mikrobiyoloji el kitabı iii. basım rev02

Ekim 2014, Ankara

Editrler

Prof. Dr. A. Kadir HALKMANzlem Etiz SADA

El KitabIII. Bask

Mikrobiyoloji

Merck Mikrobiyoloji El Kitabii

ISBN : 978-975-00373-2-0

Merck Mikrobiyoloji El Kitab III. Bask

Anonymous 2014. Merck Mikrobiyoloji El Kitab 3. Bask. Editrler: A. Kadir HALKMAN, zlem Etiz SADA, Ankara, 250 s.

Bu kitabn telif haklar, www.mikrobiyoloji.orgye aittir. Orlab Laboratuvar Market ve Merck la Ecza ve Kimya A..nin katklar ile bastrlmtr.

Kaynak gsterilerek belirli bir blm ya da tamam oaltlabilir. www.mikrobiyoloji.org sitesinden bilgisayara cretsiz olarak indirilebilir.

steme Adresi: [email protected]

Grafik Tasarm Teknik Hazrlk ve BaskProsigma TasarmSleyman GLER0.312 342 22 [email protected] www.prosigma.net

1. Bask: 3000 AdetEkim, 2010

2. Bask: 5000 AdetKasm, 2011

3. Bask: 5000 AdetEkim, 2014

Agarl besiyerlerinin hazrlanmasnda agarn jelleme gcne gre hazrlama formlnde deiiklikler olabilir. Buna bal olarak kutu zerindeki hazrlama bilgisi ile bu kitapktaki hazrlama formlnde farkllk grlr ise kutu zerindeki bilgiler geerlidir.

Bu el kitabnn yaynlanmasndan sonra retici firma tarafndan ticari retimden kaldrlan,rn kodlar deitirilen besiyeri ve katklar ile benzeri rnler olabilir. Gncellemeler iin www.mikrobiyoloji.org adresinin izlenmesi nerilir.

Merck Mikrobiyoloji El Kitab iii

nsz

Merhaba,

Kasm 2010 tarihinde 3000 adet ve Kasm 2011 tarihinde 5000 adet olarak baslan bu el kitabnn sadece gzden geirilmi deil, yeni bilgilerin eklendii 3. basksn Ekim 2014 tarihinde meslektalarmzn yararlanmasna sunuyoruz.

Bu el kitabnn 2. bask nsznden farkl olarak geen 3 yl iinde, mikrobiyoloji.org / Merck mikrobiyoloji asndan kayda deer deiiklikler oldu. Merck & Millipore birlikteliine ilave olarak, Petri kutularna hazr dklm besiyeri reten Heipha devreye girdi. Merckoplate, Merckotube vb. rnler artk Heipha kodu ile retiliyor/ retilecek. Bu el kitabnn basld tarihte henz bu retim kotlar kesinlemedii iin bu baskda yer almad ancak mikrobiyoloji.org olarak konu zerindeki talepleri yantsz brakmyoruz.

Zaman iinde Merck dhil olmak zere ticari besiyeri retimi yapan kurulularda zellikle agarl besiyerlerinde agarn jelleme gcne bal olarak forml deiiklikleri olabileceini [email protected] zerinden meslektalarmza duyurduk ve bu el kitabna bylece yeni formlasyon ile tadk. Devamnda ENDO Agarda sadece E. coli deil, baka koliform bakterilerin de metalik yeil parlaklk verebileceini grdk ve bu el kitabna bu ekilde yazdk.

Bir dier nemli ilave 09. blmde Su Mikrobiyolojisi ve Membran Filtrasyon konular da bu baskya eklendi.

Trke dilbilgisi asndan da 2. basky bir daha gzden geirdik. Geen 3 yl iinde katkda bulunan tm meslektalarmza itenlikle teekkr ediyoruz.

lerideki basklarn; bu baskya gre, her adan daha iyi olmas iin meslektalarmzn daha youn katksn bekliyoruz.

Yararl olmasn diliyoruz.

Sevgiyle, bilgiyle

www.mikrobiyoloji.org

Ekim 2014, Ankara

Merck Mikrobiyoloji El Kitabiv

indekiler Sayfa

01. Genel Kullanm 1

02. Koliform grup, E. coli, E. coli O157, dier Enterobacteriaceae besiyerleri 33

03. Salmonella 77

04. Listeria monocytogenes 95

05. Fungi (Maya ve Kfler) 117

06. Clostridium spp., Campylobacter jejuni, Anaerobiyosis 135

07. Gda ve evre rneklerindeki dier patojen, indikatr ve rkl mikroorganizmalar iin besiyerleri 163

08. Klinik Mikrobiyoloji, Farmakopi 189

09. Su Mikrobiyolojisi 213

10. Hijyen 221

Ksaltmalar 232

Merck Mikrobiyoloji rn Listesi 233

ndeks 248

Merck Mikrobiyoloji El Kitab v

ISO 11133e Uyum

MERCK besiyerlerinin en nemli zelliklerinden biri, ISO 11133 Kltr Besiyeri Hazrlama ve retme Talimatlar standardna uyumlu olmasdr. Buna gre her parti besiyeri, performans testinden geirilmektedir.#ISO 11133 sayl standart basit olarak, her parti rnn kontroln ve genel olarak rnn standart kalitesini salamaktadr. Testlerde kullanlan mikroorganizmalar stok, ana ve kullanma kltr olarak korunmakta, geri alma testleri iyi ve ok iyi gibi gsterilmekle birlikte analiz sertifikasnda dorudan saysal deerlerle verilmektedir. Bu standartta; her parti besiyerinin kabul edilebilir kalitesi, besiyerinin amaca uygunluu ve besiyerinin uyumlu sonular salamas zerinde durulmakta ve bu kriterin kalite kontrol ilemlerinin nemli bir blm olduuna iaret edilmektedir.#BSE Sertifikas#

MERCK besiyerleri sadece BSE (Bovine Spongiform Encephalopathy; Deli Dana hastal etkeni) deil, bu gibi dier tm olumsuzluklardan arndrlmtr. MERCK besiyerlerinin bileimine giren hayvansal peptonlarda ve ekstraktlarda BSE bulunmad Avrupa Farmakopisi erevesinde belgelendirilmektedir.#Deneyim#

MERCKte deneyim, evrensel kalite anlay ve aratrmagelitirme kavramlar her zaman i ie olmutur. MERCK 1885 ylnda kazein peptonu retimi iin patent alm, 1895 ylnda mikrobiyoloji blmn kurmu, 1910 ylnda Nutrient Agar ve Nutrient Broth ile ticari retime gemi, 1950 ylnda granl besiyerlerini retmeye balamtr.##Granl Yap#

Granl yapda besiyeri reten yegne marka MERCKtir. Bu yapnn, kullanc asndan hi bir ekilde ihmal edilemez ok nemli stnlkleri vardr.

alanlarn salk gvencesi vardr:#

Tartm srasnda toz bulutu oluumu dierleri ile kyaslandnda yok denecek kadar azdr. Btn markalara ait dehidre besiyerleri iinde insan salna kayda deer lde zararl olan bileenler bulunabilir. Ayrca bunlar ar higroskobik olmalar nedeni ile cierlere zarar verebilir. Yaplan almalar, besiyeri eidine bal olarak deien tartm sonras toz oluumu, granl besiyerinde sadece 10-18 birim iken, dierlerinde 33-75

Neden MERCK Mikrobiyoloji rnleri?

Merck Mikrobiyoloji El Kitabvi

birim arasnda olduunu gstermitir. Granl yapsnda olmas nedeni ile MERCK besiyerlerinde kullanc zarar grmez. Bir dier deyi ile granl besiyeri kullanmak, ncelikle kullancnn sal asndan nemlidir.#Granl yaps besiyerine daha kolay erime zellii verir:#

Deneysel olarak da gsterilen bu stnlk ile sterilizasyon ncesi besiyerinin tam olarak eritilme kural daha kolay olarak salanmaktadr. Bu zellik sayesinde sularn mikrobiyolojik analizinde kullanlan ReadyCult Coliforms ve ReadyCult Enterococci sistemleri gelitirilmitir.#Depolamada nem ekme zellii dierlerine gre daha azdr:#

Tm dehidre besiyerleri higroskopik karakter gsterir. zellikle nemli blgelerde ve/veya laboratuvarlarda granl yapda olmayan besiyerleri normal raf mr iinde bile kullanlamaz hale gelirken, granl besiyeri standart raf mrn nemli ortamn her trl olumsuzluuna kar gvenle tamamlar.##

Depolama srasnda bileim deiiklii sz konusu deildir:

Granl olmayan besiyerlerinde zaman iinde bileenlerin besiyeri kutusu iindeki dalm deiir. Baz bileenler kutunun daha alt ksmlarna doru hareket eder. Bu hareket tmyle basit fizik kanunlar erevesinde gerekleir. Sonuta besiyerlerinde zayf/ar jelleme, yetersiz/ar selektivite gibi sorunlar ile karlalr. Bu gibi sorunlarn analiz sonucuna yansmas ise sahte (false) negatif ve sahte pozitif deerlendirmelerdir. Granl besiyerlerinde ise zaman iinde kutunun alt ve st katmanlar arasnda bileenlerin hareketi yine basit fiziksel kurallar erevesinde mmkn deildir.#Hazrlanp depolanm besiyerlerinde stabilite yksektir:#

Yaplan denemelerde taze hazrlanm ve hazrlandktan sonra 6 ay depolanm novobiyosin katkl mEC Broth ve mTSB besiyerlerinde Escherichia coli O157 serotipinin gelime performansnda ve E. coli ile Citrobacter youngae sularnn basklanmasnda kayp olmad aka grlmtr.

Katkl besiyeri analiz ekonomisi salar:#

Granl besiyerinde baz katklar bazal besiyeri bileimine dorudan ilave edilebilmektedir. E. coli O157:H7 analizinde kullanlan mTSB ve mEC Broth, Salmonella analizinde kullanlan Selenite Medium ile mayakf analizinde kullanlan DRBC Agar, RBC Agar, DG 18 Agar ve YGC Agar, bu tip besiyerlerine rnek olarak verilebilir. Bu besiyerlerinde katkya bal olmakszn istenildii kadar hazrlanma zellii kullanclara kayda deer lde ekonomik avantaj salamaktadr. Bu zelliin sadece granl yapdaki MERCK besiyerlerinde olduu gzden uzak tutulmamaldr.##

Merck Mikrobiyoloji El Kitab 1

01.

01Genel Kullanm

Seyreltme, ok amal besiyerleri ve katklar,

tanmlama besiyerleri ve kitleri, Sterikon (Otoklav indikatr)

Genel Kullanm2

01.

Genel Kullanm

Seyreltme, ok amal besiyerleri ve katklar, tanmlama besiyerleri ve kitleri, Sterikon (otoklav indikatr)

Merck Katalog No01.01. Maximum Recovery Diluent _______________________________ 1.1253501.02. Sodium Chloride Peptone Broth (buffered) _______________ 1.1058201.03. TAT Broth (Base) ___________________________________________ 1.1172301.04. RINGERs Tablets __________________________________________ 1.1552501.05. Tryptic Soy Broth (TSB) ____________________________________ 1.05459 01.06. Tryptic Soy Agar (TSA) ____________________________________ 1.05458 01.07. Tryptic Soy Broth (TSB) irradiated _________________________ 1.0080001.08. Brain Heart Broth __________________________________________ 1.10493 01.09. Brain Heart (Infusion) Agar ________________________________ 1.1382501.10. Nutrient Broth _____________________________________________ 1.05443 01.11. Nutrient Agar _____________________________________________ 1.05450 01.12. Plate Count Agar __________________________________________ 1.05463 01.13. Plate Count Skim Milk Agar _______________________________ 1.15338 01.14. Yeast Extract Agar acc. to ISO 6222 _______________________ 1.13116 01.15. R2A Agar __________________________________________________ 1.00416 01.16. Orange-serum Agar _______________________________________ 1.10673 01.17. MRS Broth _________________________________________________ 1.10661 01.18. MRS Agar _________________________________________________ 1.10660 01.19. M 17 Broth acc. to Terzaghi _______________________________ 1.1502901.20. M 17 Agar acc. to Terzaghi ________________________________ 1.1510801.21. Tryptone Water ____________________________________________ 1.1085901.22. MR-VP Broth ______________________________________________ 1.05712 01.23. SIMMONS Citrate Agar ___________________________________ 1.0250101.24. Urea Agar Base acc. to CHRISTENSEN ____________________ 1.0849201.25. Bactident Oxidase ________________________________________ 1.1330001.26. Vitamin Biotin Assay Broth ________________________________ 1.1198901.27. Agar-agar Ultra Pure, Granulated _________________________ 1.0161301.28. Sterikon plus Bioindicator ________________________________ 1.10274


01.01Maximum Recovery Diluent

ISO 6887ye uygundur. zotonik zelliine bal olarak eitli kaynaklardaki mikroorganizmalarn en yksek dzeyde geri alnmasn salar. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde seyreltme zeltisi olarak kullanlr. Pepton, fizyolojik tuzlu suya ozmotik destek salar. Dk pepton konsantrasyonuna bal olarak, 1-2 saat iinde bu zeltiye aktarlm rnekteki mikroorganizma saysnda art olmaz.

