogeneralmente habraacute que aumentarla

10Al finalizar las observaciones se procederaacute a bajar la intensidad de la luzapagar el microscopio y enrollar el cable

MATERIALCristaleriacutea y equiposMicroscopio oacutepticoMicroscopio estereoscoacutepicoPorta y cubre objetosPinzasTijerasBisturiacutePipeta PasteurBulbo para pipeta PasteurAguja de diseccioacutenCaja petriVaso de precipitadoPapel Seda

Reactivos y muestrasSafraninaCebolla MoradaPerioacutedico

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PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

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g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

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SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

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Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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PROCEDIMIENTOI- Para aprender el uso correcto del microscopio compuesto y estereoscoacutepicose observaran muestras en ellos

a) Recortar del papel perioacutedico una letra ldquoerdquo minuacutescula la maacutes pequentildeaque encuentres en el perioacutedico

b) A continuacioacuten colocar en un portaobjetos una gota de agua de la llavey sobre la gota se pondraacute la letra ldquoerdquo y cubrirle con el cubreobjetos

c) Colocar en la platina la muestra de manera que la letra ldquoerdquo quede comosi se le hubiera escrito

d) Posteriormente observar al microscopio a 4X 10X y 40X anotar lasdiferencias observadas a cada aumento

Nota El objetivo de 100X necesita ser utilizado con aceite de inmersioacuten paracrear una adecuada refraccioacuten de luz en esta ocasioacuten no seraacute necesarioporque las muestras a utilizar son de gran tamantildeo

e) Repetir el procedimiento a) y depositar la letra ldquoerdquo en la mitad de la cajapetri

f) Colocar la mitad de la caja petri con la muestra en la base delmicroscopio estereoscoacutepico

g) Posteriormente enfoque y observe a 3 diferentes aumentosII-Se realizaraacute una preparacioacuten temporal de un tejido epideacutermico vegetal paraponer en praacutectica el uso del microscopio compuesto

a) Separar una de las hojas catafila de la cebolla y trabajar con la epidermisinterior

b) Depositar un fragmento de la epidermis interior de la cebolla(aproximadamente de 05 cm) sobre un portaobjetos

c) Verter unas gotas de safranina y dejar actuar durante 5 minutosNota No debe secarse la epidermis por falta de colorante o porevaporacioacuten del mismo

d) Realizar la observacioacuten al microscopio al menor aumento para localizarel campo deseado tener en cuenta que la safranina tintildee el materialgeneacutetico de las ceacutelulas haciendo que resalte el nuacutecleo de un color que vade rosa a rojo

e) Repetir todo el procedimiento pero ahora utilizando Azul de toluidinatener en cuenta que el azul de toluidina resalta la pared celular de lasplantas y dependiendo si se trata de celulosa se tentildeiraacute de color azul si lapared celular presenta hemicelulosa se tentildeiraacute de color morado o rosa ysi la ceacutelula fuera de un tallo se presentariacutea lignina la cual se tentildeiriacutea decolor azul turquesa

f) Al finalizar la praacutectica deberaacute limpiar los objetivos del microscopiooacuteptico con una solucioacuten de alcohol al 70 y con un papel seda paraevitar que quede alguacuten residuo de colorante

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g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

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SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

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Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

18

3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

19

SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

20

2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

21

SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

8

g) Dejar el microscopio oacuteptico en el 4X (menor aumento) enrollar bien elcable y regresar el equipo a su lugar tomaacutendolo del brazo y la base paraevitar accidentes

EJERCICIOCompleta la siguiente tabla de aumento total de los microscopios oacuteptico y

estereoscoacutepico (de acuerdo al equipo que tengas en tu mesa completar elcuadro con los valores de los objetivos)

Oculares Objetivo objetivo Objetivo ObjetivoCompuesto 4X 10X 40X 100X

10X

Estereoscoacutepico 08X 15X 25X 3X

10X

CUESTIONARIO1 iquestDe queacute forma se observa la letra ldquoerdquo al microscopio oacuteptico y

estereoscoacutepico Describa la diferencia si existiera2 iquestDescriba coacutemo se observa la letra ldquoerdquo a 08X 2X 25X 4X 10X y 40X

Utilice el microscopio adecuado para cada caso3 iquestDe queacute color se tintildeen los nuacutecleos de las ceacutelulas cuando se utiliza

acetocarmiacuten4 iquestDe queacute color se tintildeen la pared celular de la epidermis interna de la cebolla

al utilizar azul de toluidina Y explique a que se debe ese color5 iquestQueacute forma tienen las ceacutelulas observadas6 iquestA queacute aumentos realizo las observaciones7 iquestSon iguales todas las ceacutelulas que observas8 Investiga cuales fueron las partes de la ceacutelula vegetal que observaron al

microscopio y poacutengale nombre a todos sus esquemas

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SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

10

Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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SESIOacuteN 2MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

OBJETIVOEl alumno observaraacute como al mezclar determinados compuestos quiacutemicos

estos reaccionan entre siacute presentando una organizacioacuten constante lo quepermite explicar el posible origen de los sistemas precelulares

INTRODUCCIONA lo largo de la historia se ha tratado de dar una explicacioacuten sobre el origen

de la vida asiacute desde la antiguumledad se formularon diversas teoriacuteas quepretendiacutean dar una explicacioacuten Las principales teoriacuteas que se han postuladopara tratar de dar una explicacioacuten sobre el origen de la vida son las siguientesTeoriacuteas creacionistasTeoriacutea de la generacioacuten espontaacutenea

Versioacuten materialistaVersioacuten idealista

Teoriacutea de la panspermiaTeoriacutea de la panspermia claacutesicaTeoriacutea de la panspermia dirigida

Teoriacutea de la siacutentesis abioacuteticaEn la actualidad esta uacuteltima es la maacutes aceptada por los bioacutelogos y fuepropuesta inicialmente por Oparin en 1921-1924 y por Haldane en 1929 demanera completamente independiente Si bien difieren en algunos aspectosambos sugieren que la vida aparecioacute en la tierra como resultado de un dilatadoproceso evolutivo de la materiaOparin sostiene que las propiedades vitales aparecieron gradualmente a lolargo de largos periodos gracias a la seleccioacuten natural y de esta maneraaparecieron los primeros probiontes o primeros sistemas previos a la vida yque estos fueron adquiriendo mejores caracteriacutesticas hasta dar origen a losprimeros eubiontes o primeros seres vivosEntre los trabajos maacutes destacados acerca de modelos precelulares tenemosLos coacervados de OparinMicroesferas proteinoides de FoxColpoides y sulfobios de Alfonso Herrera

MATERIALESCristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta objetosCubre objetosAguja de diseccioacutenPipetas pasteur

Reactivos y Muestras5ml de alcohol etiacutelico20 ml de HCl concentrado1 gota de solucioacuten acuosa de grenetina al11 gota de solucioacuten acuosa de goma araacutebiga

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Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

10

Caja de petri al 11 gota de colorante azul de metileno (si esnecesario)25 ml de una mezcla de aceite de oliva ygasolina blanca en proporcioacuten 1420 ml de solucioacuten acuosa de hidroacutexido desodio al 12 con gotas de hematoxilina

PROCEDIMIENTO1 Lava un porta objeto con agua y jaboacuten y enjuaacutegalo con el alcohol y deacutejalo

secar2 Deposita sobre el porta objetos una gota de solucioacuten de goma araacutebiga y

grenetina3 Introduce la punta de una aguja de diseccioacuten en HCl concentrado para

inducir a la formacioacuten de los coacervados4 Mezcla con esa misma aguja de diseccioacuten observa a simple vista y con el

microscopio compuesto Registra tus resultados5 Agrega a tu preparacioacuten anterior una gota de azul de metileno si es

necesario y no le coloques cubre objetos cuida que la preparacioacuten notoque la lente del objetivo

6 Observa a 40x aumentos con el microscopio compuesto elabora unesquema detallado y describe sus caracteriacutesticas

7 Vierte en la caja de petri 25 ml de la mezcla de aceite de oliva y gasolinablanca

8 Tapa inmediatamente tanto la caja de petri como el frasco de dondetomaste la mezcla mantenieacutendolos asiacute para que no inhales sus vapores

9 Observando con una lupa agrega a la mezcla anterior algunas gotas de lasolucioacuten de hidroacutexido de sodio y hematoxilina

10Elabora un esquema detallado de los colpoides y describe suscaracteriacutesticas

CUESTIONARIO

1 iquestEn queacute sentido son comparables las sustancias que utilizaste para laelaboracioacuten de los modelos con las que pudieron haber existido realmentecuando se formaron estos sistemas

2 iquestQueacute estructura celular se pudo haber originado por delimitacioacutenrepresentada en ambos modelos

3 iquestQueacute implicaciones tuvo la formacioacuten de dicha estructura en relacioacuten con elprobable origen y funcionamiento de la ceacutelula

