op timasi profil disolusi dari mikroe mulsi...
TRANSCRIPT
OPMED
TIMASI DROOKS
F
UNIVE
PROFIL SIPROGE
UNDEK
Diaj
mem
DIMA
FAKULTAS
ERSITAS IS
DISOLUESTERONKANOAT
jukan seba
mperoleh ge
AS AGUNG
NIM
PROGRA
S KEDOKT
SLAM NEG
USI DARI N ASETAT (TU) SE
SKRIPSI
agai salah sa
elar Sarjana
OLEH :
G WASKIT
M : 1071020
AM STUDI
TERAN DA
GERI (UIN
JAKARTA
2012
MIKROEAT (MPA)ECARA IN
I
atu syarat u
a Farmasi (
TO WIJAN
001709
I FARMAS
AN ILMU K
N) SYARIF
A
EMULSI ) DAN TEN VITRO
untuk
(S.Far)
NARKO
I
KESEHAT
HIDAYAT
KOMBINESTOSTE
TAN
TULLAH
NASI ERON
NAMA
NIM
JUDUL
: D
: 1
:OPKODA
LEMBAR
DIMAS AGU
1071020017
PTIMASI OMBINASIAN TESTOS
R PERSETU
UNG WAS
709
PROFILI MEDROKSTERON UN
Disetujui
UJUAN SK
SKITO WIJ
DISOLUSKSI PROGNDEKANO
i oleh :
KRIPSI
JANARKO
SI DARI ESTERON
OAT (TU) SE
O
MIKROEMASETAT
ECARA IN V
MULSI (MPA)
VITRO
OPTMED
Tel
Pembimbi
1. Pembim
2.Pembim
Penguji
1. Ketua P
2. Anggota
3. Anggota
4. Anggota
Tanggal lu
TIMASI PRDROKSIPR
U
lah disetujui
ing
ming I
bing II
Penguji
a Penguji I
a Penguji II
a Penguji III
Dek
lus : 21 Febr
LEMBAR
S
OFIL DISOROGESTERUNDEKANO
, diperiksa, d
Dimas A
Dr
Sa
Dr
Dr
Fa
I Zil
kan Fakultas
UIN Sy
ruari 2012
R PENGESA
Skripsi deng
OLUSI DARRON ASETAOAT (TU) S
dan dipertaha
Agung Wask
10710200
Menyetu
r. Azrifitria,
abrina, M.Fa
r. M. Yanis M
r. M. Yanis M
arida Sulistia
lhadia, M.S
Mengeta
s Kedoktera
yarif Hidaya
AHAN SKR
an judul
RI MIKROEAT (MPA) DSECARA IN
ankan dihada
kito Wijanar
01709
ujui
, M.Si, Apt
arm, Apt
Musdja, M.
Musdja, M.
awati, M.Si,
i, Apt
ahui
an dan Ilmu
atullah Jaka
RIPSI
EMULSI KODAN TESTO
N VITRO
apan tim pen
rko
Sc, Apt
Sc, Apt
, Apt
Kesehatan
rta
OMBINASI OSTERON
nguji oleh :
……………
……………
……………
……………
……………
……………
…
…
…
…
…
…
ii
LEMBAR PERNYATAAN
DENGAN INI SAYA MENYATAKAN BAHWA SKRIPSI INI BENAR-
BENAR HASIL KARYA SENDIRI DAN BELUM PERNAH DIAJUKAN
SEBAGAI SKRIPSI ATAU KARYA ILMIAH PADA PERGURUAN
TINGGI ATAU LEMBAGA MANAPUN.
Jakarta, Februari 2012
Dimas Agung Waskito Wijanarko
107102001709
iii
ABSTRAK
Judul : OPTIMASI PROFIL DISOLUSI DARI MIKROEMULSI KOMBINASI MEDROKSI PROGESTERON ASETAT (MPA) DAN TESTOSTERON UNDEKANOAT (TU) SECARA IN VITRO
Profil disolusi digunakan sebagai salah satu aspek untuk mengetahui bofarmasetika dan farmakokinetik obat. dalam desain suatu produk obat. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengoptimasi profil disolusi dari mikroemulsi kombinasi MPA-TU dengan menggunakan 3 varian medium disolusi dan 2 varian pengekstraksi, untuk kemudian profil yang paling optimum dijadikan dasar untuk menentukan kinetika pelepasan obat. Pengujian disolusi menggunakan kantung dialisis yang ditempatkan pada alat uji disolusi tipe keranjang. Kadar dari cuplikan yang diambil, dianalisis dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Proses optimasi ekstraksi tidak memberikan hasil yang optimum untuk kedua varian pengekstrak, sedangkan dalam proses optimasi medium, yang memberikan hasil paling optimum diantara medium lainya adalah medium buffer pospat pH 7,2 - etanol 15% v/v, dan kinetika pelepasan mikroemulsi kombinasi MPA-TU yang mengikuti kinetika orde nol.
Kata kunci : Optimasi Disolusi, Mikroemulsi, Medroksiprogesteron Asetat, Testosteron Undekanoat.
iv
ABSTRACT
Title : OPTIMIZE IN VITRO DISSOLUTION PROFILE FROM MICROEMULSION COMBINATION MEDROXYPROGESTERONE ACETATE AND TESTOSTERONE UNDECANOATE
In product drug design, the dissolution profile is purpose to know biopharmaceutical and pharmacokinetic aspect.. The objective of this research is to optimize dissolution profile from microemulsion combination MPA-TU which using 3 variant dissolution medium and 2 variant extractor solvents then the best dissolution profile is using to determine drug kinetic release. The dissolution test was using basket type of dissolution tester device. The samples concentrations were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The result shown that medium buffer phosphate pH 7.2-ethanol 15% v/v gave the best dissolution profile among other medium. The kinetic release from microemulsion combination MPA-TU indicated zero order kinetic. While for extractor solvents shown that 2 variant of extractor substances could not reach the optimum level in MPA and TU extraction.
Keyword: :Optimizing Dissolution Profile, Microemulsion, Medroxyprogesterone
Asetate, Testosterone Undecanoate .
v
KATA PENGANTAR
Alhamdulillah, puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan
rahmat dan karunia-Nya serta shalawat dan salam selalu tercurah kepada
junjungan kita Nabi Muhammad SAW karena dengan segala rahmat dan karunia-
Nya penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi dengan judul
”OPTIMASI PROFIL DISOLUSI DARI MIKROEMULSI KOMBINASI
MEDROKSIPROGESTERON ASETAT (MPA) DAN TESTOTERON
UNDEKANOAT (TU) SECARA IN VITRO”. Skripsi ini disusun untuk
memenuhi tugas akhir sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana
Farmasi pada Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Program Studi Farmasi
UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis menyampaikan ucapan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada:
1. Prof. Dr. (hc) dr. M.K. Tajudin, Sp.And, selaku Dekan Fakultas Kedokteran
dan Ilmu Keseahatan UIN Syariff Hidayatullah Jakarta.
2. Bapak. Dr. M. Yanis Musdja M.Sc, Apt, selaku Ketua Jurusan Farmasi UIN
Syariff Hidayatullah Jakarta.
3. Ibu Azrifitria, M.Si, Apt, selaku pembimbing I yang telah memberikan banyak
ilmu, bimbingan, pengarahan dan dukungan selama penilitian ini.
4. Ibu Sabrina, M. Farm, Apt, selaku pembimbing II yang telah meluangkan
waktu dan tenaga serta memberikan saran dan dukungan selama penelirian ini.
5. Bapak serta Ibu dosen farmasi UIN Syarif Hidayatullah Jakata, yang telah
banyak memberikan ilmu kepada penulis selama masa perkuliahan.
Akhirnya, dengan segala kerendahan hati, penulis berharap semoga hasil
penelitian ini dapat bermanfaat baik bagi kalangan akademis, khususnya bagi
mahasiswa farmasi, masyarakat pada umumnya dan bagi dunia ilmu pengetahuan.
Jakarta, Februari 2012
Penulis
vi
DAFTAR ISI
LEMBAR PERSETUJUAN ......................................................................... i LEMBAR PERNYATAAN ........................................................................... ii ABSTRAK ...................................................................................................... iii ABSTRACT .................................................................................................... iv KATA PENGANTAR .................................................................................... v DAFTAR ISI ................................................................................................... vi DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... viii DAFTAR TABEL .......................................................................................... ix DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. x BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1
A. Latar Belakang ................................................................................ 1 B. Perumusan Masalah ......................................................................... 3 C. Hipotesis .......................................................................................... 3 D. Tujuan Penelitian ............................................................................ 3 E. Manfaat Penelitian ........................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 5
A. Tinjauan Umum 2.1. Disolusi ................................................................................... 5
2.1.1. Definisi ......................................................................... 5 2.1.2. Hukum Noyes-Whitney ................................................ 6 2.1.3. Faktor yang Memengaruhi Laju Disolusi Obat ............ 6
2.1.3.1. Fisikokimia Obat ............................................. 7 2.1.3.2. Pengaruh Formulasi ........................................ 8 2.1.3.3. Faktor Fisiologis ............................................. 8 2.1.3.4. Alat Disolusi ................................................... 8
2.1.4.Uji In Vitro Disolusi ......................................................... 8 2.2. Kinetika ................................................................................... 11
2.2. Deskripsi Umum .............................................................. 11 2.3. Orde Reaksi ..................................................................... 12
2.3. Sistem Penghantaran Kontrasepsi Hormonal .......................... 14 2.4. Otot Manusia ........................................................................... 16 2.5. Medroksiprogesteron Asetat ................................................... 18 2.6. Testosteron Undekanoat .......................................................... 19 2.7. Emulsi ..................................................................................... 21
2.7.1. Deskripsi Umum ........................................................... 21 2.7.2. Mikroemulsi ................................................................. 21
2.8. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) 2.8.1. Pendahuluan ................................................................. 22 2.8.2. Tipe Pemisahan dalam KCKT ...................................... 24 2.8.3. Instrumentasi KCKT .................................................... 25
B. Potensi penelitian ............................................................................ 28 C. Kerangka Konsep ........................................................................... 29
vii
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................... 30 3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian ........................................................ 30 3.2. Bahan dan Alat .............................................................................. 30
3.2.1. Alat ............................................................................... 30 3.2.2. Bahan ............................................................................ 30
3.3 Prosedur Penelitian ........................................................................ 31 3.3.1. Pembuatan Mikromemulsi MPA-TU ........................... 31 3.3.2. Optimasi Medium Disolusi Secara In Vitro. ................ 31 3.3.3. Optimasi Pengekstrakan Sampel .................................. 32 3.3.4. Analisis Kadar Sampel Menggunakan KCKT ............. 32
3.4. Analisis Data ................................................................................. 33 3.5. Skema Kerja .................................................................................. 34
BAB IV HASIL PENELITIAN ..................................................................... 35 4.1. Optimasi Pengekstraksi ................................................................. 35 4.2. Analisis Kadar MPA dan TU Dalam Medium .............................. 36 4.3. Penentuan Kinetika Pelepasan Zat Aktif ...................................... 37
BAB V PEMBAHASAN ................................................................................ 41 BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 46 DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 47 LAMPIRAN .................................................................................................... 51
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
Gambar 2.1. Rumus bangun medroksiprogesteron asetat ............................. 18 Gambar 2.2. Rumus bangun testoteron undekanoat ..................................... 19 Gambar 2.3. Tipe sistem dispersi mikroemulsi ............................................ 22 Gambar 2.4. Sistem instrumentasi KCKT .................................................... 25 Gambar 4.1. Perbandingan kadar MPA dalam medium ............................... 36 Gambar 4.2. Perbandingan kadar TU dalam medium(TU) .......................... 37 Gambar 4.3. Kurva kinetika orde nol MPA .................................................. 38 Gambar 4.4. Kurva kinetika orde satu MPA................................................. 38 Gambar 4.5. Kurva kinetika Higuchi MPA .................................................. 38 Gambar 4.6. Kurva kinetika orde nol TU ..................................................... 39 Gambar 4.7. Kurva kinetika orde satu TU .................................................... 39 Gambar 4.8. Kurva kinetika Higuchi TU ..................................................... 39 Gambar A. Kurva regresi MPA .................................................................. 52 Gambar B. Kurva regresi TU ..................................................................... 53 Gambar C. Kromatogram standar MPA ..................................................... 61 Gambar D. Kromatogram standar TU ........................................................ 62 Gambar E. Kromatogram MPA dan TU dalam medium NaCl .................. 63 Gambar F. Kromatogram MPA dan TU dalam medium etanol 15% - dapar
pospat pH 7,2 v/v ..................................................................... 64 Gambar G. Kromatogram MPA dan TU dalam medium SDS 0,05% -dapar
pospat pH 7,2 b/v .................................................................... 65
ix
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
Tabel.2.1. Sediaan oral konstrasepsi hormonal ......................................... 14 Tabel 2.2. Sediaan injeksi parentral kontrasepsi hormonal....................... 15 Tabel 2.3. Sediaan implant kotnrapsepsi hormonal .................................. 16 Tabel 2.4. Sediaan koyo kontrasepsi hormonal ........................................ 16 Tabel 4.1. Persen perolehan kembali MPA ............................................... 35 Tabel 4.2. Nilai koefisien (r) dari ketiga kinetika yang berbeda ............... 40 Tabel A. Deret kosentrasi larutan standar MPA ..................................... 52 Tabel B. Deret kosentrasi larutan standar TU......................................... 53 Tabel C. Data AUC MPA dan TU pada medium NaCl .......................... 54 Tabel D. Data AUC MPA dan TU pada medium etanol 15% - dapar pospat
pH 7,2 v/v ................................................................................. 55 Tabel E. Data AUC MPA dan TU pada Medium dapar pospat pH 7,2 – SDS 0,05% b/v .......................................................... 56 Tabel F. Kadar (mg) MPA dan TU dalam medium NaCl ...................... 58 Tabel G. Kadar (mg) MPA dan TU dalam medium etanol 15% - dapar
pospat pH 7,2 v/v ..................................................................... 59 Tabel H. Kadar (mg) MPA dan TU dalam medium dapar pospat pH 7,2 – SDS 0,05% b/v .......................................................... 60
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Pembuatan Kurva MPA dan TU .......................................................... 51 2. Data AUC MPA dan TU dalam Medium NaCl ................................... 54 3. Data AUC MPA dan TU dalam Medium etanol 15% - dapar pospat
pH 7,2 v/v ............................................................................................. 55 4. Data AUC MPA dan TU dalam Medium SDS 0,05% - Dapar Pospat
pH 7,2 b/v ............................................................................................ 56 5. Perhitungan Kadar Zat Aktif yang Terdisolusi dalam Medium
per Satuan Waktu ................................................................................. 57 6. Kadar MPA dan TU dalam Medium NaCl .......................................... 58 7. Kadar MPA dan TU dalam Medium etanol 15% - dapar pospat
pH 7,2 v/v ............................................................................................. 59 8. Data AUC MPA dan TU dalam Medium SDS 0,05% - Dapar Pospat
pH 7,2 b/v ............................................................................................ 60 9. Kromatogram MPA dan TU ................................................................ 61
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Dalam desain suatu produk obat diperlukan kajian mengenai aspek
biofarmasetika dan profil farmakokinetik untuk mengetahui efektifitas kinerja
dari obat tersebut. Parameter pengujian yang biasa dilakukan dalam kajian
tersebut salah satunya adalah penentuan laju disolusi. Disolusi adalah pelepasan
obat dari bentuk dosisnya (Dressman, 2005). Dalam sistem biologis, disolusi
dalam media aqueos merupakan suatu bagian penting sebelum kondisi absorpsi
sistemik (Shargel, 1998). Uji disolusi secara in vitro dapat digunakan secara
efektif untuk memprediksi pelepasan obat secara in vivo. Dan uji disolusi ini
menjadi sebuah uji yang penting dalam pengujian mutu suatu obat (Mansoor et al,
2003)
Studi dari WHO mengemukakan bahwa pemberian regimen kombinasi
androgen dengan progestin lebih efektif menekan output dibandingkan dengan
pemberian androgen atau progestin dalam bentuk tunggal (Turner et al, 2003).
