Metode Pemeriksaan Glukosa Darah

Glukosa dapat diukur dalam darah atau serum keseluruhan (yaitu, plasma).Secara historis, nilai

glukosa darah diberikan dalam hal seluruh darah, namun sebagian besar laboratorium sekarang

mengukur dan melaporkan tingkat glukosa serum.Karena sel darah merah (eritrosit) memiliki

konsentrasi yang lebih tinggi protein (misalnya, hemoglobin) daripada serum, serum memiliki

kandungan air lebih tinggi dan glukosa akibatnya lebih terlarut daripada darah. Untuk

mengkonversi dari seluruh glukosa darah, perkalian dengan 1,15 telah terbukti pada umumnya

memberikan tingkat serum / plasma.

Pengumpulan darah dalam tabung untuk analisis kimia bekuan serum memungkinkan

metabolisme glukosa dalam sampel dengan sel darah sampai dipisahkan dengan sentrifugasi.Sel

darah merah, misalnya, tidak memerlukan insulin untuk asupan glukosa dari darah.Lebih tinggi

dari jumlah normal jumlah darah putih atau merah sel dapat menyebabkan glikolisis yang

berlebihan di sampel dengan pengurangan substansial tingkat glukosa jika sampel tidak diproses

dengan cepat. Suhu lingkungan di mana sampel darah disimpan sebelum pemusingan dan

pemisahan plasma / serum juga mempengaruhi kadar glukosa. Pada suhu lemari es, glukosa tetap

relatif stabil selama beberapa jam dalam sampel darah. Pada suhu kamar (25 ° C), kehilangan 1

sampai 2% dari total per jam glukosa harus diharapkan dalam sampel darah

keseluruhan.Kehilangan glukosa bawah kondisi ini dapat dicegah dengan menggunakan tabung

Fluorida (yaitu, abu-abu atas) sejak fluoride menghambat glikolisis. Namun, seharusnya hanya

digunakan ketika darah akan diangkut dari satu laboratorium rumah sakit lain untuk pengukuran

glukosa. Merah-atas tabung pemisah serum juga melestarikan glukosa dalam sampel setelah

disentrifugasi mengisolasi serum dari sel.

Perhatian khusus harus diberikan untuk menarik sampel darah dari lengan yang

berlawanan di mana garis intravena dimasukkan, untuk mencegah kontaminasi dari sampel

dengan cairan intravena. Atau, darah dapat diambil dari lengan yang sama dengan infus setelah

infus telah dimatikan selama setidaknya 5 menit, dan lengan diangkat untuk menguras cairan

infus jauh dari vena. Kelalaian dapat menyebabkan kesalahan besar, karena sesedikit 10%

kontaminasi dengan dekstrosa 5% (D5W) akan meningkatkan glukosa dalam sampel dengan 500

mg / dl atau lebih. Ingat bahwa konsentrasi yang sebenarnya glukosa dalam darah sangat rendah,

bahkan dalam hiperglikemia tersebut.

Arteri, kapiler dan darah vena memiliki kadar glukosa yang sebanding dalam individu

berpuasa. Setelah makan tingkat vena agak lebih rendah dari darah kapiler atau arteri, sebuah

perkiraan umum adalah sekitar 10%.

Pengukuran teknik

Dua metode utama telah digunakan untuk mengukur glukosa.Yang pertama, masih digunakan di

beberapa tempat, adalah metode kimia mengeksploitasi properti''''nonspesifik mengurangi

glukosa dalam reaksi dengan zat indikator yang berubah warna saat berkurang.Karena senyawa

darah lainnya juga memiliki sifat mengurangi (misalnya, urea, yang dapat normal pada pasien

uremik yang tinggi), teknik ini dapat menghasilkan pembacaan yang salah dalam beberapa

situasi (5 sampai 15 mg / dl telah dilaporkan).Teknik yang lebih baru, menggunakan enzim

khusus untuk glukosa, kurang rentan terhadap jenis kesalahan ini.Dua enzim yang paling umum

digunakan adalah glukosa oksidase dan heksokinase.

