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２prime羟基黄烷酮对前列腺癌细胞的放射增敏作用及机制探讨

王雯　 熊伟　 李晓颖　 高献书　 孙少倩　 李懿

１０００３４ 北京大学第一医院放疗科（王雯李晓颖高献书孙少倩）０６３００１ 唐山市人民

医院放化疗科（熊伟）１００１９１ 北京大学国家天然药物及仿生药物重点实验室（李懿）通信作者高献书Ｅｍａｉｌｇａｏ７７７７ １３９ｃｏｍ李晓颖Ｅｍａｉｌ１３７１６１０９１６４ １３９ｃｏｍＤＯＩ１０３７６０ ｃｍａｊｉｓｓｎ１００４４２２１２０１６０５０００

　 　 【摘要】 　 目的　 研究 ２prime羟基黄烷酮（２primeＨＦ）对前列腺癌细胞的放射增敏作用并初步探讨其机

制 方法　 应用克隆形成实验叔丁基过氧化氢（ＴＢＨＰ）氧化损伤实验Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 流式细胞仪凋亡检测实验检测 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞的放射敏感性影响 应用

Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 方法检测 ２primeＨＦ 对 ＶＣａＰ 细胞中 ＡＫＴｐＡＫＴＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达水平影响并初步探讨作

用机制 采用 ｔ 检验和析因方差分析检验结果 结果 　 克隆形成实验结果提示经 ２primeＨＦ 处理的

ＶＣａＰ 细胞在照射后增殖能力明显低于空白对照组（Ｐ＝ ０1049008 ０１０）ＳＲ＝ １1049008 １９ＴＢＨＰ 氧化损伤实验结果

提示经 ２primeＨＦ 处理的 ＶＣａＰ 细胞的抗氧化损伤能力明显弱于空白对照组（Ｐ＝ ０1049008 ０１５）Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染

色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 流式凋亡检测实验结果提示 ２primeＨＦ 联合放射线会增加 ＶＣａＰ 细胞调亡（Ｐ＝０1049008 ００１）Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 实验结果提示 ２primeＨＦ 可以抑制 ＶＣａＰ 细胞中 ｐＡＫＴＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白的表达（Ｐ＝０1049008 ０１３Ｐ＝ ０1049008 ０１６） 结论　 ２primeＨＦ 可提高前列腺癌细胞的放射敏感性这可能与其对前列腺癌细胞中

ＡＫＴ 通路阻滞或 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达抑制相关【关键词】 　 ２prime羟基黄烷酮　 放射增敏　 前列腺癌细胞系

基金项目国家自然科学基金（８１０７２０１７）北京市科技计划项目（Ｚ１４１１０７００２５１４１６０）

Ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ 　 Ｗａｎｇ ＷｅｎＸｉｏｎｇ ＷｅｉＬｉ ＸｉａｏｙｉｎｇＧａｏ ＸｉａｎｓｈｕＳｕｎ ＳｈａｏｑｉａｎＬｉ Ｙｉ

Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ ＯｎｃｏｌｏｇｙＦｉｒｓｔ ＨｏｓｐｉｔａｌＰｅｋｉｎｇ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＢｅｉｊｉｎｇ １０００３４Ｃｈｉｎａ （Ｗａｎｇ ＷＬｉ ＸＹＧａｏ ＸＳＨ Ｓｕｎ ＳＨＱ）Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｔａｎｇｓｈａｎ Ｃｉｔｙ Ｐｅｏｐｌｅ ｓ ＨｏｓｐｉｔａｌＴａｎｇｓｈａｎ ０６３００１ＣｈｉｎａＳｃｈｏｏｌ ｏｆ ＰｈａｒｍａｃｙＰｅｋｉｎｇ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＢｅｉｊｉｎｇ １００１９１Ｃｈｉｎａ （Ｌｉ Ｙ）Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒｓＧａｏ ＸｉａｎｓｈｕＥｍａｉｌｇａｏ７７７７ １３９ｃｏｍＬｉ ＸｉａｏｙｉｎｇＥｍａｉｌ１３７１６１０９１６４ １３９ｃｏｍ

　 　 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 　 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ 　 Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ （ ２primeＨＦ） ｏｎｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｏ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｉｔｓ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ Ｍｅｔｈｏｄｓ 　 Ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｓｓａｙｔｅｒｔｂｕｔｙｌｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅ （ＴＢＨＰ） ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｓｓａｙ Ｈｏｅｃｈｓｔ ｓｔａｉｎｉｎｇ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｕｓｉｎｇＡｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ ａｎｄ ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ ｉｏｄｉｄｅ （ ＰＩ） ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ２primeＨＦ ｏｎ ｔｈｅｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＶＣａＰ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ２primeＨＦ ｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＴ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ ＡＫＴ （ｐＡＫＴ） ａｎｄ ａｌｄｏｋｅｔｏ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ １Ｃ３（ＡＫＲ１Ｃ３） ｉｎ ＶＣａＰ ｃｅｌｌｓａｎｄ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ Ｄａｔａ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｔ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｆａｃｔｏｒｉａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅＲｅｓｕｌｔｓ　 Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ａｆｔｅｒ ｅｘｐｏｓｕｒｅ ｔｏ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ＶＣａＰ ｃｅｌｌｓ ｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ ２primeＨＦ ｈａｄ ａ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｌｅｖｅｌ ｔｈａｎ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （Ｐ＝ ０1049008 ０１０） ｙｉｅｌｄｉｎｇａ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｒａｔｉｏ ｏｆ １1049008 １９ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＴＢＨＰ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｓｓａｙ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ＶＣａＰｃｅｌｌｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ２primeＨＦ ｈａｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｗｅａｋｅｒ ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｃａｐａｃｉｔｙ ｔｈａｎ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （Ｐ＝０1049008 ０１５） Ｈｏｅｃｈｓｔ ｓｔａｉｎｉｎｇ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｗｉｔｈ Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ ａｎｄ ＰＩ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ２primeＨＦｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｐｌｕｓ ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｅｎｈａｎｃｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ＶＣａＰ ｃｅｌｌｓ （Ｐ＝ ０1049008 ００１ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ２primeＨＦ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐＡＫＴ ａｎｄ ＡＫＲ１Ｃ３ ｉｎＶＣａＰ ｃｅｌｌｓ （Ｐ＝ ０1049008 ０１３ ａｎｄ Ｐ＝ ０1049008 ０１６） Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　 ２primeＨＦ ｃａｎ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｐｒｏｂａｂｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｔｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ＡＫＴ ｐａｔｈｗａｙ ａｎｄ ＡＫＲ１Ｃ３ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ　 　 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】　 ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ　 Ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｂｉｌｉｔｙ　 Ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｌｉｎｅ

Ｆｕｎｄ ｐｒｏｇｒａｍ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ８１０７２０１７） Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｐｒｏｊｅｃｔ （Ｚ１４１１０７００２５１４１６０）

　 　 放疗是前列腺癌的主要治疗方法之一为了提

高肿瘤的 ＬＣ 率目前通常采取高剂量放疗方法但这会引起较严重不良反应降低患者治疗依从性和

生活质量［１３］ 因此寻求一种可以提高肿瘤放射敏

感性 的 药 物 很 有 必 要 ２prime羟 基 黄 烷 酮 （ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ２primeＨＦ）是一种植物类黄酮类小分

子化合物对多种恶性肿瘤均有抑制增殖作用［４７］其作用机制包括促进 Ｇ２＋Ｍ 期阻滞和细胞凋亡而上述机制与放射增敏密切相关［８９］ 本研究将这种

小分子化合物作用于前列腺癌细胞系观察细胞放

射敏感性的变化并初步探讨其作用机制

材料与方法

　 　 １细胞系选取及细胞培养前列腺癌细胞株

ＶＣａＰ 购自 ＡＴＣＣ培养于含 １０胎牛血清（ＨｙＣｌｏｎｅ公司）１双抗（ＨｙＣｌｏｎｅ 公司） 的 ＤＭＥＭ 培养基

（中科迈晨科技有限公司）中培养箱需保持 ３７５ ＣＯ２ 的饱和湿度培养环境 每 ３ 天传代一次取对数生长期细胞用于实验

２药物来源及工作浓度测定２primeＨＦ 购自 Ｓｉｇｍａ公司呈白色粉末状 采用 Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂法检测

２primeＨＦ 对 ＶＣａＰ 细胞的 ４８ ｈ ＩＣ５０值以此为基础确定

最终工作浓度 配置不同浓度的 ２primeＨＦ 培养液在９６ 孔板中铺种 ＶＣａＰ 细胞待细胞贴壁后分别加入

含 ０1049008 ００３ ０1049008 ０３０ ０1049008 ３００ ３1049008 ０００ ３０1049008 ０００ ３００1049008 ０００μｍｏｌ Ｌ ２primeＨＦ 的培养液 １００ μｌ培养 ４８ ｈ按说明书

加入 Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂（ Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ 公司）于细胞培

养箱避光孵育２～６ ｈ 后用酶标仪检测每孔的荧光强

度（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙＦＩ）并记录 细胞存活率 ＝实验组 ＦＩ 对照组 ＦＩtimes１００ 实验重复 ３ 次取 ＩＣ５０

均值 在得出的 ＩＣ５０值下取几个药物浓度进行细

胞长期抑制实验确定较佳的作用浓度３细胞放射敏感性检测

（１）克隆形成实验给予细胞 ００1049008 ５１1049008 ０２1049008 ０４1049008 ０６1049008 ０ Ｇｙ 照射 不同剂量组依次铺种 ５００８００８００１０００４０００８０００ 个 ＶＣａＰ 细胞 待细胞贴壁后

向 ２primeＨＦ 组中加入 ２primeＨＦ使培养液中药物浓度达到

１０ μｍｏｌ Ｌ向空白对照组中加入普通培养液培养

４８ ｈ 后采用医用直线加速器（瓦里安 Ｃｌｉｎｉｃ瓦里安

医疗系统公司美国）６ ＭＶ Ｘ 线进行体外照射剂量

率为 ４００ ｃＧｙ ｍｉｎ源皮距为 １００ ｃｍ照射后即刻换

取新鲜不含 ２primeＨＦ 的培养液继续培养 １４ ｄ固定染色计数并拍照 计数ge５０ 个细胞的克隆计算细

胞存活分数（ＳＦ）即ＳＦ＝克隆数 （接种细胞数times未照射细胞克隆形成率） 使用多靶单击模型［ＳＦ＝ １ndash（１ ndash ｅ－ＫＤ） Ｎ］拟合细胞存活曲线计算反映细胞

敏感性的参数Ｄ０Ｄｑ 值 基于计算出的空白对照组

和 ２primeＨＦ 组Ｄ０值计算放射增敏比（ＳＥＲ）即 ＳＥＲ ＝对照组Ｄ０值 ２primeＨＦ 组Ｄ０值此值越大说明 ２primeＨＦ 放

射增敏能力越强反之亦然（２） ＴＢＨＴ 氧化损伤实验在两块 ９６ 孔板上分

别铺两组细胞一组为未加 ２primeＨＦ 处理的空白对照

组细胞另一组为 ２primeＨＦ 组细胞处理 ４８ ｈ 后分别

向两组细胞中加入含 ０２５５０１００２００４００ μｍｏｌ ＬＴＢＨＰ （百灵威科技有限公司）的培养液 一块 ９６孔板处理 ３０ ｍｉｎ另一块处理 ６０ ｍｉｎ之后按说明书

加入 Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂于培养箱避光孵育 ２６ ｈ 后

用酶标仪检测 ＦＩ（３） Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色实验准备 ６ 孔板铺种

一定量的 ＶＣａＰ 细胞待细胞长至 ５０时将细胞分

为 ４ 组第 １ 组是空白对照第 ２ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ｈ第 ３ 组采用 ４ Ｇｙ 照射第 ４ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ后联合 ４ Ｇｙ 照射 通过以上 ４ 种方法处理 ＶＣａＰ细胞后换液继续培养 ４８ ｈ利用 Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８ 试

剂盒（上海碧云天生物科技有限公司）中说明书所

述操作进行固定染色封片 在荧光倒置显微镜

（ＩＸ８１奥林巴斯日本）下观察细胞形态蓝色为正

常细胞发白色为发生凋亡的细胞拍照并计数（４） Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法凋亡检测实

验前期处理同 Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色实验将培养细胞

分为 ４ 组分组方法亦同 Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色实验按不同方法对 ＶＣａＰ 细胞进行处理后收集细胞经ＰＢＳ 清洗后按说明加入 ５ μｌ Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 及 １０μｌ２０μｇ ｍｌ ＰＩ 溶液（北京四正柏生物科技有限公

司）再加入 ＰＢＳ 后用流式细胞仪（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ公司）进行检测分析

４机制探讨采用 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 方法检测放射敏

感性相关蛋白的表达 用 ３５ ｍｍ 平皿培养前列腺

癌 ＶＣａＰ 细胞取由上述实验中得到的 ＩＣ５０值下几个

药物浓度培养 ４８ ｈ 后的细胞提取总蛋白并定量对各处理组提取 ２０ μｇ 总蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶

电泳（ＳＤＳＰＡＧＥ） 将蛋白转印至聚偏二氟乙烯膜

（ＰＶＤＦ 膜）上用 ５脱脂牛奶室温封闭 ２ ｈ４孵

育一抗过夜ＴＢＳＴ 缓冲液清洗后室温孵育二抗 １ ｈ再次洗膜后加入荧光发光液检测

５统计方法用 ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５1049008 ０ 软件得出

ＩＣ５０值拟合出细胞存活曲线参数 用 ＳＰＳＳ ２０1049008 ０ 软

件行单因素方差分析或 ｔ 检验多因素比较采用析因

设计方差分析完成 Ｐ＜０1049008 ０５ 为差异有统计学意义

结　 　 果

　 　 １２primeＨＦ 工作浓度选取

（１）ＩＣ５０值Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂法检测 ２primeＨＦ 处理

ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ ＦＩ 值并计算存活率ＩＣ５０值为 ３２８１μｍｏｌ Ｌ

（２）工作浓度依据 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细

胞活力影响的时间剂量曲线结果发现 ２primeＨＦ 对

ＶＣａＰ 细胞活性具有抑制作用并呈时间与剂量依

赖性（图 １） 结果显示药物处理 ４８ ｈ 时后 １０μｍｏｌ Ｌ 及其以下浓度对细胞活力无明显抑制但２０μｍｏｌ Ｌ 浓度可对 ＶＣａＰ 细胞产生较为明显的抑

制作用 因此本研究选取 １０ μｍｏｌ Ｌ 作为 ２primeＨＦ处理 ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ 工作浓度

２1049008 ２primeＨＦ 对 ＶＣａＰ 细胞放射敏感性的影响

（１）克隆形成实验结果２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞的

克隆形成能力明显高于空白对照组（Ｐ＝ ０1049008 ０１０）表明 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞的放射敏感性高于空白对照

组详见图 ２ 和表 １

表 １　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞放射增敏的参数（1051504ｘplusmnｓ）

组别 Ｄ０ 值（Ｇｙ） Ｄｑ 值（Ｇｙ） ＳＥＲ对照组 １５６plusmn０１３ １８３plusmn０３８２primeＨ 组 １３１plusmn０１２ １４４plusmn０３４ １１９

　 　 （２） ＴＢＨＴ 氧化损伤实验结果向空白对照组

和 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞培养液中加入不同浓度梯度

的 ＴＢＨＰ 分别处理 ３０ ｍｉｎ 和 ６０ ｍｉｎ 引起细胞氧化

损伤后出现 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞活力低于空白对

照组的趋势 其中 ＴＢＨＰ 处理 ＶＣａＰ 细胞 ３０ ｍｉｎ 后

２５５０ μｍｏｌ Ｌ 剂量组和处理 ６０ ｍｉｎ 后 ２５ μｍｏｌ Ｌ剂量组中细胞活力低于空白对照组 （ Ｐ＝ ０1049008 ０１８０1049008 ０１５０1049008 ０２４）详见图 ３

（３） Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ双染法流式细胞仪凋亡检测实验结果在 ４ 个处理

组中第 ２ 组 ＶＣａＰ 细胞的凋亡率与第 １ 组相比差

异无统计学意义（Ｐ＝ ０1049008 ０８００1049008 ０６５）但存在增高趋

势第 ４ 组细胞凋亡率与其他组相比为最高（Ｐ＝００１００1049008 ００３）提示 ２primeＨＦ 可与放射线协同促进损伤

效应详见图 ４

图 １　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞增殖活力影响的时间剂量曲线

图 ２　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞放射增敏的细胞存活曲线

图 ３　 空白对照组与 ２primeＨＦ 组经 ＴＢＨＰ 处理后细胞活力曲线（分别给予空白对照组和加入 １０ μｍｏｌ Ｌ ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ 组中的 ＶＣａＰ 细胞不同浓度的 ＴＢＨＰ在作用不同时间点检测细胞活力 ３Ａ 为ＴＢＨＰ 处理时间为 ３０ ｍｉｎ 时的细胞活力曲线３Ｂ 为 ＴＢＨＰ 处理时间为 ６０ ｍｉｎ 时的细胞活力曲线）