Bileim Peptone 1,0 g/L; Sodium chloride 8,5 g/L.

Hazrlanmas Damtk su iinde 9,5 g/L olacak ekilde hazrlanr. Amaca uygun kaplara (tp, erlen, vb.) datlp, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 7,00,2dir. Kullanma hazr zelti berrak ve renksizdir. Otoklav sonrasnda laboratuvar scaklnda 1 ay depolanabilir.

1 kutu ile hazrlanacak seyreltme zeltisi miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyeri ile 52,6 L seyreltme zeltisi hazrlanr. Standart gda analizinde 1 adet 90 mL ve 2 adet 9 mL olmak zere 1 analiz iin gereken zelti 108 mLdir. Buna gre 500 g olan 1 kutu dehidre Maximum Recovery Diluent ile 487 gda analizi yaplabilir.

15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.

Kalite Kontrol

Test Mikroorganizmalar Oda scaklnda belirli sresonunda koloni saym*

Escherichia coli ATCC 25922 0; 2; 4; 6 saatEnterococcus faecalis ATCC 11700 0; 2; 4; 6 saat

*: Test organizmalar, Maximum Recovery Diluent tpne eklendikten sonra tp, oda scaklnda (20-25 oC) bekletilir. 0; 2; 4 ve 6. saatlerde saym yaplr.

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No. AmbalajMaximum Recovery Diluent 1.12535.0500 500g

Genel Kullanm4

01.02Sodium Chloride Peptone Broth (buffered)

German Pharmacopeia DAB 10 standartlarna uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde seyreltme zeltisi olarak kullanlr.

Bileim Potassium dihydrogen phosphate 3,56 g/L; di-Sodium hydrogen phosphate dihydrate 7,23 g/L; Sodium chloride 4,3 g/L; Peptone from pepsin-digested meat 1,0 g/L.

Etki ekliMikroorganizma yk fazla olan rneklerin seyreltilmesi iin kullanlr. eriindeki fosfat, sodyum klorr ve peptonlar hassas mikroorganizmalarn geliimini destekler.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 16,1 g/L olacak ekilde damtk su iinde eritilir ve gerekirse 1-10 mL/L Tween 20 veya Tween 80 ilave edilip, amaca uygun kaplara (tp, erlen, vb.) datlarak otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Hazrlanm besiyeri berrak ve sarms renkli olup, 25 Cda pHs 7,00,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 31,0 L besiyeri hazrlanr.

15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.

Kalite Kontrol

Test mikroorganizmalar 4 saat iinde koloni saysnda azalma olmamasEscherichia coli ATCC 8739 +Staphylococcus aureus ATCC 6538-P +

rn Bilgilerirn ad Merck Kat. No Ambalaj

Sodium chloride Peptone Broth (buffered)1.10582.0500 500g1.10582.5000 5kg

Tween20 8.22184.0500 500 mLTween 80 8.22187.0500 500 mL


01.03TAT Broth (Base)

Casein-Peptone Lecithin Polysorbate Broth (Base)USP ynergelerine uygundur. zellikle farmakolojik ve kozmetik rnlerde hammadde ve son rnlerin in vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerinde seyreltme zeltisi olarak kullanlr.

Bileim Peptone from casein 20,0 g/L; Lecithin 5,0 g/L. Etki ekliYksek orandaki kazein-pepton ierii, spor geliimi iin ve hasar grm mikroorganizmalarn canlandrlmas iin gereken optimum artlar salar. Lesitin ve polisorbat (Tween 20) birok antimikrobiyel bileii inaktive eder.

Hazrlanmas25 g dehidre besiyeri, 0,96 L damtk su iine ilave edilip, 50 Ctaki su banyosunda eriyinceye kadar (yaklak 30 dakika) stlr. zerine 40 mL/L Tween 20 (Merck 8.22184) eklenip, amaca uygun kaplara (tp, erlen vb.) datlr ve otoklavda 121oCta 15 dakika sterilize edilir. Hazrlanm besiyeri lesitin ierdiinden dolay ok az bulank olabilmekle beraber berrak ve sarms olup, 25 Cta pHs 7,10,2 dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyeri ile katks ilave edilmi ekilde 20,0 L besiyeri hazrlanabilir.


Kalite KontrolTest mikroorganizmalar GelimeEscherichia coli ATCC 25922 iyiStreptococcus pyogenes ATCC 12344 iyiStaphylococcus aureus ATCC 25923 iyiClostridium perfringens ATCC 10543 iyiCandida albicans ATCC 10231 iyi

rn Bilgilerirn ad Merck Kat. No AmbalajCasein-peptone Lecithin Polysorbate Broth (Base) 1.11723.0500 500g

Tween20 8.17072.1000 1000 mL

Genel Kullanm6

01.04RINGERs Tablets Ringers zeltisi; 1/4 Kuvvetinde

ISO 6887 ve IDFye uygun bir seyreltme zeltisidir. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde st ve st rnleri iin seyreltme zeltisi olarak kullanlr.

1/4 kuvvetindeki Ringers zeltisi, bakteriler iin izotoniktir ve bylece bakterilerin doal ortamlarndaki ozmotik hasarlardan arndrlm olarak geri alnmalarn salar. Ringers zeltisi, fizyolojik tuzlu suya (serum fizyolojik) kyasla duyarl mikroorganizmalar iin fizyolojik olarak daha uygundur.

BileimSodium chloride 2,25 g/L; Potassium chloride 0,105 g/L; Calcium chloride (susuz) 0,06 g/L; Sodium bicarbonate 0,05 g/L. Burada verilen bileim dorudan 1/4 kuvvetinde olan standart kullanm iindir ve Ringers zeltisi her zaman 1/4 kuvvetinde olarak anlr.

Hazrlanmas1 tablet, 500 mL damtk suya ilave edilip kartrlr. Amaca uygun kaplara (tp, erlen vb.) datlp, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 6,90,1dir. Hazrlanm zelti berrak ve renksizdir.

1 kutu ile hazrlanacak zelti miktar 1 tablet ile 500 mL ve dolays ile 100 tablet ile 50 L zelti hazrlanr. Standart gda analizinde 1 adet 90 mL, 2 adet 9 mL olmak zere 1 analiz iin gereken zelti 108 mLdir. Buna gre 100 tablet olan 1 kutu Ringers tableti ile 462 adet gda analizi yaplabilir.

15-25 oCta ve tablet kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No. AmbalajRINGERs Tablets 1.15525.0001 1x100 tablet


01.05Tryptic Soy Broth (TSB)

CASO Broth (Casein-peptoneSoymeal-peptone Broth)EP ve USP standartlar ile AOAC, BAM, ISO ve SMWW ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde genel sv besiyeri olarak kullanlr.

CASO Brothun, hayvan kkenli olmayan proteinlerden hazrlanm (Tryptic Soy Broth (TSB) non animal origin Merck 1.00525), nlanarak sterilize edilmi (Tryptic Soy (CASO) Broth, irradiated Merck 1.00800) ve hayvan kkenli olmayan proteinlerden hazrlanp nlanarak sterilize edilmi (Tryptic Soy Broth (TSB) non animal origin, irradiated Merck 1.00550) granl yapda dehidre besiyeri formlar da vardr.

Bileim Peptone from casein 17,0 g/L; Peptone from soymeal 3,0 g/L; D(+) Glucose 2,5 g/L; Sodium chloride 5,0 g/L; di-Potassium hydrogen phosphate 2,5 g/L.

Etki ekliok amal kullanm alan olan, inhibitr ve indikatr iermeyen genel sv besiyeridir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 30,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde gerekirse stlarak eritilip, amaca uygun kaplara (tp, erlen vb.) datlr ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Hazrlanm besiyeri berrak sarms renkte olup, 25 oCta pHs 7,30,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre CASO Broth besiyeri ile 16,6 L besiyeri hazrlanr.


Kalite Kontrol (yaklak 100 mikroorganizma ekimi ile)Test mikroorganizmalar Gelime Test mikroorganizmalar Gelime20-25 Cda 3 gn inkbasyon 35 Cde 24 saat inkbasyon Staphylococcus aureus ATCC 6538 + Escherichia coli ATCC 8739 +Staphylococcus aureus ATCC 25923 + Staphylococcus aureus ATCC 6538 +Staphylococcus aureus ATCC 12228 + Streptococcus pneumoniae ATCC 6301 +Bacillus subtilis ATCC 6633 + Bacillus subtilis ATCC 6633 +20-25 Cda 5 gn inkbasyon Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 +Candida albicans ATCC 2091 + Salmonella Typhimurium ATCC 14028 +Candida albicans ATCC 10231 +Aspergillus niger ATCC 16404 +

rn Bilgileri rn Ad Merck Kat. No Ambalaj

Tryptic Soy Broth (TSB)1.05459.0500 500g1.05459.5000 5kg1.05459.9025 25kg

Genel Kullanm8

01.06Tryptic Soy Agar (TSA) CASO Agar (Casein-peptoneSoymeal-peptone Agar)

EP ve USP standartlar ile AOAC, BAM, ISO ve SMWW ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde genel kat besiyeri olarak kullanlr.

CASO Agarn analiz edilen rnekteki kalnt dezenfektanlar inaktive eden (Tryptic Soy Agar (CASO) with Polysorbate 80 and Lecithin, Merck 1.07324) granl yapda dehidre besiyeri formu da vardr.

Bileim Peptone from casein 15,0 g/L; Peptone from soymeal 5,0 g/L; Sodium chloride 5,0 g/L; Agar-agar 15,0 g/L.

Etki ekliok amal kullanm alan olan, inhibitr ve indikatr iermeyen genel kat besiyeridir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 40,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde stlarak eritilip, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir ve steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Hazrlanm besiyeri berrak ve sarms kahverengindedir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 7,30,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 12,5 L (1000 adet Petri kutusu/12,5 mL) besiyeri hazrlanr.


Kalite Kontrol

Test mikroorganizmalar Ekim(KOB/mL)% Geri

kazanmEscherichia coli ATCC 8739

103-105 70

Staphylococcus aureus ATCC 6538Streptococcus pyogenes ATCC 21059Bacillus subtilis ATCC 6633Candida albicans ATCC 10231Candida albicans ATCC 2091


Tryptic Soy Agar (TSA)1.05458.0500 500g1.05458.5000 5kg


01.07Tryptic Soy Broth (TSB) irradiated

CASO Broth (Casein-peptoneSoymeal-peptone Broth) irradiatedEP ve USP standartlarna uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan zel amal sterilite testlerinde (validation of aseptic filling; Media Fill Test) besiyeri olarak kullanlr.

CASO Brothun, gama nlar ile 48-62 kGy nlanmas ile retilmitir. Bu dozdaki nlama, sporlarn dahi tmyle imha edilmi olduunu garanti eder. Sterilite testi, hazrlanm besiyerinin inkbasyonu ile yaplr.

Bileim Peptone from casein 17,0 g/L; Peptone from soymeal 3,0 g/L; D(+) Glucose 2,5 g/L; Sodium chloride 5,0 g/L; di-Potassium hydrogen phosphate 2,5 g/L.