Dalam kedua kasus, sistem kimia biasanya terkandung pada test strip, yang sampel darah

diterapkan, dan yang kemudian dimasukkan ke meteran untuk membaca. Bentuk test strip dan

komposisi kimia yang tepat mereka bervariasi antara sistem meter dan tidak dapat dipertukarkan.

Sebelumnya, beberapa strip uji baca (setelah waktu dan menyeka sampel darah) dengan

perbandingan visual terhadap bagan warna dicetak pada label botol. Strip jenis ini masih

digunakan untuk pembacaan glukosa urin, tetapi untuk kadar glukosa darah mereka yang usang.

Tingkat kesalahan mereka, dalam hal apapun, jauh lebih tinggi.

Pembacaan glukosa urin, namun diambil, jauh kurang berguna.Dengan benar fungsi

ginjal, glukosa tidak muncul dalam urin sampai ambang batas ginjal untuk glukosa telah

terlampaui.Hal ini jauh di atas setiap tingkat glukosa normal, dan sebagainya adalah bukti dari

kondisi hiperglikemik yang ada parah.Namun, urin disimpan dalam kandung kemih dan sehingga

setiap glukosa dalam mungkin telah dihasilkan pada setiap waktu sejak terakhir kali kandung

kemih dikosongkan.Karena kondisi metabolik berubah dengan cepat, sebagai akibat dari

beberapa faktor, ini adalah berita tertunda dan tidak memberikan peringatan dari kondisi

berkembang.Pemantauan glukosa darah jauh lebih baik, baik secara klinis dan untuk pemantauan

rumah oleh pasien.

Laboratorium glukosa tes darah

1. gula darah puasa (yaitu, glukosa) uji (FBS)

2. tes urin glukosa

3. dua jam setelah makan gula darah tes (2-h PPBS)

4. tes toleransi glukosa oral (OGTT)

5. tes toleransi glukosa intravena (IVGTT)

6. glikosilasi hemoglobin (HbA1c)

7. diri-pemantauan tingkat glukosa melalui pengujian pasien

Macam – macam Metode Pemeriksaan Glukosa Darah

1. Metode Asatoor dan King

Penentuan ini menggunakan sifat glukosa yang dapat mereduksi.Darah dimasukkan

dalam larutan natrium sulfat-Cu sulfat isotonic agar glukosa tidakmudah mengalami

glikolisis.Disini diadakan penambahan CuSO4 ke dalam larutan natrium sulfat-Cu

CuSO4 isotonik. Metode ini dapat digunakan untuk kadar glukosa darah sampai

300mg’100ml, darah yang telah berada dalam larutan natrium sulfat- CuSO4 sulfat

isotonic dapat tahan 72 jam.

2. Metode Folin-Wu

Glukosa akan mereduksi ion kupri menjadi senyawa kupro yang tidak larut, pereaksi

asam fosfomolibdat senyawa kupro akan larut dan mereduksi ion fosfomolibdat yang

berwarna biru. Warna biru yang terjadi dibaca dengan spektrofotometer. Dengan metode

ini kadar glukosa puasa darah vena adalah 90-120 mg/dl darah

3. Metode Nelson-Somogyi

Deproteinisasi dilakukan dengan larutan Zn hidroksida barium sulfat. Filtrasi yang

diperoleh boleh dikatakan tidak mengandung senyawa mereduksi lain kecuali glukosa.

Filtrat dipanaskan bersama dengan reagen Cu alkali kemudian direaksikan dengan reagen

arseno molibdat, dan warna yang terjadi dibaca dengan spektrofotometrik.

4. Metode Glukosa Oksidase

Glukosa dioksidasi oleh larutan kalium ferisianida alkali.Larutan ferisianida ini berubah

menjadi ferosianida yang kemudian diperlukan lebih lanjut sehingga menjadi senyawa

yang berwarna yang dapat dibaca dengan spektrofotometer.

