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Microbiología Médica I
Tema # 10
Lic. Yudy Aranguren
Enero 2009
UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO”
DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL
SECCION DE MICROBIOLOGÍA
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BLOQUE 2:
TEMA 10: CONTENIDO:
• Cocos Gram positivos patógenos
• Morfotipos
• Géneros
• Características biológicas
• Diferenciación bioquímica
OBJETIVOS:
10.1.- Diferenciar los diferentes morfotipos de cocos según el exámen directo al
Gram
10.2.- Diferenciar los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Enterococcus
según sus características morfológicas, tintoriales y bioquímicas.
10.3.- Describir los pasos para identificación de los diferentes géneros de cocos
Gram positivos
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COCOS GRAM POSITIVOS
GÉNEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA
GÉNERO
STAPHYLOCOCCUS
GÉNERO
STREPTOCOCCUS
Clasificación de Lancefield:
Grupo A
Grupo B
Grupo C
Grupo D
No tipificables
GÉNERO
ENTEROCOCCUS
No Enterococcus:
Streptococcus bovis
1984 Estudios
ADN
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GÉNERO:
• Cocos Gram positivo
Tinción de Gram
GENERALIDADES:
• No forman esporas
• Tienen forma redondeada y se presentan en pares o en grupos en forma de racimos de uva
• Inmóviles
• Aerobios y anaerobios facultativos
• Crecen a una temperatura óptima entre 30-37ºC.
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• Fáciles de cultivar
• Algunos producen pigmentos
• Muy activos metabolicamente: Fermentan azúcares
- +
• Resistente a concentraciones de sal (7%)
Agar Salado Manitol 7%
• Son catalasa positivo:
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ESPECIES DE IMPORTANCIA CLINICA
Staphylococcus saprophyticus
Staphylococcus aureus.
Staphylococcus epidermidis
Flora normal, pero potencialmente patógenos en casos de paciente inmunocomprometidos
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CARACTERISTICAS :
• Produce pigmentos (algunas cepas)
• Coagulasa positivo• Manitol positivo
• Beta Hemolítico
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IgGProteína A
Pared celularPeptidoglicano
Ac. Teicóico:
Adherencia inespecífica
Cápsula: Inhibe la fagocitosis
Adhesinas: Proteínas de superficie que favorece al anclaje a la célula huésped.
FACTORES DE PATOGENICIDAD: ESTRUCTURA CELULAR
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U
U
U
UU
U
U
U
U
U
UU
U
U
U
U
TOXINAS:
Leucocidina
Hemolisinas
Toxina del sindrome del
shock tóxico (TSST-1)
Exfoliativa: sindrome de la “piel escaldada”
ENZIMAS (Invasinas):
Hialuronidasa
Lipasas
Nucleasa
Coagulasa
Estafiloquinasa
FACTORES DE PATOGENICIDAD: FACTORES SOLUBLES
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Coagulasa: Transforma el fibrinógeno en fibrina formando una capa protectora
Lipasas
Proteasas
Hialuronidasa
Nucleasa
PRODUCTOS CELULARES:
ENZIMAS (Invasinas):
Difusión de la bacteria en los tejidos.
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ENTEROTOXINAS
• Enterotoxinas: Hay 7 tipos diferentes que producen intoxicación alimentaria
• Leucocidina: Toxina que produce lisis de polimorfonucleares y de macrófagos
• Hemolisinas: Cuatro tipos de toxinas (alfa, beta, gamma y delta) lisan gróbulos rojos, leucocitos y la alfa es también dermonecrótica.
EXOTOXINAS:
• Toxina del Sindrome del Shock Tóxico (TSST-1): provoca los síntomas del SST.
• Exfoliativa: Toxina del sindrome de la “piel escaldada”
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CARACTERISTICAS :
• Coagulasa negativo
• No hemolíticos
• Crece a 7% NaCl
• No fermenta Manitol
• Sensible a la Novobiocina
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
• Presenta un glicocalix de protección
• Adherencia a superficies plásticas y metálicas
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CARACTERISTICAS :
• No contiene proteína A
• Coagulasa negativo
• No hemolítico
• Crece a 7% NaCl
• No fermenta Manitol
• Resistente a la Novobiocina
FACTORES DE PATOGENICIDAD:
• Receptores oligosacáridos específicos de células de la uretra
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Diagnóstico de laboratorio
REDUCCIÓN DE NITRATOS
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
? ?
NEGATIVAS
GÉNERO
Streptococcus
GÉNERO
Staphylococcus
POSITIVAS
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PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:
REDUCCIÓN DE NITRATOS
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
• S. aureus
• S. epidermidis
• S. saprophyticus?
POSITIVAS
SENSIBILIDAD
A
LA
NOVOBIOCINA
COAGULASA
POSITIVA NEGATIVA
Staphylococcus aureus
S. epidermidis S. saprophyticus ?
+ -
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SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA
SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO
RESISTENTE-CON
CRECIMIENTO
S. epidermidis S. saprophyticus
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MORFOTIPOS
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CARACTERISTICAS DEL GÉNERO
• Cocos Gram positivos dispuestos en cadenas
o en pares
• No poseen cápsula : Excepto los Streptococcus pneumoniae
• No son esporulados
• Catalasa negativo
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• Aerobios facultativos
• Muy exigentes en cuanto a requerimientos nutritivos
• Fermentan azucares sin producir gas
- +
• Producen diferentes patrones de hemólisis:
ALFA
BETA
GAMMA
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Grupo D no Enterococcus(Streptococcus bovis)
Enterococcus sp.
