metarhizium anisopliae - cracksmodqu.edu.iq/repository/wp-content/uploads/2016/12/rida6.pdf ·...
TRANSCRIPT
1
اج انسى انبرجس ين انفطر حنانثهى ألانسرعة ظرف ان جحذذ *
Metarhizium anisopliae
ك.ؾل هػب ػ اثوا١ عب
و١خ ازوث١خ ؼ اظوفخ /عبؼخ ووثالء و١خ اؼ /عبؼخ امبك١خ
-اقالطخ :
ر اؾظي ػ اػ ازبط Metarhizium anisopliaeاجور١١ي افطو اظوف اض إلزبط اي٠ ػ١ذ
زز ػظزز١و ازززو زاززؾ اإزززؼبي ألززي٠ ث % زز 0.5اززلػ ثزز وظززله وززبهث % 0.05 زوو١ززيثىزز
72ثؼزل 5.5 مزلاه هلز ١زلهع١ اثززلا ػزل 16% ززؼامزبػ اؽغ وب وظله ب٠زوع١ اغ١الر١
. 30ثلهعخ ؽواهح كهح / كل١مخ 100وػخ هط ػل بؾبػخ اياىح اؾؼ ثبػخ
، ػظ١و ازو M.anisopliaeاي٠ اجور١١ي ، افطو -اىبد افزبؽ١خ :
-املخ:
و خ ف امبخ اغوص١خؼ ا افطو٠بد از Ascomycota شؼجخ ٠M.anisopliaeؼل افطو
املهح ػ اطبثخ ػلك ، افطو٠بد ا٢خ غ١و اصخ ج١ئخ ٠ى ازؼب وجل٠ ج١لاد اى١١ب ١خ ثىفبءح
بع. ٠(1)فؼال ػ اطبثز مواك اؾ ػب خ ؽشو٠خ 50ع رؼك ا 200االفبد اؾشو٠خ رمله ث اغ
ي٠بد أل افواى فالي افزوالب بعاغلاه طؼ اقبهع ػ ؽو٠ك الخ جهار ؼب ف افطو
فؼال ػ افواى الزوو١ اف١وكو١ كاف اعب ض اجور١١ي اىب٠ز١ي اال٠ج١يازؾ اب
٠ز١ي ثبفواى ألي٠ اجور١١ي اوضو ثبل األي٠بد M.anisopliaeا افطو . (2) ؼب ف ؾلصب امز ف١ب
افغ١خ اظبػ١خ ، ٠ز١ي األف١و ثزػ ااغ ان عنة االزجب اؼب الزؼب ف قزف ازطج١مبد ((3
وظبػخ االغن٠خ اغك اظفبد اؼالعبد اظ١لال١خ اكاهح افب٠بد فؼال ػ و اكاح خ ف كهاخ
٠ؼل رؾل٠ل ( (4 ; 5% ج١ؼبد اق اؼب الي٠بد اظبػ١خ 65-60ازوو١ت اجور١ نه اطجؼ ٠ض
اظوف اض اىب بد اغو٠خ االه ماد اال١خ اجبغخ طي ا افؼ ن االؽ١بء ثبزب
الظ ازبع١خ ألي٠بد ظوا ال١زب ف اؾفبظ ػ ازاى ث١ قزف ىبد اؾ ازم١ و١خ
ثلف كهاخ اظب األي٠ فطو رؼ اجؾش رؾل٠ل .(6)خ ازقو٠خ اىبد غ١و ازقلخ ف ب٠خ اؼ١
اظوف اض الزبط اي٠ اجور١١ي ازظ لج ان ٠ض ػب اؼواح ف١ .
*اجؾش ز اؽوؽخ كوزها جبؽش اضب
2
-ااك ؽوا ك اؼ :
رؾؼ١و ػظ١و ازو - اظله اىبهث : -أ :اظله اىبهث روو١ي -1
، M.anisopliaeازقل ػظ١و ازو ايل وظله وزبهث فز زؾ اززبط ازي٠ اجور١١زي ز افطزو
غزز زز رززو 250زز زز اززبء اغزز ازز 500( ام اػزز١ف 7ؽؼززو اؼظزز١و فززك اطو٠مززخ اطززفخ زز لجزز )
زبػخ ؾظزي ػز اؼظز١و صز هشزؼ ثبززقلا لزب از 24ايل اياي ا األلبع رزون زلح
كلزب ك ؾظزي ػز اواشزؼ ثشزى ها زك. صز ففزف 10كهح/كل١مزخ زلح 5000اػمجب ػ١خ جن ووي ثزوػخ
اقزيخ .اؼظ١و ازؾظ ػ١ ا اجخ اطثخ اىو٠بد
رمل٠و اىو٠بد اقزيخ -1
اػزززبكا ػزز اؾزز ام١بزز (8) لززلهد اززىو٠بد اقزيززخ فزز ززؾ ػظزز١و ازززو ثطو٠مززخ
ىوى وىو قزيي .
ػ اؾ ام١ب ىوى -2
اؾب١ ازؼخ -
غزز زز 0.1ي ثؤماثززخ ( ؽؼززو ززنا اؾزز mg / ml 1ؾززي اىوززى اقززي٠ ) -( 1ؾززي هلزز )
ثببء امطو . 100اىوى ف و١خ ابء امطو ثؼل ارب ػ١خ األماثخ او اؾغ ا
صززززززززززززززززب ١زززززززززززززززززو ؽززززززززززززززززبغ ابزززززززززززززززز١١ه 3,5ؾززززززززززززززززي -( 2ؾززززززززززززززززي هلزززززززززززززززز )
3,5 Dinitrosalicylic acid , DNSA ) )
20 ابء امطو ثؼل ارب ػ١زخ األماثزخ اػز١ف 50غ ابكح ف 1ؽؼو نا اؾي ثؤماثخ
) غز ز رورزواد اظزك٠ اجربز١ 30زو( صز اػز١ف 2 ١لهو١ل اظزك٠ )
CuH4KNaO6.4H2O مطو . ثببء ا 100( ثؼل ارب األماثخ او اؾغ ا
-ر ػ اؾ ام١ب ىوى ثؾت اقطاد ازب١خ :
0.9، 0.7، 0.5، 0.3، 0.1ففف ؾي اىوى ام١ب ثببء امطزو ؾظزي ػز ازواو١زي ) -1
-( غ / ثؾت اغلي االر : 1.0
رقى األنببةحدى يحهل انكهكز
انخسن )يم(
حدى اناء انقطر
يم() كة انكهكز )يهغى /يم (
1 0.0 1.0 0.0
2 0.1 0.9 0.1
3 0.3 0.7 0.3
4 0.5 0.5 0.5
5 0.7 0.3 0.7
6 0.9 0.1 0.9
7 1.0 0.0 1.0
ثزوكد 3- كلزب ك. 5( ىز أجثزخ ػزؼذ فز ؽزب زب غز زلح 2ز ز وبشزف ؾزي هلز ) 1أػز١ف -2
األبث١ت ف ؽب ب صغ ثؼل ازبء لح اغ١ب جبشوح .
رذ لواءح األزظبص فز عزبى اط١زبف اؼز ػز 5- بء مطو ى أجثخ ر هعب ع١لا . 5أػ١ف 4-
. (Blank)ب١زو ازؼ األجة األي ف رظف١و اغبى 540ؽي ع
ززب١زو و١ززخ 540ازؾظزز اؾزز ام١بزز ثوزز اؼاللززخ اج١ب١ززخ ثزز١ األزظززبص ػزز اطززي اززع
( .1اىوى)غ( وب ػؼ ف اشى )
3
ةكز )انسكرات انخحسنة( بطرق( : اننحنى انقاس نحقذر انكه 1انشكم )
(3,5 Dinitro salicylic acid,DNSA).
: زؾل٠ل ازوو١ي األض ػظ١و ازو ألزبط ازي٠ اجور١١زي ففزف ػظز١و اززو جركس انصذر انكاربن –ب
ػز ( % فؼزال 0.7، 0.5، 0.3، 0.1، 0.05، ١0.01ؼطز رواو١زي زلهعزخ ز ازىو٠بد اقزيزخ )
اؼبخ اقب١خ اؼظ١و. ر رلػ١ اؼظ١و ثجؼغ اغن٠بد از اشزذ ػز فزفبد اجربز١ ا١لهع١١زخ
% صز ػزلي ازول ا١زلهع١ 0.25% وه٠زل اظزك٠ ثزجخ 0.05% وجو٠زبد اغ١ز١ ثزجخ 0.1ثجخ
% 6 ى روو١ي ػم ثبؤطلح ، ص مؼ ثؾغ مزبػ مزلاه ثبؼظ١و ف 100ثؼلب او اؾغ ا 6.5ا
72كهح /كل١مزخ زلح 150 ثزوػخ هط ˚ 28 ؽغ اؾ ؽؼ فز اؾبػزخ ازياىح ػز كهعزخ ؽزواهح
بػخ ثؼلب فظذ اىزخ اؾ٠١خ ػ هاشؼ ايهػخ اؾب ػ االي٠ مه ؾظي ػ االي٠ ثشزى ها زك
.