讨　 　 论

　 　 前列腺癌是威胁全球男性健康的第二大恶性肿

瘤［１０］ 在中国其发病率及病死率呈逐渐增长趋

图 ４　 不同方法处理组细胞凋亡情况检测［４Ａ 为用不同方法处理组细胞凋亡荧光染色图箭头所指为发生凋亡的细胞（４Ａ１ 为第 １组不加任何处理的空白对照４Ａ２ 为第 ２ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ４Ａ３为第 ３ 组采用 ４ Ｇｙ 照射４Ａ４４ 为第 ４ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ 后联合４ Ｇｙ 照射）４Ｂ 为用不同方式处理前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞后荧光染色检测所得细胞凋亡率４Ｃ 为用不同方式处理前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞后Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法流式细胞仪检测细胞凋亡结果分析所得细胞凋亡率）］

势［１１１２］ 目前前列腺癌放疗以大剂量为主对中高危患者局部照射剂量已提高至 ８１ Ｇｙ［１３］这难免造

成周围组织损伤 如果能找到一种合适的放射增敏

药物也许可以降低局部受量亦可达到较好 ＬＣ率降低放疗不良反应提高患者治疗依从性及生活

质量 因此笔者在这方面进行了初步的研究探讨　 　 ２primeＨＦ 是一种植物类黄酮类小分子化合物主要存在于水果和蔬菜中［４］其同类化合物黄连素因具有抗炎抗心律失常和抗肿瘤等作用已被广泛应

用于临床［１４］ 有文献报道２primeＨＦ也具有抗肿瘤效

图 ５　 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴｐＡＫＴ 和 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达量的影响（５Ａ 为分别以不同浓度 ２primeＨＦ 处理 ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ 后Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 实验检测 ＡＫＴｐＡＫＴＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达情况５Ｂ 为 ＡＫＴ 蛋白表达水平分析结果５Ｃ 为 ｐＡＫＴ 蛋白表达水平分析结果５Ｄ 为 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达水平分析结果５Ｅ 为不同处理组不同蛋白表达水平的Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测结果）

应 如将细胞阻滞于Ｇ２ ＋Ｍ期［７９］ 促进细胞凋

亡［４］减慢肿瘤血管生成［７９］ 等 因 Ｇ２ ＋Ｍ 期阻滞

及细胞凋亡与放射敏感性相关［１５１７］故笔者推测 ２primeＨＦ 很可能具有放射增敏作用 本克隆形成实验结

果证实加入 ２primeＨＦ 组在照射后细胞存活分数明显低

于空白对照组ＴＢＨＰ 氧化损伤实验结果提示经 ２primeＨＦ 处理后对 ＴＢＨＰ 引起的氧化损伤更为敏感进一

步证实了克隆形成实验结果Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法检测结果证实 ２primeＨＦ组照射后细胞凋亡率更高 可见 ２primeＨＦ 对前列腺癌

ＶＣａＰ 细胞确实具有放射增敏作用另外本研究还对 ２primeＨＦ 增敏的机制进行了初

步探讨 众所周知 ＡＫＴ 信号转导通路是一条经典

的放射抵抗通路［１６２１］在所有关于放射抵抗通路的

研究中ＰＩ３Ｋ ＡＫＴ ｍＴＯＲ 是研究最多的一条 此

通路与血管生成的关系最为密切此外ＨＩＦ１ 可以

通过激活此通路发挥放射抵抗作用 ＡＫＴ 是 ＰＩ３Ｋ通路中的主要调节蛋白与细胞的周期及凋亡调节

相关 ＡＫＴ 激活为 ｐＡＫＴ 后可以激活其下游基因使细胞中 Ｃｈｋ１ 失活从而增加 Ｇ０Ｇ１ 期阻滞并减少

Ｇ２ 期阻滞［２２２３］从而提高细胞的放射抵抗性 ＡＫＴ信号通路受到抑制即 ｐＡＫＴ 表达量下降可以促

进细胞凋亡 阻滞细胞周期 提高其放射敏感

性［１７１９］ 而 ２primeＨＦ 具有促进细胞凋亡阻滞细胞周

期的作用因此本研究检测了 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴ 和 ｐＡＫＴ 蛋白表达的影响结果显示 ２primeＨＦ 可以减少 ｐＡＫＴ 蛋白的表达且照射后经 ２primeＨＦ 处理过的细胞

ｐＡｋＴ 蛋白表达水平明显下调因此认为 ２primeＨＦ 可

通过抑制 ＡＫＴ 信号转导通路来提高前列腺癌的放

射敏感性ＡＫＲ１Ｃ３ 是一种放射抵抗相关基因已有研究

证实在食管癌细胞中过表达的 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因可以

通过减轻细胞氧化损伤降低 ＲＯＳ 水平和辐射诱导

的 ＤＮＡ 损伤来实现放射抵抗作用利用小分子

ＲＮＡ 干扰技术下调 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因的表达可以提高

食管癌细胞的放射敏感性［１５１７］并且已有研究证实

肺癌中 ＡＫＲ１Ｃ３ 也可以促进细胞的放射抵抗［２５］还有研究发现在前列腺癌细胞中 ＡＫＲ１Ｃ３ 过表达

可以通过促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过

激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路从而导致前列腺癌

放射抵抗［２６］ 多项研究证实 ２primeＨＦ 可以抑制体外

ＡＫＲ１Ｃ３ 酶的活性［２７２９］但对其在细胞内活性及蛋

白表达水平影响的相关研究很少且无充分确切依

据 本研究发现 ２primeＨＦ 可抑制前列腺癌细胞中

ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达而且这种抑制作用具有浓度依

赖性照射后这种抑制作用也较为明显 因此 ２primeＨＦ 发挥放射增敏作用可能与抑制 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表

达有关目前已有研究证实低浓度 ２primeＨＦ 不仅可促进肿

瘤细胞凋亡而且可通过抑制雄激素受体活性来延

缓前列腺癌细胞生长向激素非依赖转化并抑制前

列腺癌细胞增殖［３０］ 是否 ２primeＨＦ 对前列腺癌细胞

放射增敏作用与雄激素受体活性受到抑制从而促进

对细胞杀伤力有关 本研究证明了低浓度 ２primeＨＦ 对

前列腺癌细胞的抑制增殖与其放射增敏作用可以协

同促进前列腺癌细胞凋亡但低浓度药物本身对细

胞生长活力影响不大 然而随着药物浓度增加这种协同促凋亡机制可能会更为明显针对这点还需

进一步研究综上所述本研究结果显示 ２primeＨＦ 对前列腺癌

细胞具有放射增敏作用其对前列腺癌细胞促凋亡

作用可与放射线协同促进对前列腺癌细胞杀伤 这

种作用可能与阻滞 ＡＫＴ 信号通路或抑制 ＡＫＲ１Ｃ３蛋白表达有关但 ＡＫＲ１Ｃ３ 与 ＡＫＴ 信号通路之间是

否具有相互调控的关系还需要进一步研究证实志谢　 北京大学国家天然药物及仿生药物重点实验室的周德敏教授

及北京大学第一医院放疗科的虞浩马茗微亓昕崔明周东等同学

在本次实验研究中提供了帮助

参　 考　 文　 献

［１］ Ａｒｃａｎｇｅｌｉ Ｓ Ｓｔｒｉｇａｒｉ Ｌ Ｓｏｅｔｅ Ｇ ｅｔ ａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｄｏｓｉｍｅｔｒｉｃｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｆｔｅｒ ａ ４ｗｅｅｋ ｈｙｐｏｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ ｅｘｔｅｒｎａｌｂｅａｍ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｒｅｇｉｍｅｎ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ａｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｉｃ ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｔｒｉａｌ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ２００９７３（１）３９４５ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２００８０４００５

［２］ Ｄｅｌｋｅｒ ＡＦｅｎｄｌｅｒ ＷＰＫｒａｔｏｃｈｗｉｌ Ｃｅｔ ａｌ Ｄｏｓｉｍｅｔｒｙ ｆｏｒ （１７７）ＬｕＤＫＦＺＰＳＭＡ６１７ａ ｎｅｗ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｅｕｒ Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｉｍａｇ２０１６４３（１）４２５１ＤＯＩ１０１００７ ｓ００２５９０１５３１７４７

［３］ Ｔａｎｅｊａ ＳＳ Ｒｅ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｓｕｒｇｅｒｙ ｗｉｔｈ ｏｒ ｗｉｔｈｏｕｔｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｒ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ａｌｏｎｅ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｊ Ｕｒｏｌ２０１５１９４（３）７０３ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｕｒｏ２０１５０６０４８

［４］ Ｓｉｎｇｈａｌ ＳＳ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ Ｆｉｇａｒｏｌａ ＪＬ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ Ａｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｆｏｒ ｋｉｄｎｅｙ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ［Ｊ］ ＢｉｏｃｈｅｍＰｈａｒｍａｃｏｌ２０１５９６（３）１５１１５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊ ｂｃｐ２０１５０４０２２

［５］ Ｌｕ ＫＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ Ｌｕｅ ＫＨ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ １４３ Ｂ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅｅｘｔｒｉｎｓｉｃ ＴＲＡＩＬａｎｄ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｍｅｄｉａｔｅｄ ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］ Ｎｕｔｒ Ｃａｎｃｅｒ ２０１４ ６６ （ ４ ） ６２５６３５ ＤＯＩ １０ １０８０ ０１６３５５８１２０１４1049008 ８９４１００

［６］ Ｎａｇａｐｒａｓｈａｎｔｈａ ＬＤ Ｖａｔｓｙａｙａｎ Ｒ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｔｕｍｏｒ ｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｓ ｎｏｒｍａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ＶＨＬｍｕｔａｎｔ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ［Ｊ］ Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ２０１１ ３２ （ ４） ５６８５７５ ＤＯＩ １０１０９３ ｃａｒｃｉｎ ｂｇｒ０２１

［７］ Ｈｓｉａｏ ＹＣ Ｋｕｏ ＷＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ ｅｔ ａｌ Ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｎｄ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ

Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ２００７１６７（３）１９３２０６ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００７０２０１２

［８］ Ｓｈｉｎ ＳＹ Ｋｉｍ ＪＨ Ｌｅｅ ＪＨ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｅｇｒ１ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂａｘ ｐ２１ ａｎｄＮＡＧ１ ｉｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｍｏｌ Ｎｕｔｒ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ２０１２５６（５）７６１７７４ＤＯＩ１０１００２ ｍｎｆｒ２０１１００６５１

［９］ Ｈｓｉａｏ ＹＣＨｓｉｅｈ ＹＳＫｕｏ ＷＨｅｔ ａｌ Ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｉｎｓａｎｄ ＣＤＫｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｂｉｏｍｅｄ Ｓｃｉ ２００７ １４ （ １） １０７１１９ ＤＯＩ １０１００７ ｓ１１３７３００６９１１７３

［１０］ Ｆｅｒｌａｙ ＪＳｏｅｒｊｏｍａｔａｒａｍ ＩＤｉｋｓｈｉｔ Ｒｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ ｓｏｕｒｃｅｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍａｊｏｒ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎＧＬＯＢＯＣＡＮ ２０１２ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ２０１５１３６ （ ５）Ｅ３５９３８６ＤＯＩ１０１００２ ｉｊｃ２９２１０

［１１］ Ｃｈｅｎ ＷＺｈｅｎｇ ＲＢａａｄｅ ＰＤｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ２０１５ ［Ｊ］ ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ２０１６ＤＯＩ１０３３２２ ｃａａｃ２１３３８

［１２］ 韩苏军张思维陈万青等中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析［Ｊ］ 临床肿瘤学杂志２０１３１８（４）３３０３３４Ｈａｎ ＳＰ Ｚｈａｎｇ ＳＷ Ｃｈｅｎ ＷＱ ｅｔ ａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔｓｉｔｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ２０１３１８（４）３３０３３４

［１３］ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＮＣＣＮ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＰｒａｃｔｉｃｅＧｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｉｎ ＯｎｃｏｌｏｇｙＰｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｖ １ ２０１６ Ａｖａｉｌａｂｌｅ ａｔｈｔｔｐ ｗｗｗｎｃｃｎｏｒｇ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ ｐｈｙｓｉｃｉａｎ＿ ｇｌｓ ＰＤＦ ｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｐｄｆ Ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｊａｎｕａｒｙ ２８２０１６

［１４］ Ｐｉｒｉｌｌｏ ＡＣａｔａｐａｎｏ ＡＬＢｅｒｂｅｒｉｎｅａ ｐｌａｎｔ ａｌｋａｌｏｉｄ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｌｏｗｅｒｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｔｏ ｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓ ［Ｊ］ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ２０１５ ２４３ （ ２ ） ４４９４６１ ＤＯＩ １０１０１６ ｊａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ２０１５０９０３２

［１５］ Ｓｈｉ ＭＶｉｖｉａｎ ＣＪＬｅｅ ＫＪｅｔ ａｌ ＤＮＡＰＫｃｓＰＩＤＤｏｓｏｍｅａ ｎｕｃｌｅａｒｃａｓｐａｓｅ２ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ ｒｏｌｅ ｉｎ Ｇ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ２００９１３６（ ３）５０８５２０ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊｃｅｌｌ２００８１２０２１

［１６］ Ｄｅｎｇ ＲＴａｎｇ ＪＭａ ＪＧｅｔ ａｌ ＰＫＢ Ａｋｔ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ＤＳＢ ｒｅｐａｉｒ ｉｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｍｒｅ１１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２０１１３０（８）９４４９５５ＤＯＩ１０１０３８ ｏｎｃ２０１０1049008 ４６７

［１７］ Ｊｉａｎｇ Ｚ Ｐｏｒｅ Ｎ Ｃｅｒｎｉｇｌｉａ ＧＪ ｅｔ ａｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｕｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｏｎｆｅｒｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｒａｄｉａｔｉｏｎａｎｄ ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ ｔｈａｔ ｉｓ ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ ［Ｊ］ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００７ ６７ （ ９） ４４６７４４７３ ＤＯＩ １０１１５８ ０００８５４７２ＣＡＮ０６３ ３９８

［１８］ Ｃｈａｎｇ Ｌ Ｇｒａｈａｍ ＰＨ Ｈａｏ Ｊ ｅｔ ａｌ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＰＩ３Ｋ Ａｋｔ ｍＴＯＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ２０１３４ｅ８７５ＤＯＩ１０１０３８ ｃｄｄｉｓ２０１３1049008 ４０７

［１９］ Ｚａｎｎｅｌｌａ ＶＥ Ｃｏｊｏｃａｒｉ Ｄ Ｈｉｌｇｅｎｄｏｒｆ Ｓ ｅｔ ａｌ ＡＭＰＫ ｒｅｇｕｌａｔｅｓｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］

Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ Ｏｎｃｏｌ２０１１９９（３）２９３２９９ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｒａｄｏｎｃ２０１１０５０４９

［２０］ Ｓｈｉｍｕｒａ Ｔ Ａｃｑｕｉｒｅｄ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ＡＫＴ ＧＳＫ３ｂｅｔａ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｙｃｌｅ ［Ｊ］ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｒｅｓ２０１１５２（５）５３９５４４

［２１］ Ｓａｎｌｉ ＴＲａｓｈｉｄ ＡＬｉｕ Ｃｅｔ ａｌ Ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＡＭＰａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ （ＡＭＰＫ）ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ ２０１０７８（１）２２１２２９ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２０１００３００５

［２２］ Ｙａｒｄｅｎ ＲＩＰａｒｄｏＲｅｏｙｏ ＳＳｇａｇｉａｓ Ｍｅｔ ａｌ ＢＲＣＡ１ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅＧ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｃｈｋ１ ｋｉｎａｓｅ ｕｐｏｎ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ［Ｊ］ Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ２００２３０（３）２８５２８９ＤＯＩ１０１０３８ ｎｇ８３７

［２３］ Ｘｕ Ｎ Ｈｅｇａｒａｔ Ｎ Ｂｌａｃｋ ＥＪ ｅｔ ａｌ Ａｋｔ ＰＫＢ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ＤＮＡｄａｍａｇｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｌａｔｅ Ｇ２ ［Ｊ］ Ｊ ＣｅｌｌＢｉｏｌ２０１０１９０（３）２９７３０５ＤＯＩ１０１０８３ ｊｃｂ２０１００３００４

［２４］ Ｘｉｏｎｇ ＷＺｈａｏ ＪＹｕ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｅｌｅｖａｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｖｉａｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ［Ｊ］ ＰｌｏＳ ｏｎｅ ２０１４ ９ （ １１ ）ｅ１１１９１１ＤＯＩ１０１３７１ ｊｏｕｒｎａｌｐｏｎｅ０１１１９１１

［２５］ Ｘｉｅ ＬＹｕ ＪＧｕｏ Ｗｅｔ ａｌ Ａｌｄｏｋｅｔｏ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ １Ｃ３ ｍａｙ ｂｅ ａ ｎｅｗｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍａｒｋｅｒ ｉｎ ｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ ＣａｎｃｅｒＧｅｎｅ Ｔｈｅｒ２０１３２０（４）２６０２６６ＤＯＩ１０１０３８ ｃｇｔ２０１３1049008 １５