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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SESIOacuteN 3PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA PLASMAacuteTICA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar los procesos de permeabilidad que se

dan en la ceacutelula

INTRODUCCIOacuteNLa existencia de la membrana plasmaacutetica que rodea las ceacutelulas funciona

como una especie de muro que separa dos compartimentos el extracelular yel intracelular Esta separacioacuten trae como consecuencia que las diferentesmoleacuteculas e iones se distribuyan de manera asimeacutetrica estableciendodiferenciales de concentracioacuten y cargas eleacutectricas que promueven elintercambio entre ambos compartimentos Estas moleacuteculas e iones puedenatravesar las membranas bioloacutegicas mediante diferentes mecanismosdependiendo de la naturaleza polar el tamantildeo de ellas y la diferencia deconcentracioacutenDentro del grupo de moleacuteculas que pueden atravesar las membranas el pasode agua es muy importante para las ceacutelulas porque utiliza un mecanismoparticular que puede contribuir a disminuir diferencias extremas en lasconcentraciones de las sustancias disueltas entre los compartimentospermitir la adaptacioacuten celular al medio ambiente o causar la destruccioacuten de lamisma Este flujo de agua yo de diferentes sustancias puede traer comoconsecuencia cambios en la morfologiacutea de ceacutelula que pueden ser apreciables almicroscopio los ejemplos maacutes claros son el fenoacutemeno de turgencia yplasmoacutelisis estos cambios suceden tanto en la ceacutelula animal como vegetal lauacutenica diferencia es que la ceacutelula vegetal gracias a la existencia de la paredcelular compuesta de celulosa no se llega a romper por la rigidez que le brindaeacutestaEn esta praacutectica vamos a observar los fenoacutemenos de turgencia y plasmoacutelisismediante la exposicioacuten de ceacutelulas vegetales y animales a tres tipos desoluciones

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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Figura 1 Cambios que sufren la ceacutelula animal en las soluciones IsotoacutenicasHipotoacutenicas e Hipertoacutenicas

Figura 2 Cambios que sufre la ceacutelula vegetal en diferentes solucionesisotoacutenicas hipotoacutenicas e hipertoacutenicas

MATERIALCristaleriacutea y equipos Reactivos y muestras

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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Microscopio oacutepticoPorta y cubreobjetosCajas petriPipetas PasteurBisturiacuteLanceta esteacuteril

Solucioacuten isotoacutenicaSolucioacuten HipotoacutenicaSolucioacuten hipertoacutenicaCebolla blanca

PROCEDIMIENTO 11- Separe una de las capas de la epidermis de la cebolla obtenga unfragmento y coloque en un portaobjetos y observe la membrana que seencuentra en contacto con la pared celular esto es para saber coacutemo seencuentra la ceacutelula antes de sufrir cualquier cambio al ser sometida a los trestratamientos (agregue una gota de agua de ser necesario para evitar que sedeshidrate la planta)2- Posteriormente obtenga otro fragmento de la epidermis y deposiacutetela en lacaja petri con solucioacuten isotoacutenica espere 15 minutos y coloacutequelo en unportaobjetos antildeada una gota de la solucioacuten isotoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a10 X y 40X para identificar la membrana plasmaacutetica y esquematice o tomefoto de la muestra al microscopio3- Separe otro fragmento de la epidermis y coloacutequela en una caja petri conuna solucioacuten hipotoacutenica espere 15 minutos y deposite en un portaobjetos conuna gota de la solucioacuten hipotoacutenica (con el fin de evitar la desecacioacuten de lamuestra) coloque el cubreobjetos y observe al microscopio a 10X y 40X yesquematice o tome foto de la muestra al microscopio4- Prepare un cuarto fragmento de la epidermis y deposiacutetela en una caja petricon una solucioacuten hipertoacutenica espere 15 minutos y deposite en unportaobjetos con una gota de la solucioacuten hipertoacutenica (con el fin de evitar ladesecacioacuten de la muestra) coloque el cubre objetos y observe a 10X y 40X yesquematiceNota es importante que la muestra de la epidermis de la cebolla no se seque alestar observando al microscopio

PROCEDIMIENTO 21- Con una torunda de algodoacuten con alcohol limpiar la yema del dedo iacutendice2- Con una lanceta pique la yema de uno de sus dedos hasta que brote sangrecolocar una gota en cada uno de los portaobjetos (tres)NOTA Desecha la lanceta inmediatamente en el contenedor adecuado3-La primera gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten isotoacutenica4- La segunda gota coloacutequelo sobre un portaobjetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipotoacutenica

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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5- La tercera gota coloacutequelo sobre un porta objetos que contenga dos gotasde solucioacuten hipertoacutenica6- En los tres casos homogeneizar mediante movimientos circulares delportaobjetos Coloca el cubreobjetos y observa las preparaciones almicroscopio con el objetivo 10X y 40 X y esquematiza

RESULTADOS1- Realiza tus observaciones y dibuja o fotografiacutea tus resultados de la praacutecticaidentificando a queacute aumento se observoacute cada esquema2- Agrega nombre a cada proceso3- Explique las causas por las cuales las ceacutelulas sufrieron cambios alsometerlas a las diferente soluciones4- iquestHubo alguna diferencia entre lo que ocurrioacute con las ceacutelulas vegetales yanimales si la hubo a que se debioacute5- Menciona las principales diferencias que existen entre una ceacutelula animal yuna vegetal6- iquestEn queacute fenoacutemeno hay disminucioacuten de protoplasto y disminucioacuten deltamantildeo de las vacuolas

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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SESIOacuteN 4SEPARACIOacuteN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIacuteA EN

PAPEL

OBJETIVOQue el alumno realice la separacioacuten de los principales pigmentos que se

pueden encontrar en las ceacutelulas vegetales por medio de la teacutecnica decromatografiacutea en papel

INTRODUCCIOacuteNLos cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado

clorofila Sin embargo lo que en realidad existe en los cloroplastos es unamezcla de pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila(clorofila a y clorofila b) por b-caroteno y por xantofilaTodas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad lo cualpermite su separacioacuten cuando una solucioacuten de la misma asciende porcapilaridad por una tira de papel poroso (papel de filtro) ya que las maacutessolubles se desplazaraacuten a mayor velocidad pues acompantildearaacuten faacutecilmente aldisolvente a medida que eacuteste va ascendiendo De esta forma al cabo de ciertotiempo a lo largo del papel de filtro se iraacuten situando los distintos pigmentos enforma de bandas coloreadas tanto maacutes desplazadas cuanto maacutes solubles seanlos pigmentos a que pertenecen y tanto maacutes anchas cuanto mayor sea laabundancia de estos en la mezclaLa cromatografiacutea se fundamenta en la separacioacuten de los componentes de unamezcla por sus diferencias de adsorcioacuten Estas diferencias van a ser debidas alas fuerzas de Van der Wals que se establecen entre los componentes de lamezcla y una sustancia que actuacutea de fase estacionariaLa cromatografiacutea en papel es una teacutecnica sencilla y barata de separacioacuten dediversos componentes liacutequidos

MATERIALESCristaleriacuteaMortero y pistiloCajas de petriMatrazEmbudo de vidrio

Reactivos y muestrasPapel filtro No 1Alcohol de 96degHojas de distintas plantas

PROCEDIMIENTO1 Lave las hojas con abundante agua corriente y troacutecelas colocaacutendolas en elmortero (evitando las venaciones muy gruesas)2 Adicione 50 o 60 ml de alcohol y triture sin golpear hasta que el liacutequidoobtenga una coloracioacuten verde intenso

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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3 Filtrar el contenido en un matraz debidamente rotulado para obtener unasolucioacuten alcohoacutelica de pigmentos4 En una caja de petri debidamente rotulada adicionar la solucioacuten5 Coloque un papel filtro doblado en aacutengulo dentro de la solucioacuten y dejereposar el tiempo que sea necesario6 Retire el papel filtro de la caja petri y deje secar

RESULTADOS1 Mide las diferentes bandas de tu cromatograma siendo la primera banda lamaacutes cercana al borde que tocaba la solucioacuten2 Obteacuten una imagen de tu cromatograma y sentildeala las diferentes bandas ygrosores asiacute como el nombre del pigmento al cual corresponde de acuerdo a lasiguiente informacioacuten la velocidad de difusioacuten de mayor a menor es b-caroteno xantofila clorofila a y clorofila b3 Realiza un cuadro comparativo de todas tus muestras

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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SESIOacuteN 5SEPARACIOacuteN DIFERENCIAL POR CENTRIFUGACIOacuteN