ر أفز١به زخ ظبكه ١زوع١١زخ ز نع انصذر اننحرخن : -أ جأثر نع انصذر اننحرخن جركسه : -2
)وجو٠زبد األ١ وه٠ل األ١ زواد اظزك٠ ا١ه٠زب اىزبىا ١ اغ١الرز١( ؽ١زش أم٠جزذ زن ازاك
% كػ ثبغن٠بد اشبه ا١زب زبثمب ػمز 0.05ف ؾ ػظ١و ازو اؾب ػ اىو٠بد اقزيخ %1ثجخ
اؾ ص مؼ ثجهاد افطو ر اؾؼ رؾذ اظوف ابثمخ طزفب مزه زؾل٠زل اظزله ا١زوع١ز االضز
. الزبط اي٠ اجور١١ي
% ( 4، 3، 2، 1، 0.5، 0.25 واو١ززي زلهعززخ زز اغ١الرزز١ )أزززقلذ ر انصززذر اننحرخنزز : جركززس -ب
غوع رؾل٠ل ازوو١ي األض ظله ا١زوع١ اززؼ رزذ اماثززب فز زؾ اإلززبط اطزف فز افمزوح
ابثمخ .
اغ١الرز١ زو ػظز١و از كه رزؤص١و كهعزخ اؾزواهح ثؾؼز زؾ اإلززبط اؾزب ػز جأثر درخة انحزرار : - 3
. 35 30 25 ػ كهعبد ؽواهح ) M.anisopliaeامؼ ثبفطو % 0.5ثجخ )
زلح M.anisopliae ؽؼ ؾ ازبط أزي٠ اجور١١زي اطزف زبثمب امزؼ ثزبفطو جأثر سرعة انرج : - 4
50بػخ ف ؽبػز١ اؽلاب بوخ أ وػخ اوط طفو األفو ياىح ثؤزقلا وع هط قزفخ ) 72
( كهح / كل١مخ .150 100
(% مبػ 20 16 12 8 4ثؾغ مبػ ملاهب )اجور١١ي مؼ ؾ ازبط اي٠: جأثر حدى انهقاذ - 5
مه زؾل٠ل ؽغ امبػ األض إلزبط اإلي٠ . M.anisopliae افطو
5.5 5.0 4.5ػزللي ازول ا١زلهع١ زؾ اززبط اإلزي٠ از ) جأثر انرقى انيزذرخن اببحزذا : - 6
(HCl) ؽزبغ ا١زلهوه٠ه (NaOH)و ١لهوز١ل اظزك٠ 0.2( ثبزقلا 7.5 7.0 6.5 6.0
كهح 100زبػخ ثزوػخ هط 72 لح 30 ؽؼ ثلهعخ ؽواهح 16% مؼ اؾ اإلزبع ثؾغ مبػ ملاه
/ كل١مخ .
4
16%ؼوفخ رؤص١و لح اؾؼ مزؼ زؾ اإلززبط اطزف ثزبفموا د ازبثمخ ثزجخ مزبػ جأثر يذ انحضن : - 7
مزه ١٠زب ؽزاي زلح اؾؼز اجور١١زي ز افطزو ل١زل اجؾزش بػخ رذ زبثؼخ اززبط ازي٠ 168لح ؽؼ
بػخ زمل٠و افؼب١خ اإلي١٠خ اجور١ ل١ب اول ا١لهع١ ؾ اإلزبط . 24ثؾت ىوه٠ و
جأثر نع ابيالذ انعذنة: -أ جأثر نع األيالذ انعذنة جركسىا : - 8
اغ١١ اب ١خ ففبد اجرب١ صب ١خ ا١لهع١ وه٠ل اظك٠ ) اعكح أطزال كه رؤص١و وجو٠زبد
، ؽ١ش ؽؼو ازؾ ثعزك وجو٠ززبد اغ١ز١ ػ ازا( 0.125 0.05 0.025ف ؾ اإلزبط ثبزواو١ي
ثؼزل عكزب ثعزك وه٠زل اظزك٠ اب ١خ ثؼل عكب ثعزك فزفبد اجربز١ صب ١زخ ا١زلهع١
ثؼل عك اػبفخ ا اؼبالد اؾب٠خ ػز وزال اؾز١ غ١زبة اضبزش اػزبفخ از اؼبزخ اؾب٠زخ ػز وز
األالػ رووذ اؽل اؼبالد ثل اػبفخ أالػ ؼل١خ غوع امبهخ ، ؽؼ اؾ اإلزبع ف اؾبػخ
بػخ. 72اياىح لح
، 0.5، 0.25، 0.1، 0.05ززذ رواو١ززي زز وه٠ززل اظززك٠ زز) كهززذ جركززس ابيززالذ انعذنززة : -ب
زبػخ 72 زلح 30 ؽؼز ثلهعزخ ؽزواهح 16% مزؼ ازؾ اإلززبع ثؾغز مزبػ مزلاه (% 1 0.75
. الزبط اي٠ اجور١١ياالض كهح / كل١مخ مه زؾل٠ل روو١ي وه٠ل اظك٠ 100ثوػخ هط
اننحا ح انناقشة
أ أفؼز روو١زي ؼظز١و اززو إلززبط ازي٠ اجور١١زي ز ( (٠2جز١ اشزى جزأثر جركزس انصزذر انكزاربن : -1
ؽلح /غ ثور١ ، ف ػء ن ازب ظ ر ازقلا ػظ١و اززو ثزوو١زي 3.34% ام ثغذ افؼب١خ اػ١خ 0.05
ا زاعل اظله اىبهث فز زؾ ازغن٠زخ ا١زخ فز .اجؾش االؽمخ ع١ؼب رغبهة% إلزبط اإلي٠ ف 0.05
; (9ازبط االي٠بد مه أل١ز ف رؾو٠و اطبلخ ازز رؾزبعزب اىب زبد اغو٠زخ ز ازبعزب الي٠زبد
ا اجؾزش ػز (11)رواو١يزب فمزب الؽز١بعزبد اىب زبد اغو٠زخ . رزجب٠ اظزبكه اىبهث١زخ فز ااػزب 10)
ظبكه وبهث١خ عل٠لح هف١ظخ زافوح ف اج١ئخ ٠ؼل لفب اب١ب رمب ػ١ اجؾزس اؼ١زخ مزه الهرفزبع ازؼبه
ازؾظز ػ١ز ز Date syrup (DS)زنا رز افز١زبه ػظز١و اززو (12)ازىو٠بد ام١زخ اب٠زلهوبهثبد
ؼظزب زىو٠بد قزيزخ 74%صبه اظف ايل ان رؾز صزبه ػز زجخ ػب١زخ ز ازىو٠بد رظز از
( . ٠ؾزززز ػظززز١و اززززو فؼزززال ػززز ازززىو٠بد ػززز االؽزززبع ال١زززخ االؽزززبع اال١١زززخ اجور١زززبد 13)
ززنا ػززل (14)غ١زز١ اؾل٠ززل اجربزز١ اظززك٠ اؼززبك ضزز اىبزز١ ا Cاف١زب١ززبد ضزز ف١زززب١
ربذ كهابد 15;16) (خظلها ثل٠ال ىبهث اال٠بد اؼل١خ ٠ؾ اغن٠بد اىبف١خ االؽ١بء اغو٠
(17)خ ،ام ؽظز ػل٠لح ازبط اي٠ اجور١١ي االؽ١بء اغو٠خ ثؤزقلا ظبكه وبهث١خ قزفخ ثزواو١ي قزف
ز افطزو chymoelastase (Pr1) trypsin like protease(Pr2) ػ اػ ازبع١خ الي٠ اجور١١ي ثػ١ز
M.anisopliae 892 ػلب اػزبف از زؾ االززبط و١رىز ثؼزعCulex quinquefasciatus ثفؼب١زخ
( ؽلح/غ ثور١ ،ػ ازا، مبهخ غ و اؾ ازن اػز١ف ز و١رىز 0.308 0.365ػ١خ ثغذ )
0.211ام ثغززذ افؼب١ززخ اػ١ززخ الززي١٠ ) Aedes aegyptiاجؼززع stephensi Anophelesاجؼززع
ا اززقلا (18)ث١زذ زبػبد ز اؾؼز .8 ( ؽلح/غ ثور١ ػ اززا ثؼزل 0.244 0.154( )0.258
لل اػط اػز ازبع١زخ الزي٠ B. bassianinف ؾ االزبط فطو 1.5%ف١وح اقجي وظله وبهث ثجخ
ؽلح /غ ثور١ . 638.2اجور١١ي ام ثغذ افؼب١خ اػ١خ
.Mين انفطر ( : جأثر جركس انصذر انكاربن )عصر انحر( ف إنحاج إنسى انبرجس2انشكم )
anisopliae
5
ا١زوع١زز ز اظزلهاغ١الرزز١ أ ( 3 ) أظززود ززب ظ اشزىجزأثر نزع انصززذر اننحرخنز جركزسه : -2
األوفززؤ فزز ازززبط اإلززي٠ مبهززخ ثجززبل اظززبكه ا١زوع١١ززخ ازززقلخ ، ام ثغززذ افؼب١ززخ اػ١ززخ ؽززلب األلظزز
ثززور١ . فزز ؽزز١ ززغذ أؽززؤ فؼب١ززخ ػ١ززخ رززي٠ ثعززك وجو٠زززبد اال١زز ام ثغززذ ( ؽززلح / غزز5.714)
ظلها ١زوع١١ب إلزبط اي٠ اجور١١زي فز اغ١الر١ ازبكا ن ازب ظ ر افز١به،( ؽلح / غ ثور١ 2.378)
رغبهة اجؾش االؽمخ وبفخ .