Kombinasi Testosteron Undekanoat (TU) dan Medroksiprogesteron Asetat (MPA)
merupakan kontrasepsi hormonal yang paling efektif dalam menginduksi
spermatogenesis sehingga mencapai azoospermia. Penggunaan Testosteron
Undekanoat (TU) dan Medroksiprogesteron Asetat (MPA) memiliki masa kerja
yang panjang, sehingga mempunyai efek farmakokinetik dan farmakodinamik
lebih baik dibandingkan dengan bahan lain, seperti kombinasi Testosteron Enantat
(TE) dan Medroksiprogesteron Asetat (MPA) (Gu, 2004).
2
Dalam pemberian kontrasepsi hormonal pada pria sebisa mungkin
dihindari pemberian kontrasepsi hormonal secara harian (Turner et al, 2003).
Bentuk ester dari Testoteron seperti bersifat lebih non polar dan lebih mudah larut
dalam lemak dimana pemberian secara intramuskular akan memperpanjang kerja
obat (Siswandono, 2000). Oleh karena itu dibuat bentuk sediaan parentral
intramuskular dengan tujuan memperpanjang kerja obat sehingga mengurangi
frekuensi pemakain.
Mikroemulsi merupakan kandidat utama sebagai sistem penghantaran obat
(Nagarsenker, 2008). Mikroemulsi dapat dibuat untuk pemberian perkutan,
peroral topical, transdermal, ocular, dan parentral (Paul et al, 2001). Dalam
penelitan sebelumnya telah ditemukan formula mikroemulsi yang stabil secara
fisika dan kimia sebagai bentuk sediaan kombinasi Medroksiprogesteron Asetat
dan Testoteron Undekanoat (Azrifitria, 2012) yang kemudian dilanjutkan dengan
penelitan lanjutan untuk profil disolusi dari mikro emulsi terebut dengan medium
NaCl fisiologis-sodium deodesil sulfat (SDS) dengan pengekstrak kloroform
(Rico,2010). Akan tetapi hasil profil disolusi yang didapatkan masih kurang
optimum karena sampai jam ke-8 TU tidak muncul. Oleh karena itu diperlukan
lanjutan lebih jauh mengenai pelepasan zat aktif dari bentuk sediaanya dengan
cara mengoptimasi profil disolusi secara in vitro.
Pengoptimasian dilakukan dengan memvariasikan medium disolusi
menjadi 3 varian medium (NaCl fisologis, etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v,
dan SDS 0,05% - dapar pospat pH 7,2 b/v) dan 2 varian pengekstraksi (pentana
dan kloroform). Medium dan pengekstrak yang memberikan profil disolusi terbaik
dijadikan dasar penentuan kinetika pelepasan dari mikroemulsi kombinasi MPA-
3
TU untuk selanjutnya dijadikan langkah awal dalam kajian hubungan in vitro - in
vivo dalam pengembangan sediaan dimasa yang akan datang.
1.2. Perumusan Masalah
Pelepasan MPA-TU dalam mikroemulsi masih belum diketahui
secara pasti, hal ini disebabkan karena ketidakmunculan TU pada
penelitian sebelumnya (Rico, 2010). Oleh karena itu diperlukan penelitian
lanjutan pengoptimasian profil disolusi dari mikroemulsi MPA-TU.
1.3. Hipotesis
1. MPA dan TU dalam mikroemulsi dapat terdisolusi dalam medium
NaCl, etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v, dan SDS 0,05 % - dapar
pospat pH 7,2 b/v.
2. MPA dan TU dalam mikroemulsi dapat terekstrak sempurna dalam
kloroform dan pentana.
3. Profil disolusi MPA dan TU dalam mikroemulsi mengikuti kinetika
orde nol.
1.4. Tujuan Penelitian
1. Mengoptimasi profil disolusi kombinasi MPA-TU dalam mikroemulsi.
2. Mengetahui pelepasan MPA-TU dalam mikroemulsi.
4
1.5. Manfaat Penelitian
1. Memberikan gambaran laju disolusi MPA dan TU dalam mikroemulsi
untuk pengujian pada kondisi in vivo dimasa yang akan datang.
2. Mengetahui salah satu aspek biofarmasi dari mikroemulsi MPA-TU
sebagai bagian dari pengembangan sediaan kontrasepsi pria.
5
BAB II
LANDASAN TEORI
A.TINJAUAN UMUM
2.1. Disolusi
2.1.1. Definisi
Disolusi adalah perpindahan ion atau molekul dari kondisi padat
menjadi larutan. Tingkat disolusi diketahui dengan cara melakukan
serangakaian percobaan yang berhubungan dengan kondisi melarutnya
solute kedalam pelarut. Dengan demikian kelarutan suatu zat dapat dapat
diartikan dengan sejumlah bagian dari zat yang melarut ketika kondisi
kesetimbangan terjadi antara larutan dengan zat yang berlebih ( yang tidak
larut).
Karena pengertian diatas bersifat umum maka memungkinkan
untuk di aplikasikan ke semua tipe larutan meliputi ke tiga jenis fase
(gas,cair,dan padat) yang melarut dalam salah satu dari ke tiga jenis fase
tersebut (Aulton, 2002).
2.1.2. Hukum Noyes-Whitney
Pada tahun 1987 Noyes dan Whitney menggagas analisis kuntitatif
dari laju disolusi partikel obat terhadap fungsi waktu. Persamaan Noyes-
Whitney untuk laju disolusi dituliskan dengan
dM/dt = (D S / h) ( Cs-Cb)
6
dimana M adalah jumlah masa terlarut(mg atau mmol) terhadap t waktu
(detik). D adalah koefisien distribusi(cm2/s). S adalah luas permukaan
partikel (cm2), h adalah ketebalan dari lapisan film cair yang terbentuk.
Dalam banyak uji disolusi kosentrasi pada bulk medium selalu jauh
lebih kecil dibandingkan dengan larutan jenuh (Cs>>Cb). Kondisi ini
disebut kondisi hilang atau sink condition (Mansoor et al, 2003).
2.1.3. Faktor Yang Memengaruhi Laju Disolusi Obat.
2.1.3.1. Fisikokimia Obat
a. Pengurangan Ukuran Partikel
Seperti diketahui pada persamaan noyes-whitney, laju
disolusi (dm/dt) berbanding lurus dengan luas permukaan area zat
(S). Semakin besar luas area permukaan suatu zat, maka semakin
besar pula laju disolusinya. Sedangkan luas permukaan area
berbanding terbalik dengan ukuran partikel. Pengurangan ukuran
partikel dapat meningkatkan luas permukaan zat. Semakin kecil
ukuran partikel maka luas area zat semakin besar dan laju disolusi
akan semakin besar (Mansoor et al, 2003).
b.Bentuk Ionisasi
Bentuk garam elektolit lemah dari suatu zat lebih larut
terhadap air dibandingkan dengan bentuk asam atau basa
lemahnya. Bentuk garam mengakibatkan disolusi dan absorpsi obat
menjadi lebih cepat (Mansoor et al, 2003).
7
c.Bentuk Kristal
Bentuk kristal dari suatu obat akan larut lebih lama
dibandingkan dengan bentuk amorfnya. Hal di sebabkan karena
energi yang di butuhkan untuk membongkar partikel kristal jauh
lebih besar disbanding dengan bentuk amorf. Para formulator
didunia lebih suka memformulasikan obat dengan bahan aktif
dalam bentuk amorf dibandingkan dengan yang bentuk kristal
(Mansoor et al, 2003).
d.Ikatan Kompleks.
Penelitian terakhir menunjukan bahwa obat-obat hidrofob
yang di modifikasi strukturnya menjadi suatu senyawa kompleks,
menunjukan kenaikan laju disolusi karena meningkatnya kelurtan
dalam air (Mansoor et al, 2003)..
2.1.3.2. Pengaruh Formulasi
Zat-zat tambahan dari suatu obat dapat mempengaruhi laju disolui
dari suatu sediaan obat. Sebagai contoh penggunaan pengikat polimer
seperti poly-N-Vinyl pyrolidone dan NaCMC dapat meningkatkan laju
disolusi dari suatu partikel obat yang hidrofobik. Penambahan lubrikan
seperti asam stearat atau Mg stearat pada tablet dapat menurunkan laju
disolusi obat karena penambahan lubrikan akan membentuk suatu lapisan
hidrofobik pada partikel obat yang akan menghalangi interaksi antar muka
antara partikel obat dengan cairan medium.
8
Pada emulsi disolusi partikel obat dipengaruhi oleh menyatunya
partikel dispers kedalam pendispers dan kemudian larut yang kemudian
dilanjutkan dengan melarutnya kedalam cairan medium. Kekentalan dari
emulsi juga dapat memengaruhi disolusi partikel obat karena akan
menurunkan koefisien difusi seiring dengan kenaikan kekentalan
(Mansoor et al, 2003)..
2.1.3.3. Faktor Fisiologis
Waktu pengosongan lambung dapat mempengaruhi laju disolusi.
Lambung yang terisi makanan akan mengakibatkan cairan lambung
mengalami kenaikan kekentalanya sehingga memperlambat laju disolusi
obat (Mansoor et al, 2003).
