nematodos
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Resumen
Multiples síntomas tipo amarillamiento, similares con los reportados en el caso de HLB, se observaron desde el 2010 en las plantas
de cítricos en distintas regiones del estado de BCS. Para determinar el posible agente causal se colectaron las muestras de cítricos
con los síntomas sospechosos para su análisis con microscopía electrónica de barriido (MEB) y métodos moleculares. En tejido de
floema de las plantas infectadas se detectaron tanto fitoplasmas, como bacterias baciliformes con los tamaños aproximados
2000x400 nm, muy parecidos a los reportados en el caso de RLO y liberibacter. Se supone la participación de ambos patógenos en
el fenómeno manifestado.
Fig.4-7. Fitoplasmas (f) y bacterias (bac) en las muestras de naranja de
Guerrero Negro (4, 5) y Valle de Santo Domingo (6,7).
Rerferencias 1. Bové J.M.2006. Huanglongbing: a destructive, newly-emerging,
century-old disease of ciitrus. Journal of Plant Pathology 88:7-37.
2. Lebsky V., Poghosyan A. 2007. Phytoplasma associated diseases in
tomato and pepper in the state of BCS, Mexico. Bulletin of Insectology,
60(2):131-132.
3. Senasica. 2012. Comunicado, notificaciones y noticias sobre HLB y
su vector. (http://senasica.gob.mx/?doc=22653
CIBNOR, Programa Agricultura en Zonas Aridas. Instituto Politécnico Nacional 195, Col. Playa Palo de Santa
Rita Sur, La Paz, BCS, Mexico, 23096. Tel. 52(612)123844; e-mail: [email protected]
‘Detección de fitoplasmas y bacterias baciliformes en las plantas de cítricos con los
síntomas de HLB en el estado de Baja California Sur
Julio Hernández-Gonzalez, Vladimir Lebsky, Arevik Poghosyan
Sintomas de amarillamientos: 1.Naranja. 2. Naranjita. 3. Limonaria.
7
8
Fig. 8-9. Fitoplasmas(f) en mandarina (San Pedro) y limonaria
(La Paz). Al-granos de almidon, por-poros de tubos cribosos.
Introduccion
En el estado de BCS los cítricos se producen en las
plantaciones comerciales y en cultivo de traspatio. La
presencia de HLB (greening) en el estado fue
confirmada en agosto de 2011 (3). Cabe mencionar,
que la etiología de HLB, antes atribuida a RLO
(rickettsia like organisms), actualmente se asocia con
dos tipos de bacterias restringidas al floema: tres
especies de Ca. Liberibacter y dos especies de
Ca.Phytoplasma (1).
3
RESULTADOS
Objetivo del trabajo fue analizar la posible asociación de fitoplasmas y otras bacterias vasculares en cítricos con los
síntomas sospechosos en BCS, aplicando MEB y técnicas moleculares.
Materiales y métodos Se colectaron las muestras de naranja,
limón, toronja, mandarina, naranjita, limonaria con los síntomas
típicos de infección en plantaciones comerciales, parcelas
experimentales y las plantas de traspatio en distintas regiones
de BCS. Las muestras procesadas con la método reportado (2)
analizaron por el MEB Hitachi S-3000N; para estudios
moleculares de fitoplasmas aplicaron PCR-anidado con los
óligos P1/P7 R16mF2/R16mR1 y R16F2n/R16R2, para
amplificar los fragmentos de ADN correspondientes. Se realizo
la clonación en vector P-gem T-easy para enviar a secuenciar.
Electroforesis en agarosa de los productos de PCR para selección de clonas
CONCLUSIÓN
El complejo de síntomas en cítricos y los estudios
realizados por el MEB y técnicas moleculares hacen
constar la presencia de dos distintos patógenos en
floema de plantas infectadas: fitoplasmas y bacterias,
por su morfología y tamaño similares a liberibacter. La
identificación molecular de fitoplasmas esta en proceso.
Los fiitoplasmas en limón con base en el análisis de
secuencias de ADN se identificaron como miembros del
grupo 16SrI,
Ca. Phytoplasma asteris.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
1550pb
PCR de ADN
plasmidico
(1550 pb) con
los fragmentos
de ADN de
fitoplasma de
limón.
Carriles 2-10:
varias clonas
Carril 1: kb plus
1 1kb
2 LK1
3 LK2
4 LK3
5 LK4
6 LK5
7 LA1
8 LA2
9 LA3
10 LA4
11 LA5
4 5
6 7
8 9
Fig.10
por