［２６］ 孙少倩李懿王雯等ＡＫＲ１Ｃ３ 的过表达会促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路导致前列腺癌的放射抵抗［Ａ］ 中华医学会第十二次全国放射肿瘤治疗会议论文集［Ｃ］北京中华医学会２０１５ＰＢ０９２Ｓｕｎ ＳＨＱ Ｌｉ Ｗ Ｗａｎｇ Ｗ ｅｔ ａｌ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｆａｃｔｏｒ ＰＧＦ２ａｌｐｈａ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ＰＰＡＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ａ］ Ｃｈｉｎｅｓｅ ＭｅｄｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ １２ｔｈ ｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｎｃｏｌｏｇｙ ［Ｃ］ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ２０１５ＰＢ０９２

［２７］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＺｉｖｎａ ＬＸｉｏｎｇ Ｇｅｔ ａｌ ＡＫＲ１Ｃ３ ａｓ ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔａｒｇｅｔｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ ＢｉｏｌＩｎｔｅｒａｃｔ２００９１７８（ １３）１３８１４４ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００８ １００１５

［２８］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＨｏｆｍａｎ ＪＣｈｌｅｂｅｋ Ｊｅｔ ａｌ Ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ａｓａ ｎｏｖｅｌ ｔｙｐｅ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ ＭｏｌＢｉｏｌ２０１４１４３２５０２５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１４０４００５

［２９］ Ｂｙｒｎｓ ＭＣ Ｊｉｎ Ｙ Ｐｅｎｎｉｎｇ ＴＭ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｙｐｅ ５ １７ｂｅｔａｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （ＡＫＲ１Ｃ３）ｏｖｅｒｖｉｅｗ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｓｉｇｈｔｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２０１１１２５ （ １２）９５１０４ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１０１１００４

［３０］ Ｏｆｕｄｅ Ｍ Ｍｉｚｏｋａｍｉ Ａ Ｋｕｍａｋｉ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓｂｙ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ［Ｊ］ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ２０１３３３（１０）４４５３６１

（收稿日期２０１６０２０１）

Ｆｕｎｄ ｐｒｏｇｒａｍ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ （ ８１０７２０１７） Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｐｒｏｊｅｃｔ （Ｚ１４１１０７００２５１４１６０）

　 　 放疗是前列腺癌的主要治疗方法之一为了提

高肿瘤的 ＬＣ 率目前通常采取高剂量放疗方法但这会引起较严重不良反应降低患者治疗依从性和

生活质量［１３］ 因此寻求一种可以提高肿瘤放射敏

感性 的 药 物 很 有 必 要 ２prime羟 基 黄 烷 酮 （ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ２primeＨＦ）是一种植物类黄酮类小分

子化合物对多种恶性肿瘤均有抑制增殖作用［４７］其作用机制包括促进 Ｇ２＋Ｍ 期阻滞和细胞凋亡而上述机制与放射增敏密切相关［８９］ 本研究将这种

小分子化合物作用于前列腺癌细胞系观察细胞放

射敏感性的变化并初步探讨其作用机制

材料与方法

　 　 １细胞系选取及细胞培养前列腺癌细胞株

ＶＣａＰ 购自 ＡＴＣＣ培养于含 １０胎牛血清（ＨｙＣｌｏｎｅ公司）１双抗（ＨｙＣｌｏｎｅ 公司） 的 ＤＭＥＭ 培养基

（中科迈晨科技有限公司）中培养箱需保持 ３７５ ＣＯ２ 的饱和湿度培养环境 每 ３ 天传代一次取对数生长期细胞用于实验

２药物来源及工作浓度测定２primeＨＦ 购自 Ｓｉｇｍａ公司呈白色粉末状 采用 Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂法检测

２primeＨＦ 对 ＶＣａＰ 细胞的 ４８ ｈ ＩＣ５０值以此为基础确定

最终工作浓度 配置不同浓度的 ２primeＨＦ 培养液在９６ 孔板中铺种 ＶＣａＰ 细胞待细胞贴壁后分别加入

含 ０1049008 ００３ ０1049008 ０３０ ０1049008 ３００ ３1049008 ０００ ３０1049008 ０００ ３００1049008 ０００μｍｏｌ Ｌ ２primeＨＦ 的培养液 １００ μｌ培养 ４８ ｈ按说明书

加入 Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂（ Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ 公司）于细胞培

养箱避光孵育２～６ ｈ 后用酶标仪检测每孔的荧光强

度（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙＦＩ）并记录 细胞存活率 ＝实验组 ＦＩ 对照组 ＦＩtimes１００ 实验重复 ３ 次取 ＩＣ５０

均值 在得出的 ＩＣ５０值下取几个药物浓度进行细

胞长期抑制实验确定较佳的作用浓度３细胞放射敏感性检测

（１）克隆形成实验给予细胞 ００1049008 ５１1049008 ０２1049008 ０４1049008 ０６1049008 ０ Ｇｙ 照射 不同剂量组依次铺种 ５００８００８００１０００４０００８０００ 个 ＶＣａＰ 细胞 待细胞贴壁后

向 ２primeＨＦ 组中加入 ２primeＨＦ使培养液中药物浓度达到

１０ μｍｏｌ Ｌ向空白对照组中加入普通培养液培养

４８ ｈ 后采用医用直线加速器（瓦里安 Ｃｌｉｎｉｃ瓦里安

医疗系统公司美国）６ ＭＶ Ｘ 线进行体外照射剂量

率为 ４００ ｃＧｙ ｍｉｎ源皮距为 １００ ｃｍ照射后即刻换

取新鲜不含 ２primeＨＦ 的培养液继续培养 １４ ｄ固定染色计数并拍照 计数ge５０ 个细胞的克隆计算细

胞存活分数（ＳＦ）即ＳＦ＝克隆数 （接种细胞数times未照射细胞克隆形成率） 使用多靶单击模型［ＳＦ＝ １ndash（１ ndash ｅ－ＫＤ） Ｎ］拟合细胞存活曲线计算反映细胞

敏感性的参数Ｄ０Ｄｑ 值 基于计算出的空白对照组

和 ２primeＨＦ 组Ｄ０值计算放射增敏比（ＳＥＲ）即 ＳＥＲ ＝对照组Ｄ０值 ２primeＨＦ 组Ｄ０值此值越大说明 ２primeＨＦ 放

射增敏能力越强反之亦然（２） ＴＢＨＴ 氧化损伤实验在两块 ９６ 孔板上分

别铺两组细胞一组为未加 ２primeＨＦ 处理的空白对照

组细胞另一组为 ２primeＨＦ 组细胞处理 ４８ ｈ 后分别

向两组细胞中加入含 ０２５５０１００２００４００ μｍｏｌ ＬＴＢＨＰ （百灵威科技有限公司）的培养液 一块 ９６孔板处理 ３０ ｍｉｎ另一块处理 ６０ ｍｉｎ之后按说明书

加入 Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂于培养箱避光孵育 ２６ ｈ 后

用酶标仪检测 ＦＩ（３） Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色实验准备 ６ 孔板铺种

一定量的 ＶＣａＰ 细胞待细胞长至 ５０时将细胞分

为 ４ 组第 １ 组是空白对照第 ２ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ｈ第 ３ 组采用 ４ Ｇｙ 照射第 ４ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ后联合 ４ Ｇｙ 照射 通过以上 ４ 种方法处理 ＶＣａＰ细胞后换液继续培养 ４８ ｈ利用 Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８ 试

剂盒（上海碧云天生物科技有限公司）中说明书所

述操作进行固定染色封片 在荧光倒置显微镜

（ＩＸ８１奥林巴斯日本）下观察细胞形态蓝色为正

常细胞发白色为发生凋亡的细胞拍照并计数（４） Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法凋亡检测实

验前期处理同 Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色实验将培养细胞

分为 ４ 组分组方法亦同 Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色实验按不同方法对 ＶＣａＰ 细胞进行处理后收集细胞经ＰＢＳ 清洗后按说明加入 ５ μｌ Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 及 １０μｌ２０μｇ ｍｌ ＰＩ 溶液（北京四正柏生物科技有限公

司）再加入 ＰＢＳ 后用流式细胞仪（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ公司）进行检测分析

４机制探讨采用 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 方法检测放射敏

感性相关蛋白的表达 用 ３５ ｍｍ 平皿培养前列腺

癌 ＶＣａＰ 细胞取由上述实验中得到的 ＩＣ５０值下几个

药物浓度培养 ４８ ｈ 后的细胞提取总蛋白并定量对各处理组提取 ２０ μｇ 总蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶

电泳（ＳＤＳＰＡＧＥ） 将蛋白转印至聚偏二氟乙烯膜

（ＰＶＤＦ 膜）上用 ５脱脂牛奶室温封闭 ２ ｈ４孵

育一抗过夜ＴＢＳＴ 缓冲液清洗后室温孵育二抗 １ ｈ再次洗膜后加入荧光发光液检测

５统计方法用 ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５1049008 ０ 软件得出

ＩＣ５０值拟合出细胞存活曲线参数 用 ＳＰＳＳ ２０1049008 ０ 软

件行单因素方差分析或 ｔ 检验多因素比较采用析因

设计方差分析完成 Ｐ＜０1049008 ０５ 为差异有统计学意义

结　 　 果

　 　 １２primeＨＦ 工作浓度选取

（１）ＩＣ５０值Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂法检测 ２primeＨＦ 处理

ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ ＦＩ 值并计算存活率ＩＣ５０值为 ３２８１μｍｏｌ Ｌ

（２）工作浓度依据 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细

胞活力影响的时间剂量曲线结果发现 ２primeＨＦ 对

ＶＣａＰ 细胞活性具有抑制作用并呈时间与剂量依

赖性（图 １） 结果显示药物处理 ４８ ｈ 时后 １０μｍｏｌ Ｌ 及其以下浓度对细胞活力无明显抑制但２０μｍｏｌ Ｌ 浓度可对 ＶＣａＰ 细胞产生较为明显的抑

制作用 因此本研究选取 １０ μｍｏｌ Ｌ 作为 ２primeＨＦ处理 ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ 工作浓度

２1049008 ２primeＨＦ 对 ＶＣａＰ 细胞放射敏感性的影响

（１）克隆形成实验结果２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞的

克隆形成能力明显高于空白对照组（Ｐ＝ ０1049008 ０１０）表明 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞的放射敏感性高于空白对照

组详见图 ２ 和表 １

表 １　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞放射增敏的参数（1051504ｘplusmnｓ）

组别 Ｄ０ 值（Ｇｙ） Ｄｑ 值（Ｇｙ） ＳＥＲ对照组 １５６plusmn０１３ １８３plusmn０３８２primeＨ 组 １３１plusmn０１２ １４４plusmn０３４ １１９

　 　 （２） ＴＢＨＴ 氧化损伤实验结果向空白对照组

和 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞培养液中加入不同浓度梯度

的 ＴＢＨＰ 分别处理 ３０ ｍｉｎ 和 ６０ ｍｉｎ 引起细胞氧化

损伤后出现 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞活力低于空白对

照组的趋势 其中 ＴＢＨＰ 处理 ＶＣａＰ 细胞 ３０ ｍｉｎ 后

２５５０ μｍｏｌ Ｌ 剂量组和处理 ６０ ｍｉｎ 后 ２５ μｍｏｌ Ｌ剂量组中细胞活力低于空白对照组 （ Ｐ＝ ０1049008 ０１８０1049008 ０１５０1049008 ０２４）详见图 ３

（３） Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ双染法流式细胞仪凋亡检测实验结果在 ４ 个处理

组中第 ２ 组 ＶＣａＰ 细胞的凋亡率与第 １ 组相比差

异无统计学意义（Ｐ＝ ０1049008 ０８００1049008 ０６５）但存在增高趋

势第 ４ 组细胞凋亡率与其他组相比为最高（Ｐ＝００１００1049008 ００３）提示 ２primeＨＦ 可与放射线协同促进损伤

效应详见图 ４

图 １　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞增殖活力影响的时间剂量曲线

图 ２　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞放射增敏的细胞存活曲线

图 ３　 空白对照组与 ２primeＨＦ 组经 ＴＢＨＰ 处理后细胞活力曲线（分别给予空白对照组和加入 １０ μｍｏｌ Ｌ ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ 组中的 ＶＣａＰ 细胞不同浓度的 ＴＢＨＰ在作用不同时间点检测细胞活力 ３Ａ 为ＴＢＨＰ 处理时间为 ３０ ｍｉｎ 时的细胞活力曲线３Ｂ 为 ＴＢＨＰ 处理时间为 ６０ ｍｉｎ 时的细胞活力曲线）

讨　 　 论

　 　 前列腺癌是威胁全球男性健康的第二大恶性肿

瘤［１０］ 在中国其发病率及病死率呈逐渐增长趋

图 ４　 不同方法处理组细胞凋亡情况检测［４Ａ 为用不同方法处理组细胞凋亡荧光染色图箭头所指为发生凋亡的细胞（４Ａ１ 为第 １组不加任何处理的空白对照４Ａ２ 为第 ２ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ４Ａ３为第 ３ 组采用 ４ Ｇｙ 照射４Ａ４４ 为第 ４ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ 后联合４ Ｇｙ 照射）４Ｂ 为用不同方式处理前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞后荧光染色检测所得细胞凋亡率４Ｃ 为用不同方式处理前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞后Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法流式细胞仪检测细胞凋亡结果分析所得细胞凋亡率）］

势［１１１２］ 目前前列腺癌放疗以大剂量为主对中高危患者局部照射剂量已提高至 ８１ Ｇｙ［１３］这难免造

成周围组织损伤 如果能找到一种合适的放射增敏

药物也许可以降低局部受量亦可达到较好 ＬＣ率降低放疗不良反应提高患者治疗依从性及生活

质量 因此笔者在这方面进行了初步的研究探讨　 　 ２primeＨＦ 是一种植物类黄酮类小分子化合物主要存在于水果和蔬菜中［４］其同类化合物黄连素因具有抗炎抗心律失常和抗肿瘤等作用已被广泛应

用于临床［１４］ 有文献报道２primeＨＦ也具有抗肿瘤效

图 ５　 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴｐＡＫＴ 和 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达量的影响（５Ａ 为分别以不同浓度 ２primeＨＦ 处理 ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ 后Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 实验检测 ＡＫＴｐＡＫＴＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达情况５Ｂ 为 ＡＫＴ 蛋白表达水平分析结果５Ｃ 为 ｐＡＫＴ 蛋白表达水平分析结果５Ｄ 为 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达水平分析结果５Ｅ 为不同处理组不同蛋白表达水平的Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测结果）

应 如将细胞阻滞于Ｇ２ ＋Ｍ期［７９］ 促进细胞凋

亡［４］减慢肿瘤血管生成［７９］ 等 因 Ｇ２ ＋Ｍ 期阻滞

及细胞凋亡与放射敏感性相关［１５１７］故笔者推测 ２primeＨＦ 很可能具有放射增敏作用 本克隆形成实验结

果证实加入 ２primeＨＦ 组在照射后细胞存活分数明显低

于空白对照组ＴＢＨＰ 氧化损伤实验结果提示经 ２primeＨＦ 处理后对 ＴＢＨＰ 引起的氧化损伤更为敏感进一

步证实了克隆形成实验结果Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法检测结果证实 ２primeＨＦ组照射后细胞凋亡率更高 可见 ２primeＨＦ 对前列腺癌

ＶＣａＰ 细胞确实具有放射增敏作用另外本研究还对 ２primeＨＦ 增敏的机制进行了初

步探讨 众所周知 ＡＫＴ 信号转导通路是一条经典

的放射抵抗通路［１６２１］在所有关于放射抵抗通路的

研究中ＰＩ３Ｋ ＡＫＴ ｍＴＯＲ 是研究最多的一条 此

通路与血管生成的关系最为密切此外ＨＩＦ１ 可以

通过激活此通路发挥放射抵抗作用 ＡＫＴ 是 ＰＩ３Ｋ通路中的主要调节蛋白与细胞的周期及凋亡调节

相关 ＡＫＴ 激活为 ｐＡＫＴ 后可以激活其下游基因使细胞中 Ｃｈｋ１ 失活从而增加 Ｇ０Ｇ１ 期阻滞并减少

Ｇ２ 期阻滞［２２２３］从而提高细胞的放射抵抗性 ＡＫＴ信号通路受到抑制即 ｐＡＫＴ 表达量下降可以促

进细胞凋亡 阻滞细胞周期 提高其放射敏感

性［１７１９］ 而 ２primeＨＦ 具有促进细胞凋亡阻滞细胞周

期的作用因此本研究检测了 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴ 和 ｐＡＫＴ 蛋白表达的影响结果显示 ２primeＨＦ 可以减少 ｐＡＫＴ 蛋白的表达且照射后经 ２primeＨＦ 处理过的细胞