2.1.3.4. Alat Disolusi
Kecepatan pelepasan zat aktif dari bentuk sediaan secara in vitro
sangat dipengaruhi oleh kondisi-kondisi pengujian. Variabel-variabel yang
digunakan dalam uji in vitro seperti jenis dan kecepatan pengadukan yang
digunakan, volume medium dan komposisi medium turut mengambil andil
dalam perubahan laju disolusi (Abdou, 1995).
2.1.4. Uji In Vitro Disolusi
Uji disolusi secara in vitro dapat digunakan untuk meramalkan
ketersediaan hayati dan dapat digunakan untuk membedakan perumusan
faktor-faktor yang mempengaruhi bioavailabilitas obat (Shargel, L., 2004).
9
Secara umum dalam pengembangan uji disolusi, tujuan utamanya adalah
mencapai kondisi hilang (sink conditions).
Menurut farmakope amerika prosedur pengujian disolusi secara in
vitro paling tidak membutuhkan 3 hal, yakni alat penguji/apparatus,
medium disousi, metode yang sesuai. Dalam famakope amerika
disebutkan ada 7 macam apparatus untuk uji disolusi. Namun apparatus
yang paling sering digunakan adalah apparatus 1 dan apparatus 2 yaitu
apparatus basket dan keranjang. Apparatus keranjang paling umum
digunakan dalam test disolusi untuk sediaan kapsul,supositoria, tabet, dan
sediaan lain yang memilki berat jenis yang rendah dan cenderung untuk
mengapung dalam medium.
Sedangkan dalam memilih medium disolusi data fisikokimia dari
zat aktif sediaan harus terlebih dahulu di ketahui. Dua hal yang perlu
diketahui adalah kelarutan bahan obat dan stabilitasnya terhadap nilai pH.
Ketika memilih penyusun dari medium, pengaruh dari dapar, nilai pH,
penambahan surfaktan dan kestabilan obat perlu di perhatikan.
Pengunaan campuran pelarut organik-air sebagai medium disolusi
sebenarnya tidak di sarankan, namun dengan perlakuan dan persiapan
yang tepat jenis media ini dapat diterima sebagai salah satu jenis medium.
Air yang telah dimurnikan sering digunakan sebagai medium
disolusi, tetapi ini tidak ideal untuk beberapa alasan. Pertama, kualitas air
dapat bervariasi tergantung pada sumber dimana air diambil, dan tidak
dapat terkontrolnya nilai pH air. Kedua, nilai pH dapat bervariasi dari hari
10
ke hari dan juga berubah selama pengujian, tergantung pada zat aktif dan
bahan pembantu. Walau dengan memiliki keterbatasan, air juga memiliki
kelebihan antara lain murah, siap tersedia, mudah di daur ulang, ramah
lingkungan, dan cocok untuk produk dengan tingkat pelepasan yang tidak
bergantug dari nilai pH medium.
Karakteristik disolusi suatu formulasi oral harus dievaluasi dalam
kisaran pH fisiologis dari 1,2 ke 6,8 (1,2 sampai 7,5 untuk formula
pelepasan yang dimodifikasi). Penyeleksian kondisi medium yang paling
tepat untuk pengujian rutin didasarkan pada stabilitas analit dalam medium
uji dan relevansnyai terhadap kinerja in vivo.
Medium khas untuk uji disolusi dapat mencakup sebagai berikut,
asam klorida encer, dapar dalam kisaran pH fisiologis, tiruan cairan
lambung atau usus dengan pH 1,2 sampai 7,5 (dengan atau tanpa asam
atau dapar), air dengan surfaktan seperti polisorbat 80, soduim lauril sulfat
dan lain sebagainya.
Untuk Volume medium pada alat disolusi tipe keranjang dan
dayung volume medium yang digunakan normalnya antara 500mL-
1000mL. Volume dapat dinaikan hingga 2-4 L tergantung pada besar
wadah dan kondisi yang di inginkan (USP 30).
11
2.2. Kinetika
2.2.1. Deskripsi Umum
Kinetika adalah ilmu yang memperlajari laju atau kecepatan dari
suatu proses yang terjadi. Proses ini meliputi perubahan secara kimia atau
perubahan secara fisika. Studi tentang kinetika sangat bermanfaat dalam
meberikan informasi seperti :
a. Memberikan gambaran tentang mekanisme mengenai
perubahan baik secara kimia ataupun fisika
b. Memprediksikan derajat perubahan yang terjadi seiring
perubahan waktu
(Aulton , 2002).
Proses laju merupakan hal dasar yang perlu diperhatikan bagi
setiap orang yang berkaitan dengan bidang kefarmasian, mulai dari
pengusaha obat sampai ke pasien. Beberapa prinsip dan proses laju yang
berkaitan dimasukan dalam rantai peristiwa ini :
1. Kestabilan dan tak tercampurkan
2.Disolusi
3. Proses absorpsi,distribusi dan eliminasi
4. Kerja obat pada tingkat molecular (Martin, 1993).
12
Laju atau kecepatan suatu reaksi diberikan sebgai ±
. Artinya
terjadi penambahan (+) atau pengurangan (-) dalam selang waktu dt
(Martin, 1993).
Misalkan :
Obat A Obat B
Bila jumlah obat A berkurang dengan bertambahnya waktu (reaksi
berjalan searah dengan tanda ) maka laju reaksi dapat dinyatakan
sebagai :
(Shargel, 1988)
2.2.2. Orde Reaksi
Orde reaksi adalah suatu cara yang menunjukan bagaimana
kosentrasi obat dalam pereaksi dapat mempengaruhi suatu reaksi kimia
(Shargel, 1988). Menurut hukum aksi massa, laju suatu reaksi kimia
sebanding dengan hasil kali dari kosentrasi molar reaktan yang masing-
masing dipangkatkan dengan angka yang menunjukan jumlah molekul dari
zat-zat yang ikut serta dalam reaksi.Dari hukum aksi massa, suatu garis
lurus didapat bila laju reaksi diplot sebagai suatu fungsi dari kosentrasi di
13
pangkatkan dengan jumlah tertentu. Orde reaksi secara keseluruhan adalah
jumlah pangkat kosentrasi-kosentrasi yang menghasilkan sebuah garis
lurus. Orde reaksi bagi tiap reaktan adalah pangkat dari tiap kosentrasi
reaktan (Martin, 1993). Berikut adalah jenis-jenis reaksi orde :
A. Reaksi Orde Nol
Jenis reaksi orde yang terjadi apabila kecepatan laju reaksi
tidak bergantung pada kosentrasi dari reaktan. Laju
pelepasanya konstan (Aulton , 2002).
B. Reaksi Orde Kesatu
Jenis reaksi orde yang terjadi apabila laju dipengaruhi salah
kosentrasi satu dari reaktan. Laju reaksi yang ditandai
perubahan kosentrasi bergantung pada perubahan waktu
(Aulton , 2002).
C. Reaksi Orde Kedua
Jenis reaksi orde yang terjadi apabila laju reaksi dipengaruhi
dari kosentrasi 2 jenis reaktan. Ini merupakan reaksi
bimolecular dimana 2 molekul atau 2 mol dari reaktan
bersama-sama membentuk produk yang bergantung pada kedua
reaktan tersebut (Mansoor et al, 2003).
D. Reaksi Kinetika Higuchi
Kinetika pelepasan yang diselisiki oleh T. Higuchi, umumnya
ditunjukan oleh obat dari matriks yang tidak larut (Martin,
1993)
14
Untuk menentukan jenis orde reaksi dapat dilakukan dengan
beberapa metode antara lain ;
1.Metode Subsitusi
2. Metode Grafik
3.Metode Waktu Paruh (Martin, 1993).
2.3. Sistem Penghantaran Kontrasepsi Hormonal
Kemajuan teknologi dalam berbagai bidang, termasuk dalam bidang
farmasi menghasilkan bentuk sediaan obat sebgai kontrasepsi, yang dapat dipilih
oleh masing-masing individu sesuai dengan kondisinya. Didalam pendidikan ilmu
farmasi kedokteran, bentuk sediaan obat kontrasepsi merupakan pokok bahasan
yang berkaitan,selain dosis obatnya. Salah satu jenis kontrasepsi adalah
kontrasepsi hormonal (repository UI). Bentuk sediaan kontrasepsi hormonal :
a. Pil Kombinasi Oral Contraception (OC)
Pil kombinasi merupakan kombinasi dosis rendah estrogen dan
progesteron. Penggunaan kontrasepsi pil kombinasi estrogen dan
progesteron atau yang hanya terdiri dari progesteron saja merupakan
penggunaan kontrasepsi terbanyak (Trisnawarman,Erlysa, 2007)
15
Tabel 2.1. Sediaan oral kontrasepsi hormonal
b. Suntik KB
Kontrasepsi suntikan mengandung hormone sintetik. Cara
pemakaiannya dengan menyuntikkan zat hormonal ke dalam tubuh. Zat
hormonal yang terkandung dalam cairan suntikan dapat mencegah
kehamilan dalam waktu tertentu. Biasanya penyuntikan ini dilakukan 2-3
kali dalam sebulan (Trisnawarman,Erlysa, 2007).
Tabel.2.2 Sedian injeksi parentral kontrasepsi hormonal
Merek Sediaan Bahan Aktif Penggunaan
Depo Provera MPA 3 bulan sekali
Depo Estradiol Estadiol 1 bulan sekali
Depo Nebido TU 10- 14 minggu sekali
Kandungan Merek Sediaan Bahan Aktif Penggunaan
Estrogen Premarin CEE Harian
Estrace 17-β estradiol Harian
Evista Raloxifene Harian
Progesteron Provera MPA Harian
Micronor Norentindrone Harian
Kombinasi Prempoo CEE & MPA Harian
Premphase CEE & MPA Harian
16
c. Susuk KB ( Implan )
Implan terdiri dari 6 kapsul silastik, setiap kapsulnya berisi
levornorgestrel sebanyak 36 miligram dengan panjang 3,4 cm dan
diameter 2,4 cm. Kemasan Implan dirancang agar isinya tetap steril selama
masa yang ditetapkan asalkan kemasannya tidak rusak atau terbuka.
Kapsul yang dipasang harus dicabut menjelang akhir masa 5 tahun.
Pemasangan implan hanya dilakukan petugas klinik yang terlatih secara
khusus (dokter, bidan dan paramedik) yang dapat melakukan pemasangan
dan pencabutan Implan. Terdapat dua jenis Implan yaitu Norplant dan
Implanon (Trisnawarman,Erlysa, 2007).
Tabel.2.3 Sediaan implant kontrasepsi hormonal
Merek sediaan Bahan Aktif Penggunaan
Riselle Micronized 17-β
estradiol
6 bulan sekali
d. Koyo KB
Digunakan dengan ditempelkan di kulit setiap minggu.
Kekurangannya adalah menimbulkan reaksi alergi bagi yang memiliki
kulit sensitif dan kurang cocok untuk digunakan pada daerah beriklim
tropis (Trisnawarman,Erlysa, 2007).
Tabel.2.4. Sediaan koyo kontrasepsi hormonal
Merk Sediaan Bahan Aktif Pengunaan
Estraderm Micronized 17-β estradiol 2 x seminggu
Climara Micronized 17-β estradiol 1 x seminggu
17
2.4. Otot Manusia
Otot atau dalam bahasa latin musculus yang berarti tikus mungil, adalah
sebuah jaringan kontraktil dalam tubuh dengan kontraksi sebagai tugas utamanya
yang menghasilkan gaya dan menyebabkan bergerak. Otot menggunakan oksidasi
dari lemak, karbohidrat, dan reaksi kimia secara anearobik untuk membentuk
senyawa adenosine triphospate (ATP) yang berfunsi sebagai tenaga untuk
bergerak. Otot berasal dari jaringan mesoderm paraksial yang kemudian
berdiferensiasi menjadi myotone kemudain myoblast. Otot manusia terbagi
menjadi 3 jenis yaitu (Lawreen, 1997) :
a. Otot Rangka
Otot Rangka adalah otot yang melekat pada tulang dan
berfungsi menggerakan anggota gerak tubuh. Otot ini digerakan
secara sadar. Pada pria umumnya 42% tubuhnya terdiri atas otot
rangka, sedangkan untuk wanita pada umumnya tubuhnya terdiri
atas 36% otot rangka (bedasarkan persentasa massa tubuh)
(Mareeb, 2007).
b. Otot Polos
Otot polos adalah otot yang bersifat spontan atau tidak
digerakan secara sadar. Otot ini berada pada dinding dalam organ
dan struktur seperti kerongkongan, lambung, rahim, dll (Mareeb,
2007).