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS
Streptococcus pyogenes
Streptococcus agalactiae
Enterococcus sp( algunas cepas)
Streptococcus pneumoniae
Streptococcusviridans
Enterococcus sp( algunas cepas)
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Streptococcus pyogenes
Streptococcus agalactiae
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL CARBOHIDRATO DE PARED CELULAR
• Clasificación de Rebeca Lancefield (1933)
• Sólo para los beta hemolíticos según el carbohidrato de pared especifico de grupo
GRUPO A
GRUPO B
Enterococcus sp.
GRUPO D (ac. Teicóico)
GRUPO C y G
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CLASIFICACION SEGÚN SUS DIFERENCIAS FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS:
Se establecen diferencias entre las 65 especies que componen este género.
• Se utilizan galerías de identificación específicas, como la galería API Strep • Posee más de 20 pruebas bioquímicas
API 20 Strep
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ENFERMEDADES
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FACTORES DE PATOGENICIDAD Streptococcus pyogenes
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• Diplococos Gram positivos
Alfa hemolíticos
• Poseen cápsula FACTOR DE VIRULENCIA
Factores de patogenicidad:
1.- Cápsula
2.- Enzimas: neuraminidasa: factor de difusión
3.- Toxinas:
• Hemolisina dermatotóxica (neumolisina)
• Leucocidina
• Sensibles a la Optoquina
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CARACTERÍSTICAS:
• Son beta hemolíticos
Streptococcus agalactiae
• Hidrolisan el hipurato
• Prueba de CAMP: El estreptococo
del grupo B produce un factor que aumenta la beta hemólisis de una cepa indicadora de S. aureus. S.pyogenes
S. aureus
S. agalactiae
Factores de patogenicidad: Producen enzimas: neuraminidasa, proteasa, hialuronidasa, y hemolisina
+ -
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CARACTERÍSTICAS:
• Morfotipo: Diplococos
• Aerobios facultativos
• Hemólisis Gamma (No hemoliticos)
• Poco exigentes para cultivar
• Crecen a 6,5% de NaCl
• Enfermedades nosocomiales: Resistencia natural a cefalosporinas y otros antibióticos
• 12 Especies: Más comunes: Flora normal intestinal
Enterococcus faecalis 85-90%
Enterococcus faecium 5-10%
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FACTORES DE PATOGENICIDAD: citolisinas, hialuronidasas,
beta lactamasa
CLASIFICACIÓN POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS:
1.- Hidrólisis de bilis-esculina:
Todos lo Streptococcus del Grupo D son Bilis-esculina
POSITIVO
-+ -+
2- Crecimiento en solución salina al 6,5%
• Enterococcus (Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium) : CRECEN
• No Enterococcus (Streptococcus bovis): NO CRECEN
+ -
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CARACTERISTICAS:
• Habitan la boca principalmente: Flora normal
• Responsables de las caries
• Hemólisis Alfa
Streptococcus mutans
Streptococcus mitis
Streptococcus salivarium
Streptococcus sanguis
• No son tipificables con las pruebas anteriores
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COCOS GRAM POSITIVOS
(Cadenas y pares)(Grupos)
HemolisisCoagulasa
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MUESTRA: Extendido y frotis para Tinción de Gram
• Exudado faringeo
• Pus
• Sangre
• LCR
1.- EXAMEN DIRECTO: Tinción de Gram
Gram: cocos Gram positivos
EN RACIMOS ?
EN CADENAS?
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE COCOS GRAM POSITIVOS
![Page 32: Microbiología Médica I Tema # 10 Lic. Yudy Aranguren Enero 2009 UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO” DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022081503/5665b4671a28abb57c913fb5/html5/thumbnails/32.jpg)
2.- PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:
REDUCCIÓN DE NITRATOS
NEGATIVAS
Streptococcus
COCOS GRAM POSITIVOS
CATALASA
• S. aureus
• S. epidermidis
• S. saprophyticus?
POSITIVAS
COAGULASA
POSITIVA NEGATIVA
Staphylococcus aureus
S. epidermidis S. saprophyticus?
SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA
SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO
RESISTENTE-CON
CRECIMIENTO
S. epidermidis S. saprophyticus
![Page 33: Microbiología Médica I Tema # 10 Lic. Yudy Aranguren Enero 2009 UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO” DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022081503/5665b4671a28abb57c913fb5/html5/thumbnails/33.jpg)
Enterococcus sp (Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
S. pyogenes
(Grupo-A)Sensible a Bacitracina
S. agalactiae (Grupo-B)
Prueba Camp positiva
S. pneumoniaeSensible a Optoquina
Grupo Viridans Reacciones bioquímicas
ALFA GAMMA BETA
Streptococcus3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE: Agar sangre en 10% Co2:
Enterococcus sp (Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
Enterococcus sp (Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%
Grupo-D
No EnterococcusNo crece en NaCl 6,5%
Grupo Viridans Reacciones bioquímicas
![Page 34: Microbiología Médica I Tema # 10 Lic. Yudy Aranguren Enero 2009 UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO” DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD DEPARTAMENTO](https://reader036.vdocuments.pub/reader036/viewer/2022081503/5665b4671a28abb57c913fb5/html5/thumbnails/34.jpg)
PRUEBA BIOQUÍMICASTAPHYLOCOCCUS
AUREUSSTAPHYLOCOCCUS
EPIDERMIDISSTAPHYLOCOCCUS
SAPROPHYTICUS
Coagulasa POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO
Produce pigmentos SI NO NO
Crece a 7% NaCl SI SI SI
Fermenta
ManitolSI NO NO
Sensibilidad a
la Novobiocina ----- SI NO
AUTOEVALUACIÓN
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TIPO DE HEMÓLISIS
AUTOEVALUACIÓN
NO HEMOLITICO
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Unidos podemos
cambiar al mundo!