ｐＡｋＴ 蛋白表达水平明显下调因此认为 ２primeＨＦ 可

通过抑制 ＡＫＴ 信号转导通路来提高前列腺癌的放

射敏感性ＡＫＲ１Ｃ３ 是一种放射抵抗相关基因已有研究

证实在食管癌细胞中过表达的 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因可以

通过减轻细胞氧化损伤降低 ＲＯＳ 水平和辐射诱导

的 ＤＮＡ 损伤来实现放射抵抗作用利用小分子

ＲＮＡ 干扰技术下调 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因的表达可以提高

食管癌细胞的放射敏感性［１５１７］并且已有研究证实

肺癌中 ＡＫＲ１Ｃ３ 也可以促进细胞的放射抵抗［２５］还有研究发现在前列腺癌细胞中 ＡＫＲ１Ｃ３ 过表达

可以通过促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过

激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路从而导致前列腺癌

放射抵抗［２６］ 多项研究证实 ２primeＨＦ 可以抑制体外

ＡＫＲ１Ｃ３ 酶的活性［２７２９］但对其在细胞内活性及蛋

白表达水平影响的相关研究很少且无充分确切依

据 本研究发现 ２primeＨＦ 可抑制前列腺癌细胞中

ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达而且这种抑制作用具有浓度依

赖性照射后这种抑制作用也较为明显 因此 ２primeＨＦ 发挥放射增敏作用可能与抑制 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表

达有关目前已有研究证实低浓度 ２primeＨＦ 不仅可促进肿

瘤细胞凋亡而且可通过抑制雄激素受体活性来延

缓前列腺癌细胞生长向激素非依赖转化并抑制前

列腺癌细胞增殖［３０］ 是否 ２primeＨＦ 对前列腺癌细胞

放射增敏作用与雄激素受体活性受到抑制从而促进

对细胞杀伤力有关 本研究证明了低浓度 ２primeＨＦ 对

前列腺癌细胞的抑制增殖与其放射增敏作用可以协

同促进前列腺癌细胞凋亡但低浓度药物本身对细

胞生长活力影响不大 然而随着药物浓度增加这种协同促凋亡机制可能会更为明显针对这点还需

进一步研究综上所述本研究结果显示 ２primeＨＦ 对前列腺癌

细胞具有放射增敏作用其对前列腺癌细胞促凋亡

作用可与放射线协同促进对前列腺癌细胞杀伤 这

种作用可能与阻滞 ＡＫＴ 信号通路或抑制 ＡＫＲ１Ｃ３蛋白表达有关但 ＡＫＲ１Ｃ３ 与 ＡＫＴ 信号通路之间是

否具有相互调控的关系还需要进一步研究证实志谢　 北京大学国家天然药物及仿生药物重点实验室的周德敏教授

及北京大学第一医院放疗科的虞浩马茗微亓昕崔明周东等同学

在本次实验研究中提供了帮助

参　 考　 文　 献

［１］ Ａｒｃａｎｇｅｌｉ Ｓ Ｓｔｒｉｇａｒｉ Ｌ Ｓｏｅｔｅ Ｇ ｅｔ ａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｄｏｓｉｍｅｔｒｉｃｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｆｔｅｒ ａ ４ｗｅｅｋ ｈｙｐｏｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ ｅｘｔｅｒｎａｌｂｅａｍ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｒｅｇｉｍｅｎ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ａｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｉｃ ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｔｒｉａｌ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ２００９７３（１）３９４５ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２００８０４００５

［２］ Ｄｅｌｋｅｒ ＡＦｅｎｄｌｅｒ ＷＰＫｒａｔｏｃｈｗｉｌ Ｃｅｔ ａｌ Ｄｏｓｉｍｅｔｒｙ ｆｏｒ （１７７）ＬｕＤＫＦＺＰＳＭＡ６１７ａ ｎｅｗ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｅｕｒ Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｉｍａｇ２０１６４３（１）４２５１ＤＯＩ１０１００７ ｓ００２５９０１５３１７４７

［３］ Ｔａｎｅｊａ ＳＳ Ｒｅ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｓｕｒｇｅｒｙ ｗｉｔｈ ｏｒ ｗｉｔｈｏｕｔｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｒ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ａｌｏｎｅ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｊ Ｕｒｏｌ２０１５１９４（３）７０３ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｕｒｏ２０１５０６０４８

［４］ Ｓｉｎｇｈａｌ ＳＳ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ Ｆｉｇａｒｏｌａ ＪＬ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ Ａｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｆｏｒ ｋｉｄｎｅｙ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ［Ｊ］ ＢｉｏｃｈｅｍＰｈａｒｍａｃｏｌ２０１５９６（３）１５１１５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊ ｂｃｐ２０１５０４０２２

［５］ Ｌｕ ＫＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ Ｌｕｅ ＫＨ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ １４３ Ｂ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅｅｘｔｒｉｎｓｉｃ ＴＲＡＩＬａｎｄ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｍｅｄｉａｔｅｄ ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］ Ｎｕｔｒ Ｃａｎｃｅｒ ２０１４ ６６ （ ４ ） ６２５６３５ ＤＯＩ １０ １０８０ ０１６３５５８１２０１４1049008 ８９４１００

［６］ Ｎａｇａｐｒａｓｈａｎｔｈａ ＬＤ Ｖａｔｓｙａｙａｎ Ｒ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｔｕｍｏｒ ｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｓ ｎｏｒｍａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ＶＨＬｍｕｔａｎｔ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ［Ｊ］ Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ２０１１ ３２ （ ４） ５６８５７５ ＤＯＩ １０１０９３ ｃａｒｃｉｎ ｂｇｒ０２１

［７］ Ｈｓｉａｏ ＹＣ Ｋｕｏ ＷＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ ｅｔ ａｌ Ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｎｄ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ

Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ２００７１６７（３）１９３２０６ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００７０２０１２

［８］ Ｓｈｉｎ ＳＹ Ｋｉｍ ＪＨ Ｌｅｅ ＪＨ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｅｇｒ１ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂａｘ ｐ２１ ａｎｄＮＡＧ１ ｉｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｍｏｌ Ｎｕｔｒ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ２０１２５６（５）７６１７７４ＤＯＩ１０１００２ ｍｎｆｒ２０１１００６５１

［９］ Ｈｓｉａｏ ＹＣＨｓｉｅｈ ＹＳＫｕｏ ＷＨｅｔ ａｌ Ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｉｎｓａｎｄ ＣＤＫｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｂｉｏｍｅｄ Ｓｃｉ ２００７ １４ （ １） １０７１１９ ＤＯＩ １０１００７ ｓ１１３７３００６９１１７３

［１０］ Ｆｅｒｌａｙ ＪＳｏｅｒｊｏｍａｔａｒａｍ ＩＤｉｋｓｈｉｔ Ｒｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ ｓｏｕｒｃｅｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍａｊｏｒ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎＧＬＯＢＯＣＡＮ ２０１２ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ２０１５１３６ （ ５）Ｅ３５９３８６ＤＯＩ１０１００２ ｉｊｃ２９２１０

［１１］ Ｃｈｅｎ ＷＺｈｅｎｇ ＲＢａａｄｅ ＰＤｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ２０１５ ［Ｊ］ ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ２０１６ＤＯＩ１０３３２２ ｃａａｃ２１３３８

［１２］ 韩苏军张思维陈万青等中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析［Ｊ］ 临床肿瘤学杂志２０１３１８（４）３３０３３４Ｈａｎ ＳＰ Ｚｈａｎｇ ＳＷ Ｃｈｅｎ ＷＱ ｅｔ ａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔｓｉｔｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ２０１３１８（４）３３０３３４

［１３］ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＮＣＣＮ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＰｒａｃｔｉｃｅＧｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｉｎ ＯｎｃｏｌｏｇｙＰｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｖ １ ２０１６ Ａｖａｉｌａｂｌｅ ａｔｈｔｔｐ ｗｗｗｎｃｃｎｏｒｇ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ ｐｈｙｓｉｃｉａｎ＿ ｇｌｓ ＰＤＦ ｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｐｄｆ Ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｊａｎｕａｒｙ ２８２０１６

［１４］ Ｐｉｒｉｌｌｏ ＡＣａｔａｐａｎｏ ＡＬＢｅｒｂｅｒｉｎｅａ ｐｌａｎｔ ａｌｋａｌｏｉｄ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｌｏｗｅｒｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｔｏ ｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓ ［Ｊ］ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ２０１５ ２４３ （ ２ ） ４４９４６１ ＤＯＩ １０１０１６ ｊａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ２０１５０９０３２

［１５］ Ｓｈｉ ＭＶｉｖｉａｎ ＣＪＬｅｅ ＫＪｅｔ ａｌ ＤＮＡＰＫｃｓＰＩＤＤｏｓｏｍｅａ ｎｕｃｌｅａｒｃａｓｐａｓｅ２ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ ｒｏｌｅ ｉｎ Ｇ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ２００９１３６（ ３）５０８５２０ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊｃｅｌｌ２００８１２０２１

［１６］ Ｄｅｎｇ ＲＴａｎｇ ＪＭａ ＪＧｅｔ ａｌ ＰＫＢ Ａｋｔ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ＤＳＢ ｒｅｐａｉｒ ｉｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｍｒｅ１１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２０１１３０（８）９４４９５５ＤＯＩ１０１０３８ ｏｎｃ２０１０1049008 ４６７

［１７］ Ｊｉａｎｇ Ｚ Ｐｏｒｅ Ｎ Ｃｅｒｎｉｇｌｉａ ＧＪ ｅｔ ａｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｕｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｏｎｆｅｒｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｒａｄｉａｔｉｏｎａｎｄ ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ ｔｈａｔ ｉｓ ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ ［Ｊ］ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００７ ６７ （ ９） ４４６７４４７３ ＤＯＩ １０１１５８ ０００８５４７２ＣＡＮ０６３ ３９８

［１８］ Ｃｈａｎｇ Ｌ Ｇｒａｈａｍ ＰＨ Ｈａｏ Ｊ ｅｔ ａｌ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＰＩ３Ｋ Ａｋｔ ｍＴＯＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ２０１３４ｅ８７５ＤＯＩ１０１０３８ ｃｄｄｉｓ２０１３1049008 ４０７

［１９］ Ｚａｎｎｅｌｌａ ＶＥ Ｃｏｊｏｃａｒｉ Ｄ Ｈｉｌｇｅｎｄｏｒｆ Ｓ ｅｔ ａｌ ＡＭＰＫ ｒｅｇｕｌａｔｅｓｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］

Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ Ｏｎｃｏｌ２０１１９９（３）２９３２９９ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｒａｄｏｎｃ２０１１０５０４９

［２０］ Ｓｈｉｍｕｒａ Ｔ Ａｃｑｕｉｒｅｄ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ＡＫＴ ＧＳＫ３ｂｅｔａ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｙｃｌｅ ［Ｊ］ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｒｅｓ２０１１５２（５）５３９５４４

［２１］ Ｓａｎｌｉ ＴＲａｓｈｉｄ ＡＬｉｕ Ｃｅｔ ａｌ Ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＡＭＰａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ （ＡＭＰＫ）ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ ２０１０７８（１）２２１２２９ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２０１００３００５

［２２］ Ｙａｒｄｅｎ ＲＩＰａｒｄｏＲｅｏｙｏ ＳＳｇａｇｉａｓ Ｍｅｔ ａｌ ＢＲＣＡ１ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅＧ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｃｈｋ１ ｋｉｎａｓｅ ｕｐｏｎ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ［Ｊ］ Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ２００２３０（３）２８５２８９ＤＯＩ１０１０３８ ｎｇ８３７

［２３］ Ｘｕ Ｎ Ｈｅｇａｒａｔ Ｎ Ｂｌａｃｋ ＥＪ ｅｔ ａｌ Ａｋｔ ＰＫＢ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ＤＮＡｄａｍａｇｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｌａｔｅ Ｇ２ ［Ｊ］ Ｊ ＣｅｌｌＢｉｏｌ２０１０１９０（３）２９７３０５ＤＯＩ１０１０８３ ｊｃｂ２０１００３００４

［２４］ Ｘｉｏｎｇ ＷＺｈａｏ ＪＹｕ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｅｌｅｖａｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｖｉａｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ［Ｊ］ ＰｌｏＳ ｏｎｅ ２０１４ ９ （ １１ ）ｅ１１１９１１ＤＯＩ１０１３７１ ｊｏｕｒｎａｌｐｏｎｅ０１１１９１１

［２５］ Ｘｉｅ ＬＹｕ ＪＧｕｏ Ｗｅｔ ａｌ Ａｌｄｏｋｅｔｏ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ １Ｃ３ ｍａｙ ｂｅ ａ ｎｅｗｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍａｒｋｅｒ ｉｎ ｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ ＣａｎｃｅｒＧｅｎｅ Ｔｈｅｒ２０１３２０（４）２６０２６６ＤＯＩ１０１０３８ ｃｇｔ２０１３1049008 １５

［２６］ 孙少倩李懿王雯等ＡＫＲ１Ｃ３ 的过表达会促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路导致前列腺癌的放射抵抗［Ａ］ 中华医学会第十二次全国放射肿瘤治疗会议论文集［Ｃ］北京中华医学会２０１５ＰＢ０９２Ｓｕｎ ＳＨＱ Ｌｉ Ｗ Ｗａｎｇ Ｗ ｅｔ ａｌ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｆａｃｔｏｒ ＰＧＦ２ａｌｐｈａ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ＰＰＡＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ａ］ Ｃｈｉｎｅｓｅ ＭｅｄｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ １２ｔｈ ｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｎｃｏｌｏｇｙ ［Ｃ］ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ２０１５ＰＢ０９２

［２７］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＺｉｖｎａ ＬＸｉｏｎｇ Ｇｅｔ ａｌ ＡＫＲ１Ｃ３ ａｓ ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔａｒｇｅｔｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ ＢｉｏｌＩｎｔｅｒａｃｔ２００９１７８（ １３）１３８１４４ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００８ １００１５

［２８］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＨｏｆｍａｎ ＪＣｈｌｅｂｅｋ Ｊｅｔ ａｌ Ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ａｓａ ｎｏｖｅｌ ｔｙｐｅ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ ＭｏｌＢｉｏｌ２０１４１４３２５０２５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１４０４００５

［２９］ Ｂｙｒｎｓ ＭＣ Ｊｉｎ Ｙ Ｐｅｎｎｉｎｇ ＴＭ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｙｐｅ ５ １７ｂｅｔａｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （ＡＫＲ１Ｃ３）ｏｖｅｒｖｉｅｗ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｓｉｇｈｔｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２０１１１２５ （ １２）９５１０４ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１０１１００４

［３０］ Ｏｆｕｄｅ Ｍ Ｍｉｚｏｋａｍｉ Ａ Ｋｕｍａｋｉ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓｂｙ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ［Ｊ］ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ２０１３３３（１０）４４５３６１

（收稿日期２０１６０２０１）

（ＰＶＤＦ 膜）上用 ５脱脂牛奶室温封闭 ２ ｈ４孵

育一抗过夜ＴＢＳＴ 缓冲液清洗后室温孵育二抗 １ ｈ再次洗膜后加入荧光发光液检测

５统计方法用 ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５1049008 ０ 软件得出

ＩＣ５０值拟合出细胞存活曲线参数 用 ＳＰＳＳ ２０1049008 ０ 软

件行单因素方差分析或 ｔ 检验多因素比较采用析因

设计方差分析完成 Ｐ＜０1049008 ０５ 为差异有统计学意义

结　 　 果

　 　 １２primeＨＦ 工作浓度选取

（１）ＩＣ５０值Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ 试剂法检测 ２primeＨＦ 处理

ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ ＦＩ 值并计算存活率ＩＣ５０值为 ３２８１μｍｏｌ Ｌ

（２）工作浓度依据 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细

胞活力影响的时间剂量曲线结果发现 ２primeＨＦ 对

ＶＣａＰ 细胞活性具有抑制作用并呈时间与剂量依

赖性（图 １） 结果显示药物处理 ４８ ｈ 时后 １０μｍｏｌ Ｌ 及其以下浓度对细胞活力无明显抑制但２０μｍｏｌ Ｌ 浓度可对 ＶＣａＰ 细胞产生较为明显的抑

制作用 因此本研究选取 １０ μｍｏｌ Ｌ 作为 ２primeＨＦ处理 ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ 工作浓度

２1049008 ２primeＨＦ 对 ＶＣａＰ 细胞放射敏感性的影响

（１）克隆形成实验结果２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞的

克隆形成能力明显高于空白对照组（Ｐ＝ ０1049008 ０１０）表明 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞的放射敏感性高于空白对照

组详见图 ２ 和表 １

表 １　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞放射增敏的参数（1051504ｘplusmnｓ）

组别 Ｄ０ 值（Ｇｙ） Ｄｑ 值（Ｇｙ） ＳＥＲ对照组 １５６plusmn０１３ １８３plusmn０３８２primeＨ 组 １３１plusmn０１２ １４４plusmn０３４ １１９

