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ESCUELA SUPERIOR POLITECNICA DEL LITORALHERRAMIENTAS DE COLABORACION
DIGITAL -PROANO SALVATIERRA CANDY ZULAY
RECONOCIMIENTO DE MICROORGANISMOS EN LAS PLAYAS DE SANTA ELENA
INTEGRANTES:• QUINDE YEPEZ CINDY ROSSANA
• PAGUAY ICAZA CHRISTYAN RICHARD
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MUESTREO EN PLAYAS DE SANTA ELENA
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• La Provincia de Santa Elena tiene una extensión de 3.762,8 km2, con una población residente de 238,889 habitantes (1.97 % del total nacional) y una
población flotante superior a 200,000 personas en época alta de turismo. Posee un clima muy agradable que puede ser disfrutado todo el año, el cual
es influenciado por la corriente cálida de El Niño (Diciembre – Abril desde Panamá hacia la zona central del Ecuador) y la corriente fría de Humboldt .
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ORGANISMOS MARINOS
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Muchos organismos marinos que incluyen bacterias, hongos, fitoplancton y algas mayores, así como algunos invertebrados son actualmente considerados
como virtuales fuentes promisorias de substancias bioactivas.
En los últimos años para enfrentar a los grandes problemas de salud pública y enfermedades hasta hoy considerados incurables como el SIDA o el cáncer se han explorado diversos ecosistemas marinos que representan uno del hábitat
favorito en la búsqueda de nuevos metabolitos bioactivos.
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SEDIMENTO
En líneas generales, las cifras más elevadas de microorganismos suelen darse en la zona más superficial, disminuyendo, en mayor o menor cantidad, al aumentar la profundidad, aunque sobre los sedimentos suele observarse un incremento.
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TEMPERATURA
Dependen de:condiciones climáticas
ambientales.Ecuación:
Bajas concentraciones de nutrientes Flora y fauna
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CONCENTRACIONES:
ELEMENTOS CONCENTRACION (ppm)
Br 65
C 28
Sr 8
B 4.6
Si 3
F 1
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SALINIDAD
SALINIDAD () TIPO DE AGUA0 – 0.5 Agua dulce 0.5 – 3 Agua salobre oligohalina3 – 10 Agua salobre mesohalina
10 – 17 Agua salobre Polihalina17 – 30 Agua de mar oligohalina 30 – 34 agua de mar mesohalina 34 – 38 Agua de mar polihalina
38 – 150 SalmueraHipersalina
En cuanto a las oscilaciones estacionales de los microorganismos que viven en el mar, se ha detectado que son
relativamente escasas en las zonas lejanas de tierra firme
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OBTENCION DE PORCENTAJES
• En cada mililitro de agua de mar viven unos mil protistas, cerca de un millón de bacterias, y cerca de 10 millones de virus y, como veremos más adelantes, es posible que estos recuentos sean muy conservadores.
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ESTUDIO TOMA DE MUESTRAS
Los invertebrados marinos fueron recolectados en Santa .Se colectaron un total de 40 muestras de invertebrados marinos
entre intermareales y algunos bentónicos.
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ESTUDIOS DE MICROORGANISMO MARINOS
Se ha podido constatar que la mayoría de las bacterias de origen marino son Gram- negativas y que las Gram- positivas corresponden a menos del 10% del total de la población microbiana en el ecosistema, planteándose que la pared celular de las bacterias Gram- negativas está mejor adaptada para sobrevivir en este medio.
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AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION
Las bacterias marinas en las Zonas de Muestreo para el aislamiento de bacterias
marinas heterótrofas se tomaron muestras de agua y sedimentos en diferentes estaciones de
Santa Elena.
Las cepas recién aisladas, después de la purificación, fueron clasificadas por sus
características morfológicas y bioquímicas, encontrándose que el 55%
se clasificaron como Bacillus sp. es importante señalar que en sedimentos se
aisló el 80.4 % de las bacterias encontradas en estos muestreos
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PROCESAMIENTO DE MUESTRAS Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS EPIBIONTAS DE INVERTEBRADOS
Incubación
Colonias
Crecimiento
agar
aislamiento
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Las colonias se conservaron en ceparios preparados con agar marino semisólido más glicerina al 20% (v/v).
AGARhttp://sisbib.
unmsm.edu.p
e/bvrevistas/
biologia/v08_
n2/bacte_mar
inas.htm
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OBSERVACIONES DE MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
Se realizaron estudios complementarios de morfología celular y presencia o ausencia de
flagelos de tres cepas seleccionadas por su amplia actividad inhibitoria, mediante observaciones de
microscopía electrónica de transmisión (Zeiss – EM 900).
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Phylum Clase Orden S1 S2 S3
Arthropoda Insecta Coleóptera x x X
Dermáptera X
Lepidóptera x X x
Arachnida Areneae x x X
Chilopoda Geophilomorpha
X
Diplopoda Spirobolida x
Malacostraca Isópoda x x X
Mollusca Gastropoda Archeogastropoda
X
annelida Oligochaeta Haplotaxida x x x
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PORCENTAJE DE CEPAS
• Porcentajes de cepas evaluadas con actividad antimicrobiana De los resultados obtenidos en esta investigación se pudo constatar que para los actinomicetos la actividad antifúngica fue ligeramente superior que la antibacteriana.