anisopliae .M( : جأثر نع انصذر اننحرخن ف إنحاج إنسى انبرجس ين انفطر 3انشكم )
ثؼل أ ر رؾل٠ل اظله ا١زوع١ األض إلزبط اإلي٠ كهذ رواو١ي قزفخ اغ١الر١ زؾل٠ل ازوو١ي
ؽلح / غ ثور١ ػل ازقلا 4.739ا اػ فؼب١خ ػ١خ (4)٠زج١ ف اشى األض إلزبط اإلي٠ ،
افؼب١خ اػ١خ رله٠غ١ب ثي٠بكح روو١ي اظله ا١زوع١ ازؼ اغ١الر١، ف ؽ١ اقفؼذ % 0.5روو١ي
ثبءا ػ١ ،ؽلح / غ ثور١ 2.048% اغ١الر١ ام ثغذ 4 ػل ازوو١ي ف نا اجؾش ؽز طذ الب
٠ؼل اظله ا١زوع١ ازقل ف ؾ االزبط اؽل اؼا االب١خ ثبزغبهة االؽمخ . فمل أػزل نا ازوو١ي
، ثبجخ الي٠ اجور١١١ي(19)اؤصوح ف اقال٠ب اب٠ىوث١خ رؤص١و ؽبس ا ضجؾ ف ازبعب ألي٠بد
ػ اوغ ازؼبي (20)٠ؼل اظله ا١زوع١ ى اب عو ٠لف ف ثبء االؽبع اال١١خ
ػظ١و ازو ان ٠ؾ ػ اغن٠بد اىبف١خ االؽ١بء اغو٠خ اال ا ثؼغ الهابد ازغبهة اصجزذ ا
اغن ىب اغو ثؼا كاػخ وبظله اؾ غ١و غ ثبالؽبع اال١١خ ال١خ نا عت ري٠ل
، نا ر افز١به اغ١الر١ وظله زوع١ كاػ ؾ ر١خ (21)ازوع١ غوع رؾف١ي ازبع اك اال٠ؼ١خ
ثؼل ا اصجزذ وفبءر ف هفغ ز ازبط اي٠ اجور١١ي افطو ازقل ، ٠ؼل M.anisopliaeافطو
75%١ ظلها زوع١١ب ب ام ٠زؤف اؼل٠ل االؽبع اال١١خ اىو٠بد ام عل ػ االل اغ١الر
رظ١غ اغ١الر١ رورجؾ ثبشزك اال١ ظله ان ٠ؼل (Collagen)اىو٠بد الا١خ اعكح ف اىالع١
Hydroxylysine ثآطوح وال٠ى١ل٠خO-glycoside linkage ل ن اىو٠بد ب ىو اىوى ا
ثؼغ اجبؽض١ . ظلها وبهث١ب ع١لا ل نا ػل اغ١الر١ (22)رجم ا ؽل ب ورجطخ ثىبد ازوع١
M.anisopliae( : جأثر جركس اندالجن ف إنحاج إنسى انبرجس ين انفطر4انشكم )
ان ث١ ا اغ١الر١ االفؼ وؾ (23)ػ١ب فالي ن الهاخ الرزفك غ ز١غخ عل ا از١غخ ازؾظ
ك ا ٠ى به ازؾضبس الزبط ا افواى اي٠ M.anisopliaeىهػ ب ي٠بكح ازبط اىزخ اؾ٠١خ فطو
Serine endoprotease (Pr1) ان ٠زغ غبجب نا افطو غ١و افطو٠بد ضAschersonia aleyrodis
Verticillium lecanii B. bassiana ان ٠فوى ف اغبت اؼؼ اؼبغؾappressorium اصبء
اغ١الر١ ثزوو١ي ثؤ ازقلا (24)ػ١خ االفزواق ى١رى اؾشواد .رزفك ز١غخ اجؾش اؾب غ بموو اجبؽضب
6
ونه . B. bassiana كه فؼبي ف رؾف١ي ى٠بكح ازبط اي٠ اجور١١ي اؾ جور١بد فج افطو %1
افوى Pr1 Pr2ان٠ علا ا ازبط اي٠ اجور١١ي افوى افطو ثػ١ (17)ارفمذ غ ز١غخ اجبؽش
لل اىكاك صالس واد ز١غخ الػبفخ اغ١الر١ وبكح ؽبصخ مبهخ غ ؼبخ ا١طوح . M.anisopliae 892افطو
ا ا اغ١بد اشفوح الي٠بد اطثخ الزالن ازوع١ اقفبع ازبط اجور١١ي ثي٠بكح ازوع١ لل ٠فو
١خ رؼوف ثب١بد وجؼ ا٠غ ازوع١ رظ ػبكح ثب١بد ازؾضبس ا رؾف١ي زقظظخ رقؼغ ا ا١خ ١طوح ه ١
(Nitrogen metabolic repression ) رجؼب ن ا١٢بد فبغ١بد رؼجو ثز٠بد ػب١خ ػل ظوف رؾل٠ل
، اب ػل ا ثعك ظبكه ب٠زوع١١خ عبيح فؼخ فؤ ٠ؤك ا اػطبء اشبهح ال٠مبف ازؼج١و ازوع١ فمؾ
ام الؽظا ا اػ ازبط الي٠ اجور١١ي افطو (26)نا بث١ (25) ؾخاغ١ الي٠بد ا
Scledosporium apiospermum 1%ف ؽ١ ا ى٠بكح ازوو١ي ف اؾ ا 0.1%٠ى ػل روو١ي اججز
ا وال اججز (27)اك ا ى٠بكح ف ؼلي افطو اقفبع وج١و علا ف ازبط االي٠ .وب الؽع
ثبزب اقفبع افؼب١خ االي١٠خ A. terreusاىبىا ١ ٠ؾفي رواو اي٠ اجور١١ي ف اؾ ايهػ فطو
مه ال ن اظبكه ا١زوع١١خ اج١طخ رى ؽب٠خ ػ ػلك وج١و االؽبع اال١١خ اججز١لاد اظغ١وح
، ا اظبكه (Catabolic repression)االي٠ ثآ١خ وجؼ اال٠غ ال١خ ثنه رؤك ا ا٠مبف ازبط
ازوع١١خ اؼؼ٠خ اؼملح رى ظلها زواو١ي زجب٠خ االؽبع اال١١خ اؾوح اججز١لاد از ٠ى ب
ؽبع اال١١خ ثزواو١ي ل١خ رؤص١وا ب ف رظ١ ازبط اي٠بد اجور١١ي ؽت ا١٢خ انوهح بثمب لل رى اال
غ١و وبف١خ ؾش ازبط االي٠ ا ثزواو١ي ض ؾش االزبط فزجت اػ ازبط الي٠ ا اب لل رى ثزواو١ي ػب١خ
.(28)فزجت وجؼ ازبط اي٠بد اجور١١ي
ؽزلح 4.76زبػخ ز ازقزو ثفؼب١زخ ػ١زخ 24أ اززبط اإلزي٠ ٠جزلأ ثؼزل ٠5ػزؼ اشزى جأثر يذ انحضزن : -3
رزفك ن از١غخ غ ثور١. ؽلح / 12.25بػخ ازقو ثفؼب١خ ػ١خ 72/غ ثور١ ١ظ ا ألظب ثؼل
زبػخ ز 24لزل ثزلأد ثؼزل B. bassianaز افطزو فؼب١خ اي٠ اجور١١ي ازظ 80%ا (29)بموو غ
اززز موززود ا ازززبط اززي٠ اجور١١ززي افززوى زز (18)ززبػخ. ززغ بعلرزز 120اؾؼزز طززذ الظززبب ثؼززل
ؽزلح / غز ثزور١ ١ظز از الظزب 133.3بػخ ازقو ثفؼب١خ ػ١زخ 24لل ثلأ ثؼل B. bassianaافطو
ؽلح /غ ثور١ . 1304.34بػخ ازقو ثفؼب١خ ػ١خ 72ثؼلا االفواى اجىزو ازو٠غ الزي٠ اجور١١زي ٠زلي ػز فزوح غزياهح ازاك اغنا ١زخ فز زؾ از١زخ ازن ٠ؾز
ف ػء ن ازب ظ فمل ر رضج١ذ لح . (30 ;31)زطجبد ا ىب اغو فؼال ػ زطجبد ازبع الي٠
رزؼزبهع زن از١غزخ زغ بعزل بػخ ألفؼ ازبط اإلي٠ ر ازقلاب ف ازغبهة وبفخ . 72ؽؼ للهب
