microbiology

تهیه کنندگان: فاطمه رعیت – صدیقه

اژدریموضوع پژوهش:

Bacillus thuringiensis

دانشگاه:جهرم

دانشکده:کشاورزی

91آذر ماه

مقدمه

Bacillus thuringiensis اBی BT ی آشنا در کنترل آفات و حشراتBنام از بیBش تولیBد در کBه تعداد 90اسBت و میکروبی های کBش آفBت %

زیادی از گیاهان فراریخته مقاوم به حشرات کاربرد دارد ؛

( (یBک باکتری اسپورزای Bacillus thuringiensisباسBیلوس تورنژنسBیسگرم مثبت است که در خاک های سراسر دنیا یافت می شود.

تاریخچه ژاپنی1901در سBال زیسBت شناس Ishiwata بیماری بررسBی علBت در حال sotto که بود

باکتری را در کرم ابریشم مرده یافت و علت مرگ آنها را ناشی از این باکتری دانست. ارنسBت برلینBر ایBن باکتری را کBه سBبب مرگ پروانBه آرد مدیترانBه بود کشف کرد.او 1911در سBال

نام آBن را بBه دلیBل شهBر آلمانBی تورنجینیBا کBه پروانBه در آBن پیدا شده بود باسBیلوس تورنجنسیس گذارد.

برلینر از و جود یک کریستال در آن خبر داد.1915در سال فرانسوی ها فرمول تجاری آنرا تولید کردند که آن را اسپورین نامیدند.1938که در سال

از ایBن بلور های سBمی برای دفع حشرات از Plant Genetic System کمپانBی 1985در سBال استفاده کرد.Tobaccoگیاه

. بگیرندE.coliژن آن را کلون کردند و توانستند این سم را از 1987درسال

Bacillus thuringiensis spore and protein crystals

Lief cycle

:این باکتری چندین انوع توکسین تولید می کند

آلفا اندو توکسین: این توکسین عالوه بر حشرات بر روی موش و دیگر مهره داران دارای اثر سمی می

باشد.

بتا اگزو توکسین:در برخی از گونه های این باکتری تولید شده و بر روی پستانداران عوارض عمده ای

دارد.

گاما اگزو توکسین:بر روی حشرات اثر سمیت ندارد.دلتا اندو توکسین:در هنگام تشکیل اسپور ودر مرحله

مرگ تولید می شود.

امروزه در فراورده های تجاری از سویه هایی از این باکتری که دلتا اندو توکسین تولید می نمایند استفاده

می شود.و ازآلفا و بتا اگزو توکسین چون عالوه بر حشرات بر پستانداران نیز اثر نامطBلوب

.دارد .استفاده نمی شود

E.coli نحوه استفاده از سم باکتری بعد از گرفتن آن از باکتری

.تولید حشره کش:به صورت گرد یا پودر قابل تعلیق در آب ارائه می شود و جزء 1پرمصرفترین عوامل کنترل میکروبی حشرات به شمار می رود.

.تولید گیاه ترا ریخته:این گیاهان حاوی ژن تولید کننده توکسین که از باسیلوس 2تورنجنسیس بدست آمده است می باشند.این گیاهان خود قادر به تولید سم بوده و

آفات حشره ای را که از این گیاهان تغذیه می کنند از بین می روند.

این سم بر سه گونه از موجودات اثر کشندگی دارد

1.Lepidopetraشامل پروانه ها و کرم های صد پا 2.Dipteraشامل پشه ها و مگس ها 3.Coleopteraشامل سوسک ها

نحوه اثر سم بر حشرات

توکسBین های ایBن باکتری کBه بBه " دلتBا اندو توکسBین " معروفنBد ، در حقیقت می تولیBد باکتری اسBپورزایی هنگام کBه هسBتند کریسBتالی های پروتئیBن اندو دلتا " مBی بلعیده حشره توسBط توکسBین ایBن کBه هنگامBی . شونBد توکسBین شود .پروتئین کریسBتالی در محتویات و شیره قلیایی روBده حشره تاثیBر آنزیBم های پروتئاز بBه قطعات کوچBک تBر تبدیBل می حBل شده و تحBت شود . در اثBر واکنBش هایBی که ایBن قطعات بBا سBلولهای اپBی تلیال روده میانی حشره انجام مBی دهنBد ، دیواره روده حشره سوراخ شده و محتویات روده تعادل عدم یک بروز موجBب امBر ایBن کBه گردد مBی مخلوط هموسBل بBا بیوشیمیایBی در بدن الرو مBی شود کBه برای حشره کشنده اسBت . پس از جذب میزان کافBی از توکسBین و صBورت پذیرفتBن فعل و انفعاالت مذکور ، الرو دست از تغذیه می کشد، در نتیجه ظرف چند روز از گرسنگی می میرد

.