OBJETIVOQue el alumno sea capaz de realizar separaciones diferenciales por el

meacutetodo de centrifugacioacuten

INTRODUCCIOacuteNEl fraccionamiento subcelular es un conjunto de meacutetodos y teacutecnicas que

tienen como objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en undeterminado componente celular ya sea eacuteste un orgaacutenulo (mitocondriasnuacutecleos peroxisomas etc) una fraccioacuten de membrana (membrana totalplasmaacutetica dominio basolateral dominio apical etc) complejosmultiproteicos (citoesqueleto de actina microtuacutebulos poros nucleares etc)Separacioacuten de los organelos puede ser llevada a cabo empleando lacentrifugacioacuten Manejando las variables fuerza centriacutefuga y tiempo podemosseparar primero los organelos de mayor tamantildeo como el nuacutecleo Encentrifugaciones sucesivas de mayor fuerza gravitacional y mayor tiempoobtendremos las diferentes fracciones de nuestro intereacutes La etapa final es laobtencioacuten del citosol que es un liacutequido complejo el cual contiene los elementosdel citoesqueleto y entre el 25 - 50 de las enzimas celulares De acuerdo a laley de Stokes tambieacuten podemos separar las organelas de acuerdo a susdensidades relativas con respecto a un gradiente de densidadesLas ceacutelulas se lisan y los componentes subcelulares se separan mediante unaserie de centrifugaciones que van aumentando de velocidad Despueacutes de cadacentrifugacioacuten los orgaacutenulos que se han sedimentado en el fondo del tubo serecogen en forma de precipitado soacutelido El sobrenadante se centrifuga a unamayor velocidad para sedimentar la siguiente organela maacutes grande Sesedimentan las estructuras maacutes grandes y pesadas con mayor rapidez

MATERIALESCristaleriacutea y equiposTubos de ensayoCentriacutefugaMortero y pistiloPipeta pasteurBulbo para pipeta pasteur

Reactivos y muestrasAgua destiladaSolucioacuten fisioloacutegicaHCl al 30Muestra bioloacutegica de sangre de perroMuestra bioloacutegica de hiacutegado de pollo

PROCEDIMIENTO 11 Tome una porcioacuten de aproximadamente 1 cm3 de hiacutegado de pollo y agregue10 ml de HCL al 10 en un mortero Con ayuda del pistilo triture hasta formaruna pasta diluida

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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2 Coloque una porcioacuten de esta solucioacuten en un tubo de ensayo y agreguesolucioacuten fisioloacutegica3 Centrifugue a 1000 g por 10 min4 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica5 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min6 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica7 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

PROCEDIMIENTO 21 Coloque una muestra de solucioacuten de sangre de perro en un tubo de ensayo yagregue solucioacuten fisioloacutegica2 Centrifugue a 1000 g por 10 min3 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica4 Centrifugue el sobrenadante a 20000 g por 15 min5 Retire el sobrenadante a otro tubo de ensayo y en caso de ser necesarioagregue maacutes solucioacuten fisioloacutegica6 Centrifugue el sobrenadante a 80000 g por 50 min

RESULTADOSEsquematiza tus resultados sentildealando cada una de las fases y su contenidoteoacuterico para cada procedimiento

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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SESIOacuteN 6CEacuteLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir las diferencias en las estructuras de

las ceacutelulas procariotas y eucariotas

INTRODUCCIOacuteNLa ceacutelula es la unidad estructural funcional o metaboacutelica y geneacutetica de

todo organismo vivo Basaacutendonos en la organizacioacuten de las estructurascelulares todos las ceacutelulas vivientes pueden ser divididas en dos grandesgrupos Procariotas y EucariotasLas ceacutelulas procariotas son ceacutelulas sin nuacutecleo donde el ADN y el ARN no estaacutenlimitados por membrana alguna El teacutermino procariota hace referencia a losorganismos conocidos como moneras que se incluyen en el reino Moneras oProcariotas ejemplo las bacteriasLas ceacutelulas procariotas se dividen en tres grupos principales1)- Eubacterias que poseen paredes celulares formadas por peptidoglicano opor mureiacutena Incluye a la mayoriacutea de las bacterias y tambieacuten a lascianobacterias2)- Arqueobacterias que utilizan otras sustancias para constituir sus paredescelulares Son todas aquellas que habitan en condiciones extremas comomanantiales sulfurosos calientes o aguas de salinidad muy elevada3) Cianobacterias son un grupo de bacterias con caracteriacutesticas peculiaresSon maacutes parecidas a las bacterias gramnegativas Son mayores que laseubacterias Como particularidad tambieacuten tienen la pared parecida a la de lasbacterias grampositivas La clorofila es praacutecticamente la misma de las plantassuperiores y la fotosiacutentesis es aerobia En las cianobacterias los pigmentos sedisponen sobre una vesiacutecula denominada tilacoide que se dispone en unaregioacuten alrededor de una zona clara llamada nucleoplasma regioacuten granulardonde estaacute el material geneacutetico y a su alrededor se encuentra elcromatoplasma donde se encuentran los tilacoides que le dan esa tonalidadque poseen las cianobacterias Tambieacuten se les llama algas procariotas debido asu semejanza con respecto a la clorofila de las plantas superioresLos organismos eucariontes incluye a los organismos maacutes conocidosrepartidos en cuatro reinos Animalia Plantae Fungi y Protista Los ejemplosde la disparidad eucarioacutetica van desde un dinoflagelado (un protista unicelularfotosintetizador) un aacuterbol como la sequoia un calamar o un racimo de setas(oacuterganos reproductivos de hongos) cada uno con ceacutelulas distintas y en elcaso de los pluricelulares a menudo muy variadas Estas ceacutelulas poseen unnuacutecleo bien definido delimitado por una membrana nuclear En ella seobservan organelos unidos por membranas Las ceacutelulas eucariontes tienen

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distintas regiones que van separando distintos procesos metaboacutelicos lo quepermite aumentar la eficiencia de las actividades celulares propias de ellas Lauacutenica diferencia entre sus estructuras es la pared celular ya que la ceacutelulavegetal tiene por fuera de la membrana una membrana riacutegida que la protegellamada pared celular Las ceacutelulas animales no la tienen (Karp G 1998)

Bosmina Ceriodafnia Dafnia Simocefalos

Cladoacuteceros

Copeacutepodos

Clyclopsfuscus

Ciclopsstrenuus

Diaptomusgricilis Diaptomusgraciloides

Distilaohioensis

Rotiacuteferos Furculariaforticula Hydatinasento Pedalionmirum

Philodina rosetaPolyarthraplatypteraRattuluscylindricus Synchaetastylata Triarthra

Hormidium

Algaspluricelulares

Maxonema Spirogyra Ulothrix Zygnema Scenedesmus

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Ameba limax Ameba proteusDiflugia

Ameba radiosa

Chlamydomonas Euglena Eudorina Peridineo

Gastrostila Colpidium Euplotes Halteria

Paramecium Spirostomum Stentor Vorticella Stylonychia

Asterionella Navicula Closterium Cosmarium Euastrum

Rizoacutepodos

Flagelados

Ciliados

Algasunicelulares

Figura 1 Los microorganismos maacutes comunes en las muestras de aguadulce

MATERIALCristaleriacuteaMicroscopio compuestoPorta y cubreobjetosPipetas PasteurAza de siembraAguja de diseccioacutenPinza

Reactivos y muestrasSafraninaAzul de algodoacutenAzul de metilenoMuestra de agua de estanquepileta o cenoteSolucioacuten de levaduraTortilla con hongos

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PROCEDIMIENTO1- Tome una pequentildea gota de cada muestra para elaborar preparacionestemporales en caso de requerirse colocar una gota de agua al porta objetos ydiluir la muestra del frasco colocar el cubre objetos y observar las tresmuestras al microscopio compuesto a 10X y 40X en caso de que el profesor lorequiera observar a 100X con sus instrucciones2- Las ceacutelulas procariotas se tintildeen de color rosa en presencia de la safraninapor lo que repetimos el paso anterior pero agregando una gota de estecolorante con las tres muestras3- Con una pipeta tome una gota del sedimento de la muestra de aguacoloacutequelo en un portaobjetos y cubra con el cubreobjetos4- Observe la preparacioacuten al microscopio a 10X y 40X e identifiqueprotozoarios algas clorofitas diatomeas y algunos invertebrados o larvas deestos de ser necesario tintildea con azul de metileno5- Coloque una gota de agua en un portaobjetos y con un asa de siembratoma una muestra a los hongos de la tortilla y diluye en la gota de agua delportaobjetos tintildee con azul de algodoacuten coloca el cubreobjetos y observe a 10Xy 40X la preparacioacutenNota Las muestras del agua deben de contener residuos de las paredes ofondo del estanque o pileta para que se puedan observar los microorganismos

RESULTADOS1- Anote los tipos de ceacutelulas procariotas y eucariota que se encontraron encada muestra2- Realice esquemas a todos los tipos de ceacutelulas que observoacute3- De acuerdo a los esquemas proporcionados por el profesor identifique aqueacute tipo de ceacutelula eucariota pertenecen las que usted encontroacute en su muestrade agua4- Mencione cinco caracteriacutesticas de las ceacutelulas Procariotas y cinco de lasEucariotas5- Mencione cinco ejemplos de seres unicelulares o pluricelulares quepresenten el tipo de ceacutelula eucariota y que haya observado6- En base a la praacutectica mencione cinco diferencias entre las ceacutelulasprocariotas y eucariotas

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SESIOacuteN 7CEacuteLULA VEGETAL Y ANIMAL