Etki eklinhibitr ve indikatr iermeyen genel sv besiyeridir. Zengin besin maddesi ierii, zor gelien (fastidious) mikroorganizmalarn dahi gelimesini salar.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 30,0 g/L olacak ekilde sterilitesi kontrol edilecek zelti iine eklenerek besiyeri oluturulur ve amaca uygun olarak inkbasyona braklr. Steril su ile hazrlanm besiyeri berrak sarms renkte olup, 25 oCta pHs 7,30,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 5 kg olan 1 kutu dehidre CASO Broth; irradiated besiyeri ile 166 L besiyeri hazrlanr. Dolays ile bu miktarda zeltinin sterilitesi kontrol edilir. 15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.

Kalite Kontrol (yaklak 10-100 mikroorganizma ekimi ile)Test mikroorganizmalar Gelime Test mikroorganizmalar Gelime20-25 Cda 3 gn inkbasyon 35 Cde 24 saat inkbasyon Staphylococcus aureus ATCC 6538 + Escherichia coli ATCC 8739 +Staphylococcus aureus ATCC 25923 + Staphylococcus aureus ATCC 6538 +Staphylococcus aureus ATCC 12228 + Streptococcus pneumoniae ATCC 6301 +Bacillus subtilis ATCC 6633 + Bacillus subtilis ATCC 6633 +20-25 Cda 5 gn inkbasyon Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 +Candida albicans ATCC 2091 + Salmonella Typhimurium ATCC 14028 +Candida albicans ATCC 10231 +Aspergillus niger ATCC 16404 +

Sterilite testinde 20-25 oC ve 30-35 oCta 2 hafta inkbasyon sonunda gelime olmamaldr.


Tryptic Soy Broth (TSB), irradiated 1.00800.0500 500 g1.00800.5000 5kg

Genel Kullanm10

01.08Brain Heart Broth

DIN Norm 10163 ile AOAC, BAM, ISO, SMWW ve USDA ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde zor gelienler de dhil olmak zere bakteriler iin genel sv besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Nutrient Substrate (beyin ekstrakt, kalp ekstrakt ve peptonlar) 27,5 g/L; D(+) Glucose 2,0 g/L; Sodium chloride 5,0 g/L; di-Sodium hydrogen phosphate 2,5 g/L.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 37,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde gerekirse stlarak eritilip, amaca uygun kaplara (tp, erlen vb.) datlr ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 7,40,2dir. Hazrlanm besiyeri berrak ve kahverengidir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 13,5 L besiyeri (1351 adet tp/10 mL) hazrlanr.


Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar nkbasyon Atmosfer GeliimStreptococcus pyogenes ATCC 19615 35 C/24 s aerobik/anaerobik iyi/ok iyiStreptococcus pneumoniae ATCC 6305 35 C/24 s aerobik/anaerobik iyi/ok iyiPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 35 C/24 s aerobik iyi/ok iyiCandida albicans ATCC 60193 35 C/48 s aerobik iyi/ok iyiBacteroides fragilis ATCC 25285 35 C/2-5 g anaerobik iyi/ok iyiHaemophilus influenzae ATCC 10211 35 C/2-5 g mikroaerofilik iyi/ok iyiStaphylococcus aureus ATCC 25923 35 C/24 s aerobik iyi/ok iyi

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No. AmbalajBrain Heart Broth 1.10493.0500 500g


01.09Brain Heart (Infusion) Agar

AOAC, BAM, ISO, SMWW ve USDA ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde zor gelien (fastidious) bakteriler iin de genel kat besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Nutrient substrate (beyin ekstrakt, kalp ekstrakt ve peptonlar) 27,5 g/L; D(+) Glucose 2,0 g/L; Sodium chloride 5,0 g/L; di-Sodium hydrogen phosphate 2,5 g/L, Agar-agar 15,0 g/L.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 52,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde stlarak eritilip, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir ve steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 7,40,2dir. Hazrlanm besiyeri berrak ve bazen hafif opalesent (menevi, yanar dner) ve kahverengindedir. Brain Heart Infusion Broth besiyerine (Merck 1.10493) 15 g/L olacak ekilde Agar-agar (Merck 1.01613) ilavesi ile de Brain Heart Agar besiyeri hazrlanabilir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 9,6 L besiyeri (769 Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanr.


Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar GeliimStreptococcus pyogenes ATCC 12344 iyi/ok iyiStreptococcus pneumoniae ATCC 6301 iyi/ok iyiStaphylococcus aureus ATCC25923 iyi/ok iyiErysipelothrix rhusiopathiae ATCC 19414 iyi/ok iyiLactobacillus acidophilus ATCC 4356 orta/iyiClostridium perfringens ATCC10543 iyi/ok iyi (anaerobik)Clostridium sporogenes ATCC11437 iyi/ok iyi (anaerobik)

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No. AmbalajBrain Heart Agar 1.13825.0500 500g

Staphylococcus aureus ATCC 25923

Genel Kullanm12

01.10Nutrient Broth

AOAC ve BAM ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde genel sv besiyeri olarak kullanlr. Zor gelien (fastidious) mikroorganizmalar, bu besiyerinde geliemeyebilir.

Bileim Peptone from meat 5,0 g/L; Meat extract 3,0 g/L.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 8,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde eritilir ve amaca uygun kaplara (tp, erlen vs.) datlr ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Hazrlanm besiyeri berrak ve sarms kahverenginde olup, 25 oCta pHs 7,00,2dir. Besiyeri bileimine %0,05 potasyum tellurit ilavesi ile Listeria monocytogenes iin zenginletirme besiyeri hazrlanabilir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 62,5 L besiyeri (6250 adet tp/10 mL) hazrlanr.


Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar GelimeStaphylococcus aureus ATCC 25923 orta/ok iyiStreptococcus pyogenes ATCC 12344 orta/ok iyiListeria monocytogenes ATCC 19118 orta/ok iyiEscherichia coli ATCC 25922 orta/ok iyiSalmonella Typhimurium ATCC 14028 orta/ok iyiPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 orta/ok iyiBacillus cereus ATCC 11778 orta/ok iyi

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajNutrient Broth 1.05443.0500 500g


01.11Nutrient Agar

AOAC, APHA, BAM, ISO ve SMWW ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde genel kat besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Peptone from meat 5,0 g/L; Meat extract 3,0 g/L; Agar-agar 12,0 g/L.

Etki eklinhibitr ve indikatr iermeyen, ok amal kullanm olan genel besiyeridir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 20,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde stlarak eritilip, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir ve 45-50 oCa soutulup steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Hazrlanm besiyeri berrak ve sarms kahverenginde olup, 25 Cta pHs 7,00,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 25,0 L besiyeri (2000 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanr.


Kalite Kontrol (spiral plater yntemi)

Test Mikroorganizmalar Ekim(KOB/mL)% Geri

kazanmStaphylococcus aureus ATCC 25923 103-105 70Listeria monocytogenes ATCC 19118 103-105 70/48 saatEscherichia coli ATCC 25922 103-105 70Salmonella Typhimurium ATCC 14028 103-105 70Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 103-105 70Bacillus cereus ATCC 11778 103-105 70

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No. AmbalajNutrient Agar 1.05450.0500 500g

Escherichia coli ATCC 25922 Salmonella Typhimurium ATCC 14028

Genel Kullanm14

01.12Plate Count Agar Casein-peptone Dextrose Yeast Agar; PCA

ISO 4833 ile AOAC, BAM, EPA ve SMWW ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde, toplam aerobik mezofil bakteri saymnda (Aerobik mezofil koloni says belirlenmesinde) kullanlan genel kat besiyeridir. nhibitr ve indikatr iermez. Baz mayalar da bu besiyerinde gelierek bakteri saysna dhil olabilir.

Bileim Peptone from casein 5,0 g/L; Yeast extract 2,5 g/L; D(+) Glucose 1,0 g/L; Agar-agar 14,0 g/L.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 22,5 g/L olacak ekilde damtk su iinde stlarak eritilip, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir ve steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Hazrlanm besiyeri berrak, ok ak sarms renktedir ve 25 oCta pHs 7,00,2dir. 1,0 g/L konsantrasyonda inhibitr iermeyen st tozu ilavesi ile st rnlerinde toplam aerobik mezofil bakteri saymnda kullanlan Plate Count Skim Milk Agar (Merck 1.15338) besiyeri de hazrlanabilir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 22,2 L (1777 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanabilir.


Kalite Kontrol

Test mikroorganizmalar Ekim (KOB/mL)% Geri

kazanmStaphylococcus aureus ATCC 6538

103-105 70

Streptococcus agalactiae ATCC 13813Lactococcus lactis ssp. lactis ATCC 19435Listeria monocytogenes ATCC 19118Lactobacillus acidophilus ATCC 4356Bacillus cereus ATCC 11778Escherichia coli ATCC 11775

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No Ambalaj

Plate Count Agar (Casein-peptone Dextrose Yeast Agar)1.05463.0500 500 g1.05463.5000 5 kg

Bacillus cereus ATCC 11778


01.13Plate Count Skim Milk Agar

DIN Norm 10192 ile IDF ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde, st ve rnlerinde toplam aerobik mezofil bakteri saymnda (Aerobik mezofil koloni says belirlenmesinde) kullanlan genel kat besiyeridir. nhibitr ve indikatr iermez. Baz mayalar da bu besiyerinde gelierek bakteri saysna dhil olabilir.

Bileim Peptone from casein 5,0 g/L; Yeast extract 2,5 g/L; Skim Milk Powder (no inhibitors) 1,0 g/L; Glucose 1,0 g/L; Agar-agar 10,5 g/L.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 20,0 g/L olacak ekilde oda scaklndaki damtk suda tartlr, 15 dakika kendi hlinde braklr. Sonra stlarak eritilip, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir ve steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Hazrlanm besiyeri berrak ve hafife opalesent (menevi, yanardner) sarms renktedir ve 25 oCta pHs 7,00,2dir.



Kalite Kontrol

Test Mikroorganizmalar Ekim(KOB/ml)% Geri

kazanmStaphylococcus aureus ATCC 25923

103-105 70

Staphylococcus agalactiae ATCC 13813Lactococcus lactis ssp. lactis ATCC 19435Listeria monocytogenes ATCC 19118Bacillus cereus ATCC 11778Escherichia coli ATCC 11775Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853Candida albicans ATCC 10231

rn Bilgileri

rn Ad Merck Kat. No AmbalajPlate Count Skim Milk Agar 1.15338.0500 500 g

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

Genel Kullanm16

01.14Yeast Extract Agar acc. to ISO 6222

ISO 6222ye uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde sulardaki toplam jerm saym ve aranmas iin kullanlan genel kat besiyeridir.

Dikkat: Yeast Extract Agar acc. to ISO 6222 (Merck 1.13116) ile Yeast Extract Agar (Merck 1.03750) bileim ve kullanm amac farkl olan 2 ayr besiyeridir.

Bileim Peptone from casein 6,0 g/L; Yeast extract 3,0 g/L; Agar-agar 15,0 g/L.

Etki ekliBesiyerinde inhibitr ve indikatr yoktur. ok sayda bakteri, maya ve kf bu besiyerinde geliebilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 24,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde kaynatlarak eritilip, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Otoklav sonras besiyeri scakl 45-50 oCa dnce ISO 6222ye gre dkme yntemi ile ekim yaplr. Otoklavlanm besiyeri, su banyosunda 45 oCta 4 saatten daha uzun sre ile tutulmamaldr. Hazrlanm besiyeri berrak, sar-kahverenkli ve pHs otoklav sonras 25 oCta 7,20,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyeri ile 20,8 L besiyeri (1666 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanabilir.


Kalite Kontrol

Test Mikroorganizmalar EkimKOB/mL*Gelime

362 C/48 saatGelime

222 C/72 saatEscherichia coli ATCC 25922 100 +Pseudomonas fluorescens ATCC 13525 100 +Enterococcus faecalis ATCC 11700 100 +Candida albicans ATCC 10231 100 +Aspergillus niger ATCC 16404 100 +

*: yaklak say

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajYeast Extract Agar acc. to ISO 6222 1.13116.0500 500g


01.15R2AAgar

EPA ve SMWW ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde ime sularnda heterotrofik toplam bakteri analizi iin kullanlan kat besiyeridir.