　 　 （２） ＴＢＨＴ 氧化损伤实验结果向空白对照组

和 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞培养液中加入不同浓度梯度

的 ＴＢＨＰ 分别处理 ３０ ｍｉｎ 和 ６０ ｍｉｎ 引起细胞氧化

损伤后出现 ２primeＨＦ 组 ＶＣａＰ 细胞活力低于空白对

照组的趋势 其中 ＴＢＨＰ 处理 ＶＣａＰ 细胞 ３０ ｍｉｎ 后

２５５０ μｍｏｌ Ｌ 剂量组和处理 ６０ ｍｉｎ 后 ２５ μｍｏｌ Ｌ剂量组中细胞活力低于空白对照组 （ Ｐ＝ ０1049008 ０１８０1049008 ０１５０1049008 ０２４）详见图 ３

（３） Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ双染法流式细胞仪凋亡检测实验结果在 ４ 个处理

组中第 ２ 组 ＶＣａＰ 细胞的凋亡率与第 １ 组相比差

异无统计学意义（Ｐ＝ ０1049008 ０８００1049008 ０６５）但存在增高趋

势第 ４ 组细胞凋亡率与其他组相比为最高（Ｐ＝００１００1049008 ００３）提示 ２primeＨＦ 可与放射线协同促进损伤

效应详见图 ４

图 １　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞增殖活力影响的时间剂量曲线

图 ２　 ２primeＨＦ 对前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞放射增敏的细胞存活曲线

图 ３　 空白对照组与 ２primeＨＦ 组经 ＴＢＨＰ 处理后细胞活力曲线（分别给予空白对照组和加入 １０ μｍｏｌ Ｌ ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ 组中的 ＶＣａＰ 细胞不同浓度的 ＴＢＨＰ在作用不同时间点检测细胞活力 ３Ａ 为ＴＢＨＰ 处理时间为 ３０ ｍｉｎ 时的细胞活力曲线３Ｂ 为 ＴＢＨＰ 处理时间为 ６０ ｍｉｎ 时的细胞活力曲线）

讨　 　 论

　 　 前列腺癌是威胁全球男性健康的第二大恶性肿

瘤［１０］ 在中国其发病率及病死率呈逐渐增长趋

图 ４　 不同方法处理组细胞凋亡情况检测［４Ａ 为用不同方法处理组细胞凋亡荧光染色图箭头所指为发生凋亡的细胞（４Ａ１ 为第 １组不加任何处理的空白对照４Ａ２ 为第 ２ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ４Ａ３为第 ３ 组采用 ４ Ｇｙ 照射４Ａ４４ 为第 ４ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ 后联合４ Ｇｙ 照射）４Ｂ 为用不同方式处理前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞后荧光染色检测所得细胞凋亡率４Ｃ 为用不同方式处理前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞后Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法流式细胞仪检测细胞凋亡结果分析所得细胞凋亡率）］

势［１１１２］ 目前前列腺癌放疗以大剂量为主对中高危患者局部照射剂量已提高至 ８１ Ｇｙ［１３］这难免造

成周围组织损伤 如果能找到一种合适的放射增敏

药物也许可以降低局部受量亦可达到较好 ＬＣ率降低放疗不良反应提高患者治疗依从性及生活

质量 因此笔者在这方面进行了初步的研究探讨　 　 ２primeＨＦ 是一种植物类黄酮类小分子化合物主要存在于水果和蔬菜中［４］其同类化合物黄连素因具有抗炎抗心律失常和抗肿瘤等作用已被广泛应

用于临床［１４］ 有文献报道２primeＨＦ也具有抗肿瘤效

图 ５　 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴｐＡＫＴ 和 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达量的影响（５Ａ 为分别以不同浓度 ２primeＨＦ 处理 ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ 后Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 实验检测 ＡＫＴｐＡＫＴＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达情况５Ｂ 为 ＡＫＴ 蛋白表达水平分析结果５Ｃ 为 ｐＡＫＴ 蛋白表达水平分析结果５Ｄ 为 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达水平分析结果５Ｅ 为不同处理组不同蛋白表达水平的Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测结果）

应 如将细胞阻滞于Ｇ２ ＋Ｍ期［７９］ 促进细胞凋

亡［４］减慢肿瘤血管生成［７９］ 等 因 Ｇ２ ＋Ｍ 期阻滞

及细胞凋亡与放射敏感性相关［１５１７］故笔者推测 ２primeＨＦ 很可能具有放射增敏作用 本克隆形成实验结

果证实加入 ２primeＨＦ 组在照射后细胞存活分数明显低

于空白对照组ＴＢＨＰ 氧化损伤实验结果提示经 ２primeＨＦ 处理后对 ＴＢＨＰ 引起的氧化损伤更为敏感进一

步证实了克隆形成实验结果Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法检测结果证实 ２primeＨＦ组照射后细胞凋亡率更高 可见 ２primeＨＦ 对前列腺癌

ＶＣａＰ 细胞确实具有放射增敏作用另外本研究还对 ２primeＨＦ 增敏的机制进行了初

步探讨 众所周知 ＡＫＴ 信号转导通路是一条经典

的放射抵抗通路［１６２１］在所有关于放射抵抗通路的

研究中ＰＩ３Ｋ ＡＫＴ ｍＴＯＲ 是研究最多的一条 此

通路与血管生成的关系最为密切此外ＨＩＦ１ 可以

通过激活此通路发挥放射抵抗作用 ＡＫＴ 是 ＰＩ３Ｋ通路中的主要调节蛋白与细胞的周期及凋亡调节

相关 ＡＫＴ 激活为 ｐＡＫＴ 后可以激活其下游基因使细胞中 Ｃｈｋ１ 失活从而增加 Ｇ０Ｇ１ 期阻滞并减少

Ｇ２ 期阻滞［２２２３］从而提高细胞的放射抵抗性 ＡＫＴ信号通路受到抑制即 ｐＡＫＴ 表达量下降可以促

进细胞凋亡 阻滞细胞周期 提高其放射敏感

性［１７１９］ 而 ２primeＨＦ 具有促进细胞凋亡阻滞细胞周

期的作用因此本研究检测了 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴ 和 ｐＡＫＴ 蛋白表达的影响结果显示 ２primeＨＦ 可以减少 ｐＡＫＴ 蛋白的表达且照射后经 ２primeＨＦ 处理过的细胞

ｐＡｋＴ 蛋白表达水平明显下调因此认为 ２primeＨＦ 可

通过抑制 ＡＫＴ 信号转导通路来提高前列腺癌的放

射敏感性ＡＫＲ１Ｃ３ 是一种放射抵抗相关基因已有研究

证实在食管癌细胞中过表达的 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因可以

通过减轻细胞氧化损伤降低 ＲＯＳ 水平和辐射诱导

的 ＤＮＡ 损伤来实现放射抵抗作用利用小分子

ＲＮＡ 干扰技术下调 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因的表达可以提高

食管癌细胞的放射敏感性［１５１７］并且已有研究证实

肺癌中 ＡＫＲ１Ｃ３ 也可以促进细胞的放射抵抗［２５］还有研究发现在前列腺癌细胞中 ＡＫＲ１Ｃ３ 过表达

可以通过促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过

激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路从而导致前列腺癌

放射抵抗［２６］ 多项研究证实 ２primeＨＦ 可以抑制体外

ＡＫＲ１Ｃ３ 酶的活性［２７２９］但对其在细胞内活性及蛋

白表达水平影响的相关研究很少且无充分确切依

据 本研究发现 ２primeＨＦ 可抑制前列腺癌细胞中

ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达而且这种抑制作用具有浓度依

赖性照射后这种抑制作用也较为明显 因此 ２primeＨＦ 发挥放射增敏作用可能与抑制 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表

达有关目前已有研究证实低浓度 ２primeＨＦ 不仅可促进肿

瘤细胞凋亡而且可通过抑制雄激素受体活性来延

缓前列腺癌细胞生长向激素非依赖转化并抑制前

列腺癌细胞增殖［３０］ 是否 ２primeＨＦ 对前列腺癌细胞

放射增敏作用与雄激素受体活性受到抑制从而促进

对细胞杀伤力有关 本研究证明了低浓度 ２primeＨＦ 对

前列腺癌细胞的抑制增殖与其放射增敏作用可以协

同促进前列腺癌细胞凋亡但低浓度药物本身对细

胞生长活力影响不大 然而随着药物浓度增加这种协同促凋亡机制可能会更为明显针对这点还需

进一步研究综上所述本研究结果显示 ２primeＨＦ 对前列腺癌

细胞具有放射增敏作用其对前列腺癌细胞促凋亡

作用可与放射线协同促进对前列腺癌细胞杀伤 这

种作用可能与阻滞 ＡＫＴ 信号通路或抑制 ＡＫＲ１Ｃ３蛋白表达有关但 ＡＫＲ１Ｃ３ 与 ＡＫＴ 信号通路之间是

否具有相互调控的关系还需要进一步研究证实志谢　 北京大学国家天然药物及仿生药物重点实验室的周德敏教授

及北京大学第一医院放疗科的虞浩马茗微亓昕崔明周东等同学

在本次实验研究中提供了帮助

参　 考　 文　 献

［１］ Ａｒｃａｎｇｅｌｉ Ｓ Ｓｔｒｉｇａｒｉ Ｌ Ｓｏｅｔｅ Ｇ ｅｔ ａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｄｏｓｉｍｅｔｒｉｃｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｆｔｅｒ ａ ４ｗｅｅｋ ｈｙｐｏｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ ｅｘｔｅｒｎａｌｂｅａｍ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｒｅｇｉｍｅｎ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ａｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｉｃ ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｔｒｉａｌ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ２００９７３（１）３９４５ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２００８０４００５

［２］ Ｄｅｌｋｅｒ ＡＦｅｎｄｌｅｒ ＷＰＫｒａｔｏｃｈｗｉｌ Ｃｅｔ ａｌ Ｄｏｓｉｍｅｔｒｙ ｆｏｒ （１７７）ＬｕＤＫＦＺＰＳＭＡ６１７ａ ｎｅｗ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｅｕｒ Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｉｍａｇ２０１６４３（１）４２５１ＤＯＩ１０１００７ ｓ００２５９０１５３１７４７

［３］ Ｔａｎｅｊａ ＳＳ Ｒｅ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｓｕｒｇｅｒｙ ｗｉｔｈ ｏｒ ｗｉｔｈｏｕｔｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｒ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ａｌｏｎｅ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｊ Ｕｒｏｌ２０１５１９４（３）７０３ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｕｒｏ２０１５０６０４８

［４］ Ｓｉｎｇｈａｌ ＳＳ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ Ｆｉｇａｒｏｌａ ＪＬ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ Ａｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｆｏｒ ｋｉｄｎｅｙ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ［Ｊ］ ＢｉｏｃｈｅｍＰｈａｒｍａｃｏｌ２０１５９６（３）１５１１５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊ ｂｃｐ２０１５０４０２２

［５］ Ｌｕ ＫＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ Ｌｕｅ ＫＨ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ １４３ Ｂ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅｅｘｔｒｉｎｓｉｃ ＴＲＡＩＬａｎｄ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｍｅｄｉａｔｅｄ ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］ Ｎｕｔｒ Ｃａｎｃｅｒ ２０１４ ６６ （ ４ ） ６２５６３５ ＤＯＩ １０ １０８０ ０１６３５５８１２０１４1049008 ８９４１００

［６］ Ｎａｇａｐｒａｓｈａｎｔｈａ ＬＤ Ｖａｔｓｙａｙａｎ Ｒ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｔｕｍｏｒ ｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｓ ｎｏｒｍａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ＶＨＬｍｕｔａｎｔ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ［Ｊ］ Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ２０１１ ３２ （ ４） ５６８５７５ ＤＯＩ １０１０９３ ｃａｒｃｉｎ ｂｇｒ０２１

［７］ Ｈｓｉａｏ ＹＣ Ｋｕｏ ＷＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ ｅｔ ａｌ Ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｎｄ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ

Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ２００７１６７（３）１９３２０６ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００７０２０１２

［８］ Ｓｈｉｎ ＳＹ Ｋｉｍ ＪＨ Ｌｅｅ ＪＨ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｅｇｒ１ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂａｘ ｐ２１ ａｎｄＮＡＧ１ ｉｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｍｏｌ Ｎｕｔｒ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ２０１２５６（５）７６１７７４ＤＯＩ１０１００２ ｍｎｆｒ２０１１００６５１

［９］ Ｈｓｉａｏ ＹＣＨｓｉｅｈ ＹＳＫｕｏ ＷＨｅｔ ａｌ Ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｉｎｓａｎｄ ＣＤＫｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｂｉｏｍｅｄ Ｓｃｉ ２００７ １４ （ １） １０７１１９ ＤＯＩ １０１００７ ｓ１１３７３００６９１１７３

［１０］ Ｆｅｒｌａｙ ＪＳｏｅｒｊｏｍａｔａｒａｍ ＩＤｉｋｓｈｉｔ Ｒｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ ｓｏｕｒｃｅｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍａｊｏｒ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎＧＬＯＢＯＣＡＮ ２０１２ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ２０１５１３６ （ ５）Ｅ３５９３８６ＤＯＩ１０１００２ ｉｊｃ２９２１０

［１１］ Ｃｈｅｎ ＷＺｈｅｎｇ ＲＢａａｄｅ ＰＤｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ２０１５ ［Ｊ］ ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ２０１６ＤＯＩ１０３３２２ ｃａａｃ２１３３８

［１２］ 韩苏军张思维陈万青等中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析［Ｊ］ 临床肿瘤学杂志２０１３１８（４）３３０３３４Ｈａｎ ＳＰ Ｚｈａｎｇ ＳＷ Ｃｈｅｎ ＷＱ ｅｔ ａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔｓｉｔｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ２０１３１８（４）３３０３３４

［１３］ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＮＣＣＮ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＰｒａｃｔｉｃｅＧｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｉｎ ＯｎｃｏｌｏｇｙＰｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｖ １ ２０１６ Ａｖａｉｌａｂｌｅ ａｔｈｔｔｐ ｗｗｗｎｃｃｎｏｒｇ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ ｐｈｙｓｉｃｉａｎ＿ ｇｌｓ ＰＤＦ ｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｐｄｆ Ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｊａｎｕａｒｙ ２８２０１６

［１４］ Ｐｉｒｉｌｌｏ ＡＣａｔａｐａｎｏ ＡＬＢｅｒｂｅｒｉｎｅａ ｐｌａｎｔ ａｌｋａｌｏｉｄ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｌｏｗｅｒｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｔｏ ｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓ ［Ｊ］ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ２０１５ ２４３ （ ２ ） ４４９４６１ ＤＯＩ １０１０１６ ｊａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ２０１５０９０３２

［１５］ Ｓｈｉ ＭＶｉｖｉａｎ ＣＪＬｅｅ ＫＪｅｔ ａｌ ＤＮＡＰＫｃｓＰＩＤＤｏｓｏｍｅａ ｎｕｃｌｅａｒｃａｓｐａｓｅ２ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ ｒｏｌｅ ｉｎ Ｇ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ２００９１３６（ ３）５０８５２０ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊｃｅｌｌ２００８１２０２１

［１６］ Ｄｅｎｇ ＲＴａｎｇ ＪＭａ ＪＧｅｔ ａｌ ＰＫＢ Ａｋｔ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ＤＳＢ ｒｅｐａｉｒ ｉｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｍｒｅ１１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２０１１３０（８）９４４９５５ＤＯＩ１０１０３８ ｏｎｃ２０１０1049008 ４６７

［１７］ Ｊｉａｎｇ Ｚ Ｐｏｒｅ Ｎ Ｃｅｒｎｉｇｌｉａ ＧＪ ｅｔ ａｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｕｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｏｎｆｅｒｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｒａｄｉａｔｉｏｎａｎｄ ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ ｔｈａｔ ｉｓ ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ ［Ｊ］ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００７ ６７ （ ９） ４４６７４４７３ ＤＯＩ １０１１５８ ０００８５４７２ＣＡＮ０６３ ３９８

［１８］ Ｃｈａｎｇ Ｌ Ｇｒａｈａｍ ＰＨ Ｈａｏ Ｊ ｅｔ ａｌ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＰＩ３Ｋ Ａｋｔ ｍＴＯＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ２０１３４ｅ８７５ＤＯＩ１０１０３８ ｃｄｄｉｓ２０１３1049008 ４０７

［１９］ Ｚａｎｎｅｌｌａ ＶＥ Ｃｏｊｏｃａｒｉ Ｄ Ｈｉｌｇｅｎｄｏｒｆ Ｓ ｅｔ ａｌ ＡＭＰＫ ｒｅｇｕｌａｔｅｓｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］

Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ Ｏｎｃｏｌ２０１１９９（３）２９３２９９ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｒａｄｏｎｃ２０１１０５０４９

［２０］ Ｓｈｉｍｕｒａ Ｔ Ａｃｑｕｉｒｅｄ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ＡＫＴ ＧＳＫ３ｂｅｔａ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｙｃｌｅ ［Ｊ］ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｒｅｓ２０１１５２（５）５３９５４４

［２１］ Ｓａｎｌｉ ＴＲａｓｈｉｄ ＡＬｉｕ Ｃｅｔ ａｌ Ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＡＭＰａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ （ＡＭＰＫ）ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ ２０１０７８（１）２２１２２９ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２０１００３００５