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar las estructuras que componen las

ceacutelulas animales y vegetales

INTRODUCCIOacuteNExisten dos tipos de ceacutelulas con respecto a su origen ceacutelulas animales y ceacutelulasvegetales

En ambos casos presentan un alto grado de organizacioacuten con numerosasestructuras internas delimitadas por membranas La membrana nuclearestablece una barrera entre el material geneacutetico y el citoplasma

Diferencias entre ceacutelulas animales y vegetales

1- La ceacutelula vegetal presenta una pared que suele estar formada por celulosariacutegida en cambio la ceacutelula animal no la posee soacutelo tiene la membranacitoplasmaacutetica que la separa del medio

2- La ceacutelula vegetal contiene cloroplastos organelos capaces de sintetizarazuacutecares a partir de dioacutexido de carbono agua y luz solar (fotosiacutentesis) lo cuallos hace autoacutetrofos (producen su propio alimento) y la ceacutelula animal no losposee por lo tanto no puede realizar el proceso de fotosiacutentesis (heteroacutetrofos)

3- Una vacuola uacutenica llena de liacutequido que ocupa casi todo el interior de laceacutelula vegetal en cambio la ceacutelula animal tiene varias vacuolas y son maacutespequentildeas

4- Las ceacutelulas vegetales pueden reproducirse mediante un proceso que da porresultado ceacutelulas iguales a las progenitoras este tipo de reproduccioacuten se llamareproduccioacuten asexual

5-Las ceacutelulas animales pueden realizar un tipo de reproduccioacuten llamadoreproduccioacuten sexual en el cual los descendientes presentan caracteriacutesticas delos progenitores pero no son ideacutenticos a eacutel (Alberts et al 1999)

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Ameba limax Ameba proteusDiflugia

Ameba radiosa

Chlamydomonas Euglena Eudorina Peridineo

Gastrostila Colpidium Euplotes Halteria

Paramecium Spirostomum Stentor Vorticella Stylonychia

Asterionella Navicula Closterium Cosmarium Euastrum

Rizoacutepodos

Flagelados

Ciliados

Algasunicelulares

Figura 1 Los microorganismos maacutes comunes en las muestras de aguadulce

MATERIALCristaleriacuteaMicroscopio compuestoPorta y cubreobjetosPipetas PasteurAza de siembraAguja de diseccioacutenPinza

Reactivos y muestrasSafraninaAzul de algodoacutenAzul de metilenoMuestra de agua de estanquepileta o cenoteSolucioacuten de levaduraTortilla con hongos

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PROCEDIMIENTO1- Tome una pequentildea gota de cada muestra para elaborar preparacionestemporales en caso de requerirse colocar una gota de agua al porta objetos ydiluir la muestra del frasco colocar el cubre objetos y observar las tresmuestras al microscopio compuesto a 10X y 40X en caso de que el profesor lorequiera observar a 100X con sus instrucciones2- Las ceacutelulas procariotas se tintildeen de color rosa en presencia de la safraninapor lo que repetimos el paso anterior pero agregando una gota de estecolorante con las tres muestras3- Con una pipeta tome una gota del sedimento de la muestra de aguacoloacutequelo en un portaobjetos y cubra con el cubreobjetos4- Observe la preparacioacuten al microscopio a 10X y 40X e identifiqueprotozoarios algas clorofitas diatomeas y algunos invertebrados o larvas deestos de ser necesario tintildea con azul de metileno5- Coloque una gota de agua en un portaobjetos y con un asa de siembratoma una muestra a los hongos de la tortilla y diluye en la gota de agua delportaobjetos tintildee con azul de algodoacuten coloca el cubreobjetos y observe a 10Xy 40X la preparacioacutenNota Las muestras del agua deben de contener residuos de las paredes ofondo del estanque o pileta para que se puedan observar los microorganismos

RESULTADOS1- Anote los tipos de ceacutelulas procariotas y eucariota que se encontraron encada muestra2- Realice esquemas a todos los tipos de ceacutelulas que observoacute3- De acuerdo a los esquemas proporcionados por el profesor identifique aqueacute tipo de ceacutelula eucariota pertenecen las que usted encontroacute en su muestrade agua4- Mencione cinco caracteriacutesticas de las ceacutelulas Procariotas y cinco de lasEucariotas5- Mencione cinco ejemplos de seres unicelulares o pluricelulares quepresenten el tipo de ceacutelula eucariota y que haya observado6- En base a la praacutectica mencione cinco diferencias entre las ceacutelulasprocariotas y eucariotas

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SESIOacuteN 7CEacuteLULA VEGETAL Y ANIMAL

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar las estructuras que componen las

ceacutelulas animales y vegetales

INTRODUCCIOacuteNExisten dos tipos de ceacutelulas con respecto a su origen ceacutelulas animales y ceacutelulasvegetales

En ambos casos presentan un alto grado de organizacioacuten con numerosasestructuras internas delimitadas por membranas La membrana nuclearestablece una barrera entre el material geneacutetico y el citoplasma

Diferencias entre ceacutelulas animales y vegetales

1- La ceacutelula vegetal presenta una pared que suele estar formada por celulosariacutegida en cambio la ceacutelula animal no la posee soacutelo tiene la membranacitoplasmaacutetica que la separa del medio

2- La ceacutelula vegetal contiene cloroplastos organelos capaces de sintetizarazuacutecares a partir de dioacutexido de carbono agua y luz solar (fotosiacutentesis) lo cuallos hace autoacutetrofos (producen su propio alimento) y la ceacutelula animal no losposee por lo tanto no puede realizar el proceso de fotosiacutentesis (heteroacutetrofos)

3- Una vacuola uacutenica llena de liacutequido que ocupa casi todo el interior de laceacutelula vegetal en cambio la ceacutelula animal tiene varias vacuolas y son maacutespequentildeas

4- Las ceacutelulas vegetales pueden reproducirse mediante un proceso que da porresultado ceacutelulas iguales a las progenitoras este tipo de reproduccioacuten se llamareproduccioacuten asexual

5-Las ceacutelulas animales pueden realizar un tipo de reproduccioacuten llamadoreproduccioacuten sexual en el cual los descendientes presentan caracteriacutesticas delos progenitores pero no son ideacutenticos a eacutel (Alberts et al 1999)

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PROCEDIMIENTO1- Tome una pequentildea gota de cada muestra para elaborar preparacionestemporales en caso de requerirse colocar una gota de agua al porta objetos ydiluir la muestra del frasco colocar el cubre objetos y observar las tresmuestras al microscopio compuesto a 10X y 40X en caso de que el profesor lorequiera observar a 100X con sus instrucciones2- Las ceacutelulas procariotas se tintildeen de color rosa en presencia de la safraninapor lo que repetimos el paso anterior pero agregando una gota de estecolorante con las tres muestras3- Con una pipeta tome una gota del sedimento de la muestra de aguacoloacutequelo en un portaobjetos y cubra con el cubreobjetos4- Observe la preparacioacuten al microscopio a 10X y 40X e identifiqueprotozoarios algas clorofitas diatomeas y algunos invertebrados o larvas deestos de ser necesario tintildea con azul de metileno5- Coloque una gota de agua en un portaobjetos y con un asa de siembratoma una muestra a los hongos de la tortilla y diluye en la gota de agua delportaobjetos tintildee con azul de algodoacuten coloca el cubreobjetos y observe a 10Xy 40X la preparacioacutenNota Las muestras del agua deben de contener residuos de las paredes ofondo del estanque o pileta para que se puedan observar los microorganismos

RESULTADOS1- Anote los tipos de ceacutelulas procariotas y eucariota que se encontraron encada muestra2- Realice esquemas a todos los tipos de ceacutelulas que observoacute3- De acuerdo a los esquemas proporcionados por el profesor identifique aqueacute tipo de ceacutelula eucariota pertenecen las que usted encontroacute en su muestrade agua4- Mencione cinco caracteriacutesticas de las ceacutelulas Procariotas y cinco de lasEucariotas5- Mencione cinco ejemplos de seres unicelulares o pluricelulares quepresenten el tipo de ceacutelula eucariota y que haya observado6- En base a la praacutectica mencione cinco diferencias entre las ceacutelulasprocariotas y eucariotas

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SESIOacuteN 7CEacuteLULA VEGETAL Y ANIMAL

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar las estructuras que componen las

ceacutelulas animales y vegetales

INTRODUCCIOacuteNExisten dos tipos de ceacutelulas con respecto a su origen ceacutelulas animales y ceacutelulasvegetales

En ambos casos presentan un alto grado de organizacioacuten con numerosasestructuras internas delimitadas por membranas La membrana nuclearestablece una barrera entre el material geneacutetico y el citoplasma

Diferencias entre ceacutelulas animales y vegetales

1- La ceacutelula vegetal presenta una pared que suele estar formada por celulosariacutegida en cambio la ceacutelula animal no la posee soacutelo tiene la membranacitoplasmaacutetica que la separa del medio