Bileim Yeast extract 0,5 g/L; Proteose peptone 0,5 g/L; Casein hydrolysate 0,5 g/L; Glucose 0,5 g/L; Soluble starch 0,5 g/L; Sodium pyruvate 0,3 g/L; di-Potassium hydrogen phosphate 0,3 g/L; Magnesium sulfate 0,05 g/L; Agar-agar 12,0 g/L.

Etki ekliYayma, dkme ve membran filtrasyon yntemlerinde kullanlabilir. Bu besiyeri dk besin ierii, dk inkbasyon scakl ve uzun inkbasyon sresi sayesinde ime suyunda zellikle stres altndaki ve klora direnli bakterilerin belirlenmesine elverilidir. Dk konsantrasyondaki maya ekstrakt, kazein hidrolizat, pepton ve glikoz ierii sayesinde hzl gelien bakterilerin yava gelienleri basklamas nlenir ve ok sayda bakterinin gelimesine izin verir. Niasta ve piruvat, zellikle hasar grm bakterilerin daha abuk gelimesine destek olur. nkbasyon 3 gnden daha uzun olacak ise Petri kutularnn mutfak tipi stre filme sarlarak inkbe edilmesi nerilir. Analiz raporuna inkbasyon scaklk ve sresi yazlmaldr.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 15,2 g/L olacak ekilde stlarak damtk su iinde eritilir ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Otoklav sonrasnda 45-50 oCa soutulup Petri kutularna 12,5er mL dklr. Hazrlanm besiyeri berrak ve hafif menevili olup renksizdir. pHs 25 oCta 7,20,2dir. Hazrlanm besiyeri buzdolabnda nem kayb olmamak kayd ile 4 hafta kadar depolanabilir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 32,8 L besiyeri (2631 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanabilir.

15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir. Kalite Kontrol

Test mikroorganizmalar Gelime35 C/24 saatGelime

20 C/72 saatEscherichia coli ATCC 25922 + +Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 + +Staphylococcus aureus ATCC 25923 + +Bacillus cereus ATCC 11778 + +

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No. AmbalajR2AAgar 1.00416.0500 500g

Genel Kullanm18

01.16Orange-serum Agar

COMPF ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde bata turungil meyve sular ve konsantrelerindeki aside direnli ve bozulma yapan mikroorganizmalarn izolasyonu, gelitirilmesi ve saym iin kullanlan kat besiyeridir.

Bileim Peptone from casein 10,0 g/L; Yeast extract 3,0 g/L; Orange extract 5,0 g/L;D(+) Glucose 4,0 g/L; di-Potassium hydrogen phosphate 3,0 g/L; Agar-agar 17,0 g/L.

Etki eklieriindeki portakal z, turungil meyve sularnda bulunan mikrobiyel florann (Bacillus, Lactobacillus, Leuconostoc trleri, kf vb.) zel gelime ihtiyalarn karlar.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 42,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde eritilir ve otoklavda 115 oCta 15 dakika sterilize edilir. Otoklav sonrasnda 45-50 oCa soutulup steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Ar stmadan kanlmaldr. Hazrlanm besiyeri berrak, yanardner ve sarms kahverenkli olup, 25 Cta pHs 5,50,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyeri ile 11,9 L (952 adet Petri kutusu/12,5 mL) besiyeri hazrlanabilir.



Test Mikroorganizmalar Ekim(KOB/mL)% Geri

kazanmBacillus cereus ATCC 11778 103-105 70Lactobacillus plantarum ATCC 14917 103-105 70Lactobacillus casei ATCC 393 103-105 70Leuconostoc mesenteroides ATCC 9135 103-105 70Candida albicans ATCC 10231 103-105 70

rn Bilgilerirn Bilgileri Merck Kat. No AmbalajOrange-serum Agar 1.10673.0500 500g

Lactobacillus plantarum ATCC 14917 Leuconostoc mesenteroides ATCC 9135


01.17MRS Broth

Lactobacillus Broth acc. to DE MAN, ROGOSA and SHARPEAPHA, COMPF ve SDM ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde Lactobacillus trlerinin gelitirilmesi iin sv besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Peptone from casein 10,0 g/L; Meat extract 8,0 g/L; Yeast extract 4,0 g/L; D(+) Glucose 20,0 g/L; di-Potassium hydrogen phosphate 2,0 g/L;Tween 80 1,0 g/L; di-Ammonium hydrogen citrate 2,0 g/L; Sodium acetate 5,0 g/L; Magnesium sulfate 0,2 g/L; Manganese sulfate 0,04 g/L.

Etki ekliBesiyeri bileimindeki polisorbat, asetat, magnezyum ve manganez, laktobasiller iin gelimeyi destekleyici faktrler olup, buna bal olarak MRS Broth, dier mikroorganizmalar inhibe etmekten ziyade, laktobasilleri tevik edici bir zellik gsterir. Laktobasillerin gelimesini tevik eden bu maddeler refakati flora zerinde zayf bir inhibisyon yapar. Bu durumda laktobasiller dndaki bakteriler ve baz mayalar da MRS Broth besiyerinde geliebilir. nkbasyonun mikroaerofil ortamda yaplmas nerilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 52,2 g/L olacak ekilde damtk su iinde eritilir ve amaca uygun kaplara datlp, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Besiyeri, Bifidobacterium spp. iin kullanlacak ise sterilizasyonun 118 oCta 15 dakika olarak yaplmas nerilir. Hazrlanm besiyeri berrak ve kahverenginde olup, 25 oCta pHs 5,70,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 9,5 L besiyeri (957 adet tp/10 mL) hazrlanr. Dierlerinden farkl olarak, MRS Broth (ve MRS Agar) besiyeri 3-4 ay gibi ksa bir sre iinde kullanlmayacak ise buzdolabnda korunmaldr.

Besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.

Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar GelimeLactobacillus acidophilus ATCC 4356 iyi/ok iyiLactobacillus plantarum ATCC 8014 iyi/ok iyiLactobacillus casei ATCC 393 iyi/ok iyiLactobacillus fermentum ATCC 9338 iyi/ok iyiEscherichia coli ATCC 25922 orta/iyiPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 yok

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajMRS Broth (Lactobacillus Broth acc. to De Man, Rogosa and Sharpe) 1.10661.0500 500g

Anaerobic jar 1.16387.0001 1 adetAnaerocult C 1.16275.0001 1x25 test

Genel Kullanm20

01.18MRS Agar Lactobacillus Agar acc. to DE MAN, ROGOSA and SHARPE

APHA, COMPF ve SDM ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde Lactobacillus trlerinin gelitirilmesi, izolasyonu ve saym iin kat besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Peptone from casein 10,0 g/L; Meat extract 10,0 g/L; Yeast extract 4,0 g/L; D(+) Glucose 20,0 g/L; di-Potassium hydrogen phosphate 2,0 g/L; Tween 80 1,0 g/L; di-Ammonium hydrogen citrate 2,0 g/L; Sodium acetate 5,0 g/L; Magnesium sulfate 0,2 g/L; Manganese sulfate 0,04 g/L; Agar-agar 14,0 g/L.

Etki ekliBesiyeri bileimindeki polisorbat, asetat, magnezyum ve manganez, laktobasiller iin gelimeyi destekleyici faktrler olup, buna bal olarak MRS Agar, dier mikroorganizmalar inhibe etmekten ziyade, laktobasilleri tevik edici bir zellik gsterir. Laktobasillerin gelimesini tevik eden bu maddeler refakati flora zerinde zayf bir inhibisyon yapar. Bu durumda laktobasiller dndaki bakteriler ve mayalar da MRS Agar besiyerinde geliebilir. nkbasyonun mikroaerofilik ortamda yaplmas nerilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 68,2 g/L olacak ekilde damtk su iinde stlarak eritilir ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Otoklav sonras 45-50 oCa soutulup, steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Besiyeri, Bifidobacterium spp. iin kullanlacak ise sterilizasyonun 118 oCta 15 dakika olarak yaplmas nerilir. Hazrlanm besiyeri berrak ve kahverenkli ve 25 oCta pHs 5,70,2dir.


Dierlerinden farkl olarak, MRS Agar (ve MRS Broth) besiyeri 3-4 ay gibi ksa bir sre iinde kullanlmayacak ise buzdolabnda korunmaldr. Besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.


Test mikroorganizmalar Ekim(KOB/mL)% Geri

kazanmLactobacillus acidophilus ATCC 4356

103-105 50

Lactobacillus sake ATCC 15521Lactobacillus lactis ATCC 19435Pediococcus damnosus ATCC 29358Bifidobacterium bifidum ATCC 11863 50*

Bacillus cereus ATCC 11778>105 zayf/gelime yok

Escherichia coli ATCC 25922

*: anaerobik inkbasyon


01.18

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajMRS Agar (Lactobacillus Agar acc. to De Man, Rogosa and Sharpe) 1.10660.0500 500g

Anaerobic jar 1.16387.0001 1 adetPetridish rack 1.07040.0001 1 adetAnaerocult C 1.16275.0001 1x25 testAnaerocult C mini 1.13682.0001 1x25 testAnaeroclip 1.14226.0001 1x25 adet

Bifidobacterium bifidum ATCC 11863 Lactobacillus casei ATCC 393

Genel Kullanm22

01.19M 17 Broth acc. to Terzaghi

COMPF ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde laktik streptokoklarn gelitirilmesi iin sv besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Peptone from soymeal 5,0 g/L; Peptone from meat 2,5 g/L; Peptone from casein 2,5 g/L; Yeast extract 2,5 g/L; Meat Extract 5,0 g/L; Lactose mono-hydrate 5,0 g/L; Ascorbic acid 0,5 g/L; Sodium -glycerophosphate 19,0 g/L; Magnesium sulfate 0,25 g/L.

Etki ekliBu dehidre besiyerinde Lactococcus cremoris, Lactococcus diacetilactis, Lactococcus lactis gibi zor gelien trlerin gelitirilmesi, dier benzer besiyerlerinden daha stndr. Bileimindeki -glycerophosphate, besiyerinin tamponlama kapasitesini arttrarak laktik streptokoklarn geliimini tevik eder. Besiyerinde selektif bir katk yoktur. Sadece, laktik streptokoklarn geliimi desteklenir. Dolays ile laktik streptokoklarn dndaki mikroorganizmalar da bu besiyerinde geliebilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 42,5 g/L olacak ekilde damtk su iinde eritilir ve uygun kaplara datlarak (tp, erlen) otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Hazrlanm besiyeri berrak ve kahverengi olup, 25 Cta pHs 7,20,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 11,7 L besiyeri (1176 adet tp/10 mL) hazrlanr.


Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar GelimeStreptococcus agalactiae ATCC 13813 iyi/ok iyiLactococcus lactis ssp. cremoris ATCC 19257 iyi/ok iyiLactococcus lactis ssp. lactis ATCC 19435 iyi/ok iyiEnterococcus faecalis ATCC 11700 iyi/ok iyiEscherichia coli ATCC 25922 iyi/ok iyiStaphylococcus aureus ATCC 25923 iyi/ok iyiLactobacillus acidophilus ATCC 4356 iyi/ok iyiLactobacillus casei ATCC 393 iyi/ok iyiLactobacillus fermentum ATCC 9338 orta/iyi

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajM 17Agar Broth acc. to TERZAGHI 1.15029.0500 500g


01.20M 17 Agar acc. to Terzaghi

COMPF ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde laktik streptokoklarn saym, gelitirilmesi ve faj almalar iin kat besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Peptone from soymeal 5,0 g/L; Peptone from meat 2,5 g/L; Peptone from casein 2,5 g/L; Yeast extract 2,5 g/L; Meat Extract 5,0 g/L; Lactose mono-hydrate 5,0 g/L; Ascorbic acid 0,5 g/L; Sodium -glycerophosphate 19,0 g/L; Magnesium sulfate 0,25 g/L; Agar-agar 12,75 g/L.