• De las 86 bacterias heterótrofas evaluadas sólo un 12.7 % presentó actividad antimicrobiana.
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MUESTRAS DETECTADASMUESTRAS (NMP/100gr)
No detectados( (200 y 300) (231 y 1000) (1001 y 3000) (mayor e igual a 3000)
Tripia Perla (princtada imbricata) (n=87)
42.6 2.3 17.2 24.1 13.8
Pepitona o Pata (arca zebr)(N=30)
30 10 20 20 20
Mejillon (Perna perna)(n=14)
35.8 7.1 7.1 14.3 35.7
Vaeiras (amusium papyraceum)(n=9)
0 0 0 55.6 44.4
Guacuco (tivela mactroides)(n=5)
40 0 20 0 40
Chipi-chipi (donax spp)(n=2)
0 0 0 100 0
Caracoles marinos (diferentes especies)(n=14)
9.1 9.1 9.1 27.3 45.4
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Conservación de los
microorganismos
ViabilidadMUESTRAS
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N C pH C/N Arena
Li + Ar
CE Ca Mg Na K Ped
N 1000 C 949 1000 pH 804 834 1000 C/N 101 401 273 1000 Arena
-763 -732 -477 -140 1000
Li + Ar
763 732 477 140 -1000 1000
CE 894 865 847 148 -635 635 1000 Ca 593 568 524 101 -488 488 636 1000 Mg 751 771 735 234 -664 664 599 508 1000 Na 859 804 838 70 -662 662 933 675 689 1000 K 750 743 852 132 -404 404 764 457 766 856 1000 1000Ped 782 699 770 -59 -435 435 885 433 521 805 743
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RESULTADOS
• Los resultados arrojaron que de 335 cepas aisladas de fuentes marinas cubanas, 185 (55%) mostraron actividad antimicrobiana ante Bacillus subtilis ATCC 6633; Escherichia coli ATCC 8739; Candida albicansATCC 10231 y Aspergillus niger
• En ambos casos, todas las bacterias evaluadas fueron aisladas de fuentes marinas cubanas, lo cual evidencia el alto potencial biotecnológico de nuestra diversidad microbiana marina.
• Los resultados de este estudio sugieren que las cepas marinas productoras de sustancias antimicrobianas detectadas o sus compuestos antimicrobianos
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• El 4.8% de las cepas estudiadas (126) tienen la capacidad de producir sustancias intercalantes de ADN como posibles agentes antitumorales de bajo peso molecular.
• Estos y otros estudios realizados en dicha temática, han sido recogidos en los estudios de Fenical y Jensen (1993).
• Por otra parte, aunque se ha comprobado que muchos microorganismos que producen tensioactivos no lisan los glóbulos rojos, esta técnica permite una rápida detección de estas sustancias (24 h)
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DISCUSION
• La recuperación de los microorganismos evidenció que para las cepas estudiadas se seleccionó un buen método de conservación (la liofilización).
• La observación microscópica de los cultivos demostró la presencia, de cultivos puros, en cada una de las especies estudiadas.
• La valoración de que los microorganismos estan biológicamente puros es un aspecto crítico en la caracterización microbiológica, por lo que deben realizarse ensayos apropiados para la detección de contaminantes.
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CONCLUSION• Se comprobó que con el empleo de la liofilización como método de conservación se
mantienen inalteradas las características propias de las especies microbianas estudiadas con un alto grado de pureza.
• Los hongos son mucho menos abundantes proporcionalmente en el medio marino que en aguas dulces y prevalecen en zonas de descomposición reciente de residuos vegetales.
• Como consecuencia del metabolismo animal, parte de esas sustancias orgánicas son eliminadas en la forma de excretas formadas por otros compuestos minerales o inorgánicos que no serían utilizables por los vegetales en un nuevo proceso de síntesis, si no fuese por la acción de determinadas bacterias que los transforman en aquellas sales que directamente pueden utilizar los vegetales autótrofos.
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BIBIOGRAFIAAtlas R.M. (1984). Diversity of microbial communities. New York USA. : In: K.C. Marshall (ed.). Advances in Microbial Ecology.Brock T.D. (2001). Biología de los microorganismos. Ed. Omega. Barcelona - España.Jimenez B. (2012). ORGANISMOS MARINOS. Vida marina.Krupa, S.V. (2012). Ecology of root . Amsterdam The Netherlands.: Elsevier Scientific Publ. Co.MUNDO. (2012). microorganismos marinos. MUNDO, 1,2.OSPAR. (2008). Muestreo de playas. INFORME ANUAL.R., Olembo. (1991). Importance of microorganisms and invertebrates as components o diversity. D.L Hawksworth (ed).