2- La ceacutelula vegetal contiene cloroplastos organelos capaces de sintetizarazuacutecares a partir de dioacutexido de carbono agua y luz solar (fotosiacutentesis) lo cuallos hace autoacutetrofos (producen su propio alimento) y la ceacutelula animal no losposee por lo tanto no puede realizar el proceso de fotosiacutentesis (heteroacutetrofos)

3- Una vacuola uacutenica llena de liacutequido que ocupa casi todo el interior de laceacutelula vegetal en cambio la ceacutelula animal tiene varias vacuolas y son maacutespequentildeas

4- Las ceacutelulas vegetales pueden reproducirse mediante un proceso que da porresultado ceacutelulas iguales a las progenitoras este tipo de reproduccioacuten se llamareproduccioacuten asexual

5-Las ceacutelulas animales pueden realizar un tipo de reproduccioacuten llamadoreproduccioacuten sexual en el cual los descendientes presentan caracteriacutesticas delos progenitores pero no son ideacutenticos a eacutel (Alberts et al 1999)

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SESIOacuteN 7CEacuteLULA VEGETAL Y ANIMAL

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de identificar las estructuras que componen las

ceacutelulas animales y vegetales

INTRODUCCIOacuteNExisten dos tipos de ceacutelulas con respecto a su origen ceacutelulas animales y ceacutelulasvegetales

En ambos casos presentan un alto grado de organizacioacuten con numerosasestructuras internas delimitadas por membranas La membrana nuclearestablece una barrera entre el material geneacutetico y el citoplasma

Diferencias entre ceacutelulas animales y vegetales

1- La ceacutelula vegetal presenta una pared que suele estar formada por celulosariacutegida en cambio la ceacutelula animal no la posee soacutelo tiene la membranacitoplasmaacutetica que la separa del medio

2- La ceacutelula vegetal contiene cloroplastos organelos capaces de sintetizarazuacutecares a partir de dioacutexido de carbono agua y luz solar (fotosiacutentesis) lo cuallos hace autoacutetrofos (producen su propio alimento) y la ceacutelula animal no losposee por lo tanto no puede realizar el proceso de fotosiacutentesis (heteroacutetrofos)

3- Una vacuola uacutenica llena de liacutequido que ocupa casi todo el interior de laceacutelula vegetal en cambio la ceacutelula animal tiene varias vacuolas y son maacutespequentildeas

4- Las ceacutelulas vegetales pueden reproducirse mediante un proceso que da porresultado ceacutelulas iguales a las progenitoras este tipo de reproduccioacuten se llamareproduccioacuten asexual

5-Las ceacutelulas animales pueden realizar un tipo de reproduccioacuten llamadoreproduccioacuten sexual en el cual los descendientes presentan caracteriacutesticas delos progenitores pero no son ideacutenticos a eacutel (Alberts et al 1999)

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Fig 1 Ceacutelula de Elodea con colorante de acetocarmiacuten

Fig 2 Ceacutelula de epitelio bucal con azul de metileno

MATERIALCristaleriacuteaMicroscopio compuestoPorta y cubreobjetosPipetas PasteurCajas petriBisturiacute

Reactivos y muestrasBotella de agua purificadaAzul de metilenoAcetocarmiacutenVerde raacutepidoLugolCebolla blancaMuestra de frotis de mucosa bucal

PROCEDIMIENTO 11- De la epidermis de la cebolla realice cuatro preparacionestemporales con diferentes colorantes como se indica a continuacioacutenColorante Especie vegetal Estructura tentildeida por

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el coloranteAzul de metileno Allium cepa Pared celular (lignina)

Acetocarmiacuten Allium cepa Nuacutecleo(cromosomas)

Verde raacutepido Allium cepa Pared celular(celulosa)

Lugol Allium cepa Pareacutenquima dereserva (almidoacuten)

2- Observe al microscopio a 10X y 40X y esquematice

PROCEDIMIENTO 23- Tome un trago de agua purificada y realice buches para enjuagarsela boca4- Tome una muestra del epitelio de la mejilla con un portaobjetoslimpio y realice una impronta de su mejilla interna tintildea con azul demetileno y observe al microscopio a 10X y 40X

RESULTADOS

1- Esquematice todas las ceacutelulas vegetales y animales observadassentildealando sus estructuras y aumento al que fue observada dichaestructura2- Mencione las caracteriacutesticas de las ceacutelulas vegetales y animales3- iquestQueacute hace que a las ceacutelulas vegetales y animales se les considereceacutelulas eucariotas

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SESIOacuteN 8ORGANISMOS PLURICELULARES CARENTES DE TEJIDO

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir la organizacioacuten celular en organismosque no forman un verdadero tejido

INTRODUCCIOacuteN

Un organismo pluricelular es aqueacutel que estaacute constituido por maacutes de unaceacutelula las cuales estaacuten diferenciadas Los organismos pluricelulares sonagregados celulares con divisioacuten de trabajo entre ceacutelulas Poseen un TALOcuerpo vegetativo multicelular con especializacioacuten de ceacutelulas o grupos deceacutelulas (tejidos) pero NO diferenciado en un eje vascularizado hojas y raiacuteces yNO dispone de mecanismos de regulacioacuten de su contenido hiacutedrico(poiquilohiacutedricos) Se consideran taloacutefitos las algas verdes los hongosinferiores y los liacutequenes Los talos pueden formarse de dos maneras

Por yuxtaposicioacuten de ceacutelulas al principio libres (consorcios de agregacioacuten)

Por separacioacuten incompleta de las ceacutelulas hijas resultantes de la divisioacuten(pluricelulares auteacutenticos)

Tipos

Consorcios de agregacioacuten Se encuentran en algunas algas verdes comoPediastrum

Colonias celulares Ocupan un lugar intermedio entre los cenobios y consorciosde agregacioacuten y los talos con una divisioacuten incipiente del trabajo EjemploVolvox

Talos filamentosos Las ceacutelulas que forman los filamentos poseen tabiquescomunes con punteaduras

Algas Verdes (Clorofitas) Suelen ser unicelulares y se agrupan unidas pormuciacutelagos formando un cenobio Tambieacuten pueden ser multicelulares las cualesse agrupan formando filamentos acintados cenociacuteticos y septados en formade hojas talo Poseen pigmentos accesorios ficobilina xantofila carotenosTambieacuten poseen clorofila A B C D E y la combinacioacuten de estas dando comopor ejemplo A1 B2 E2 ETC todas poseen sustancias de reserva (almacenanla energiacutea producida por el desdoblamiento de algunos organelos (ATP)

27

el coloranteAzul de metileno Allium cepa Pared celular (lignina)

Acetocarmiacuten Allium cepa Nuacutecleo(cromosomas)

Verde raacutepido Allium cepa Pared celular(celulosa)

Lugol Allium cepa Pareacutenquima dereserva (almidoacuten)

2- Observe al microscopio a 10X y 40X y esquematice

PROCEDIMIENTO 23- Tome un trago de agua purificada y realice buches para enjuagarsela boca4- Tome una muestra del epitelio de la mejilla con un portaobjetoslimpio y realice una impronta de su mejilla interna tintildea con azul demetileno y observe al microscopio a 10X y 40X

RESULTADOS

1- Esquematice todas las ceacutelulas vegetales y animales observadassentildealando sus estructuras y aumento al que fue observada dichaestructura2- Mencione las caracteriacutesticas de las ceacutelulas vegetales y animales3- iquestQueacute hace que a las ceacutelulas vegetales y animales se les considereceacutelulas eucariotas

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SESIOacuteN 8ORGANISMOS PLURICELULARES CARENTES DE TEJIDO

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir la organizacioacuten celular en organismosque no forman un verdadero tejido

INTRODUCCIOacuteN

Un organismo pluricelular es aqueacutel que estaacute constituido por maacutes de unaceacutelula las cuales estaacuten diferenciadas Los organismos pluricelulares sonagregados celulares con divisioacuten de trabajo entre ceacutelulas Poseen un TALOcuerpo vegetativo multicelular con especializacioacuten de ceacutelulas o grupos deceacutelulas (tejidos) pero NO diferenciado en un eje vascularizado hojas y raiacuteces yNO dispone de mecanismos de regulacioacuten de su contenido hiacutedrico(poiquilohiacutedricos) Se consideran taloacutefitos las algas verdes los hongosinferiores y los liacutequenes Los talos pueden formarse de dos maneras

Por yuxtaposicioacuten de ceacutelulas al principio libres (consorcios de agregacioacuten)

Por separacioacuten incompleta de las ceacutelulas hijas resultantes de la divisioacuten(pluricelulares auteacutenticos)

Tipos

Consorcios de agregacioacuten Se encuentran en algunas algas verdes comoPediastrum

Colonias celulares Ocupan un lugar intermedio entre los cenobios y consorciosde agregacioacuten y los talos con una divisioacuten incipiente del trabajo EjemploVolvox

Talos filamentosos Las ceacutelulas que forman los filamentos poseen tabiquescomunes con punteaduras