ام وبذ M.anisopliaeػل رؾل٠ل اػ ازبع١خ الي٠ اجور١١ي افوى لج اهثؼخ ػيالد فطو (32)و
ا٠ززب زز اضزز الزززبط اززي٠ 5 مززلاهب ثززؤ ززلح ؽؼزز (33)٠زز زز ثلا٠ززخ اؾؼزز ، ززغ بأوززل 4-6فزز اال٠ززب
فزز ؽززبي ازززبط اززي٠ (34)ث١ززب ارفمززذ ز١غززخ اجؾززش ززغ بث١زز . M.anisopliae IF 28.2اجور١١ززي زز افطززو
قزفززخ ز١ززخ ازززؼبي اززبؽ ىهػ١ززخ. ا B. bassiana B. amorpha اجور١١ززي زز وزز زز افطو٠ززبد
ام اػزؾب (35)االؽ١بء اغو٠خ ٠زظ ػ افزالف ف لح اؾؼ االىخ الززبط االي٠زبد وزب ثز١ مزه وز ز
االفزو M19ازبط ػب الي٠ اجور١١ي الخ اؽلاب ماد M.anisopliae ثؤزؼبي الز١ افطو
minimal (MM)ابؽ ىهػ١خ اؽلب ؾ اؾل االك ) 7ثؤزؼبي M10ماد ازبط اؽئ الي٠ الخ
media )] زز ززؾ ىزز زز اززالػ وجو٠زززبد اال١زز(NH4)2SO4 فززفبد اجربزز١ صب ١ززخ ا١ززلهع١
KH2PO4 فززفبد اجربزز١ اؽبك٠ززخ ا١ززلهع١KHPO4 وجو٠زززبد اغزز١MgSO4 [ ا وززال اززالز١
ثؤززؼبي M19الخ M10ث١ب اػطذ الخ MMبػخ ثؤزؼبي ؾ 72 فؼب١خ الي٠ فالي اػطذ اػ
.بػخ ػ ازا 120بػخ 96ايهػ١خ اػ فؼب١خ الي٠ فالي ثبل االبؽ
اػز ازبع١زخ ام اشزبها از ا زلح اؾؼز اضز الػطزبء (36)ػ١ز اافزفذ ز١غخ اجؾش اؾزب زغ بؽظز
زز فززخ ا٠ززب . ا اقفززبع M.anisopliaeاؼب ززلر١ فطززو CL11ززالخ 22الززي٠ اجور١١ززي زز ززالخ
ازبع١خ االي٠ ػل ى٠بكح لح اؾؼ ك١ ػ ا االي٠ اك اال٠غ اال١خ از رطوػ ف اطه اغزبهر
اززله٠غ ازن لزل صز ٠جزلأ ثبالقفزبع (37) افطو٠بد زف١لح رفو ااك اغنا ١خ ف ازؾ ايهػز
٠ؼي ا ؽلس رغ١واد ف ؾ ا ثشى فبص فز ل١زخ ازول ا١زلهع١، افزواى اىزب اؾز الي٠زبد
لل ٠ى ازجت ؼزة ازاك اغنا ١زخ ثزوه الزذ اززبط ا ، (38)افو رؼ ػ رؾط١ االي٠ ل١ل الهاخ
٠ش١و ا٠ؼب ا اىك٠بك ل١خ اول ا١زلهع١ رزله٠غ١ب ػز 5فؼال ػ مه فؤ اشى .(39)اك ا٠ؼ١خ بخ
اجور١١زي از زبػخ ؽ١زش ٠ظز اززبط ازي٠ 72ثؼل 7.1ؾ ازقو ١ظ ا 5.5اول ا١لهع١ االثزلا
.8.14ألظب ، ثغذ أػ ل١خ ول ا١لهع١ ف ا١ ابثغ
7
M.anisopliaeانفطر( : جأثر يذ انحضن ف إنحاج إنسى انبرجس ين 5انشكم )
فززالي فزززوح ازقززو ػزز اززول زز اهرفززبع اززول ا١ززلهع١ ازززله٠غ (36)ا١زز ارزفززك ززن از١غززخ ززغ بأشززبه
فز ا١ز اقزب ١7.78ظ ا M.anisopliae افطو 22ؾ رقو االخ 6.45ا١لهع١ االثزلا
فز ا١ز ازبك ػشزو ز 8.57ام رظ ازبع١خ اي٠ اجور١١ي ا انهح ١جغ اول ا١لهع١ اػ ل١خ
ام اهرفززغ 22فىبززذ از١غززخ شززبثخ ززالخ M.anisopliaeزز افطززو CL11اززب ثبززجخ ززالخ ثلا٠ززخ اؾؼزز ،
ف ا١ اقب ص ٠زيكاك ١ظز ١8.14ظ ا 6.46اول ا١لهع١ رله٠غ١ب ػ اول ا١لهع١ االثزلا
ا١زلهع١ فزالي فززوح ازقزو ٠ؼزي از اهرفزبع ازول ؼز ف ا١ ابك ػشو ثلا٠زخ اؾؼز . 8.67ا
عزززك ػظززز١و اززززو فؼزززال ػززز اغ١الرززز١ ازززنا ٠زززيكا ازززؾ ثبالؽزززبع اال١١زززخ اؼزززوه٠خ ز١زززخ افطزززو
M.anisopliae ،ام ا ف ؽبخ ازقلا االؽ١بء اغو٠خ ووجبد اال١١خ اؼؼ٠خ غوع از فزؤ مزه ٠زؤك
١لهع١ ى ن اووجبد ززفمل غػزخ االز١ زب ٠زؤك از اهرفزبع ازول ا١زلهع١ ا اهرفبع اول ا
(40 ).
جأثر درخة انحرار : -4
٠جز١ اقفزبع اززبط M.anisopliaeرؤص١و كهعخ اؾواهح ف ازبط اي٠ اجور١١ي افطزو ٠6ػؼ اشى
٠ىز رفز١و مزه ثبز ػزل ،( ؽزلح / غز ثزور١ 16.72 ام ثغزذ افؼب١زخ اػ١زخ ) 25اإلي٠ ػل كهعخ ؽواهح
ف١ززب اىكاكد ززن افؼب١ززخ .)41)كهعززبد اؾززواهح ااؽئززخ رظززجؼ افؼب١ززبد اال٠ؼزز١خ ػززل االؽ١ززبء اغو٠ززخ ثط١ئززخ
ور١ ، زب ٠شز١و از أ كهعزخ ( ؽلح / غ ث59.5 ؽ١ش ثغذ ) 30طذ ا ألظبب ػل الهعخ اؾواه٠خ
فؼززال ػزز مززه فززؤ اشززى أػزززلد فزز ازغززبهة االؽمززخ وبفززخ .اززز 30 اؾززواهح اضزز إلزززبط اإلززي٠ زز
٠ىزز رفزز١و ززن اؾبززخ ثززؤ 35اززنوه ٠ػززؼ اقفززبع افؼب١ززخ اػ١ززخ رززي٠ ثإىك٠ززبك كهعززخ اؾززواهح ازز وب اب رؤصو ػىز١ب ػز اؼ١زبد اال٠ؼز١خ (42) رؼ ػ فمل اقاص ازؾف١ي٠خ الي٠ كهعبد اؾواهح اؼب١خ
رؼزل كهعزخ . (43)الؽ١بء اغو٠خ ازغخ الي٠بد اؾخ جور١ ججخ رضج١ؾ افطو ثبزب ازبط االزي٠
ؽواهح اؾؼ ؼ١بها ؽوعب ٠زؤصو ػز وز ز ػ١زز ثزبء افزواى ازي٠ اجور١١زي امز فز االؽ١زبء اغو٠زخ
(46)ػ١خ ازظبص االوغ١ ري٠ل اطبلخ الكاء افؼب١زبد اال٠ؼز١خ 1- -مه فالي رؤص١و ػ : (44;45)
ا .(48)رؤص١وب ػز اقزاص اف١ي٠ب ١زخ غشزبء اقز 3- . (47) ػ١بد ام ازوعخ زظ١غ اجور١ 2- .
35اؾزواهح ام اػؾا كهعزخ (33)از١غخ اؾب١خ ثنا اقظص الرزفك غ ب أهك ᵒ
ز ازز رزغ ػزلب
ث امز اؼزوف ازبع١زخ الزي٠ اجور١١زي الظز M.anisopliaeفطو M408 M440 M460االالد
(Pr1) Subtilisin-like ونه الي٠(Pr2) Trypsin-like .