Etki ekliBu dehidre besiyerinde Lactococcus cremoris, Lactococcus diacetilactis, Lactococcus lactis gibi zor gelien trlerin gelitirilmesi, dier benzer besiyerlerinden daha stndr. Laktozu metabolize edemeyen mutasyona uram bakteriler M 17 Agar besiyerinden izole edilebilirler. Yapsndaki -glycerophosphate, besiyerinin tamponlama kapasitesini arttrarak laktik streptokoklarn geliimini ve byk faj plaklarnn oluumunu tevik eder. Besiyerinde selektif bir katk yoktur. Sadece, laktik streptokoklarn geliimi desteklenir. Dolays ile laktik streptokoklarn dndaki mikroorganizmalar da bu besiyerinde geliebilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 55,0 g/L olacak ekilde stlarak damtk su iinde eritilir ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Otoklav sonrasnda 45-50 oCa soutulup, steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Hazrlanm besiyeri berrak ve kahverengi olup, 25 Cta pHs 7,20,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 9,0 L besiyeri (727 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanr.


Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar GelimeStreptococcus agalactiae ATCC 13813 iyi/ok iyiLactococcus lactis ssp. cremoris ATCC 19257 iyi/ok iyiLactococcus lactis ssp. lactis ATCC 19435 iyi/ok iyiEnterococcus faecalis ATCC 11700 iyi/ok iyiEscherichia coli ATCC 25922 iyi/ok iyiStaphylococcus aureus ATCC 25923 iyi/ok iyiLactobacillus acidophilus ATCC 4356 orta/iyiLactobacillus casei ATCC 393 orta/iyiLactobacillus fermentum ATCC 9338 orta/iyi

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajM 17Agar acc. to Terzaghi 1.15108.0500 500g

Genel Kullanm24

01.21Tryptone WaterTryptone (ndol) Besiyeri

ISO 3811 ile APHA, EPA ve SMWW ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde, zellikle indol testi yaplmas iin kullanlan genel sv besiyeridir.

Bileim Peptone from casein 10,0 g/L; Sodium chloride 5 g/L.

Etki ekliBileimde bulunan kazein peptonu (tripton) yksek miktarda triptofan ierir. Triptofan, indol pozitif mikroorganizmalar tarafndan paralanr ve ortaya kan indol, Kovacs Indol Reagent (Merck 1.09293) ya da Bactident Indole (Merck 1.11350) ile belirlenir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 15,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde zlr, tplere 10ar mL datlp otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Hazrlanm besiyeri berrak ve sarmsdr, 25 oCta pHs 7,30,2dir. Vibrio analizinde kullanlaca zaman besiyerine 25 g/L NaCl ilave edilerek hazrlanr.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 33,3 L besiyeri (3333 adet tp/10 mL) hazrlanr.


Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar Gelime ndolEscherichia coli ATCC 25922 iyi/ok iyi +Proteus vulgaris ATCC 13315 orta/iyi +Morganella morganii ATCC 25830 orta/iyi +Enterobacter cloacae ATCC 13047 iyi/ok iyi Salmonella Typhimurium ATCC 14028 orta/ok iyi Staphylococcus aureus ATCC 25923 orta/iyi

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajTryptone Water 1.10859.0500 500gBactident Indole (damlalkl ie) 1.11350.0001 30 mLKOVCS Indole Reagent 1.09293.0100 100 mL


01.22MR-VP Broth

Methyl-red VOGES-PROSKAUER BrothDIN 101 60 ve DIN 10 181 ile AOAC, BAM, ISO ve SMWW ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde koliform grup bakterilerin tanmlama testlerinden Metil Red (MR) ve Voges Proskauer (VP) testleri iin kullanlr.

Bileim Peptone from meat 7,0 g/L;D(+) Glucose 5,0 g/L; Phosphate buffer 5,0 g/L.

Etki ekliBileimde, inhibitr yoktur. nkbasyon sonrasnda kltre ayr ayr MR ve VP testleri uygulanr.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 17,0 g/L olacak ekilde damtk su iinde eritilip, standart deney tplerine 5er mL olarak datlr ve otoklavda 121 oC da 15 dakika sterilize edilir. Hazrlanm besiyeri berrak, sarms-kahverenktedir ve 25 oCta pHs 6,90,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyeri ile 29,4 L (5882 adet tp/5 mL) besiyeri hazrlanabilir.


Kalite Kontrol Test mikroorganizmalar Gelime MR VPEscherichia coli ATCC 25922 iyi/ok iyi + Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 iyi/ok iyi +Klebsiella pneumoniae ATCC 10031 iyi/ok iyi +Enterobacter cloacae ATCC 13047 iyi/ok iyi +Serratia marcescens ATCC 14756 iyi/ok iyi +

rn Bilgilerirn ad Merck Kat. No AmbalajMR-VP Broth 1.05712.0500 500gAmmonia solution 25% 1.05432.1000 1 LCopper sulfate 1.02790.0250 250gCreatine (monohydrate) 8.41470.0050 50gEthanol absolute 1.00983.1000 1 LMethyl red 1.06076.0025 25gNaphthol-(1) 1.06223.0050 50gPotassium hydroxide pellets 1.05033.0500 500g

Genel Kullanm26

SIMMONS Citrate Agar01.23

AOAC, BAM, ISO ve USDA ynergesine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mik-robiyolojik analizlerde koliform grup bakterilerin tanmlama testlerinden sitrat testi iin kullanlr.

Bileim Ammonium dihydrogen phosphate 1,0 g/L; K2HPO4 1,0 g/L; NaCl 5,0 g/L; Sodium citrate 2,0 g/L; MgSO4 0,2 g/L; Bromothymol blue 0,08 g/L; Agar-agar 13,0 g/L

Etki ekli Bu besiyerindeki tek karbon kayna sitrattr. Buna bal olarak sitratn karbon kayna olarak kul-lanlmas halinde besiyerinin pHs ykselir ve bu durum pH indikatr aracl ile belirlenir. Genel-likle 37 oCta 48 saat sren inkbasyondan sonra besiyerinin orijinal rengi olan koyu mavi rengin korunmu olmas sitratn kullanlmadn gsterir. E. coli, Shigella, Salmonella Typhi, Salmonella Paratyphi A tipik sitrat negatif bakterilerdir. nkbasyon sonunda besiyeri renginin yeile dn-mesi ise sitratn kullandnn gstergesidir ve Citrobacter, Enterobacter, Salmonella Paratyphi B, Klebsiella, Arizona, Serratia tipik sitrat pozitif bakterilerdir.

Hazrlanmas Dehidre besiyeri, 22,3 g/L olacak ekilde damtk su iinde stlarak (kaynar su banyosunda 5-10 dakika tutularak ve srekli kartrlarak ya da mikrodalga frn kullanlarak) tam olarak eritilir. Be-siyeri henz sv halde iken, standart 16x160 mm tplere 7er mL olarak datlp, 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Otoklav knda besiyeri henz sv iken tpler 1-1,5 cm yksekliinde bir ubua yatrlarak (tpn dibinde 2-2,5 cm yksekliinde bir besiyeri kalnl olacak ekilde) besiyerinin katlamas beklenir. Hazrlanm besiyeri berrak ve yeil renkte olup, 25 Cta pHs 6,60,2dir. 1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyeri ile 22,4 L (3203 adet tp/7 mL) besiyeri hazrlanabilir.


Kalite Kontrol

rn Bilgileri

Test mikroorganizmalar Gelime Mavi renk

Enterobacter cloacae ATCC 13047 iyi/ ok iyi +

Salmonella Typhimurium ATCC 14028

iyi/ ok iyi +

Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 iyi/ ok iyi +

Escherichia coli ATCC 25922 yok/ zayf

Shigella flexneri ATCC 12022 yok/ zayf

Morganella morganii ATCC 25830 yok/ zayf

rn ad Merck Kat. No Ambalaj

SIMMONS Citrate Agar 1.02501.0500 500 g Yeil (orijinal) renk (solda): Sitrat negatif sonu; E. coli

Mavi renk (sada): Sitrat pozitif sonu; Enterobacter cloacae


01.24Urea Agar base acc. to CHRISTENSEN

ISO 6579, DIN Norm 10160 standartlarna ve USDA ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde re testi ile mikroorganizma tanmlanmasnda kullanlan kat besiyeridir.

Bileim Peptone from meat 1,0 g/L;D(+) Glucose 1,0 g/L; Sodium chloride 5,0 g/L; Potassium dihydrogen phosphate 2,0 g/L; Phenol red 0,012 g/L; Agar-agar 12,0 g/L.

Etki eklire, urease enzimi ile CO2 ve amonyaa paralanr. Oluan amonyak pHy ykseltir ve sonuta pH indikatr aracl ile renk krmzdan sar-pembeye dner. Besiyerinin yzeyine youn bir srme yaplr. nkbasyon 35 oCta 5-48 saat srer. Alama younluu ve enzim aktivitesine bal olarak pozitif sonular 5 saat sonunda alnabilir. Bu test iin 1 tpn alanmadan kontrol olarak braklmas, 1 tpn Proteus sp ile (pozitif ahit) ve 1 tpn de E. coli (negatif ahit) ile alanmas nerilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 21,0 g/L olacak ekilde stlarak damtk suda eritilir ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sre ile sterilize edilir. Otoklav sonras 45 oCa soutulup, zerine 50 mL/L hesabyla filtre ile sterilize edilmi %40 re zeltisi eklenir, kartrlr ve steril tplere 7er mL datlp, dip ksm yaklak 2,5 cm olacak ekilde yatk agar hazrlanr. Hazrlanm besiyeri berrak ve krmz renklidir. pHs 25 oCta 6,80,2dir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden (re ilave edilmi halde), 25,0 L besiyeri (3571 adet tp/7 mL) hazrlanr.


Kalite KontrolTest mikroorganizmalar Gelime RenkEscherichia coli ATCC 25922 iyi/ok iyi sarShigella flexneri ATCC 12022 iyi/ok iyi sarSalmonella Typhimurium ATCC 14028 iyi/ok iyi sarKlebsiella pneumoniae ATCC 13883 iyi/ok iyi krmzProteus vulgaris ATCC 13315 iyi/ok iyi krmzProteus mirabilis ATCC 14153 iyi/ok iyi krmzMorganella morganii ATCC 25830 iyi/ok iyi krmz

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajUrea Agar Base acc. to CHRISTENSEN 1.08492.0500 500g

Urea1.08487.0500 500g1.08487.1000 1000g

Genel Kullanm28

01.25Bactident Oxidase

In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde bakterilerde sitokrom oksidaz testinin yaplabilmesi iin bir ucunda reaktif blgesi olan test eritleridir.

Bileim Test blgesi N,N-Dimethyl-1,4-phenylenediammonium chloride (0,1 mol) ve -Naphthol (1,0 mol) ierir.

Kullanm ekliTestin uygulannda dorudan tek koloni ya da tek koloniden elde edilmi youn bakteri sspansiyonu, platin bir ze ile alnp test blgesine aktarlr. 20-60 saniye iinde kutu zerindeki renk skalas ile kyaslanmak zere mavi-meneke renk oluumu pozitif sonu olarak deerlendirilir. eridin test blgesine el srlmemelidir. 60 saniye sonrasnda kitte alnan pozitif sonu dikkate alnmamaldr.

Test kitinin depolanmasSadece kullanlacak miktarda eridin kutudan kartlmas ve kutu az skca kapal olarak 2-8Cta tutulmas gerekir. Kutunun az uzun sre ak braklrsa ve/veya gevek olarak kapatlp depolanrsa kit ile son kullanma tarihinden nce sahte (false) pozitif sonular alnabilir. Byle bir endie varsa oksidaz negatif olduu bilinen bir bakteri (rnein E. coli) ile test kiti kontrol edilmeli, pozitif sonu alnrsa kutunun tm ierii imha edilmelidir.

1 kutu ile yaplacak test miktar Bir kutuda 50 test eridi vardr. Dolays ile 1 kutu ile 50 test yaplabilir.

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajBactident Oxidase 1.13300.0001 50 test eridi

Klinik mikrobiyoloji asndan Oksidaz pozitif bakteriler:

Actinobacillus equuli, Actinobacillus ligniereslii, Aeromonas spp., Alcaligenes spp., Bac. anthracis, Bac.subtilis, Bordetella pertussis, Branhamella catarrhalis, Brucella spp., Campylobacter spp., Chromobacterium spp., Cordiobacterium hominis, Eikenella corrodens, Flavobacterium spp., Micrococcus spp., Moraxella spp., Neisseria spp., Pasteurella spp., Plesionmonas spp., Pseudomonas spp., Vibrio spp.