Algas Verdes (Clorofitas) Suelen ser unicelulares y se agrupan unidas pormuciacutelagos formando un cenobio Tambieacuten pueden ser multicelulares las cualesse agrupan formando filamentos acintados cenociacuteticos y septados en formade hojas talo Poseen pigmentos accesorios ficobilina xantofila carotenosTambieacuten poseen clorofila A B C D E y la combinacioacuten de estas dando comopor ejemplo A1 B2 E2 ETC todas poseen sustancias de reserva (almacenanla energiacutea producida por el desdoblamiento de algunos organelos (ATP)

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SESIOacuteN 8ORGANISMOS PLURICELULARES CARENTES DE TEJIDO

OBJETIVOEl alumno seraacute capaz de distinguir la organizacioacuten celular en organismosque no forman un verdadero tejido

INTRODUCCIOacuteN

Un organismo pluricelular es aqueacutel que estaacute constituido por maacutes de unaceacutelula las cuales estaacuten diferenciadas Los organismos pluricelulares sonagregados celulares con divisioacuten de trabajo entre ceacutelulas Poseen un TALOcuerpo vegetativo multicelular con especializacioacuten de ceacutelulas o grupos deceacutelulas (tejidos) pero NO diferenciado en un eje vascularizado hojas y raiacuteces yNO dispone de mecanismos de regulacioacuten de su contenido hiacutedrico(poiquilohiacutedricos) Se consideran taloacutefitos las algas verdes los hongosinferiores y los liacutequenes Los talos pueden formarse de dos maneras

Por yuxtaposicioacuten de ceacutelulas al principio libres (consorcios de agregacioacuten)

Por separacioacuten incompleta de las ceacutelulas hijas resultantes de la divisioacuten(pluricelulares auteacutenticos)

Tipos

Consorcios de agregacioacuten Se encuentran en algunas algas verdes comoPediastrum

Colonias celulares Ocupan un lugar intermedio entre los cenobios y consorciosde agregacioacuten y los talos con una divisioacuten incipiente del trabajo EjemploVolvox

Talos filamentosos Las ceacutelulas que forman los filamentos poseen tabiquescomunes con punteaduras

Algas Verdes (Clorofitas) Suelen ser unicelulares y se agrupan unidas pormuciacutelagos formando un cenobio Tambieacuten pueden ser multicelulares las cualesse agrupan formando filamentos acintados cenociacuteticos y septados en formade hojas talo Poseen pigmentos accesorios ficobilina xantofila carotenosTambieacuten poseen clorofila A B C D E y la combinacioacuten de estas dando comopor ejemplo A1 B2 E2 ETC todas poseen sustancias de reserva (almacenanla energiacutea producida por el desdoblamiento de algunos organelos (ATP)

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Hongos Los hongos son organismos eucariontes con uno o maacutes nuacutecleos encada ceacutelula con pared celular con quitina o celulosa no presentan tejidoverdadero sino hifas ceacutelulas alargadas que componen al micelio queconstituyen al talo cuerpo del hongo carecen de clorofila reservan glucoacutegenoy carecen de clorofila su reproduccioacuten es sexual o asexual por fisioacuten binariafragmentacioacuten o esporulacioacuten

MATERIAL

Cristaleriacutea y equiposMicroscopio compuestoPorta y cubreobjetosPipetas PasteurCajas petriAgujas de diseccioacutenAsas de siembra

Reactivos y muestrasAzul de metilenoAzul de algodoacutenMuestras de agua de estanque quecontenga algas coloniales yfilamentosasMuestra de tortilla o pan conhongos

PROCEDIMIENTO1- Coloque en un portaobjetos una gota de la muestra de agua tintildea con azulde metileno e identifique algas de tipo colonial2- De la muestra de agua ponga una gota en la cual incluya filamentosformados por las algas tintildea con azul de metileno y observe otro tipo decolonias3- Coloque una gota de agua en un portaobjetos y con una aguja de diseccioacutencoloque una pequentildea muestra de los hongos presentes en el pan o tortilla tintildeacon azul de algodoacuten y observe al microscopio e identifique que tipos de hifaspresento su muestra

RESULTADOS1- Realice esquemas de todos los organismos observados y sus estructuras2- iquestQueacute tipo de ceacutelulas fueron las que se observaron en las muestras(procariota o eucariota) iquestPor queacute3- iquestCuaacuteles de los organismos presentaron clorofila4- iquestCuaacutentos y cuaacuteles de los agregados celulares o pseudotejidos observoacute

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IV Bibliografiacutea

1 Alberts B Bray D Johnson Lewis J Raff M Roberts K y Walters P1999 Introduccioacuten a la biologiacutea celular Editorial Omega Barcelona

2 Avers C 1991 Biologiacutea celular Interamericana Meacutexico3 CNEB 1970 Investigaciones de laboratorio y de campo CECSA Meacutexico

DF4 Corteacutes F 1980 Histologiacutea vegetal baacutesica H Blume Madrid5 Esau F 1976 Anatomiacutea vegetal Ed Omega Barcelona Espantildea6 Gavintildeo TG y C Juaacuterez 2004 Teacutecnicas bioloacutegicas de laboratorio y de

campo Limusa Meacutexico DF7 Geneser F 2000 Histologiacutea sobre bases moleculares Meacutedica-

Panamericana Meacutexico8 Karp G 1998 Biologiacutea Celular McGraw-Hill-interamericana Meacutexico

DF9 Leeson C R y T Leeson 1988 Atlas de Histologiacutea Interamericana

Meacutexico DF10Peacuterez Chirinos IG 2007 Praacutecticas de Laboratorio de Biologiacutea y Geologiacutea11Paniagua R Nistal M Sesma P Aacutelvarez-Uriacutea M Fraile B 2002

Citologiacutea e Histologiacutea Vegetal y Animal Biologiacutea de las Ceacutelulas y tejidosAnimales y Vegetales 3a ed InteramericanaMcGrawHill Madrid

31

ANEXO 1

Formato del reporte de la praacutectica

El reporte deberaacute incluirPortada nombre de la institucioacuten nombre de la dependencia nombre de lalicenciatura o ingenieriacutea nuacutemero de praacutectica nombre de los autores delreporte nombre del profesor a cargo de la materia fecha y lugar deelaboracioacutenIntroduccioacuten redaccioacuten sinteacutetica de la informacioacuten documental baacutesicarequerida como elemento de apoyo para interpretar los resultados Nota nodebe ser la misma del protocolo de la praacutecticaObjetivo Este si es igual al del protocolo de la praacutecticaMaterial Descripcioacuten de los materiales y equipos que se utilizaron durante larealizacioacuten de la praacutectica pueden variar al en cuanto al listado original delprotocoloProcedimiento Descripcioacuten de los procedimientos que se siguieron para lograrlos resultados puede ser el mismo del protocolo o podriacutea variar en algunoscasos pero se debe de reportar en tercera persona y en tiempo pasado(Ejemplo Tomar una escama de pez y limpiarla con agua queda como Setomoacute una escama de pez y se limpioacute con agua)Resultados presentacioacuten descriptiva graacutefica yo esquemaacutetica de los hallazgosobtenidos durante la realizacioacuten de la praacutectica ademaacutes del ejercicio ycuestionario contenidos en el protocolo de la praacutecticaDiscusioacuten interpretacioacuten y argumentos de los resultados obtenidosfundamentados en la introduccioacuten citando todas las fuente de informacioacutenocupadas en este apartadoConclusioacuten siacutentesis de resultados fundamentadosBibliografiacuteaEscribir las referencias en orden alfabeacutetico de acuerdo con el apellido del autoro los autores y despueacutes por antildeo Utilizar sangriacutea francesa de 125 cm Noabreviar el nombre de las publicaciones Las formas de citar son las siguientes

Revistas o Publicaciones perioacutedicasSardagrave-Palomera F M Puigcerver L Brotons y JD Rodriacuteguez-Teijeiro 2012

Modelling seasonal changes in the distribution of Common QuailCoturnix coturnix in farmland landscapes using remote sensing Ibis154703-713

LibrosAOU (American Ornithologistsrsquo Union) 1998 Check-list of North American

birds 7a ed American Ornithologistsrsquo Union Washington DC EUA

32

Arizmendi M del C y L Maacuterquez Valdelamar (eds) 2000 Aacutereas deimportancia para la conservacioacuten de aves en Meacutexico FMCN CONABIOCCA CIPAMEX Meacutexico DF

Stattersfield AJ MJ Crosby AJ Long y DC Wege 1998 Endemic birdareas of the world Priorities for biodiversity conservation BirdLifeConservation Series No 7 Birdlife International Cambridge Reino Unido

Capiacutetulos de libroNavarro S AG y LA Saacutenchez-Gonzaacutelez 2003 La diversidad de las aves Pp

24-85 In H Goacutemez de Silva y A Oliveras de Ita (eds) Conservacioacuten deaves Experiencias en Meacutexico CIPAMEX NFWF CONABIO Meacutexico DF

Snow DW 2001 Family Momotidae (motmots) Pp 264-285 In J del HoyoA Elliot y J Sargatal (eds) Handbook of the birds of the world Vol 6mousebirds to hornbills Lynx Edicions Barcelona Espantildea