M. anisopliae ( : رؤص١و كهعخ اؾواهح ف ازبط اي٠ اجور١١ي افطو6اشى )
8
)ازالخ ل١زخ االززبط الزي٠ M10ا الهعخ اؾواه٠خ ابثمخ انوو اض الزبط اي٠ اجور١١ي زالز
.) M.anisopliae (35)االخ غي٠وح االزبط الي٠ اجور١١ي ( فطو M19 اجور١١ي(
افطزو ول ا١زلهع١ اإلثززلا فز اززبط ازي٠ اجور١١زي زا رؤص١و اجأثر انرقى انيذرخن اإلبحذا : -5
M. anisopliae ام ٠الؽززع أ افطززو لززبكه ػزز ازززبط اإلززي٠ ثشززى أفؼزز فزز ززل هلزز 7ػززؼ فزز اشززى
اػ١زخ إلزي٠ اجور١١زي ام ثغذ افؼب١زخ 5.5( ث١ل أ أػ ازبط رؾمك ػل اول ا١لهع١ 5 - ١6لهع١ )
غ ثزور١ ػزل ازول ؽلح / ( 2.97)( ؽلح / غ ثور١ اقفؼذ رله٠غ١ب ؽز طذ أؽؤ ل١خ ب 6.90)
فز واؽز 5.5 ػ ب رمل زب ظ فمل ر رؼل٠ ازول ا١زلهع١ زؾ اإلززبط از اثبء . 7.5ا١لهع١
أززوا ؼمززلا، رزززبى اؾ٠١ززخ فؼب١زززب ٠ؼززل رززؤص١و اززول ا١ززلهع١ فزز زز افطو٠ززبد. اجؾززش االؽمززخ ع١ؼززب
زب ١زلهع١١ب أزضال ز زب ثز١ 6.0- 5.0افطو٠بد ثزؾب ألهلب ا١لهع١خ ااؽئخ ا ؼظزب ٠ززه هل
(49) .
M. anisopliae انفطر ( : جأثر انرقى انيذرخن اببحذا ف إنحاج إنسى انبرجس ين7انشكم )
اجور١١ي ثبؽخ األؽ١بء اغو٠خ ٠ؼزل ثشى وج١و ػ ل١خ اول ا١لهع١ فبهط اق١خ ام ا ازبط اي٠
٠زووي رؤص١و ػ طفبد اؾ اغنا ونثب ااك اغنا ١خ ازمبب رؤ٠ب روو١ي اج١ىبهثبد ابرغخ
ؾ اغنا از ٠ؼى رؤص١وب ػ افطومثب صب أو١ل اىبهث ان ٠ؤصو ػ اؼخ الاه خ
اؼ١بد اإلي١٠خ م اىبد اؼل٠ل (. وب ا ول ا١لهع١ رؤص١و وج١و ػ(50 ري٠بد ازبع
( أ 54)ا . لل موو(51 ;52 ;53)ري٠ ازبعب اقال٠ب اقزفخ ػجو اغشبء اق ان ثله ٠ؼيى
ا١لهع١ فمل مووا أ ول (20)اول ا١لهع١ ٠ؤصو ػ ػ١خ ازوعخ االزبؿ ثبء اجور١ ، أب
اضب٠خ الافخ ف اؼ١بد رؤص١و ف ١ىب١ى١خ ازؼج١و اغ١ اظ زفبػالد األ٠ؼ١خ، أ رى٠ ااك األ١خ
رزفكاجور١١ي ام رؼزل وض١وا ػ اول ا١لهع١ ؾ. ا ام١خ ازؾظخ اؾب١خ اؾ٠١خ إلزبط اي٠
وبذ ػل اول M.anisopliae افطو افوى اب ام عل ا أػ فؼب١خ إلي٠ اجور١١ي )55 (موو ب غ
وب األفؼ ف 5.5( ام علا ا اول ا١لهع١ االثزلا 56ارفمذ غ ز١غخ اجبؽضب ) .5.5ا١لهع١
ا ازبط و ع أاع . Aspergillus awamori MTCC6652افطو األ١ي ازبط اي٠ اجور١١ي
ام ا (Ambient pH)اي٠بد اجور١١ي ٠زجغ ؽو٠مخ رؼج١و ع١ قزفخ وبزغبثخ ول ا١لهع١ اقبهع
اإلي٠بد رزظ ػل اول ا١لهع١ ان رى ػل فؼبخ أ ؤصوح فمؾ ، نا ٠ؼ ا ول ا١لهع١ كه
. (54) ف ازؼج١و اغ١ جور١بد افوىح
اإلزي٠ زنا اق١زخ ثزبء٠ؼل روو١ي امبػ ػبال ؽوعب أل ػ١خ ؽ٠١خ ىز زؤصوا فز ز جأثر حدى انهقاذ : -6
أ رم١ؼ ث١ئخ ا ثؼلك ؼ اجهاد ٠ؼل ز اطوا زك شزب ؼخ ) ; 57 ( 20 ٠غت أ ٠ؼبف ثبز األض
االزقلا ف اززبط اإلي٠زبد ز افطو٠زبد ، ام رؼز اؾظزي ػز ززب ظ لبثزخ زىزواه غ١زو زنثنثزخ . ٠ؼزوف
ثؤ اؾغ ان ٠ؾز ػلك ؾلك ؼ األؽ١بء اغو٠خ امزبكهح ػز االززفبكح ز ( ؽغ امبػ األض58)
رجز١ اززب ظ ى٠زبكح رله٠غ١زخ فز اززبط اغن٠بد اؾلكح ف اؾ ايهػ رؾم١ك اإلزبع١زخ امظز ز اإلزي٠.
يهػزز ؽززز ثغززذ افؼب١ززخ اػ١ززخ ألظززبب اإلززي٠ ززغ ى٠ززبكح أػززلاك اقال٠ززب فزز و١ززخ امززبػ اؼززبفخ ازز اززؾ ا
( 4.91، اال أزب اقفؼزذ ثؼزل مزه زظز از ) %16ؽلح / غ ثور١ ػل اػزبفخ ؽغز مزبػ مزلاه (11.35)
رؼطز زن از١غزخ ؤشزوا ػز ا ، 8% وزب ػزؼ فز اشزى 20ؽلح /غ ثور١ ػل اززقلا ؽغز مزبػ
ؽغ امبػ اؼب ١ ثبؼوهح أ ٠ؼط ؽظ١خ ػب١خ األي٠ ازب ٠ززظ ػز فزبم ازاك اغنا ١زخ ز ازؾ
ايهػ ثلذ جىو فؼال ػ فملا األوغ١ مه او٠غ يهػخ رىز اقال٠زب زب ٠زؤك از اقفزبع
وب ا ؾبخ اززبف زن (5 ; 20 ; 59 ; 60) وغ١ ازى١ ثبزب اقفبع ازبط اإلي٠ جخ اىو األ
األػلاك اىج١وح اقال٠ب رؤص١و ػ رض١ اؼبطو اغنا ١خ األب١خ فز ازؾ ايهػز رغ١زو ازول ا١زلهع١
% إلزبط ازي٠ فز واؽز اجؾزش 16نا فمل ر ازقلا ؽغ امبػ ، ( 61 ب ٠ؤصو جب ف فؼب١خ اإلي٠ ازظ )
×4االؽمخ اػزبكا ػ از١غخ ازؾظخ نا اجؾش . وب ؽغ امبػ 6زجه/ ز اززؼ ز لجز 10
9
×3( ؽغ مزبػ مزلاه 36. ازؼ )M.anisopliae( إلزبط اي٠ اجور١١ي افطو 62)7زجه/ ز إلززبط 10
×1( ثبززقلا ؽغز مزبػ مزلاه 35( )33. ف ؽ١ لزب وز ز ) M.anisopliaeاي٠ اجور١١ي افطو 610
انوه ف. جه/ إلزبط اي٠ اجور١١ي افطو
M. anisopliae ( : جأثر حدى انهقاذ ف إنحاج إنسى انبرجس ين انفطر8انشكم )
ثزور١ ، ( ؽزلح /غز9.52أ أػ فؼب١خ ػ١خ إلزي٠ اجور١١زي ثغزذ ) ٠9ػؼ اشى جأثر سرعة انرج : -7
زغ١ززي اززز رىفزز ؽ١ززش رززيكاك ر٠ززخ اززؾ ايهػزز ػززل ززن اززوػخكهح /كل١مززخ ، 100ػززل ززوػخ هط
ث١ب ظود أؽزؤ فؼب١زخ ػ١زخ رزي٠ األوغ١ انا ت ااك اغنا ١خ ف اؾ ب ٠زظ ػ ى٠بكح اإلزبع١خ ،
ؽزلح / غز ثزور١ ٠ؼزي مزه از ػزل وفب٠زخ از٠زخ 5.07، ام ثغزذ طزفو )اػزغ ازبو (ػل زوػخ هط
ا اززقلا اؾبػزخ ازياىح فز اززبط ( ، 63)ح افطزو ز ثشزى وفزء ااك اغنا ١خ از رؤك ا ػل لله
اإلي٠بد ثبؽخ األؽ١بء اغو٠خ اا ١خ وبفطو٠بد ٠ؼ ثبالزغالي األض ىبد اؾ ايهػز فؼزالػ
زب ػز ؽو٠زك اؾووزخ رى ؽجمخ هل١مخ ج١ب اج١ئخ )اؾ ايهػ( ااح ثزبؽخ االزشزبه فزالي زطؼ ا
اوؽ٠ززخ ززوط ، ثززنه ٠ززؼ اززوط أ ازؾو٠ززه ثززيط رغززب ىززبد اززؾ ايهػزز ثشززى ع١ززل وفززء ثؾ١ززش
65 ;66)٠زط١غ افطو ا ف اريا ث١ اإللاك ااء ف األػ اإللاك ز ازاك اغنا ١زخ فز األزف
( ى٠ززبكح مثززب األوززغ١ زز فززالي 1( فا ززل اززوط ززؾ ايهػزز ثززب٢ر: 68( )67لززل أعززي وزز زز ) (64;
( رشز١ذ أ رفو٠ك اقال٠زب 3( رؾ١ رى٠غ اغن٠بد ف اؾ ايهػ. 2 رؾو٠ه يط ىبد اط ايهػ.