［２２］ Ｙａｒｄｅｎ ＲＩＰａｒｄｏＲｅｏｙｏ ＳＳｇａｇｉａｓ Ｍｅｔ ａｌ ＢＲＣＡ１ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅＧ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｃｈｋ１ ｋｉｎａｓｅ ｕｐｏｎ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ［Ｊ］ Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ２００２３０（３）２８５２８９ＤＯＩ１０１０３８ ｎｇ８３７

［２３］ Ｘｕ Ｎ Ｈｅｇａｒａｔ Ｎ Ｂｌａｃｋ ＥＪ ｅｔ ａｌ Ａｋｔ ＰＫＢ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ＤＮＡｄａｍａｇｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｌａｔｅ Ｇ２ ［Ｊ］ Ｊ ＣｅｌｌＢｉｏｌ２０１０１９０（３）２９７３０５ＤＯＩ１０１０８３ ｊｃｂ２０１００３００４

［２４］ Ｘｉｏｎｇ ＷＺｈａｏ ＪＹｕ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｅｌｅｖａｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｖｉａｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ［Ｊ］ ＰｌｏＳ ｏｎｅ ２０１４ ９ （ １１ ）ｅ１１１９１１ＤＯＩ１０１３７１ ｊｏｕｒｎａｌｐｏｎｅ０１１１９１１

［２５］ Ｘｉｅ ＬＹｕ ＪＧｕｏ Ｗｅｔ ａｌ Ａｌｄｏｋｅｔｏ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ １Ｃ３ ｍａｙ ｂｅ ａ ｎｅｗｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍａｒｋｅｒ ｉｎ ｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ ＣａｎｃｅｒＧｅｎｅ Ｔｈｅｒ２０１３２０（４）２６０２６６ＤＯＩ１０１０３８ ｃｇｔ２０１３1049008 １５

［２６］ 孙少倩李懿王雯等ＡＫＲ１Ｃ３ 的过表达会促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路导致前列腺癌的放射抵抗［Ａ］ 中华医学会第十二次全国放射肿瘤治疗会议论文集［Ｃ］北京中华医学会２０１５ＰＢ０９２Ｓｕｎ ＳＨＱ Ｌｉ Ｗ Ｗａｎｇ Ｗ ｅｔ ａｌ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｆａｃｔｏｒ ＰＧＦ２ａｌｐｈａ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ＰＰＡＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ａ］ Ｃｈｉｎｅｓｅ ＭｅｄｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ １２ｔｈ ｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｎｃｏｌｏｇｙ ［Ｃ］ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ２０１５ＰＢ０９２

［２７］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＺｉｖｎａ ＬＸｉｏｎｇ Ｇｅｔ ａｌ ＡＫＲ１Ｃ３ ａｓ ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔａｒｇｅｔｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ ＢｉｏｌＩｎｔｅｒａｃｔ２００９１７８（ １３）１３８１４４ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００８ １００１５

［２８］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＨｏｆｍａｎ ＪＣｈｌｅｂｅｋ Ｊｅｔ ａｌ Ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ａｓａ ｎｏｖｅｌ ｔｙｐｅ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ ＭｏｌＢｉｏｌ２０１４１４３２５０２５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１４０４００５

［２９］ Ｂｙｒｎｓ ＭＣ Ｊｉｎ Ｙ Ｐｅｎｎｉｎｇ ＴＭ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｙｐｅ ５ １７ｂｅｔａｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （ＡＫＲ１Ｃ３）ｏｖｅｒｖｉｅｗ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｓｉｇｈｔｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２０１１１２５ （ １２）９５１０４ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１０１１００４

［３０］ Ｏｆｕｄｅ Ｍ Ｍｉｚｏｋａｍｉ Ａ Ｋｕｍａｋｉ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓｂｙ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ［Ｊ］ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ２０１３３３（１０）４４５３６１

（收稿日期２０１６０２０１）

图 ４　 不同方法处理组细胞凋亡情况检测［４Ａ 为用不同方法处理组细胞凋亡荧光染色图箭头所指为发生凋亡的细胞（４Ａ１ 为第 １组不加任何处理的空白对照４Ａ２ 为第 ２ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ４Ａ３为第 ３ 组采用 ４ Ｇｙ 照射４Ａ４４ 为第 ４ 组加 ２primeＨＦ 处理 ４８ ｈ 后联合４ Ｇｙ 照射）４Ｂ 为用不同方式处理前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞后荧光染色检测所得细胞凋亡率４Ｃ 为用不同方式处理前列腺癌 ＶＣａＰ 细胞后Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法流式细胞仪检测细胞凋亡结果分析所得细胞凋亡率）］

势［１１１２］ 目前前列腺癌放疗以大剂量为主对中高危患者局部照射剂量已提高至 ８１ Ｇｙ［１３］这难免造

成周围组织损伤 如果能找到一种合适的放射增敏

药物也许可以降低局部受量亦可达到较好 ＬＣ率降低放疗不良反应提高患者治疗依从性及生活

质量 因此笔者在这方面进行了初步的研究探讨　 　 ２primeＨＦ 是一种植物类黄酮类小分子化合物主要存在于水果和蔬菜中［４］其同类化合物黄连素因具有抗炎抗心律失常和抗肿瘤等作用已被广泛应

用于临床［１４］ 有文献报道２primeＨＦ也具有抗肿瘤效

图 ５　 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴｐＡＫＴ 和 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达量的影响（５Ａ 为分别以不同浓度 ２primeＨＦ 处理 ＶＣａＰ 细胞 ４８ ｈ 后Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 实验检测 ＡＫＴｐＡＫＴＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达情况５Ｂ 为 ＡＫＴ 蛋白表达水平分析结果５Ｃ 为 ｐＡＫＴ 蛋白表达水平分析结果５Ｄ 为 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达水平分析结果５Ｅ 为不同处理组不同蛋白表达水平的Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测结果）

应 如将细胞阻滞于Ｇ２ ＋Ｍ期［７９］ 促进细胞凋

亡［４］减慢肿瘤血管生成［７９］ 等 因 Ｇ２ ＋Ｍ 期阻滞

及细胞凋亡与放射敏感性相关［１５１７］故笔者推测 ２primeＨＦ 很可能具有放射增敏作用 本克隆形成实验结

果证实加入 ２primeＨＦ 组在照射后细胞存活分数明显低

于空白对照组ＴＢＨＰ 氧化损伤实验结果提示经 ２primeＨＦ 处理后对 ＴＢＨＰ 引起的氧化损伤更为敏感进一

步证实了克隆形成实验结果Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法检测结果证实 ２primeＨＦ组照射后细胞凋亡率更高 可见 ２primeＨＦ 对前列腺癌

ＶＣａＰ 细胞确实具有放射增敏作用另外本研究还对 ２primeＨＦ 增敏的机制进行了初

步探讨 众所周知 ＡＫＴ 信号转导通路是一条经典

的放射抵抗通路［１６２１］在所有关于放射抵抗通路的

研究中ＰＩ３Ｋ ＡＫＴ ｍＴＯＲ 是研究最多的一条 此

通路与血管生成的关系最为密切此外ＨＩＦ１ 可以

通过激活此通路发挥放射抵抗作用 ＡＫＴ 是 ＰＩ３Ｋ通路中的主要调节蛋白与细胞的周期及凋亡调节

相关 ＡＫＴ 激活为 ｐＡＫＴ 后可以激活其下游基因使细胞中 Ｃｈｋ１ 失活从而增加 Ｇ０Ｇ１ 期阻滞并减少

Ｇ２ 期阻滞［２２２３］从而提高细胞的放射抵抗性 ＡＫＴ信号通路受到抑制即 ｐＡＫＴ 表达量下降可以促

进细胞凋亡 阻滞细胞周期 提高其放射敏感

性［１７１９］ 而 ２primeＨＦ 具有促进细胞凋亡阻滞细胞周

期的作用因此本研究检测了 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴ 和 ｐＡＫＴ 蛋白表达的影响结果显示 ２primeＨＦ 可以减少 ｐＡＫＴ 蛋白的表达且照射后经 ２primeＨＦ 处理过的细胞

ｐＡｋＴ 蛋白表达水平明显下调因此认为 ２primeＨＦ 可

通过抑制 ＡＫＴ 信号转导通路来提高前列腺癌的放

射敏感性ＡＫＲ１Ｃ３ 是一种放射抵抗相关基因已有研究

证实在食管癌细胞中过表达的 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因可以

通过减轻细胞氧化损伤降低 ＲＯＳ 水平和辐射诱导

的 ＤＮＡ 损伤来实现放射抵抗作用利用小分子

ＲＮＡ 干扰技术下调 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因的表达可以提高

食管癌细胞的放射敏感性［１５１７］并且已有研究证实

肺癌中 ＡＫＲ１Ｃ３ 也可以促进细胞的放射抵抗［２５］还有研究发现在前列腺癌细胞中 ＡＫＲ１Ｃ３ 过表达

可以通过促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过

激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路从而导致前列腺癌

放射抵抗［２６］ 多项研究证实 ２primeＨＦ 可以抑制体外

ＡＫＲ１Ｃ３ 酶的活性［２７２９］但对其在细胞内活性及蛋

白表达水平影响的相关研究很少且无充分确切依

据 本研究发现 ２primeＨＦ 可抑制前列腺癌细胞中

ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达而且这种抑制作用具有浓度依

赖性照射后这种抑制作用也较为明显 因此 ２primeＨＦ 发挥放射增敏作用可能与抑制 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表

达有关目前已有研究证实低浓度 ２primeＨＦ 不仅可促进肿

瘤细胞凋亡而且可通过抑制雄激素受体活性来延

缓前列腺癌细胞生长向激素非依赖转化并抑制前

列腺癌细胞增殖［３０］ 是否 ２primeＨＦ 对前列腺癌细胞

放射增敏作用与雄激素受体活性受到抑制从而促进

对细胞杀伤力有关 本研究证明了低浓度 ２primeＨＦ 对

前列腺癌细胞的抑制增殖与其放射增敏作用可以协

同促进前列腺癌细胞凋亡但低浓度药物本身对细

胞生长活力影响不大 然而随着药物浓度增加这种协同促凋亡机制可能会更为明显针对这点还需

进一步研究综上所述本研究结果显示 ２primeＨＦ 对前列腺癌

细胞具有放射增敏作用其对前列腺癌细胞促凋亡

作用可与放射线协同促进对前列腺癌细胞杀伤 这

种作用可能与阻滞 ＡＫＴ 信号通路或抑制 ＡＫＲ１Ｃ３蛋白表达有关但 ＡＫＲ１Ｃ３ 与 ＡＫＴ 信号通路之间是

否具有相互调控的关系还需要进一步研究证实志谢　 北京大学国家天然药物及仿生药物重点实验室的周德敏教授

及北京大学第一医院放疗科的虞浩马茗微亓昕崔明周东等同学

在本次实验研究中提供了帮助

参　 考　 文　 献

［１］ Ａｒｃａｎｇｅｌｉ Ｓ Ｓｔｒｉｇａｒｉ Ｌ Ｓｏｅｔｅ Ｇ ｅｔ ａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｄｏｓｉｍｅｔｒｉｃｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｆｔｅｒ ａ ４ｗｅｅｋ ｈｙｐｏｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ ｅｘｔｅｒｎａｌｂｅａｍ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｒｅｇｉｍｅｎ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ａｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｉｃ ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｔｒｉａｌ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ２００９７３（１）３９４５ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２００８０４００５

［２］ Ｄｅｌｋｅｒ ＡＦｅｎｄｌｅｒ ＷＰＫｒａｔｏｃｈｗｉｌ Ｃｅｔ ａｌ Ｄｏｓｉｍｅｔｒｙ ｆｏｒ （１７７）ＬｕＤＫＦＺＰＳＭＡ６１７ａ ｎｅｗ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｅｕｒ Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｉｍａｇ２０１６４３（１）４２５１ＤＯＩ１０１００７ ｓ００２５９０１５３１７４７

［３］ Ｔａｎｅｊａ ＳＳ Ｒｅ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｓｕｒｇｅｒｙ ｗｉｔｈ ｏｒ ｗｉｔｈｏｕｔｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｒ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ａｌｏｎｅ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｊ Ｕｒｏｌ２０１５１９４（３）７０３ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｕｒｏ２０１５０６０４８

［４］ Ｓｉｎｇｈａｌ ＳＳ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ Ｆｉｇａｒｏｌａ ＪＬ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ Ａｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｆｏｒ ｋｉｄｎｅｙ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ［Ｊ］ ＢｉｏｃｈｅｍＰｈａｒｍａｃｏｌ２０１５９６（３）１５１１５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊ ｂｃｐ２０１５０４０２２

［５］ Ｌｕ ＫＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ Ｌｕｅ ＫＨ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ １４３ Ｂ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅｅｘｔｒｉｎｓｉｃ ＴＲＡＩＬａｎｄ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｍｅｄｉａｔｅｄ ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］ Ｎｕｔｒ Ｃａｎｃｅｒ ２０１４ ６６ （ ４ ） ６２５６３５ ＤＯＩ １０ １０８０ ０１６３５５８１２０１４1049008 ８９４１００

［６］ Ｎａｇａｐｒａｓｈａｎｔｈａ ＬＤ Ｖａｔｓｙａｙａｎ Ｒ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｔｕｍｏｒ ｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｓ ｎｏｒｍａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ＶＨＬｍｕｔａｎｔ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ［Ｊ］ Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ２０１１ ３２ （ ４） ５６８５７５ ＤＯＩ １０１０９３ ｃａｒｃｉｎ ｂｇｒ０２１

［７］ Ｈｓｉａｏ ＹＣ Ｋｕｏ ＷＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ ｅｔ ａｌ Ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｎｄ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ

Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ２００７１６７（３）１９３２０６ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００７０２０１２

［８］ Ｓｈｉｎ ＳＹ Ｋｉｍ ＪＨ Ｌｅｅ ＪＨ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｅｇｒ１ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂａｘ ｐ２１ ａｎｄＮＡＧ１ ｉｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｍｏｌ Ｎｕｔｒ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ２０１２５６（５）７６１７７４ＤＯＩ１０１００２ ｍｎｆｒ２０１１００６５１

［９］ Ｈｓｉａｏ ＹＣＨｓｉｅｈ ＹＳＫｕｏ ＷＨｅｔ ａｌ Ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｉｎｓａｎｄ ＣＤＫｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｂｉｏｍｅｄ Ｓｃｉ ２００７ １４ （ １） １０７１１９ ＤＯＩ １０１００７ ｓ１１３７３００６９１１７３

［１０］ Ｆｅｒｌａｙ ＪＳｏｅｒｊｏｍａｔａｒａｍ ＩＤｉｋｓｈｉｔ Ｒｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ ｓｏｕｒｃｅｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍａｊｏｒ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎＧＬＯＢＯＣＡＮ ２０１２ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ２０１５１３６ （ ５）Ｅ３５９３８６ＤＯＩ１０１００２ ｉｊｃ２９２１０

［１１］ Ｃｈｅｎ ＷＺｈｅｎｇ ＲＢａａｄｅ ＰＤｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ２０１５ ［Ｊ］ ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ２０１６ＤＯＩ１０３３２２ ｃａａｃ２１３３８

［１２］ 韩苏军张思维陈万青等中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析［Ｊ］ 临床肿瘤学杂志２０１３１８（４）３３０３３４Ｈａｎ ＳＰ Ｚｈａｎｇ ＳＷ Ｃｈｅｎ ＷＱ ｅｔ ａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔｓｉｔｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ２０１３１８（４）３３０３３４

［１３］ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＮＣＣＮ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＰｒａｃｔｉｃｅＧｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｉｎ ＯｎｃｏｌｏｇｙＰｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｖ １ ２０１６ Ａｖａｉｌａｂｌｅ ａｔｈｔｔｐ ｗｗｗｎｃｃｎｏｒｇ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ ｐｈｙｓｉｃｉａｎ＿ ｇｌｓ ＰＤＦ ｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｐｄｆ Ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｊａｎｕａｒｙ ２８２０１６

［１４］ Ｐｉｒｉｌｌｏ ＡＣａｔａｐａｎｏ ＡＬＢｅｒｂｅｒｉｎｅａ ｐｌａｎｔ ａｌｋａｌｏｉｄ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｌｏｗｅｒｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｔｏ ｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓ ［Ｊ］ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ２０１５ ２４３ （ ２ ） ４４９４６１ ＤＯＩ １０１０１６ ｊａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ２０１５０９０３２

［１５］ Ｓｈｉ ＭＶｉｖｉａｎ ＣＪＬｅｅ ＫＪｅｔ ａｌ ＤＮＡＰＫｃｓＰＩＤＤｏｓｏｍｅａ ｎｕｃｌｅａｒｃａｓｐａｓｅ２ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ ｒｏｌｅ ｉｎ Ｇ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ２００９１３６（ ３）５０８５２０ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊｃｅｌｌ２００８１２０２１

［１６］ Ｄｅｎｇ ＲＴａｎｇ ＪＭａ ＪＧｅｔ ａｌ ＰＫＢ Ａｋｔ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ＤＳＢ ｒｅｐａｉｒ ｉｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｍｒｅ１１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２０１１３０（８）９４４９５５ＤＯＩ１０１０３８ ｏｎｃ２０１０1049008 ４６７

