MORFOLOGÍA BACTERIANA - EXAMEN EN FRESCO Y TINCIÓN

SIMPLEMESA Nº

1

MIC

RO

IOLO

GÍA

MÉD

ICA

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UCO

Est. Med. Raymundo Gómez José Luis

GENERALIDADESBacteria: bacterium = bastónCaracterísticas

Procariota: pro=primitivo, karyon=núcleo

Ribosoma 70SPared bacterianaAusencia de esterolesAusencia de mitocondrias,

RE, AGÓrganos de MovilidadCromosoma únicoPlásmidos

Estructura de la célula bacteriana

MORFOLOGÍA MICROBIANA

Tamaño: 0.2 a 3-4 µm de

diámetro.Micoplasmas

(pequeñas)Forma:

CocosBacilosEspiralesFilamentosasPleomórficas

Tamaño pequeño intercambio más eficiente,

permite mayor velocidad metabólica

Según su forma y agrupación: Cocos Bacilos Espirilos Vibrios

Clasificación de la bacterias

De aspecto redondeado: diplococos: que aparecen aislados o en

grupos de dos. estreptococos :forman cadenas

arrosariadas: estafilococos : sarcinas: grupos arracimadoso masas

cúbicas Ejemplos: Diplococos (Diplococcus pneumoniae,

causante de la pulmonía bacteriana). Estafilococos (Staphylococcus aureus, que

vive sobre la piel y puede producir erupciones)

Estreptococos (Streptococcus thermophilus que se emplea para hacer yogurt).

Cocos o micrococos

Alargados y cilíndricosse pueden encontrar como: Diplobacilos Estreptobacilos. El género más representativo de esta

morfología lleva el nombre Bacillusse suelen dividir en:

Bacilos Grampositivos:Bacilos Gramnegativos:

ejemplos: Salmonella typhi (causante de la tifoidea), Mycobacterium tuberculosis (causante de la tuberculosis).

Bacillus o Bacilos

pueden ser: Espirilos, en forma de “coma” (Vibrio

comma, bacteria causante del cólera) Espiroquetas, bacterias con muchas

espirales (Treponema pallidum, bacteria causante de la sífilis)

Las formas espirales se mueven en medios viscosos avanzando en tornillo

Spirillum o Espiraladas son muy cortos y curvados,

en forma de coma. Ejemplo: Vibrio cholerae

Vibrios.

¡ CAUSAN ENFERMEDADES!

Es el método de elección cuando se desea evitar la alteración que sufre los microorganismos de una muestra

OBJETIVOS1: observar microorganismos2: observar movimientos microbianos

EXAMEN EN FRESCO

TINCIÓN SIMPLE

MATERIALES:

Mechero Bunsen

Hisopo

Baja lengua

Portaobjeto

Azul de metileno

Aceite de inmersión

Materiales y procedimientos

TINCIÓN SIMPLE

Objetivos:Observar la morfología de la bacteria. Observar la agregación o tipo de distribución bacteriana.

Fundamento:Se basa en la afinidad de los colorantes a los distintos componentes celulares, ya que las células bacterianas en medios a pH neutros suelen presentar una débil carga negativa. Así pues, la bacteria cargada negativamente se combinará con los iones positivos de los colorantes básicos.

Colorantes: Las propiedades ácidas o básicas de los colorantes permiten su fácil clasificación en:

Ácidos. Los colorantes ácidos se unen a las partes de las células cargadas positivamente. Ejem: Eosina, rojo congo, fucsina ácida. Básicos. Estos colorantes tienen afinidad por el material nuclear y otros componentes. Ejem: Azul de metileno, fucsina básica, cristal de violeta. Neutros. Ejem: Giemsa.

Procedimientos:

I. Preparación de un frotis

1. En una laminilla limpia añada utilizando un asa de inoculación:a) Si usa suspensión microbiana en medio líquido, una pequeña gota de la suspensión en el centro de la laminilla.b) Si usa cultivo en tubo con agar, una pequeña gota de agua en el centro de la laminilla. Luego añada asépticamente una pequeña porción del cultivo microbiano y mezcle bien.

2. Flamee el asa.3. Permita que el frotis bacteriano quede seco (sólo al aire)

TINCIÓN SIMPLE

II. Fijación del frotis

1. Fijar los frotis de cultivos líquidos con dos gotas de metanol o etanol absoluto y dejar secar al aire.

2. Los frotis de cultivos sólidos, completamente secos se fijarán con calor.

3. Palpar la parte inferior del portaobjetos con el dorso de la mano izquierda para enfriar y comprobar que no hubo sobrecalentamiento.

Procedimientos:

TINCIÓN SIMPLE

TINCIÓN SIMPLE

Procedimientos:III. Tinción simple

1. Cubrir el frotis con gotas de azul de metileno durante 2 a 3 minutos.

2. Eliminar el exceso de colorante con lavado suave al agua corriente o con la ayuda de la pipeta con agua destilada.

3. Dejar secaral aire

Ventajas: Los microorganismos incrementa el contraste con sus alrededores y

por tanto son mucho mas visibles.

Desventajas:No será 100% fiable ya que no permite diferenciar bacterias, formaciones de tejidos como colágeno, fibras...

POR SU ATENCIÓN

GRACIAS!!!...

«Lo que no te mata

te hace más fuerte»