18
c. Otot Jantung
Otot jantung adalah otot yang hanya dijumpai pada dinding
jantung. Otot jantung adalah otot yang yang digerakan secara
spontan atau tak sadar namun strukturnya mirip dengan otot rangka
(Mareeb, 2007).
2.5. Medroksiprogesteron Asetat
Gambar 2.1. Rumus Bangun Medroksiprogesteron Asetat
Nama kimia : (6α)-17-Hidroksi-6 metil pregn-4-ene-3, 20-dione asetat
Rumus Molekul : C24H34O4
Bobot Molekul : 386,5
Kelarutan : praktis tidak larut dalam air, sedikit larut dalam alkohol,
50 bagian aseton, 10 bagian kloroform
Penyimpanan : dalam wadah kedap udara dan terlindung dari cahaya.
(Reynolds, 1982; Kozutsumi et al., 1999)
19
Medroksiprogesteron asetat (MPA) adalah derivat dari progesteron
yang merupakan hormon steroid endogen yang diproduksi oleh ovarium,
korteks adrenal, testis dan plasenta pada masa kehamilan. MPA berbentuk
serbuk hablur berwarna putih, tidak berbau. Secara farmakologi, MPA
digunakan untuk kontrasepsi dan terapi paliatif karsinoma endometrium yang
telah bermetastasis (Suherman, 2008). Penggunaan Medroksiprogesteron
Asetat (MPA) dapat menekan spermatogenesis tetapi juga menekan sekresi
testosteron. Hal ini menyebabkan penurunan libido, sehingga perlu
dikombinasikan dengan Testosteron Undekanoat (TU).
2.6. Testoteron Undekanoat
Gambar 2.2. Rumus Bangun Testosteron Undekanoat
Rumus molekul : C30H48O3
Bobot molekul : 456,70
Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air, secara mudah larut
dalam alkohol, larut dalam dalam 2 bagian
kloroform, dan 100 bagian eter, larut dalam minyak
nabati
20
Testosteron undekanoat (TU) yang dikembangkan untuk kontrasepsi pria
digunakan dalam bentuk injeksi (liquid). Sediaan tersebut diberikan dengan cara
injeksi secara intramuskular. Ada juga TU dalam bentuk powder yang
kadangkadang dibungkus dengan kapsul. Testosteron undekanoat (Gambar 1)
dihasilkan melalui esterifikasi testosteron alami pada posisi 17β. TU ini
merupakan steroid dengan 19 atom karbon dengan rumus kimia C19H28O2, serta
nama kimianya adalah 17 betahydroxyandrost- 4-en-3-one. Testosteron
Undekanoat merupakan suatu bentuk ester dari testosterone alami. Bentuk aktif
testosteron dihasilkan dari hidrolisasi esternya. Efek utama dari testosteron hasil
hidrolisasi TU tersebut terjadi setelah adanya ikatan testosteron terhadap reseptor
spesifiknya yang membentuk komplek hormon-reseptor. Komplek hormon-
reseptor tersebutmasuk ke dalam inti sel dimana ia akan memodulasi transkripsi
gen-gen tertentu setelah terikat dengan DNA
Tujuan utama dari pemberian testosteron adalah mempertahankan
tingginya tingkat serum testosteron jangka panjang pada pria yang ikut dalam
kontrasepsi pria. Hal ini bertujuan untuk menekan spermatogenesis sehingga
terjadi azoospermia atau oligozoospermia berat yang berlangsung lebih lama
namun bersifat aman, efektif, reversibel, dan aseptibel. Konsentrasi testosteron
serum stabil dalam rentang fisiologi minggu pertama setelah pemberian pertama
kali. Kandungan testosteron melebihi rentang fisiologis dari testosteron enantat
dan sipionat. Rentang fisologi dari TU dapat mencapai 12 minggu setelah injeksi.
(Ilyas,2008).
21
2.7. Emulsi
2.7.1. Deskripsi Umum
Emulsi adalah sistem yang secara termodinamika tidak stabil dan
cairan terdispersi (fase terdispersi) dalam cairan lainya (fase
pendispersi/fase kontinu) dalam bentuk globul-globul dan di stabilkan
dengan emulgator (Martin, 1983). Keuntungan dari sediaan bentuk emulsi
adalah dapat menutupi rasa yang tidak enak, meperbaiki penampilan scara
visual, meingkatkan stabilitas obat (Ansel, 1989 ). Sebagian besar emulsi
memiliki ukuran droplet antara 0,1-100um dan bersifat tidak stabil (Auton,
2002).
Dua tipe utama dari emulsi adalah tipe minyak-air dan air-minyak,
ini bergantung pada fase mana yang menjadi fase kontinu/pendispers
apakah fase air atau fase minyak. Jauh lebih kompleks emulsi juga dapat
terdiri dari globul minyak yang mendispersi molekul air dan globul
minyak tersebut terdispers dalam lingkungan air, yang disebut emulsi air-
minyak-air (a/m/a). Sebaliknya jika molekul minyak yang terdispers dalam
globul air yang terdispers dalam lingkungan minyak disebut emulsi jenis
minyak-air-minyak(m/a/m). Emulsi jenis ini disebut juga dengan multiple
emulsions (Auton, 2002)
2.7.2. Mikroemulsi
Tidak seperti emulsi biasa, mikroemulsi adalah sistem homogen
transparan yang secara termodinamika stabil. Mikroemulsi terbentuk
secara spontan ketika rasio dari komposisi penyusunya bercampur secara
22
tepat dengan ukuran droplet sekitar 5-140nm,jauh lebih kecil dari pada
droplet pada emulsi biasa.
Ada tiga tipe sistem dispersi yang dibentuk oleh mikroemulsi yaitu
tipe minyak dalam air (M/A atau O/W), tipe air dalam minyak (A/M atau
W/O) dan tipe bicontinuous. Tipe sistem dispersi mikroemulsi tersebut
terbentuk tergantung komposisi dari komponen mikroemulsi itu sendiri.
Gambar .2.3. Tipe Sistem Dispersi Mikroemulsi (Lawrence et al, 2000)
Dalam membuat dan memformulasi mikroemulsi hal utama yang
perlu dicapai adalah bagaimana memebentuk sekecil mungkin tegangan
permukaan yang terjadi. Ini tidak mungkin dicapai dengan hanya
memakiai satu jenis surfaktan. Dibutuhkan surfaktan kedua seperti
alkhohol rantai sedang yang biasa disebut cosurfactant (Auton, 2002) .
2.8. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
2.8.1. Pendahaluan
Pada tahun 1902 Mikhael Tswett menemukan metode untuk
memisahkan pigmen daun dengan menggunakan berbagai macam
adsorben ,yang kemudian pigmen daun akan tertahan di berbagai macam
adsorben yang digunakan dan membentuk pita-pta warna. Ini yang
23
menjadi awal mula kata kromatografil yang berasal dari bahasa yunani
“chromate” yang berarti warna dan “graph” yang berarti merekam.
Kromatografi sendiri dapat di definisikan sebagai pemisahan campuran
dengan distribusi antara dua atau lebih fase yang tidak bercampur.
Sejumlah fase tidak bercampur tersebut dapat berupa fase gas-cair, gas-
padat, cair-cair, cair-padat, gas-cair-padat, dan cair-cair-padat (Welling
Donald, 2006).
Perkembangan kromatografi dimulai pada tahun 1930an dengan di
temukanya kromatografi lapis tipis (KLT), tahun 1940 mulai di
kembangkan kromatografi gas dan kromatografi kertas, baru pada tahun
1960an perkembangan kromatografi cair mulai di perhatikan dengan di
temukanya KCKT (Johnson & Stevenson, 1978).
KCKT merupakan tehnik kromtografi yang komplementer. Dalam
pengaplikasianya alat kromatografi ini dapat di kendalikan dengan
computer dengan software yang canggih dan berkemampuan untuk
memisahkan sampai 100 komponen dalam campuran yang kompleks.
Kegunaan umum kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) adalah
untuk pemisahan senyawa organik, anorganik, maupun senyawa biologis,
analisis ketidak murnian (impurities), anlisis senyawa non volatile baik
dalam jumlah sekelumit, dalam jumlah banyak dan dalam skala proses
industrusi. KCKT merupakan metode tidak destruktif dan dapat di
gunakan baik untuk anlisis kunatitatif maupun kualitatif (Gandjar &
Rohman, 2007).
24
2.8.2. Tipe Pemisahan dalam KCKT`
Ada dua tipe pemisahan dalam KCKT, yang mana tergantung pada
polaritas relatif dan pelarut dan fase diam.
A. Fase normal KCKT (normal phase)
Dalam tipe ini kolom diisi dengan partikel silika yang sangat kecil
dan pelarut non polar misalnya heksan. Sebuah kolom sederhana memiliki
diameter internal 4.6 mm (dan mungkin kurang dan nilai ini) dengan
panjang 150 sampai 250 mm. Senyawa-senyawa polar dalam campuran
melalui kolom akan melekat lebih lama pada silika yang polar dibanding
degan senyawa-senyawa non polar. Oleh karena itu, senyawa yang non
polar kemudian akan lebih cepat melewati kolom.
B. Fase terbalik KCKT ( reverse phase)
Dalam kasus ini. ukuran kolom sama, tetapi silika dimodifikasi
menjadi non polar melalui pelekatan rantai-rantai hidrokarbon panjang
pada permukaannya secara sederhana baik berupa atom karbon 8 atau 18.
Sebagai contoh, pelarut polar digunakan berupa campuran air alkohol
seperti metanol.
Dalam kasus ini, akan terdapat atraksi yang kuat antara pelarut
polar dan molekul polar dalam campuran yang melalui kolom. Atraksi
yang terjadi tidak akan sekuat atraksi antara rantai-rantai hidrokarbon yang
berlekatan pada silika (fase diam) dan molekul-molekul polar dalam
larutan. Oleh karena itu. molekul-molekul polar dalam campuran akan
menghabiskan waktunya untuk bergerak bersama dengan pelarut.
25
Senyawa-senyawa non polar dalam campuran akan cenderung
membentuk atraksi dengan gugus hidrokarbon karena adanva dispersi gaya
van der Waals. Senyawa-senyawa ini juga akan kurang larut dalam pelarut
karena membutuhkan pemutusan ikatan hidrogen sebagaimana halnya
senyawa-senyawa tersebut berada dalam molekul-molekul air atau metanol
misalnya. Oleh karenanya, senyawa-senyawa ini akan menghabiskan
waktu dalam larutan dan akan bergerak lambat dalam kolom. ini berarti
bahwa molekul-molekul polar akan bergerak lebih cepat melalui kolom.
Fase balik KCKT adalah bentuk yang biasa digunakan dalam KCKT
(Hermanto, 2009).
2.8.3. Instrumentasi KCKT
Gambar.2.4. Sistem Instrumentasi KCKT (Hermanto, 2009).
a. Wadah Pelarut
Wadah pelarut adalah tempat penyimpanan pelarut untuk
KCKT dengan jumlah yang cukup untuk pengoprasian system
KCKT. Wadah pelarut dapat dilangkapi pengawasan secara online
dan filteruntuk melindungi pelarut dari pengaruh lingkungan
26
b. Pompa
Pompa berfungsi untuk menjaga aliran fase gerak ke sistem
secara konstan dan terus menerus. Sebagian besar pompa modern
memungkinkan pengaturan pencampuran berbagai macam pelarut
dari wadah pelarut yang berbeda.
c. Injektor
Injektor berfungsi untuk menginjeksikan analit agar bercampur
kedalam aliran fase gerak sebelum memasuki kolom. Sebagian
injektor modern sudah dilengkapi dengan autosampler(automatis)
dimana memungkinkan menginjeksikan sampel dengan volume
yang berbeda dari vial yang berbeda
d. Kolom
Kolom bisa di analogikan ini adalah jantung dari system
KCKT. Kolomlah yang memroses pemisahan analit dari sampel.
Kolom adalah tempat dimana fase gerak dan fase diam bertemu
dan mengalami kontak membentuk suatu kontak antar muka yang
besar. Perkembangan beberapa tahun terakir ini mengarahkan
dalam pengembangan disain untuk meperbesar kontak antar muka
tersebut.
e. Detektor
Detektor adalah alat yang berfungsi untuk mentekan secara spesifik
karakteristik dari analit yang telah di pisahkan di dalam kolom.
Sebagian besar detector yang digunakan dalam KCKT adalah
27
detector UV, dimana detector UV memungkinkan untuk secara
terus menerus memonitor absorbansi dari sampel dalam rentang
panjang gelombang UV. Kemunculan analit dalam detector muncul
apabila analit menyerap/mengabsorbansi sinar UV lebih banyak
dari pada pembawanya, dan ini menunjukan bahwa sampel positif.
f. Analisis Data dan Kontrol Sistem
Adalah bagian dari KCKT yang berbasis computer dimana
semua parameter instrument dalam KCKT (komposisi pembawa,
campuran dari beberapa pelarut, temperature, urutan injeksi, dll)
dan merupakan bagian untuk mendapatkan dan mengolah data
yang di dapat dari detektor.
