mikroskop i preparati
TRANSCRIPT
Mikroskopska vizualizacija morfolokih i funkcionalnih struktura bakterijske elije
Obrada materijalaObrada materijala predstavlja skup razliitih tehnika i postupaka koji imaju za cilj izolaciju, identifikaciju bakterija i po potrebi ispitivanje osetljivosti izolovanih bakterija na hemioterapijska sredstva.
MikroskopOptiki deloviOkular Makrozavrtanj Mikrozavrtanj Objektivi Telo mikroskopa Stoi za preparat Kondenzor Zavrtanj za pomeranje kondenzora Izvor svetla
Mehaniki delovi
MikroskopUkupno uvelianje mikroskopa: proizvod uvelianja okulara i uvelianja objektiva Razdvojna mo mikroskopa (rezolucija): najmanje rastojanje izmeu dve take na kome se one vide odvojeno (za svetlosne mikroskope 200 nm)
nerazdvojene
delimino razdvojene
razdvojene
Vrste preparata
1. Nativni preparat 2. Bojeni preparat
1. Direktni preparat (iz materijala) 2. Preparat iz kulture
MikroskopPreporuke za mikroskopiranje: koristiti objektive 10 ili 40 za posmatranje bakterija na nativnom preparatu koristiti imerzioni objektiv (100) za posmatranje bakterija na bojenom preparatu postaviti preparat tako da razmaz bude okrenut na gore, ka soivu objektiva
Nativni preparatNativni preparat omoguava vizualizaciju:
1. Oblika bakterija 2. Veliine bakterija 3. Pokretljivosti bakterija
Osnovni oblici bakterija
Koke (loptast)
Bacili (tapiast)
Spirohete (spiralan)
Kokobacili
Vibrio
Veliina bakterijanekoliko mikrona ali:
Thiomargarita namibia
Nativni preparatVrste nativnog preparata:
1. Nativni preparat (u uem smislu) 2. Visea kap 3. Tamno polje
Nativni preparat
Nativni preparat
Objektiv
Nativni preparat
Nativni preparat - visea kap
Nativni preparat - visea kap
Nativni preparat - tamno poljeSVETLO POLJE TAMNO POLJE
u svetlom polju se spirohete ne vide jer je popreni presek ovih bakterija 0,1 m (rezolucija svetlosnog mikroskopa je 0,2 m) tamno polje omoguava posmatranje spiroheta
Nativni preparat - tamno polje
Bojeni preparatBojeni preparat omoguava vizualizaciju:1. Oblika bakterija 2. Veliine bakterija 3. Rasporeda bakterija 4. Pojedinih struktura bakterijske elije (kapsula, spore, granule...) ne i pokretljivost
Raspored (grupisanje) bakterijaKoke Diplokoke Bacili Diplobacili Kokobacil
Streptokoke
Tetrade Sarcine
Streptobacili
Vibrio
Spirohete Stafilokoke
Bojeni preparatPodela bojenja u bakteriologiji: prosta bojenja sloena bojenja: diferencijalna specijalna
Prosto bojenje metilenskim plavim
Diferencijalna bojenja
bojenje po Gram-u bojenje po Ziehl-Neelsen-u
Bojenje po Gram-uOmoguava razlikovanje: Gram-pozitivnih bakterija (plavo-ljubiasto obojene) Gram-negativnih bakterija (crveno obojene) razlika u bojenju je posledica razlika u grai elijskog zida
elijski zid Gram pozitivnih bakterija
elijski zid Gram negativnih bakterija
Bojenje po Gram-uGram pozitivne bakterije Gencijana violet Rastvor joda Alkohol (etanol) Voda Karbol fuksin / safranin Voda Gram negativne bakterije
Bojenje po Gram-u
Specijalna bojenjaBojenje intracitoplazmatskih granula (po Neisser-u) Bojenje spora (po Hauser-u) Bojenje kapsule (po Olt-u)
Bojenje intracitoplazmatskih granula
Bojenje kapsule
Priprema razmaza za bojeni preparat