TesisBravo-Cadena J 2008 Seleccioacuten de aacutereas prioritarias para la conservacioacuten de

aves en Hidalgo Meacutexico Tesis de licenciatura Universidad Autoacutenomadel Estado de Hidalgo Pachuca Hidalgo Meacutexico

Fraga RM 1986 The Bay-winged Cowbird (Molothrus badius) and its broodparasites interactions coevolution and comparative efficiency Tesis dedoctorado University of California Santa Barbara California EUA

Publicaciones gubernamentalesSEMARNAT (Secretariacutea de Medio Ambiente y Recursos Naturales) 2010

Norma Oficial Mexicana NOM-059-SEMARNAT-2010 ProteccioacutenAmbiental ndash Especies nativas de Meacutexico de flora y fauna silvestres ndashCategoriacuteas de riesgo y especificaciones para su inclusioacuten exclusioacuten ocambio ndash lista de especies en riesgo Diario Oficial de la Federacioacuten 30de diciembre de 2010 Segunda Seccioacuten Meacutexico DF

InternetCitar las fuentes de Internet soacutelo si son relevantes y razonablemente

permanentes Incluir la fecha en la que se consultoacute el sitioGoacutemez de Silva H A Oliveras de Ita y RA Medelliacuten (en liacutenea) 2005

Myiopsitta monachus Vertebrados superiores exoacuteticos en Meacutexicodiversidad distribucioacuten y efectos potenciales Instituto de EcologiacuteaUniversidad Nacional Autoacutenoma de Meacutexico Bases de datosSNIBCONABIO Proyecto U020 Meacutexico DFltconabiogobmxinstitucionproyectosresultadosInfU020pdfgt(consultado 9 de febrero de 2012)

33

Ridgely RS TF Allnutt T Brooks DK McNicol DW Mehlman BE Young yJR Zook (en liacutenea) 2007 Digital distribution maps of the birds of theWestern Hemisphere versioacuten 30 NatureServe Arlington Virginia EUAltwwwnatureserveorggetDatabirdMapsjspgt (consultado 18 dediciembre de 2012)

• LIC CARLOS DURAacuteN PEacuteREZ
• USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MU
• SESIOacuteN 2
• MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

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IV Bibliografiacutea

1 Alberts B Bray D Johnson Lewis J Raff M Roberts K y Walters P1999 Introduccioacuten a la biologiacutea celular Editorial Omega Barcelona

2 Avers C 1991 Biologiacutea celular Interamericana Meacutexico3 CNEB 1970 Investigaciones de laboratorio y de campo CECSA Meacutexico

DF4 Corteacutes F 1980 Histologiacutea vegetal baacutesica H Blume Madrid5 Esau F 1976 Anatomiacutea vegetal Ed Omega Barcelona Espantildea6 Gavintildeo TG y C Juaacuterez 2004 Teacutecnicas bioloacutegicas de laboratorio y de

campo Limusa Meacutexico DF7 Geneser F 2000 Histologiacutea sobre bases moleculares Meacutedica-

Panamericana Meacutexico8 Karp G 1998 Biologiacutea Celular McGraw-Hill-interamericana Meacutexico

DF9 Leeson C R y T Leeson 1988 Atlas de Histologiacutea Interamericana

Meacutexico DF10Peacuterez Chirinos IG 2007 Praacutecticas de Laboratorio de Biologiacutea y Geologiacutea11Paniagua R Nistal M Sesma P Aacutelvarez-Uriacutea M Fraile B 2002

Citologiacutea e Histologiacutea Vegetal y Animal Biologiacutea de las Ceacutelulas y tejidosAnimales y Vegetales 3a ed InteramericanaMcGrawHill Madrid

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ANEXO 1

Formato del reporte de la praacutectica

El reporte deberaacute incluirPortada nombre de la institucioacuten nombre de la dependencia nombre de lalicenciatura o ingenieriacutea nuacutemero de praacutectica nombre de los autores delreporte nombre del profesor a cargo de la materia fecha y lugar deelaboracioacutenIntroduccioacuten redaccioacuten sinteacutetica de la informacioacuten documental baacutesicarequerida como elemento de apoyo para interpretar los resultados Nota nodebe ser la misma del protocolo de la praacutecticaObjetivo Este si es igual al del protocolo de la praacutecticaMaterial Descripcioacuten de los materiales y equipos que se utilizaron durante larealizacioacuten de la praacutectica pueden variar al en cuanto al listado original delprotocoloProcedimiento Descripcioacuten de los procedimientos que se siguieron para lograrlos resultados puede ser el mismo del protocolo o podriacutea variar en algunoscasos pero se debe de reportar en tercera persona y en tiempo pasado(Ejemplo Tomar una escama de pez y limpiarla con agua queda como Setomoacute una escama de pez y se limpioacute con agua)Resultados presentacioacuten descriptiva graacutefica yo esquemaacutetica de los hallazgosobtenidos durante la realizacioacuten de la praacutectica ademaacutes del ejercicio ycuestionario contenidos en el protocolo de la praacutecticaDiscusioacuten interpretacioacuten y argumentos de los resultados obtenidosfundamentados en la introduccioacuten citando todas las fuente de informacioacutenocupadas en este apartadoConclusioacuten siacutentesis de resultados fundamentadosBibliografiacuteaEscribir las referencias en orden alfabeacutetico de acuerdo con el apellido del autoro los autores y despueacutes por antildeo Utilizar sangriacutea francesa de 125 cm Noabreviar el nombre de las publicaciones Las formas de citar son las siguientes

Revistas o Publicaciones perioacutedicasSardagrave-Palomera F M Puigcerver L Brotons y JD Rodriacuteguez-Teijeiro 2012

Modelling seasonal changes in the distribution of Common QuailCoturnix coturnix in farmland landscapes using remote sensing Ibis154703-713

LibrosAOU (American Ornithologistsrsquo Union) 1998 Check-list of North American

birds 7a ed American Ornithologistsrsquo Union Washington DC EUA

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Arizmendi M del C y L Maacuterquez Valdelamar (eds) 2000 Aacutereas deimportancia para la conservacioacuten de aves en Meacutexico FMCN CONABIOCCA CIPAMEX Meacutexico DF

Stattersfield AJ MJ Crosby AJ Long y DC Wege 1998 Endemic birdareas of the world Priorities for biodiversity conservation BirdLifeConservation Series No 7 Birdlife International Cambridge Reino Unido

Capiacutetulos de libroNavarro S AG y LA Saacutenchez-Gonzaacutelez 2003 La diversidad de las aves Pp

24-85 In H Goacutemez de Silva y A Oliveras de Ita (eds) Conservacioacuten deaves Experiencias en Meacutexico CIPAMEX NFWF CONABIO Meacutexico DF

Snow DW 2001 Family Momotidae (motmots) Pp 264-285 In J del HoyoA Elliot y J Sargatal (eds) Handbook of the birds of the world Vol 6mousebirds to hornbills Lynx Edicions Barcelona Espantildea

TesisBravo-Cadena J 2008 Seleccioacuten de aacutereas prioritarias para la conservacioacuten de

aves en Hidalgo Meacutexico Tesis de licenciatura Universidad Autoacutenomadel Estado de Hidalgo Pachuca Hidalgo Meacutexico

Fraga RM 1986 The Bay-winged Cowbird (Molothrus badius) and its broodparasites interactions coevolution and comparative efficiency Tesis dedoctorado University of California Santa Barbara California EUA

Publicaciones gubernamentalesSEMARNAT (Secretariacutea de Medio Ambiente y Recursos Naturales) 2010

Norma Oficial Mexicana NOM-059-SEMARNAT-2010 ProteccioacutenAmbiental ndash Especies nativas de Meacutexico de flora y fauna silvestres ndashCategoriacuteas de riesgo y especificaciones para su inclusioacuten exclusioacuten ocambio ndash lista de especies en riesgo Diario Oficial de la Federacioacuten 30de diciembre de 2010 Segunda Seccioacuten Meacutexico DF

InternetCitar las fuentes de Internet soacutelo si son relevantes y razonablemente

permanentes Incluir la fecha en la que se consultoacute el sitioGoacutemez de Silva H A Oliveras de Ita y RA Medelliacuten (en liacutenea) 2005

Myiopsitta monachus Vertebrados superiores exoacuteticos en Meacutexicodiversidad distribucioacuten y efectos potenciales Instituto de EcologiacuteaUniversidad Nacional Autoacutenoma de Meacutexico Bases de datosSNIBCONABIO Proyecto U020 Meacutexico DFltconabiogobmxinstitucionproyectosresultadosInfU020pdfgt(consultado 9 de febrero de 2012)

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Ridgely RS TF Allnutt T Brooks DK McNicol DW Mehlman BE Young yJR Zook (en liacutenea) 2007 Digital distribution maps of the birds of theWestern Hemisphere versioacuten 30 NatureServe Arlington Virginia EUAltwwwnatureserveorggetDatabirdMapsjspgt (consultado 18 dediciembre de 2012)