28
B. Potensi Penelitian
Medroksiprogesteron asetat dan testoteron undekanoat merupakan hormon
kelamin yang dapat berkhasiat kontraseptif bagi pria. Pengembangan kedua zat
tersebut sebagai sediaan kontrasepsi bagi pria saat ini sedang gencar digalangkan
oleh WHO. Dengan berkembangnya ilmu farmasetik memungkin kan di buatnya
sediaan dengan laju pelepasan yang di modifikasi. Maka di formulasikanlah
kombinasi Medroksiprogesteron asetat dan Testoteron undekanoat dalam sediaan
mikroemulsi untuk rute intramuscular yang di harapakan memiliki kinetika
pelepasan mengikuti pelepasan lepas terkendali. Salah satu paramaeter untuk
mengetahui kinetka pelepasan suatu obat adalah dengan melakukan test disolusi
secara in vitro.
Pengujian disolusi sediaan mikroemulsi MPA-TU sebelumnya telah
dilakukan namun belum memperoleh hasil yang optimum dengan
ketidakmunculan TU pada analisis KCKT (Rico, 2010). Uji disolusi kali ini
dilakukan dengan menggunakan alat disolsi tipe basket,dimana mikroemulsi di
masukan kedalam kantung membran dialisis seperti yang dikembangkan Kang et
al (2004) sebagai pembatas antara mikroemulsi dengan medium disolusi. Dalam
uji disolusi kali ini menggunakan 3 varian medium NaCl-fis, etanol 15% - dapar
pospat pH 7,2 v/v,dan SDS 0,05% - dapar pospat pH 7,2 b/v dan pengekstrak
kloroform dan pentana. Cuplikan dari uji disolusi di analisis dengan Kromatografi
Cair Kinerja Tinggi (KCKT) dengan kolom C18. Hasil dari penelitian ini di
harapkan dapat menjadi acuan dalam pengujian secara in vivo di masa yang akan
datang.
29
C. KERANGKA KONSEP
Kombinasi Medroksiprogesteron asetat dan Testoteron undekanoat
diketahui dapat menekan proses spermatogensis pada pria normal sehingga
dapat digunakan sebagai kontrasepsi hormonal pria.
Dilakukan pengujian disolusi secara in vitro untuk mengetahui kinetika
sediaan dimana Uji disolusi tersebut dioptimasi dengan menggunakan 3 jenis
medium yaitu : NaCl fisiologis, etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v, SDS
0,05% - dapar pospat pH 7,2 b/v. Kemudian di analisa dengan kromatografi
cair kinerja tinggi (KCKT) dengan kolom C18
Di buat sedian yang dapat mengakomodasi kedua hormon tersebut sesuai
dengan aspek biofarmasi dan farmokinetik sediaan lepas terkendali. Oleh
karena itu dibuat sediaan mikroemulsi untuk rute intra muscular.
Menetukan medium dan pengestrak yang meberikan hasil paling optimum.
Menentukan kinetika orde reaksi dari sediaan mikroemulsi MPA-TU
Hasil dari uji disolusi secara in vitro merupakan acuan untuk uji secara in vivo
di peneltian selanjutnya.
30
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di laboratorium bioavailability dan
bioequivalence jurusan farmasi UIN Syarif Hdayatullah Jakarta. Penelitian
berlangsung selama Juli 2011-Januari 2012.
3.2. Alat dan Bahan
3.2.1. Alat
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (Ultimate 3000 Dionex®)
dengan kolom C18, alat uji disolusi tipe keranjang (Erweka), kantong
dialisis (Spectra/Por 4), alat-alat gelas (Iwaki Pyrex®), timbangan analitik
(AND GH-202®), pipet mikro (Eppendorf), Sentrifugator (Eppendorf)
lemari pendingin (Sanyo Medicool®), pengaduk magnetik (Nuova
Stirrer®), hot plate (Wiggen Hauser
®).
3.2.2. Bahan
Medroksiprogesteron asetat (BPOM RI), testosteron
undekanoat (Xianju Co Ptd), minyak jarak (PT. Bratachem), isopropyl
myristate (Merck), tween 80 (Merck), benzil benzoat (Merck),
aquabidestilata (PT. Ikapharmindo), NaCl (Merck), dinatrium hidrogen
pospat (Merck),natrium dihidrogen pospat (merck), Etanol (PT.
Bratachem), SDS (PT. Bratachem), asetonitril (Merck), metanol (Merck)
31
3.3. Prosedur Penelitian
3.3.1. Pembuatan Mikroemulsi Kombinasi MPA-TU
Mikroemulsi kombinasi MPA-TU dibuat dengan formula : tween
80 (26%), minyak jarak (15%), isopropil miristat (25 %), benzil benzoat
(31 %), air (3 %). Semua bahan tersebut kecuali air dimasukan kedalam
beker gelas dan diaduk dengan pengaduk magnetic sampai homogen lalu
setelah itu baru ditambahkan air sampai terbentuk mikroemulsi.
Pemberian zat aktif ke dalam mikroemulsi dilakukan dengan cara
memasukan zat aktif MPA-TU ke dalam mikroemulsi kemudian di stirrer
samapi homogen. Dengan kekuatan sediaan MPA : 1,125 mg/ml , TU :
2,5mg/ml
3.3.2 Optimasi Medium Disolusi Secara In Vitro
Sebanyak 4ml sampel dimasukan ke dalam kantung dialisis
(spectra/por4) dan ditempatkan ke dalam alat uji disolusi tipe
basket dengan variasi medium yaitu ;
1. Nacl Fisiologis
2. Etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v
3. SDS 0,05% - dapar pospat pH 7,2 b/v
Temperatur pada saat pengujian di buat konstan sebesar 37oC ±
0,5oC dengan keceptan putaran 100 rpm. Proses pengujian disolusi
ini berlangsung selama 12 jam dengan pengambilan sampel setiap
32
1 jam sebanyak 1ml. Setiap pengambilan cuplikan , dimasukan
medium sejenis sebanyak jumlah cuplikan yang diambil.
3.3.3. Optimasi Pengestrakan Sampel
Optimasi pengekstrakan sampel dilakukan dengan cara
melarutkan MPA dan TU kedalam fase gerak metanol : asetonitril
(90:10) dengan kosentrasi 100 ppm. Sebanyak 3 ml larutan
ditambahkan dengan pengekstrak (kloroform/pentana) kemudian di
vortex selama 1 menit lalu di sentrifuge di sentrifugator dengan
kecepatan 6000 rpm selama 20 menit. Bagian pengekstrak
(kloroform/pentana) diambil lalu diuapkan samapai kering. Residu
dari pengekstrak diencerkan dengan fase gerak metanol :
asetonitril (90:10) sebanyak 0.5 mL kemudian dianalisis dengan
KCKT.
3.3.4. Analisis Kadar Sampel Menggunakan KCKT
A. Pembuatan Kurva Kalibrasi TU dan MPA
Kurva kalibrasi TU dan MPA dibuat dengan mengencerkan
larutan induk TU dan MPA 100 ppm menjadi 12 seri konsentrasi
yaitu 0,5 - 12 ppm lalu diinjeksikan ke dalam instrumen KCKT
dengan fase gerak Metanol : Asetonitril (90:10), laju alir 1,2
mL/menit, panjang gelombang 243 nm dan suhu kolom 25oC.
33
B. Penetapan Kadar
Sampel di injeksikan ke dalam KCKT dengan fase gerak
methanol :asetonitril (90:10) sebesar 20 µL, laju alir 1,2 mL/menit,
panjang gelombang 243 nm dan suhu kolom 25oC.
3.4. Analisis Data
Data yang dianalisis adalah data kuntitatif dari AUC MPA-TU
pada sampel, untuk mengetahui perbandingan laju disolusi MPA dan TU
dalam mikroemulsi pada medium dan pengekstrak yang dioptimasi.
34
3.5. Skema kerja
Pembuatan Mikroemulsi MPA,TU, dan MPA-TU
Pembuatan Kurva
Kalibrasi MPA dan TU
Preparasi dan Pengujian Disolusi dari Mikroemulsi MPA-TU
Pentana CHCl3 Pentana
CHCl3
CHCl3
Pentana
NaCl Fisiologis
Etanol 15% - dapar
pospat pH 7,2 v/v
SDS 0,05 %Dapar
pospat pH 7,2 b/v
Analisa Data dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Menetapkan Medium Uji Disolusi dan pengekstrak yang Paling Optimum,
Menentukan Orde Pelepasan dari Mikroemulsi MPA-TU
Menentukan Orde Pelepasan dari Mikroemulsi MPA-TU
35
BAB IV
HASIL PENELITIAN
4.1. Optimasi Pengekstraksi
Optimasi pengekstraksi dilakukan dengan menentukan uji perolehan
kembali dari MPA dan TU untuk mengetahui seberapa besar kemapuan kloroform
dan pentana dalam mengekstraksi MPA dan TU. Persen perolehan kembali
didapatkan dengan membuat larutan zat aktif sebesar 10 ppm yang diekstraksi
dengan kloroform dan pentana kemudian di analisis dengan KCKT. Dari hasil
optimasi pengekstrak yang dilakukan terhadap 10 ppm MPA didapat data seperti
pada tabel. 4.1.
Tabel. 4.1. Persen perolehan kembali MPA 10 ppm dengan 2 jenis pengekstrak.
Pengekstrak Hasil
Kloroform 5%
Pentana 2%
Dari pengujian perolehan kembali dari 10 ppm MPA diketahui bahwa ke-
dua penekstrak hanya mampu mengekstraksi sebesar 0,5 ppm untuk kloroform
dan 0,2 ppm untuk pentana. Karena kemampuan pengekstraksi dari kloroform dan
pentana yang kecil, dilakukan preparasi dengan cara lain yakni dengan melarutkan
0,1 mL cuplikan dari medium disolusi ke dalam 5 mL fase gerak metanol :
asetonitril (90:10) lalu 20µL dari larutan tersebut disuntikan ke dalam KCKT
dengan laju alir 1,2 mL/menit. Namun preparasi dengan cara ini pun tidak
36
memberikan hasil yang bagus, MPA maupun TU tidak dapat teranalisis dengan
proses ini. Oleh karena itu penetapan kadar dilakukan dengan cara menyuntikan
secara langsung 20µL cuplikan medium disolusi kedalam KCKT dengan fase
gerak metanol : asetonitril (90:10), laju alir 1,2 mL/menit.
4.2. Analisis Kadar MPA dan TU Dalam Medium
Sampel mikroemulsi kombinasi MPA-TU sebanyak 4 mL yang
mengandung MPA sebanyak 1,125 mg/mL dan TU sebanyak 2,5 mg/mL,
dimasukan ke dalam kantung dialisis, dan diikat kencang pada kedua ujungnya
untuk selanjutnya dtempatkan kedalam keranjang uji disolusi. Pengujian disolusi
ini dilakukan selama 12 jam dan setiap interval 1 jam dilakukan pemgambilan
cuplikan sebanyak 1 mL. Tiap pengambilan cuplikan dari medium diikuti dengan
penambahan medium sebanyak sebanyak cuplikan yang diambil. Cuplikan
tersebut diuji kadarnya dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Dari
pengujian tersebut diperoleh hasil :
Gambar.4.1. Perbandingan kadar MPA (mg) yang terdisolusi pada medium NaCl,
etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v, dan SDS 0,05% - dapar pospat pH 7,2 b/v.
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ka
da
r M
PA
(m
g)
Jam
NaCl
etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v
SDS 0,05% - dapar pospat pH 7,2 b/v
37
Gambar.4.2.Perbandingan kadar TU (mg) yang terdisolusi pada medium etanol
15% - dapar pospat pH 7,2 v/v, dan SDS 0,05% dapar pospat pH 7,2 b/v. TU
tidak terdisolusi dalam medium NaCl, sehingga medium NaCl tidak dicantumkan
dalam grafik ini
Dari perbandingan kadar MPA dan TU yang terdisolusi dalam medium
diatas, dapat disimpulkan bahwa kadar MPA dan TU terdisolusi paling besar
pada medium etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v.