Klinik mikrobiyoloji asndan Oksidaz negatif bakteriler:

Acholeplasma spp., Acinetobacter spp., Actinobacillus, Actinomycetem comitans, Anaerobier spp., Bacillus spp., Bordetella parapertussis, Corynebacterium spp., Enterobacteriaceae spp., Gemella haemolysans, Haemophilus spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Listeria spp., Mycoplasma spp., Pasteurella haemolytica, Peptococcus spp., Peptostreptococcus spp., Pseudomonas mallei, Pseudomonas maltophilia, Staphylococcus spp., Streptobacillus, Streptococcus spp.


01.26Vitamin Biotin Assay Broth

AOAC ve USP ynergelerine uygundur. la, gda, yem ve dier pek ok sektrde in vitro (canl hcre dnda) olarak, mikroorganizmalar kullanlarak vitamin miktar tayininde kullanlan sv besiyeridir. Baz bakteri trleri ve mayalar belirli vitaminlere kar tam bamllk zellii gsterirler. Bu mikroorganizmalar (ihtiya duyduklar vitamin hari) gelimeleri iin gerekli olan bileenlerin tamamn ieren bir besiyerine ilave edildiklerinde gelimelerini tamamen durdururlar ya da hzla azaltrlar. htiya duyduklar vitaminin ilave edilmesi ile mikroorganizmalar gelimeye balar ve bu geliim, ilave edilen vitaminin konsantrasyonuna bal olarak deiir. Bu ynteme dayanarak baz vitaminlerin konsantrasyonlar, mikroorganizmalar kullanlarak, mikrobiyel gelime sonucu oluan bulankln (trbidimetrik olarak) veya metabolitlerin (r. laktik asit) (titrimetrik olarak) llmesi ile kantitatif olarak belirlenebilir. zellii ve miktardaki bilinen saf vitaminin artan konsantrasyonlar ile gerekletirilmi paralel almalar, bu vitamin iin analiz standardn oluturur.

Bileimi D(+) Glucose anhydrous 40g/L; Casein hydrolysate Vitamin-free 12g/L; DL-Alanine; L-Asparagine; L-Cysteinium chloride; L-Cysteine 200 mg/L; L-Tryptophane 100 mg/L; Adenine 20 mg/L; Guanosin 40 mg/L; Uracil 20 mg/L; Xanthine 10 mg/L; 4-Amino-benzoic acid 200 g/L; L(+) Ascorbic acid; D(+) Biotin (VitaminH); Calcium D(+) pantothenate 2 mg/L; Folic acid;Nicotin acid 2mg/L; Pyridoxol hydrochloride 4 mg/L; Pyridoxamine hydrochloride; Riboflavin 2 mg/L; Thiaminium dichloride 2 mg/L; di-Potassium hydrogen phosphate 1 g/L; Iron(II) sulfate 20 mg/L; Potassium dihydrogen phosphate 1g/L; Magnesium sulfate 400 mg/L; Manganese(II) sulfate 20 mg/L; tri-Sodium citrate dihydrate; Sodium acetate anhydrous 20g/L; Sodium chloride 20 mg/L.

HazrlanmasDehidre besiyeri, ksa sreli kaynatma ile 75,0 g/L olacak ekilde bidistile su iinde eritilir. Mikro-Inoculum Broth bileimi, Proteose peptone 5,0 g/L; Yeast extract 20,0 g/L; D(+)glucose 10,0 g/L;Potassium dihydrogen phosphate 2,0 g/L;Tween80 0,1 ml/L eklindedir. 10 g/L agar, Micro-Inoculum Brotha ilave edilir ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 6,80,1dir.

Analiz Yntemi-Dehidre besiyeri, 7,5 g/100 mL olacak ekilde bidistile su iinde eritilir.-Sk sk alkalayarak 2-3 dakika gibi ksa sreli kaynatma uygulanr.-Analiz edilecek rnek, dilsyon serisi eklinde tplere konur ve bidistile su ile 5 mLye tamamlanr.-Hazrlanm bu tplere 5er mL besiyeri datlr ve sterilize edilir.-Soutulmu tplere 1er damla inoklasyon kltr ilave edilir.-37 oCta 16-20 saat inkbasyona braklr.-Oluan bulanklk 546 nm dalga boyunda fotometrik olarak llr.

D-Biotin (Vitamin H) Testi rnek hazrlama: D-biotin miktar nceden bilinen rnek (r. ila sektr), suda starak homojenize edilir. Eer D-biotin miktar bilinmeyen rnek analiz edilecek ise ncelikle genel bir miktar belirlemesi yaplmaldr. Bunun iin, mmknse, konsantre edilmi ekstrakt hazrlanr ve 10lu dilsyon (seyreltme) serileri eklinde analiz edilir. Biotin, ba oluturmu durumdaysa (r. doal sebze rnleri) asit hidrolizi ile serbest hale getirilmelidir.

Asit hidrolizi: 1 g rnek 50 mL 1 N H2SO4 ierisinde homojenize edilir ve 121 oCta 2 saat

otoklavlanr. Soutulduktan sonra pH 4,5e ayarlanr. Santrifj edilerek znmeyen maddelerin kelmesi salanr ve stte kalan sv ksm pipet yardm ile alnr. Analiz edilebilir konsantrasyona ulaana kadar damtk su ile seyreltilir. Biotini, hayvansal materyallerden ekstrakte edebilmek iin 6 N H2SO4 kullanlacak ise otoklavlama sresi 121

oCta 1 saat olarak ayarlanmaldr.

noklasyon: Lactobacillus plantarum (ATCC 8014) suu, Micro-Inoculum Brotha ekilerek 37 oCta 24 saat inkbasyona braklr. Daha sonra kltr santrifj edilir, fizyolojik tuzlu su ile 3 defa ykanr ve mikrobiyel say 3x108 bakteri/mL olacak ekilde ayarlanr.

Genel Kullanm30

01.26

Kalibrasyon: D-biotin, buhar banyosunda stlarak 100 mg/L olacak ekilde bidistile suda (ierik: 100 mcg/mL) eritilir ve 1 ng/mLye seyreltilerek referans zelti hazrlanr. Bu zeltiden 0,0-0,2-0,4-0,8-1,0-1,5-2,0-2,5-3,0 ng D-biotin/10 mL dilsyon (seyreltme) serisi oluturacak ekilde tplere pipetlenir ve bidistile su ile 5 mLye tamamlanr. Kontrol tplerine (kltr ve sterilite kontrol iin) sadece 5,0 mL damtk su konulur.rnek: Analiz edilecek rnek zelti, kalibrasyon aamasndaki gibi dilsyon (seyreltme) serileri eklinde tplere datlr ve bidistile su ile 5 mLye tamamlanr.

Besiyeri hazrlama ve inoklasyon: Dehidre Vitamin Biotin Assay Broth besiyeri ksa sreli kaynatma ile 75 g/L olacak ekilde bidistile suda eritilir. pH kontrol edilir ve gerekirse ayarlanr (25 oCta pHs 6,8). rnek ve referans zelti dilsyonlarn ieren tm tplere 5 mL kltr besiyeri kontroll bir ekilde ilave edilir ve tpler kapaklar kapatlarak otoklavda 115 oCta 10 dakika sterilize edilir. Soutulmu tplere 1er damla alama kltr ilave edilir (sterilite kontrol tpleri hari). 37 oCta 16-20 saat inkbasyona braklr.

Deerlendirme: Tm tpler, fotometrik olarak 546 nm dalga boyunda incelenir ve optik bulanklklar (OD) llr. Referans zelti ile hazrlanm tplerden llen bulanklk deerleri standart madde miktarna karlk gelecek ekilde bir grafie aktarlr ve kalibrasyon erisi oluturulur. Analiz edilen rnekteki biotin miktar bu eriye gre hesaplanr. Suya kar kontrol kltr ile yaplan okumalarda OD (546 nm, 1 c)


01.27Agar-agar Ultra Pure, Granulated

In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde sv ortam katlatrmak iin ok yksek ultra saflkta besiyeri katks olarak kullanlr.

zellikleriUltra saflatrlm, yksek jelleme kuvvetinde, mineral ve dk kl ierikli ve dolaysyla safszlklardan arndrlm, toksik kontaminantlar olmayan, termodurik ve l bakteri iermeyen granl yapda bir besiyeri katksdr. Mkemmel safl yannda, kontroll jelleme scakl, kontroll erime scakl ve iyi difze olabilme gibi stnlkleri de vardr. Mikroorganizmalarn gelitirilmesinde, molekler genetik almalarda, Minimum nhibisyon Konsantrasyonu (MK) analizlerinde, elektroforez ve difzyon testlerinde baaryla kullanlr. Dk kl ve mineral ierii, antibiyotik MK ve difzyon testlerinde agarn interferensini nler.

Agar-agar ultra pure, besiyerini katlatrmak iin kullanlacaksa %1-1,5; besiyerindeki hareketlilik almalarnda %0,5; anaeroblarla yaplan almalarda %0,1 konsantrasyonda ve mikroaerofillerle yaplan almalarda daha dk miktarlarda kullanlr. Tamamen zlm halde 121 Cta 15 dakika otoklavlanr ve eer gerekliyse 25 Cta pH 7,00,2 olacak ekilde ayarlanr.

Tipik zellikleriGranl halde rengi Kahverengi-sar Ar (toksik) metaller (Pb gibi) %0,0005Grn Granl yapda Ca %0,1Erimi haldeki renk Ak amber Mg %0,05Erimi haldeki grn Yanardner-menevi Katlama noktas 32-36 CpH (%5 suda) 5,0-6,0 Erime noktas > 85 CKuruma kayb (nem) %10 Standart kullanm %1-1,5Slfatlanm kl %5

Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar Gelime Test Mikroorganizmalar GelimeStreptococcus agalactiae ATCC 13813 + (1) Escherichia coli ATCC 25922 + (1)

Staphylococcus aureus ATCC 25923 + (1) Streptococcus equinus DSM 20062 + (1)

Streptococcus pneumoniae ATCC 6301 + (1) Shigella sonnei ATCC 29930 + (1)

Erysipelothrix rhusiopathiae ATCC 19414 + (1) Mikrobiyoloji iin uygunluk + (1)

Streptococcus pyogenes ATCC 21059 + (1)

(1) Standart 1 Nutrient Brotha ilave edilmi ekli ile 24 saat sonra

Dehidre katknn depolanmas15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.


Agar-agar Ulta Pure, Granulated 1.01613.1000 1kg

Genel Kullanm32

Sterikon plus Bioindicator Biyolojik Sterilizasyon ndikatr01.28

FDA Form 2400 (3/01), EP ve USP ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde otoklav etkinliinin kontrol edildii biyolojik indikatrdr. Patojen olmayan canl bakteri sporu ierir.

Bileim Her ampulde bakteri geliimi iin sv besiyeri, fermente edilebilir karbohidrat ve pH indikatr ile 5X105-1X107 sayda Geobacillus stearothermophilus (Syn. Bacillus stearothermophilus) ATCC 7953 sporu vardr.

Prensip ve kullanm ekliGeobacillus stearothermophilus sporlar, sl ileme ok dayankldr. D121 deeri 1,5-2 dakikadr. Buna gre 121 oCta 15 dakika sren otoklavlama srasnda sporlarn tamam lm olmaldr. Standart otoklavlama srasnda otoklavn sy en zor alan yerlerine Sterikon yerletirilir, otoklavlama ilemi sonunda ampuller 60 oCta 24-48 saat inkbe edilir. Bu srenin sonunda ampul orijinal krmz-meneke rengini koruyor ise bakteri sporlarnn tmnn ld ve dolays ile otoklavn doru scaklkta alt anlalr. Tersine olarak, inkbasyon sonunda ampul sar-turuncu bir renk alm ise en az 1 adet sporun canl kald ve dolays ile ayn otoklavlama sreci iinde otoklavda bulunan malzemenin steril edilememi olma olaslnn var olduu anlalr.

Patojen olmasa bile ampullerin krlmamasna zen gsterilmeli ve ampuller Erlen iinde otoklava yerletirilmelidir.