［１７］ Ｊｉａｎｇ Ｚ Ｐｏｒｅ Ｎ Ｃｅｒｎｉｇｌｉａ ＧＪ ｅｔ ａｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｕｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｏｎｆｅｒｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｒａｄｉａｔｉｏｎａｎｄ ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ ｔｈａｔ ｉｓ ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ ［Ｊ］ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００７ ６７ （ ９） ４４６７４４７３ ＤＯＩ １０１１５８ ０００８５４７２ＣＡＮ０６３ ３９８

［１８］ Ｃｈａｎｇ Ｌ Ｇｒａｈａｍ ＰＨ Ｈａｏ Ｊ ｅｔ ａｌ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＰＩ３Ｋ Ａｋｔ ｍＴＯＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ２０１３４ｅ８７５ＤＯＩ１０１０３８ ｃｄｄｉｓ２０１３1049008 ４０７

［１９］ Ｚａｎｎｅｌｌａ ＶＥ Ｃｏｊｏｃａｒｉ Ｄ Ｈｉｌｇｅｎｄｏｒｆ Ｓ ｅｔ ａｌ ＡＭＰＫ ｒｅｇｕｌａｔｅｓｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］

Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ Ｏｎｃｏｌ２０１１９９（３）２９３２９９ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｒａｄｏｎｃ２０１１０５０４９

［２０］ Ｓｈｉｍｕｒａ Ｔ Ａｃｑｕｉｒｅｄ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ＡＫＴ ＧＳＫ３ｂｅｔａ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｙｃｌｅ ［Ｊ］ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｒｅｓ２０１１５２（５）５３９５４４

［２１］ Ｓａｎｌｉ ＴＲａｓｈｉｄ ＡＬｉｕ Ｃｅｔ ａｌ Ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＡＭＰａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ （ＡＭＰＫ）ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ ２０１０７８（１）２２１２２９ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２０１００３００５

［２２］ Ｙａｒｄｅｎ ＲＩＰａｒｄｏＲｅｏｙｏ ＳＳｇａｇｉａｓ Ｍｅｔ ａｌ ＢＲＣＡ１ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅＧ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｃｈｋ１ ｋｉｎａｓｅ ｕｐｏｎ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ［Ｊ］ Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ２００２３０（３）２８５２８９ＤＯＩ１０１０３８ ｎｇ８３７

［２３］ Ｘｕ Ｎ Ｈｅｇａｒａｔ Ｎ Ｂｌａｃｋ ＥＪ ｅｔ ａｌ Ａｋｔ ＰＫＢ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ＤＮＡｄａｍａｇｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｌａｔｅ Ｇ２ ［Ｊ］ Ｊ ＣｅｌｌＢｉｏｌ２０１０１９０（３）２９７３０５ＤＯＩ１０１０８３ ｊｃｂ２０１００３００４

［２４］ Ｘｉｏｎｇ ＷＺｈａｏ ＪＹｕ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｅｌｅｖａｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｖｉａｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ［Ｊ］ ＰｌｏＳ ｏｎｅ ２０１４ ９ （ １１ ）ｅ１１１９１１ＤＯＩ１０１３７１ ｊｏｕｒｎａｌｐｏｎｅ０１１１９１１

［２５］ Ｘｉｅ ＬＹｕ ＪＧｕｏ Ｗｅｔ ａｌ Ａｌｄｏｋｅｔｏ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ １Ｃ３ ｍａｙ ｂｅ ａ ｎｅｗｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍａｒｋｅｒ ｉｎ ｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ ＣａｎｃｅｒＧｅｎｅ Ｔｈｅｒ２０１３２０（４）２６０２６６ＤＯＩ１０１０３８ ｃｇｔ２０１３1049008 １５

［２６］ 孙少倩李懿王雯等ＡＫＲ１Ｃ３ 的过表达会促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路导致前列腺癌的放射抵抗［Ａ］ 中华医学会第十二次全国放射肿瘤治疗会议论文集［Ｃ］北京中华医学会２０１５ＰＢ０９２Ｓｕｎ ＳＨＱ Ｌｉ Ｗ Ｗａｎｇ Ｗ ｅｔ ａｌ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｆａｃｔｏｒ ＰＧＦ２ａｌｐｈａ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ＰＰＡＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ａ］ Ｃｈｉｎｅｓｅ ＭｅｄｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ １２ｔｈ ｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｎｃｏｌｏｇｙ ［Ｃ］ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ２０１５ＰＢ０９２

［２７］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＺｉｖｎａ ＬＸｉｏｎｇ Ｇｅｔ ａｌ ＡＫＲ１Ｃ３ ａｓ ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔａｒｇｅｔｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ ＢｉｏｌＩｎｔｅｒａｃｔ２００９１７８（ １３）１３８１４４ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００８ １００１５

［２８］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＨｏｆｍａｎ ＪＣｈｌｅｂｅｋ Ｊｅｔ ａｌ Ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ａｓａ ｎｏｖｅｌ ｔｙｐｅ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ ＭｏｌＢｉｏｌ２０１４１４３２５０２５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１４０４００５

［２９］ Ｂｙｒｎｓ ＭＣ Ｊｉｎ Ｙ Ｐｅｎｎｉｎｇ ＴＭ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｙｐｅ ５ １７ｂｅｔａｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （ＡＫＲ１Ｃ３）ｏｖｅｒｖｉｅｗ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｓｉｇｈｔｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２０１１１２５ （ １２）９５１０４ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１０１１００４

［３０］ Ｏｆｕｄｅ Ｍ Ｍｉｚｏｋａｍｉ Ａ Ｋｕｍａｋｉ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓｂｙ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ［Ｊ］ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ２０１３３３（１０）４４５３６１

（收稿日期２０１６０２０１）

亡［４］减慢肿瘤血管生成［７９］ 等 因 Ｇ２ ＋Ｍ 期阻滞

及细胞凋亡与放射敏感性相关［１５１７］故笔者推测 ２primeＨＦ 很可能具有放射增敏作用 本克隆形成实验结

果证实加入 ２primeＨＦ 组在照射后细胞存活分数明显低

于空白对照组ＴＢＨＰ 氧化损伤实验结果提示经 ２primeＨＦ 处理后对 ＴＢＨＰ 引起的氧化损伤更为敏感进一

步证实了克隆形成实验结果Ｈｏｅｃｈｓｔ 荧光染色Ａｎｎｅｘｉｎ ＶＦＩＴＣ 和 ＰＩ 双染法检测结果证实 ２primeＨＦ组照射后细胞凋亡率更高 可见 ２primeＨＦ 对前列腺癌

ＶＣａＰ 细胞确实具有放射增敏作用另外本研究还对 ２primeＨＦ 增敏的机制进行了初

步探讨 众所周知 ＡＫＴ 信号转导通路是一条经典

的放射抵抗通路［１６２１］在所有关于放射抵抗通路的

研究中ＰＩ３Ｋ ＡＫＴ ｍＴＯＲ 是研究最多的一条 此

通路与血管生成的关系最为密切此外ＨＩＦ１ 可以

通过激活此通路发挥放射抵抗作用 ＡＫＴ 是 ＰＩ３Ｋ通路中的主要调节蛋白与细胞的周期及凋亡调节

相关 ＡＫＴ 激活为 ｐＡＫＴ 后可以激活其下游基因使细胞中 Ｃｈｋ１ 失活从而增加 Ｇ０Ｇ１ 期阻滞并减少

Ｇ２ 期阻滞［２２２３］从而提高细胞的放射抵抗性 ＡＫＴ信号通路受到抑制即 ｐＡＫＴ 表达量下降可以促

进细胞凋亡 阻滞细胞周期 提高其放射敏感

性［１７１９］ 而 ２primeＨＦ 具有促进细胞凋亡阻滞细胞周

期的作用因此本研究检测了 ２primeＨＦ 对 ＡＫＴ 和 ｐＡＫＴ 蛋白表达的影响结果显示 ２primeＨＦ 可以减少 ｐＡＫＴ 蛋白的表达且照射后经 ２primeＨＦ 处理过的细胞

ｐＡｋＴ 蛋白表达水平明显下调因此认为 ２primeＨＦ 可

通过抑制 ＡＫＴ 信号转导通路来提高前列腺癌的放

射敏感性ＡＫＲ１Ｃ３ 是一种放射抵抗相关基因已有研究

证实在食管癌细胞中过表达的 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因可以

通过减轻细胞氧化损伤降低 ＲＯＳ 水平和辐射诱导

的 ＤＮＡ 损伤来实现放射抵抗作用利用小分子

ＲＮＡ 干扰技术下调 ＡＫＲ１Ｃ３ 基因的表达可以提高

食管癌细胞的放射敏感性［１５１７］并且已有研究证实

肺癌中 ＡＫＲ１Ｃ３ 也可以促进细胞的放射抵抗［２５］还有研究发现在前列腺癌细胞中 ＡＫＲ１Ｃ３ 过表达

可以通过促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过

激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路从而导致前列腺癌

放射抵抗［２６］ 多项研究证实 ２primeＨＦ 可以抑制体外

ＡＫＲ１Ｃ３ 酶的活性［２７２９］但对其在细胞内活性及蛋

白表达水平影响的相关研究很少且无充分确切依

据 本研究发现 ２primeＨＦ 可抑制前列腺癌细胞中

ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表达而且这种抑制作用具有浓度依

赖性照射后这种抑制作用也较为明显 因此 ２primeＨＦ 发挥放射增敏作用可能与抑制 ＡＫＲ１Ｃ３ 蛋白表

达有关目前已有研究证实低浓度 ２primeＨＦ 不仅可促进肿

瘤细胞凋亡而且可通过抑制雄激素受体活性来延

缓前列腺癌细胞生长向激素非依赖转化并抑制前

列腺癌细胞增殖［３０］ 是否 ２primeＨＦ 对前列腺癌细胞

放射增敏作用与雄激素受体活性受到抑制从而促进

对细胞杀伤力有关 本研究证明了低浓度 ２primeＨＦ 对

前列腺癌细胞的抑制增殖与其放射增敏作用可以协

同促进前列腺癌细胞凋亡但低浓度药物本身对细

胞生长活力影响不大 然而随着药物浓度增加这种协同促凋亡机制可能会更为明显针对这点还需

进一步研究综上所述本研究结果显示 ２primeＨＦ 对前列腺癌

细胞具有放射增敏作用其对前列腺癌细胞促凋亡

作用可与放射线协同促进对前列腺癌细胞杀伤 这

种作用可能与阻滞 ＡＫＴ 信号通路或抑制 ＡＫＲ１Ｃ３蛋白表达有关但 ＡＫＲ１Ｃ３ 与 ＡＫＴ 信号通路之间是

否具有相互调控的关系还需要进一步研究证实志谢　 北京大学国家天然药物及仿生药物重点实验室的周德敏教授

及北京大学第一医院放疗科的虞浩马茗微亓昕崔明周东等同学

在本次实验研究中提供了帮助

参　 考　 文　 献

［１］ Ａｒｃａｎｇｅｌｉ Ｓ Ｓｔｒｉｇａｒｉ Ｌ Ｓｏｅｔｅ Ｇ ｅｔ ａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｄｏｓｉｍｅｔｒｉｃｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｆｔｅｒ ａ ４ｗｅｅｋ ｈｙｐｏｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ ｅｘｔｅｒｎａｌｂｅａｍ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｒｅｇｉｍｅｎ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ａｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｉｃ ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｔｒｉａｌ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ２００９７３（１）３９４５ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２００８０４００５

［２］ Ｄｅｌｋｅｒ ＡＦｅｎｄｌｅｒ ＷＰＫｒａｔｏｃｈｗｉｌ Ｃｅｔ ａｌ Ｄｏｓｉｍｅｔｒｙ ｆｏｒ （１７７）ＬｕＤＫＦＺＰＳＭＡ６１７ａ ｎｅｗ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｅｕｒ Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｉｍａｇ２０１６４３（１）４２５１ＤＯＩ１０１００７ ｓ００２５９０１５３１７４７

［３］ Ｔａｎｅｊａ ＳＳ Ｒｅ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｓｕｒｇｅｒｙ ｗｉｔｈ ｏｒ ｗｉｔｈｏｕｔｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｒ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ａｌｏｎｅ ｆｏｒ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ Ｊ Ｕｒｏｌ２０１５１９４（３）７０３ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｕｒｏ２０１５０６０４８

［４］ Ｓｉｎｇｈａｌ ＳＳ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ Ｆｉｇａｒｏｌａ ＪＬ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ Ａｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｆｏｒ ｋｉｄｎｅｙ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ［Ｊ］ ＢｉｏｃｈｅｍＰｈａｒｍａｃｏｌ２０１５９６（３）１５１１５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊ ｂｃｐ２０１５０４０２２

［５］ Ｌｕ ＫＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ Ｌｕｅ ＫＨ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ １４３ Ｂ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅｅｘｔｒｉｎｓｉｃ ＴＲＡＩＬａｎｄ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｍｅｄｉａｔｅｄ ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］ Ｎｕｔｒ Ｃａｎｃｅｒ ２０１４ ６６ （ ４ ） ６２５６３５ ＤＯＩ １０ １０８０ ０１６３５５８１２０１４1049008 ８９４１００

［６］ Ｎａｇａｐｒａｓｈａｎｔｈａ ＬＤ Ｖａｔｓｙａｙａｎ Ｒ Ｓｉｎｇｈａｌ Ｊ ｅｔ ａｌ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｔｕｍｏｒ ｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｓ ｎｏｒｍａｌ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ＶＨＬｍｕｔａｎｔ ｒｅｎａｌ ｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ［Ｊ］ Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ２０１１ ３２ （ ４） ５６８５７５ ＤＯＩ １０１０９３ ｃａｒｃｉｎ ｂｇｒ０２１

［７］ Ｈｓｉａｏ ＹＣ Ｋｕｏ ＷＨ Ｃｈｅｎ ＰＮ ｅｔ ａｌ Ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｎｄ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ

Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ２００７１６７（３）１９３２０６ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００７０２０１２

［８］ Ｓｈｉｎ ＳＹ Ｋｉｍ ＪＨ Ｌｅｅ ＪＨ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｅｇｒ１ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂａｘ ｐ２１ ａｎｄＮＡＧ１ ｉｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｍｏｌ Ｎｕｔｒ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ２０１２５６（５）７６１７７４ＤＯＩ１０１００２ ｍｎｆｒ２０１１００６５１

［９］ Ｈｓｉａｏ ＹＣＨｓｉｅｈ ＹＳＫｕｏ ＷＨｅｔ ａｌ Ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｉｎｓａｎｄ ＣＤＫｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｂｉｏｍｅｄ Ｓｃｉ ２００７ １４ （ １） １０７１１９ ＤＯＩ １０１００７ ｓ１１３７３００６９１１７３

［１０］ Ｆｅｒｌａｙ ＪＳｏｅｒｊｏｍａｔａｒａｍ ＩＤｉｋｓｈｉｔ Ｒｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ ｓｏｕｒｃｅｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍａｊｏｒ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎＧＬＯＢＯＣＡＮ ２０１２ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ２０１５１３６ （ ５）Ｅ３５９３８６ＤＯＩ１０１００２ ｉｊｃ２９２１０

［１１］ Ｃｈｅｎ ＷＺｈｅｎｇ ＲＢａａｄｅ ＰＤｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ２０１５ ［Ｊ］ ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ２０１６ＤＯＩ１０３３２２ ｃａａｃ２１３３８

［１２］ 韩苏军张思维陈万青等中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析［Ｊ］ 临床肿瘤学杂志２０１３１８（４）３３０３３４Ｈａｎ ＳＰ Ｚｈａｎｇ ＳＷ Ｃｈｅｎ ＷＱ ｅｔ ａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔｓｉｔｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ２０１３１８（４）３３０３３４

［１３］ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＮＣＣＮ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＰｒａｃｔｉｃｅＧｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｉｎ ＯｎｃｏｌｏｇｙＰｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｖ １ ２０１６ Ａｖａｉｌａｂｌｅ ａｔｈｔｔｐ ｗｗｗｎｃｃｎｏｒｇ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ ｐｈｙｓｉｃｉａｎ＿ ｇｌｓ ＰＤＦ ｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｐｄｆ Ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｊａｎｕａｒｙ ２８２０１６

［１４］ Ｐｉｒｉｌｌｏ ＡＣａｔａｐａｎｏ ＡＬＢｅｒｂｅｒｉｎｅａ ｐｌａｎｔ ａｌｋａｌｏｉｄ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｌｏｗｅｒｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｔｏ ｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓ ［Ｊ］ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ２０１５ ２４３ （ ２ ） ４４９４６１ ＤＯＩ １０１０１６ ｊａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ２０１５０９０３２