4.3. Penentuan Kinetika Pelepasan Zat Aktif
Penentuan kinetika pelepasan zat aktif didapat dengan cara memplotkan
kadar sampel dari medium yang memberikan hasil terbaik yakni medium etanol
15% - dapar pospat pH 7,2 v/v ke dalam tiga kinetika yang berbeda yaitu:
Orde nol : t (jam) terhadap C (mg)
Orde satu : t (jam) terhadap Log C (mg)
Higuchi : √t (jam) terhadap C (mg)
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ka
da
r T
U (
mg
)
Jam
etanol 15 % - dapar pospat
pH 7,2 v/vSDS 0,05% - dapar pospat
pH 7,2 b/v
38
A. Kurva Kinetika MPA
Gambar.4.3. Kurva regresi linear MPA dalam medium etanol 15% - dapar pospat
pH 7,2 v/v yang diplotkan dalam kinetika orde nol.
Gambar.4.4. Kurva regresi linear MPA dalam medium etanol 15% - dapar pospat
pH 7,2 v/v yang diplotkan dalam kinetika orde satu.
Gambar.4.5. Kurva regresi linear MPA dalam medium etanol 15% - dapar pospat
pH 7,2 v/v yang diplotkan dalam kinetika Higuchi.
y = 0,2695x + 0,1915
R² = 0,9775
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ka
da
r (m
g)
Waktu (jam)
y = 0,0685x - 0,2169
R² = 0,9564
-0,4
-0,2
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
LO
G C
Waktu (jam)
y = 1,2148x - 1,0178
R² = 0,9319
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4
Ka
da
r (m
g)
√t (jam)
39
B. Kurva Kinetika TU
Gambar.4.6. Kurva regresi linear TU dalam medium etanol 15% - dapar pospat
pH 7,2 v/v yang diplotkan dalam kinetika orde nol
Gambar.4.7. Kurva regresi linear TU dalam medium etanol 15% - dapar pospat
pH 7,2 v/v yang diplotkan dalam kinetika orde satu.
Gambar.4.8. Kurva regresi linear TU dalam etanol 15% - dapar pospat pH 7,2
v/v yang diplotkan dalam kinetika Higuchi.
y = 0,0065x + 0,0078
R² = 0,9921
0
0,02
0,04
0,06
0,08
0,1
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Ka
da
r (m
g)
Waktu (jam)
y = 0,0625x - 1,7584
R² = 0,9781 -2
-1,5
-1
-0,5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
LO
G C
Waktu (jam)
y = 0,0292x - 0,0212
R² = 0,9467
0
0,02
0,04
0,06
0,08
0,1
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4
Ka
da
r (m
g)
√t (Jam)
40
Kinetika pelepasan ditentukan dengan perbandingan nilai koefisien
korelasi pearson MPA dan TU yang paling mendekati satu. Hasil memplotkan
MPA dan TU yang terdisolusi dalam medium etanol 15% - dapar pospat pH 7,2
v/v, kedalam tiga kinetika yang berbeda didapat :
Tabel.4.2. Nilai koefisien korelasi ( r2 ) dari ketiga kinetika yang berbeda.
Zat Aktif Kinetika
Orde nol Orde 1 Higuchi
MPA 0.977 0.956 0.931
TU 0.992 0.978 0.946
Data dari tabel 4.2. dapat disimpulkan kinetika pelepasan MPA dan TU mengikuti
kinetika orde nol.
41
BAB V
PEMBAHASAN
Pengujian disolusi mikroemulsi kombinasi MPA-TU dalam penelitian ini
adalah tahap awal (0-1) dari uji disolusi, dimana tujuan utamanya adalah untuk
mengetahui pelepasan obat secara in vitro dan kelarutanya (Cynthia et al, 2004).
Uji disolusi dilakukan dengan alat uji disolusi tipe keranjang dengan
menggunakan metode kantung dialisis seperti yang dikembangkan oleh Kang et al
(2004). Kantung dialisis ditempatkan pada wadah yang berputar konstan dan
ditempatkan kedalam medium reseptor dengan jumlah besar (Larsen, 2009).
Penggunaan kantung membran ini bertujuan untuk memisahkan mikroemulsi
dengan lingkungan medium disolusi (Chi, 1999 ; Kang et al, 2004).
Dalam pengujian disolusi terdapat faktor-faktor yang memengaruhi laju
disolusi suatu sediaan. Faktor-faktor tersebut antara lain suhu, pH, gaya mekanis
(kecepatan putaran per menit), volume medium dan jenis medium. Menurut
farmakope amerika (USP) jenis medium dalam pengujian disolusi secara in vitro
dapat berupa tiruan cairan fisiologis, air, asam lemah, dapar, surfaktan, serta
campuran pelarut organik. Dalam pengujian kali ini jenis medium di variasikan
menjadi tiga variasi yaitu NaCl fisiologis, etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v ,
dan SDS 0.05% - dapar pospat pH 7,2 b/v. Sedangkan untuk suhu, pemberian
gaya mekanis, dan volume dibuat sama untuk tiap medium.
Pemilihan NaCl sebagai medium pertama dalam pengujian ini mewakili
tiruan cairan fisologis tubuh. Sebagai medium kedua digunakan campuran dapar
dan etanol (He et al, 2003). Menurut Cynthia et al (2004), penggunan campuran
42
pelarut organik dapat diterima sebagai medium disolusi apabila kondisi pelepasan
in vitro suatu zat tidak tercapai dengan media air. Selain itu penggunan campuran
etanol sebagai medium kedua juga didasarkan pada kelarutan TU yang tinggi
pada etanol, sehingga di harapkan dengan adanya etanol didalam medium dapat
meningkatkan kelarutan TU yang pada pengujian sebelumnya tidak dapat
teranalisis. Sebagai medium ketiga digunakan campuran dapar dan surfaktan (He
et al, 2003). Sama halnya dengan etanol, keberadaan surfaktan diketahui juga
dapat meingkatkan kelarutan suatu zat meskipun dengan mekanisme kerja yang
berbeda. Campuran surfaktan dengan asam lemah adalah medium yang biasa
digunakan untuk uji disolusi sediaan yang mengandung hormon-hormon steroid
(Nguyen, 1990). Akan tetapi karena penambahan asam lemah dapat menurunkan
pH medium, penambahan asam lemah tidak dilakukan pada medium ini.
Pengaturan suhu sebesar 37oC dan pH sebesar 7,2 bertujuan untuk
mendapatkan kondisi keadaan suhu tubuh dan pH otot pada saat normal.
Sedangkan pengaturan kecepatan aduk (gaya mekanis) sebesar 100 RPM
bertujuan menghilangkan keadaan stagnant layer yang berada di sekitar kantung
dialisis. Keberadaan stagnant layer ini dapat mengaggu pengujian kadar disolusi
karena keadaan dapat menghambat laju disolusi sampel.
Pada awalnya pengoptimasian profil disolusi mikroemulsi MPA-TU dalam
penelitian ini meliputi pengoptimasian pengekstrak, dengan memvariasikan 2
jenis pengekstraksi yakni kloroform dan pentana. Akan tetapi setelah diuji persen
perolehan kembali, didapati bahwa kemampuan mengekstraksi dari kedua
pengekstraksi tersebut sangat kecil yaitu kurang dari 5%. Menurut Harmita
(2004) rentang perolehan kembali yang diperbolehkan untuk analit dengan
43
konsentrasi 10 ppm adalah 90% sampai 107%. Karena kloroform dan pentana
tidak memenuhi syarat maka dilakukan metode lain dalam preparasi cuplikan
sampel, yakni metode pengenceran. Sebanyak 0,1 mL cuplikan diencerkan dalam
5 mL fase gerak metanol:asetonitril (90:10). Setelah dianalisis dengan
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT), MPA dan TU dalam cuplikan tidak
muncul dalam kromatogram. Atas dasar ini maka penetapan kadar MPA dan TU
dilakukan dengan cara menyuntikan cuplikan secara langsung kedalam KCKT.
Dari data hasil analisis kadar MPA dalam medium NaCl fisiologis
menunjukan kadar yang paling kecil dibandingkan kedua medium lainya.
Sedangkan TU tidak muncul dalam analisis KCKT sampai jam ke- 12.
Ketidakmunculan TU dapat disebabkan karna TU memiliki sifat sangat hidrofob
dimana memiliki kelarutan yang tinggi pada fase minyak di dalam mikroemulsi.
Ketidakadaan zat yang dapat meningkatkan kelarutan ditenggarai menjadi
penyebab tidak keluarnya TU pada medium ini.
Pada medium SDS 0,05% - dapar pospat pH 7,2 0,05%, TU dalam
mikroemulsi sudah dapat teranalisis dengan diikuti munculnya puncak TU dalam
kromotogram KCKT dan kadar MPA yang terdapat dalam medium ini lebih
banyak di bandingkan dengan kadar MPA dalam NaCl. Hal ini dapat disebabkan
karena adanya SDS yang merupakan suatu surfaktan dimana keberadaan surfaktan
ini dapat meningkatkan kelarutan suatu zat.
Dalam medium etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v kadar MPA dan TU
yang dilepaskan lebih banyak dibandingkan dua medium sebelumnya. Keberadaan
etanol dan SDS diketahui dapat meningkatkan kelarutan suatu zat meskipun
44
dengan mekanisme kerja yang berbeda,. Perbedaan jumlah kadar MPA dan TU
yang terlarut dalam medium adalah dapat disebabkan karena perbedaan jumlah
kadar pengunaan etanol (15%) yang jauh lebih besar dibandingkan dengan SDS
(0,05%). Apabila dilihat dari sifat fisikokimia kimia MPA dan TU, kedua zat
tersebut menunjukan kelarutan yang lebih besar di dalam etanol dibandingkan
dengan kelarutan dalam air. Hal inilah yang menyebabkan kadar MPA dan TU
dalam medium etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v lebih besar dibandingkan
dengan medium lainya. Sehingga dapat disimpulkan bahwa medium etanol 15% -
dapar pospat pH 7,2 v/v adalah medium yang memberikan profil terbaik.
Pembuatan mikroemulsi MPA dan TU dimaksudkan untuk membuat zat
aktif berada lebih lama dalam tubuh dengan mengikuti kinetika sediaan lepas
terkendali dengan rute pemberian secara intramuskular (IM). Pemberian rute
parentral dengan sediaan lepas terkendali, yang disuntikan dalam jaringan otot
akan membentuk “depot” (Agus, 2008). Untuk mengetahui sediaan mikroemulsi
MPA-TU termasuk sediaan lepas terkendali atau tidak, dapat dilihat dari kinetika
pelepasan mikroemulsi MPA-TU yang di didapat dengan cara memplotkan hasil
penetapan kadar dari medium etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v kedalam 3
kinetika yang berbeda , yaitu orde nol (gambar 4.3 dan 4.6),orde satu (gambar4.4
dan 4.7) dan kinetika Higuchi (gambar 4.5 dan 4.8).
Dari hasil penghitungan koefisien korelasi, menunjukan bahwa kinetika
untuk MPA dan TU dalam mikroemulsi mengikuti kinetika orde nol. Berbeda
dengan penelitian sebelumnya (Rico, 2010) yang menyatakan bahwa kinetika
pelepasan mikroemulsi MPA-TU mengikuti orde satu. Perbedaan ini dapat
disebabkan karena perbedaan parameter pengujian seperti, jenis medium dan
45
jenis pengekstraksi dimana yang digunakan hanya 1 jenis saja, yakni NaCl
sebagai medium dan kloroform sebagai pengekstraki. Perbedaan juga dapat
disebabkan karena pada penelitian tersebut penetapan kinetika reaksi hanya
diplotkan untuk satu zat aktif saja yakni MPA. Pada penelitian ini parameter yang
digunakan lebih banyak dengan penggunaan medium dan pengekstrak yang lebih
variatif pemploltan data pun dilakukan untuk kedua zat aktif yang terdapat dalam
mikroemulsi yakni MPA dan TU.
Dari data kinetika tersebut didapati bahwa kinetika pelepasan mikroemulsi
MPA-TU mengikuti kinetika pelepasan sediaan lepas terkendali (controlled
relase) . Sediaan lepas terkendali adalah bentuk sediaan yang dibuat denga
teknologi special agar obat memiliki kinetika orde nol, dengan tujuan untuk
menjaga tingkat kadar terapetik obat yang lebih lama (24 jam atau lebih)
(Krowczynski, 2000).
46
BAB VI
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari optimasi uji dsolusi yang dilakukan maka diperoleh
kesimpulan sebagai berikut :
1. MPA dapat terdisolusi dalam medium NaCl, etanol 15% - dapar
pospat pH 7,2 v/v , dan SDS 0,05% - dapar pospat pH 7,2 b/v.
Sedangkan TU hanya dapat terdisolusi pada etanol 15% - dapar
pospat pH 7,2 v/v dan SDS 0,05% - dapar pospat pH 7,2 b/v.
2. Sebagian kecil MPA dan TU dapat terekstraksi oleh kloroform dan
pentana. MPA-TU yang terkstrak sebesar 5 % pada kloroform dan
sebesar 3% untuk pentana.