USP, ampullerin etkinlik kontrol iin bir miktar ampuln 121 oCta 6 dakika tutulmasn nermektedir. Bu koulda, tm ampullerin pozitif sonu vermesi beklenmektedir.

Biyolojik indikatrn depolanmas ndikatr, buzdolab scaklnda olmak koulu ile son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir. Oda scaklnda en fazla 2 hafta tutulabilir. 30 oC zerindeki depolamalarda aktivitesini yitirir. Termofilik karakterli olduu iin oda scaklnda germinasyon olmaz.

1 kutu ile yaplacak analiz says250 litreye kadar olan otoklavlar iin 2, daha byk otoklavlar iin orantl olarak daha fazla indikatr kullanlmaldr. Ayrca her denemede 1 adet ahit (otoklavlanmam) ampuln, otoklavlanm ampul ile birlikte inkbasyonu nerilmektedir.


Sterikon plus Bioindicator1.10274.0001 15 ampul1.10274.0002 100 ampul

sar-turuncu renk: yetersiz sterilizasyon

krmz-meneke renk yeterli sterilizasyon


02.

02Koliform grup,

E. coli, E. coli O157, dier Enterobacteriaceae

besiyerleri

Koliform grup, E. coli, E. coli O157, dier Enterobacteriaceae besiyerleri34

02.

Koliform grup, E. coli, E. coli O157, dier Enterobacteriaceae besiyerleri

Merck Katalog No02.01. Lauryl Sulfate Broth ________________________________________1.1026602.02. Fluorocult Lauryl Sulfate Broth ____________________________1.1258802.03. VRB (Violet Red Bile Agar) Agar ____________________________1.0140602.04. Fluorocult VRB Agar ______________________________________1.04030 02.05. Chromocult Coliform Agar ________________________________1.1042602.06. Chromocult Coliform Agar ES _____________________________1.0085002.07. Chromocult TBX Agar _____________________________________1.16122 02.08. MacConkey Broth __________________________________________1.05396 02.09. MacConkey Agar ___________________________________________1.05465 02.10. Lactose Broth _______________________________________________1.07661 02.11. Brillant-green 2% Bile Broth ________________________________1.0545402.12. ENDO Agar _________________________________________________1.04044 02.13. EMB Agar ___________________________________________________1.01347 02.14. Fluorocult LMX Broth Modified ____________________________1.1062002.15. EC Broth ____________________________________________________1.10765 02.16. ReadyCult Coliforms ____________________________ 1.01298; 1.0129502.17. Lactose TTC Agar with Tergitol 7 __________________________1.07680 02.18. KOVCS Indole Reagent ___________________________________1.0929302.19. Bactident E. coli ___________________________________________1.13303

02.20 mTSB Broth _________________________________________________1.0920502.21. mEC Broth with Novobiocin ________________________________1.1458202.22. Sorbitol-MacConkey Agar __________________________________1.0920702.23. CT-Supplement ____________________________________________1.0920202.24. Singlepath E. coli O157 ___________________________________1.0414102.25. Duopath Verotoxins _______________________________________1.04144

02.26. Violet Red Bile Dextrose (VRBD) Agar ______________________1.1027502.27. Enterobacteriaceae Enrichment

Broth acc. to MOSSEL ______________________________________1.05394

02.28. Chromocult Enterobacter Sakazakii Agar _________________1.00873


02.01Lauryl Sulfate Broth

Lauryl Sulfate Tryptose Broth (LST Broth)ISO 4831 ve ISO 5541 ile AOAC, APHA, BAM, EPA ve SMWW ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde koliform grup bakterilerin EMS yolu ile saylmas iin nerilen selektif sv besiyeridir.

Bileim Tryptose 20,0 g/L; Lactose 5,0 g/L; Sodium chloride 5,0 g/L; Sodium Lauryl Sulfate 0,1 g/L; di-Potassium hydrogen phosphate 2,75 g/L; Potassium dihydrogen phosphate 2,75 g/L.

Etki ekliBesiyeri bileimindeki lauryl sulfate, refakati florann geliimini basklarken, yksek dzeyde bulunan besin maddeleri ve fosfat tampon laktozu yava kullanan koliform bakterilerin de hzl geliimini ve fazla miktarda gaz kn salar. nkbasyon sonunda gelime saptanan tplerde gaz k Durham tplerinde gaz birikmesi ile belirlenir. Koliform grup bakterilerin analizi ile ilgili uluslararas standartlara gre, inkbasyon sonunda gaz grlen tplerden dorulama iin Brillant-green 2% Bile Broth (Merck 1.05454) besiyerine ekim yaplmas gerekir. MUG katkl Fluorocult LST Broth (Merck 1.12588) besiyerinde pozitif sonu veren tplerde E. coli olup olmad birka dakika iinde belirlenebilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 35,6 g/L olacak ekilde damtk su iinde eritilip, iinde Durham tp bulunan tplere 10ar mL besiyeri datlr ve otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pH 6,80,2dir. Buzdolabnda 2 ay, oda scaklnda 1 ay depolanabilir. Hazrlanm besiyeri berrak ve sarms renktedir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden tek kuvvette 14 L (1404 tp/10 mL) hazrlanr. EMS yntemi ile yaplan standart analizde 9 tp kullanlacana gre 1 kutu dehidre besiyeri ile 156 analiz yaplr. 15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.

Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar Gelime Gaz Escherichia coli ATCC25922 iyi +Escherichia coli ATCC 8739 iyi +Citrobacter freundii ATCC43864 iyi +Staphylococcus aureus ATCC 25923 yok/dk Enterococcus faecalis ATCC19433 orta/iyi Aeromonas hydrophila ATCC 7966 iyi Aeromonas sobria Linx 16 iyi /dk

rn Bilgilerirn ad Merck Kat. No. Ambalaj

Lauryl Sulfate Broth1.10266.0500 500g1.10266.5000 5 kg


02.02Fluorocult Lauryl Sulfate BrothFluorocult LST Broth ( LST-MUG Medium)

ISO 11886, DIN Norm 10183 ve EWG 76/1604 standartlarna uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde koliform grup bakteriler ve zellikle Escherichia coli nin aranmas ve saylmas iin selektif sv besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Tryptose 20,0 g/L; Lactose 5,0 g/L; Sodium chloride 5,0 g/L; Sodium Lauryl Sulfate 0,1 g/L; di-Potassium hydrogen phosphate 2,75 g/L; Potassium dihydrogen phosphate 2,75 g/L; L-Trytophane 1,0 g/L; MUG 0,1 g/L.

Etki ekliBileimde bulunan Lauril slfat, refakati florann geliimini basklarken yksek dzeyde bulunan besin maddeleri ve fosfat tampon laktozu yava kullanan koliform bakterilerin de hzl geliimini ve fazla miktarda gaz kn salar. Gaz k, Durham tplerinde gaz birikmesi ile belirlenir. Gaz pozitif olan tpler koliform grup olarak iaretlenir. Bunlar 366 nm uzun dalga boylu UV el lambas (Merck 1.13203) ile lo bir ortamda kontrol edilir. Floresan ma grlen tpler E. coli olarak iaretlenir. Besiyeri bileiminde bulunan triptofan sayesinde dorudan indol testi yapmak mmkndr. ndol testi, besiyerine 1 mL Kovacs Indol Reagent (Merck 1.09293) ilavesi ile yaplr. ndol testi, sadece floresan ma veren kltrlere uygulanr ve bu ekilde sahte MUG pozitif sonulardan saknlm olunur. Floresann belirginletirilmesi iin tpe ilave edilen NaOH, indol testini etkilemez.

Bu besiyerinin kullanlaca tplerde nceden kendiliinden floresan verme (self fluoresans) testi yaplmaldr. Kendiliinden floresan veren tpler bu amala kullanlmaz.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 36,5 g/L olacak ekilde damtk su iinde eritilir, iinde Durham tp bulunan tplere 10ar mL datlp, otoklavda 121 oCta 15 dakika sterilize edilir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 6,80,2dir. Hazrlanm besiyeri berrak ve sarms renktedir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 13,6 L besiyeri (1369 adet tp/10 mL) hazrlanr.


Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar Geliim Floresan ndolEscherichia coli ATCC 25922 iyi/ok iyi + +Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 iyi/ok iyi Enterobacter aerogenes ATCC 13048 iyi/ok iyi Escherichia coli ATCC 25922 ve Enterobacter aerogenes ATCC 13048 karm iyi/ok iyi + +

Escherichia coli ATCC 25922 ve Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 karm iyi/ok iyi + +

Staphylococcus aureus ATCC 6538 yok/azBacillus cereus ATCC 11778 yok/azMicrococcus luteus ATCC 10240 yok/az


02.02

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No. AmbalajFluorocult Lauryl Sulfate Broth 1.12588.0500 500gBactident Indole (damlalkl ie) 1.11350.0001 30 mLKOVCS Indole Reagent 1.09293.0100 100 mLUV Lamp (366 nm) 1.13203.0001 1 adet

Soldaki 3 tp MUG pozitiftir


02.03VRB (Violet Red Bile Agar) Agar Violet Red Bile Lactose (VRBL) Agar

ISO 4832 ve FDA Form 2400a 3/01 ile APHA, COMPF, IDF ve SMD ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde koliform grup bakteriler iin selektif kat besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Peptone from meat 7,0 g/L; Yeast Extract 3,0 g/L; Lactose 10,0 g/L; Sodium chloride 5 g/L; Ox Bile (Bile Salt Mixture) 1,5 g/L; Neutral Red 0,03 g/L; Crystal Violet 0,002 g/L; Agar-agar 13,0 g/L.

Etki ekliBesiyeri bileiminde bulunan safra tuzlar ve kristal viyole, bata Gram pozitifler olmak zere refakati florann geliimini basklar. Laktoz pozitif bakterilerin varl pH indikatr ile koloni renginin krmzya dnmesi ve safra asitlerinin koloni etrafnda kelti oluturmas ile belirlenir. Dolaysyla 30-32 ya da 35-37 oCta 18-24 saat sren inkbasyondan sonra 1-2 mm apnda krmzms bir kelti zonu ile evrili krmz koloniler, laktoz pozitif Enterobacteriaceae yeleri olan koliform grup bakteriler olarak saylr. Enterokoklar ve koliform grup dndaki Klebsiella trleri bu besiyerinde toplu ine ba byklnde kk pembe koloniler olutururlarken, laktoz negatif olan Enterobacteriaceae yeleri renksiz koloniler meydana getirirler. Laktozdan baka eker ieren sv gdalarn dorudan ekiminde Enterobacteriaceae familyasnn baka trleri atipik koloniler oluturabilir. Atipik koloniler, Brillant-green Bile (BGB) Broth (Merck 1.05454) besiyerine alanarak gaz oluumu izlenmelidir. MUG katkl Fluorocult VRB Agar (Merck 1.04030) besiyerinde tipik kolonilerin E. coli olup olmad birka dakika iinde ve standart VRB Agar (Merck 1.01406) besiyerindeki tipik kolonilerin E. coli olup olmad en ge 2 saat iinde Bactident E. coli (Merck 1.13303) ile MUG esasl olarak hzl bir ekilde belirlenebilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 39,5 g/L olacak ekilde damtk su iinde kartrlarak kaynatlr ve kaynama baladktan sonra en ok 2 dakika daha kaynama scaklnda tutulup, hzla 45-50 oCa soutulur ve steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Baz standartlarda dkme kltr ve/veya 2. kat ilavesi nerilmektedir. Bu besiyeri otoklavlanmaz. Sterilizasyon, kaynar su banyosunda besiyeri eritilirken yaplm olur. Mikrodalga frnda kaynatlarak da sterilize edilebilir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 7,40,2dir. VRB Agar besiyerinin ar stlmasndan kanlmaldr. Ar stma selektiviteyi azaltr. Kaynar su banyosundaki sl ilem etkinliinin salanmas iin besiyerinin 250 mLden fazla hacimlerde hazrlanmamas nerilir. Hazrlanm besiyeri parlak ve koyu krmz renklidir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden 12,6 L besiyeri (1012 adet Petri kutusu/12,5 mL ya da ift kat allyorsa 840 adet Petri kutusu/15 mL) hazrlanr.15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.

