Műszerezettség és mintaelőkészítés kapcsolat

Kiegészítések

• 1. Nagy műszerezettség és mintaelőkészítési szükséglet

• Fogalmak:

• On-line

• Off-line

• At-line

• In-line

• Folyadékkromatográf, mint mintaelőkészítő egység!

• Kolonna követelmény: rövidebb, mert az MS, mint elválasztó egység működik. Feladata a mátrix interferencia elkerülése!

• Ionelyomás vagy érzékenyítés elkerülése!

• Mi különbség az LC-MS és az LCMS-MS nyújtotta teljesítmény között?

• LC-MS: minőségi információ kevés!

• LC-MS-MS: minőségi információ, interferencia mentes mennyiségi analitika!

• Tömeganalizátorok használata 2012!

• Q kvadrupol

• IT ioncsapda

• TOF repülési idő analizátor

• IMS ion mobilitási spektométer

• ICR ion ciklotron tömegspektrometer

• LIT lineáris ioncsapda

LC-MS-MS

• Mátrixot tartalmazó mintáknál és nagyon eltérő polaritásúaknál, a minta előkészítést a folyadékkromatográfiában grádienselucióval végezzük!

• Elsődlegesen oldószergrádienssel!

• Folyadékkromatográfiás módok hatékonysága és elemzési időszükséglet

• összefüggése a grádienselúcióban! Mérőszáma:csúcskapacítás(P).– A csúcsfelbontó kapacitás a vegyületek

molekulatömegétől, a folyadékkromatográfiás módtól és a töltet morfológiájától függ!

• Az elválasztást csúcskapacitással(P)jellemezzük.

• Fizikai értelme, hány komponenst tudunk elhelyezni, szorosan egymás mellett, hogy a felbontás,Rs=1.

• Feltételezve, hogy csúcsok egyenlő szélességűek(w)

• P=tg/w, vagy P=1+tg/w

Folyadékkromatográfiásan kis molekulatömegű anyagok

Választási lehetőségek

• HPLC

• UPHLC megvalósítása: az alábbiakkal

• 2 mikrométer alatti töltetek:teljesen porózus vagy héjszerű

• HTLC:kolonna stabilitás

• Héjszerű töltetek: 3 vagy 2 um alatti töltetek

Nagy molekulatömegű anyagok

• QxQ: mennyiségi analitikára.

• Nincs tökéletes kolonna, amelynél a mátrix zavarás kiküszöbölhető lenne!

• Kísérő vagy kettős belső standard alkalmazása szükséges a false pozitív vagy false negatív hiba kiküszöbölésére!

• Mátrixhatás kiküszöbölése:

• 1.Mátrixra való kalibrálás:szpájk.

• 2.Kisérő standard vagy kettős belső standard

• 3.Izotóp higításos módszer

• Izotóp hígításos módszernél vagy deuterizált vagy szén izotóp jelzett.

• Minőségi meghatározásra:

• MADI-TOF

• Nem alkalmas mennyiségire!

• MALDIxQqQ, mind mennyiségi, mind minőségi analitikára!

Trendek:Kis felbontású készülékek helyett nagy felbontásúak!

HPLC-MS, helyett UHPLC-MS

2D-LC-MS

Szoftver segítség az adatfeldolgozáshoz!Orbitrap analizátor bevezetése!

Ion mobilitási spektrométer elve

• Megjelentek az ion mobilitás spektrométer (IMS) kombinációk!

Spektrum.IMS: gyors felvételek

Ma oz off-line technika a döntő

• LC-SPE on line

• Off-line oldószercsere

• SPE-NMR on-line

• Követelmények az SPE-vel szemben:

• Adott mozgófázisnál az oszlop visszatartása nagy legyen. Ezt segíti a mozgófázis gyengébbik komponensének adagolása!

• Össze kell hangolni a folyadékkromatográfiás módszert, az SPE kémiájával

• RPLC-víz

• NPLC-n-hexán

• HILIC-AN

• Minden esetben a fókuszáló hatást kell kihasználni!

• RPLC:

• Ha vegyület logP vagy logD értéke 2 alatt van, akkor a fókuszáló hatás kevésbé érvényesül!

• Ha logP vagy logD értéke 2, akkor a víz hozzáadására a visszatartás jelentősen nő,érvényesül a fókuszáló hatás!

• SPE mintadúsító és tisztító oszlopok felületi kémiája nagy átfedést mutat a folyadékkromatográfiás kolonnákéval!

• Szilikagél alapú alkilmódosítottak!

• Poláris fordított fázisú töltetek!

• C-8 módosítás

• Szerves polimer alapúak

• ioncserélők

• NMR jel függ a kolonna elejének koncentráló hatásától!

• LC-FTIR, nincs újabb fejlesztés.

• Ok:

• érzékenység

• megfelelő oldószer kiválasztása a méréshez az on-line csatolásnál

• Off-line technika nehézkes

• Új trend a GC-MS technikában:• GC-MS-MS a GC-MS helyett

• Elemanalitikában a speciációs elemzés előtérbe kerülése,

• Így GC-ICP-LRMS vagy HRGC-HRMS• LC-ICP-LRMS vagy UHPLC-HRMS•

• IC-ICP-MS helyett

• IC=ionkromatográf

• CIC=capillary ion chromatograph

• CIC: kisebb mozgófázis fogyasztás

• nagyobb érzékenység