افؼب١ززخ اػ١ززخ اقفززبع 9وززنه ٠جزز١ اشززى ( ى٠ززبكح اؼ١ززبد اال٠ؼزز١خ اا ١ززخ فززالي ػ١ززخ ازقززو.4ازىزززخ .
ا ازوع اؼب١زخ كهح / كل١مزخ 150ؽزلح /غز ثزور١ ػزل زوػخ هط 8.12ري٠ ثي٠بكح وػخ ازوط ام ثغزذ
وط ال رؤك ثبؼوهح ا ى٠بكح ازبط اإلي٠ ث لل رؤك ا رم١ ازبع فالي زـ اإلزي٠ رؾطز١ اقال٠زب
٠Shear forces (69; 63;59)ب ى٠بكح بفن٠زب ز١غخ االؽزىبن ثفؼ ل امض أ اب رؤك ا رؾ اقال
M. anisopliae( : جأثر سرعة انرج ف إنحاج إنسى انبرجس ين انفطر 9انشكم )
ز كهح / كل١مزخ إلززبط ازي٠ اجور١١زي 100 ف ػزء زن از١غزخ رز رضج١زذ اؾبػزخ ازياىح ػز زوػخ هط
ازقلذ وع هط قزفخ إلزبط اي٠ اجور١١ي ز أػزلد ف واؽ اجؾش االؽمخ . M. anisopliae افطو
( ثبززقلا 33كهح/كل١مزخ، ث١زب لزب ) 150( ثبزقلا زوػخ ازوط 62 ) (17فمب و ) M.anisopliaeافطو
ا افزززالف ززوع اززوط ثززبفزالف األؽ١ززبء اغو٠ززخ لززل ٠ؼززي ازز االفزالفززبد فزز كهح/كل١مززخ. 180ززوػخ اززوط
. (70)ف١ع١خ اىب ازظ ري٠ ىبد اؾ ؽغ ثبلهق
جأثر نع األيالذ انعذنة جركسىا : -8
األززالػ اضالصززخ ؼززب رززؤص١وا رشزز١ط١ب اػززؾب فزز ازززبط اززي٠ اجور١١ززي مبهززخ ا إلزززقلا ٠10ظززو زز اشززى
( ؽلح /غ ثور١ ، ث١زب أظزود اؼبزخ اقب١زخ 7.66ثبؼبخ اقب١خ األالػ ، ام ثغذ افؼب١خ اػ١خ )
ر١ ، رلهعذ اؼبالد االفو ف رؤص١وزب ؽلح / غ ثو 4.78 األالػ انوهح أل فؼب١خ ػ١خ ام ثغذ
ػ ازبط األي٠ ث١ اؼبخ اضالص١زخ االزالػ االفزو اقب١زخ زب . غ١زو ا اؼبزخ اؾب٠زخ ػز زؼ وه٠زل
اؼبزخ اظك٠ ؽل لل وب ب رؤص١وا رضج١ط١ب ػ ازبط األي٠ ام وبزذ زب فؼب١زخ ػ١زخ الز ز الز ؼبزخ )
رؼزل األزالػ اؼل١زخ )األ٠زبد اؼل١زخ( أؽزل ؽزلح / غز ثزور١ . 4.46اقب١خ ز االزالػ ( لزل ثغزذ ل١ززب
11
اغن٠بد األب١خ از رؾزبعب األؽ١بء اغو٠خ ثمبك٠و ػئ١خ رىز٠ اإلي٠زبد صجر١زخ اززمواه ثؼؼزب
وزب ا عزك ثؼزغ زن األ٠زبد ٠ي٠زل ز اضجزبد (10 ; 66) ظزله اإلزي٠ ا٢فو ىزب رقززف ثبالػززبك ػز
. (71)اؾواه ألي٠بد ٠غؼب فؼبخ ؽز ػل كهعبد اؾواهح اؼب١خ
anisopliae M.ين انفطر ( : جأثر نع األيالذ انعذنة ف إنحاج إنسى انبرجس10انشكم )
٠عل اؼل٠ل األثؾبس از أػؾذ اله افؼبي ألالػ اؼل١زخ فز اززبط اإلزي٠ ز افطو٠زبد، فمزل اززقل
فزززفبد KH2Po4) فزززفبد اجربززز١ صب ١زززخ ا١زززلهع١ ) 2So4(NH4)( أزززالػ وجو٠ززززبد اال١ززز 33)
فزز ازززبط اززي٠ اجور١١ززي افطززو MgSo4وجو٠زززبد اغزز١ K2HPo4)) اظززك٠ أؽبك٠ززخ ا١ززلهع١
M.anisopliae . ف ػء اززب ظ اػزال مزل رز ازوو١زي ػز زؼ وه٠زل اظزك٠ فمزؾ لهازخ رزؤص١و افززالف
فبد اجربز١ وجو٠زبد اغ١١ اب ١خ فزروو١ي ف ازبط اي٠ اجور١١ي غ صجر١خ روو١ي اؾ١ ا٢فو١٠ )
صب ١خ ا١لهع١ ( ام كهذ رواو١ي قزفخ وه٠ل اظك٠ زؾل٠ل ازوو١زي األضز ز إلززبط اإلزي٠ ، لزل
ثغززذ افؼب١ززخ اػ١ززخ ام 11% وززب ػززؼ فزز اشززى 0.1ززغذ أػزز فؼب١ززخ ػ١ززخ ػززل ازززقلا ثزوو١ززي
ؽزلح 6.1افؼب١خ اػ١خ رله٠غ١ب ثي٠بكح روو١ي اؼ فطزذ از ؽلح / غ ثور١، ف ؽ١ اقفؼذ (8.66)
رؼز ػز ففزغ ازبع١زخ Naclا ازواو١ي اؼب١زخ زؼ % ؼ وه٠ل اظك1٠/ غ ثور١ ػل ازوو١ي
ىب رجت رغ١واد ف روو١ت اج١لاد اىخ غشبء اق قال٠ب األؽ١زبء (72)اجور١١ي األؽ١بء اغو٠خ
( ام ؽظا ػ أػ ازبع١خ إلي٠ اجور١١ي اززظ ز 10ارفمذ ز١غخ اجؾش غ ز١غخ اجبؽش ). (73)اغو٠خ
. % ؼ وه٠ل اظك٠ 0.1ػل روو١ي A. carbonariusافطو
M. anisopliae( : جأثر جركس كهرذ انصدو ف إنحاج إنسى انبرجس ين انفطر11) انشكم
11
-اظبكه :
1- Samuels, K. D. Z., Pinnock, D. E. & Allsopp, P. G. (1989). The potential of
Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) Sorokin (Deutermycotina, Hyphomycetes) as a
biological control-agent of Inopus rubriceps (Macquart) (Diptera, Stratiomyidae). J Aust
Entomol Soc 28, 69–74.
2- Charnley, AK.( 2003). Fungal Pathogens of Insects: Cuticle Degrading Enzymes
and Toxins. Advances in Botanical Research. 40: 241-321.
3-Fernandes , E.G. ; Valério , H.M. ; Feltrin , T. and Sand , S.T.V.D. (2012) . Variability
in the production of extracellular enzymes by entomopathogenic fungi grown on different
substrates . Brazilian Journal of microbiology : 827 – 833 . ISSN 1517 – 8382 .
4- Rao,M.; Tanksale,A.; Ghatge,M. & Deshpande, V. (1998). Molecular and
Biotechnological Aspects of Microbial Proteases . Microbiol. Mol. Biol. Rev.
62(3):597-635.
5- Muthulakshmi, C.; Gomathi, D.; Kumar, D.; Ravikumar, G. ; Kalaiselvi, M. & Uma,
C.(2011). Production ,purification and characterization of protease by Aspergillus flavus
under solid state fermentation .Jordan Journal of Biological Sciences. Vol.4. No. 3.
pp.137-148.