［１５］ Ｓｈｉ ＭＶｉｖｉａｎ ＣＪＬｅｅ ＫＪｅｔ ａｌ ＤＮＡＰＫｃｓＰＩＤＤｏｓｏｍｅａ ｎｕｃｌｅａｒｃａｓｐａｓｅ２ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ ｒｏｌｅ ｉｎ Ｇ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ２００９１３６（ ３）５０８５２０ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊｃｅｌｌ２００８１２０２１

［１６］ Ｄｅｎｇ ＲＴａｎｇ ＪＭａ ＪＧｅｔ ａｌ ＰＫＢ Ａｋｔ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ＤＳＢ ｒｅｐａｉｒ ｉｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｍｒｅ１１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２０１１３０（８）９４４９５５ＤＯＩ１０１０３８ ｏｎｃ２０１０1049008 ４６７

［１７］ Ｊｉａｎｇ Ｚ Ｐｏｒｅ Ｎ Ｃｅｒｎｉｇｌｉａ ＧＪ ｅｔ ａｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｕｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｏｎｆｅｒｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｒａｄｉａｔｉｏｎａｎｄ ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ ｔｈａｔ ｉｓ ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ ［Ｊ］ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００７ ６７ （ ９） ４４６７４４７３ ＤＯＩ １０１１５８ ０００８５４７２ＣＡＮ０６３ ３９８

［１８］ Ｃｈａｎｇ Ｌ Ｇｒａｈａｍ ＰＨ Ｈａｏ Ｊ ｅｔ ａｌ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＰＩ３Ｋ Ａｋｔ ｍＴＯＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ２０１３４ｅ８７５ＤＯＩ１０１０３８ ｃｄｄｉｓ２０１３1049008 ４０７

［１９］ Ｚａｎｎｅｌｌａ ＶＥ Ｃｏｊｏｃａｒｉ Ｄ Ｈｉｌｇｅｎｄｏｒｆ Ｓ ｅｔ ａｌ ＡＭＰＫ ｒｅｇｕｌａｔｅｓｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］

Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ Ｏｎｃｏｌ２０１１９９（３）２９３２９９ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｒａｄｏｎｃ２０１１０５０４９

［２０］ Ｓｈｉｍｕｒａ Ｔ Ａｃｑｕｉｒｅｄ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ＡＫＴ ＧＳＫ３ｂｅｔａ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｙｃｌｅ ［Ｊ］ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｒｅｓ２０１１５２（５）５３９５４４

［２１］ Ｓａｎｌｉ ＴＲａｓｈｉｄ ＡＬｉｕ Ｃｅｔ ａｌ Ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＡＭＰａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ （ＡＭＰＫ）ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ ２０１０７８（１）２２１２２９ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２０１００３００５

［２２］ Ｙａｒｄｅｎ ＲＩＰａｒｄｏＲｅｏｙｏ ＳＳｇａｇｉａｓ Ｍｅｔ ａｌ ＢＲＣＡ１ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅＧ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｃｈｋ１ ｋｉｎａｓｅ ｕｐｏｎ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ［Ｊ］ Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ２００２３０（３）２８５２８９ＤＯＩ１０１０３８ ｎｇ８３７

［２３］ Ｘｕ Ｎ Ｈｅｇａｒａｔ Ｎ Ｂｌａｃｋ ＥＪ ｅｔ ａｌ Ａｋｔ ＰＫＢ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ＤＮＡｄａｍａｇｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｌａｔｅ Ｇ２ ［Ｊ］ Ｊ ＣｅｌｌＢｉｏｌ２０１０１９０（３）２９７３０５ＤＯＩ１０１０８３ ｊｃｂ２０１００３００４

［２４］ Ｘｉｏｎｇ ＷＺｈａｏ ＪＹｕ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｅｌｅｖａｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｖｉａｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ［Ｊ］ ＰｌｏＳ ｏｎｅ ２０１４ ９ （ １１ ）ｅ１１１９１１ＤＯＩ１０１３７１ ｊｏｕｒｎａｌｐｏｎｅ０１１１９１１

［２５］ Ｘｉｅ ＬＹｕ ＪＧｕｏ Ｗｅｔ ａｌ Ａｌｄｏｋｅｔｏ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ １Ｃ３ ｍａｙ ｂｅ ａ ｎｅｗｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍａｒｋｅｒ ｉｎ ｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ ＣａｎｃｅｒＧｅｎｅ Ｔｈｅｒ２０１３２０（４）２６０２６６ＤＯＩ１０１０３８ ｃｇｔ２０１３1049008 １５

［２６］ 孙少倩李懿王雯等ＡＫＲ１Ｃ３ 的过表达会促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路导致前列腺癌的放射抵抗［Ａ］ 中华医学会第十二次全国放射肿瘤治疗会议论文集［Ｃ］北京中华医学会２０１５ＰＢ０９２Ｓｕｎ ＳＨＱ Ｌｉ Ｗ Ｗａｎｇ Ｗ ｅｔ ａｌ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｆａｃｔｏｒ ＰＧＦ２ａｌｐｈａ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ＰＰＡＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ａ］ Ｃｈｉｎｅｓｅ ＭｅｄｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ １２ｔｈ ｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｎｃｏｌｏｇｙ ［Ｃ］ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ２０１５ＰＢ０９２

［２７］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＺｉｖｎａ ＬＸｉｏｎｇ Ｇｅｔ ａｌ ＡＫＲ１Ｃ３ ａｓ ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔａｒｇｅｔｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ ＢｉｏｌＩｎｔｅｒａｃｔ２００９１７８（ １３）１３８１４４ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００８ １００１５

［２８］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＨｏｆｍａｎ ＪＣｈｌｅｂｅｋ Ｊｅｔ ａｌ Ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ａｓａ ｎｏｖｅｌ ｔｙｐｅ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ ＭｏｌＢｉｏｌ２０１４１４３２５０２５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１４０４００５

［２９］ Ｂｙｒｎｓ ＭＣ Ｊｉｎ Ｙ Ｐｅｎｎｉｎｇ ＴＭ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｙｐｅ ５ １７ｂｅｔａｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （ＡＫＲ１Ｃ３）ｏｖｅｒｖｉｅｗ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｓｉｇｈｔｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２０１１１２５ （ １２）９５１０４ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１０１１００４

［３０］ Ｏｆｕｄｅ Ｍ Ｍｉｚｏｋａｍｉ Ａ Ｋｕｍａｋｉ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓｂｙ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ［Ｊ］ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ２０１３３３（１０）４４５３６１

（收稿日期２０１６０２０１）

Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ２００７１６７（３）１９３２０６ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００７０２０１２

［８］ Ｓｈｉｎ ＳＹ Ｋｉｍ ＪＨ Ｌｅｅ ＪＨ ｅｔ ａｌ ２primeＨｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｅｇｒ１ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂａｘ ｐ２１ ａｎｄＮＡＧ１ ｉｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｍｏｌ Ｎｕｔｒ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓ２０１２５６（５）７６１７７４ＤＯＩ１０１００２ ｍｎｆｒ２０１１００６５１

［９］ Ｈｓｉａｏ ＹＣＨｓｉｅｈ ＹＳＫｕｏ ＷＨｅｔ ａｌ Ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ａｎｄ ２primeＯＨ ｆｌａｖａｎｏｎｅ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｉｎｓａｎｄ ＣＤＫｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｂｉｏｍｅｄ Ｓｃｉ ２００７ １４ （ １） １０７１１９ ＤＯＩ １０１００７ ｓ１１３７３００６９１１７３

［１０］ Ｆｅｒｌａｙ ＪＳｏｅｒｊｏｍａｔａｒａｍ ＩＤｉｋｓｈｉｔ Ｒｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ ｓｏｕｒｃｅｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍａｊｏｒ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎＧＬＯＢＯＣＡＮ ２０１２ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ２０１５１３６ （ ５）Ｅ３５９３８６ＤＯＩ１０１００２ ｉｊｃ２９２１０

［１１］ Ｃｈｅｎ ＷＺｈｅｎｇ ＲＢａａｄｅ ＰＤｅｔ ａｌ Ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｉｎ Ｃｈｉｎａ２０１５ ［Ｊ］ ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ２０１６ＤＯＩ１０３３２２ ｃａａｃ２１３３８

［１２］ 韩苏军张思维陈万青等中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析［Ｊ］ 临床肿瘤学杂志２０１３１８（４）３３０３３４Ｈａｎ ＳＰ Ｚｈａｎｇ ＳＷ Ｃｈｅｎ ＷＱ ｅｔ ａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔｓｉｔｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｃｈｉｎａ［Ｊ］ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ２０１３１８（４）３３０３３４

［１３］ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｎｅｔｗｏｒｋ ＮＣＣＮ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＰｒａｃｔｉｃｅＧｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｉｎ ＯｎｃｏｌｏｇｙＰｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｖ １ ２０１６ Ａｖａｉｌａｂｌｅ ａｔｈｔｔｐ ｗｗｗｎｃｃｎｏｒｇ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ ｐｈｙｓｉｃｉａｎ＿ ｇｌｓ ＰＤＦ ｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｐｄｆ Ａｃｃｅｓｓｅｄ Ｊａｎｕａｒｙ ２８２０１６

［１４］ Ｐｉｒｉｌｌｏ ＡＣａｔａｐａｎｏ ＡＬＢｅｒｂｅｒｉｎｅａ ｐｌａｎｔ ａｌｋａｌｏｉｄ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄａｎｄｇｌｕｃｏｓｅｌｏｗｅｒｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ Ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｔｏ ｃｌｉｎｉｃａｌｓｔｕｄｉｅｓ ［Ｊ］ Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ２０１５ ２４３ （ ２ ） ４４９４６１ ＤＯＩ １０１０１６ ｊａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ２０１５０９０３２

［１５］ Ｓｈｉ ＭＶｉｖｉａｎ ＣＪＬｅｅ ＫＪｅｔ ａｌ ＤＮＡＰＫｃｓＰＩＤＤｏｓｏｍｅａ ｎｕｃｌｅａｒｃａｓｐａｓｅ２ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ ｒｏｌｅ ｉｎ Ｇ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ２００９１３６（ ３）５０８５２０ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊｃｅｌｌ２００８１２０２１

［１６］ Ｄｅｎｇ ＲＴａｎｇ ＪＭａ ＪＧｅｔ ａｌ ＰＫＢ Ａｋｔ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ＤＳＢ ｒｅｐａｉｒ ｉｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ Ｍｒｅ１１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２０１１３０（８）９４４９５５ＤＯＩ１０１０３８ ｏｎｃ２０１０1049008 ４６７

［１７］ Ｊｉａｎｇ Ｚ Ｐｏｒｅ Ｎ Ｃｅｒｎｉｇｌｉａ ＧＪ ｅｔ ａｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｔｅｎｓｉｎｈｏｍｏｌｏｇｕｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｏｎｆｅｒｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｒａｄｉａｔｉｏｎａｎｄ ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ ｔｈａｔ ｉｓ ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ ［Ｊ］ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００７ ６７ （ ９） ４４６７４４７３ ＤＯＩ １０１１５８ ０００８５４７２ＣＡＮ０６３ ３９８

［１８］ Ｃｈａｎｇ Ｌ Ｇｒａｈａｍ ＰＨ Ｈａｏ Ｊ ｅｔ ａｌ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＰＩ３Ｋ Ａｋｔ ｍＴＯＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ［Ｊ］ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｓ２０１３４ｅ８７５ＤＯＩ１０１０３８ ｃｄｄｉｓ２０１３1049008 ４０７

［１９］ Ｚａｎｎｅｌｌａ ＶＥ Ｃｏｊｏｃａｒｉ Ｄ Ｈｉｌｇｅｎｄｏｒｆ Ｓ ｅｔ ａｌ ＡＭＰＫ ｒｅｇｕｌａｔｅｓｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ［Ｊ］

Ｒａｄｉｏｔｈｅｒ Ｏｎｃｏｌ２０１１９９（３）２９３２９９ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｒａｄｏｎｃ２０１１０５０４９

［２０］ Ｓｈｉｍｕｒａ Ｔ Ａｃｑｕｉｒｅｄ ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ＡＫＴ ＧＳＫ３ｂｅｔａ ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｙｃｌｅ ［Ｊ］ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｒｅｓ２０１１５２（５）５３９５４４

［２１］ Ｓａｎｌｉ ＴＲａｓｈｉｄ ＡＬｉｕ Ｃｅｔ ａｌ Ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ＡＭＰａｃｔｉｖａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ （ＡＭＰＫ）ａ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ［Ｊ］ Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ ２０１０７８（１）２２１２２９ＤＯＩ１０１０１６ ｊｉｊｒｏｂｐ２０１００３００５

［２２］ Ｙａｒｄｅｎ ＲＩＰａｒｄｏＲｅｏｙｏ ＳＳｇａｇｉａｓ Ｍｅｔ ａｌ ＢＲＣＡ１ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅＧ２ Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｃｈｋ１ ｋｉｎａｓｅ ｕｐｏｎ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ［Ｊ］ Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ２００２３０（３）２８５２８９ＤＯＩ１０１０３８ ｎｇ８３７

［２３］ Ｘｕ Ｎ Ｈｅｇａｒａｔ Ｎ Ｂｌａｃｋ ＥＪ ｅｔ ａｌ Ａｋｔ ＰＫＢ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ＤＮＡｄａｍａｇｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ａｎｄ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｌａｔｅ Ｇ２ ［Ｊ］ Ｊ ＣｅｌｌＢｉｏｌ２０１０１９０（３）２９７３０５ＤＯＩ１０１０８３ ｊｃｂ２０１００３００４

［２４］ Ｘｉｏｎｇ ＷＺｈａｏ ＪＹｕ Ｈ ｅｔ ａｌ Ｅｌｅｖａｔｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｖｉａｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ［Ｊ］ ＰｌｏＳ ｏｎｅ ２０１４ ９ （ １１ ）ｅ１１１９１１ＤＯＩ１０１３７１ ｊｏｕｒｎａｌｐｏｎｅ０１１１９１１

［２５］ Ｘｉｅ ＬＹｕ ＪＧｕｏ Ｗｅｔ ａｌ Ａｌｄｏｋｅｔｏ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ １Ｃ３ ｍａｙ ｂｅ ａ ｎｅｗｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍａｒｋｅｒ ｉｎ ｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ［Ｊ］ ＣａｎｃｅｒＧｅｎｅ Ｔｈｅｒ２０１３２０（４）２６０２６６ＤＯＩ１０１０３８ ｃｇｔ２０１３1049008 １５

［２６］ 孙少倩李懿王雯等ＡＫＲ１Ｃ３ 的过表达会促进放射抵抗因子 ＰＧＦ２α 的生成并通过激活 ＭＡＰＫ 抑制 ＰＰＡＲγ 通路导致前列腺癌的放射抵抗［Ａ］ 中华医学会第十二次全国放射肿瘤治疗会议论文集［Ｃ］北京中华医学会２０１５ＰＢ０９２Ｓｕｎ ＳＨＱ Ｌｉ Ｗ Ｗａｎｇ Ｗ ｅｔ ａｌ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｆａｃｔｏｒ ＰＧＦ２ａｌｐｈａ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ＰＰＡＲ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅ ＭＡＰＫ ｐａｔｈｗａｙ ［Ａ］ Ｃｈｉｎｅｓｅ ＭｅｄｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ １２ｔｈ ｎａｔｉｏｎａｌ ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｎｃｏｌｏｇｙ ［Ｃ］ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ２０１５ＰＢ０９２

［２７］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＺｉｖｎａ ＬＸｉｏｎｇ Ｇｅｔ ａｌ ＡＫＲ１Ｃ３ ａｓ ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｔａｒｇｅｔｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｅｔａｒｙ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ［Ｊ］ Ｃｈｅｍ ＢｉｏｌＩｎｔｅｒａｃｔ２００９１７８（ １３）１３８１４４ ＤＯＩ１０ １０１６ ｊ ｃｂｉ ２００８ １００１５

［２８］ Ｓｋａｒｙｄｏｖａ ＬＨｏｆｍａｎ ＪＣｈｌｅｂｅｋ Ｊｅｔ ａｌ Ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ａｓａ ｎｏｖｅｌ ｔｙｐｅ ｏｆ ＡＫＲ１Ｃ３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ ＭｏｌＢｉｏｌ２０１４１４３２５０２５８ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１４０４００５

［２９］ Ｂｙｒｎｓ ＭＣ Ｊｉｎ Ｙ Ｐｅｎｎｉｎｇ ＴＭ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｔｙｐｅ ５ １７ｂｅｔａｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （ＡＫＲ１Ｃ３）ｏｖｅｒｖｉｅｗ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｓｉｇｈｔｓ ［Ｊ］ Ｊ Ｓｔｅｒｏｉｄ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２０１１１２５ （ １２）９５１０４ＤＯＩ１０１０１６ ｊｊｓｂｍｂ２０１０１１００４

［３０］ Ｏｆｕｄｅ Ｍ Ｍｉｚｏｋａｍｉ Ａ Ｋｕｍａｋｉ Ｍ ｅｔ ａｌ Ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓｂｙ ２primeｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖａｎｏｎｅ ［Ｊ］ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ２０１３３３（１０）４４５３６１

（收稿日期２０１６０２０１）