BTچند مثال از کاربرد های

Pseudomonas fluorescence به باکتری خاکزی BTانتقالB ژن - این اضافBه کردن و باشBد بBا ریشBه غالت و سBویا همزیسBت مBی کBه باکتری به خاک می تواند خسBارت کرم اگروتیBس یا شBب پره زمستانی

(Agrotis ipsilon or Black cutworm. در غالت را کنترل کند)

ژBن Bانتقال -BT کBی بBه Endophyte Microorganism داخل کBه آغشته و شود مBی تکثیBر و کنBد مBی زندگBی گیاهان آوندی دسBتگاه سازی بذور ذرت و برنج با آنها ، موجبB کنترلB کرم ساقه خوار ذرت و

برنج می شود .

شناسایی و تعیین سروتیپ سویه های بومی باسیلوس تورنجینسیس در خاک های مختلف استان فارس

باکتری تولیBد کنند یBا چنBد سBم پروتئینBی بلوری در مرحله 0باسBلوس تورنجینسBیس یBک اسپورزایی و با قابلیت از بین بردن حشره ها،نماتد ها و سلول های سرطانی می باشد.

ایBن پژوهBش،جداسBازی،شناسBایی و مقایسBه سBم پروتئینBی انجام از از این cry هدف باکتری در سویه های بومی جدا سازی شده از مناطق مختلف استان فارس می باشد.

یافتBه هBا : نمونBه های خاک شهBر شیراز بیشتریBن سBویه باکتری باسBیلوس تورنجینسیس را نسBبت به شهر های جهرم – کازرون – مرودشت – فسا و سد درود زن داشت.ازطرف دیگر و لسیتیناز سBالیسین،تولیBد و سBوکروز تخمیBر شامBل بیوشیمیایBی های آزمون اسBاس بر

هیدرولیز اسکولین جدایه ها در سه سروتیپ قرار گرفتند.

نمونه 25مواد و روش هBا : در این پژوهBش به صBورت تصBادفی منطقBه اسBتان فارس جمBع آوری گردیBد و بBا استفاده 6خاک از

انجام شد.شناسایی 7از روش متفاوت جدا سBازی سBویه هBا بیوشیمیایBی،بررسBی ساختار های آزمون اسBاس بر هBا نمونBه

بBا اسBتفاده از میکروسBکپ فازکنتراست و cryبلوری پروتئیBن SDS-PAGE پروتئینی توکسBین تنوع بررسBی منظور بBه cry انجام گرفت.

اینکه باوجود کBه داد نشان مطالعBه ایBن نتایBج : گیری نتیجBه جدایBه های مورد بررسBی دارای نوار های پروتئینBی بBا فراوانی

پروتویناز بBا برش از پBس هسBتند،امBا تمام Kمتفاوت تقریبآ کیلو دالتون را داشتند.34نمونه ها حدود اندازه

Selected References

1 -http://microbiology1.blogfa.com/post-89.aspx2 -http://journals.ut.ac.ir/page/article-frame.html?articleId=11292

3 -http://www.plantago.blogfa.com/post-269.aspxوان دریش، تامس بلوز؛ ترجمه محمدرضا موسوی- مبارزه بیولوژیکی- جهاد دانشگاهی مشهد 4-

39 – 38- صفحات 1379 - تولید کپسولهای نشاسته دار ٣ و علی اصغر پورمیرزا ٢، نورالدین شایسته ١ رسول زارعی 5-

حاوی مواد همراه مختلف و بررسی کارآیی آنها Bacillus thuringiensis Berlinerباکتری ( ٨۶٢-٨۵۵ - صفحات )١٣٨٢ - سال ۴ - شماره ٣۴- مجله علوم کشاورزی ایران - جلد

از خاک و اثر توکسین Bacillus thuringiensis سیامک نایبی-روش انتخابی برای جدا نمودن 6-- فصلنامه علوم زیستی دانشگاه آزاد اسالمی واحد MuscaDomesticaتولیدی آن بر روی

.61 – 53- صفحات 1388زنجان، سال اول- شماره سوم- تابستان http://aent.persianblog.ir/post/2828 پزشکان گیاهان7- ویکیپدیا8- – الهام معظمیان،نیما 89 مجله دنیای میکرب ها – سال سوم – شماره اول – بهار 9-

بهادر،منوچهر رسولی،نگار آذر پیرا