• LIC CARLOS DURAacuteN PEacuteREZ
• USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MU
• SESIOacuteN 2
• MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

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ANEXO 1

Formato del reporte de la praacutectica

El reporte deberaacute incluirPortada nombre de la institucioacuten nombre de la dependencia nombre de lalicenciatura o ingenieriacutea nuacutemero de praacutectica nombre de los autores delreporte nombre del profesor a cargo de la materia fecha y lugar deelaboracioacutenIntroduccioacuten redaccioacuten sinteacutetica de la informacioacuten documental baacutesicarequerida como elemento de apoyo para interpretar los resultados Nota nodebe ser la misma del protocolo de la praacutecticaObjetivo Este si es igual al del protocolo de la praacutecticaMaterial Descripcioacuten de los materiales y equipos que se utilizaron durante larealizacioacuten de la praacutectica pueden variar al en cuanto al listado original delprotocoloProcedimiento Descripcioacuten de los procedimientos que se siguieron para lograrlos resultados puede ser el mismo del protocolo o podriacutea variar en algunoscasos pero se debe de reportar en tercera persona y en tiempo pasado(Ejemplo Tomar una escama de pez y limpiarla con agua queda como Setomoacute una escama de pez y se limpioacute con agua)Resultados presentacioacuten descriptiva graacutefica yo esquemaacutetica de los hallazgosobtenidos durante la realizacioacuten de la praacutectica ademaacutes del ejercicio ycuestionario contenidos en el protocolo de la praacutecticaDiscusioacuten interpretacioacuten y argumentos de los resultados obtenidosfundamentados en la introduccioacuten citando todas las fuente de informacioacutenocupadas en este apartadoConclusioacuten siacutentesis de resultados fundamentadosBibliografiacuteaEscribir las referencias en orden alfabeacutetico de acuerdo con el apellido del autoro los autores y despueacutes por antildeo Utilizar sangriacutea francesa de 125 cm Noabreviar el nombre de las publicaciones Las formas de citar son las siguientes

Revistas o Publicaciones perioacutedicasSardagrave-Palomera F M Puigcerver L Brotons y JD Rodriacuteguez-Teijeiro 2012

Modelling seasonal changes in the distribution of Common QuailCoturnix coturnix in farmland landscapes using remote sensing Ibis154703-713

LibrosAOU (American Ornithologistsrsquo Union) 1998 Check-list of North American

birds 7a ed American Ornithologistsrsquo Union Washington DC EUA

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Arizmendi M del C y L Maacuterquez Valdelamar (eds) 2000 Aacutereas deimportancia para la conservacioacuten de aves en Meacutexico FMCN CONABIOCCA CIPAMEX Meacutexico DF

Stattersfield AJ MJ Crosby AJ Long y DC Wege 1998 Endemic birdareas of the world Priorities for biodiversity conservation BirdLifeConservation Series No 7 Birdlife International Cambridge Reino Unido

Capiacutetulos de libroNavarro S AG y LA Saacutenchez-Gonzaacutelez 2003 La diversidad de las aves Pp

24-85 In H Goacutemez de Silva y A Oliveras de Ita (eds) Conservacioacuten deaves Experiencias en Meacutexico CIPAMEX NFWF CONABIO Meacutexico DF

Snow DW 2001 Family Momotidae (motmots) Pp 264-285 In J del HoyoA Elliot y J Sargatal (eds) Handbook of the birds of the world Vol 6mousebirds to hornbills Lynx Edicions Barcelona Espantildea

TesisBravo-Cadena J 2008 Seleccioacuten de aacutereas prioritarias para la conservacioacuten de

aves en Hidalgo Meacutexico Tesis de licenciatura Universidad Autoacutenomadel Estado de Hidalgo Pachuca Hidalgo Meacutexico

Fraga RM 1986 The Bay-winged Cowbird (Molothrus badius) and its broodparasites interactions coevolution and comparative efficiency Tesis dedoctorado University of California Santa Barbara California EUA

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Norma Oficial Mexicana NOM-059-SEMARNAT-2010 ProteccioacutenAmbiental ndash Especies nativas de Meacutexico de flora y fauna silvestres ndashCategoriacuteas de riesgo y especificaciones para su inclusioacuten exclusioacuten ocambio ndash lista de especies en riesgo Diario Oficial de la Federacioacuten 30de diciembre de 2010 Segunda Seccioacuten Meacutexico DF

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Myiopsitta monachus Vertebrados superiores exoacuteticos en Meacutexicodiversidad distribucioacuten y efectos potenciales Instituto de EcologiacuteaUniversidad Nacional Autoacutenoma de Meacutexico Bases de datosSNIBCONABIO Proyecto U020 Meacutexico DFltconabiogobmxinstitucionproyectosresultadosInfU020pdfgt(consultado 9 de febrero de 2012)

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Ridgely RS TF Allnutt T Brooks DK McNicol DW Mehlman BE Young yJR Zook (en liacutenea) 2007 Digital distribution maps of the birds of theWestern Hemisphere versioacuten 30 NatureServe Arlington Virginia EUAltwwwnatureserveorggetDatabirdMapsjspgt (consultado 18 dediciembre de 2012)

• LIC CARLOS DURAacuteN PEacuteREZ
• USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MU
• SESIOacuteN 2
• MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

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Arizmendi M del C y L Maacuterquez Valdelamar (eds) 2000 Aacutereas deimportancia para la conservacioacuten de aves en Meacutexico FMCN CONABIOCCA CIPAMEX Meacutexico DF

Stattersfield AJ MJ Crosby AJ Long y DC Wege 1998 Endemic birdareas of the world Priorities for biodiversity conservation BirdLifeConservation Series No 7 Birdlife International Cambridge Reino Unido

Capiacutetulos de libroNavarro S AG y LA Saacutenchez-Gonzaacutelez 2003 La diversidad de las aves Pp

24-85 In H Goacutemez de Silva y A Oliveras de Ita (eds) Conservacioacuten deaves Experiencias en Meacutexico CIPAMEX NFWF CONABIO Meacutexico DF

Snow DW 2001 Family Momotidae (motmots) Pp 264-285 In J del HoyoA Elliot y J Sargatal (eds) Handbook of the birds of the world Vol 6mousebirds to hornbills Lynx Edicions Barcelona Espantildea

TesisBravo-Cadena J 2008 Seleccioacuten de aacutereas prioritarias para la conservacioacuten de

aves en Hidalgo Meacutexico Tesis de licenciatura Universidad Autoacutenomadel Estado de Hidalgo Pachuca Hidalgo Meacutexico

Fraga RM 1986 The Bay-winged Cowbird (Molothrus badius) and its broodparasites interactions coevolution and comparative efficiency Tesis dedoctorado University of California Santa Barbara California EUA

Publicaciones gubernamentalesSEMARNAT (Secretariacutea de Medio Ambiente y Recursos Naturales) 2010

Norma Oficial Mexicana NOM-059-SEMARNAT-2010 ProteccioacutenAmbiental ndash Especies nativas de Meacutexico de flora y fauna silvestres ndashCategoriacuteas de riesgo y especificaciones para su inclusioacuten exclusioacuten ocambio ndash lista de especies en riesgo Diario Oficial de la Federacioacuten 30de diciembre de 2010 Segunda Seccioacuten Meacutexico DF

InternetCitar las fuentes de Internet soacutelo si son relevantes y razonablemente

permanentes Incluir la fecha en la que se consultoacute el sitioGoacutemez de Silva H A Oliveras de Ita y RA Medelliacuten (en liacutenea) 2005

Myiopsitta monachus Vertebrados superiores exoacuteticos en Meacutexicodiversidad distribucioacuten y efectos potenciales Instituto de EcologiacuteaUniversidad Nacional Autoacutenoma de Meacutexico Bases de datosSNIBCONABIO Proyecto U020 Meacutexico DFltconabiogobmxinstitucionproyectosresultadosInfU020pdfgt(consultado 9 de febrero de 2012)

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Ridgely RS TF Allnutt T Brooks DK McNicol DW Mehlman BE Young yJR Zook (en liacutenea) 2007 Digital distribution maps of the birds of theWestern Hemisphere versioacuten 30 NatureServe Arlington Virginia EUAltwwwnatureserveorggetDatabirdMapsjspgt (consultado 18 dediciembre de 2012)

• LIC CARLOS DURAacuteN PEacuteREZ
• USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MU
• SESIOacuteN 2
• MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES

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Ridgely RS TF Allnutt T Brooks DK McNicol DW Mehlman BE Young yJR Zook (en liacutenea) 2007 Digital distribution maps of the birds of theWestern Hemisphere versioacuten 30 NatureServe Arlington Virginia EUAltwwwnatureserveorggetDatabirdMapsjspgt (consultado 18 dediciembre de 2012)

• LIC CARLOS DURAacuteN PEacuteREZ
• USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PARA EL ESTUDIO DE MU
• SESIOacuteN 2
• MODELOS DE SISTEMAS PRECELULARES