Kalite KontrolTest mikroorganizmalar Ekim (KOB/mL) % Geri kazanm Koloni rengi kelmeEscherichia coli ATCC 11775

103-105 30

krmz +Salmonella Gallinarum NCTC 9240 renksiz-krmzms Shigella flexneri ATCC 29903 renksiz Yersinia enterocolitica ATCC 9610 renksiz Staphylococcus aureus ATCC 6538

>105 0,01Micrococcus luteus ATCC 9341Lactococcus lactis ATCC 19435Bacillus cereus ATCC 11778Lactobacillus plantarum ATCC 14917


VRB Agar (Violet Red Bile Agar)1.01406.0500 500g1.01406.5000 5kg

Bactident E. coli 1.13303.0001 1x50 test


02.04Fluorocult VRB Agar

VRB-MUG AgarBAM ve COMPF ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde koliform bakteriler ve zellikle Escherichia coli aranmas ve saylmas iin selektif kat besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Peptone 7,0 g/L; Yeast Extract 3,0 g/L; Lactose 10,0 g/L; Sodium chloride 5 g/L; Ox Bile (Bile Salt Mixture) 1,5 g/L; Neutral Red 0,03 g/L; Crystal Violet 0,002 g/L; MUG 0,1 g/L; Agar-agar 13,0 g/L.

Etki ekliBesiyeri bileiminde bulunan safra tuzlar ve kristal viyole, bata Gram pozitifler olmak zere refakati florann geliimini basklar. Laktoz pozitif bakterilerin varl, pH indikatr ile koloni renginin krmzya dnmesi ve safra asitlerinin koloni etrafnda kelti oluturmas ile belirlenir. Dolaysyla 30-32 ya da 35-37 oCta 18-24 saat sren inkbasyondan sonra 1-2 mm apnda krmzms bir kelti zonu ile evrili krmz koloniler, laktoz pozitif Enterobacteriaceae yeleri olan koliform grup bakteriler olarak saylr. Enterokoklar ve koliform grup dndaki Klebsiella trleri bu besiyerinde toplu ine ba byklnde kk pembe koloniler olutururlarken, laktoz negatif olan Enterobacteriaceae yeleri renksiz koloniler meydana getirirler. Laktozdan baka eker ieren sv gdalarn dorudan ekiminde Enterobacteriaceae familyasnn baka trleri atipik koloniler oluturabilir. nkbasyon sonrasnda koliform grup bakteriler arasnda uzun dalga boylu (~366 nm)UV el lambas ile (Merck 1.13203) ile floresan verenler E. coli olarak iaretlenir. Kolonilerin floresan may datmas nedeni ile gerekte olduundan daha fazla E. coli saylmasndan saknmak iin inkbasyon 18 saati gememelidir. Var/yok esasl testlerde inkbasyon sresi 24 saat olabilir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 39,6 g/L olacak ekilde damtk su iinde kartrlarak kaynatlr ve kaynama baladktan sonra en ok 2 dakika daha kaynama scaklnda tutulup, hzla 45-50 oCa soutulur ve steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Bu besiyeri otoklavlanmaz. Sterilizasyon, kaynar su banyosunda besiyerini eritirken yaplm olur. Mikrodalga frnda kaynatlarak da sterilize edilebilir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 7,40,2dir. VRB-MUG Agar besiyerinin ar stlmasndan kanlmaldr. Ar stma selektiviteyi azaltr. Kaynar su banyosundaki sl ilem etkinliinin salanmas iin besiyerinin 250 mLden fazla hacimde hazrlanmamas nerilir. Hazrlanm besiyeri parlak ve koyu krmz renklidir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 12,6 L besiyeri (1010 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanr.15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir.


02.04

Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar Gelime Koloni Rengi kelti MUGEscherichia coli ATCC 11775 iyi/ok iyi kmz + +Enterobacter aerogenes ATCC 13048 iyi/ok iyi krmz +/ Salmonella Gallinarum NCTC 9240 iyi/ok iyi renksiz Shigella flexneri ATCC 29903 iyi/ok iyi renksiz Yersinia enterocolitica ATCC 9610 orta/ok iyi renksiz Staphylococcus aureus ATCC 6538 yokMicrococcus luteus ATCC 9341 yokLactococcus lactis ssp. lactis ATCC 19435 yokBacillus cereus ATCC 11778 yokLactobacillus plantarum ATCC 14917 yok/zayf

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No AmbalajFluorocult VRB Agar 1.04030.0500 500gUV Lamp (~366 nm) 1.13203.0001 1 adet

Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Escherichia coli ATCC 11775


02.05Chromocult Coliform Agar

EPA ynergelerine uygundur. In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde koliform grup bakteriler ve E. coli aranmas ve saylmas iin selektif kat besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Casein peptone 1.0 g/L; Yeast extract 2.0 g/L; sodium chloride 5.0 g/L; monosodium phosphate 2.2 g/L; di-sodium hydrogen phosphate 2.7 g/L ; sodiumpyruvate 1.0 g/L; Sorbitol 1.0 g/L; tryptophan 1.0 g/L; Tergitol 7 0.15 g/L; 6-chloro-3-indoxyl-beta-D-galactopyranoside 0.2 g/L; 5-bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-glucuronic acid 0.1 g/L; isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside 0.1 g/L; agar-agar 10.0 g/L.

Etki ekliBesiyeri bileiminde bulunan seilmi peptonlar, piruvat ve fosfat tampon, ar hasar grm koliform bakterilerin kendilerini onarmalarn salarken tergitol-7, Gram pozitiflerin ve baz Gram negatiflerin geliimini basklar. Koliform grup bakteriler iin karakteristik olan -D-galactosidase enzimi, Salmon-GAL kromojenik substratn paralayarak koliform bakterilerin pembemsi krmz koloni oluturmasn salar. Bileimdeki X-Glucuronide substrat ise E. coli iin karakteristik olan -D-glucuronidase enzimi tarafndan paralanr. Bylece E. coli, koliform bakteri olarak Salmon-GALi paralamas yannda X-Glucuronide substratn da paralayarak dier koliform bakterilerden koyu mavi-meneke renkli koloni oluturmas ile ayrlr. Besiyeri bileimindeki triptofan varl, dorudan koloni zerinde indol testi yaplmasna izin verir.

Chromocult Coliform Agar besiyerinde dier Gram negatifler renksiz koloni olutururlar. Bunlardan bir ksm -D -Glucuronidase aktivitesi nedeni ile ak mavi-turkuaz renkli koloniler meydana getirirler. Gda analizlerinde zellikle Pseudomonas ve Aeromonas trleri bata olmak zere rnekte youn bir refakati flora kontaminasyonu var ise kaynatarak yaplan sterilizasyon sonrasnda besiyeri 45-50 oCa soutulup sefsulodin ilavesinin, besiyerinin selektivitesini artraca literatrde belirtilmektedir. lave edilecek sefsulodin miktar 1 L besiyeri iin yayma ve dkme yntemleri ile ekim yapldnda 5 mg; membran filtre ekimlerinde 10 mg olmaldr. 5 mg sefsulodin 1 mL damtk su iinde zlerek besiyerine ilave edilir. nkbasyon sresi 24 saattir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 26,5 g/L olacak ekilde damtk su iinde yaklak yarm saat sre ile kartrlarak kaynatlp 45-50 Ca soutulur ve steril Petri kutularna 12,5er mL dklr. Besiyerinde oluabilecek bulanklk, besiyeri performansn etkilemez. Bu besiyeri otoklavlanmaz. Ar stmadan kanlmaldr. Hazrlanm besiyeri opalesent (menevi, yanardner) ve sarms renktedir. Sterilizasyon sonras 25 oCta pHs 6,80,2dir. Buzdolabnda, k almayacak ekilde ve kurumay nlemek zere strech film ile sarlarak 6 ay depolanabilir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 18,8 L besiyeri (1509 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanr.

15-25 oCta ve besiyeri kutusu skca kapal tutulmak zere, kutu alm olsa dahi son kullanma tarihine kadar gvenle kullanlabilir

Kalite KontrolTest Mikroorganizmalar

% Gerikazanm Gelime Koloni rengi

Salmon-GAL

X- Glu ndol

E. coli ATCC 11775 70 iyi/ok iyi koyu mavi-meneke + + +E. coli DSMZ 502 70 iyi/ok iyi mavi-meneke + +Citr. freundii ATCC 8090 70 iyi/ok iyi somon-krmz + Salm. Enteritidis ATCC 13076 limit yok orta/ok iyi renksiz


02.05

Test Mikroorganizmalar

% Gerikazanm Gelime Koloni rengi

Salmon-GAL

X- Glu ndol

Ent. faecalis ATCC 19433 0,01 yok

rn Bilgilerirn Ad Merck Kat. No. AmbalajChromocult Coliform Agar 1.10426.0500 500gBactident Indole (damlalkl ie) 1.11350.0001 1x30 mLKOVCS Indole Reagent 1.09293.0100 100 mLMillipore S-PAK Membran Filtre 0,45 m, 47 mm HAWG047S6 4x150 adetMillipore EZ-PAK Membran Filtre 0,45 m, 47 mm EZHAWG474 4x150 adet

Citrobacter freundii ATCC 8090 Escherichia coli ATCC 11775


02.06Chromocult Coliform Agar ES

In vitro (canl hcre dnda) yaplan standart mikrobiyolojik analizlerde E. coli ve koliform grup bakterilerin beraberce aranmas ve saylmas iin selektif kat besiyeri olarak kullanlr.

Bileim Peptone 5,0 g/L; Potassium chloride 7,5 g/L; MOPS 10,0 g/L; Bile salts 1,15 g/L; Propionate 0,5 g/L; Agar-agar 10,0 g/L; 6-Chloro-3-indoxyl--D-galactopyranoside 0,15 g/L; Isopropyl--D-thiogalactopyranoside 0,1 g/L; 5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl--D-glucuronic acid 0,1 g/L.

Etki ekliPeptonlarn ve MOPSun uygun kombinasyonu, koliformlarn hzl gelimesini ve kromojenik bileenlerin optimum transformasyonunu salar. Safra tuzlar ve propiyonat, Gram pozitif ve Gram negatif refakati floray basklar. Koliform grup ve E. colinin beraberce belirlenmesi iki kromojenik substrat ile salanr. Salmon--D-GAL koliformlar iin karakteristik olan -D-galaktozidaz ile paralanr ve koliform kolonilerinin somonkrmz renkte olmasn salar. E. coli iin karakteristik olan -D-glucuronidaz enzimi ise X-beta-D-glucuronide substratn paralayarak koloninin mavi renk almasn salar. E. coli O157 serotipleri gibi -D-glucuronidaz enzimi olmayan baz bakteriler de somonkrmz renkli koloniler oluturur. Yksek asitli gdalarda asitlik ile koloni rengi arasnda etkileim olmamas iin Peptone Water; Buffered (Merck 1.07228) ya da Sodium chloride peptone Broth; buffered (Merck 1.10582) ile hazrlanm 1/10 seyreltisinin kullanlmas nerilmektedir.

HazrlanmasDehidre besiyeri, 34,5 g/L olacak ekilde damtk su iinde yaklak yarm saat sre ile kartrlarak kaynatlr ve 45-50 oCa soutulup Petri kutularna 12,5er mL dklr. Besiyeri bu scaklkta 2 saatten fazla bekletilirse kelti grlebilir. Bu besiyeri otoklavlanmaz. Ar stmadan kanlmaldr. Hazrlanm besiyeri berrak ve renksizdir. pHs 25 oCta 7,00,2dir. Buzdolab scaklnda 2 haftaya kadar depolanabilir.

1 kutu ile hazrlanacak besiyeri miktar 500 g olan 1 kutu dehidre besiyerinden, 14,4 L besiyeri (1159 adet Petri kutusu/12,5 mL) hazrlanr.


Kalite Kontrol

Test Mikroorganizmalar KOB/Petri % Geri Kazanm Koloni rengi

Escherichia coli ATCC 1177530-300 70

koyu mavi-menekeCitrobacter freundii ATCC 8090 somon-krmzEnterobacter cloacae ATCC 13047 somon-krmzAeromonas hydrophila ATCC 7966

1000 - 2000

1Serratia liquefaciens ATCC 27592

0.01Staphylococcus aureus A

mikrobiyoloji el kitabı iii. basım rev02

Documents