6- Kathiresan, K. and Manivannan, S.(2006) .Amylase production by Penicillium
fellutanum isolated from mangrove rhizosphere soil. African Journal of Biotechnology
Vol. 5 (10), 829-832.
7- AL- Obaidi ,Z. S. ; Gh.M. Aziz ; Th. S. AL- Hakkak and M. A. AL- Hilli .(1987) .
Optimization of propagation medium for bakers yeast using date extract and
molasses . Date palm J.5(1) : 164-178 .
8- Miller ,G .I. (1959) . Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of
reducing sugar . Anal. Chem. , 3r . 426-428 .
9- Haq, I.-U. ; Mukhtar, H. & Umber, H. (2008). Fermentation Medium Optimization
For The Biosynthesis of Protease by Penicillium chrysogenum in shake flasks. Pakistan J.
Zool. Vol. 40. (2): pp. 69-73.
10- Ire,F. ; Okolo,B. ; Moneke,A. & Odibo,F. (2011). Influence of cultivation conditions
on the production of a protease from Aspergillus carbonarius using submerged
fermentation.African Journal of Food Science. Vol. 5(6):pp. 353-365.
11- Jaswal,R.; Kocher,G. & Virk,M. (2008).Production of alkaline protease by Bacillus
circulans using agricultural residues:A statistical approach. Indian Journal of
Biotechnology.Vol.7. pp. 356-360.
12- Dahot, M. (1994). Purification and some properties of alkaline protease from
Penicillium expansum. Journal of Islamic Academy of Sciences. 7:2. 100-105.
اظفبد ف ازبلؾ ثؼغ NAA ،CA3.رؤص١و ظبد ا :األ٠ضوي ،( 1988بالكث ، رعذ طو .) 13-
–ايهاػخ ، عبؼخ ثغلاك اطج١ؼ١خ اى١١ب٠خ ضبه قخ ازو طف ىل ، هبخ بعز١و ، و١خ
اؼواق .
12
14- Al-Khateeb, A.A., (2008). Enhancing the growth of date palm (Phoenix Dactylifera)
in vitro tissue by adding date syrup to the culture medium. Sci. J. King Faisal University
(Basic Appl. Sci.) 19, 71–85.
15- Khiyami, M.;Aboseide ,B. and Pometto , A.(2008).Influence of complex nutrient
sources:Dates syrup and dates pits on Lactocooous lactis growth and nisin
production.J.Biotechnol.136:717-742.
16- Moosavi-Nasab,M. and Yousefi ,A. (2011) .Biotechnological production of cellulose
by Gluconacetobacter xylinus from agricultural waste .Iranian Journal of Biotechnology
.Vol.9,No.2 ,pp:94-101.
17- Mohanty, S.S. ; Raghavendra, K. and Dash, A.P. (2008). Induction of
chymoelastase(Pr1) of Metarhizum anisopliae and its role in causing mortality to
mosquito larvae .World J Microbiol Biotechnol 24:2283-2288 .
Beauveria ( .كهاخ و١ؽ٠١زخ ألزي٠ اجور١١زي اززظ ز افطزو 2012، وه ؾل ػ .) انعبادي- 18
bassiana .هبخ بعز١و / و١خ اؼ / عبؼخ ووثالء .
19- Wang,L.; Ridgway,D.; Gu,T. & Moo-Young,M. (2005) . Bioprocessing strategies
to improve heterologous protein production in filamentous fungal fermentation.
Biotechnology Advances . 23. pp.115-129.
20- Patil,U. and Chaudhari, A.(2013). Production of Alkaline Protease by Solvent-
Tolerant Alkaliphilic Bacillus circulans MTCC 7942 Isolated from Hydrocarbon
Contaminated Habitat: Process Parameters Optimization .Indian Journal of
Biotechnology .
21- Djilali,B.;Bouziane ,A.;Ahmed,H.;Kada,I. and Nawal,O.(2012).Study of the
Behaviour of Lactbacillus Delbrueckii Subsp.Bulgaricus in Date Syrup in Batch
Fermentation with Controlled pH .J.Biotechnol Biomaterial.2:2 .
22- Wood , H.W. (1958) .Technical and pharmaceutical uses of gelatine. J. Photogr. Sci ,
6 , 91-96. (Cited from Ward , A.G. and A. Courts . 1977. The Science and Technology of
Gelatin. A Cademic press . London , New York , San Francisco . 506pp.).
23- Clarkson, J. M. (1996). Molecular biology of fungi for the control of insects. In
molecular biology of biological control of plants. Edited by Gunasekaran, M. and
Weber, D.J.© by CRC press, Inc.
24- Bidochka, M. & Khachatourians,G. (1988). N-Acetyl-d-Glucosamine – Mediated
Regulation of Extracellular Protease in the Entomo -pathogenic fungus Beauveria
bassiana .Appl. Environ. Microbiol. Vol.54 No. 11. 2699-2704.
25- Marzluf,G.(1997).Genetic regulation of nitrogen metabolism in the
fungi.Microbiol.Mol.Biol.Rev.61(1):17-32.
26- Larcher ,G.;Cimon,B.;Symoens,F.Trongchin,G.;Chabase,D. and Bouchara,J.
(1996).A 33 Kda serine proteinase from Scedosporium apiospermum
.Biochem.J.315:11a-126.
27- Ashur,S.A.;El-Shura, H.M.;Metwally ,M. and Habib,S.A.(1996).Fungal fermentation
of whey incorporated with certain supplements for the production of protease
.Micrbios.86(346):59-69.
28- Egorov , N. S. ;Loriya,Z.K.and Yudina, T.G.(1983) .Effect of protein on exprotease
synthesis in Bacillus thuringiesis .Microbiol.(USSR),52(4):443-446.
29- Ito, E. ; Varéa-Pereira, G. ; Miyagui, D. ; Pinotti, M. & Neves, P. (2007).
Production of extracellular protease by a Brazilian strain of Beauveria bassiana
13
reactivated on coffee berry borer,Hypothenemus hampei. Brazilian Archives of Biology
and Technology. Vol.50. No.2. pp. 217-223.
30- Qureshi,A. ; Bhutto,M. ; Khushk,I. & Dahot,M. (2011). Optimization of cultural
conditions for protease production by Bacillus subtilis EFRL 01. African Journal of
Biotechnology. Vol. 10(26). pp. 5173-5181.
31- Pandit, N.P. and Maheshwari ,S.K. (2012) Optimization of Cellulase
Enzyme Production from Sugarcane Pressmud Using Oyster Mushroom - Pleurotus
Sajor-Caju by Solid State Fermentation. J Bioremed Biodegrad 3:140.
doi:10.4172/2155-6199.
32- Dhar, P and Kaur , G.(2010) Cuticle – Degrading protease produced by Metarhizium
anisopliae and their in Different Media .Indian J Microbiol .50 (4) 449-455 .
33- Ali,S. ; Huang,Z, ; Zang,W. & Ren,S. (2011) . Production and Regulation of
Extracellular Proteases from the Entomopathogenic Fungus Metarhizium
anisopliae (Cordycipitaceae; Hypocreales) in the Presence of Diamondback Moth
Cuticle. Pakistan J. Zool., vol. 43(6). pp. 1203-1213.
34- Campos, R.; Arruda, W.; Boldo, J.; da Silva, M.; de Barros, N.; de Azevado, J.;
Schrank, A. & Vainstein, M. (2005). Boophilus microplus Infection by Beauveria
amorpha and Beauveria bassiana: SEM Analysis and Regulation of Subtilisin-like
Proteases and Chitinases. Current Microbiology.Vol. 50. pp. 257-261.
35- Prakash,G.V.S.B. and Padmaja,V.(2012).Substrate effects and abiotic factors
influencing protease enzyme production in the entomopathogenic fungus Metarhizium
anisopliae .African J.of Biotechnology.Issn 1684-5315.
36- Braga, G.; Destéfano, R. & Messias,C. (1999) . Protease production during growth
and autolysis of submerged Metarhizium anisopliae cultures. Revista de Microbiologia.
30 : 107-113.
37- Sumantha, A.; Deepa, P.; Sandhya1, C.; Szakacs, G.; Carlos, R. S. and Pandey1,
A.(2006).Rice Bran as a Substrate for Proteolytic Enzyme Production. Brazilian archives
of biology and technology. Vol.49, n. 5 : pp. 843-851.
38- Al-Juamily and H. Al-Zaidy, B.(2012)Optimization Conditions of Production
Fibrinolytic Enzyme from Bacillus lichniformis. British Journal of Pharmacology and
Toxicology 3(6): 289-295.
39- Romero, F.; Garcia L.A.;and Diaz, M. ;(1998). Protease production from
whey at high concentration by Serratia marcescens. Resour. Environ. Biotechnol., 2: 93–
115. Cited from Muthulakshmi et. al.
( . األؽ١ززبء اغو٠ززخ اظززبػ١خ . اطجؼززخ األزز ، 1989، ظززب وززبظ اظززؼ، هشزز١ل ؾغززة . )انحززذري - 40
عبؼخ ثغلاك .