5. Metode Titriometri

Dasar untuk penentuan ini seperti metode yang lain, hanya setelah reaksi reduksi

berlangsung ditambahkan kalium iodide dan asam. Kemudian banyaknya iodium yang

ada ditentukan dengan menitrasinya menggunakan natrium tiosulfat.

6. Metode Hagedorn Dan Jensen

Pengendapan protein darah dengan Zn hidroksid pada suhu 100 OC, glukosa dalam filtrate

dioksidase oleh larutan kalium ferisianida alkali yang dibufer pada pH 11,5 yang

diberikan berlebihan. Dalam reaksi ini terjadi kalium ferosianida yang akan diikat oleh

Zn sulfat. Kelebihan kalsium ferisianida difiltrasi secara iodemetrik.Dari banyaknya

ferisianida yang digunakan untuk mengoksidasikan glukosa, dapat diketahui banyaknya

glukosa yang ada.

7. Metode o-toludine

Glukosa berekasi dengan o-toluidine dalam acetic acid panas dan menghasilkan senyawa

berwarna hijau yang dapat ditentukan secara fotometris.

Metode Pemeriksaan Glukosa Urine

Uji Benedict

Darah disaring oleh jutaan nefron, sebuah unit fungsional dalam ginjal.Hasil penyaringan (filtrat)

berisi produk-produk limbah (mis. urea), elektrolit (mis. natrium, kalium, klorida), asam amino,

dan glukosa.Filtrat kemudian dialirkan ke tubulus ginjal untuk direabsorbsi dan diekskresikan;

zat-zat yang diperlukan (termasuk glukosa) diserap kembali dan zat-zat yang tidak diperlukan

kembali diekskresikan ke dalam urin.

Kurang dari 0,1% glukosa yang disaring oleh glomerulus terdapat dalam urin (kurang

dari 130 mg/24 jam). Glukosuria (kelebihan gula dalam urin) terjadi karena nilai ambang ginjal

terlampaui (kadar glukosa darah melebihi 160-180 mg/dl atau 8,9-10 mmol/l), atau daya

reabsorbsi tubulus yang menurun.

Uji glukosa urin konvensional menggunakan pereaksi Benedict atas dasar sifat glukosa

sebagai zat pereduksi. Cara ini tidak spesifik karena beberapa pereduksi lain dapat mengacaukan

hasil uji. Beberapa gula lain bisa menyebabkan hasil uji reduksi positif misalnya fruktosa,

sukrosa, galaktosa, pentose, laktosa, dsb.Beberapa zat bukan gula yang dapat mengadakan

reduksi seperti asam homogentisat, alkapton, formalin, glukoronat.Pengaruh obat : streptomisin,

salisilat kadar tinggi, vitamin C, dsb.

Glukosa mempunyai sifat mereduksi.Ion cupri direduksi menjadi cupro dan mengendap

dalam bentuk merah bata. Semua larutan sakar yang mempunyai gugusan aldehid atau keton

bebas akan memberikan reaksi positif. Na sitrat dan Na karbonat (basa yang tidak begitu kuat)

berguna untuk mencegah pengendapan Cu++ .Sukrosa memberikan reaksi negative karena tidak

mempunyai gugusan aktif (aldehid/keton bebas).

Reaksi benedict sensitive karena larutan sakar dalam jumlah sedikit menyebabkan

perubahan warna dari seluruh larutan, sedikit menyebabkan perubahan warna dari seluruh

larutan, hingga praktis lebih mudah mengenalnya.Hanya terlihat sedikit endapan pada dasar

tabung.  Uji benedict lebih peka karena benedict dapat dipakai untuk menafsir kadar glukosa

secara kasar, karena dengan berbagai kadar glukosa memberikan warna yang berlainan.