3. Kinetika pelepasan sediaan ini mengikuti kinetika pelepasan orde
nol pada medium disolusi etanol 15% - dapar pospat pH 7,2 v/v
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lanjutan tentang disolusi
mikroemulsi MPA-TU dengan mengoptimasi parameter-parameter
lain seperti volume medium, komposisi medium, volume sampel,
serta kecepatan pengadukan (gaya mekanis).
47
DAFTAR PUSTAKA
Abdou M.H. 1989. Dissolution, bioavailability & bioequivalence, MACK
Publisher California.
Agus, 2008. Sistem Penghantaran Obat Lepas Terkendali . ITB press, Bandung.
Aulton., 2002. Pharmacetics The Science of Dossage Form Design 2nd
Edition,
Churchil Livingstone.
Azrifitria., 2012. Formulasi Mikroemulsi TU dan MPA Sebagai Kontrasepsi Pria
dan Uji Aktivitas Farmakokinetik serta Farmakodinamik pada Tikus
Jantan SD Secara In Vivo, Disertasi Universitas Indonesia, Jakarta
Chi, S. C., Enhanced dissolution rate of biphenyl dimethyl dicarboxylate using
SMEDDS. B.T. Gattefosse, 92, 75-80 (1999).
Cynthia et al,. 2004. Acceptable Analytical Practices for Dissolution Testing of
Poorly Soluble Compounds, Pharmacetical Tecnology Journal
Dressman, J. Kramer, J, 2005. Pharmacetical Dissolution Testing. Tayor &
Francis Group, New York
Depkes RI, 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta.
Gandjar, I. G. dan Abdul Rohman. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka
Pelajar, Yogyakarta.
48
Gu YQ, Jian-sun Tong, Ding-zhi Ma, Xing-hai Wang, Dong Yuan, Wen-hao Tang
and William J. Bremner. 2004. Male Hormonal Contraception : Effect of
Injection of Testoterone Undecanoate and Depot Medroxyprogesterone
Acetate at Eight-Week Intervals in Chinese Men. The Journal of Clinical
Endrocrinology & Metabolism Vol 89, No. 5 2254-2262
Haarmita, 2004. Petunjuk pelaksanaan validasi metode dan cara perhitunganya.
Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol. I, No.3, Desember 2004, 117 - 135
He, Zhongu, et al. 2004. Development of Dissolution Medium for Nimodipine
Tablets Based on Bioavailability & Bioequivalence. Europe Journal
Science 21
HT, Nguyen et al 1990, Dissolution testing of norethindrone:ethinyl estradiol,
norethindrone:mestranol, and norethindrone acetate:ethinyl estradiol
combination tablets. J Pharm Sci. 1990 Feb;79(2):163-7.
Ilyas, S. 2008. Efektivitas Kontrasepsi Hormonal Pria Yang Menggunakan
Kombinasi Testosteron Undekanoat dan Noretisteron Enantat. Dalam
Jurnal Biologi Sumatera. Vol. 3. No. 1. 23-28
Joong Soo Wao et al. 2007. Formulation and Biopharmacetical evaluation of
silymarin using SMEDSS. Arch Fan Res Vol 30.
Kamischke, A., Venherm S., Ploger D., von Eckardstein S., Nieschlag E. 2000.
Intramuscular testosterone undecanoate and norethisterone enanthate in a
clinical trial for male contraception. J Clin Endocrinology Metab. Vol. 86.
No. 1. 303-309
49
Kang, B. K., Lee, J. S., Chon, S. K., Jeong, S. Y., Yuk, S. H., Khang, G., Lee, H.
B., and Cho, S. H., Development of selfmicroemulsifying drug delivery
systems (SMEDDS) for oralbioavailability enhancement of simvastatin in
beagle dogs. . J. Pharm., 274, 65-73 (2004).
Krowczynski, Leszek. 1987. Extended Release Dosage Forms . CRC Press, Inc.
Florida
Lawrence, M. Jayne and Rees, Gareth. 2000. Microemulsion-based Media as
Novel Drug Delivery System. Advance Drug Delivery Reviews.
Larsen & Larsen, 2009. Critical Factors Influencing the In Vivo Performance of
Long acting Lipophilic Solutions—Impact on In Vitro Release Method
Design. The AAPS Journal, Vol. 11, No. 4, December 2009
Mansoor M. Amiji, Beverly J. Sandmann. 2003. The Applied Physical Pharmacy
McGraw-Hill Professional
Martin, A., J. Swarbick & A. Cammarata 1993 Farmasi Fisik JIlid 2 Edisi III. UI
Press, Jakarta
Maurice and Daniel. 2005. Assessing Bioavailability of Drug Delivery Systems.
CRC press, New York
Moeloek, N. H. 1991. Penurunan Kesuburan Pria Pada Penyuntikan Testoteron
Enanthat+DMPA dan 19 Nortestoteron Heksiloksifenilpropionat (19 Nt)
+ DMPA. Disertasi. Program Pasca Sarjana FKUI
50
Rico, 2010. Penentuan Profil Disolusi dan Difusi Medroksiprogesteron Asetat
dan Testosteron Undekanoat dalam Mikroemulsi dan Kosolven, Skripsi
UIN Jakarta
Shargel, L & Andrew B.C.Yu 1988. Biofarmasetika dan Farmakokinetika
Terapan. Unair Press, Surabaya.
Siswandono & Soekardjo, B 2000. Kimia Medisinal. Unair Press, Surabaya.
Suherman S.K. 2008 Farmakologi dan Terapi Edisi V FKUI. Gaya Baru, Jakarta.
Trisnawarman & Erlysa 2007. Sistem Penunjang Pemilihan Alat/Metode
Kontrasepsi. Gematika Jurnal Manajemen Informatika, Vol 9 No 1,
Desember 2007
Turner et al, 2003 Contraceptive Efficacy of a Depot Progestin and Androgen
Combination in Men.The Journal Clinical Endrocrinology & Metabolism.
Watson, 2005, Analisis Farmasi, EGC, Jakarta
William, Roger L.M.D., et al 2007. USP 30- The United States Pharmacopeia.
USP Convention, Inc
51
LAMPIRAN
52
Lampiran 1
Pembuatan Kurva MPA dan TU
Pembuatan kurva kalibrasi MPA dan TU dilakukan dengan cara membuat
serangakian deret larutan standar dengan beberapa konsentrasi yang berbeda
menggunakan pelarut metanol : asetonitril (90:10). Larutan standar disuntikan ke
dalam KCKT kolom C18 dengan laju alir 1,2 mL/menit, suhu kolom 25oC dan
menggunakan fase gerak metanol : asetonitril (90:10). Kurva regreasi linearnya
dibuat dengan memplotkan AUC dengan konsentrasi masing-masing sampel.
Tabel. A. Deret konsentrasi larutan standar MPA dan AUC pada analisa KCKT.
Konsentrasi MPA (ppm) AUC
2 1,.47
3 2,18
4 2,72
6 4,03
7 4,66
8 5,31
9 6,05
Gambar. A. Kurva regresi linear MPA antara konsentrasi MPA dengan AUC pada
analisa dengan KCKT. Menunjukan koefisien korelasi (r2) sebesar 0,999; a = 0,17
; b = 0,646
y = 0.17 + 0.646x
R² = 0.999
0
1
2
3
4
5
6
7
0 2 4 6 8 10
AU
C
Konsentrasi (ppm)
53
Tabel. B. Deret konsentrasi larutan standar TU dan AUC pada analisa KCKT
Konsentrasi (ppm) AUC
1 0.0914
2 0.1587
3 0.2223
7 0.5115
8 0.5948
9 0.6689
10 0.7333
Gambar. B. Kurva regresi linear TU, antara konsentrasi TU dengan AUC pada
analisa dengan KCKT. Menunjukan koefisien korelasi (r2) sebesar 0,999; a =
0,013; b = 0,072
Dari tabel kurva kalibrasi MPA (1 – 12 ppm) dan TU (1 – 9 ppm), data
konsentrasi terhadap nilai AUC dimasukkan ke dalam perhitungan regreasi linear
(intersep, slope dan pearson) pada microsoft excel hingga diperoleh variabel a, b
dan r yaitu untuk MPA nilai a = 0,117, b = 0,646 dan r = 0,999 sedangkan untuk
TU nilai a = 0,934, b = 0,337 dan r = 0,999.
y = 0,0722x + 0,0133
R² = 0,9995
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0 2 4 6 8 10 12
AU
C
Konsentrasi (ppm)
54
Lampiran 2
Tabel. C. AUC MPA dan TU dalam medium NaCl
Jam Medroksiprogestron Asetat Testosteron Undekanoat
AUC 1 AUC 2 Rata-rata AUC 1 AUC 2 Rata-rata
1 0.305 0.044 0.1745 - - -
2 0.343 0.075 0.209 - - -
3 0.399 0.101 0.25 - - -
4 0.347 0.256 0.3015 - - -
5 0.368 0.277 0.3225 - - -
6 0.392 0.293 0.3425 - - -
7 0.417 0.325 0.371 - - -
8 0.47 0.407 0.4385 - - -
9 0.513 0.343 0.428 - - -
10 0.547 0.347 0.447 - - -
11 0.535 0.382 0.4585 - - -
12 0.546 0.422 0.484 - - -
55
Lampiran 3
Tabel. D. AUC MPA dan TU dalam medium etanol 15% -dapar pospat pH 7,2 v/v
Jam Medroksiprogestron Asetat Testosteron Undekanoat
AUC 1 AUC 2 Rata-rata AUC 1 AUC 2 Rata-rata
1 1.099 0.653 0.876 0.01 0.025 0.0175
2 1.682 0.732 1.207 0.011 0.035 0.023
3 1.703 1.176 1.4395 0.011 0.04 0.0255
4 2.35 1.387 1.8685 0.016 0.05 0.033
5 2.561 1.878 2.2195 0.018 0.059 0.0385
6 2.618 2.334 2.476 0.017 0.075 0.046
7 2.154 3.14 2.647 0.021 0.078 0.0495
8 2.396 3.206 2.801 0.039 0.08 0.0595
9 3.784 3.4281 3.60605 0.044 0.086 0.065
10 3.686 3.97 3.828 0.059 0.089 0.074
11 4.29 4.124 4.207 0.062 0.096 0.079
12 5.717 4.262 4.9895 0.075 0.102 0.0885
56
Lampiran 4
Tabel. E. AUC MPA dan TU dalam SDS 0,05 % - dapar pospat pH 7,2 b/v
Jam Medroksiprogestron Asetat Testosteron Undekanoat
AUC 1 AUC 2 Rata-rata AUC 1 AUC 2 Rata-rata
1 0.827 0.723 0.775 0.018 0.016 0.017
2 1.163 1.154 1.1585 0.023 0.022 0.0225
3 1.326 1.299 1.3125 0.031 0.025 0.028
4 1.389 1.33 1.3595 0.035 0.03 0.0325
5 1.413 1.398 1.4055 0.039 0.042 0.0405
6 2.037 1.97 2.0035 0.015 0.05 0.0325
7 2.69 2.36 2.525 0.002 0.059 0.0305
8 2.999 2.567 2.783 0.013 0.063 0.038
9 3.194 3.064 3.129 0.033 0.07 0.0515
10 4.13 3.581 3.8555 0.014 0.077 0.0455
11 4.585 3.889 4.237 0.014 0.087 0.0505
12 4.834 4.301 4.5675 0.017 0.095 0.056
57
Lampiran 5
Perhitungan Kadar Zat Aktif yang Terdisolusi
dalam Medium per Satuan Waktu
Perhitungan kadar zat aktif dalam medium dihitung berdasarkan besar luas
area puncak yang diperoleh dari analisis dengan KCKT. Data luas area yang telah
di dapat dari interval waktu tertentu di masukkan ke dalam persamaan regresi
linear sebagai berikut :
Dimana, a = nilai intersep dari kuva kalibrasi, b = nilai slope dari kurva kalibrasi
dan y = nilai luas area puncak zat aktif yang akan dihitung kadarnya. Dari
perhitungan mengunakan rummus diatas akan didapatkan kadar cuplikan dengan
satuan ppm. Setelah di dapat kadar ppm kemudian dimasukkan ke dalam
persamaan dibawah untuk mengetahui kadar mg yang terdisolusi dalam medium :
Dimana 1000 pembagi untuk membuat kadar ppm menjadi satuan mg/ml,
sedangkan 500 adalah volume medium yang digunakan.