41-Ellaiah,P. and Srinivasulu,D.(1996).Production of extracellular protease by
Streptomyces fradiae.Hind.Antibiot.Bull.,38:41-47.
42-Conn,T.K.;Cooper,R.M. and Charnley,A.K.(1987).Production of acidic
protease.J.Gen.Microbiol.,133:1371-1382.
43- Irfan,M. ; Abdul Rauf, ; Syed,Q. ; Nadeem,M. & Baig,S. (2011). Exploitation of
Different Agro-residues for Acid protease Production by Rhizopus sp.in Koji
Fermentation. IJAVMS. Vol. 5. Issue 1:43-52.
14
44- Peek,K. ;Daniel,R.M.; Monk,C.;Parker,L. and Coolbear ,T.(1992).Purification and
characterization of athermostable proteinase isolated from Thermus sp.strain Rt 41 A .
European Journal of Biochemistry.Vol.207.NO.3 .PP. 1035-1044.
45- Engel,L.S.;Hill,J.M.;Caballero,A.R.;Green,L.C. and Callaghan,R.J. (1998). Protease
IV a unique extracellular protease and virulence factor from Pseudomonas aeruginosa
.J.Biol. Chem. .vol.273,no.27 ,pp.16792-16796 .
46- Frankena,J.;Koningostein,VanVerseveld,H.and Stouthamer,A.(1986).Effect of
different limitations in chemostat cultures on growth and production of exocellular
protease by Bacillus licheniformis .Applied Microbiology and Biotechnology
.vol.24,no.2,pp.106-112 .
47-Votruba,J.;Pazlarova,J.;Dvorakova,M.,Vachora,L.,Strnadova,M.;
Kucerova,H.,Vinter,V.;Zourabian,R.and Chaloupka,J.(1991). External factors involved in
the regulation of synthesis of an extracellular proteinase in Bacillus megaterium:effect of
temperature .Applied Microbiology and Biotechnology,Vol.35,No.3,pp.352-357.
48- Rahman,R.N.;Geok, L.P.;Basri,M. and Salleh,A.B.(2005).Physical factors acting
the production of organic solvent –tolerant protease by Pseudomonas aeruginosa strain K
. Bioresource Technology,vol.96,no.4,pp.429-436.
49- Berry, D.R. (1975). The Environmental control of the physiology of filamentous
fungi. In the filamentous fungi. Vol. 1 (ed. by Smith, J.R. & Berry, D.R) pp.16-32-
Arnold.
50- Bull,A.T. and Bushnel,,M.E.(1976).Environmental control of fungal growth .Inthe
filamentous fungi.J.E.Smith and D.R.Berry eds.Vol.2:1-26.Edward Arnold.London.
51-Ellaiah,P.;Adinarayana,K.;Bhavani,Y.;Padmaja,P.andSrinivasulu,B.(2002).Optimization
of process parameters for glucoamylase production under solid state fermentation by a newly
isolated Aspergillus species .Process Biochem,38:615-620.
52- Akujobi ,C. ; Odu, N. ; Okorondu,S. & Ike,G.(2012) . Production of protease by
Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus isolated from abattoir environment
. Journal of Research in Biology. Vol.2. No.2:077-082 .
53- Ali, S. S.; Vidhale ,N.N.(2013) Protease Production by Fusarium oxysporum in
Solid- State Fermentation Using Rice Bran. American Journal of Microbiological
Research, Vol. 1, 3, 45-47.
54- Ramon,A.M.;Porta,A. and Fonzi, W.A.(1999).Effect of environmental pHon
morphological development of Candida albicans is mediated via the pac C-related
transcription factor encoded by PRR2.J.Bacteriol.181(24):7524-7530.
55- Kucera,M.(1981).The production of toxic protease by the entomopathogenic fungus
Metarhizium anisopliae in submerged culture .Journal of Invertebrate Pathology
.Vol.38.(1), pp:33-38.
56-Negi,S. and Banerjee,R.(2010).Optimization of culture parameters to enhance
production of amylase and protease from Aspergillus awamori in a single fermentation
.African Journal of Biochemistry Research,Vol.4(3),pp.73-80.
57- Sandhya, C. ; Adapa, L. K. ; Nampoothiri, K. M. ; Binod, P. ; Szakacs, G. ; Pandy,
A. (2004) . Extracellular chitinase production by Trichoderma harzianum in submerged
fermentation . J. Basic Microbiol. , 44(1): 49-58
58- Abusham,R.A.;Rahman,R.N.Z.RA.;Salleh,A.B.(2009).Optimization of physical
factors affecting the production of thermo-stable organic solvent –tolerant protease from
anewly isolated halo tolerant Bacillus subtilis strain Rand .Microbial cell Factories,8:20 .
15
59- Haritha, R. ; SivaKumar,K. ; Swathi,A. ; Mohan,Y. & Ramana,T. (2011) .
Characterization of marine Streptomyces carpaticus and optimization of condition for
production of extracellular protease. Microbiology Journal . pp.1-13.
60- Deb, P.; Talukdar, S. A.; Mohsina, K.; Sarker, P. K. and Abu Sayem, S.M.(2013).
Production and partial characterization of extracellular amylase enzyme from Bacillus
amyloliquefaciens .SpringerPlus , 2:154.
( رؾل٠زل اظزوف اضز ألززبط 2009ع ، ىزوح ؾزك )؛ ػي٠ي ، غبى ؼ ؛ اقفب سعد ، اساء يحذ 61-
(: 1) 8اؼيخ ؾ١ب . اغخ اؼوال١خ زمببد اؾ١بر١خ Staphylococcus aureus AG10اجور١١ي ثىزو٠ب
10-26 .
62- Paterson,I.C. ;Charnley,A.K.; Cooper,R,M. and Clarkson,M.(1994).
Specific induction of a cuticle-degrading protease of the insect pathogenic fungus
Metarhizium anisopliae .Microbiology,140,pp:185-189.
63- Sepahy,A. & Jabalameli, L. (2011) . Effect of culture conditions on the production
of an extracellular protease by Bacillus sp. Isolated from soil sample of Lavizan
Jungle park. Enzyme Research. pp. 1-7 .
64- Casida, L. E. Jr. (1968) . Industrial microbiology . John Wiley and Sons , Inc. , New
York .
65- Rhodes, A. and Fletcher, D. L. (1966) . Principles of industrial microbiology . 1st ed.
Pergamon Press , Oxford .
66- Stanbury, P. F. and Whitaker, A. (1984) . Principles of fermentation
technology . 1st ed. Pergamon Press , Oxford .
67- Genckal,H. and Tari,C.(2006).Alkaline protease production from alkalophilic
Bacillus sp. Isolated from natural habitats .Enzyme Microbial Technology
.vol.39,no.4,pp.703-710 .
68- Calik.P.;Bilir,E.;Calic,G. and Özdamar ,T.H.(2002). Influence of pH condition on
metabolic regulation in serine alkaline protease production by Bacillus licheniformis
.Enzyme Microbial Technology .vol.31,no.5,pp.685-697 .
69- Singh, R.S.; Sooch, B.S. and Puri, M. (2007b). Optimization of medium and
process parameters for the production of inulinase from a newly isolated Kluyveromyces
marxianus YS-1. Bioresource Technology 98: 2518-2525.
70- Ghanem, K. ; AL-Fassi,F. & Farsi, R. (2011). Statistical optimization of cultural
condition for chitinase production from shrimp shellfish waste by Alternaria alternata .
African Journal of Microbiology Research. Vol. 5(13).pp.1649-1659.
71- Haq, I.-U.; Mukhtar, H. & Umber, H. (2006). Production of protease by penicillium
chrysogenum Through Optimization of Environmental conditions.Journal of Agriculture
& Social Sciences.Vol.2. No.1: 23-25.
72- Ventosa,A.;Nieto,J.J.andOren,A. (1998).Microbiol.Mol.Biol.Rev.62:504-544.
73- Suganthi ,C.;Msgeswari,A. ;Karthikeyan,S.;Anbalagan,M.;Sivakumar,A. and
Gothandam,K.M.(2013).Screening and optimization of protease production from a
halotolerant Bacillus licheniformis isolated from saltern sediments.J.of Genitic
Engineering and Biotechnology .11,47-52.
16
* Determining the optimum culture's conditions for protease
production from Metarhizium anisopliae Mohammed Reddah Annon Muna Ibrahim Jasim
Sciences College /Al-Qadisiya University Education of sciences freehold College / Kerballa University
Summary
The identify optimum conditions for protease production from Metarhizium anisopliae
and the maximum yield was in the medium contain Date syrup (DS) at concentration
0.05 % as carbon sources and supplemented with 0.5 % gelatin as nitrogen sources , the
inoculum size was 16 % at initial pH 5.5 after 72 h from incubation with rotary shaker at
100 rpm at the temperature 30 ˚C .
Key words : protease , Metarhizium anisopliae, Date syrup
*the research borrower from the doctorate thesis for the second researcher.