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My summer life in Yang-Ming My summer life in Yang-Ming
微生物及免疫學研究所張南驥老師
神經科學研究所 錢嘉韻老師
生科 04 級 891632 曾煥昌
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實驗室簡介實驗室簡介
張南驥老師1. 巨噬細胞分泌性蛋白 (YM-1).2. 神經元 LUZP 蛋白 .
錢嘉韻老師1.α2 腎上腺素受體位置及功能研究 .2.建立 TG & KO mice 來做基因標的 .
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My projectMy project
KO 老鼠的建立Lupz 基因的研究老鼠的行為
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KOKO 老鼠老鼠 nn promoterrtTA and TRE systemCre/loxP system
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nn promoternn promoter
nn:
the promoter of α2C4 , one kind of the recepter of epinephrine.
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rtTA & TRE systemrtTA & TRE system
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Cre/loxP systemCre/loxP system
Cre/loxP is the recombinase system of bacteriophage p1.
Cre recognizes and catalyzes recombination between 34bps loxP site.
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Cre recombinationCre recombination
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Combine allCombine all
nn rtTA Cre TRE
nn : tissue-specificrtTA & TRE : doxycycline induceCre/loxP : turn on knock-out
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How to apply on mice?How to apply on mice?
Do microinjection on the mice, get transgenic mice(chimeric mice).
Mate the mice to get hetozygotes.Mate hetrozygotes to get homozygotes.
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What is the advantage?What is the advantage?
The target gene may be lethal. The knock out mice can be survival until we turn on the system.
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nnC4 rtTA
TRECre ScaIScaIH
M
9-1
9-2
9-3
9-4
9-5
10-2
10-3
10-4
10-5
11-3
11-4*
LM
**
HM
9-1
9-2
9-3
9-4
9-5
10-2
10-3
10-4
10-5
11-3
11-4*
LM
**
EcoRI EcoRI EcoRI
1.9kb
6.0kb
1.9kb 3.8kb
3.8kb
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LuzpLuzp
Luzp encodes a protein (LUZP) expressing in brain areas such as hippocampus and cerebellum .
Subcellular localization is also revealed by immunocytochemistry(ICC) .
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ICC localizationICC localization
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What’s wrong with What’s wrong with LuzpLuzp KO mice? KO mice? - Neural tube closure defect - Neural tube closure defect
-/- +/- +/+
-/- +/- +/+ +/- -/- +/+
+/+ +/- +/- -/- +/-
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Exencephaly in Exencephaly in LuzpLuzp-/- mice -/- mice through E10.5 to E14.5 through E10.5 to E14.5
E10.5 E11.5E14.5
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Behavior effectBehavior effect
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What did I do in summer? What did I do in summer?
Southern blotVector construct PCRICCFeed mice and clean their room ^^|||
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