(Kadar interval waktu (ppm) /1000) x 500 mL =.....mg
Y = bx ± a
58
Lampiran 6
Tabel. F. Kadar (mg) MPA dan TU yang terdisolusi dalam medium NaCl
Jam MPA TU
1 0,003483 -
2 0,030186 -
3 0,06192 -
4 0,10178 -
5 0,118034 -
6 0,133514 -
7 0,155573 -
8 0,207817 -
9 0,19969 -
10 0,214396 -
11 0,223297 -
12 0,243034 -
59
Lampiran 7
Tabel.G. Kadar (mg) MPA dan TU yang terdisolusi dalam medium etanol 15 % -
dapar pospat pH 7,2 v/v
Jam MPA TU
1 0,54644 0,03125
2 0,802632 0,069444
3 0,982585 0,086806
4 1,314628 0,138889
5 1,5863 0,177083
6 1,78483 0,229167
7 1,917183 0,253472
8 2,036378 0,322917
9 2,659481 0,361111
10 2,831269 0,423611
11 3,124613 0,458333
12 3,730263 0,524306
60
Lampiran 8
Tabel.H. Kadar (mg) MPA dan TU yang terdisolusi dalam medium SDS 0,05 % -
dapar pospat pH 7,2 b/v
Jam MPA TU
1 0,468266 0,027778
2 0,765093 0,065972
3 0,884288 0,104167
4 0,920666 0,135417
5 0,956269 0,190972
6 1,419118 0,135417
7 1,822755 0,121528
8 2,022446 0,173611
9 2,290248 0,267361
10 2,852554 0,225694
11 3,147833 0,260417
12 3,403638 0,298611
61
Lampiran 9
Kromatogram MPA dan TU
Gambar. C. Kromatogram KCKT MPA konsentrasi 12 ppm dengan menggunakan
kolom C 18, ; fase gerak metanol asetonitril (90:10) ; laju alir 1,2 mL/menit ;
waktu retensi 1,79 menit
62
Gambar. D. Kromatogram KCKT TU konsentrasi 7 ppm dengan menggunakan
kolom C 18, ; fase gerak metanol asetonitril (90:10) ; laju alir 1,2 mL/menit ;
waktu retensi 5,65 menit
63
302 NaCl 4
Sample Name: NaCl 4 Injection Volume: 20.0
Vial Number: RD5 Channel: UV_VIS_1
Sample Type: unknown Wavelength: 243
Control Program: standar MPA baru Bandwidth: n.a.
Quantif. Method: standar MPA baru Dilution Factor: 1.0000
Recording Time: 1/13/2012 11:11 Sample Weight: 1.0000
Run Time (min): 7.00 Sample Amount: 1.0000
No. Ret.Time Peak Name Height Area Rel.Area Amount Type
min mAU mAU*min % ppm
1 1.75 MPA 3.137 0.256 54.21 0.365 BMB
2 2.14 n.a. 0.601 0.127 26.90 n.a. BMb
3 2.33 n.a. 0.328 0.089 18.88 n.a. bMB
Total: 4.066 0.471 100.00 0.365
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00
-1.00
1.25
2.50
3.75
5.00
6.25
8.00Standar MPA dan TU #302 NaCl 4 UV_VIS_1m AU
m in
1 - M PA - 1.753
2 - 2.140
3 - 2.333
WVL:243 nm
Gambar. E. Kromatogram KCKT MPA dan TU yang terdisolusi dalam medium
NaCl, dengan menggunakan kolom C 18, ; fase gerak metanol asetonitril (90:10) ;
laju alir 1,2 mL/menit
64
219 etoh 7
Sample Name: etoh 7 Injection Volume: 20.0Vial Number: RD4 Channel: UV_VIS_1Sample Type: unknown Wavelength: 243Control Program: standar MPA baru Bandwidth: n.a.Quantif. Method: standar MPA baru Dilution Factor: 1.0000Recording Time: 1/9/2012 13:22 Sample Weight: 1.0000
Run Time (min): 7.00 Sample Amount: 1.0000
No. Ret.Time Peakname Height Width Type Resol. Asym. Plates
min min mAU min (EP) (EP) (EP)
1 1.867 MPA 20.790 0.165 BMb 1.62 1.09 1707
2 2.207 n.a. 2.148 0.239 bMb 1.23 1.37 1357
3 2.553 n.a. 0.664 0.278 bMB 1.77 1.62 995
4 3.053 n.a. 0.135 0.212 BMB 1.32 1.34 2514
5 3.280 n.a. 0.021 n.a. BMb 0.62 0.85 16930
6 3.393 n.a. 0.276 0.338 bMB 9.99 1.82 2593
7 5.520 n.a. 0.086 0.137 BMb 0.44 0.72 18970
8 5.607 TU 0.058 0.185 bMB n.a. 2.57 9013
Average: 3.022 0.222 2.43 1.43 6760
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00
-15.0
-10.0
-5.0
0.0
5.0
10.0
15.0Standar MPA dan TU #219 etoh 7 UV_VIS_1mAU
min
1 - MPA - 1.867
2 - 2.207
3 - 2.553
4 - 3.0535 - 3.2806 - 3.3937 - 5.5208 - TU - 5.607
WVL:243 nm
Gambar. F. Kromatogram KCKT MPA dan TU yang terdisolusi dalam medium
dapar pH 7,2 – etanol 15 % v/v, dengan menggunakan kolom C 18, ; fase gerak
metanol asetonitril (90:10) ; laju alir 1,2 mL/menit
65
257 SDS 4
Sample Name: SDS 4 Injection Volume: 20.0
Vial Number: RE4 Channel: UV_VIS_1
Sample Type: unknown Wavelength: 243
Control Program: standar MPA baru Bandwidth: n.a.
Quantif. Method: standar MPA baru Dilution Factor: 1.0000
Recording Time: 1/9/2012 18:57 Sample Weight: 1.0000
Run Time (min): 7.00 Sample Amount: 1.0000
No. Ret.Time Peak Name Height Area Rel.Area Amount Type
min mAU mAU*min % ppm
1 1.87 MPA 11.432 1.389 76.74 1.986 BMB
2 2.21 n.a. 1.844 0.261 14.43 n.a. BMB
3 2.53 n.a. 0.388 0.073 4.02 n.a. BMB
4 3.35 n.a. 0.256 0.040 2.23 n.a. BMB
5 4.23 n.a. 0.021 0.002 0.09 n.a. BMB
6 4.85 n.a. 0.017 0.002 0.12 n.a. BMB
7 5.21 n.a. 0.084 0.008 0.45 n.a. BMb
8 5.42 TU 0.145 0.035 1.92 n.a. bMB
Total: 14.188 1.810 100.00 1.986
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00
-2.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
16.0Standar MPA dan TU #257 SDS 12 UV_VIS_1m AU
m in
1 - M PA - 1.867
2 - 2.213
3 - 2.533
4 - 3.353
5 - 4.227 6 - 4.8537 - 5.2078 - 5.420
WVL:243 nm
Gambar. F. Kromatogram KCKT MPA dan TU yang terdisolusi dalam medium
SDS 0,05 % - dapar pospat pH 7,2 b/v, dengan menggunakan kolom C 18, ; fase
gerak metanol asetonitril (90:10) ; laju alir 1,2 mL/menit
47
DAFTAR PUSTAKA
Abdou M.H. 1989. Dissolution, bioavailability & bioequivalence, MACK
Publisher California.
Agus, 2008. Sistem Penghantaran Obat Lepas Terkendali . ITB press, Bandung.
Aulton., 2002. Pharmacetics The Science of Dossage Form Design 2nd Edition,
Churchil Livingstone.
Azrifitria., 2012. Formulasi Mikroemulsi TU dan MPA Sebagai Kontrasepsi Pria
dan Uji Aktivitas Farmakokinetik serta Farmakodinamik pada Tikus
Jantan SD Secara In Vivo, Disertasi Universitas Indonesia, Jakarta
Chi, S. C., Enhanced dissolution rate of biphenyl dimethyl dicarboxylate using
SMEDDS. B.T. Gattefosse, 92, 75-80 (1999).
Cynthia et al,. 2004. Acceptable Analytical Practices for Dissolution Testing of
Poorly Soluble Compounds, Pharmacetical Tecnology Journal
Dressman, J. Kramer, J, 2005. Pharmacetical Dissolution Testing. Tayor &
Francis Group, New York
Depkes RI, 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta.
Gandjar, I. G. dan Abdul Rohman. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Pustaka
Pelajar, Yogyakarta.
48
Gu YQ, Jian-sun Tong, Ding-zhi Ma, Xing-hai Wang, Dong Yuan, Wen-hao Tang
and William J. Bremner. 2004. Male Hormonal Contraception : Effect of
Injection of Testoterone Undecanoate and Depot Medroxyprogesterone
Acetate at Eight-Week Intervals in Chinese Men. The Journal of Clinical
Endrocrinology & Metabolism Vol 89, No. 5 2254-2262
Haarmita, 2004. Petunjuk pelaksanaan validasi metode dan cara perhitunganya.
Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol. I, No.3, Desember 2004, 117 - 135
He, Zhongu, et al. 2004. Development of Dissolution Medium for Nimodipine
Tablets Based on Bioavailability & Bioequivalence. Europe Journal
Science 21
HT, Nguyen et al 1990, Dissolution testing of norethindrone:ethinyl estradiol,
norethindrone:mestranol, and norethindrone acetate:ethinyl estradiol
combination tablets. J Pharm Sci. 1990 Feb;79(2):163-7.
Ilyas, S. 2008. Efektivitas Kontrasepsi Hormonal Pria Yang Menggunakan
Kombinasi Testosteron Undekanoat dan Noretisteron Enantat. Dalam
Jurnal Biologi Sumatera. Vol. 3. No. 1. 23-28
Joong Soo Wao et al. 2007. Formulation and Biopharmacetical evaluation of
silymarin using SMEDSS. Arch Fan Res Vol 30.
Kamischke, A., Venherm S., Ploger D., von Eckardstein S., Nieschlag E. 2000.
Intramuscular testosterone undecanoate and norethisterone enanthate in a
clinical trial for male contraception. J Clin Endocrinology Metab. Vol. 86.
No. 1. 303-309
49
Kang, B. K., Lee, J. S., Chon, S. K., Jeong, S. Y., Yuk, S. H., Khang, G., Lee, H.
B., and Cho, S. H., Development of selfmicroemulsifying drug delivery
systems (SMEDDS) for oralbioavailability enhancement of simvastatin in
beagle dogs. . J. Pharm., 274, 65-73 (2004).
Krowczynski, Leszek. 1987. Extended Release Dosage Forms . CRC Press, Inc.
Florida
Lawrence, M. Jayne and Rees, Gareth. 2000. Microemulsion-based Media as
Novel Drug Delivery System. Advance Drug Delivery Reviews.
Larsen & Larsen, 2009. Critical Factors Influencing the In Vivo Performance of
Long acting Lipophilic Solutions—Impact on In Vitro Release Method
Design. The AAPS Journal, Vol. 11, No. 4, December 2009
Mansoor M. Amiji, Beverly J. Sandmann. 2003. The Applied Physical Pharmacy
McGraw-Hill Professional
Martin, A., J. Swarbick & A. Cammarata 1993 Farmasi Fisik JIlid 2 Edisi III. UI
Press, Jakarta
Maurice and Daniel. 2005. Assessing Bioavailability of Drug Delivery Systems.
CRC press, New York
Moeloek, N. H. 1991. Penurunan Kesuburan Pria Pada Penyuntikan Testoteron
Enanthat+DMPA dan 19 Nortestoteron Heksiloksifenilpropionat (19 Nt)
+ DMPA. Disertasi. Program Pasca Sarjana FKUI
50
Rico, 2010. Penentuan Profil Disolusi dan Difusi Medroksiprogesteron Asetat
dan Testosteron Undekanoat dalam Mikroemulsi dan Kosolven, Skripsi
UIN Jakarta
Shargel, L & Andrew B.C.Yu 1988. Biofarmasetika dan Farmakokinetika
Terapan. Unair Press, Surabaya.
Siswandono & Soekardjo, B 2000. Kimia Medisinal. Unair Press, Surabaya.
Suherman S.K. 2008 Farmakologi dan Terapi Edisi V FKUI. Gaya Baru, Jakarta.
Trisnawarman & Erlysa 2007. Sistem Penunjang Pemilihan Alat/Metode
Kontrasepsi. Gematika Jurnal Manajemen Informatika, Vol 9 No 1,
Desember 2007
Turner et al, 2003 Contraceptive Efficacy of a Depot Progestin and Androgen
Combination in Men.The Journal Clinical Endrocrinology & Metabolism.
Watson, 2005, Analisis Farmasi, EGC, Jakarta
William, Roger L.M.D., et al 2007. USP 30- The United States Pharmacopeia.
USP Convention, Inc